Simplifying Progress

Микробиологический мониторинг
воздуха в чистых зонах и линиях
заполнения
Марина Капранова | Сентябрь 2020
Методы отбора проб воздуха

Пассивный Активные
Седиментация Отбор проб прибором
Объём неизвестен
отбор в жидкую среду
центрифужные

щелевые отбор фильтрацией

импактор

Точные
Необходимо обеспечить изокинетические условия отбора проб в критических зонах
=>
Импакторы (портативные пробоотборники) - зона класса С, D
Пробоотборники с фильтрами (стационарные пробоотборники с выносной
отбирающей головкой) – зона класса А, B, C
 Содержание

1 НД и требования

2 Метод импакции

3 Метод желатиновых фильтров

4 Пробоотборник воздуха MD8 AirScan

3
Нормативные документы и требования
Документы и активный метод мониторинга воздуха
• ГОСТ Р ИСО 13137-2016 Воздух рабочей
зоны. Насосы для индивидуального отбора
проб химических и биологических веществ.
Требования и методы испытаний

• ГОСТ Р 57669-2017 Воздух рабочей зоны.

Приборы для отбора биоаэрозольных
объемных проб. Требования и методы
испытания

• ГОСТ ИСО 14698-1-2005 Чистые • ISO 14698 Cleanrooms and

помещения и связанные с ними associated controlled
контролируемые среды. Контроль environments. Biocontamination
биозагрязнений. Часть 1. Общие принципы и control... - Drafts
методы. и Часть 2. Анализ данных о
биозагрязнениях.
Нормативные документы и требования
Документы и активный метод мониторинга воздуха
• Правила EU GMP, Приложение1, проект (EU
GMP Annex 1: 2020 2nd draft)
и
• Руководство FDA по асептическому
наполнению (FDA Guide To Aseptic
Processing)

• МУК 4.2.734-99 Микробиологический

мониторинг производственной среды

• ГОСТ Р ИСО 16000-16-2012 Воздух

замкнутых помещений. Часть 16.
Обнаружение и подсчёт плесневых грибков.
Отбор проб фильтрованием.
Нормативные документы и требования
Обновление Приложения 11 к Европейским GMP
• Европейская комиссия внесла изменения в
GMP ЕС – рекомендации по производству
стерильных лекарственных средств.
Большинство препаратов имеют
биологическое происхождение и / или
производятся в асептических условиях, и
потому требуют организации чистых
регулируемых производственных зон, таких
как ISO класс V (“класс 100” или “класс A”) .
• “Приложение 1 к Европейским правила GMP ” –
создано на основе диалога с научным
сообществом в области
фармбиотехпроизводства. *
• ..... и это привело к > 6000 предложений /
изменений / комментариев от производств.
Чистые зоны класса А-D (ISO 4.8-5 – 8-9)

Чистые помещения по ISO 5 – ISO 9 Линии заполнения

Контроль стерильности
в изоляторах

Машины BFS (выдув-надув-запайка)

Типы зон класса А (ISO 4.8-5)

Постоянное присутствие людей (операторов) в зоне чистоты

Классическое чистое класса A. Производство ведется в зоне А с окружающей чистой
помещение зоной класса В.

RABs - открытая система Наличие физического барьера между оператором и зоной А, но

воздух зоны А выходит в окружающую зону В. Такая система
устанавливается в зоне В.

cRABs - закрытая Наличие физического барьера между людьми (операторами) и

зоной класса А. Воздух зоны А рециркулирует внутри cRABs. Такая
система
система устанавливается в зоне В.

Изолятор Полное физическое разделение между оператором и зоной А.

Воздух зоны А рециркулирует только внутри изолятора. Изолятор
может быть установлен в окружающей зоне С.
Требования к контролю воздуха по GMP

Регулярный мониторинг чистых комнат вокруг Расположение точек контроля

зоны риска (Класс C/D) зависит от риска

Требуется и мониторинг
микробиологических
загрязнений, и мониторинг
частиц в воздухе

Постоянный мониторинг зон риска (Класс A/B)

 Содержание

1 НД и требования

2 Метод импакции

3 Метод желатиновых фильтров

4 Пробоотборник воздуха MD8 AirScan

10
Портативный пробоотборник –
принцип Андерсена
Подходят для непродолжительного пробоотбора

Осаждение микроорганизмов сразу на чашки со средой

Чашки со средами готовы к подсоединению

Легко надеваются на пробоотборник

Поток воздуха

Микроорганизмы Перфорированная
пластина (сито)

Не задержанные

Агаризованная среда Задержанные

микроорганизмы
Портативный пробоотборник –
принцип Андерсена
Скорость работы
 Быстрый отбор пробы активным способом
 Возможность использования готовых расходных
материалов и приготовленных вами сред

Надёжные результаты
 Высокий коэффициент улавливания микроорганизмов и
частиц
 Минимальный риск контаминации – использование готовых
расходных материалов
 Содержание

