Лекция 18

ЦЕНТРАЛЬНАЯ РОЛЬ АЦЕТИЛ КоА

В МЕТАБОЛИЗМЕ ЛИПИДОВ

1. Источники ацетил-КоА и его использование

Основными источниками ацетил-КоА служат: β-окисление жир-

ных кислот, расщепление кетогенных аминокислот, окисление глюкозы
до пирувата и окислительное декарбоксилирование его до ацетил-КоА.
Образующийся ацетил-КоА служит отправной точкой следующих
важнейших метаболических путей: 1) окисление в ЦТК, 2) синтез кето-
новых тел, 3) синтез холестерина, 4) биосинтез жирных кислот.

2. Кетогенез

Ацетил-КоА включается в ЦТК в условиях, когда расщепление

жиров и углеводов сбалансировано. Ускоренный катаболизм жирных
кислот или сниженный уровень использования углеводов (как порознь,
так и в сочетании) могут приводить к накоплению ацетил-КоА и синте-
зу из него кетоновых тел: ацетоацетата, b-гидроксибутирата и ацето-
на. Синтез кетоновых тел происходит в митохондриях печени. Ацето-
ацетат образуется из ацетил-КоА в 3 стадии. Вначале 2 молекулы аце-
тил-КоА конденсируются с образованием ацетоацетил-КоА:
ацетил-КоА-
O ацетилтрансфераза O
O
2CH3 C~SKoA
ацетоацетил-КоА
CH3 C CH2 C~SKoA + HSKoA
O
+ CH 3 C~SKoA
гидроксиметилглутарил-
КоА-синтаза
OH O
HOOC CH2 C CH2 C~SKoA
CH3
b-гидрокси-bМетил-Глутарил-КоА (ГМГ-КоА)

ГМГ-КоА-лиаза

O +
O
CH3 C CH2 COOH CH3 C~SKoA
ацетоацетат ацетил-КоА

188
b-гидроксибутират-
дегидрогеназа СО2 (спонтанно)
НАДН+Н+

CH3 CHOH CH2 COOH + НАД CH3 C CH3

b-гидроксибутират O ацетон

В норме в митохондриях печени образуется небольшое количе-

ство кетоновых тел. В печени ацетоацетат не может окислиться, по-
этому с током крови он попадает в скелетные мышцы, сердце, мозг, ко-
торые способны превращать ацетоуксусную кислоту вновь в ацетил-
КоА.
O
CH3 C CH2 COOH + сукцинил-КоА

сукцинил-КоА-ацетоацетат-
трансфераза (ее нет в печени)
O
O
Сукцинат +CH 3 C CH2 C~SKoA
ацетоацетил-КоА

тиолаза
+ HSKoA
O
2CH3 C~SKoA
ацетил-КоА

ЦТК

Таким образом, ацетоацетат в норме выполняет роль источ-

ника энергии для сердечной мышцы, скелетных мышц, мозга.
Голодание и диабет, ведущие к усиленному освобождению жир-
ных кислот из тканевых депо и к снижению метаболизма углеводов в
печени, приводят к образованию такого избытка кетоновых тел, что
внепеченочные ткани не справляются с их утилизацией. Это приводит к
накоплению кетоновых тел в крови (кетонемия), которые обладают
свойствами кислот, что снижает рН и развивается метаболический аци-
доз. При большом избытке кетоновых тел они выводятся почками, т.е.
возникает кетонурия. В крайне тяжелых случаях ацетон выводится че-

189
рез легкие и может быть обнаружен в выдыхаемом воздухе.

3. Синтез холестерина

Холестерин может поступать с пищей или синтезироваться de

novo. Синтез холестерина осуществляется в клетках почти всех органов
и тканей, однако в значительных количествах он синтезируется в пече-
ни – 80%, стенке тонкой кишки – 10% и коже – 5%. За сутки в организ-
ме взрослого синтезируется около 800 мг холестерина.
Синтез происходит из ацетил-КоА с затратой АТФ, в эндоплазма-
тическом ретикулуме, необходимы Mg, НАДФН2. В синтезе выделяют 3
этапа:
1 этап. Образование 5-углеродного метаболита – изопентенила
(синтез изопреновых блоков).
Начало синтеза совпадает с синтезом кетоновых тел до стадии
ГМГ-КоА.
OH
COOH CH2 C CH2 CH2OH + HSKoA
CH3 ГМГ-КоА

