Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
+380964772507 ,
e-mail: igor_pin@mail.ru
URL: www.garryc2008.narod.ru
Количественная тонкослойная
хроматография
В настоящее время к тонкослойной хроматографии (ТСХ)
возобновился интерес, нарастающий по мере разработки новых
неподвижных фаз и оборудования для нанесения проб, новых
методов элюирования пластинок и количественного определения
анализируемых веществ непосредственно на пластинках. За
последние десятилетия активно совершенствуются средства для
количественного анализа результатов ТСХ. При достаточно
развитых методах подготовки и нанесения проб, проявки
веществ, при использовании современных сорбционных
материалов, именно конечный этап анализа - оценка
результатов тормозит использование метода для проведения
точного количественного анализа. В настоящий момент в
основном используется субъективный метод оценки - визуальное
сравнение с градуировочными пятнами или геометрическое
измерение размеров пятна. Что влечет за собой недоверие к
ТСХ, как количественному методу.
Количественный анализ в тонкослойной
хроматографии имеет несколько видов,
характеризующих каждый этап развития метода.
И хотя некоторые методы можно применять
только как полуколичественные, они до сих пор
используются на практике.
Метод визуального сравнения.
S= a·Ln(c) + b
где а и b - эмпирические коэффициенты, определяемые
экспериментальным путем.
Если пятно разделенного вещества имеет резкие
границы, то площадь пятна можно определить
планиметром. Этот метод дает ошибку до 10-15%.
Анализ : Pigmentsin
Дата : 02.08.2005
Оператор :
Пластинка : 10 х 15 см 0,2 мм Сорбфил УФ254
Объем нанесенного образца : мкл
Подвижная фаза :
Детекция : УФ(Гашение флуоресценции)
Проявитель :
Условия проявления:
Результаты анализа :
№ 1 2 3
Название
Содержание
По-трековый отчет
Расчеты проведены программой "ТСХ - менеджер" 4.01 @PinSoft 2009
~~~~~~~©~~~~~~~
Анализ : Neosurf
Дата : 16.05.2009
Оператор : Игорь
Пластинка : 10 х 15 см 0,2 мм Сорбфил УФ254
Объем нанесенного образца : 4 мкл Неосурф (1 мл препарата + 9 мл Хлф:метанол 1:1)
Подвижная фаза : хлороформ : метанол : вода (50:40:4)
Детекция : Визуальная
Проявитель : 10 % раствор фосфорно-молибденовой кислоты в этаноле
Условия проявления: Нагрев при 120 °С
Температура : 25 °С
Влажность : 70 %
№ 1 2 3 4 5 6 7
Название
Содержание
Отчет о калибровке
Расчеты проведены программой "ТСХ - менеджер" 4.01 @PinSoft 2009
~~~~~~~©~~~~~~~
X Y1 Y2 Y3 Y ср
1 8173.67 8173.6700
2 10986.37 10986.3700
5 21692.03 21692.0300
ОБЩИЕ ПАРАМЕТРЫ
u 4 ( y)
eff m
u
i 1
i
4
( y ) / i
РЕАКТИВИ
Метод тонкошарової хроматографії
РЕАКТИВЫ
Метод тонкослойной хроматографии
REAGENTS
Method of thin-layer chromatography
Точность - + - +
Прецизионность:
Сходимость - + - +
Воспроизводимость - - (1) - - (1)
Специфичность + + + + (2)
Предел обнаружения - + + -
Предел
количественного - + - -
определения
Линейность - + - +
Диапазон - + - +
-= обычно не измеряется
+ = обычно измеряется
(1) может быть необходим в некоторых случаях
(2) Может не требоваться в некоторых случаях
Оценка нового аналитического метода
Метод - кандидат
(разработка)
Валидация метода
Калибровка и линейность
Сравнение с Адекватность формы
референтными методами
Образец с известной
концентрацией Возврат Эффективность
подготтовки
Контроль качества Укрепленные образцы
Валидированный метод
Использование метода
Примеры валидационных карт
ЗБІЖНІСТЬ
Результати
Компонент
X1 X2 X3 X4 X5 X6 X7 X8 X9 X10 Xav SD RSD
Трибенурон-
метил, мкг 4,05 4,04 3,81 3,97 4,06 3,85 4,09 3,88 4,1 - 3,99 0,06 1,58
Кількість (Amt,
1 2 3 4 5 6
Концентрація), мкг
Норма вмісту , г/кг 750
Відсоток від норми 25% 50 % 75 % 100 % 125 % 150 %
Площа, одиниці 6728,92 8337,99 10041,33 11829,33 13433,51 15086,59
Чинник відгуку
(RF=Площа/Amt), 6728,92 4168,99 3347,11 2957,08 2686,70 2514,43
одиниці/(мкг)
Показник Значення Примітка
Значення закріпленого
зразка, Xf , мкг 4,258 3,795 4,097 4,003 3,927 3,719 3,867 3,95 0,18 4,6
Значення не закріпленого
зразка, Xunf, мкг 1,977 2,076 2,140 2,119 1,963 2,116 1,835 2,03 0,11 5,4
Різниця, =Xf–Xunf 2,281 1,719 1,957 1,884 1,964 1,603 2,032 1,92 0,22 11,5
Відсоток повернення,
114 86 98 94 98 80 102 96 11 11,5
%RP Показник Значення Примітка
Кількість спостережень (n) 7
Середнє значення для закріпленого зразка Xf av,
3,95
мкг
Середнє значення для не закріпленого зразка Xunf
2,03
av
, мкг