РОССИЙСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ДРУЖБЫ НАРОДОВ

На правах рукописи

Ставцев Дмитрий Сергеевич

ИММУНОГЕНЕТИЧЕСКИЕ МАРКЕРЫ ПРИ ЯЗВЕННОМ

КОЛИТЕ И БОЛЕЗНИ КРОНА У ВЗРОСЛОГО
НАСЕЛЕНИЯ МОСКОВСКОГО РЕГИОНА

03.02.07 - генетика

ДИССЕРТАЦИЯ
на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Научные руководители:
Астрелина Татьяна Алексеевна – доктор медицинских наук
Азова Мадина Мухамедовна – доктор биологических наук, доцент

Москва
2016
 ОГЛАВЛЕНИЕ
Стр.
Введение 3
Глава 1. Обзор литературы 10
1.1. Значение иммуногенетических факторов в развитии болезни 11
Крона
1.2. Значение иммуногенетических факторов в развитии язвенного 23
колита
Глава 2. Материал и методы исследования 33
2.1. Материал исследования 33
2.2. Методы исследования 43
2.3. Статистическая обработка результатов 51
Глава 3. Полиморфизм генов системы HLA при язвенном колите и 55
болезни Крона у взрослого населения Московского региона
(Результаты и обсуждение)
3.1. Распределение групп аллелей HLA I и II классов в 55
контрольных группах
3.2. Особенности полиморфизма генов системы HLA при язвенном 58
колите
3.3. Особенности полиморфизма генов системы HLA при болезни 72
Крона
3.4. Особенности полиморфизма генов системы HLA при 82
воспалительных заболеваниях кишечника
Заключение 101
Список сокращений 104
Список литературы 105

2
 ВВЕДЕНИЕ
Актуальность проблемы
Язвенный колит (ЯК) и болезнь Крона (БК) относятся к
воспалительным заболеваниям кишечника (ВЗК), при которых
наблюдаются комплексные расстройства организма.
Распространенность язвенного колита в мире составляет от 5 до
500, болезни Крона – от 2 до 300 случаев на 100 тыс. населения [85, 102,
103, 136, 143, 154, 183], причем наиболее высокая встречаемость ЯК и БК
отмечается в экономически развитых странах, низкая – в странах Азии и
Южной Америки [102, 103, 136, 143, 154, 183].
В России, согласно немногочисленным исследованиям, данный
показатель колеблется в диапазоне 3 – 20 случаев на 100 тыс. населения
[11, 46, 47, 67, 85].
Как известно, важная роль в иммунном ответе в целом, и в
возникновении ЯК и БК в частности, принадлежит главному комплексу
гистосовместимости (MHC), причем развитие обоих заболеваний носит
мультифакториальный характер. К настоящему времени проведено
значительное количество исследований, связывающих указанные
заболевания с определенными генами HLA-системы. Так,
исследователями разных стран, в числе которых США [185], Канада
[175], Испания [106], Финляндия [129], была подтверждена связь аллеля
HLA- DRB1*0103 как с развитием БК и ЯК в целом, так и с характером
течения заболеваний и их осложнений. Во многих работах показано
существование ассоциации HLA-DRB1*1502 с развитием ЯК [109, 182].
В Израиле установлена взаимосвязь развития БК с DR15 [114], в
Германии – с HLA-DRB1*0701 [1], в Китае – с HLA-Cw*12 [148], в
Японии – с HLA-DRB1*0405 и 0410 [124]. В Великобритании ЯК
ассоциирован с HLA-DRB1*103, HLA-DRB1*12 [166], в Голландии – с
HLA-DRB1*15 [88], в Китае – с HLA-DRB1*07 и HLA-Cw*07 [123, 193],

3
в Корее – с HLA-DR2 и DRB1*1502 [182]. В ряде исследований
оценивалась не только предрасположенность к заболеванию, но и к
определенным его формам. Так, в Италии установлена ассоциация
DRB1*0304, DRB1*0305, DRB1*0307, DRB1*0309 с тотальным
поражением толстой кишки [83], в Испании HLA-DRB1*07 – с
терминальным илеитом при БК и HLA-DRB1*0103 – с колитом [106]и т.д.
В России подобного рода исследований крайне мало, и они, в
основном, проводились с использованием серологических методов
типирования. Согласно полученным результатам, развитие ЯК
ассоциировано с Cw4, DR3, DR5 [44], B13 и Cw4 [7], DRB1*01 [39], A29,
B13, DR3 [48], БК – с B14 и A3 [44], В18 и DRB1*01 [39]. При
исследовании ЯК и БК были выявлены общие положительные
ассоциации с B14, DR3 и DR5 [7, 44].
Таким образом, несмотря на многочисленные исследования
иммуногенетической предрасположенности к возникновению ЯК и БК,
сведения о роли антигенов HLA в патогенезе данных заболеваний
противоречивы и требуют дальнейшего изучения, причем полученные
данные имеют выраженную этническую специфичность. В этой связи
следует отметить, что недостаточно полно охарактеризованы частота
среди больных ВЗК Московского региона различных аллельных групп
системы HLA, их связь с клиническими формами ЯК и БК, тяжестью
течения указанных заболеваний, с возрастом и полом пациентов и
ответом на проводимую терапию. Исследованию данных вопросов,
имеющих важное фундаментальное и прикладное значение, и посвящена
настоящая работа.
Цель исследования
Изучить иммуногенетические маркеры предрасположенности и
протекции к развитию язвенного колита и болезни Крона у взрослого
славянского населения Московского региона.

4
 Задачи исследования
1. Изучить встречаемость различных аллельных групп генов HLA среди
проживающих в Московском регионе славян, страдающих язвенным
колитом.
2. Выявить ассоциации между группами аллелей HLA и
предрасположенностью к развитию ЯК, клинической формой,
степенью тяжести заболевания и ответом на проводимую терапию,
полом и возрастом пациентов.
3. Изучить встречаемость различных аллельных групп генов HLA среди
славян с болезнью Крона, проживающих в Московском регионе.
4. Исследовать распределение групп аллелей HLA в зависимости от
клинической формы БК, степени тяжести заболевания и ответа на
проводимую терапию, пола и возраста пациентов.
5. Выявить HLA-маркеры предрасположенности и протекции к развитию
ВЗК у взрослого славянского населения Московского региона.

Научная новизна работы

Впервые с применением технологии генотипирования проведено
изучение полиморфизма генов HLA I и II классов у пациентов с ЯК, БК и
в общей группе больных ВЗК славян, проживающих в Московском
регионе.
Впервые исследовано распределение генов HLA I и II классов в
группах пациентов с ЯК, БК и ВЗК в зависимости от клинической формы,
тяжести течения заболевания, ответа на гормональную терапию, возраста
и пола больных.
Впервые установлено, что группы аллелей А*26, B*38 и С*12
являются общими маркерами предрасположенности к развитию ЯК и ВЗК
у женщин старше 35 лет. Впервые показана связь группы аллелей В*52 с

5
развитием ЯК и ВЗК в возрасте до 35 лет, В*56 отнесен к маркерам
развития ВЗК в возрасте после 35 лет. Показана ассоциация В*58 с ЯК.
Впервые выявлено, что с развитием БК у женщин ассоциирована
группа аллелей С*12. Впервые охарактеризованы маркеры различных
форм БК. Показано, что характерными маркерами стриктурирующего
типа БК являются В*38 и А*11. Маркерами нестриктурирующего,
непенетрирующего типа являются группы аллелей С*14 и В*56. С*14
ассоциирована также с развитием БК у мужчин.
Впервые установлено, что маркерами протекции к развитию ЯК
являются группы аллелей В*15, C*04 и DQB1*02, причем В*15
выступает маркером протекции к развитию ЯК у мужчин, DQB1*02 – у
лиц младше 35 лет. Установлено, что группа аллелей DRB1*07
отрицательно ассоциирована с развитием ВЗК у мужчин, DQB1*02 – с
развитием ВЗК у мужчин младше 35 лет. Впервые определены
характерные маркеры протекции, в частности, к развитию ВЗК им
является С*03, к тяжелому течению БК – DQB1*03.
Впервые показано, что при наличии в генотипе групп аллелей А*26,
В*38 возрастает вероятность развития рефрактерных к гормональной
терапии форм ВЗК и ЯК, также характерными маркерами рефрактерности
к гормональной терапии являются С*17 при ЯК и С*07 при ВЗК.
Впервые установлено, что DRB1*07 является маркером протекции к
развитию гормональной рефрактерности при ВЗК и ЯК, а С*06 –
характерным маркером протекции к гормональной рефрактерности при
ВЗК.
Впервые к маркерам восприимчивости к гормональной терапии
отнесены В*52, В*56 и С*12 при ВЗК, В*52 и В*58 при ЯК, С*12 при БК.
Впервые выявлен характерный маркер гормональной восприимчивости к
терапии при ВЗК - DQB1*04. Установлено, что DQB1*02 отрицательно

6
ассоциирована с развитием восприимчивых к гормональной терапии
форм ЯК и ВЗК.
Впервые установлено, что развитие хронического непрерывного
течения ВЗК и ЯК ассоциировано с А*26 и B*38, DRB1*14 является
характерным маркером хронического непрерывного течения ЯК.
Показано, что маркерами протекции к хроническому рецидивирующему
течению ВЗК являются С*04 и DQB1*02, к данной форме БК - DQB1*02.
Маркером тотального колита при ЯК можно считать А*26 и B*38,
характерным маркером левостороннего колита при ЯК – В*56.

Теоретическая и практическая значимость

На основании полученных в рамках представленного исследования
данных установлены HLA-маркеры протекции и предрасположенности к
возникновению как ЯК и БК, так и ВЗК в целом, которые будут
способствовать более точному формированию групп риска, а также
установлению диагноза на начальных стадиях соответствующего
заболевания.
Иммуногенетические особенности, выявленные при разных
клинических формах ВЗК, ЯК и БК позволят прогнозировать течение,
степень тяжести заболевания, развитие рефрактерности к гормональной
терапии с коррекцией тактики лечения пациентов.
При сравнении частоты групп аллелей HLA I и II класса в группах
взрослых здоровых доноров и новорожденных Московского региона
достоверных различий выявлено не было, что позволяет использовать
образцы пуповинной крови в качестве контрольной группы при
проведении генетических исследований HLA-системы взрослых
пациентов.

7
 Методология и методы диссертационного исследования
Для выявления иммуногенетических маркеров при язвенном колите
и болезни Крона проводилось HLA-генотипирование методом SSO
(Sequence Specific Oligonucleotides) c применением технологии
LIFECODES и мультиплексного проточного анализатора Luminex.
Образцы, при исследовании которых были получены двойные
интерпретации при использовании метода SSO, были типированы
методом ПЦР-SSP (Sequence Specific Primer). Статистическая обработка
результатов проводилась с помощью программного обеспечения
Microsoft Excel, Open Source Epidemiologic Statistics for Public Health
(«Open Epi»), версия 3.01 от 2013/04/06.

Положения, выносимые на защиту

1. Распределение аллельных групп генов HLA среди пациентов с ЯК, БК
и ВЗК Московского региона отличается от их распределения среди
здорового населения того же региона.
2. Изучение особенностей генетического полиморфизма HLA-системы у
пациентов с ЯК, БК и ВЗК позволяет выявить генетические маркеры
предрасположенности к указанным заболеваниям у славянского
населения Московского региона.
3. Существует ряд иммуногенетических маркеров предрасположенности
и протекции к развитию ЯК, БК и ВЗК у славянского населения
Московского региона, зависящих от пола и возраста и ассоциированных с
определенной клинической формой, течением, степенью тяжести
заболевания, а также ответом на гормональную терапию.
4. При ВЗК имеются как общие для ЯК и БК иммуногенетические
маркеры, так и специфичные для каждого заболевания.

8
 Степень достоверности
Достоверность результатов исследования подтверждается объемом
фактического материала (9685 исследований, 1937 образцов),
применением современных технологий генотипирования и
использованием методов статистической обработки данных, полностью
соответствующих поставленным задачам.

Апробация результатов диссертации

Материалы диссертации доложены на VI научно-практической
конференции «Современные технологии и методы диагностики
различных групп заболеваний, лабораторный анализ» (Москва, 23 – 24
мая, 2013 г.), 27-ой Европейской конференции по иммуногенетике и
гистосовместимости (The 27th European Immunogenetics and
Histocompatibility Conference, Poster Presentations, Маастрихт,
Нидерланды, 11 – 14 мая, 2013 г.), заседании кафедры биологии и общей
генетики медицинского института РУДН (2015 г.).

Внедрение результатов в практику

Результаты исследования внедрены в работу Государственного
Бюджетного Учреждения Здравоохранения «Банк стволовых клеток
Департамента здравоохранения г. Москвы», реорганизованного
23.10.2013г. согласно приказу ДЗМ №327 от 27.03.2013г. в
Государственное Бюджетное Учреждение Здравоохранения «Станция
переливания крови Департамента здравоохранения г. Москвы», и
Центрального Научно-исследовательского института гастроэнтерологии
г. Москвы (в настоящее время ГБУЗ Московский Клинический Научно-
практический Центр).

9
 ГЛАВА 1
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Главный комплекс гистосовместимости (MHC), расположенный на

коротком плече 6-ой хромосомы, является одной из наиболее изученных
областей в геноме человека. Около 60 лет назад был идентифицирован
мышиный MHC и определена его роль в гистосовместимости. Вскоре
был обнаружен и МНС человека, или так называемые человеческие
лейкоцитарные антигены (HLA), названные так потому, что впервые
были выявлены на поверхности белых кровяных клеток [19, 56, 70].
Гены HLA-системы являются генами иммунного ответа, т.к. они
кодируют молекулы, презентирующие антигены Т-лимфоцитам [69].
В главном комплексе гистосовместимости различают 3 класса
молекул. К I и II классам относятся «классические» антиген-
представляющие молекулы, к III классу – молекулы, как участвующие в
иммунном ответе, так и не вовлеченные в данный процесс [58].
Молекулы HLA I класса (А, В, С) присутствуют на всех ядерных клетках
организма, в отличие от молекул HLA II класса (DR, DQ, DP),
экспрессирующихся только на иммунокомпетентных клетках, в числе
которых дендритные клетки, В-лимфоциты, макрофаги. В составе
молекулы HLA I класса презентируются эндогенные пептиды,
образующиеся внутри клетки и распознающиеся CD 8+ Т-лимфоцитами.
Молекулы HLA II класса участвуют в презентации как экзогенных
пептидов, «обработанных» (подвергшихся процессингу) в антиген-
представляющих клетках, так и эндогенных. В дальнейшем антиген в
составе молекул HLA II класса распознается в основном CD 4+ Т-
лимфоцитами [118, 186].
Гены HLA являются самой полиморфной системой человека. На
сегодняшний день насчитывается более 10000 вариантов аллелей, и их

10
число продолжает увеличиваться с развитием технологий типирования.
Известно, что структура молекулы HLA позволяет связать ограниченное
количество антигенов. Наблюдающееся большое разнообразие аллельных
вариантов объясняется выработанным в процессе эволюции
«стремлением» иммунной системы вида распознать как можно больше
различных антигенов [12, 79, 188].
Гены HLА-системы участвуют в генетическом контроле уровня
иммунного ответа посредством более или менее эффективного
связывания антигена молекулами HLA и, соответственно, более или
менее эффективной презентации антигена Т-лимфоцитам. Таким образом,
сила иммунного ответа на конкретный антиген зависит от строения
антиген-связывающего участка молекулы HLA. Повышенное сродство
молекул HLA к некоторым антигенам объясняет также и связь
аутоиммунных заболеваний с HLA-системой [156].
Для генов HLA-системы характерна кодоминантность –
одновременная экспрессия материнских и отцовских генов, в связи с чем,
гетерозиготные особи должны иметь преимущество перед
гомозиготными в борьбе с инфекцией [12, 79, 188].

1.1. Значение иммуногенетических факторов в развитии болезни

Крона
Согласно современным представлениям, болезнь Крона (БК) – это
хроническое рецидивирующее заболевание желудочно-кишечного тракта
неясной этиологии, характеризующееся трансмуральным сегментарным
гранулематозным воспалением с развитием местных и системных
осложнений [52, 55].
Показатели заболеваемости и распространенности БК в разных
регионах различны, что связано, прежде всего, со сложностью оценки
эпидемиологических показателей, обусловленной как трудностью

11
диагностики самого заболевания, так и низким уровнем медицинской
помощи, обращаемости и диагностики в слабо развитых странах мира [8,
11, 85]. Распространенность БК колеблется от 2 до 300 и даже более
случаев на 100 тыс. населения, причем она наиболее высока в
экономически развитых странах, особенно в Северной Америке,
Скандинавских странах, Израиле [102, 103, 136, 174]. Также следует
отметить, что данный показатель выше у городского населения [18, 77,
98].
Согласно результатам различных исследований, отмечаются два
возрастных пика начала заболевания БК: 20 – 30 лет и 50 – 60 лет.
Причем среди мужчин и женщин нет значительной разницы в
распространенности и заболеваемости БК. Однако в последнее время
наблюдается тенденция к увеличению заболеваемости БК в целом [18, 74,
143, 154, 183].
Данных, касающихся распространенности БК в России, крайне мало.
Согласно проведенным исследованиям, данный показатель ниже
среднеевропейского уровня и составляет от 1 до 4 случаев на 100 тыс.
населения, что, вероятно, связано не с меньшим уровнем
распространенности и заболеваемости, а с недостаточным учетом
пациентов и малой выявляемостью [11, 46, 47, 67, 85].
Отсутствие патогномоничных симптомов, конкретных
инструментально выявляемых и лабораторных признаков данного
заболевания, низкая встречаемость БК, а также недостаточная
осведомленность о нем пациентов и врачей приводят к длительной
диагностике [99]. На постановку диагноза от момента появления первых
симптомов может уходить до 3-6 лет и более [18, 47, 66, 74]. Для этого
необходимо комплексное клиническое, инструментальное и лабораторное
обследование [18, 26]. Диагноз БК, согласно рекомендациям 2013г. [52,
55], должен быть подтвержден эндоскопическим и морфологическим

12
методами и/или эндоскопическим и рентгенологическим методами. Для
каждого метода исследования имеются четкие критерии [172]. При
необходимости, а также для дифференциальной диагностики БК и
диагностики осложнений выполняются: ультразвуковое исследование,
рентгенологическое исследование пассажа бариевой взвеси, анализ кала,
магнитно-резонансная томография, компьютерная томография,
фистулография (при наличии наружных свищей), капсульная эндоскопия,
баллонная энтероскопия [117]. Общепринятыми являются критерии
достоверного диагноза БК по Lennard-Jones, включающие определение
шести ключевых признаков заболевания: 1) Поражение от полости рта до
анального канала (хроническое гранулематозное поражение слизистой
оболочки); 2) Прерывистый характер поражения; 3) Трансмуральный
характер поражения: язвы-трещины, абсцессы, свищи; 4) Фиброз:
стриктуры; 5) Лимфоидная ткань (гистология) - афтоидные язвы или
трансмуральные лимфоидные скопления; 6) Муцин (гистология) -
нормальное содержание муцина в зоне активного воспаления слизистой
оболочки толстой кишки [10, 52, 55].

1.1.1. Клинические проявления БК

К клиническим проявлениям болезни Крона относятся: диарея,
нередко с примесью крови, частота которой зависти от тяжести атаки и
составляет в среднем от 3 до 7 раз в сутки; боль в животе различной
интенсивности; лихорадка; снижение массы тела, анемия [18, 26, 77].
Проявлениями воспалительной реакции являются: лейкоцитоз,
гипопротеинемия, повышение уровня С-реактивного белка, увеличение
СОЭ (скорости оседания эритроцитов). Течение болезни может
осложняться возникновением инфильтратов, абсцессов брюшной
полости, формированием наружных и внутренних кишечных свищей,
стриктурами и кишечной непроходимостью, аноректальными

13
поражениями, кровотечением. Также характерны внекишечные
поражения, к которым относятся артропатии, поражения глаз, кожи и
слизистых. При БК могут наблюдаться ревматоидный артрит,
анкилозирующий спондилоартрит, сакроилеит, первичный
склерозирующий холангит, остеопороз, остеомаляция, псориаз. В
результате длительного течения воспалительного процесса и
метаболических нарушений при болезни Крона могут развиваться стеатоз
печени и стеатогепатит, холелитиаз, венозные тромбозы и эмболии,
амилоидоз [52, 55].
По локализации поражений при болезни Крона в настоящее время
выделяют терминальный илеит, колит, илеоколит и поражение верхних
отделов ЖКТ, либо сочетание поражения верхних отделов ЖКТ с
поражением другой локализации (согласно Монреальской классификации
2005г.) [168, 176]. Также выделяют распространенную и локализованную
формы. По течению заболевания различают три варианта: с острым,
хроническим непрерывным и хроническим рецидивирующим течением.
Тяжесть течения или тяжесть текущей атаки определяют по индексу
активности болезни Крона (ИАБК, CDAI, Crohn s Disease Activity Index;
индекс Беста), либо по критериям Общества по изучению ВЗК при
Ассоциации колопроктологов России согласно рекомендациям 2013г.
Данные критерии учитывают как клинические проявления болезни, в том
числе и внекишечные, так и лабораторные показатели. Возможно
выделение следующих фенотипических вариантов, или типов БК:
нестриктурирующий, непенетрирующий тип; стриктурирующий тип;
пенетрирующий тип. По результатам ответа на лечение
глюкокортикостероидами может быть определена стероидозависимость
или стероидорезистентность, что необходимо учитывать при
формулировке диагноза [76, 105, 144, 158].