+2НАДФН2
ГМГ-КоА-редуктаза

OH
COOH CH2 C CH2 CH2OH + HSKoA +2 НАДФ
CH3
мевалоновая кислота

Это практически необратимая реакция лимитирует скорость син-

теза холестерина. ГМГ-КоА-редуктаза – регуляторный фермент. Ско-
рость синтеза редуктазы в печени подвержена четким суточным колеба-
ниям: максимум ее приходится на полночь и минимум на утренние ча-
сы. Активность ГМГ-КоА-редуктазы (или содержание ее в клетках
печени) возрастает при действии ионизирующей радиации, введении
инсулина и тиреоидных гормонов, а также при гипофизэктомии, что
приводит к усилению синтеза холестерина и повышению его уровня в
крови. Напротив, угнетение синтеза холестерина, связанное с воздей-
ствием на редуктазу, отмечается при голодании, тиреоэктомии, при вве-
дении глюкагона и глюкокортикоидов, а также больших доз никотино-
вой кислоты.

190
 В отличие от печени, в стенке тонкой кишки синтез холестерина
регулируется исключительно концентрацией желчных кислот. Так, от-
сутствие желчных кислот в кишечнике при наличии желчной фистулы
ведет к повышению синтеза холестерина в тонкой кишке в 5-10 раз.
Далее идет 2 фосфорилирования мевалоновой кислоты:

+2 АТФ
OH O O 5-пирофос-
фомевало-
COOH CH2 C CH2 CH2 O P O P OH новая ки-
CH3 OH OH слота

СО2
Н2О
H2C O O изопентенилпирофосфат
C CH2 CH2 O P O P OH
H3C OH OH

изомеризация
H3C O O
C CH CH2 O P O P OH диметилалилпирофосфат
H3C OH OH (5 атомов С, изопреновое
звено)
Изопреновое звено схематически можно изобразить следующим
образом:

фосфорилированный «хвост»

«голова»

2 этап. Конденсация изопреновых блоков в сквален (30 атомов С).

конденсация
3 блока фарнезил (15 атомов С)
конденсация
2 фарнезила сквален (30 атомов С)

3 этап. Модификация и образование холестерина.

циклизация

191
сквален ланостерин (30 атомов С)
ланостерин холестерин (27 атомов С)

При образовании из ланостерина холестерина происходит:

1. Удаление трех метильных групп.
2. Насыщение двойной связи в боковой цепи.
3. Перемещение двойной связи в кольце из положения 8,9 в по-
ложение 5,6.
21
CH3
22
23
18
20
CH3 24
25
12 17 27
19 11 13 16
CH3
26 CH3
14 15 CH3
1 9
2 10 8

3 5 7
4 6

OH

Холестерин

Начиная со сквалена и кончая самим холестерином, все проме-

жуточные продукты биосинтеза нерастворимы в водной среде. Поэтому
они участвуют в конечных реакциях биосинтеза холестерина, будучи
связанными со стеринпереносящими белками. Это обеспечивает их рас-
творимость в цитозоле клетки и протекание соответствующих реакций.
Стеринпереносящие белки обеспечивают также перемещение холе-
стерина внутри клетки, что имеет важное значение для вхождения его в
клеточные мембраны, окисления в желчные кислоты, превращения в
стероидные гормоны.
Наиболее интересной находкой явилось установление того фак-
та, что пищевой холестерин угнетает синтез собственного холестерина в
печени и что синтез холестерина в целом регулируется по принципу от-
рицательной обратной связи.
Предполагается, что холестерин или продукты его окисления в
клетке могут угнетать непосредственного синтез редуктазы или инду-
цировать синтез энзимов, участвующих в ее деградации. И в этом, и в
другом случае тормозится восстановление ГМГ-КоА в мевалоновую
кислоту, что незамедлительно сказывается на синтезе холестерина в це-
лом. В 70-е годы ХХ века в ряде стран (Япония, США и др.) проводился
усиленных поиск лекарственных ингибиторов редуктазы, завершив-
шийся к настоящему времени большим успехом - внедрением в клини-
ческую практику соединений, известных под названием «статинов» (ло-