1 НД и требования

2 Метод импакции

3 Метод желатиновых фильтров

4 Пробоотборник воздуха MD8 AirScan

13
Высыхание агаровых сред при пробоотборе

Свежий Пересушенный
агар агар
Пробоотборники MD8 AirScan (фильтрующие)

Непрерывный пробоотбор (до неск.часов)

Поддержание изокинетических условий

Сохранение жизнеспособности
микроорганизмов

Защита критической зоны от отбирающей

головки воздушным фильтром
Метод отбора на желатиновые фильтры (GMF)

Прямой метод Непрямой метод

Фильтр сразу Фильтр растворяют после отбора
помещают на среду пробы если в пробе воздуха:
после отбора пробы a) Нужно удалить ингибиторы
b) Ожидается большое
количество колоний
Преимущества желатиновых фильтров

– “Абсолютное ” задерживание
(99,9995% для споровых форм Bac. sub. Niger при 0,25 м/сек,
99,94% для фагов T3 при 80% отн. влажности)

– Фильтр поддерживает жизнеспособность улавливаемых

микроорганизмов в течение существенного и значимого
времени отбора

– Желатиновые фильтры полностью растворяются в воде

– Для мониторинга воздуха, который может содержать

ингибирующие вещества (дезинфектанты, антибиотики и т.д.)

Метод рекомендован GMP

Преимущества желатиновых фильтров

– Обеспечение высокой скорости потока воздуха

(ок. 2,7 л/мин/см2 при ∆P = 0,05 бар)
- Толщина 250 мкм, размер пор* 3 мкм
- Стерилизованы гамма-излучением

Метод рекомендован GMP

 Содержание

1 НД и требования

2 Метод импакции

3 Метод желатиновых фильтров

4 Пробоотборник воздуха MD8 AirScan

19
Пробоотборник MD8 AirScan

MD8 Airscan и его компоненты

Головка для
Блок управления * Кабель
отбора пробы
* Устройство управления с дисплеем
Схема встраивания AirScan MD8 в изолятор
(или BFS):
стенка изолятора
желатиновые
фильтр-элементы для каждого фланцевого
17528 соединения нужен зажим из
нерж. стали
адаптер 17033
17801---01

коннектор
адаптеры 17030
17659---003
(для ПВХ-шланга)
или
17016 адаптер
(для силиконового шланга 17658

коннекто
р шланг
17026 17085|17088
Sartofluor Capsule (ПВХ)
5185307T9—SS--A или
17662 (силикон)
Ваши возможности с MD8 AirScan

Возможность присоединения
гидрофобного (Sartofluor®)
стерилизующего воздушного
фильтра (0,2 мкм):
5181307T9—SS-A
Ваши возможности с MD8 AirScan

Непрерывный мониторинг

Стерилизация в в
Стерилизация линии с H2сOH
линии 2 O
Головки 2 2

пробоотборн Контроль желатиновыми фильтрами

ика
Сохранение данных калибровки

Возможность отложенного старта

Хранение результатов (до 300)

Вывод данных на печать

Фильтрующие пробоотборники MD8 AirScan

Дезинфекция
Для предотвращения вторичной контаминации перед перемещением
устройства и его компонентов в критические зоны фармпроизводства
обязательна их дезинфекция и упаковка. Головку пробоотборника и
блок управления можно легко продезинфицировать с помощью
следующих дезсредств:

In-line в изоляторе с H202

Этанол (70%)
Изопропанол (70%)
Dismozon® (1%)
Гипохлорит натрия (5%)
Формальдегид (4%)
Пероксикарбоновая кислота (1%)
Фильтрующие пробоотборники MD8 AirScan

Термотрансферная печать для СМК

в области фармпроизводств

Принтер YDP30 Компактность & лёгкий вес

Надёжные результаты
Предложения по сервису MD8 Airscan

Протоколы квалификации (IQ|OQ)

-Подтверждение применимости для целевого
использования
-Соответствие требованиям регуляторных
документов
-Использование анализа рисков для минимизации
различных рисков и контроля всех критических
аспектов оборудования
Как передать стерильные желатиновые фильтры
в чистую зону?
Упаковка желатиновых фильтров:

17528--80----ACD каждый в одной упаковке

17528--80----BZD каждый в тройной упаковке

17528--80----VPD каждый в тройной упаковке, с

этикеткой на внутренней
упаковке

17528--------BFV каждый в упаковке Biosafe® с портом

асептической передачи в чистую зону
Асептическая передача фильтров в изоляторы &
чистые помещения при помощи портов и мешков
Biosafe®

17528--------BFV
Желатиновый
фильтр в упаковке
Biosafe®
Видео:

https://www.youtube.com/watch?v=holkeDmp3qM
MD8 AirScan для непрерывного мониторинга
 Вопросы?

32
 Спасибо!

Марина Капранова
Ведущий специалист по лабораторной фильтрации и микробиологии
Phone +49 551 308 1234
Mobile +49 151 123456789
Marina.Kapranova@sartorius.com