14
1.1.2. Этиология и патогенез БК
На сегодняшний день этиология и патогенез болезни Крона, как и
ВЗК в целом, остаются недостаточно изученными. Согласно
многочисленным литературным данным, имеется наследственная
предрасположенность к данному заболеванию [60]. Семейные случаи
заболевания БК отмечаются у 10 – 20% пациентов [1, 18, 72, 167].
Существуют теории, связывающие БК с характером питания, в
частности, с присутствием в пище некоторых жиров, употреблением
газированных напитков, фастфуда, избыточным потреблением сахара, а
также курением [1, 29, 72, 135, 183].
Инфекционная теория возникновения воспаления в стенке
кишечника при БК, отводящая этиологическую роль «классическим»
инфекционным агентам, таким как Escherichia coli [94,], Clostridium
difficile [43,], роду Pseudomonas и менее изученным Mycobacterium
paratuberculosis, Mycobacterium avium, Listeria monocytogenes, а также
вирусам кори, герпес-вирусам, цитомегаловирусам, аденовирусам,
ротавирусам, энтеровирусам [189] в настоящее время не доказана [2, 17,
18, 71], хотя возможно, триггерный микроорганизм существует, но еще не
идентифицирован [16]. Тем не менее, многие исследователи связывают
начало заболевания именно с нарушением взаимодействия микрофлоры
кишечника и макроорганизма и отмечают значительные изменения в
видовом и количественном составе микроорганизмов [113]. У разных
групп пациентов наблюдалось как повышение, так и снижение
численности бифидо- и лактобактерий, Bacteroides fragilis, Clostridium
leptum, Clostridium coccoides, Clostridium difficile, Atopobium,
энтеробактерий, грибов рода Candida [60]. В целом, отмечалась
значительная нестабильность микробиоценоза у данной группы
пациентов [15, 18]. И, хотя многие микроорганизмы являются условно-
патогенными, на фоне уже имеющихся воспалительных и деструктивных

15
процессов в слизистой, они оказывали повреждающее действие,
усугубляли течение заболевания и способствовали его хроническому
течению [66, 78, 163, 164].
Об участии микроорганизмов в запуске иммунного или
аутоиммунного ответа свидетельствует обнаружение в крови больных
антител к некоторым микроорганизмам (Chlamydia trachomatis, Candida
albicans) и компонентам бактериальных клеток (порину внешней
мембраны Escherichia coli – Omp С (outer membrane porin С) и I2 –
антигену Pseudomona fluorescens, гликанам бактериальной стенки АККА
(АССА – anti - chitobisoside carbohydrate antibodies), АЛКА (ALCA – anti -
laminaribioside carbohydrate antibodies) и АМКА (АМСА – anti -
mannobioside carbohydrate antibodies) [18, 66, 81, 140]. Другим
доказательством определенного вклада микроорганизмов в развитие
воспаления в кишечнике являлись эксперименты на трансгенных
животных, у которых в обычных условиях было смоделировано развитие
колита или энтероколита [162, 171, 173]. При содержании животных в
стерильных условиях, препятствующих заселению кишечника
микроорганизмами, либо стерилизации кишечника антибактериальными
препаратами воспаление не развивалось или было выражено в меньшей
степени [1, 18, 120, 163].
При БК обнаруживаются отклонения во многих звеньях иммунной
системы [77, 90]. Так, у больных снижен метаболический потенциал
фагоцитов. В связи с этим рецидив заболевания и распространение
патологического процесса связывают со снижением активности и
интенсивности фагоцитоза [18, 28]. Отмечено изменение активности
митохондриальных ферментов лимфоцитов при БК и корреляция
ферментного статуса лимфоцитов с активностью заболевания [30]. В
исследованиях системы комплемента отмечено повышение уровня

16
некоторых ее компонентов в крови, а также отложение компонентов
системы комплемента и иммунных комплексов в стенке кишечника [18].
В клеточном звене иммунитета наблюдаются колебания численности
субпопуляций лимфоцитов: возрастает количество активированных Т-
лимфоцитов, нарушается соотношение CD4+ (хелперов) и CD8+
(цитотоксических клеток, супрессоров) лимфоцитов [60]. В стенке
кишечника увеличивается число антигенпредставляющих клеток –
макрофагов и дендритных клеток [18, 29, 66, 72].
Изменения клеточного состава закономерно отражаются на
содержании цитокинов, что в свою очередь, обусловливает изменение
дифференцировки различных иммунокомпетентных клеток,
наблюдающееся при воспалительных заболеваниях кишечника [1, 60, 72].
При БК дисбаланс в системе цитокинов проявляется изменением
уровня интерлейкинов (ИЛ): повышением ИЛ –1 альфа, ИЛ-6, ИЛ–8,
ФНО (фактор некроза опухоли) – альфа, ИЛ-10 и снижением содержания
ИЛ-4 и ИЛ-2 [9, 137, 153].
Во многих исследованиях у больных БК отмечается нарушение
продукции различных классов иммуноглобулинов: снижение
секреторного иммуноглобулина (Ig) А, являющегося основным
иммуноглобулином слизистой желудочно-кишечного тракта, и
увеличение IgG и IgM. В основе этих явлений лежит изменение
количества клеток, продуцирующих соответствующие иммуноглобулины,
в слизистой оболочке кишечника. Снижение уровня IgA свидетельствует
о недостаточности местного иммунитета в стенке кишечника, а
повышение IgG – о повышенной проницаемости ее для чужеродных
агентов. Указанные изменения являются звеном воспалительного
процесса и, вероятнее всего, они вторичны [18, 22, 60, 66].
Достаточно интересны и другие иммунологические феномены, к
которым относятся появление некоторых антител и экспрессия

17
аутоантигенов в стенке кишечника [60]. У больных БК часто (до 60%
случаев) обнаруживаются антитела к Saccharomyces cerevisiae (пекарским
и пивным дрожжам) – ASCA (anti-Saccharomyces cerevisiae antibodies), и
более редко (до 20-40% случаев) – антитела к перинуклеарным
нейтрофильным антигенам – pANCA (perinuclear anti - neutrophil
cytoplasmic antibody). Уровень антител коррелирует как с локализацией и
протяженностью поражения, так и с активностью заболевания [18, 37].
Установлена достаточно высокая чувствительность и специфичность
совместного определения данных групп антител, что может
использоваться в дифференциальной диагностике БК и язвенного колита
как между собой, так и с другими заболеваниями, однако в настоящее
время данные тесты не являются критериями диагностики [32, 52, 68,
169].
Большое внимание отводится поискам генетических факторов,
вовлеченных в развитие БК [14, 97, 133167].
Во многих исследованиях определены локусы IBD (Inflammatory
bowel disease) 1 на 16-й, IBD 2 на 12-й, IBD 3 на 6-й, IBD 5 на 5-й
хромосомах, где обнаружены гены, которые могут определять
предрасположенность к ВЗК. Гены предрасположенности обнаружены и
на других хромосомах [87, 101, 121, 167].
Как в зарубежной, так и в отечественной литературе наибольшая
ассоциация с заболеванием показана для гена CARD15/NOD2 (Caspase
recruitment domain-containing protein 15/Nucleotide-binding oligomerization
domain containing 2), расположенного на 16-й хромосоме в пределах
локуса IBD 1 [18, 145]. Данный ген кодирует белок, участвующий в
распознавании компонентов бактериальной клетки, запуске и регуляции
иммунных и воспалительных реакций на внедрение чужеродных
микроорганизмов. Как считается, мутации в гене CARD15/NOD2
приводят к недостаточной бактерицидной активности слизистой

18
кишечника, что, в свою очередь, способствует проникновению патогенов
в слизистую, а также неадекватной стимуляции иммунокомпетентных
клеток [18, 90, 145]. Во многих исследованиях показана связь БК, его
различных форм течения и осложнений с наличием определенных
аллелей указанного гена [60]. Данные полиморфные варианты гена
CARD15/NOD2 встречаются у 30-70% пациентов с БК [145].
Большинство исследований, подтверждающих роль мутаций в
данном гене в возникновении и прогрессировании БК, проведено в
Северной Америке и Европе [82, 89, 169, 190]. Результаты, полученные в
России, показывают, что риск заболевания возрастает от 2-4 до 20-40 раз
в зависимости от вида и количества обнаруживаемых полиморфных
вариантов [38, 42, 45, 78]. Однако оказалось, что полиморфизм гена
CARD15/NOD2 не связан с БК в азиатских и африканских популяциях
[123, 145].

1.1.3. Взаимосвязь антигенов HLA-системы с развитием БК

Как упоминалось выше, важная роль в иммунном ответе и
возникновении аутоиммунных, инфекционных и воспалительных
заболеваний, в том числе и воспалительных заболеваний кишечника,
принадлежит главному комплексу гистосовместимости (MHC), или HLA-
системе человека [56, 58, 69, 79].
Механизмы, лежащие в основе ассоциации МНС с БК, не совсем
ясны [60]. Давно существует точка зрения о нарушении
иммунологической толерантности к собственным антигенам через
аберрантную презентацию Т-лимфоцитам в составе молекул HLA II
класса собственных пептидов или чужеродных пептидов, на которые не
должен развиваться иммунный ответ [19, 58, 95, 112]. В основе данных
явлений может лежать существование общего иммуногенного эпитопа у
микроорганизмов и человека, хроническая внутриклеточная инфекция,

19
особенно вирусная [112, 116, 162, 165]. Все это приводит к презентации
антигена, схожего с собственным или измененным аутоантигеном, в
составе молекул HLA Т-лимфоцитам и началу аутоиммунного ответа [79,
130, 188]. От набора HLA-антигенов может зависеть характер иммунного
ответа – при сильном иммунном ответе организм удачно справляется с
инфекцией, но и легко может начинаться аутоиммунная агрессия [12, 110,
122, 156]
Во многих исследованиях показана связь генов HLA-системы с
различными инфекционными, воспалительными, аллергическими,
онкологическими и аутоиммунными заболеваниями, причем отмечается
как их защитная, так и предрасполагающая роль [3, 57, 151, 127].
Среди инфекционных заболеваний ассоциация с генами HLA
выявлена для вирусных гепатитов, туберкулеза, ВИЧ (Вирус
иммунодефицита человека) и некоторых других [60]. Также обнаружена
связь с генами HLA системы для ревматоидного артрита, сахарного
диабета 1 типа, системной красной волчанки, рассеянного склероза,
миастении гравис, аутоиммунного тиреоидита, анкилозирующего
спондилоартрита, болезни Грейвса, первичной надпочечниковой
недостаточности (болезни Аддисона), аутоиммунного гепатита,
первичного билиарного цирроза, целиакии, атопического дерматита,
бронхиальной астмы [70, 107, 155, 192].
К настоящему времени проведено значительное количество
исследований, связывающих хронические воспалительные заболевания
кишечника, в частности болезнь Крона, с определенными генами HLA-
системы [60, 119, 191].
Развитие БК положительно ассоциировано с наличием DR15, и
отрицательно - с DR3 , DR7, DQ2 у евреев ашкенази [114].
В исследовании, проведенном среди еврейского и не еврейского
населения США, отмечены положительные ассоциации с

20
воспалительными заболеваниями кишечника гаплотипов DRB1*0103 -
DQA1*0501 - DQB1*0301 и DRB1*0103 - DQA1*0101- DQB1*0501, а
также аллеля DPB1*0401 [185].
Канадские исследователи связывают развитие БК с аллелем HLA
DRB1*0103 у пациентов, не имеющих еврейского происхождения. В этом
же исследовании отмечается увеличение встречаемости HLA-DQB1*0501
аллеля и гаплотипа HLA-DRB1*0103/HLA-DQB1*0501 при
воспалительных заболеваниях кишечника в общем [175].
Согласно другим данным, HLA-DRB1*0103 ассоциирован с
изолированным поражением толстой кишки при БК и необходимостью
хирургического лечения [115]. В Германии была выявлена ассоциация БК
с HLA-DRB1*0701 [1]. В Великобритании группа аллелей HLA-DRB1*03
связывается с устойчивостью к БК [187]. В исследовании итальянских
пациентов не отмечено связи каких-либо генов HLA с наличием БК,
однако аллели DRB1*0304, DRB1*0305, DRB1*0307, DRB1*0309
достоверно чаще обнаруживались у пациентов с тотальным поражением
толстой кишки при БК и у пациентов с внекишечными проявлениями
[83]. При изучении больных БК в Испании было выявлено, что наличие
HLA-DRB1*07 связано с терминальным илеитом, а HLA-DRB1*0103 – с
колитом [106].
Несколько иные закономерности наблюдаются среди пациентов
азиатского происхождения. Так, у китайских пациентов отмечена связь
БК с геном HLA-Cw*12 [193]. В Японии наличие гаплотипа Cw*1202-
B*5201-DRB1*1502 снижает риск возникновения данного заболевания
[148], в то время, как положительная ассоциация наблюдается с HLA-
DRB1*0405 и DRB1*0410 [124].
В исследовании, анализирующем данные по всему миру,
подтверждена связь возникновения БК, характера течения и осложнений
заболевания с HLA-DRB1*0103, HLA-DRB1*04, HLA-DR7 и HLA-

21
DRB3*0301, HLA-B*18, HLA-B*21, HLA-DR6 (включая HLA-
DRB1*1401), HLA-DR8 (в том числе HLA-DRB1*0802 и *0803) и HLA-
DR10 [107]. В другом исследовании, проведенном в значительной
выборке пациентов из Европы, также отмечена связь БК с HLA-
DRB1*0103, HLA-DRB1*04, HLA-DRB1*07, HLA-DRB3*0301, HLA-
DRB1*1101 [155]. Достаточно часто при изучении различных этнических
групп обнаруживается связь HLA-B*27 с поражением позвоночника при
воспалительных заболеваниях кишечника [91, 152].
В отечественной литературе значительно меньше информации,
касающейся данной темы [60]. В Московском регионе с использованием
серологических методов были получены следующие данные: при
исследовании 44 человек с БК отмечены положительные ассоциации с
B14, A3 и отрицательная ассоциация с А19. При исследовании больных с
воспалительными заболеваниями кишечника положительные ассоциации
язвенного колита и БК наблюдались с B14, DR3 и DR5 и отрицательные –
с A19. Для БК получены положительные ассоциации с A3, отрицательные
– с DR1. В этом же исследовании показано, что резистентные к лечению
формы воспалительных заболеваний кишечника положительно
ассоциированы с Cw4 и DR3, и отрицательно – с DR2 [7, 44]. В другом
исследовании, проведенном с применением как серологических методов,
так и методов генотипирования, была выявлена ассоциация БК с В18 и
DRB1*01 [39].
Однако следует отметить, что литературные данные не столь
однозначны. Существуют публикации, показывающие отсутствие связи
БК с HLA – системой [88, 129, 131, 166].

22
1.2. Значение иммуногенетических факторов в развитии язвенного
колита
Язвенный колит (ЯК) – это хроническое заболевание слизистой
оболочки толстой кишки, характеризующееся иммунным воспалением и
относящееся к группе хронических воспалительных заболеваний
кишечника [53].
Распространенность ЯК в разных регионах отличается и колеблется
в диапазоне от 5 до 500 случаев на 100 тыс. населения [1, 22, 98, 143,
183]. Аналогично данным, полученным для БК, показатели
заболеваемости и распространенности ЯК в экономически развитых
странах, особенно в Северной Европе, Северной Америке, Израиле выше,
чем в Африке, Азии и Латинской Америке [37, 91, 103, 123, 136].
Возникновение ЯК также отмечается чаще среди городского населения,
причем достоверных отличий среди мужчин и женщин не выявляется
[102, 154, 174]. В последнее время во многих странах так же, как и для
болезни Крона, отмечается тенденция к росту заболеваемости ЯК [8, 18,
68, 74].
В России данные малочисленны, и, согласно проведенным
исследованиям, распространенность ЯК составляет от 5 до 20 на 100 тыс.
населения, причем пик заболеваемости приходится на возраст от 20 до 40
лет [11, 46, 47, 67, 85].
На сегодняшний день четких и достоверных клинических, лучевых,
эндоскопических и морфологических критериев диагностики язвенного
колита не существует. Диагноз может быть выставлен на основании
сочетания полученных данных, а также проведения дифференциального
диагноза с другими заболеваниями [53]. Все эти факторы приводят к
длительной, от 6 месяцев до 3-5 и более лет, диагностике язвенного
колита, следствием чего становятся преобладание тяжелых и

23
среднетяжелых форм, часто рецидивирующее течение ЯК, большое число
осложнений и высокий уровень летальности [11, 47, 66, 74].

1.2.1. Клинические проявления ЯК

В клинической картине язвенного колита наблюдаются: диарея,
тенезмы, ложные позывы к дефекации, ночная дефекация, кровь в стуле,
лихорадка, снижение массы тела, слабость, анемия. Могут наблюдаться
боли в животе, запоры. К проявлениям воспалительной реакции
относятся: лейкоцитоз, увеличение СОЭ, гипопротеинемия, повышение
уровня острофазных белков, электролитные расстройства. Типичными
осложнениями ЯК являются кишечное кровотечение, токсическая
дилатация и перфорация толстой кишки [53]. При длительном течении
заболевания может развиваться колоректальный рак [53, 134]. К
внекишечным проявлениям относятся артропатии, поражения глаз, кожи
и слизистых оболочек. Возможно сочетание ЯК с анкилозирующим
спондилоартритом, сакроилеитом, первичным склерозирующим
холангитом, перихолангитом, псориазом, серонегативным ревматоидным
артритом. В результате длительного течения воспалительного процесса и
метаболических нарушений при ЯК могут наблюдаться стеатоз печени и
стеатогепатит, холелитиаз, венозные тромбозы и эмболии, амилоидоз [5,
18, 26, 53].
При ЯК, за исключением фульминантного колита, поражается только
толстая кишка, где обнаруживается воспаление только слизистой
оболочки [18,53].
По протяженности поражения выделяют проктит, левосторонний
колит, тотальный колит. Различают острое, хроническое непрерывное и
хроническое рецидивирующее варианты течения ЯК [168, 176]. Для
определения тактики лечения учитывают тяжесть текущей атаки, которая
определяется по критериям Truelove – Witts, индексу активности

24
язвенного колита (индекс Мейо, DAI, Disease Activity Index), в которые
включены клинические, лабораторные и эндоскопические показатели.
Существует классификация эндоскопической активности ЯК по Schroeder
[53]. При постановке диагноза и определении тяжести течения ЯК
учитывают ответ на стероидную терапию, отмечают стероидозависимость
и стероидорезистентность [53, 76, 105, 125].

1.2.2. Этиология и патогенез ЯК

Этиология и факторы, предрасполагающие к ЯК, являются объектом
многих исследований и обсуждений [59]. Известны следующие факторы,
способствующие развитию ЯК: психологический стресс, прием
нестероидных противовоспалительных препаратов и контрацептивов,
избыточное потребление легкоусвояемых углеводов, кока-колы,
фастфуда, недостаток пищевых волокон и полиненасыщенных жирных
кислот. [104, 123, 135, 164] Достаточно интересны наблюдения,
выделяющие курение и аппендэктомию в анамнезе как защитные
факторы к возникновению ЯК [1, 26, 126].
Была отмечена роль клеточной гипоксии и снижения
антиоксидантной защиты тканей в возникновении и прогрессировании
заболевания, на что указывает повышение концентрации малонового
диальдегида (МДА) и гидроперекисей липидов в биоптате слизистой
оболочки кишечника у данной группы пациентов [4].
Существует достаточно обширная информация о связи ЯК, наряду с
болезнью Крона, с микробными агентами [22, 26, 37, 66]. Высказывались
предположения о том, что Clostridium difficile, Escherichia coli,
сальмонеллы, иерсинии, шигеллы, кампилобактерии, микобактерии, а
также некоторые вирусы могут являться причиной возникновения как ЯК,
так и БК, но их роль, как возбудителей заболеваний не доказана [1, 16, 18,
104]. Однако схожие механизмы нарушения проницаемости слизистой

25
оболочки кишечника для микроорганизмов и изменения взаимодействия
микрофлоры и стенки кишечника могут реализовываться при ЯК и при
БК [15, 40, 78, 162].
На участие микроорганизмов в патогенезе ЯК указывают
эксперименты на трансгенных животных, у которых развитие и
прогрессирование колита происходит только при наличии микрофлоры в
кишечнике [33, 138, 163, 164, 171].
В исследованиях у больных ЯК отмечаются изменения в составе
микрофлоры (вид и количество), приводящие к дисбиозу II и III ст.
Многие авторы подчеркивают неустойчивость микробиоценоза при ЯК
[4, 18, 40, 164].
На роль нарушения взаимодействия микроорганизмов в просвете
кишечника указывают исследования, отмечающие ускорение наступления
ремиссии заболевания при включении в схему лечения пробиотиков [4,
26, 170].
Выявляемые изменения в составе кишечной микрофлоры у больных
ЯК приводят к нарушению функций слизистой оболочки кишечника, в
частности, могут индуцировать выработку провоспалительных цитокинов
[59]. Указанные механизмы могут приводить к повреждению слизистой
оболочки, запуску и поддержанию воспалительных реакций в кишечнике
[40, 41, 163].
Как и при БК, в крови больных ЯК обнаруживаются антитела к
Chlamydia trachomatis, Candida albicans, порину внешней мембраны
Escherichia coli - Omp С (outer membrane porin С) и I2 - антигену
Pseudomonas fluorescenc, антитела к гликанам бактериальной стенки
(АККА (АССА – anti - chitobisoside carbohydrat eantibodies), АЛКА (ALCA
- anti-laminaribioside carbohydrate antibodies) и АМКА (АМСА – anti -
manno bioside carbohydrate antibodies)) [1, 18, 81, 140].

26
 При изучении иммунной системы отмечаются нарушения в разных
ее звеньях, сходные с таковыми при БК [90]. Отмечено ослабление
фагоцитарного звена иммунитета [18, 28, 30], изменения в системе
комплемента [18]. У больных ЯК отмечается увеличение общего
количества Т-лимфоцитов (Т3+), активных Т-лимфоцитов, а также
субпопуляций Т4+ и, в меньшей степени, Т8+, изменение соотношения
Т4/Т8 в сторону его повышения, колебания других субпопуляций Т-
лимфоцитов, увеличение концентрации В-лимфоцитов в общем и
активных В - лимфоцитов в частности, на основании чего можно сделать
заключение о повышении активности адаптивного иммунитета.
Количество макрофагов и дендритных клеток в стенке кишечника
увеличивается [4, 18, 25].
Указанные изменения в клеточном звене иммунитета обусловливают
изменения соотношения про- и противовоспалительных цитокинов, в
результате чего, в свою очередь, изменяются активность и
пролиферативные свойства иммунокомпетентных клеток [4, 33, 48, 66].
В различных исследованиях обнаружены изменения содержания
цитокинов при ЯК: увеличение уровня интерлейкинов (ИЛ)-1, 1a [9], 1Ra,
ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-6, ИЛ-8 [9], ИЛ-10, ИЛ-13, ФНО (фактор некроза
опухоли) – альфа, снижение концентрации ИЛ-2 [41, 48, 153, 180].
Изменение соотношения классов иммуноглобулинов в слизистой
оболочке кишечника проявляется увеличением продукции IgG и IgM и
снижением продукции секреторного IgA. Указанные явления
наблюдаются и при БК и отражают нарушение местного иммунитета в
кишечнике при ВЗК [18, 22, 66, 78].
У 50-80% больных ЯК обнаруживаются перинуклеарные
антинейтрофильные цитоплазматические антитела (pANCA, perinuclear
antineutrophil cytoplasmic antibodies), которые вырабатываются, вероятно,
на компоненты бактериальной стенки, имеющие схожее строение с

27
компонентами цитоплазмы нейтрофилов [26, 37, 66]. Отмечена связь
pANCA с протяженностью поражения и активностью ЯК. Определяемые
примерно у 60% больных БК антитела к Saccharomyces cerevisiae
(пекарским и пивным дрожжам) - ASCA (anti-Saccharomyces cerevisiae
antibodies), выявляются у пациентов с ЯК гораздо реже (около 10 %) [4,
18, 32]. Определение pANCA и ASCA может быть использовано для
дифференциальной диагностики ЯК [4, 18, 68].
Определенное место в возникновении ЯК занимает генетическая
предрасположенность: 10-20% случаев носят семейный характер [8, 22,
78]. В некоторых этнических группах, в частности у евреев ашкенази,
наблюдается повышенная заболеваемость и распространенность по
сравнению с остальными популяциями [8, 18, 167]. Конкордантность у
монозиготных близнецов при ЯК составляет 14-19% [14, 104, 123].
Выделено несколько десятков генов и локусов, ответственных за
иммунные функции, полиморфизм в которых может быть связан с
развитием ЯК [87, 97, 101, 133]. К ним относятся: ген TNF-α (tumor
necrosis factor, ген фактора некроза опухоли – α), расположенный на 6
хромосоме [6, 41, 78, 123]; ген рецепторов моноцитов CD14,
расположенный на 5-ой хромосоме, продукт которого участвует в
связывании липополисахарида клеточной стенки бактерий [16, 66]; гены
ИЛ-23R (ген рецептора к интерлейкину-23) [131, 145, 177, 190], ген TLR4
(Toll-like receptor 4, толл – подобный рецептор 4), гены ИЛ-1RA, ИЛ-2,
ИЛ-10, ИЛ-12B, ИЛ-18RAP, ИЛ-26 [45, 109, 141] и другие [42, 123, 178,
184].

