Открыть Электронные книги
Категории
Открыть Аудиокниги
Категории
Открыть Журналы
Категории
Открыть Документы
Категории
Дмитрий Зимин
Екатерина Васильева
Зинаида Стаина
Рустам Абдрахимов
Никита Скабцов
Владимир Шитов
Сергей Лисофт
Иван Пономарев
Дмитрий Соломаха
Николай Кочкин
Сергей Вязьмин
Антон Коваленко
Сергей Попов
Алина Федосова
Владимир Коротков
Ирина Пименова
Роберт Имангулов
Алексей Волков
Анастасия Чумакова
Вадим Ской
Руслан Кундельский
Андрей Савченко
Евгений Шевелев
Максим Кузьмич
Клещенко Е.
К48 ДНК и её человек: Краткая история ДНК-идентификации / Елена Клещенко. — М.: Альпина нон-
фикшн, 2019. — 314 с.
ISBN 978-5-00139-120-3
Книга Елены Клещенко адресована всем, кого интересует практическое применение достижений
генетики в таких областях, как криминалистика, генеалогия, история. Речь идет о возможности иден-
тификации человека по его генетическому материалу. Автор рассказывает о методах исследования
ДНК и о тех, кто стоял у их истоков: cэре Алеке Джеффрисе, придумавшем ДНК-дактилоскопию, экс-
центричном Кэри Муллисе, сумевшем размножить до заметных количеств одиночную молекулу ДНК,
и других героях «научных детективов». Детективную линию продолжает рассказ о поиске преступников
с помощью анализа ДНК — от Джека-потрошителя до современных маньяков и террористов. Не менее
увлекательны исторические расследования: кем был Рюрик — славянином или скандинавом,
много ли потомков оставил Чингисхан, приходился ли герцог Монмут сыном королю Англии, наконец,
почему специалисты уверены в точности идентификации останков Николая II и его семьи и отчего
сомневаются неспециалисты. А в заключение читатель узнает, почему нельзя изобрести биологиче-
ское оружие против определенной этнической группы, можно ли реконструировать внешность по ДНК
и опасно ли выкладывать свой геном в интернет.
УДК 575.113
ББК 28.704
Все права защищены. Никакая часть этой книги не может быть воспроизведена в какой бы то ни было форме и каки-
ми бы то ни было средствами, включая размещение в сети интернет и в корпоративных сетях, а также запись
в память ЭВМ для частного или публичного использования, без письменного разрешения владельца авторских прав.
По вопросу организации доступа к электронной библиотеке издательства обращайтесь по адресу mylib@alpina.ru
От автора . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11
БЛАГОДАРНОСТИ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 297
ЛИТЕРАТУРА . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 299
от автора
11
елена клещенко днк и её человек
13
елена клещенко днк и её человек
Краткая предыстория
15
елена клещенко днк и её человек
16
как устроена днк
17
елена клещенко днк и её человек
18
как устроена днк
Вещество наследственности:
где находится, из чего состоит
19
елена клещенко днк и её человек
20
как устроена днк
* Шрёдингер Э. Что такое жизнь с точки зрения физика? / Пер. А. Малиновского. — М.:
Синхробук, 2017.
21
елена клещенко днк и её человек
22
как устроена днк
23
елена клещенко днк и её человек
24
как устроена днк
25
елена клещенко днк и её человек
26
как устроена днк
Экстракт “гладких”
стрептококков
Мышь
выздоравливает
27
елена клещенко днк и её человек
28
как устроена днк
29
елена клещенко днк и её человек
Рис. 4. Слева — структура ДНК. Ее молекула состоит из двух цепочек, каждая цепочка —
из нуклеотидов, нуклеотид — из азотистого основания, дезоксирибозы и фосфата.
Внизу на примере аденозинтрифосфата обозначена разница между азотистым ос-
нованием, нуклеозидом и нуклеотидами. Цифры около атомов дезоксирибозы пока-
зывают, почему так называются 5’ — и 3’ — концы нити ДНК. (Атомы дезоксирибозы
пронумерованы со штрихами, потому что цифры без штрихов достались азотистому
основанию.) Справа — щадящий вариант для тех, кто не очень любит биохимию, это-
го достаточно, чтобы понимать дальнейший рассказ
30
как устроена днк
31
елена клещенко днк и её человек
32
как устроена днк
35
елена клещенко днк и её человек
36
как читать днк
Автоматическое распознавание
37
Присоединение обычного нуклеотида Присоединение
(дезоксинуклеотидтрифосфата). дидезоксинуклеотидтрифосфата.