192
вастатин, правастатин, симвастатин и др.) Эти соединения, структурно
близкие лактону мевалоновой кислоты, в относительно небольших до-
зах (20-80 мг в день) эффективно снижают уровень холестерина в крови
за счет угнетения его синтеза в печени на стадии превращения ГМГ-
КоА в мевалоновую кислоту.
В 1964 г. М. Siperstein и V. Fagan показали, что в гепатоме мыши
отсутствует регуляция синтеза холестерина по принципу отрицательной
обратной связи, и, таким образом, синтез стерина, столь необходимого
для построения мембран быстропролиферирующих раковых клеток,
идет бесконтрольно. Это наблюдение оказалось справедливым и для ге-
патомы человека, и для некоторых других злокачественных новообра-
зований. Здесь уместно упомянуть еще об одной интересной находке: V.
Huneeus и соавт. (1979) нашли, что мевалоновая кислота, помимо того,
что является промежуточным продуктом в синтезе холестерина, актив-
но участвует в репликации ДНК, хотя механизм этого участия еще не
ясен. Все это побудило высказать мнение, что бесконтрольное образо-
вание не только холестерина, но и мевалоната играет определенную
роль в развитии злокачественной опухоли [Siperstein М., 1984].

4. Биосинтез жирных кислот

Биосинтез жирных кислот можно рассматривать как процесс,

складывающийся из 3 этапов.
I. Транспорт ацетил-КоА в цитозоль из митохондрий
II. Образование малонилКоА
III. Конденсация этих молекул и их восстановление с образовани-
ем высших насыщенных жирных кислот, главным образом пальмитино-
вой.
I этап. Образование ацетил-КоА происходит в митохондриях, а их
мембрана непроницаема для ацетил-КоА. Перенос ацетильных групп
происходит при помощи цитрата (цитратный челночный механизм).
митохондрии

ацетил-КоА + ЩУК

цитратсинтаза

цитрат + HSKoA

транслоказа

цитозоль цитрат + АТФ + HSKoA

цитратлиаза

ацетил-КоА + АДФ + Рн + ЩУК

193
 ЩУК может вернуться в митохондрии с помощью своей трансло-
казы, но чаще она восстанавливается до малата с участием малатдегид-
рогеназы (МДГ).

МДГ
+
цитозоль ЩУК + НАДН + Н малат + НАД+
Малат декарбоксилируется НАДФ-зависимой малатдегидро-
геназой (маликфермент):
МДГ
Малат + НАДФ пируват + СО2 + НАДФН2

Образующийся НАДФН2 используется в дальнейшем для синтеза

жирных кислот.
II этап. Ацетил-КоА карбоксилируется под действием ацетил-
КоА-карбоксилазы, сложного фермента, коферментом которого служит
витамин биотин.

O O
CH3 C~SKoA+CO2+АТФ COOH CH2 C~SKoA+ АДФ+Рн
малонилКоА

Эта реакция лимитирует скорость всего процесса синтеза жирных

кислот.
III этап протекает при участии мультиферментного пальмитат-
синтазного комплекса. Он состоит из двух полипептидных цепей. Ка-
ждая полипептидная цепь содержит все 6 ферментов синтеза (трансаци-
лаза, кетоацилсинтаза, кетоацилредуктаза, гидратаза, еноилредуктаза,
тиоэстераза). Ферменты связаны между собой ковалентными связями,
ацилпереносящий белок (АПБ) является также частью полипептидной
цепи, но его функция связана только с переносом ацильных радикалов.
В процессе синтеза важную роль играют тиогруппы. Одна из них при-
надлежит 4-фосфопантотеину, входящему в состав АПБ (центральная)
и вторая – цистеину кетоацилсинтазы (периферическая). Функциональ-
ная единица синтеза состоит из половины одного мономера, взаимодей-
ствующего с комплементарной половиной второго мономера, где цен-
тральная SH-группа одного мономера очень близка к периферической
SH-группе другого. Т.е. на синтазном комплексе синтезируются одно-
временно 2 жирные кислоты и только димер активен. Перенос субстрата
от фермента к ферменту происходит при участии АПБ.
Многие мультиферментные комплексы эукариот состоят из по-
лифункциональных белков, в которых различные ферменты ковалентно
связано в единую полипептидную цепь. Преимущество такой организа-
ции - возможность координирования синтеза различных ферментов.