1.2.3. Взаимосвязь антигенов HLA-системы с развитием ЯК

Большое внимание в патогенезе ЯК уделяется HLA-генам [59]. Связь
с системой MHC показана для многих заболеваний, среди которых
аутоиммунные, аллергические, инфекционные, онкологические,

28
воспалительные, в том числе и хронические воспалительные заболевания
кишечника [8, 36, 104, 178].
Механизм участия HLA-системы в возникновении ЯК окончательно
не выяснен [80, 107, 155]. Считается, что в составе молекул MHC могут
презентироваться как аутоантигены, так и антигены нормальной
микрофлоры, к которой утрачивается толерантность иммунной системы
[70, 79, 155]. Указанные явления могут быть следствием наличия
перекрестно реагирующих микробных антигенов, либо появления
аутоантигенов под воздействием микробных агентов, в том числе
вирусных и внутриклеточных [107, 131, 182, 190]. Данный механизм
может лежать в основе запуска и поддержания аутоиммунного процесса
[59]. От уникальной аминокислотной последовательности молекул MHC
может зависть характер иммунного ответа, а так же возможность
развития аутоиммунных заболеваний [12, 119, 123, 192].
В эксперименте с трансгенными мышами показано, что выраженный
колит развивается только в случае экспрессии молекулы MHC II класса
на профессиональных антигенпредставляющих клетках (дендритных
клетках) в присутствии микроорганизмов и при провоцировании
воспаления с помощью Т-лимфоцитов. При экспрессии молекулы MHC II
класса на клетках эпителия кишечника в таких же условиях возникает
лишь легкое воспаление [138].
Во многих странах мира проведены исследования, целью которых
было выявление взаимосвязи различных аллельных вариантов HLA-генов
с ЯК [59]. Так, в Финляндии ЯК ассоциировался с HLA-DRB1*0103 [129].
При исследовании в Канаде у мигрантов из Европы ЯК также был
ассоциирован с HLA-DRB1*0103 [175]. В Великобритании было
показано, что HLA-DRB1*103 и HLA-DRB1*12 связаны с развитием ЯК,
и отмечены снижение встречаемости DRB1*0303/DQB*0201 (DR3/DQ2) у
женщин и сочетание гаплотипа DR3/DQ2 с тотальным колитом [166].

29
Голландские исследователи выявили увеличение встречаемости HLA-
DRB1*15 у пациентов с ЯК, особенно у женщин, а также у пациентов с
семейными случаями заболевания [88]. В результате крупномасштабного
исследования, проведенного в Европе, была подтверждена связь ЯК с
аллелями HLA-DRB1*1502 и HLA-DRB1*0103 [109]. В другом
исследовании в Европе на большом количестве образцов (свыше 10 тыс.)
была выявлена связь аллеля HLA-DRB1*1101 с предрасположенностью к
ЯК [155].
В Китае у пациентов с ЯК было отмечено увеличение встречаемости
групп аллелей HLA-DRB1*07 и генотипов DRB1*16/DRB1*09 и
DRB1*07/DRB1*12. Также отмечена ассоциация аллеля HLA-DQα1с с
наличием ANCA (antineutrophil cytoplasmic antibodies,
антинейтрофильные цитоплазматические антитела) при ЯК [123]. В
другом исследовании китайские ученые показали ассоциацию ЯК с HLA-
Cw*07 [193]. При исследовании корейской популяции было выявлено,
что HLA-DR2 и DRB1*1502 встречаются чаще у пациентов с ЯК, чем в
контрольной группе [182].
Объединенный анализ данных литературы подтверждает связь ЯК с
HLA-DRB1*0103, HLA-DRB1*1502, HLA-DR5 (и его
субспецифичностями HLA- DR11 и DR12), HLA-A19 и HLA-A24 [107].
Существуют исследования, указывающие на корреляцию HLA-B27 с
поражением опорно-двигательного аппарата у больных ЯК [139].
В ряде публикаций была отмечена ассоциация ЯК с геном BTNL2
(butyrophilin-like 2), расположенным в регионе MHC [131, 141, 177]. В
тоже время есть литературные данные, показывающие, что ассоциация
ЯК с геном BTNL2 обусловлена неравновесным сцеплением c
DRB1*1502, который и ассоциирован с этим заболеванием [109, 142].
В России также проводились исследования, направленные на
выявление связи ЯК с HLA системой [181]. В частности, в Московском

30
регионе с применением серологических методов типирования была
выявлена положительная ассоциация ЯК с группами аллелей Cw4, DR3
DR5 и отрицательная – с группами аллелей A19, DR4 [44]. Согласно
результатам другого исследования, также выполненного с применением
серологических методов, ЯК был положительно ассоциирован с наличием
B13 и Cw4, отрицательно – с A9, DR4 [7]. Еще одной исследовательской
группой обнаружено, что HLA-маркерами резистентности к ЯК среди
антигенов I класса являются антигены А19, В8, В51 и В62. При анализе
генов HLA II класса группа аллелей DRB1*01 была представлена, как
маркер предрасположенности к ЯК. С возникновением заболевания в 30 –
50-летнем возрасте ассоциированы DRB1*08 и гомозиготный вариант
DRB1*11, устойчивость к ЯК в этом возрасте была связана с DRB1*04.
Дебют ЯК в возрасте 51 – 70 лет был ассоциирован с гомозиготным
вариантом DRB1*15. При дистальном поражении чаще выявляли аллель
DRB1*08, при левостороннем поражении DRB1*04 встречался реже, чем
в контрольной группе. С хроническим непрерывным течением ЯК был
ассоциирован DRB1*01, маркером протекции являлся DRB1*11.
Устойчивость к хроническому рецидивирующему течению ЯК была
связана с DRB1*04 [39].
В исследовании, проведенном в Ростове-на-Дону, у пациентов с ЯК
были выявлены положительные ассоциации с серологическими
вариантами A29, B13, DR3, и отрицательные – с A2, B12, DR4. Также
было обнаружено, что при наличии серотипа A1, B8, DR3 отмечался
слабый ответ на терапию, а серотип A3, B7, DR2 коррелировал с
положительным ответом на проводимое лечение [48].
Как видно из представленных выше литературных данных,
результаты исследований в значительной мере зависят от этнической
принадлежности пациентов и региона проживания, что связано с
различной встречаемостью аллелей HLA в разных популяциях, наличием

31
неравновесного сцепления при наследовании HLA-генов. Поэтому не
исключено существование различных механизмов возникновения ЯК и
БК при сочетании различных факторов, в том числе генетических и
средовых [59].
Таким образом, целесообразно проводить исследования с целью
выявления дополнительных генетических маркеров
предрасположенности, прогноза течения и ответа на терапию при ЯК и
БК в конкретных популяциях и регионах проживания пациентов [59].

32
 ГЛАВА 2
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материал исследования

В рамках представленной работы исследование проводилось в
следующих группах пациентов:
1) группа больных ЯК - 65 пациентов в возрасте от 20 до 73 лет (31
женщина и 34 мужчины, средний возраст которых составил 43,75±12,6
лет) с установленным диагнозом ЯК. Диагноз ЯК был выставлен согласно
рекомендациям по диагностике и лечению взрослых больных язвенным
колитом, основанным на международных стандартах, разработанных
Европейским доказательным консенсусом по диагностике и лечению
язвенного колита [53] на основании:
 анамнестических данных;
 клинических данных, к которым относились диарея, тенезмы,
ложные позывы к дефекации, ночная дефекация, кровь в стуле,
лихорадка, снижение массы тела, слабость;
 лабораторных данных, при которых выявлялись анемия, лейкоцитоз,
ускорение СОЭ, гипопротеинемия, повышение уровня острофазных
белков, электролитные расстройства;
 инструментальных методов исследования, к которым относились
основные методы исследования: обзорная рентгенография органов
брюшной полости, колоноскопия с илеоскопией и биопсией,
ультразвуковое исследование органов брюшной полости. При
необходимости выполнялись: ирригоскопия, магнитно-резонансная и
компьютерная томографии, трансабдоминальное и трансректальное
ультразвуковое исследование, рентгеноконтрастное исследование
кишечника;

33
 типичных осложнений ЯК (кишечное кровотечение, токсическая
дилатация и перфорация толстой кишки). Учитывались наличие
внекишечных проявлений и состояний: артропатий, поражения кожи и
слизистых оболочек, глаз, англизирующего спондилоартрита,
сакроилеита, первичного склерозирующего холангита, псориаза,
серонегативного ревматоидного артрита, стеатоза печени и
стеатогепатита, холелитиаза, венозных тромбозов и эмболий, амилоидоза.
Учитывая, что четких и достоверных клинических, лучевых,
эндоскопических и морфологических критериев диагностики язвенного
колита не существует, диагноз выставлялся на основании сочетания
полученных данных, а также проведения дифференциального диагноза с
другими заболеваниями. Протяженность поражения кишечника при ЯК
оценивалась согласно Монреальской классификации 2005 г. [18, 53, 168,
176] на основании макроскопических изменений слизистой оболочки
толстой кишки.
Пациенты с ЯК в зависимости от протяженности поражения
кишечника были разделены на 3 подгруппы:
 с тотальным колитом - 37 пациентов (21 мужчина и 16 женщин,
средний возраст – 41 ± 11,8 лет);
 с левосторонним колитом – 25 пациентов (13 женщин и 12 мужчин,
средний возраст – 45,0 ± 11,5 лет);
 с проктитом – 3 пациента (1 мужчина и 2 женщины, средний возраст
– 66,6 ± 3,7 лет).
По течению заболевания ЯК выделяли острое течение (до 6 месяцев
от начала клинических проявлений), хроническое непрерывное течение
(при отсутствии периодов ремиссии длительностью более чем 6 месяцев)
и хроническое рецидивирующее течение (при длительности ремиссии
более 6 месяцев) [5, 18, 53].

34
 Пациенты с ЯК в зависимости от характера течения заболевания
были распределены на следующие подгруппы:
 с острым течением - 6 пациентов (3 мужчин и 3 женщин, средний
возраст – 41 ± 10,5 лет. На момент исследования заболевание было
впервые выявлено и время от его дебюта составляло менее 6
месяцев);
 с хроническим непрерывным течением – 27 пациентов (13 женщин и
14 мужчин, средний возраст – 46,2 ± 10,6 лет);
 с хроническим рецидивирующим течением – 32 пациента (17
мужчин и 15 женщин, средний возраст – 41,9 ± 14,1 лет).
При определении тяжести течения заболевания ЯК учитывались:
тяжесть текущей атаки, наличие осложнений и внекишечных проявлений,
гормональная зависимость и гормональная резистентность. Для
определения тяжести текущей атаки ЯК использовались критерии
Truelove-Witts и индекс активности ЯК или индекс Мейо (DAI),
учитывающие эндоскопическую активность по Schroeder [5, 18, 53, 168,
176].
Больные язвенным колитом по тяжести течения заболевания были
разделены так же на 3 подгруппы:
 с легким течением – 3 пациента (1 мужчина и 2 женщины, средний
возраст – 47,3 ± 8,8 лет);
 со среднетяжелым течением – 57 пациентов (31 мужчина и 26
женщин, средний возраст - 43,5 ± 13,4 лет);
 с тяжелым течением – 5 пациентов (2 мужчины и 3 женщины,
средний возраст - 44 ± 5,6 лет).
Согласно распространенному подходу [18, 53, 76, 105, 125], при
оценке ответа на терапию глюкокортикоидами выделяли гормональную
зависимость – усиление активности заболевания при снижении дозы

35
препарата, и гормональную резистентность – отсутствие эффекта от
применения адекватных доз гормональных препаратов.
В нашем исследовании пациенты с ЯК в зависимости от ответа на
терапию глюкокортикоидами были разделены на 2 подгруппы:
 с рефрактерностью к гормональной терапии – 22 человека (13
мужчин и 9 женщин, средний возраст – 44,3 ± 12,0 лет), из которых
14 пациентов характеризовались гормональной зависимостью, 8
пациентов – гормональной резистентностью, причем у 6 из них
гормональная резистентность развилась на фоне гормональной
зависимости.
 с восприимчивостью к гормональной терапии – 43 больных (20
мужчин и 23 женщины, средний возраст – 42,3 ± 13,9 лет).
В настоящей работе исследование проводилось в двух возрастных
группах больных язвенным колитом в зависимости от возраста
установления диагноза:
 младше 35 лет – 36 пациентов (23 мужчины и 13 женщин) в возрасте
от 20 до 48 лет, средний возраст составил 31,3 ± 6,7 лет. Диагноз ЯК
был установлен в возрасте от 15 до 35 лет, средний возраст
выявления заболевания – 25,0±4,7 лет.
 старше 35 лет – 29 больных (9 мужчин и 20 женщин), в возрасте от
44 до 72 лет, средний возраст составил 56,7±6,9 лет. Диагноз ЯК был
установлен в возрасте от 36 до 66 лет, средний возраст – 49,3±6,5 лет.
2) группа больных БК – 53 пациента в возрасте от 19 лет до 70 лет (21
женщина и 32 мужчины, средний возраст которых составил 38,1±12,9 лет)
с установленным диагнозом БК. Диагноз БК был выставлен согласно
международным стандартам, разработанным Европейским доказательным
консенсусом по диагностике и лечению БК [52, 55], на основании:
 анамнестических данных;

36
 клинических проявлений заболевания, таких как диарея, нередко с
примесью крови, частота которой составляла в среднем от 3 до 7 раз в
сутки, боль в животе различной интенсивности, лихорадка, снижение
массы тела, перианальные поражения, выявляемые при осмотре;
 лабораторных данных, в которых выявлялись: анемия, лейкоцитоз,
гипопротеинемия, повышение уровня С-реактивного белка, ускорение
СОЭ;
 инструментальных методов исследования. Диагноз обязательно
подтверждался эндоскопическим и морфологическим и/или
эндоскопическим и рентгенологическим методами. Для диагностики
осложнений или подтверждения диагноза выполнялись ультразвуковое
исследование, рентгенологическое исследование пассажа бариевой
взвеси, копрологическое исследование, магнитно-резонансная и
компьютерная томографии, фистулография (при наличии наружных
свищей), капсульная эндоскопия, баллонная энтероскопия;
 наличия характерных осложнений БК: инфильтратов, абсцессов
брюшной полости, наружных и внутренних кишечных свищей,
стриктурами и кишечной непроходимостью, аноректальными
поражениями, кровотечением; выявления внекишечных поражений
(артропатии, поражения кожи, слизистых, глаз, ревматоидный артрит,
анкилозирующий спондилоартрит, сакроилеит, первичный
склерозирующий холангит, остеопороз, остеомаляция, псориаз, стеатоз
печени и стеатогепатит, холелитиаз, венозные тромбозы и эмболии,
амилоидоз).
Ввиду отсутствия достоверных признаков БК, диагноз
устанавливался на основании сочетания клинических, эндоскопических
данных и характерной морфологической картины, а также исключения
других заболеваний со схожими проявлениями. При постановке диагноза
использовались критерии достоверного диагноза БК по Lennard-Jones [52,

37
55, 117, 172], включающие определение шести ключевых признаков
заболевания: 1) Поражение от полости рта до анального канала
(хроническое гранулематозное поражение слизистой оболочки); 2)
Прерывистый характер поражения; 3) Трансмуральный характер
поражения: язвы-трещины, абсцессы, свищи; 4) Фиброз: стриктуры; 5)
Лимфоидная ткань (гистология) - афтоидные язвы или трансмуральные
лимфоидные скопления; 6) Муцин (гистология) - нормальное содержание
муцина в зоне активного воспаления слизистой оболочки толстой кишки.
Пациенты с БК в зависимости от локализации поражения
кишечника были разделены, согласно Монреальской классификации [18,
52, 55, 168, 176], на 3 подгруппы:
 с терминальным илеитом – 12 пациентов (7 мужчин и 5 женщин,
средний возраст – 42,4 ± 14,5 лет);
 с колитом – 16 пациентов (9 мужчин и 7 женщин, средний возраст –
37,8 ± 9,4 лет);
 с илеоколитом – 25 человек (16 мужчин и 9 женщин, средний возраст
– 36,2 ± 13,5 лет).
Следует отметить, что согласно данной классификации при каждой
локализации возможны поражения верхних отделов желудочно-
кишечного тракта.
По особенностям течения заболевания, как и в случае c ЯК,
пациенты с БК были разделены на 3 подгруппы:
 с острым течением – 2 пациента (мужчины в возрасте 26 и 48 лет),
причем на момент исследования заболевание было впервые
выявлено и время от дебюта его составляло менее 6 месяцев.
 с хроническим непрерывным течением – 21 пациент (8 женщин и 13
мужчин, средний возраст – 35,8±11,7 лет), у которых периоды
ремиссии отсутствовали более чем 6 месяцев.

38
 с хроническим рецидивирующим течением – 30 пациентов (17
мужчин и 13 женщин, средний возраст – 39,8±13,5 лет), у которых
длительность ремиссии была более 6 месяцев.
При оценке тяжести течения заболевания БК учитывались тяжесть
текущей атаки, наличие осложнений и внекишечных проявлений,
гормонзависимость и гормонрезистентность. При определении тяжести
текущей атаки использовались критерии, разработанные Обществом по
изучению ВЗК при Ассоциации колопроктологов России, и индекс
активности БК (индекс Беста; СDAI) [18, 52, 55].
Пациенты с БК в зависимости от тяжести течения заболевания были
также разделены на 3 подгруппы:
 с легким течением – 3 пациента (2 мужчин в возрасте 27 и 62 лет и 1
женщина в возрасте 64 лет);
 со среднетяжелым течением – 28 пациентов (16 мужчин и 12
женщин, средний возраст – 39,2 ± 12,2 лет);
 с тяжелым течением – 22 пациента (14 мужчин и 8 женщин, средний
возраст – 34,8 ± 11,7 лет).
Согласно Монреальской классификации 2005 г. [18, 52, 55, 168,
176] соответственно фенотипическому варианту заболевания среди
пациентов с БК можно выделить 3 подгруппы:
 с нестриктурирующим, непенетрирующий типом – 24 пациента (17
мужчин и 7 женщин, средний возраст – 37,8 ± 13,5 лет);
 со стриктурирующим типом – 24 пациента (14 мужчин и 10 женщин,
средний возраст – 39,1 ± 12,1 лет);
 с пенетрирующим типом – 5 пациентов (1 мужчина и 4 женщины,
средний возраст – 34,4 ± 12,8 лет).
Пациенты с БК в зависимости от ответа на терапию
глюкокортикоидами, аналогичного пациентам с ЯК, были разделены на 2
группы:

39
 с рефрактерностью к гормональной терапии – 21 больной (14
мужчин и 7 женщин, средний возраст которых составил 32,6 ± 9,8
лет). В данную группу были объединены 14 пациентов с
гормональной зависимостью и 7 пациентов с гормональной
резистентностью, у 5 из которых гормональная резистентность
развилась на фоне гормональной зависимости.
 с восприимчивостью к гормональной терапии – 32 пациента (18
мужчин и 14 женщин, средний возраст – 41,7 ± 12,9 лет).
В рамках представленной работы исследование проводилось в двух
возрастных группах пациентов с БК в зависимости от возраста
установления диагноза:
 младше 35 лет – 37 пациентов (23 мужчины и 14 женщин), в возрасте
от 19 до 60 лет, средний возраст составил 30,7 ± 7,3 лет. Диагноз БК
был установлен в возрасте от 9 до 34 лет, средний возраст
выявления заболевания – 23,5 ± 4,5 лет.
 старше 35 лет – 16 больных (9 мужчин и 7 женщин), в возрасте от 44
до 70 лет, средний возраст составил 55,1 ± 6,1 лет. Диагноз БК был
установлен в возрасте от 37 до 61 года, средний возраст
диагностирования – 49, 8± 6,4 лет.
3) общая группа пациентов с воспалительными заболеваниями
кишечника (ВЗК), включающая в себя 118 представленных выше
пациентов с БК и ЯК, из них 52 женщины и 66 мужчин, средний возраст
которых составил 41,2 ± 13,0 лет.
Пациенты с ВЗК в зависимости от течения заболевания были
разделены на 3 подгруппы:
 с хроническим непрерывным течением ВЗК – 48 человек (21
женщина и 27 мужчин, средний возраст – 41,7 ± 12,3 лет);
 с хроническим рецидивирующим течением – 62 пациента (34
мужчины и 28 женщин, средний возраст – 40,9 ± 13,8 лет);

40
 с острым течением – 8 пациентов (5 мужчин и 3 женщины, средний
возраст – 40 ± 12 лет).
В зависимости от тяжести течения заболевания больные с ВЗК
были разделены на 3 подгруппы:
 со среднетяжелым течением – 85 пациентов (47 мужчин и 38
женщин, средний возраст которых составил 42,1 ± 13,1 лет);
 с тяжелым течением – 27 пациентов (16 мужчин и 11 женщин,
средний возраст которых составил 36,5 ±11,4 лет);
 с легким течением – 6 пациентов (3 мужчины и 3 женщины, средний
возраст – 49 ± 12,4 лет).
Больные с ВЗК по особенностям ответа на терапию
глюкокортикоидами были разделены на 2 подгруппы:
 с рефрактерностью к гормональной терапии – 43 больных (27
мужчин и 16 женщин, средний возраст – 38,6 ± 12,3 лет);
 с восприимчивостью к гормональной терапии – 75 пациентов (38
мужчин и 37 женщин, средний возраст – 42,0 ± 13,5 лет).
Исследование больных с ВЗК проводилось в тех же возрастных
группах в зависимости от возраста установления диагноза:
 младше 35 лет – 73 пациента (46 мужчин и 27 женщин, средний
возраст пациентов составил 31,0 ± 7,0 лет, средний возраст
установления диагноза – 24,3 ± 4,6 лет);
 старше 35 лет – 45 больных (18 мужчин и 27 женщин, средний
возраст пациентов составил 56,1 ± 6,7 лет, средний возраст
установления диагноза – 49,4 ± 6,5 лет).
Заключение о диагнозе, клинической форме, степени тяжести
заболевания, ответе на гормональную терапию пациентов было получено
при изучении медицинской документации.
Пациенты с ЯК и БК находились на лечении в Государственном
бюджетном учреждении здравоохранения «Центральный научно-

41
исследовательский институт гастроэнтерологии» (с июля 2013 г. –
Государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Московский
клинический научно-практический центр» Департамента
здравоохранения г. Москвы) в период с 2009 г. по сентябрь 2013 г.
(главный врач – д.м.н. профессор Хатьков И.Е.).
В настоящее исследование также были включены 2 контрольные
группы:
 Контрольная группа 1 – 1700 образцов пуповинной крови
практически здоровых новорожденных, родившихся на 37–41 неделе
гестации и внесенных в реестр неродственных доноров в г. Москве (HLA-
типирование проводилось в 2004 - 2009 гг.).
 Контрольная группа 2 – 119 образцов периферической крови
практически здоровых доноров из числа взрослого населения
Московского региона в возрасте от 20 до 72 лет (60 женщин и 59
мужчин), средний возраст которых составил 37,44 ± 7,5 лет (HLA-
типирование осуществлялось в 2004 - 2013 гг.).
Все пациенты с ЯК, БК и контрольные группы в представленном
исследовании относились к славянам Московского региона. При
определении этнической принадлежности учитывались как анкетные
данные, так и результаты сравнения частотного распределения групп
аллелей HLA в исследуемых группах с данными популяционных
исследований [12, 27, 73].
Работа была выполнена на кафедре биологии и общей генетики
медицинского института РУДН (директор медицинского института –
Абрамов А.Ю., зав. кафедрой – д.б.н., доцент М.М. Азова) и в
Государственном Бюджетном Учреждении Здравоохранения города
Москвы «Банк стволовых клеток Департамента здравоохранения города
Москвы» (директор – д.м.н. М.В. Яковлева) с 23.11.2013 г. согласно
приказа ДЗМ №278 от 27.03.02013 г. реорганизованном в

42
Государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Станция
переливания крови Департамента здравоохранения города Москвы»
(главный врач – д.м.н. профессор Майорова О.А.).

