ЗАО "ЭКОлаб"

«Мочевина-УФ»

«НАБОР РЕАГЕНТОВ ДЛЯ

ФЕРМЕНТАТИВНОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ МОЧЕВИНЫ
В СЫВОРОТКЕ, ПЛАЗМЕ КРОВИ И МОЧЕ»

ЗАО "ЭКОлаб"
 2

ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ НАБОРА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ

ФЕРМЕНТАТИВНОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ МОЧЕВИНЫ
В СЫВОРОТКЕ, ПЛАЗМЕ КРОВИ И МОЧЕ
(кинетический УФ-метод)

(Мочевина-УФ)

Назначение
Набор предназначен для количественного определения содержания
мочевины в сыворотке, плазме крови и моче человека в клинико-
диагностических и биохимических лабораториях.
Набор рассчитан на проведение 50 определений при расходе 1,0 мл
растворов реагентов на одно определение.

Принцип метода
Ферментативный кинетический метод с уреазой и глутаматдегидроге-
назой (ГЛДГ).
уреаза
Мочевина  H 2 O     2 NH 3
 CO 2

ГЛДГ 
2 NH 3
   кетоглутар ат  NADH    L  глутамат  NAD  H 2O

Скорость окисления NADH в NAD+ пропорциональна концентрации мо-

чевины в пробе.

Состав набора:
 Реагент 1 – трис буфер,  - кетоглутарат, рН 7,8 - 1 флакон (40 мл).
 Реагент 2 – глутаматдегидрогеназа, уреаза, NADH - 1 флакон (10
мл)
 Калибратор - калибровочный раствор мочевины, 8,0 ммоль/л - 1
флакон (1,5 мл).

Аналитические характеристики набора

Линейная область определения – до 33,3 ммоль/л.
Чувствительность – не более 1,5 ммоль/л.

Нормальные значения содержания мочевины:

в сыворотке крови, плазме - 2,5-8,33 ммоль/л;
в моче - 333-583 ммоль/сут.

Рекомендуется в каждой лаборатории определить диапазон нормаль-

ных величин для обследуемого контингента.

Анализируемые пробы
Сыворотка или гепаринизированная плазма крови и моча. Мочу перед
определением разбавить дистиллированной водой в соотношении 1:50.
 3

Приготовление рабочего раствора реагентов

Смешать Реагент 1 с Реагентом 2 в соотношении 4:1.
Рабочий раствор реагентов можно хранить при температуре (2-8) оС в
темном месте в плотно закрытом флаконе не более 30 сут.
Калибратор готов к применению.

Набор предназначен для проведения анализа на биохимических полу-

автоматических и автоматических анализаторах
Проведение анализа

Перед проведением анализа рабочий раствор реагентов следует вы-

держать при температуре (37 ± 1) оС в течение 5 мин.

Компоненты и анализируемые пробы отмерить в количествах, указан-

ных в таблице.
Таблица
Отмерить, мл Опытная проба Калибровочная
проба
Рабочий раствор реа-
1,0 1,0
гентов
Сыворотка (плазма)
0,01 0,01
крови или моча

Примечание. При использовании кюветы меньшего объема расход

реагентов может быть уменьшен при сохранении указанных выше соот-
ношений.

Пробы перемешать и инкубировать при температуре (37+1) оС в тече-

ние 30 сек. Измерить оптическую плотность опытной (Е1) и калибровочной
(Ек1) проб против воды при длине волны 340 нм в кювете с длиной оптиче-
ского пути 1,0 см. Через 90 сек повторно измерить оптическую плотность
опытной (Е2) и калибровочной (Ек2) проб.

Расчеты

Рассчитать изменение оптической плотности опытной и калибровочной

проб:

ΔЕ = Е1 – Е2; ΔЕк = Ек1 - Ек2.

Содержание мочевины (С, ммоль/л) в сыворотке крови (плазме) опре-

делить по формуле:
 4
Е
С   8 ,0
Ек

где Е – изменение оптической плотности опытной пробы, ед. опт. пл.;

Ек – изменение оптической плотности калибровочной пробы, ед.
опт. пл.;
8 ,0 – концентрация мочевины в калибраторе, ммоль/л.

Содержание мочевины (С, ммоль/сут) в моче определить по формуле:

 Е  V  51
С   8 ,0 ,
Ек

где: Е – изменение оптической плотности опытной пробы, ед. опт. пл.;

Ек – изменение оптической плотности калибровочной пробы, ед.
опт. пл.;
V – объем мочи, собранный за сутки, л;
51 – коэффициент разведения мочи;
8,0 – концентрация мочевины в калибраторе, ммоль/л.

Условия хранения и эксплуатации набора

Набор должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при

температуре (2-8) оС в течение всего срока годности. Допускается хранение
набора при температуре до 25 оС не более 20 сут.
Срок годности набора – 1 год.
Рабочий раствор реагентов можно хранить при температуре (2-8) оС в
темном месте в плотно закрытом флаконе не более 30 суток.
Калибратор после вскрытия флакона можно хранить при температуре
о
(2-8) С в плотно закрытом флаконе не более 6 месяцев.
При содержании мочевины в сыворотке крови выше 33,3 ммоль/л ана-
лизируемую пробу следует развести физиологическим раствором и полу-
ченный результат умножить на разведение.
Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение
инструкции по применению набора.

По вопросам, касающимся качества набора Мочевина-УФ, следует

обращаться по адресу 142530, Московская обл, г. Электрогорск, ул. Буденно-
го, д. 1, ЗАО «ЭКОлаб»; тел/факс (49643) 3-30-93, 3-30-85. - отдел сбыта