194
Кроме того, мультиферментный комплекс, состоящий из ковалентно
соединенных ферментов, является более стабильным, чем комплекс,
образованный нековалентными связями.
Гибкость и максимальная длина в 20 Ангстрем фосфопантетеи-
нильного компонента представляются критическими для функции
мультиферментного комплекса, поскольку они обеспечивают тесный
контакт удлиняющейся цепи жирной кислоты с активным центром
каждого фермента в комплексе. Для взаимодействия субъединиц фер-
мента с субстратом не требуется их большой структурной пере-
стройки, поскольку сам субстрат на длинном гибком плече может
достигнуть каждого активного центра. Организованная структура
синтетаз жирных кислот у дрожжей и высших организмов повышает
общую эффективность процесса благодаря прямому переносу проме-
жуточных продуктов от одного активного центра к следующему. Реа-
гирующие соединения не разбавляются в цитозоле. Кроме того, им не
нужно «находить» друг друга путем случайной диффузии. Еще одним
преимуществом такого мультиферментного комплекса является то
обстоятельство, что ковалентно связанные промежуточные продук-
ты изолированы и защищены от конкурирующих реакций.

Реакции III этапа

1. COOH CH 3 2.
O -СО2
1 SH + C H 2 + C~ O S~C CH 3
S K -HSKoA 1
2 C~ SO oA
Ko 2
A
SH S~C CH 2 COOH
1 SH 3. + НАДФН2 1O SH 4. гидратаза
2 – НАДФ – Н2О
2

S~C CH2 C CH3 S~C CH2 CHOH CH3

O O O
b-кетоацил АПБ b-гидроксиацил АПБ
(ацетоацетил АПБ)

1 SH 5. + HАДФН2 6.
1 SH
2 - НAДФ
2
S~C CH CH CH3
S~C CH2 CH2 CH3
O
еноилацил АПБ (ацетоацетил АПБ) O ацил АПБ (масляная кислота)

195
Обозначения: 1 SH – периферическая SH-группа,
2 SH – центральная SH-группа.

Пояснения к реакциям III этапа:

1. При участии трансацилазы остатки малонила переносятся на

центральную SH-группу, а ацетила – на периферическую.
2. Кетоацилсинтаза переносит ацетильный остаток с перифери-
ческой SH-группы на остаток малонила, это реакция конденсации, энер-
гия для нее освобождается при одновременном декарбоксилировании
малонила.
3. Для удаления О2 далее проходят 3 последовательные реакции:
восстановление – дегидратация – восстановление. Первая реакция вос-
становления происходит при участии кетоацилредуктазы с кофермен-
том НАДФН2, при этом кетогруппа восстанавливается в спиртовую.
4. Удаление воды происходит при участии гидратазы.
5. Восстановление двойной связи еноилредуктазой с кофермен-
том НАДФН2. В результате последних трех реакций – восстановления,
дегидратирования и второго восстановления – происходит превращение
ацетоацетил-АПБ в бутирил-АПБ, которое завершает первый цикл
элонгации.
6. Если в данный момент в клетке нужна именно масляная ки-
слота, то тиоэстераза (деацилаза) отщепляет масляную кислоту с цен-
тральной SH группы на цитоплазматический КоА. При необходимости
жирной кислоты с более длинной цепью, трансацилаза переносит оста-
ток масляной кислоты на периферическую SH-группу, а к центральной
вновь переносится малонил-КоА и элонгация повторяется, пока не об-
разуется пальмитиновая кислота. Она отщепляется тиоэстеразой и со-
единяется с цитоплазматическим коферментом А. Полученный ком-
плекс пальмитоил-КоА ингибирует пальмитатсинтазу, вызывая диссо-
циацию димера на мономеры. Синтез жирных кислот прекращается.

Дальнейшее удлинение пальмитиновой кислоты может про-

исходить двумя механизмами:

1. Митохондриальный. Остаток пальмитиновой кислоты карни-

тином переносится в митохондрии, где происходит удлинение за счет
присоединения ацетил-КоА по пути, обратному b-окислению. Отличие:
используется кофермент НАДФН2, а не ФАД и НАД.
2. Микросомальный. Напоминает цитоплазматический, т.е. уд-
линение происходит за счет малонил-КоА, отличие – промежуточные
продукты не связываются с АПБ, т.е. все ферменты действуют разроз-
ненно.