2.2. Методы исследования

2.2.1. Получение материала
Забор периферической венозной крови у пациентов с ЯК, БК и
здоровых взрослых доноров проводился с применением вакуумных
систем для взятия крови в пробирки с антикоагулянтом ЭДТА
(Этилендиаминтетрауксусная кислота) при наличии информированного
согласия.
Забор пуповинной крови проводился при физиологических и
оперативных родах доношенных новорожденных (37 – 41 недель
гестации, медиана – 40 недель) из пупочного канатика после отделения
плаценты при наличии информированного согласия матери и отсутствии
стандартных противопоказаний к донорству [31].

2.2.2. Выделение ДНК из биоматериала

Выделение ДНК из образцов крови проводилось автоматическим
методом с использованием прибора для автоматического выделения
нуклеиновых кислот NorDiagArrow и наборов реагентов ArrowBloodDNA
(Норвегия). Принцип работы данной системы основан на связывании
ДНК с магнитными частицами, приводящем к автоматическому
отделению ДНК от клеток в образце крови. Метод автоматического
выделения нуклеиновых кислот позволяет автоматизировать основную
часть процесса, что снижает риск ошибок, ускоряет процесс и дает
возможность получать ДНК стабильно высокого качества. Прибор
NorDiagArrow снабжен механизмами для перемещения и перемешивания
жидкостей, нагревательным элементом, магнитным планшетом [128].

43
 Процесс выделения ДНК включает в себя следующие манипуляции:
помещение в прибор индивидуальных одноразовых наконечников с
помпами, картриджей с реагентами, пробирок с 500 мкл крови и пустых
пробирок для раствора ДНК; запуск протокола выделения, в результате
которого в соответствующей пробирке оказывается раствор ДНК,
готовый к использованию. Время выполнения протокола составляет 38
минут.
Сразу после выделения проводилось изучение качества раствора
ДНК с применением спектрофотометра SmartSpecPlus («Biorad», США).
Оценивали такие показатели, как концентрация ДНК (при длине волны
260 нм) и коэффициент чистоты, рассчитываемый как отношение
оптической плотности при длине волны 260 нм к оптической плотности
при длине волны 280 нм (А 260/280). Все образцы ДНК соответствовали
требуемым характеристикам: концентрации не ниже 15 нг/мкл и
коэффициенту чистоты (А260/280) в пределах 1,7 – 1,9.
Полученные образцы ДНК использовали непосредственно после
получения или хранили в морозильной камере при температуре -20 °С.

2.2.3. HLA-генотипирование методом SSO c применением

технологии LIFECODES и мультиплексного проточного анализатора
Luminex
Принцип метода основан на гибридизации одноцепочного продукта
ПЦР (изучаемая ДНК) с аллель-специфичными олигонуклеотидными
зондами (Sequence Specific Oligonucleotides, SSO) [157]. Каждый из
зондов комплементарен уникальной для группы аллелей
последовательности ДНК. На зонде фиксирована флуоресцентная
микросфера Luminex, различающаяся для каждого вида зондов. Принцип
работы прибора Luminex, в котором использованы технологии проточной
флюорометрии, основан на распознавании различных флюоресцирующих

44
микросфер с фиксированными на них олигонуклеотидными зондами с
идентификацией группы аллелей HLA в амплифицированном образце.
Программное обеспечение системы Luminex выполняет детекцию и
интерпретацию результатов. Заключение о результате выдается в виде
отчета на электронном и бумажном носителе.
Процесс исследования состоял из нескольких последовательных
этапов:
1. Амплификация ДНК методом ПЦР
2. Гибридизация
3. Анализ образца с использованием мультиплексного проточного
анализатора Luminex.
На этапе амплификации в лунки ПЦР-планшета вносились:
 раствор LIFECODES Мastermix, содержащий олигонуклеотидные
зонды для одного из локусов HLA (-A, -B, -Cw, -DRB1 или -DQB1) в
объеме 15 мкл,
 10 мкл исследуемой ДНК с концентрацией 15 нг/мкл,
 деионизированная вода в объеме 24,5 мкл,
 термостабильная Taq-полимераза в объеме 0,5 мкл.
Затем образцы переносились в термоциклер (амплификатор) и
запускался протокол со следующим температурным режимом:
 1 цикл при температуре + 95° С в течении 5 минут,
 при температуре +95°С – 30 секунд, при температуре +60°С – 45
секунд, при температуре +72°С – 45 секунд (8 циклов),
 при температуре +95°С – 30 секунд, при температуре +63°С – 45
секунд, при температуре +72° С – 45 секунд (32 цикла),
 1 цикл при температуре +72° С 15 минут.
На этапе гибридизации полученные продукты амплификации в
объеме 5 мкл смешивали с 15 мкл предварительно прогретого до
температуры +55°С раствора микросфер LIFECODES, различного для

45
каждого локуса HLA. Запускали протокол гибридизации в термоциклере
со следующим температурным режимом:
 1 цикл при температуре +95°С в течении 5 минут,
 1 цикл при температуре +47°С в течении 30 минут,
 1 цикл при температуре +56°С в течении 10 минут.
После выполнения последнего этапа гибридизации во время
нахождения образцов в термоциклере и поддержании температуры 56°С в
смесь вносили раствор коньюгата Р-Фикоэритрина-Стрептавидина (SA-
PE) разведенного раствором для разбавления (Dilution Solution, DS) в
соотношении 1:200.
На заключительном этапе планшет с образцами помещали в
мультиплексный проточный анализатор Luminex и запускали
автоматическую программу регистрации сигналов с микросфер. В
последующем происходила обработка полученных данных программным
обеспечением Quick Type for Lifecodes с формированием отчета,
содержащего данные об HLA-генотипе пациента (Рис. 1).

46
 Номер
образца

Графики
сигнала
микро-
сфер

Результат
по локусам
Список всех
образцов из
партии

№ микросфер и
Возможные уровень их
варианты сигнала
аллелей по
локусу А

Рисунок 1. Интерфейс программы Quick type for Lifecodes

В каждой партии проб был отрицательный контроль, содержащий

все компоненты исследования, кроме ДНК, вместо которой в пробу
вносили деионизированную воду.

2.2.4. HLA - генотипирование методом PCR-SSP с применением

аллель - специфических праймеров
Образцы, при исследовании которых были получены двойные
интерпретации при использовании метода SSO, были типированы
методом PCR-SSP (Sequence Specific Primer, аллель-специфические
праймеры). Метод основан на полной или почти полной
комплементарности праймеров и искомых участков ДНК на 3’- конце. В
реакционной смеси содержался набор праймеров, комплементарных
аллелям или группам аллелей, в зависимости от назначений конкретного
47
набора реагентов. При наличии в лунке участка ДНК и комплементарного
праймера происходило накопление данного участка в процессе ПЦР на
этапе амплификации, что указывало на положительный результат. При
отсутствии в реакционной лунке участка ДНК, комплементарного
праймеру, накопления данного участка ДНК не происходило, т.е.
фиксировался отрицательный результат. Выявление наличия или
отсутствия накопленных участков ДНК и, соответственно,
положительных или отрицательных результатов, проводилось методом
электрофореза в агарозном геле. При этом фрагменты ДНК окрашивались
бромистым этидием, добавляемым в агарозный гель [149, 150].
HLA-генотипирование методом PCR-SSP проводилось с
использованием коммерческих наборов реагентов Olerup SSP® HLA
Typing Kits.
Первым этапом исследования являлась амплификация образцов
ДНК. Для этого готовился рабочий раствор, состоящий из исследуемой
ДНК с концентрацией 15 – 30 нг/мкл, раствора Master Mix (буферный
раствор, MgCL2, нуклеотиды (dATP, dCTP, dGTP, dTTP)),
термостабильной Taq-полимеразы и деионизированной воды. Объем
компонентов зависел от количества лунок в плашке с праймерами,
различного для каждого локуса, и определялся по таблице, прилагаемой к
набору реагентов. Далее полученный раствор в объеме 10 мкл добавлялся
в лунки планшета, содержащего смесь лиофилизированных праймеров
(планшет с праймерами является одним из компонентов коммерческого
набора). Запускалась программа амплификации в термоциклере со
следующим температурным режимом:
 1 цикл при температуре +94°C в течении 2-х минут,
 при температуре +94°C – 10 секунд, при температуре +65°C – 60
секунд (10 циклов)

48
 при температуре +94°C – 10 секунд, при температуре +61°C – 50
секунд, при температуре +72°C – 30 секунд (20 циклов)
 сохранение проб при комнатной температуре до 8 часов или при
температуре +4°C свыше 8 часов.
Следующим этапом исследования являлся электрофорез в 2%
агарозном геле, содержащем бромистый этидий. Предварительно пробы
после проведения амплификации переносились в лунки геля.
Электрофорез проводился в течении 20 минут при напряжении 300 В и
силе тока 400 мА.
Затем гель помещался в трансиллюминатор, где просматривался в
ультрафиолетовом свете. При этом фрагменты ДНК, окрашенные
бромистым этидием, выявлялись как флуоресцирующие полосы.
Фотографирование и архивирование изображения осуществляли с
помощью программного обеспечения «UPV» гельдокументирующей
системы «ДиДжиДок» (США).
После получения изображения геля проводилась интерпретация
результатов. При проведении ПЦР в каждую лунку со смесью праймеров
добавлялся внутренний положительный контроль (участок гена гормона
роста). На изображении геля сигнал с внутреннего положительного
контроля обязательно присутствовал в каждой лунке, где содержалась
ДНК. Учитывая, что фрагмент ДНК гена гормона роста больше и,
соответственно, тяжелее фрагментов ДНК HLA-генов, после проведения
электрофореза контрольная полоса располагалась ближе к началу
электрофореза, чем полоса накопленного фрагмента ДНК HLA – гена в
случае положительного результата в какой-либо лунке. Также в каждой
лунке содержались олигомеры праймеров, которые короче и легче
накопленных фрагментов ДНК и располагались на самом дальнем
расстоянии от точки начала электрофореза. В последней лунке каждой
плашки был отрицательный контроль. В эту лунку добавлялись все

49
 компоненты реакционной смеси, за исключением ДНК и положительного
контроля. Вместо ДНК в пробу вносилась деионизированная вода.
Таким образом, в случае положительного результата и наличия в
исследуемом образце комплементарных к некоторым праймерам участков
ДНК на изображении геля были полосы в соответствующих лунках,
расположенные между полосами внутреннего положительного контроля
и олигомеров праймеров (рис. 2).
Номера лунок, в которых получен положительный результат,
отмечались в виртуальном геле компьютерной программы Helmberg-
SCORE™, используемой для интерпретации результатов и формирования
рапорта. Также интерпретация может быть проведена с использованием
таблиц, прилагаемых к каждому набору реагентов Olerup SSP® HLA
TypingKits.

Сигнал
внутреннего
контроля

Специфические
фрагменты ДНК
(положительная
реакция)

Олигомеры
праймеров

Рисунок 2. Изображение агарозного геля в трансиллюминаторе при

HLA-типировании методом PCR-SSP

50
 Всего было выполнено 9685 исследований.

2.3. Статистическая обработка результатов

Статистическая обработка результатов проводилась с помощью
программного обеспечения Microsoft Excel, Open Source Epidemiologic
Statistics for Public Health («OpenEpi»), версия 3.01 от 2013/04/06.
С целью выявления возможной взаимосвязи между наличием в
генотипе каких-либо групп аллелей HLA и возникновением ЯК, БК, ВЗК
в целом и некоторых форм течения заболеваний, в частности, было
выполнено исследование по типу «случай – контроль». Как «случай»
были определены образцы периферической крови пациентов с
установленным диагнозом БК или ЯК. «Контроль» представлен
образцами пуповинной крови здоровых новорожденных доноров
пуповинной крови. Предполагаемым этиологическим фактором,
связанным с развитием заболевания, являлось наличие в генотипе
больных БК и ЯК и в контрольной группе определенных групп аллелей
HLA, т.е. в каждой из групп определены носители и не носители
исследуемых групп аллелей HLA [96].
Группы аллелей, встречающиеся достоверно чаще у больных ЯК,
БК и ВЗК были определены как маркеры предрасположенности к
развитию заболеваний, а встречающиеся достоверно реже – как маркеры
протекции к заболеваниям.
Также группы аллелей HLA, отрицательно или положительно
ассоциированные с развитием заболевания в нескольких группах,
представлены как общие маркеры протекции или предрасположенности,
соответственно. Группы аллелей HLA, отрицательно или положительно
ассоциированные с развитием заболевания в конкретной группе
пациентов, представлены как характерные маркеры протекции или
предрасположенности, соответственно.

51
 Для оценки взаимосвязи между наличием определенных групп
аллелей HLA в генотипе и развитием заболеваний были рассчитаны
следующие показатели и применены следующие статистические
критерии:
1. Частота групп аллелей HLA, выраженная в долях и
рассчитанная как отношение количества положительных исходов (в
нашем случае – количество случаев, где встретилась исследуемая группа
аллелей HLA, причем при наличии исследуемой группы аллелей в
гомозиготном состоянии показатель умножался на 2) к общему
количеству испытаний (в нашем случае – к количеству исследованных по
данной группе аллелей HLA образцов, умноженному на 2 ввиду
диплоидности).
f = n / 2N, где:
n – количество случаев, где выявлена исследуемая группа аллелей
HLA (в гомозиготном состоянии показатель умножен на 2);
N – общее количество исследованных образцов по данной группе
аллелей HLA;
f – частота группы аллелей, в долях;
2. Сформулирована нулевая гипотеза об отсутствии различий в
частоте групп аллелей HLA в долях между исследуемой и контрольной
группами.
3. Для сравнения долей и, таким образом, для проверки нулевой
гипотезы, применен критерий z, рассчитываемый по формуле:
pˆ1  pˆ 2
z
pˆ11 pˆ1  pˆ 2 1 pˆ 2 

n1 n2
Учитывая, что нормальное распределение непрерывно, а критерий z
имеет дискретные значения, применена поправка Йейтса (Yates), или

52
поправка на непрерывность. При этом формула для расчета критерия z
имеет вид:

1 1 1
pˆ1  pˆ 2    
2  n1 n2 
z ,
1 1
pˆ 1 pˆ   
 n1 n2 
где p1 и p2 – выборочные доли; n1 и n2-объемы двух выборок.
При np и n(1 – p) менее 5 критерий z неприменим, в этом случае
использовался точный критерий Фишера.
4. Был принят уровень значимости р˂0,05, при котором
критическое значение z составляет 1,96. При получении в наших
исследованиях значения z больше критического значения z при р˂0,05,
нулевая гипотеза об отсутствии различия долей отвергалась, и различия
принимались как статистически значимые.
5. Для оценки характера влияния прогностических факторов
применена таблица сопряженности, или таблица «2 х 2», и рассчитан
критерий χ2 с поправкой Йейтса. Если ожидаемое число в одной из
клеток было меньше 5, применялся точный критерий Фишера. Таблица
«2 х 2» имела следующий вид:
Прогностический Заболевание БК или ЯК ВСЕГО
фактор Наличие Заболевание
(группа аллелей HLA) заболевания отсутствует
Исследуемая группа Группа аллелей Группа аллелей Всего с
аллелей HLA HLA HLA наличием
присутствует в присутствует у присутствует у группы
генотипе больных ВЗК (n здоровых (n аллелей HLA
человек) (A) человек) (B)
Исследуемая группа Группа аллелей Группа аллелей Всего с
аллелей HLA HLA отсутствует HLA отсутствует отсутствием
отсутствует в генотипе у больных ВЗК (n у здоровых (n группы
человек) (C) человек) (D) аллелей HLA

ВСЕГО Всего больных Всего здоровых Всего

исследовано
53
 6. Расчет показателя отношения шансов (ОШ) и 95%
доверительного интервала (ДИ) проводился в случае, если для
исследуемой группы аллелей HLA различия долей оказывались
статистически значимыми (при р˂0,05) т.е. если отвергалась нулевая
гипотеза.
Отношение шансов (ОШ) определяли по следующей формуле:

95% доверительный интервал (ДИ) для ОШ рассчитывали по

формуле:

⁄ ⁄ ⁄ ⁄ ⁄

Показатель ОШ отражает шансы развития заболеваний (БК, ЯК или

ВЗК) при наличии или отсутствии исследуемой группы аллелей HLA.
При значении ОШ более 1 группа аллелей HLA положительно
ассоциирована с развитием заболевания, если значение показателя
колеблется в пределах от 0 до 1, группа аллелей HLA отрицательно
ассоциирована с развитием заболевания, т.е. имеется связь данной группы
аллелей HLA с протективными свойствами к развитию заболевания. При
ОШ, равном 1, связь развития заболевания с наличием данной группы
аллелей HLA отсутствует [20, 49, 50, 100].

54
 ГЛАВА 3
ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ СИСТЕМЫ HLA ПРИ
ЯЗВЕННОМ КОЛИТЕ И БОЛЕЗНИ КРОНА У
ВЗРОСЛОГО НАСЕЛЕНИЯ МОСКОВСКОГО РЕГИОНА
(РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ)

3.1. Распределение групп аллелей HLA I и II классов в

контрольных группах
На начальном этапе исследования было изучено распределение
генов HLA I и II классов в контрольных группах. Первая контрольная
группа, представленная взрослыми здоровыми донорами, была разделена
на подгруппы по полу (60 женщин и 59 мужчин, средний возраст
составил 37,44±7,5 лет) и по возрасту (младше 35 лет - 28 мужчин и 30
женщин; старше 35 лет - 31 мужчина и 30 женщин). При сравнении
частоты групп аллелей HLA I и II классов в контрольной группе
достоверных отличий между исследуемыми подгруппами выявлено не
было.
Так как полученные данные показали, что распределение групп
аллелей HLA I и II класса достоверно не различается у представителей
разного пола и в разных возрастных группах, стало возможным
объединить эти подгруппы в одну контрольную группу взрослых
здоровых доноров Московского региона.
Далее было проведено сравнение полученных данных с
соответствующими показателями в группе здоровых новорожденных
доноров пуповинной крови Московского региона (вторая контрольная
группа). Статистически значимых отличий обнаружено не было (таблица
1).

55
 Таблица 1
Частота групп аллелей HLA в контрольных группах (p>0,05)
Группа Частота групп аллелей HLA в Частота групп аллелей HLA в
аллелей HLA контрольной группе взрослых контрольной группе
доноров, в долях новорожденных доноров
пуповинной крови, в долях
HLA A*
01 0,126 0,114
02 0,285 0,288
03 0,134 0,134
11 0,058 0,063
23 0,033 0,028
24 0,126 0,096
25 0,067 0,052
26 0,021 0,049
29 0,021 0,017
30 0,012 0,028
31 0,021 0,020
32 0,012 0,031
33 0,016 0,016
66 0,016 0,006
68 0,046 0,038
HLA B*
07 0,134 0,12
08 0,071 0,067
13 0,100 0,066
14 0,033 0,027
15 0,029 0,054
18 0,079 0,084
27 0,037 0,051
35 0,109 0,098
37 0,004 0,01
38 0,029 0,044
39 0,016 0,020
40 0,037 0,046
41 0,033 0,032
44 0,113 0,101
46 0 0,002
47 0 0,003
48 0 0,004
49 0,012 0,017
50 0,012 0,014
51 0,063 0,040
52 0,025 0,031

56
 53 0 0,0017
54 0 0,0003
55 0,008 0,010
56 0,008 0,012
57 0,025 0,030
58 0,008 0,010
73 0,004 0,0015
78 0 0,0003
HLA C*
01 0,029 0,042
02 0,050 0,063
03 0,063 0,091
04 0,163 0,128
05 0,029 0,038
06 0,142 0,130
07 0,285 0,257
08 0,037 0,029
12 0,100 0,134
14 0,012 0,016
15 0,042 0,024
16 0,012 0,017
17 0,029 0,030
18 0 0,001
HLA DRB1*
01 0,126 0,110
03 0,071 0,080
04 0,067 0,110
07 0,184 0,143
08 0,050 0,035
09 0,008 0,014
10 0,012 0,010
11 0,134 0,130
12 0,008 0,026
13 0,138 0,139
14 0,025 0,019
15 0,134 0,133
16 0,037 0,046
HLA DQB1*
02 0,226 0,211
03 0,315 0,330
04 0,037 0,037
05 0,201 0,200
06 0,218 0,222

57
 Таким образом, показано, что распределение групп аллелей HLA I и
II классов достоверно не различается у здоровых новорожденных доноров
пуповинной крови и взрослых здоровых доноров, что позволяет
использовать образцы пуповинной крови для формирования контрольной
группы при проведении генетических исследований HLA-системы
взрослых пациентов. В этой связи при проведении настоящего
исследования в качестве контрольной группы была использована группа
здоровых доноров пуповинной крови новорожденных.

3.2. Особенности полиморфизма генов системы HLA при

язвенном колите
У больных ЯК и в контрольной группе были выявлены следующие
группы аллелей HLA I класса (А*, В*, C*) и II класса (DRB1* и DQB1*):
А*01, А*02, А*03, А*11, А*23, А*24, А*25, А*26, А*29, А*30, А*31,
А*32, А*33, А*66, А*68, В*07, В*08, В*13, В*14, В*15, В*18, В*27,
В*35, В*37, В*38, В*39, В*40, В*41, В*44, В*46, В*47, В*48, В*49, В*50,
В*51, В*52, В*53, В*54, В*55, В*56, В*57, В*58, В*73, В*78, C*01, C*02,
C*03, C*04, C*05, C*06, C*07, C*08, C*12, C*14, C*15, C*16, C*17, C*18,
DRB1*01, DRB1*03, DRB1*04, DRB1*07, DRB1*08, DRB1*09, DRB1*10,
DRB1*11, DRB1*12, DRB1*13, DRB1*14, DRB1*15, DRB1*16, DQB1*02,
DQB1*03, DQB1*04, DQB1*05, DQB1*06.
Для полной оценки генетических особенностей HLA-антигенов при
ЯК исследование проводилось как в общей группе больных ЯК, так и в
подгруппах, сформированных в зависимости от протяженности
поражения кишечника, тяжести, характера течения, ответа на
гормональную терапию, пола пациентов и возраста диагностики
заболевания.