Рост цепи Обрыв цепи
C T
A T A T A
GC G
5’ T CG T G
C C
T G G CG C G G
C G C C C T
G T G
T CG A T C T
C A
G G C A T G T G
C A A T
C A T G C A G C
G G
C A T C G A C C C
A C
G G C A T G C G
A A T
A C G T A C G G A T
G T T A
A A T A T A A T
C
G C T A T A A T G C
A
C G G C C G
T A
3’
A T A T A
C
A
G
T
A
T
T
A
T A
A T A
G
T
A
A
G G C T
C
C A C
G
G
G
G C
T T C T
C
T G G G C GC
G C C
T A T CG
C C CG T
T G A T CG
C G T G C G
G C C G C G C
G A A T CG
C C C G A T
A A T A T CG
C G T A T A T
A G C G C G C
G A T A G C
G C G C G A T
A A T C G
CG A T A T A T
A G C A T
A T T A T A G C
G C C G T A
T A C G A
C G A T
A T
A T T A
C
T A T
G
A T A
G
T
Рис. 6. Слева — набор молекул ДНК, которые образуются при секвенировании по Сенгеру.
Справа их разделение электрофорезом — традиционным, на четырех дорожках, и ка-
пиллярным электрофорезом с флуоресцентной меткой (пики справа изображают ре-
гистрацию четырех цветов флуоресценции в приборе). Чем короче молекула, тем бы-
стрее она просачивается сквозь гель, так что по расположению фрагментов можно
восстановить нуклеотидную последовательность
39
елена клещенко днк и её человек
40
как читать днк
G A T A A AT C T G G T C T T AT T T C C
Рис. 7. Результат секвенирования по Сенгеру — олдскульный “ручной” вариант и современ-
ный прибор для капиллярного электрофореза
41
елена клещенко днк и её человек
42
как читать днк
43
елена клещенко днк и её человек
44
как читать днк
45
елена клещенко днк и её человек
Пиросеквенирование
T C
A G
A
T
C
T A T C
T
T T T
A G G G G G C
C
A
C T C G C
C
C C C C
T
G
C
G A G G G G C
T
A
A A A A
T
A A G A A
G
G A G G G C
C G C G C G C G
A T A T A T A T
T A T A T A T A
T A C
A
G
A
T
G
T T T A
A G G G G
C C C C T
C
T
C C C A C G
G G G G
C
G
A A A A T
C
A A A A
G G C G C G C
C G C G C G C G
A T A T A T A T
T A T A T A T A
T C
A G
A
T
G
T A T C
T
T T T
A G G G G G C
C
A
C T C G C
C
C C C C
T
G
C
G A G G G G C
T
A
H+
A A A A
T
A A G A A
G
G A G G G C
C G C G C G C G
A T A T A T A T
T A T A T A T A
46
как читать днк
47
елена клещенко днк и её человек
48
как читать днк
51
елена клещенко днк и её человек
52
днк-дактилоскопия сэра алека джеффриса
53
елена клещенко днк и её человек
54
днк-дактилоскопия сэра алека джеффриса
55
елена клещенко днк и её человек
56
днк-дактилоскопия сэра алека джеффриса
57
елена клещенко днк и её человек
А
1 2 3
Родители
Сестра и братья
Аллельные варианты
на саузерн-блоте
АА аа Аа Аа Аа аа Аа АА
Рис. 10. Что такое “полиморфизм длин рестрикционных фрагментов”? Допустим, изначаль-
но у людей в определенном фрагменте ДНК было 3 сайта рестрикции (аллель А).
Но мутация испортила сайт №2 (аллель а). Жирной линией обозначен участок, с ко-
торым гибридизуется зонд. У каждого человека, как мы помним, по два аллеля каж-
дого гена в двух парных хромосомах. (Аллелями называются различные варианты
одного и того же участка ДНК; так, в примере с менделевским горохом из первой
главы аллельные гены определяют желтый или зеленый цвет горошины.) Значит, ес-
ли у человека генотип АА, метку будет нести короткий кусочек 2–3; если генотип аа —
длинный кусочек 1–3; если Аа (гетерозиготный), то будут оба варианта, и 2–3, и 1–3.