196
 В микросомах с помощью оксидаз также происходит введение
двойных связей в насыщенные жирные кислоты с образованием моно-
ненасыщенных жирных кислот, при этом используется НАДФН2 и О2:

Пальмитоил-КоА+НАДФН2+О2®Пальмитоолеил-КоА+2Н2О+НАДФ

Скорость синтеза жирных кислот регулируется механизмами

кратковременного и долговременного контроля. Кратковременная регу-
ляция происходит аллостерически на уровне фермента ацетил-КоА-
карбоксилазы: цитрат - активатор, пальмитат и др. жирные кислоты –
ингибиторы. Долговременная регуляция осуществляется через синтез
ферментов и их деградацию при участии гормонов.
Полиеновые жирные кислоты - линолевая и линоленовая в орга-
низме человека не синтезируются, а должны поступать с пищей (неза-
менимые). Все остальные полиненасыщенные жирные кислоты синте-
зируются из этих кислот, особенно важен синтез арахидоновой и эйко-
запентаеновой кислот, являющимися предшественниками эйкозаноидов.

Сопоставление некоторых особенностей окисления и синтеза

жирных кислот

Показатели Окисление Синтез

Локализация ферментов Митохондриальный мат- Цитозоль
рикс
Состояние ферментов Неассоциированные в Полиферментный ком-
комплекс ферменты плекс
Переносчик ацила Коэнзим А АПБ
Окислительно- НАД+/НАДН + Н+ НАДФ+/НАДФН2
восстановительная систе- ФАД/ФАДН2
ма
«С»-единица Ацетат Малонат
Термодинамическое рав- Благоприятствует окисле- Благоприятствует синтезу
новесие нию

5. Синтез триацилглицеринов

Триацилглицерины синтезируются во многих органах и тканях, но

наиболее важную роль в их синтезе играют печень, стенка кишечни-
ка, лактирующая молочная железа и жировая ткань.
Для синтеза необходима активная форма глицерина – a-
глицерофосфат и активная форма жирной кислоты – ацил-КоА.
Активация глицерина может происходить двумя способами:
1. В стенке кишечника и почках, печени есть активная глицерол-
киназа:
C H 2O H глицеролкиназа CH 2 OH
CHOH CH OH
197
C H 2O H CH 2 OPO 3H 2
 + АТФ + АДФ

глицерин a-глицерофосфат

2. В жировой ткани и мышцах активность этого фермента очень

низкая и образование a-глицерофосфата связано с гликолизом:
C H 2O H лицерофосфатде- CH 2 OH
гидрогеназа
C O + НАДН + H+ CH OH + НАД+
C H 2O PO 3H 2 CH 2 OPO 3 H 2
диоксиацетонфосфат a-глицерофосфат

a-Глицерофосфат, образованный любым из этих путей, взаимо-

действует с двумя молекулами активированных жирных кислот (ацил-
КоА) с образованием фосфатидной кислоты:
O
CH 2 OH CH 2 O C R 1
O
O + 2 H SK oA
CHOH + 2R C~ S K o A CH O C R 2
CH 2 OPO 3H 2 CH 2 OPO 3H 2
фосфатидная кислота
фосфатаза
O –Н3РО4 O
CH 2 O C R 1 O CH 2 O C R 1
O+ R O
3 C~ S K o A CH O C R 2
CH O C R 2 O
CH 2 OH CH 2 O C R 3

диацилглицерин триацилглицерин

6. Синтез глицерофосфолипидов

Биосинтез глицерофосфолипидов наиболее интенсивно происхо-

дит в печени, стенке кишечника, семенниках, молочной железе. Реакции
синтеза локализованы в эндоплазматической сети. Синтез до образова-
ния фосфатидной кислоты происходит также, как и синтез триа-
цилглицеринов.
O O NH2
CH 2 O C R 1 C H 2O C R 1
O O N +Н4Р2О7
CH O C R 2 + ЦТФ CHO C R2
O O O
N пиро-
CH 2 OPO 3 H 2 C H 2O P O P O H 2C рофос
фосфатидная O- O- O фос-
кислота ЦДФ-диацилглицерин фата-

OH OH 2Н3РО4
+ OH CH 2 CH COOH
NH 2
198
 серин
O
CH 2 O C R 1
O
CH O C R 2 +ЦМФ
O
CH 2 O P O CH 2 CH COOH
O- NH 2
фосфатидилсерин

– СО2

O
C H 2O C R 1
O
CHO C R2
O
C H 2O P C C H 2 C H 2
O- N H 3+
фосфатидилэтаноламин

3 S-аденозилметионин

3 S-аденозилгомоцистеин
O
CH 2 O C R 1
O
CH O C R 2
O
CH 2 O P O CH 2 CH 2 N + (CH 3 ) 3
O- фосфатидилхолин

199