58
 3.2.1. Генетические особенности HLA - антигенов в общей группе
больных ЯК
При проведении исследований в общей группе пациентов с ЯК было
обнаружено, что частоты групп аллелей HLA А*26, В*38, В*58 и C*12
достоверно выше соответствующих показателей в контрольной группе
(рисунок 3 и таблица 2). В то же время при ЯК отмечалось достоверное
снижение встречаемости групп аллелей В*15, C*04, DRB1*07 и
DQB1*02.
Частота, в долях

р=0,026 р=0,011
0,25 0,22
0,21
0,2
р=0,043
р=0,004 0,14
0,15 р=0,013 0,13 0,13
0,12
0,11
р=0,03 0,1
0,1 0,07
1 р=0,027 0,06
0,04 0,05 0,04 0,04
0,05
0,01 0,01 р=0,03
0
А*26 В*15 В*38 В*58 С*04 С*12 DRB1*07 DQB1*02

Пациенты с ЯК Контрольная группа

Рисунок 3. Частота групп аллелей HLA в группе больных ЯК и в

контрольной групп

59
 Таблица 2
HLA-маркеры предрасположенности и протекции к развитию ЯК в
общей группе пациентов с ЯК (n=65)
Группа p ОШ ДИ
А*26 0,004 2,583 1,397–4,775
В*15 0,031 0,132 0,018-0,954
В*38 0,013 2,391 1,248-4,58
В*58 0,027 4,033 1,521-10,69
С*04 0,043 0,444 0,21–0,94
С*12 0,026 1,847 1,106–3,083
DRB1*07 0,032 0,461 0,233-0,91
DQB1*02 0,011 0,459 0,26–0,82

Как видно из представленных данных, группы аллелей А*26, В*38,

В*58 и C*12 можно отнести к маркерам предрасположенности к
развитию ЯК. Вероятность развития ЯК увеличивается в 1,84 раза при
наличии в генотипе группы аллелей C*12 и становится в 4,03 раза выше
при наличии группы аллелей В*58. Группы аллелей А*26 и В*38
занимают промежуточное положение в ряду маркеров
предрасположенности к данному заболеванию. Шанс заболеть ЯК среди
носителей данных групп аллелей составляет 2,5 и 2,3, соответственно.
Группы аллелей В*15, C*04, DRB1*07, DQB1*02 ассоциированы с
протективными свойствами по отношению к развитию ЯК. Минимальный
риск развития заболевания наблюдается у носителей группы В*15 и
составляет 0,13.

3.2.2. Генетические особенности HLA - антигенов у пациентов с ЯК

в зависимости от протяженности поражения кишечника
Было проведено исследование распределения групп аллелей HLA у
больных ЯК с тотальным и левосторонним поражением кишечника.
Группа пациентов с проктитом (n=3) не оценивалась ввиду ее

60
малочисленности. Полученные данные представлены на рисунке 4 и в
таблице 3.
При сравнении группы пациентов с тотальным поражением толстой
кишки и контрольной группы у больных выявлена достоверно более
высокая частота групп аллелей А*26 и В*38.
Также обнаружено, что левосторонний колит ассоциирован с
повышением частоты группы аллелей В*56.
Частота, в долях

0,14
0,14

0,12 0,11

0,1
р=0,044
0,08
0,06
0,06
0,04 0,04
0,04
р=0,049 р=0,008 0,01
0,02

0
А*26 В*38 В*56
Пациенты с тотальным поражением кишечника при ЯК
Контрольная группа
Пациенты с левосторонним поражением кишечника при ЯК

Рисунок 4. Частота групп аллелей HLA в группах пациентов с

тотальным поражением толстого кишечника, левосторонним
поражением толстого кишечника при ЯК и в контрольной группе

61
 Таблица 3
HLA-маркеры предрасположенности к развитию ЯК с тотальным
или левосторонним поражением толстого кишечника
Группа p OШ ДИ
аллелей
Группа пациентов с тотальным поражением толстого
кишечника(n=37)
А*26 0,049 2,595 1,166 – 5,778
В*38 0,008 3,394 1,571 – 7,335
Группа пациентов с левосторонним поражением толстого
кишечника(n=25)
В*56 0,044 5,713 1,639- 19,91

Как видно из табл. 3, А*26 и В*38 являются маркерами

предрасположенности к тотальному поражению кишечника при ЯК.
Вероятность возникновения данной формы заболевания увеличивается в
2,6 раза при наличии в генотипе группы аллелей А*26 и в 3,4 раза – при
наличии В*38. Также можно полагать, что группа аллелей В*56 является
фактором, способствующим поражению язвенным колитом левых
отделов ободочной кишки.

3.2.3. Генетические особенности HLA - антигенов при ЯК в

зависимости от характера течения заболевания
В рамках настоящего исследования было проведено сравнение
подгрупп пациентов с хроническим непрерывным течением и
хроническим рецидивирующим течением с контрольной группой. При
этом достоверных отличий в характере распределения групп аллелей
HLA у пациентов с хроническим рецидивирующем течением от контроля
не выявлено.
Группа пациентов с острым течением ЯК не оценивалась ввиду ее
малочисленности (n = 6).

62
 Значимые отклонения изучаемых показателей от контроля
наблюдались лишь в подгруппе больных с хроническим непрерывным
течением ЯК. На рисунке 5 и в таблице 4 представлены результаты
статистического анализа полученных данных.
Частота, в долях

0,29
0,3

0,25
р=0,002 р=0,015
0,2 0,17
0,15 0,13 р=0,036
0,15
0,04 0,07
0,1 0,04
р=0,004 0,01
0,05

0
А*26 В*38 C*12 DRB1*14
Пациенты с хроническим непрерывным течением ЯК
Контрольная группа

Рисунок 5. Частота групп аллелей HLA в группе пациентов с

хроническим непрерывным течением ЯК и в контрольной группе

Таблица 4
HLA-маркеры предрасположенности к развитию ЯК в группе
пациентов с хроническим непрерывным течением заболевания (n=27)
Группа аллелей p OШ ДИ
А*26 0,002 4,704 2,077-10,65
В*38 0,015 3,696 1,536-8,892
C*12 0,004 3,182 1,483-6,827
DRB1*14 0,036 4,558 1,527-13,61

Как видно из приведенных данных, группы аллелей А*26, B* 38,

C*12 и DRB1*14 у пациентов с хроническим непрерывным течением
заболевания встречаются достоверно чаще и являются маркерами
предрасположенности к данной форме заболевания с вероятностью ее
возникновения больше 3, причем наличие в генотипе А*26 повышает
данную величину до 4,7.
63
 3.2.4. Генетические особенности HLA - антигенов при ЯК в
зависимости от тяжести течения заболевания
Учитывая, что количество пациентов с тяжелым (n = 5) и легким (n =
3) течением заболевания оказалось недостаточным для проведения
анализа, данные этих групп не обрабатывались. Было проведено
сравнение группы пациентов со среднетяжелым течением и контрольной
группы. Частота А*26 в группе пациентов со среднетяжелым течением
оказалась достоверно выше, чем в контрольной группе, в то время как
группы аллелей DRB1*07 и DQB1*02 у больных встречались значимо
реже (рисунок 6).

р=0,02
Частота, в долях
0,25 0,21
р=0,03

0,2
р=0,03
0,14
0,15 0,11
0,096
0,07
0,1
0,04
0,05

0
А*26 DRB1* 07 DQB1* 02

Пациенты со среднетяжелым течением ЯК Контрольная группа

Рисунок 6. Частота групп аллелей HLA в группе пациентов со

среднетяжелым течением ЯК и в контрольной группе
Следует отметить, что, несмотря на то, что данная подгруппа
пациентов (n=57) составляла значительную часть общей группы больных
ЯК (n=65), и полученные результаты в значительной мере
соответствовали таковым в общей группе, были обнаружены
определенные иммуногенетические особенности, связанные со
среднетяжелым течением заболевания (таблица 5).
64
 Таблица 5
HLA-маркеры предрасположенности и протекции к развитию ЯК в
группе пациентов со среднетяжелым течением заболевания (n=57)
Группа аллелей p OШ ДИ
А*26 0,03 2,25 1,14- 4,44
DRB1* 07 0,03 0,4132 0,19- 0,88
DQB1* 02 0,02 0,452 0,24 – 0,85

Группа аллелей HLA-А*26 ассоциирована с возникновением ЯК со

среднетяжелым течением заболевания, а группы аллелей DRB1*07 и
DQB1*02 можно считать маркерами протекции именно к среднетяжелому
течению заболевания.

3.2.5. Генетические особенности HLA - антигенов при ЯК в

зависимости от ответа на гормональную терапию
Как было указано в разделе «Материал и методы исследования»,
больные язвенным колитом по их реакции на проводимую терапию были
разделены на 2 подгруппы: восприимчивые к гормональной терапии и
характеризующиеся гормональной рефрактерностью. При сравнении
показателей в данных подгруппах с контролем выявлено возрастание
шансов возникновения ЯК с гормональной рефрактерностью при наличии
в генотипе А*26 до 6,5 раз, С*17 – до 4,6 раз, В*38 – до 4,9 раз, и
уменьшение шансов при наличии DRB1* 07 до 0,1 (рисунок 7 и таблица
6). Группы аллелей В*52 и В*58, как показал статистический анализ
результатов исследования, ассоциированы с восприимчивостью к
гормональной терапии ЯК, в то время как DQB1*02 в этой подгруппе
пациентов встречается достоверно реже.

65
 Частота, в долях
0,25
0,21 0,21
0,2 0,18 р=0,019

0,14 0,14
0,15
р=0,009 0,12
р=0,0003
р=0,004 0,09
0,1 р=0,026 р=0,027
0,05
0,04 0,04 0,03 0,03
0,05
0,01 р=0,046
0,02

0
А*26 В*38 С*17 DRB1* 07 В*52 В*58 DQB1*02

Пациенты с гормональной рефрактерностью к терапии при ЯК

Пациенты с гормональной восприимчивостью к терапии при ЯК
Контрольная группа

Рисунок 7. Частота групп аллелей HLA в группе больных ЯК с

гормональной рефрактерностью, гормональной восприимчивостью и
в контрольной группе

Таблица 6
HLA-маркеры предрасположенности и протекции к развитию
различных типов ответа на гормональную терапию ЯК
Группа p OШ ДИ
аллелей
группа пациентов с гормональной рефрактерностью (n=22)
А*26 0,0003 6,513 2,739 – 15,49
В*38 0,004 4,928 1,977 – 12,29
С*17 0,019 4,631 1,672 – 12,82
DRB1* 07 0,026 0,121 0,016–0,898
группа пациентов с гормональной восприимчивостью(n=43)
В*52 0,009 3,573 1,614 – 7,91
В*58 0,027 4,963 1,677 – 14,69
DQB1*02 0,046 0,46 0,23– 0,95

66
 3.2.6. Генетические особенности HLA - антигенов при ЯК в
зависимости от пола пациентов
В рамках представленной работы был проведен анализ
распределения групп аллелей HLA среди больных ЯК разного пола. У
женщин с ЯК некоторые группы аллелей, а именно, А*26, B*38 и С*12,
встречались достоверно чаще, чем в контрольной группе. Безусловный
интерес представляет тот факт, что у мужчин с данным заболеванием
группа аллелей В*15 отсутствовала (рисунок 8).

Частота, в долях

0,16 0,15 0,15

0,14
0,11
0,12 р=0,005
р=0,021
0,1
р=0,046 р=0,033
0,08
0,05 0,05
0,06 0,04
0,04
0,04

0,02 0,0
0
0
В*15 А*26 В*38 С*12

Пациенты с ЯК, мужчины Контрольная группа

Пациенты с ЯК, женщины

Рисунок 8. Частота групп аллелей HLA у пациентов разного пола и в

контрольной группе

Исходя из полученных данных (табл. 7) можно полагать, что В*15

является маркером протекции к возникновению ЯК у мужчин, а у
женщин наличие в генотипе А*26, В*38 и С*12 повышает вероятность
развития ЯК в 2,4 – 3,8 раз.

67
 Таблица 7
HLA-маркеры предрасположенности и протекции к развитию ЯК у
мужчин и женщин
Группа аллелей p OШ ДИ
Группа мужчин с ЯК(n=34)
В*15 0,046 0,0 0
Группа женщин с ЯК(n=31)
А*26 0,005 3,849 1,741- 8,508
В*38 0,033 3,08 1,304- 7,274
С*12 0,021 2,433 1,189- 4,981

3.2.7. Генетические особенности HLA - антигенов при ЯК в

зависимости от возраста установления диагноза
При сравнении встречаемости HLA-антигенов среди пациентов с ЯК
младше 35 лет с соответствующими показателями в контрольной группе
был выявлен ряд статистически значимых отличий, а именно – более
высокая частота группы аллелей В*52 и низкая – DQB1*02 (рисунок 9 и
таблица 8).
Частота, в долях

0,3
0,26
0,25
0,21
р=0,011 р=0,023
0,2
р=0,043 р=0,003 0,13
0,14 0,14
0,15

0,1 0,08 р=0,03

0,07 0,04
0,03 0,04
0,05

0
В*52 DQВ1*02 А*26 В*38 C*12
Пациенты с ЯК, младше 35 лет Пациенты с ЯК, старше 35 лет
Контрольная группа

Рисунок 9. Частота групп аллелей HLA в группах пациентов с

диагностикой ЯК в возрасте старше 35 лет, младше 35 лет и в
контрольной группе

68
 Вышеперечисленные маркеры можно считать, соответственно,
положительно и отрицательно ассоциированными с возникновением ЯК в
возрасте младше 35 лет.

Таблица 8
HLA-маркеры предрасположенности и протекции к развитию ЯК у
пациентов с диагностикой заболевания в возрасте младше 35 лет и
старше 35 лет
Группа аллелей p OШ ДИ
Группа пациентов с ЯК младше 35 лет(n=36)
В*52 0,043 3,127 1,27 – 7,69
DQВ1*02 0,003 0,25 0,095- 0,64
Группа пациентов с ЯК старше 35 лет(n=29)
А*26 0,011 3,584 1,561 – 8,229
В*38 0,023 3,36 1,411 – 8,003
C*12 0,03 2,401 1,145 – 5,035

Диагностика ЯК после 35-летнего возраста коррелирует со значимым

повышением частоты групп аллелей HLA А*26, В*38 и С*12, причем
наличие С*12 увеличивает риск заболеть ЯК в 2,4 раза, В*38 – в 3,3, А*26
– в 3,5 раз по сравнению с контрольной группой.
Обобщенные данные по HLA-маркерам предрасположенности и
протекции к ЯК в исследованных группах приведены в таблице 9.
Опираясь на полученные результаты, можно заключить, что
общими иммуногенетическими маркерами предрасположенности к
развитию ЯК у женщин старше 35 лет, а также к хроническому
непрерывному течению ЯК являются группы аллелей А*26, В*38, C*12.
Маркерами предрасположенности к развитию ЯК является также В*58, а
у населения в возрасте младше 35 лет – В*52. Иммуногенетическими
маркерами предрасположенности к тотальному поражению кишечника и
к гормональной рефрактерности при ЯК выступают А*26 и В*38.
Характерным маркером предрасположенности к хроническому
69
непрерывному течению ЯК является DRB1*14, к гормональной
рефрактерности при ЯК – С*17. С поражением при ЯК левых отделов
ободочной кишки ассоциирована В*56, со среднетяжелым течением –
А*26, с восприимчивостью к гормональной терапии – В*52 и В*58.
Маркерами протекции к ЯК являются В*15, C*04, DRB1*07, DQB1*02; у
мужчин – В*15; у населения в возрасте младше 35 лет –DQB1*02; к
среднетяжелому течению заболевания – DRB1*07 и DQB1*02; к
гормональной рефрактерности – DRB1*07 и к ЯК с восприимчивостью к
гормональной терапии – DQB1*02 [63].

70
 Таблица 9
HLA – маркеры предрасположенности и протекции к ЯК в исследованных группах
Группа ОШ
аллелей Общая Тотальн Левостор Непрерыв Среднетя Рефрактер Восприим Мужчи Женщи Младше Старше
HLA группа с ый онний ное желое ные к чивые к ны ны 35 лет 35 лет
ЯК колит колит течение течение гормональ гормонал n= 34 n= 31 n= 36 n= 29
n= 65 n= 37 n= 25 ЯК ЯК ной ьной
n= 27 n= 57 терапии терапии
при ЯК при ЯК
n= 22 n= 43
А*26 2,58 2,59 - 4,70 2,25 6,51 - - 3,85 - 3,58
В*15 0,13 - - - - - - 0,0 - - -
В*38 2,39 3,39 - 3,69 - 4,93 - - 3,08 - 3,36
В*52 - - - - - - 3,57 - - 3,13 -
В*56 - - 5,71 - - - - - - - -
В*58 4,03 - - - - - 4,96 - - - -
С*04 0,44 - - - - - - - - - -
С*12 1,85 - - 3,18 - - - - 2,43 - 2,40
С*17 - - - - - 4,63 - - - - -
DRB1*07 0,46 - - - 0,41 0,12 - - - - -
DRB1*14 - - - 4,56 - - - - - - -
DQB1*02 0,46 - - - 0,45 - 0,46 - - 0,25 -
Если ОШ менее 1,0 - группа аллелей HLAявляется маркером протекции
Если ОШ более 1,0- группа аллелей HLA является маркером предрасположенности

71
 3.3. Особенности полиморфизма генов системы HLA при
болезни Крона
У больных БК и в контрольной группе были выявлены группы
аллелей HLA I класса (А*, В*, C*) и II класса (DRB1* и DQB1*): А*01,
А*02, А*03, А*11, А*23, А*24, А*25, А*26, А*29, А*30, А*31, А*32,
А*33, А*66, А*68, В*07, В*08, В*13, В*14, В*15, В*18, В*27, В*35,
В*37, В*38, В*39, В*40, В*41, В*44, В*46, В*47, В*48, В*49, В*50, В*51,
В*52, В*53, В*54, В*55, В*56, В*57, В*58, В*73, В*78, C*01, C*02, C*03,
C*04, C*05, C*06, C*07, C*08, C*12, C*14, C*15, C*16, C*17, C*18,
DRB1*01, DRB1*03, DRB1*04, DRB1*07, DRB1*08, DRB1*09, DRB1*10,
DRB1*11, DRB1*12, DRB1*13, DRB1*14, DRB1*15, DRB1*16, DQB1*02,
DQB1*03, DQB1*04, DQB1*05, DQB1*06.

3.3.1. Генетические особенности HLA-антигенов в общей группе

пациентов с БК
На первом этапе изучения характера распределения групп аллелей
HLA у больных БК исследование проводилось в общей группе пациентов
(n=53). Данные, полученные в исследуемой и контрольной группах,
представлены на рисунке 10 и в таблице 10.

Таблица 10
HLA – маркеры предрасположенности к БК (n=53)
Группа аллелей p ОШ ДИ
С*12 0,005 2,265 1,301-3,946

72
 0,24

Частота, в долях
0,25
0,13
0,2

0,15

0,1 р=0,005

0,05

0
С*12

Пациенты с БК Контрольная группа

Рисунок 10. Частота групп аллелей HLA в группе пациентов с БК и в

контрольной группе

Как видно из полученных результатов, группа аллелей С*12

встречается достоверно чаще у пациентов с БК, чем в контрольной
группе, увеличивая вероятность развития заболевания в 2,2 раза.

3.3.2. Генетические особенности HLA-антигенов у пациентов с БК

в зависимости от локализации поражения кишечника
По аналогии с описанным ранее исследованием, выполненным среди
больных язвенным колитом, было проведено сравнение встречаемости
групп аллелей HLA у пациентов с илеоколитом при БК и в контрольной
группе, при этом статистически значимых отличий выявлено не было.
Группы пациентов с колитом (n=16) и терминальным илеитом (n=12) не
оценивались по причине их малочисленности.

3.3.3. Генетические особенности HLA - антигенов у пациентов с

БК в зависимости от характера течения заболевания
В представленном исследовании было проведено сравнение
встречаемости групп аллелей HLA у пациентов с хроническим
73
непрерывным течением и с хроническим рецидивирующим течением с
соответствующими показателями в контрольной группе. Достоверных
отличий от контроля в подгруппе больных с хроническим непрерывным
течением БК не обнаружено.
У пациентов с хроническим рецидивирующим течением заболевания
значимо чаще, чем в контроле встречается группа С*12, в то время как
DQB1*02 – достоверно реже (рисунок 11 и таблица 11).
Частота, в долях
0,28

0,3 0,21
0,25
0,2 0,13
0,1
0,15
0,1 р=0,047
р=0,001
0,05
0
С*12 DQB1* 02

Пациенты с хроническим рецидивирующим течением БК

Контрольная группа

Рисунок 11. Частота групп аллелей HLA в группе пациентов с

хроническим рецидивирующим течением БК и в контрольной группе

Таким образом, С*12 можно рассматривать в качестве маркера

предрасположенности к хроническому рецидивирующему течению БК, а
DQB1*02 –маркера протекции к данной форме заболевания.
Таблица 11
HLA-маркеры предрасположенности и протекции к хроническому
рецидивирующему течению БК (n=30)
Группа аллелей p ОШ ДИ
С*12 0,001 2,96 1,43- 6,098
DQB1* 02 0,047 0,38 0,16- 0,94

74
 Группу пациентов с острым течением БК не оценивали в связи с ее
малочисленностью (n=2).

3.3.4. Генетические особенности HLA - антигенов у пациентов с

БК в зависимости от тяжести течения БК
Характер распределения групп аллелей HLA изучался также в
подгруппах пациентов с БК, разделенных по тяжести течения
заболевания. Подгруппа пациентов с легким течением БК не оценивалась
из-за малочисленности (n = 3).
При сравнении подгрупп пациентов с тяжелым и среднетяжелым
течением БК с контрольной группой выявлен ряд иммуногенетических
особенностей, представленных на рисунке 12 и в таблице 12.
Частота, в долях

0,33
0,35 р=0,02
0,3
0,23
0,25 р=0,049
0,18
0,2 0,13
0,13
0,15
р=0,03
0,1 0,023
0,05
0
А*03 DQB1*03 С*12

Пациенты с тяжелым течением БК

Контрольная группа
Пациенты со среднетяжелым течением БК

Рисунок 12. Частоты групп аллелей HLA в группах пациентов со

среднетяжелым, тяжелым течением БК и в контрольной группе

75
 Таблица 12
HLA-маркеры протекции и предрасположенности к тяжелому и
среднетяжелому течению БК
Группа аллелей p ОШ ДИ
Группа пациентов с БК с тяжелым течением (n = 22)
А*03 0,049 0,15 0,019-1,06
DQB1*03 0,03 0,35 0,14- 0,86
Группа пациентов с БК со среднетяжелым течением (n = 28)
С*12 0,02 2,56 1,21-5,43

Как видно из приведенных данных, для тяжелого течения БК

характерна достоверно более низкая частота DQB1*03. Также ниже
встречаемость А*03, однако доверительный интервал (ДИ) отношения
шансов (ОШ) проходит через 1, что не позволяет использовать нам
данный показатель.
У пациентов со среднетяжелым течением БК значимо чаще
встречается группа аллелей С*12, следовательно наличие в генотипе
указанной группы аллелей может служить маркером
предрасположенности к соответствующей форме течения заболевания.