Справа — пример: как могут выглядеть саузерн-блоты двух гетерозиготных родите-
лей и их детей
Рис. 11. Аналогичная ситуация, но длина меченого фрагмента изменяется не оттого, что му-
тация попала в сайт рестрикции, а от вариаций числа повторов
58
днк-дактилоскопия сэра алека джеффриса
59
елена клещенко днк и её человек
60
днк-дактилоскопия сэра алека джеффриса
Ген миоглобина
Минисателлит
Зонд
Коровая
GGAGGTGGGCAGGARG последовательность
61
елена клещенко днк и её человек
Рис. 13. Первый в мире ДНК-фингерпринт. Слева направо — дочка, мать, отец, крайняя до-
рожка справа — табак, на остальных — бабуин, лемур, тюлень, корова, мышь, крыса,
лягушка, но в какой последовательности, не помнит даже Алек Джеффрис. Выглядит
не слишком эффектно, и все же именно эта картинка совершила переворот в судеб-
ной медицине
62
днк-дактилоскопия сэра алека джеффриса
63
елена клещенко днк и её человек
А Б
ДНК нарезают на фрагменты
с помощью рестриктаз
А Б
Рис. 14. ДНК-фингерпринт. Сейчас это делается иначе — с 80-х гг. ХХ в. многое изменилось,
но именно такая технология применялась в расследованиях, о которых пойдет речь
дальше
64
днк-дактилоскопия сэра алека джеффриса
65
елена клещенко днк и её человек
Х М С Д Д Д М С Д Д Д
Рис. 15. Дело об иммигрантах из Ганы. Два ДНК-фингерпринта подтверждают, что женщина —
мать ребенка. Слева направо: заведомо неродственный мужчина (сам Алек Джеф-
фрис, Х), мать (М), мальчик (С) и трое детей этой женщины (Д), относительно которых
не было вопросов. Каждая линия в пробе мальчика соответствует либо материнской,
либо одной из отцовских, наблюдаемых у других детей
66
днк-дактилоскопия сэра алека джеффриса
67
елена клещенко днк и её человек
68
днк-дактилоскопия сэра алека джеффриса
69
елена клещенко днк и её человек
70
днк-дактилоскопия сэра алека джеффриса
Убийца — кондитер
71
елена клещенко днк и её человек
А Б Х В Г Д Х
Рис. 16. Убийства в Нарборо и Эндерби. А — ДНК Линды, Б — смесь ДНК Линды и убийцы,
Х — ДНК Бакленда, В — ДНК Дон, Г, Д — ДНК убийцы Дон. Видно, что Бакленд не со-
вершал ни первого, ни второго убийства и что обеих девочек убил один и тот же
человек
72
днк-дактилоскопия сэра алека джеффриса
73
елена клещенко днк и её человек
74
днк-дактилоскопия сэра алека джеффриса
77
елена клещенко днк и её человек
78
кэри муллис и полимеразная цепная реакция
79
елена клещенко днк и её человек
Ночь на трассе
80
кэри муллис и полимеразная цепная реакция
81
елена клещенко днк и её человек
82
кэри муллис и полимеразная цепная реакция
Целевая
последо-
вательность Новая ДНК
83
елена клещенко днк и её человек
84
кэри муллис и полимеразная цепная реакция
85
елена клещенко днк и её человек
86
кэри муллис и полимеразная цепная реакция
87
елена клещенко днк и её человек
88
кэри муллис и полимеразная цепная реакция
89
елена клещенко днк и её человек
90
кэри муллис и полимеразная цепная реакция
91
елена клещенко днк и её человек
900
800
700
600
500
400
300
200
100
о
1
10
13
16
19
22
25
28
31
34
37
40
43
46
49
–100
Рис. 18. Кривые ПЦР в реальном времени. По горизонтальной оси — число циклов ПЦР,
по вертикальной — интенсивность флуоресценции, пропорциональная количеству
ДНК. (Ее измеряют оптические датчики, вмонтированные в амплификатор.) Метод
не только показывает наличие генома той или иной бактерии в пробе: по форме кри-
вой можно вычислить его изначальную концентрацию
92
кэри муллис и полимеразная цепная реакция
93
елена клещенко днк и её человек
94
кэри муллис и полимеразная цепная реакция
95
елена клещенко днк и её человек