3.3.5. Генетические особенности HLA-антигенов у пациентов с БК

в зависимости от фенотипического варианта заболевания
В рамках проведенного исследования была изучена частота групп
аллелей HLA в подгруппах с различными фенотипическими вариантами
БК (рисунок 13 и таблица13). Подгруппа пациентов с пенетрирующим
типом БК не оценивалась в виду ее малочисленности (n = 5).
Выявлено, что у пациентов со стриктурирующим типом БК
достоверно чаще встречаются группы аллелей А*11, В*38 и С*12,
увеличивая шансы возникновения данного типа БК в 2,5 (при С*12), 3,0
и 3,5 (при А*11 и В*38, соответственно) раза. При нестриктурирующем,
непенетрирующем типе БК частота групп аллелей В*56, С*12 и С*14
76
статистически значимо выше, в частности, при наличии в генотипе В*56
и С*14 риск возникновения именно данного фенотипического варианта
заболевания увеличивается в 5,9 и 5,8 раз, соответственно.

Частота, в долях

0,3 0,27
0,25
0,25
р=0,04
0,2 0,17 р=0,03
0,15 0,13 0,13 р=0,04 0,13
р=0,017

0,1 0,08
0,06 0,06 р=0,012
0,04
0,05 р=0,04 0,02
0,01
0
А*11 В*38 С*12 В*56 С*12 С*14

Пациенты со стриктурирующим типом БК

Пациенты с нестриктурирующим непенетрирующим типом БК
Контрольная группа

Рисунок 13. Частота групп аллелей HLA в группе пациентов со

стриктурирующим типом, в группе пациентов с
нестриктурирующим, непенетрирующим типом БК и в контрольной
группе
Таблица 13
HLA-маркеры предрасположенности к стриктурирующему (n=24), к
нестриктурирующему, непенетрирующему (n=24) типам БК
Группа аллелей p ОШ ДИ
Группа пациентов со стриктурирующим типом БК (n=24)
А*11 0,04 3,05 1,25-7,459
В*38 0,03 3,52 1,38- 9,01
С*12 0,04 2,5 1,11- 5,63
Группа пациентов с нестриктурирующим, непенетрирующим типом
БК (n=24)
В*56 0,04 5,99 1,712-20,92
С*12 0,012 2,96 1,317-6,63
С*14 0,017 5,85 1,93- 17,74

77
 3.3.6. Генетические особенности HLA - антигенов при БК в
зависимости от ответа на терапию стероидными гормонами
В зависимости от ответа на проводимую гормональную терапию при
БК был изучен характер распределения групп аллелей HLA. При
сравнении показателей в группе пациентов с гормональной
рефрактерностью к терапии при БК и контрольной группе статистически
значимых отличий не выявлено.
В группе пациентов с гормональной восприимчивостью достоверно
чаще встречается С*12, который, соответственно, ассоциирован с
предрасположенностью к данной форме заболевания (рисунок 14 и
таблица 14).

0,26
Частота, в долях

0,3
0,25 0,13

0,2
0,15
0,1 р=0,003

0,05
0
С *12
Пациенты с гормональной восприимчивостью БК
Контрольная группа

Рисунок 14. Частота групп аллелей HLA в группе пациентов с

восприимчивостью к гормональной терапии при БК и в контрольной
группе
Таблица 14
HLA-маркеры предрасположенности к гормональной
восприимчивости при БК (n=32)
Группа аллелей p ОШ ДИ
С*12 0,003 2,955 1,464-5,963

78
 3.3.7. Генетические особенности HLA-антигенов при БК в
зависимости от пола пациентов
При сравнении показателей встречаемости групп аллелей HLA у
больных БК мужчин и женщин с контрольной группой обнаружено, что
группа аллелей С*14 встречается достоверно чаще у больных мужчин
(рисунок 15 и таблица 15). При этом шанс заболеть БК для мужчин при
наличии С*14 увеличивается в 4,1 раза. При изучении характера
распределения групп аллелей HLA у женщин с БК выявлена значимо
более высокая частота С*12. Следовательно, группа аллелей С*12
является маркером предрасположенности к БК у женщин.
Частота, в долях

0,3 0,26

0,25

0,2
0,13
0,15 р=0,046

0,1 0,06 р=0,038

0,05 0,02

0
С*14 С*12
Пациенты с БК, мужчины Контрольная группа
Пациенты с БК, женщины

Рисунок 15. Частота групп аллелей HLA у мужчин с БК, у женщин с

БК и в контрольной группе
Таблица 15
HLA-маркеры предрасположенности к БК у мужчин (n=32) и у
женщин (n=21)
Группа аллелей p ОШ ДИ
Группа мужчин с БК (n=32)
С*14 0,046 4,18 1,42-12,35
Группа женщин с БК (n=21)
С*12 0,038 2,69 1,13-6,37

79
 3.3.8. Генетические особенности HLA - антигенов при БК в
зависимости от возраста установления диагноза
При изучении характера распределения групп аллелей HLA в
подгруппе пациентов с возрастом установления диагноза младше 35 лет
статистически значимых отличий от контроля обнаружено не было.
Группа пациентов с возрастом установления диагноза старше 35 лет
не изучалась по причине ее малочисленности.
Обобщенные данные по HLA-маркерам предрасположенности и
протекции к БК в исследованных группах приведены в таблице 16.
Как видно из представленных данных, общим иммуногенетическим
маркером предрасположенности к развитию БК у женщин Московского
региона является С*12. Эта же группа аллелей ассоциирована с БК со
среднетяжелым и хроническим рецидивирующим течением,
стриктурирующим, нестриктурирующим, непенетрирующим типами
заболевания, восприимчивостью к гормональной терапии.
Характерными маркерами предрасположенности к развитию БК
стриктурирующего типа являются В*38 и А*11, нестриктурирующего,
непенетрирующего типа - С*14 и В*56, являющийся характерным
маркером данной формы заболевания. С*14 выступает так же маркером
предрасположенности к БК у мужчин Московского региона.
Характерным маркером протекции к развитию хронического
рецидивирующего течения БК является DQB1*02, характерным маркером
протекции к тяжелому течению заболевания – группа аллелей DQB1*03
[62, 64].

80
 Таблица 16
HLA-маркеры предрасположенности и протекции к БК в исследованных группах
Группа ОШ
аллелей Общая Рецидив Тяжелое Средне Стриктур Нестриктур Восприимч Мужчины Женщины
HLA группа ирующее течение тяжелое ирующий ирующий, ивые к n= 32 n= 21
с БК течение БК течение тип БК непенетрир гормональн
n= 53 БК n= 22 БК n= 24 ующий тип ой терапии
n= 30 n= 28 БК при БК
n= 24 n= 32
А*11 - - - - 3,05 - - - -
В*38 - - - - 3,52 - - - -
В*56 - - - - - 5,99 - - -
С*12 2,26 2,96 - 2,56 2,5 2,96 2,95 - 2,69
С*14 - - - - - 5,85 - 4,18 -
DQB1*02 - 0,38 - - - - - - -
DQB1*03 - - 0,35 - - - - - -
Если ОШ менее 1,0 - группа аллелей HLAявляется маркером протекции
Если ОШ более 1,0- группа аллелей HLA является маркером предрасположенности

81
 3.4. Особенности полиморфизма генов системы HLA при
воспалительных заболеваниях кишечника

Как известно, язвенный колит и болезнь Крона относятся к

воспалительным заболеваниям кишечника (ВЗК), сопровождающимся
комплексным расстройством организма, в связи, с чем для выявления
иммуногенетических маркеров ВЗК нами было изучено распределение
групп аллелей HLA в общей группе пациентов.
При сравнении полученных данных с контрольными величинами
был получен ряд статистически значимых отличий, представленных на
рисунке 16 и в таблице 17.
Частота, в долях

0,25 0,23
0,21
р=0,004
0,2 р=0,001
р=0,020
р=0,007 0,13 0,15
0,14
0,15 р=0,04 0,13
р=0,021 87
0,09 0,09 0,09 0,09 р=0,006
0,1 0,08
0,06
0,04 0,04 0,05
0,04
0,05 0,03 р=0,04 р=0,018
0,01
0

Пациенты с ВЗК Контрольная группа

Рисунок 16. Частота групп аллелей HLA при ВЗК и в контрольной

группе

К ВЗК в целом выявлены маркеры предрасположенности и

протекции, наблюдаемые при каждом заболевании в отдельности, однако
исчезла достоверная значимость для группы аллелей В*58, которая
наблюдалась при ЯК. В противоположность этому появились новые
ассоциации, достигшие в общей группе статистической достоверности.

82
Так, В*52 и В*56 можно представить как маркеры предрасположенности,
а С*03 - как маркер протекции к данной группе заболеваний.

Таблица 17
HLA-маркеры предрасположенности и протекции к ВЗК (n = 118)
Группа аллелей p ОШ ДИ
А*26 0,007 2,037 1,235-3,36
В*38 0,004 2,155 1,293-3,592
В*52 0,021 2,104 1,162-3,812
В*56 0,020 3,047 1,388-6,69
С*03 0,04 0,497 0,263-0,936
С*04 0,04 0,57 0,340-0,953
С*12 0,001 2,026 1,379-2,976
DRB1*07 0,018 0,568 0,359-0,90
DQB1*02 0,006 0,545 0,357-0,831

3.4.1. Генетические особенности HLA-антигенов при ВЗК в

зависимости от характера течения заболевания
В зависимости от характера течения ВЗК были сформированы две
подгруппы пациентов: с хроническим непрерывным течением (n=48) и
хроническим рецидивирующим течением (n=42). Данные пациентов с
острым течением не использовались ввиду малочисленности данной
подгруппы (n=8).
При сравнении частоты групп аллелей HLA в подгруппе пациентов с
хроническим непрерывным течением с соответствующими показателями
в контрольной группе, было выявлено, что у больных достоверно выше
встречаемость А*26, В*38 и С*12, причем указанные группы аллелей
являются маркерами предрасположенности к заболеваниям с риском
более 2 (рисунок 17 и таблица 18).

83
 Частота, в долях
0,24
0,25
0,21
р=0,03
0,2

0,15 р=0,033 р=0,047 0,13 0,13

0,11
0,1 0,1
0,1
0,06
0,04 0,04 р=0,007 р=0,005
0,05

0
А*26 В*38 С*12 С*04 DQB1*02
Пациенты с хроническим непрерывным течением ВЗК
Пациенты с хроническим рецидивирующим течением ВЗК
Контрольная группа

Рисунок 17. Частота групп аллелей HLA с хроническим

непрерывным течением, с хроническим рецидивирующим течением
ВЗК и в контрольной группе
Таблица 18
HLA-маркеры предрасположенности к хроническому непрерывному
течению ВЗК и протекции к хроническому рецидивирующему
течению ВЗК
Группа аллелей p ОШ ДИ
Группа пациентов с хроническим непрерывным течением ВЗК (n = 48)
А*26 0,033 2,476 1,21-5,068
В*38 0,047 2,437 1,157-5,134
С*12 0,007 2,298 1,285-4,111
Группа пациентов с хроническим рецидивирующим течением ВЗК (n = 62)
С*04 0,03 0,40 0,18-0,89
DQB1*02 0,005 0,41 0,22-0,75

При хроническом рецидивирующем течении ВЗК выявлены только

маркеры протекции к данной форме заболевания – группы аллелей С*04
и DQB1*02.

84
 3.4.2. Генетические особенности HLA-антигенов при ВЗК в
зависимости от тяжести течения заболевания
В зависимости от тяжести течения ВЗК пациенты были разделены на
подгруппы с тяжелым (n = 27) и среднетяжелым течением (n = 85). При
изучении характера распределения групп аллелей HLA в данных
подгруппах были выявлены некоторые особенности (рисунок 18, таблица
19). Так, среди пациентов с тяжелым течением ВЗК А*26 встречается
достоверно чаще, чем в контрольной группе, следовательно, группа
аллелей А*26 ассоциирована с предрасположенностью к ВЗК с тяжелым
течением. Также установлено, что В*38 и В*56 ассоциированы с
предрасположенностью, а С*04, DRB1*07 и DQB1*02 – с протекцией к
ВЗК со среднетяжелым течением.
Частота, в долях

0,3 0,26
0,25 0,21 0,21
0,2 р=0,03 р=0,049
0,13 0,13 0,13 0,13 0,14 0,14
0,15 р=0,008
0,09 р=0,01
0,1 0,07 0,08
р=0,008
0,04 0,04 0,04 р=0,003
0,05 р=0,04 0,01 р=0,04
0
А*26 С*12 В*38 В*56 С*04 С*12 DRB1*07 DQB1*02

Пациенты с тяжелым течением ВЗК

Пациенты со среднетяжелым течением ВЗК
Контрольная группа

Рисунок 18. Частота групп аллелей HLA при тяжелом,

среднетяжелом течении ВЗК и в контрольной группе

85
 Таблица 19
HLA-маркеры предрасположенности к тяжелому и среднетяжелому
течению ВЗК
Группа аллелей p ОШ ДИ
Группа пациентов с тяжелым течением ВЗК (n = 27)
А*26 0,03 3,29 1,37-7,913
С*12 0,04 2,36 1,097-5,093
Группа пациентов со среднетяжелым течением ВЗК (n = 85)
В*38 0,008 2,26 1,262-4,057
В*56 0,01 3,76 1,627- 8,688
С*04 0,049 0,52 0,28- 0,968
С*12 0,003 1,97 1,258- 3,085
DRB1*07 0,04 0,54 0,307- 0,957
DQB1*02 0,008 0,50 0,303- 0,83

Частота групп аллелей С*12 статистически значимо повышена в

обеих подгруппах пациентов, причем шансы развития тяжелого течения
находится на уровне 2,3, среднетяжелого – 1,9. Указанное явление
обусловлено, по-видимому, тем, что предрасположенность к ВЗК в целом
ассоциирована с наличием в генотипе С*12.

3.4.3. Иммуногенетические особенности HLA-антигенов при ВЗК в

зависимости от ответа на гормональную терапию
При сравнении данных, полученных в подгруппе пациентов с
гормональной рефрактерностью при ВЗК, с контролем выявлено, что
среди больных группы аллелей А*26, В*38 и С*07 встречаются
достоверно чаще, в то время как группы аллелей С*06 и DRB1*07 – реже
(рисунок 19 и таблица 20).
Пациенты с гормональной восприимчивостью характеризуются
несколько иными иммуногенетическими особенностями. Так, группы
аллелей B*52, B*56, C*12 и DRB1*04 могут быть отнесены к маркерам

86
 предрасположенности к гормональной восприимчивости, а DQB1*02 – к
маркерам протекции.
Частота, в долях

0,5
0,41
0,4 р=0,005 р=0,005
р=0,01 р=0,001
р=0,01
0,3 0,26
р=0,01 0,23 0,21
р=0,02
р=0,03
0,2 0,13 0,12 0,13 0,14 р=0,02 0,13 0,14
р=0,04 0,08
0,04 0,08 0,04
0,1 0,04 0,05 0,03 0,04
0,03 0,01
0

Пациенты с гормональной рефрактерностью к терапии при ВЗК

Пациенты с гормональной восприимчивостью к терапии при ВЗК
Контрольная группа

Рисунок 19. Частота групп аллелей HLA в подгруппах пациентов с

гормональной рефрактерностью, с гормональной восприимчивостью
и в контрольной группе
Таблица 20
HLA-маркеры предрасположенности и протекции к определенному
ответу на гормональную терапию при ВЗК
Группа аллелей p ОШ ДИ
Группа пациентов с гормональной рефрактерностью при ВЗК (n=43)
A*26 0,005 3,23 1,598-6,55
В*38 0,02 2,80 1,34-5,95
С*06 0,013 0,23 0,07-0,75
С*07 0,04 1,98 1,06-3,71
DRB1*07 0,01 0,26 0,09-0,73
Группа пациентов с гормональной восприимчивостью при ВЗК
(n=75)
В*52 0,005 2,98 1,55-5,71
В*56 0,02 3,64 1,49-8,91
С*12 0,001 2,32 1,45-3,71
DQB1*02 0,01 0,48 0,28-0,83
DQB1*04 0,03 2,22 1,14-4,33

87
 3.4.4. Генетические особенности HLA-антигенов при ВЗК в
зависимости от пола пациентов
В настоящей работе проведено сравнительное исследование
распределения групп аллелей HLA среди мужчин (n=66) и женщин (n=52)
с ВЗК и в контрольной группе. В результате выявлены статистически
значимые отличия, представленные на рисунке 20 и в таблице 21.
Частота, в долях 0,25
0,25
0,21
0,2 р=0,03
р=0,003 р=0,003
р=0,04 0,14
0,15 0,13
0,12 0,12 0,12

0,076 р=0,001
0,1 0,07 р=0,03

0,04 0,04
0,05 0,03

0
В*52 DRB1*07 DQB1*02 А*26 В*38 С*12
Пациенты с ВЗК, мужчины Пациенты с ВЗК, женщины Контрольная группа

Рисунок 20. Частота групп аллелей HLA при ВЗК у мужчин, женщин
и в контрольной группе
Таблица 21
HLA-маркеры предрасположенности и протекции к ВЗК у
мужчин(n=66) и у женщин (n=52)
Группа аллелей p ОШ ДИ
Группа мужчин с ВЗК (n=66)
В*52 0,04 2,47 1,19-5,13
DRB1*07 0,03 0,45 0,23-0,89
DQB1*02 0,03 0,53 0,30-0,93
Группа женщин с ВЗК (n=52)
А*26 0,003 2,822 1,449-5,496
В*38 0,003 3,168 1,625-6,177
С*12 0,001 2,533 1,451-4,42

Как видно из приведенных данных, у мужчин служат маркерами

предрасположенности к ВЗК В*52, протекции – DRB1*07 и DQB1*02, в
88
 то время как у женщин обнаружены только маркеры
предрасположенности, которыми являются А*26, В*38 и С*12. Следует
отметить, что подобные результаты наблюдались и в общей группе
больных ВЗК.

3.4.5. Генетические особенности HLA - антигенов при ВЗК в

зависимости от возраста установления диагноза
В зависимости от возраста установления диагноза все пациенты с
ВЗК были разделены на 2 подгруппы: младше 35 лет (n = 73) и старше 35
лет (n = 45). При сравнении встречаемости групп аллелей HLA в
подгруппе пациентов с диагностикой ВЗК до 35 лет и в контрольной
группе установлено, что у больных значимо чаще встречается В*52, и
достоверно реже – DQB1*02 (рисунок 21, таблица 22).
Частота, в долях

0,3 0,28

0,25 0,21
0,2 р=0,003
р=0,03 0,14 р=0,02
0,15 0,13 0,13
10,11 р=0,01
0,1 0,07 1 р=0,001
р=0,007 0,06
0,03 0,04 0,04
0,05 0,01

0
В*52 DQB1*02 А*26 В*38 В*56 С*12
Пациенты с ВЗК, с возрастом младше 35 лет
Пациенты с ВЗК, с возрастом старше 35 лет
Контрольная группа

Рисунок 21. Частота групп аллелей HLA при ВЗК с возрастом

установления диагноза младше 35 лет, старше 35 лет и в контрольной
группе

В подгруппе пациентов с выявлением ВЗК в возрасте старше 35 лет

обнаружено, что А*26, В*38, В*56 и С*12 встречаются достоверно чаще

89
и, следовательно, являются маркерами предрасположенности к более
позднему развитию заболевания.
Таблица 22
HLA-маркеры предрасположенности и протекции к ВЗК при
выявлении заболевания в возрасте младше 35 лет и старше 35 лет
Группа аллелей p ОШ ДИ
Пациенты с ВЗК младше 35 лет (n=73)
В*52 0,03 2,48 1,24-4,99
DQB1*02 0,007 0,46 0,27-0,81
Пациенты с ВЗК старше 35 лет (n=45)
А*26 0,021 2,69 1,31-5,54
В*38 0,003 3,42 1,69-6,89
В*56 0,01003 5,24 1,96-14,01
С*12 0,001 2,83 1,51-5,13

Обобщенные данные по HLA-маркерам предрасположенности и

протекции к ВЗК в исследованных группах приведены в таблице 23.

Таким образом, в ходе проведенного исследования установлен ряд

иммуногенетических маркеров предрасположенности к развитию ВЗК. К
их числу относятся группы аллелей А*26, В*38, C*12, которые чаще
обнаруживаются у женщин с ВЗК с более поздним развитием
заболевания, а также при хроническом непрерывном течении ВЗК; В*52 и
В*56, которые также маркируют восприимчивость к гормональной
терапии; В*52, встречающийся чаще у мужчин с ранним установлением
диагноза; В*56, выступающий одновременно маркером среднетяжелого
течения болезни и развития заболевания в старшем возрасте. Маркерами
предрасположенности к тяжелому течению ВЗК являются А*26 и C*12; к
среднетяжелому течению – В*38 и C*12; к гормональной рефрактерности
– А*26, В*38 и С*07, являющийся характерным маркером
рефрактерности к гормональной терапии при ВЗК; к гормональной
восприимчивости – C*12 и характерный маркер данной формы ВЗК -
90
DQB1*04. Маркерами протекции к развитию ВЗК выступают С*03, С*04,
DRB1*07, DRB1*02, причем С*03 является характерным маркером
протекции к ВЗК; к хроническому рецидивирующему течению
заболевания – С*04 и DQB1*02; среднетяжелому течению – С*04,
DQB1*02 и DQB1*07; к гормональной рефрактерности – DQB1*07 и
С*06, являющийся характерным маркером протекции к данной форме
заболевания; к гормональной восприимчивости – DQB1*02. Маркеры
протекции к ВЗК для мужчин – DQB1*02 и DQB1*07; для населения в
возрасте младше 35 лет –DQB1*02 [61].

91
 Таблица 23
HLA-маркеры предрасположенности и протекции к ВЗК в исследованных группах
Группа ОШ
аллелей Общая Непрер Рецидивир Тяжелое Средне Рефрактерные Восприимчив Муж Женщ Младше 35 Старше
HLA группа с ывное ующее течение тяжелое к ые к чины ины лет 35 лет
ВЗК течение течение ВЗК течение гормональной гормональной n= 66 n= 52 n= 72 n= 45
n= 118 ВЗК ВЗК n= 27 ВЗК терапии при терапии при
n= 48 n= 62 n= 85 ВЗК n= 43 ВЗК
n= 75
А*26 2,04 2,48 3,29 3,23 2,82 2,69
В*38 2,16 2,44 2,26 2,80 3,17 3,42
В*52 2,10 2,98 2,47 2,48
В*56 3,05 3,76 3,64 5,24
С*03 0,50
С*04 0,57 0,40 0,52
С*06 0,23
С*07 1,98
С*12 2,03 2,30 2,36 1,97 2,32 2,53 2,83
DRB1*07 0,57 0,54 0,26 0,45
DQB1*02 0,54 0,41 0,50 0,48 0,53 0,46
DQB1*04 2,22
Если ОШ менее 1,0 - группа аллелей HLAявляется маркером протекции
Если ОШ более 1,0- группа аллелей HLA является маркером предрасположенности

92
 ***
Обобщая полученные данные, можно говорить о существовании
групп аллелей HLA, ассоциированных с ВЗК в целом, и, в частности с ЯК
и БК, с определенными формами и тяжестью течения заболевания, ответом
на гормональную терапию, полом и возрастом пациентов.
Установлено, что ЯК и БК имеют как общие ассоциации с HLA-
антигенами, подтвержденные в общей группе больных ВЗК, что,
возможно, обусловлено общими чертами патогенеза заболеваний, так и
специфичные для каждого заболевания группоспецифичные варианты
генов HLA, что может быть связано с различиями в проявлении данных
заболеваний [61, 62, 63, 64].
С предрасположенностью к заболеванию ВЗК в целом, ЯК и БК в
частности, ассоциирована группа аллелей С*12, с ВЗК и ЯК – А*26, В*38.
В*58 ассоциирована с ЯК, В*52 и В*56 – с ВЗК.
Протективные свойства к ВЗК и ЯК ассоциированы с группами
аллелей С*04, DRB1*07 и DQB1*02. ЯК также отрицательно коррелирует
с В*15. С*03 является характерным маркером протекции к ВЗК.
С тотальным поражением толстого кишечника при ЯК
ассоциированы группы аллелей А*26 и В*38. Характерным маркером
левостороннего колита при ЯК является В*56.
Характерными маркерами предрасположенности к развитию БК
стриктурирующего типа являются В*38 и А*11, нестриктурирующего,
непенетрирующего типа - С*14 и В*56, являющийся характерным
маркером данной формы заболевания. Группа аллелей С*12 ассоциирована
с развитием двух вышеописанных типов БК, что отражает ассоциацию
С*12 с БК в целом.
Значительный практический интерес представляет тот факт, что
некоторые из групп аллелей могут служить маркерами прогноза течения
рассматриваемых заболеваний, и, в частности, ответа на проводимую
терапию. Так, с гормональной рефрактерностью ассоциированы группы
аллелей: при ВЗК – А*26, В*38 и С*07, при ЯК – А*26, В*38 и,
дополнительно, С*17. С*07 и С*17 являются характерными маркерами
предрасположенности к гормональный рефрактерности при ВЗК и ЯК,
соответственно. С протективными свойствами к гормональной
рефрактерности ассоциированы С*06, являющийся характерным маркером
протекции к данной форме при ВЗК, DRB1*07 при ВЗК и ЯК.
Маркерами восприимчивости к гормональной терапии служат
группы аллелей В*52 (при ВЗК и ЯК), С*12 (при ВЗК и БК), В*56 и
DQB1*04 (при ВЗК), В*58 (при ЯК). DQB1*04 является характерным
маркером гормональной чувствительности при ВЗК. Маркером протекции
к развитию чувствительной к гормональной терапии формы ВЗК и ЯК, в
частности, можно считать DQB1*02.
Относительно ассоциации групп аллелей HLA с тяжестью и
характером течения заболеваний выявлены следующие закономерности.
Группа аллелей DQB1*03 при БК достоверно реже выявляется у пациентов
с тяжелым течением заболевания и является характерным маркером
протекции к данной форме БК. Группы аллелей С*04, DRB1*07, DQB1*02,
отрицательно ассоциированные со среднетяжелым течением ВЗК, и
DRB1*07 и DQB1*02 отрицательно ассоциированные с этой же формой
течения ЯК, отражают общие протективные свойства данных групп
аллелей к заболеваниям в целом. Маркерами предрасположенности к
среднетяжелому течению ВЗК, как и к ВЗК в общем, могут являться В*38,
В*56 и С*12. С*12 ассоциирован с этой же формой течения БК.
Достоверное увеличение частоты указанных групп аллелей именно в этих
подгруппах пациентов, возможно, объясняется тем, что пациенты со
среднетяжелым течением заболеваний составляют большинство в
проведенном исследовании.
Группа аллелей DRB1*14 является характерным маркером
хронического непрерывного течения ЯК. Группы аллелей A*26 и B*38,
ассоциированные с хроническим непрерывным течением ЯК и ВЗК,
94
отражают ассоциацию данных групп аллелей с предрасположенностью к
ЯК и ВЗК в общем. Аналогичные закономерности обнаружены при
хроническом рецидивирующем течении, где группы аллелей DQB1*02 при
ВЗК и БК, и С*04 при ВЗК отрицательно ассоциированы с данной формой
течения заболеваний и заболеваниями в общем.
Также выявлено, что группа аллелей А*26 достоверно чаще
встречается при тяжелом течении ВЗК и, в то же время, при
среднетяжелом течении ЯК. Аналогичная ситуация наблюдается в
отношении группы аллелей С*12, которая ассоциирована как с тяжелым,
так и со среднетяжелым течение ВЗК, и со среднетяжелым течением БК.
Также С*12 ассоциирована с хроническим непрерывным течением ЯК и
ВЗК, а в случае БК данная группа аллелей ассоциирована с хроническим
рецидивирующим течением. Указанные явления могут объясняться
потенциально прогрессирующим течением заболеваний, приводящим без
лечения к утяжелению состояния и сокращению ремиссий вплоть до
постоянного наличия симптомов заболевания. Вместе с тем, при ранней
диагностике заболевания и применении современных методов лечения
удается добиться стихания воспалительного процесса, наступления
ремиссии заболевания, что, соответственно, обусловливает возможность
отнесения пациента к иной клинической группе. Исходя из
вышесказанного, использование групп аллелей А*26 и С*12 в качестве
маркеров соответствующих форм течения заболевания затруднительно.
Тем не менее, достоверно более высокая частота А*26 и С*12 у данных
групп пациентов подтверждает их ассоциацию с заболеваниями в целом и
позволяет отнести данные маркеры к общим маркерам
предрасположенности к ЯК, БК и ВЗК, соответственно.
У женщин выявлены значительные положительные ассоциации
групп аллелей А*26 и В*38 с возникновением ВЗК и ЯК, а С*12 – с
возникновением ВЗК, ЯК и БК. У мужчин маркером предрасположенности

95
к ВЗК является группа аллелей В*52, к БК – С*14. Маркерами протекции к
ВЗК у мужчин могут служить DRB1*07 и DQB1*02, к ЯК – В*15.
С развитием и выявлением ВЗК и ЯК в возрасте младше 35 лет
обнаружена положительная ассоциация группы аллелей В*52. Маркером
протекции к возникновению ВЗК и ЯК в данной возрастной группе можно
считать DQB1*02. Группы аллелей А*26, В*38 и С*12 ассоциированы с
развитием и выявлением ВЗК и ЯК в возрасте старше 35, в то время как
В*56 маркирует позднее развитие ВЗК в целом.
Таким образом, A*26, B*38 и C*12 можно отнести к маркерам
предрасположенности к развитию ЯК и ВЗК у женщин старше 35 лет, B*52
– к маркерам предрасположенности к развитию ВЗК у мужчин до 35 лет.
DQB1*02 является маркером протекции к развитию ВЗК у мужчин до 35
лет [61, 62, 63, 64].
Следует обратить внимание на следующую особенность: некоторые
группы аллелей HLA проявили ассоциацию только с объединенной
группой больных ВЗК, в то время как в группах пациентов с ЯК и БК
достоверных ассоциаций этих групп аллелей не отмечено. Однако имеется
тенденция к появлению различий в частоте групп аллелей HLA в опытных
и контрольной группах, не достигшая статистической достоверности. Так,
В*52 отнесен к маркерам предрасположенности к ВЗК (р = 0,021) и
встречается чаще при ЯК (р = 0,09) и у мужчин с БК (р = 0,08). В*56 также
ассоциирован с предрасположенностью к ВЗК и встречается недостоверно
чаще при БК (р = 0,08) и у женщин при ЯК (р = 0,07). С*07 достоверно
чаще встречается при рефрактерности к гормональной терапии при ВЗК (р
= 0,04), и также имеется тенденция к увеличению частоты данной группы
аллелей у больных с гормональной рефрактерностью к терапии при БК (р
= 0,09). Аналогичная ситуация наблюдается в отношении группы аллелей
DQB1*04, достоверно чаще встречающейся при восприимчивости к
гормональной терапии у больных ВЗК (р = 0,03), и недостоверно чаще –
при этой же форме ЯК (р = 0,07). При рефрактерности к гормональной
96
терапии при ЯК С*06 встречается недостоверно реже (p = 0,055), в то
время, как в такой же группе больных с ВЗК уровень достоверности был
достигнут (p = 0,013). С*03, выделенный как маркер протекции к ВЗК (р =
0,04), встречается реже, однако также недостоверно, при БК (р = 0,09).
Таким образом, можно утверждать, что указанные группы аллелей HLA
ассоциированы с патогенезом ВЗК в целом, и БК и ЯК имеют общие
черты патогенеза. Вышесказанное нашло отражение при анализе группы
больных ВЗК, когда после объединения подгрупп тенденции к увеличению
или уменьшению частоты некоторых групп аллелей HLA были
подтверждены, т.е. уровень достоверности в различиях был достигнут.
Таким образом, В*52, В*56, С*07, DQB1*04, С*06 и С*03 могут быть
отнесены к маркерам предрасположенности или протекции к ВЗК,
рефрактерности или восприимчивости к гормональной терапии при ВЗК
[61, 62, 63, 64].
Несмотря на многочисленные исследования, механизм участия HLA-
системы в возникновении ЯК и БК окончательно не выяснен. Наиболее
распространена теория о нарушении иммунологической толерантности к
собственным антигенам через аберрантную презентацию Т-лимфоцитам в
составе молекул HLA собственных пептидов или чужеродных пептидов, на
которые не должен развиваться иммунный ответ [58, 69, 95, 112].
Вероятно, имеет место наличие общего иммуногенного эпитопа у
микроорганизмов и человека, а так же хроническая внутриклеточная
инфекция, в том числе вирусная [116, 156, 162, 165]. В итоге может
происходить презентация антигена, схожего с собственным, или
измененного аутоантигена, в составе молекул HLA Т-лимфоцитам и запуск
каскада аутоиммунных реакций [56, 79, 107, 188]. От уникального набора
HLA-антигенов может зависеть характер иммунного ответа, а также
вероятность развития аутоиммунной агрессии [62, 70, 110, 122, 151].
Как известно, частотное распределение аллельных вариантов HLA
генов неоднородно в разных популяциях мира [12, 84, 92, 93, 111, 146, 147,
97
159, 160, 161, 179]. Среди населения России также имеются свои
особенности, причем у представителей разных этнических групп,
проживающих в разных регионах России, имеются различия в частотах
аллелей HLA [12, 13, 21, 23, 24, 34, 35, 54, 73, 75, 108, 132]. Вероятно,
именно данный факт обусловливает ассоциацию ЯК, БК и ВЗК с разными
группами и аллелями HLA, обнаруженную исследователями из различных
стран [62].
Так, в исследованиях, проведенных в Европе и Северной Америке, с
развитием ВЗК установлены положительные ассоциации с наличием в
генотипе определенных HLA – генов II класса. В частности, ЯК и БК в
различных странах указанных регионов наиболее часто ассоциируются с
наличием HLA-DRB1*0103, что воспроизводится в многочисленных
исследованиях [106, 107, 109, 115, 129, 155, 175, 185]. БК также
ассоциирована у европейцев с DRB1*07 [1, 106, 155], а ЯК – с DRB1*15
[88, 107, 109,142]. В Великобритании выявлена отрицательная ассоциация
ЯК с DQB*0201 [166]. Эти данные соответствуют результатам,
полученным в нашем исследовании.
В азиатских странах данные несколько противоречивы. Имеются
данные, как схожие с европейскими, так и отличные от них. В Китае
маркерами ЯК являются HLA-DRB1*07 [123] и Cw*07 [193], в корейской
популяции - HLA-DR2 и DRB1*1502 [182]. В Японии наличие гаплотипа
Cw*1202-B*5201-DRB1*1502 снижает риск возникновения БК [148], в то
время как положительная ассоциация наблюдается с HLA-DRB1*0405 и
DRB1*0410 [124]. Напротив, в Китае С*12 считается маркером развития
БК, что согласуется с данными нашего исследования [193].
В России работ, посвященных изучению распределения HLA генов у
больных БК и ЯК крайне мало, и, как отмечалось ранее, большинство из
них выполнено с применением серологических методов типирования [62].
В одном из исследований, проведенных в Московском регионе, ЯК
положительно ассоциирован с Cw4, DR3 и DR5, отрицательно – с A19 и
98
DR4 [44]. По данным другого исследования В13 и Cw4 ассоциированы с
развитием ЯК, а А9 и DR4 отнесены к маркерам устойчивости к
заболеванию [7]. Также есть работа, согласно которой HLA-маркерами
резистентности к ЯК являются антигены А19, В8, В51 и В62, а DRB1*01
представлен как маркер предрасположенности к ЯК [39]. В Ростове-на-
Дону у пациентов с ЯК были выявлены положительные ассоциации с
группами аллелей A29, B13, DR3, отрицательные – с A2, B12, DR4 [48].
БК в Московском регионе по данным одного из исследований
положительно ассоциирована с В14 и А3, отрицательно - с А19 [44], по
данным другого исследования положительная ассоциация найдена для А3,
отрицательная - для DR1 [7]. В18 и DRB1*01 представлены как маркеры
БК еще одними авторами [39].
Как видно, в разных регионах России полученные результаты
значительно отличаются. Данные по Московскому региону также
противоречивы, а учитывая различную номенклатуру HLA – системы при
серологическом и генетическом типировании, обобщение результатов
нашего исследования и литературных данных затруднительно [62].
Таким образом, проведенное нами исследование показало, что
определенные группы аллелей HLA тесно ассоциированы с патогенезом
ЯК, БК и ВЗК у взрослого населения Московского региона. Выявлены
иммуногенетические факторы предрасположенности и протекции к
возникновению заболевания в целом, а также зависящие от пола и
возраста, клинической формы и эффективности лечения. Наличие
некоторых групп аллелей HLA в генотипе может увеличивать риск
заболевания у пациентов определенного возраста и пола, при этом не
оказывая влияния на другое население Московского региона. Полученные
результаты позволяют рассматривать патогенез ЯК и БК в частности, и
ВЗК в целом у населения Московского региона с позиции
иммуногенетических механизмов, а различие в полученных данных у
пациентов разных этнических групп указывает на необходимость
99
проведения исследований полиморфизма генов HLA-системы в различных
популяциях. Представленные данные о HLA-маркерах
предрасположенности и протекции к ЯК, БК и ВЗК могут представлять
значительный научный и практический интерес при проведении медико-
генетического консультирования, разработке дополнительных критериев
диагностики ЯК и БК, прогнозировании течения заболеваний и
возможного ответа на лечение.

100
 ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Результаты проведенного исследования позволяют подвести

следующие итоги:

1. При исследовании различных подгрупп пациентов с ВЗК, ЯК и БК,

разделенных по полу, возрасту возникновения заболеваний, характеру
и тяжести течения заболеваний, распространѐнности поражения и
ответу на проводимую терапию, и контрольной группы обнаружены
различия в частоте групп аллелей HLA.
2. Группы аллелей HLA А*26, B*38 и С*12 являются общими маркерами
предрасположенности к ЯК у женщин старше 35 лет. Среди указанных
групп аллелей обнаружены маркеры предрасположенности к
хроническому непрерывному течению заболевания, к тотальному
колиту и рефрактерности к гормональной терапии при ЯК (А*26 и
B*38). B*58, являющийся маркером предрасположенности к ЯК, и
B*52 отнесены к маркерам восприимчивости к гормональной терапии,
B*56 – характерный маркер левостороннего колита, В*52 ассоциирован
с развитием ЯК в возрасте до 35 лет. Также выявлены характерные
маркеры предрасположенности к хроническому непрерывному
течению заболевания (DRB1*14), и к рефрактерности к гормональной
терапии при ЯК (С*17).
3. Маркерами протекции к развитию ЯК являются группы аллелей В*15,
C*04, DRB1*07 и DQB1*02, причем В*15 выступает характерным
маркером протекции к развитию ЯК у мужчин, DQB1*02 – у лиц
младше 35 лет, DRB1*07 – к рефрактерности к гормональной терапии.
4. С развитием БК у женщин и с восприимчивостью к гормональной
терапии при данном заболевании ассоциирована группа аллелей С*12.
К характерным маркерам стриктурирующего типа БК относятся В*38 и
А*11. Маркерами нестриктурирующего, непенетрирующего типа
101
 являются группы аллелей В*56 и С*14, причем С*14 также
ассоциирована с риском развития БК у мужчин. Характерными
маркерами протекции к развитию БК с хроническим рецидивирующим
течением и тяжелым течением являются DQB1*02 и DQB1*03,
соответственно.
5. Группы аллелей A*26, B*38 и С*12 определены как маркеры
предрасположенности к ВЗК у женщин в возрасте старше 35 лет.
Выявлены маркеры предрасположенности к хроническому
непрерывному течению заболевания (A*26 и B*38), рефрактерности
(A*26, B*38) и восприимчивости (B*52, B*56, С*12 ) к гормональной
терапии. B*52 ассоциирован с развитием ВЗК у мужчин в возрасте до
35 лет. С развитием ВЗК у лиц старше 35 лет ассоциирована группа
аллелей B*56. Характерными маркерами рефрактерности и
восприимчивости к гормональной терапии при ВЗК являются С*07 и
DQB1*04, соответственно.
6. Группа аллелей DRB1*07 отрицательно ассоциирована с развитием
ВЗК у мужчин и с рефрактерностью к гормональной терапии при ВЗК,
DQB1*02 – с развитием ВЗК у мужчин младше 35 лет. С*04 и
DQB1*02 выступают маркерами протекции к ВЗК с хроническим
рецидивирующим течением, С*03 является характерным маркером
протекции к ВЗК, С*06 – характерным маркером протекции к развитию
рефрактерности к гормональной терапии при ВЗК.

Практические рекомендации
1. При установлении иммуногенетических маркеров ЯК, БК и ВЗК
необходимо учитывать популяционную принадлежность пациента.
2. Пациентов, у которых выявлены генетические HLA-маркеры
предрасположенности к возникновению ВЗК, и, в частности, к ЯК и
БК, рекомендуется относить к группе риска развития
соответствующего заболевания при генетическом прогнозировании.

102
3. Генотип по генам HLA у больных ВЗК в общем, БК и ЯК в частности,
рекомендуется учитывать при прогнозировании течения заболевания,
возможного развития рефрактерности или восприимчивости к
гормональной терапии с коррекцией тактики ведения пациентов.
4. Полученные данные распределения иммуногенетических HLA-
маркеров у пациентов с ВЗК, ЯК и БК характерны для славянского
населения Московского региона и могут быть рекомендованы для
использования при проведении подобных исследований в
медицинских учреждениях Российской Федерации.

103
 СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

БК - болезнь Крона
ВЗК – воспалительные заболевания кишечника
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
ДИ – доверительный интервал
ОШ - отношение шансов
ПЦР – полимеразная цепная реакция
ЯК – язвенный колит
CD – кластер дифференцировки (Cluster of differentiation)
HLA – человеческие лейкоцитарные антигены (Human leukocyte antigen)
Ig – иммуноглобулин
MHC – главный комплекс гистосовместимости (Major histocompatibility
complex)
SSO – Sequence Specific Oligonucleotides
SSP – Sequence Specific Primer

104
 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Адлер Г. Болезнь Крона и язвенный колит. / Г. Адлер. - М.:

ГЕОТАР-МЕД, 2001. – 500 с.
2. Балкарова, Е. О. Вирусно-бактериальный дисбиоз и клинико-
морфологические изменения респираторного и желудочно-
кишечного тракта при атопическом синдроме / Е. О. Балкарова, А.
Г. Чучалин, Н. М. Грачева и др. // Пульмонология. – 1998. - №2. -
С.47-53.
3. Барановский, А.Ю. HLA-антигены I и II класса при аутоиммунных
заболеваниях печени в северо-западном регионе России / А.Ю.
Барановский, У.А. Мительглик, К.Л. Райхельсон [и д.р.] // Вестник
Санкт-Петербургской академии последипломного образования. –
2010. - № 2 (4). - С. 55 - 58.
4. Барановский, А.Ю. Достижения и перспективы изучения
функциональных и воспалительных заболеваний кишечника в
СПбМАПО / А.Ю. Барановский, В.И. Симаненков // Вестник
Санкт-Петербургской медицинской академии последипломного
образования. – 2010. - №2 (2). - С. 121-134.
5. Барановский, А.Ю. Можно ли предвидеть неблагоприятное течение
язвенного колита? / А.Ю. Барановский, Э.А. Кондрашина, А.Г.
Харитонов // Вестник Северо-западного государственного
медицинского университета им. И.И. Мечникова. - 2012. - № 4 (1). –
С. 41-47.
6. Барановский, А.Ю. Полиморфизм гена TNF-α у пациентов с
язвенным колитом / А.Ю. Барановский, Э.А. Кондрашина, А.Г.
Харитонов [и др.] // Вестник Санкт-Петербургской медицинской
академии последипломного образования. - 2011. - № 3 (3). – С. 41-
45.

105
7. Белоусова, Е.А. Резистентные формы воспалительных заболеваний
кишечника: автореф. дис…д.м.н. / Е.А. Белоусова; М., 1998. – 38 с.
8. Белоусова, Е.А. Язвенный колит и болезнь Крона / Е.А. Белоусова.
– Тверь: ООО «Издательство «Триада», 2002. – 128 с.
9. Бельмер, С.В. Значение цитокинов в патогенезе воспалительных
заболеваний толстой кишки у детей / С.В. Бельмер, А.С.
Симбирцев, О.В. Головенко [и др.] // Российский медицинский
журнал. – 2003. - № 11 (3). – С. 116-20.
10.Богатырева, О.Е. Морфологическая диагностика неспецифического
язвенного колита и болезни Крона: уч. пособие / О.Е. Богатырева. –
М.: РМАПО, 1997. – 19с.
11.Бодрягина, Е.С. Клинико-эпидемиологические показатели
воспалительных заболеваний кишечника по Республике Татарстан /
Е.С. Бодрягина, Д.И. Абдулганиева, А.Х. Одинцова // Лечащий
врач. Гастроэнтерология. – 2013. - № 7. – С. 25-32.
12.Болдырева, М.Н. HLA (класс II) и естественный отбор.
«Функциональный» генотип, гипотеза преимущества
«функциональной» гетерозиготности: автореферат дис. ... доктора
медицинских наук: 14.00.36 / Болдырева М. Н. - Москва, 2007. - 47
с.
13.Борисова, Л.В. Иммуногенетические особенности чувашской
популяции: дис... канд. мед. наук: 14.00.36 / Л.В. Борисова. – М. –
2008. – 136с.
14.Бочкова Н.П. Генетические основы болезней кишечника / Н.П.
Бочкова // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии,
колопроктологии. – 1999. - № 6. – С. 7 - 13.
15.Бурковская, В.А. Нарушение микробиоценоза кишечника при
хронических воспалительных заболеваниях и абсорбционная
функция тонкой кишки / В.А. Бурковская, Э.И. Белобородова, Л.А.

106
 Акимова [и др.] // Сибирский медицинский журнал. – 2009. -
№24(4). – С. 40-45.
16.Валуйских, Е.Ю. Клинико-генетические аспекты воспалительных
заболеваний кишечника / Е. Ю. Валуйских, И.О. Светлова, С.А.
Курилович [и др.] // Российский журнал гастроэнтерологии,
гепатологии, колопроктологии. – 2008. - № 18 (6). – С. 68 – 74.
17.Водилова, О.В. Клинико-диагностические параллели при
осложненных и неосложненных формах болезни Крона у детей /
Водилова О.В., Мазанкова Л.Н., Халиф И.Л // Российские
медицинские вести. – 2003. - № 4. – С. 35-42.
18.Воробьев, Г.И. Неспецифические воспалительные заболевания
кишечника / Г.И. Воробьев, И.Л. Халиф. - М.: Миклош, 2008. –
400с.
19.Галактионов, В.Г. Иммунология / В.Г. Галактионов. – М.: Изд-во
МГУ, 1998. – 480 с.
20.Гланц, С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц. - М.:
Практика, 1998. – 459 с.
21.Голованова, О.В. Сравнительный анализ иммуногенетических
структур популяций европеоидного и монголоидного
происхождения, проживающих в сибирском регионе: автореф.
дис… канд. биол. наук: 14.00.36 / О.В. Голованова. – Новосибирск.
– 2002. – 16с.
22.Голованчиков, В.М. Современные подходы к лечению хронических
воспалительных заболеваний кишечника / В.М. Голованчиков, О.С.
Шифрин, В.Т. Ивашкин // Российские медицинские вести. – 2009. -
№ 14 (3). – С. 29-37.
23.Гусева, И.А. Распределение антигенов HLA-I класса в финно-
угорских популяциях России / И.А. Гусева, М.М. Мошнина, М.Ю.
Крылов [и др.] // Генетика. - 1998. - Т.34. - №1. -С. 100-105.

107
24.Девальд И.В. Особенности иммуногенетического профиля
башкирской популяции южного Урала / И.В. Девальд, А.Л.
Бурмистрова, В.А. Черешнев [и др.] // Успехи современного
естествознания. – 2006. – № 1 – С. 64-65.
25.Денисов, Н.Л. Адаптивный иммунитет у больных хроническими
заболеваниями желудка и кишечника / Н.Л. Денисов, В.Т. Ивашкин
// Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии,
колопроктологии . – 2009. - № 19 (5). – С. 30 – 33.
26.Загорский, С.Э. Хронические воспалительные заболевания
кишечника у детей и подростков (современный подход к
диагностике, лечению и реабилитации): Учебно-методическое
пособие / С.Э. Загорский, Л.М. Беляева. – Минск: БелМАПО, 2007.
– 29с.
27.Зарецкая, Ю.М. Клиническая иммунология / Ю.М. Зарецкая. – М.:
Медицина, 1983. – 207 с.
28.Ильяшенко, М.Г. Фагоцитарная активность нейтрофильных
гранулоцитов у больных с воспалительными заболеваниями
кишечника в зависимости от клинических характеристик
заболевания / М.Г. Ильяшенко, Г.Н. Тарасова, Е.Н. Федотова, Е.А.
Чумакова // Практическая медицина. Педиатрия. – 2012. - № 07 (62).
– С. 170-173.
29.Киркин, Б.В. Новое в изучении болезни Крона / Б.В. Киркин //
Российский медицинский журнал. – 1996. № 3(4). – С. 16.
30.Климова, С. В. Клиническое значение активности
митохондриальных ферментов лимфоцитов при воспалительных
заболеваниях кишечника у детей: дис. канд. мед. наук: 14.01.08 / С.
В. Климова. – М., 2010. – 108 с.
31.Кобзева, И.В. Алгоритм работы Московского банка-регистра
стволовых клеток / И.В. Кобзева, Т.А. Астрелина, М.В. Яковлева,
Е.Э. Карпова, Я.А. Круглова, Н.К. Шахпазян, А.Е. Гомзяков, Л.Л.
108
 Лебедева, Т.В. Пухликова, А.А. Чумак, Д.С. Ставцев, Е.В. Боякова
// Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. - 2013. - Т.8. -
№2. – С. 69-74.
32.Конович, Е. А. Перинуклеарные антинейтрофильные
цитоплазматические антитела у больных язвенным колитом и
болезнью Крона / Е.А. Конович, И.Л. Халиф // Российский журнал
гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. – 2009. - № 19
(5). – С. 72 – 77.
33.Конович, Е.А. Иммунопатогенез воспалительных заболеваний
кишечника / Е.А. Конович, И.Л. Халиф, М.В. Шапина // Российский
журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. – 2013.
2013. - № 23 (4). – С. 69-78.
34.Лебедева, Л.Л. Генетический полиморфизм антигенов
гистосовместимости здорового детского населения Московского
региона и при острых лейкозах у детей: дис. ... канд. биол. наук:
03.02.07 / Л. Л. Лебедева. – М., 2010.- 132 с.
35.Лебедева, Л.Л. Распределение HLA-гаплотипов в славянской
популяции Московского региона / Л.Л. Лебедева, Т.В. Пухликова,
А.А. Чумак [и др.] // VI научно-практическая конференция
«Современные технологии и методы диагностики различных групп
заболеваний, лабораторный анализ». Тезисы докладов. – Москва. –
2013. - С. 22-23.
36.Ливзан, М.А. Неспецифический язвенный колит: генетика
иммунного ответа / М.А. Ливзан, М.А. Макейкина // Клинические
перспективы в гастроэнтерологии, гепатологии. – 2012. - № 1. – С.
28-33.
37.Ливзан, М.А. Воспалительные заболевания кишечника:
современные аспекты диагностики и лечения / М.А. Ливзан, М.А.
Макейкина. [Электронный ресурс] // ConsiliumMedicum.
Гастроэнтерология. 2010; (2). – Режим доступа: http://con-
109
 med.ru/magazines/gastroenterology/gastroenterol ogy-02-
2010/vospalitelnye_zabolevaniya_kishechnika_sovremennye_aspekty
_diagnostiki_i_lecheniya_/
38.Лоранская, И.Д. Взаимосвязь клинических аспектов болезни Крона
с носительством полиморфных вариантов гена NOD2/CARD15 /
И.Д. Лоранская, Е.В. Степанова, И.Л. Халиф [и др.] //
Колопроктология. – 2009. - № 4(30). –С. 10-17.
39.Лоранская, И.Д. Генетические HLA-маркеры при неспецифических
воспалительных и функциональных заболеваниях толстой кишки /
И.Д. Лоранская, И.Л. Халиф, А.Г. Долбин, В.В. Яздовский //
Российские медицинские вести. – 2001. -№ 2. – С. 43-46.
40.Лягина, И.А. Характеристика кишечной микрофлоры у больных
язвенным колитом / И.А. Лягина, Т.К Корнева, О.В Головенко, А.В.
Веселов // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии,
колопроктологии. – 2008. - № 18 (2). – С. 48 – 54.
41.Макейкина, М.А. Генетические прогностические факторы течения
неспецифического язвенного колита / М.А. Макейкина, М.А.
Ливзан // Практическая медицина. Акушерство. Гинекология.
Эндокринология. Дерматовенерология. – 2012. -№ 09 (65). – С. 133-
136.
42.Малахинова, Н.А. Клинико-генетические ассоциации
полиморфизма генов иммунорецепторного аппарата и
воспалительных заболеваний кишечника у детей: автореф.
дис…кандидата медицинских наук: 14.01.08 / Н.А. Малахинова;
Москва. 2010. – 24 с.
43.Малов, В.А. Clostridium difficile в патологии человека» / В.А.
Малов, В.М. Бондаренко, С.Г. Пак // Журнал микробиология. - М., -
1996. - № 1. – С. 91-96.
44.Морозова, Н.А. Клинико-генетические взаимосвязи при
воспалительных заболеваниях толстой кишки (язвенный колит и
110
 болезнь Крона): автореф. дис… кандидата медицинских наук:
14.00.05 / Н.А. Морозова. - Москва. 1997. -24 с.
45.Насыхова, Ю. А. Молекулярно-генетические аспекты развития
воспалительных заболеваний кишечника: болезни Крона и
язвенного колита: автореф. дис. ... кандидата биологических наук:
03.02.07 / Ю.А. Насыхова. - Санкт-Петербург. 2012. – 18 с.
46.Николаева, Н.Н. Эпидемиология язвенного колита и болезни Крона
в Красноярском крае / Н.Н. Николаева, И.Д. Чечеткина, Л.В.
Николаева // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии,
колопроктологии. - 2004. - № 5. – Т.ХIV. - Прил. № 23: матер. Х
Рос. гастроэнтерол. недели. - Москва, 25-28 окт., 2004г. - С.1.
47.Никулина, И.В. Клинико-эпидемиологическая характеристика
воспалительных заболеваний кишечника в Московской области:
автореф. дис… кандидата медицинских наук: 14.00.05 / И.В.
Никулина. - М., 1997. – 24 с.
48.Павленко, В.В. Клинико-патогенетические аспекты и
прогностические аспекты язвенного колита: дис… доктора
медицинских наук / Павленко В.В. - Ростов-на-Дону. 2003. – 36 с.
49.Плавинский, С.Л. Биостатистика. Планирование, обработка и
представление результатов биомедицинских исследований при
помощи системы SAS / С.Л. Плавинский. - СПб: Издательский дом
СПб МАПО, 2005. – 559 с.
50.Платонов, А.Е. Статистический анализ в медицине и биологии:
задачи, терминология, логика, компьютерные методы / А.Е.
Платонов. - М.: Издательство РАМН, 2000. - 52 с.
51.Плотникова, И.Г. Воспалительные заболевания кишечника:
клинико-диагностическое значение нейрогормонов и цитокинов в
оценке особенностей течения и эффективности лечения: дис... канд.
мед. наук: 14.00.05 / И.Г. Плотникова. – Саратов, 2005. – 163с.

111
52.Проект клинических рекомендаций по диагностике и лечению
взрослых пациентов с болезнью Крона // Колопроктология. – 2013. -
№ 45 (3) (приложение). – С. 22 - 38.
53.Проект клинических рекомендаций по диагностике и лечению
взрослых пациентов язвенным колитом // Колопроктология. – 2013.
- № 45 (3) (приложение). – С. 4 - 21.
54.Пухликова, Т.Н. Генетический полиморфизм HLA системы в
московской популяции здоровых детей / Т.Н. Пухликова, Л.Л.
Лебедева, Т.В. Потапова [и др.] // Сборник материалов XV
Конгресса педиатров России с международным участием
«Актуальные проблемы педиатрии». - Москва, 14-17 февраля. -
2011г. - № 497. - С. 498.
55.Рекомендации Российской гастроэнтерологической ассоциации по
лечению болезни Крона у взрослых (проект) // Российский журнал
гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. – 2012. - № 23
(6). – С. 68-82.
56.Ройт, А. Иммунология / А. Ройт, Дж. Бростофф, Д. Мейл. – М.:
Мир, 2000. – 592 с.
57.Сароянц, Л.В. Иммуногенетика лепры. Межпопуляционный аспект:
автореф. дис… д-ра мед. наук: 14.03.09 / Л.В. Сароянц. – М., 2011. –
49с.
58.Соколова Е.И. Клиническая иммунология / Е.И. Соколова. – М.:
Медицина 1998. – 45 с.
59.Ставцев, Д.С. Значение иммуногенетических HLA маркеров в
развитии язвенного колита / Д.С. Ставцев, Т.А. Астрелина, О.В.
Князев, Т.В. Пухликова // Клиническая лабораторная диагностика. -
2014. - № 6. - С. 22-26.
60.Ставцев, Д.С. Значение иммуногенетических факторов в развитии
болезни Крона / Д.С. Ставцев, Т.А. Астрелина, О.В. Князев, Т.В.

112
 Пухликова // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии,
колопроктологии. - 2015. – Т. 25. - № 3. – С. 70 – 77.
61.Ставцев, Д.С. Иммуногенетические маркеры ВЗК у взрослого
населения московского региона / Д.С. Ставцев, Т.А. Астрелина,
М.М. Азова, Л.Л. Лебедева, Т.В. Пухликова, А.А. Чумак, О.В.
Князев // Материалы XV Юбилейного съезда Научного общества
гастроэнтерологов России и 17-го Международного медицинского
Славяно-Балтийского научного форума «Санкт-Петербург – Гастро-
2015», Санкт – Петербург, 25–27 мая. - 2015. - 90. -
Гастроэнтерология Санкт-Петербурга. – 2015. - № 1-2. – С. М28.
62.Ставцев, Д.С. Иммуногенетические маркеры при болезни Крона у
взрослого населения московского региона / Д.С. Ставцев, Т.А.
Астрелина, М.М. Азова, Л.Л. Лебедева, Т.В. Пухликова, А.А.
Чумак, О.В. Князев, И.И. Еремина, И.Р. Гильмутдинова, К.В.
Котенко // Саратовский научно-медицинский журнал. – 2014. – Т.
10. - № 4. - С. 743 – 749.
63.Ставцев, Д.С. Иммуногенетические маркеры при язвенном колите
у взрослого населения московского региона / Д.С. Ставцев, О.А.
Майорова, В.Ю. Зинкин, Л.Л. Лебедева, Т.В. Пухликова, А.А.
Чумак, Т.А. Астрелина, М.М. Азова, О.В. Князев // Вестник РУДН,
серия Медицина. – 2014. - № 3. - С.53-59.
64.Ставцев, Д.С. Особенности генетического полиморфизма HLA-
антигенов при болезни Крона у взрослого населения Московского
региона / Д.С. Ставцев, Т.А. Астрелина, М.М. Азова, Л.Л.
Лебедева, Т.В. Пухликова, А.А. Чумак, О.В. Князев // Материалы
XV Юбилейного съезда Научного общества гастроэнтерологов
России и 17-го Международного медицинского Славяно-
Балтийского научного форума «Санкт-Петербург – Гастро-2015»,
Санкт – Петербург, 25–27 мая. - 2015. - 89. - Гастроэнтерология
Санкт-Петербурга. – 2015. - № 1-2. – С. М28.
113
65.Тарасова, Г.Н. Фагоцитарная активность нейтрофильных
гранулоцитов у больных с воспалительными заболеваниями
кишечника в зависимости от клинических характеристик
заболевания / Г.Н. Тарасова, Е.Н. Федотова, Е.А. Чумакова, М.Г.
Ильяшенко // Педиатрия. Практическая медицина. – 2012. №7 (62).
– С. 170 - 173.
66.Ткачев, А.В. Воспалительные заболевания кишечника: на
перекрѐстке проблем / А.В. Ткачев, Л.С. Мкртчян, К.Е. Никитина,
Е.И. Волынская // Практическая медицина. Гастроэнтерология. –
2012. № 3 (58). – С. 17 – 22.
67.Ткачев, А.В. Оценка распространенности воспалительных
заболеваний кишечника (ВЗК) в Ростовской области / А.В. Ткачев,
Т.А. Девликамова, Т.Г. Розенберг // Симпозиум Гастроэнтерология
Юга России, Ростов-на-Дону. – 2009. С. - 103.
68.Хавкин, А.И. ВЗК. Проблема дифференциальной диагностики и
лечения / А.И. Хавкин, Н.С. Рачкова // РМЖ. Детская
гастроэнтерология и нутрициология. – 2006. № 3. – С. 154 - 158.
69.Хаитов, Р.М. Иммунология: учебник / Р.М. Хаитов, Г.А. Игнатьева,
И.Г. Сидорович. – М.: Медицина, 2000. – 432 с.
70.Хаитов, Р.М., Иммунология: учебник. / Р.М. Хаитов. - М.: ГЕОТАР-
МЕД, 2009. – 320 с.
71.Халиф, И.Л. Воспалительные заболевания кишечника
(неспецифический язвенный колит и болезнь Крона) клиника,
диагностика и лечение / И.Л. Халиф, И.Д. Лоранская. - М.:
«Миклош», 2004. - 88 с.
72.Хацко, В.В. Современные аспекты этиопатогенеза, диагностики и
лечения болезни Крона / В.В. Хацко, А.М. Дудин, С.В. Межаков [и
д.р.] // Украинский журнал хирургии. - 2012; 4 (19). С. 133-136.
73.Хромова, Н.А. Полиморфизм системы HLA у представителей
разных славянских этнических групп (русской, белорусской и
114
 украинской): автореф. дис. канд. мед. наук: 14.00.36 / Н. А.
Хромова, ГНЦ Ин-т иммун. Фед. мед.-биол. агенс. Рос. - Москва,
2006. – 29 с.
74.Хурцилава, О.Г. Организационные вопросы оказания больным
воспалительными заболеваниями кишечника специализированной
гастроэнтерологической помощи в Санкт-Петербурге / О.Г.
Хурцилава, А.М. Сегаль, О.Б. Щукина [и д.р.] // Вестник Северо-
Западного государственного медицинского университета им. И.И.
Мечникова. – 2012. - № 4 (1). –С. 84-91.
75.Чернова, М. С. Иммуногенетический профиль популяций
челябинской области (русские, татары, башкиры, нагайбаки) в
структуре мировых популяций: дис... канд. биол. наук: 14.03.09 /
М. С. Чернова. – Челябинск. – 2014. – 102с.
76.Шимановский, Н.Л. Резистентность к глюкокортикоидам:
механизмы и клиническое значение / Н.Л Шимановский –
Фарматека. - 2005. – №7. – С.30–33.
77.Шифрин, О.С. Болезнь Крона: особенности патогенеза, клиники и
лечения / О.С. Шифрин // Consilium Medicum. - 2001. - № 06 (3). –
С. 261 – 267.
78.Шумилов, П.В. Патогенетические факторы развития и течения
болезни Крона и неспецифического язвенного колита у детей: дисс.
доктора медицинских наук: 14.01.08 / П.В. Шумилов. - М., 2010. -
385 с.
79. Ярилин, А.А. Иммунология / А.А. Ярилин. - М.: ГЕОТАР-МЕД,
2010. – 752 с.
80.Achkar, J.P. Amino acid position 11 of HLA-DRβ1 is a major
determinant of chromosome 6p association with ulcerative colitis / J.P.
Achkar, L. Klei, P.I. de Bakker [et al.] // Genes Immun. – 2012. - Vol.
13(3). – Р. 245-52.

115
81.Altstock, R. Improved IBD diagnosis via Elisa detecting novel
antibodies: ACCA, ALCA and AMCA / R. Altstock, A. Shtevi, A.
Karban [et al.] // Gastroenterol. – 2005. – Vol. 128 (4). – A - 303.
82.Annese, V. Variants of CARD15 are associated with an aggressive
clinical course of Crohn's disease - an IG-IBD study / V. Annese, G.
Lombardi, F. Perri // American Journal of Gastroenterology. – 2005. –
Vol. 100. – P. 84-92.
83.Annese, V. HLA-DRB1 alleles may influence disease phenotype in
patients with inflammatory bowel disease: a critical reappraisal with
review of the literature / V. Annese, A. Piepoli, A. Latiano // Dis.Colon
Rectum. – 2005. – Vol. 48(1). – P. 57-64.
84.Begovich, A.B. Genetic variability and linkage disequilibrium within the
HLA-DP region: analysis of 15 different populations / A.B. Begovich,
P.V. Moonsamy, S.J. Mack [et al.] // Tissue Antigens. – 2001. – Vol.
57. – P.424-439.
85.Belousova E.A. Epidemiology of inflammatory bowel disease in Russia.
Falk Symposium 154 "Inflammatory Bowel Disease Diagnostic and
Therapeutic Strategies" (2006; Moscow). - M.; 2006. - P.31.
86.Blomqvist, P. A 10-year survey of inflammatory bowel diseases-drug
therapy, costs and adverse reactions / P. Blomqvist, N. Feltelius, R.
Löfberg, A. Ekbom // Aliment. Pharmacol. Ther. – 2001. – Vol. 15(4). -
P. 475-81.
87.Bonen, D K. The genetics of inflammatory bowel disease / D. K. Bonen,
J. H. Cho // Gastronterology. – 2003. - 124(2). – P.521-536.
88.Bouma, G. Evidence for genetic heterogeneity in inflammatory bowel
disease (IBD); HLA genes in the predisposition to suffer from ulcerative
colitis (UC) and Crohn’s diseases / G. Bouma, M. Oudkerk Pool, J. B.
A. Crusius [et al.] // Clin. Exp. Immunol. - 1997. - Vol. 109. – P. 175-
179.

116
89.Brand, S. The role of Toll-like receptor 4 Asp299Gly and Thr399ILe
polymorphisms and CARD15/NOD2 mutations in the susceptibility and
phenotype of Crohn's disease / S. Brand, T. Staudinger, F. Schnitzler
[et al.] // Inflamm. Bowel Ds. – 2005. – Vol. 11. – P. 645-652.
90.Braun, J. Multiparameter Analysis Of Immunogenetic Mechanism In
Clinical Diagnosis And Management Of Inflammatory Bowel Disease /
J. Braun, S. R. Targan / Immune Mechanisms in Inflammatory Bowel
Disease / R. S. Blumberg, M. F. Neurath // Advances in Experimental
Medicine and Biology. – 2006. - Volume 579. – P. 209 – 218.
91.Buchel, O.C. Primarysclerosing cholangitis, Crohn's disease and HLA-
B27 in black South African women / O.C. Buchel, F.J. Bosch, J. Janse
van Rensburg [et al.] // ActaGastroenterol. Belg. – 2012. – Vol. 75(4). –
P. 454-7.
92.Bugawan, T.L. HLA class I distributions in six Pacific/Asian
populations: evidence of selection at the HLA-A locus / T.L. Bugawan,
S.J. Mack, M. Stoneking [et al.] // Tissue Antigens. – 1999. – Vol. 53. –
P. 311-319.
93.Buhler, S. HLA DNA Sequence Variation among Human Populations:
Molecular Signatures of Demographic and Selective Events / S. Buhler,
A. Sanchez-Mazas // PLoS ONE. – 2011. – Vol. 6(2). - e14643.
[Электронный ресурс] Режим доступа:
http://www.plosone.org/article/info:doi/10.1371 /journal.pone.0014643.
94.Carvalho, F. A. Crohn's disease‐associated Escherichia coli LF82
aggravates colitis in injured mouse colon via signaling by flagellin / F.
A. Carvalho, N. Barnich, P. Sauvanet [et al.] // Inflammatory Bowel
Diseases. – 2008. – Vol. 14(8). - P. 1051-60.
95.Cho, J. H. Genomics and the Multifactorial Nature of Human
Autoimmune Disease / J. H. Cho, P. K. Gregersen // N. Engl. J. Med. –
2011. – Vol. 365. – P. 1612-23.

117
96.Coggon, D. Epidemiology for the uninitiated / D. Coggon, G. Rose,
D.J.P. Barker. - London, GB .: BMJ, 2003. – 80 pp.
97.Cooper, G. S. The Role of Genetic Factors in Autoimmune Disease:
Implications for Environmental Research / G. S. Cooper, F. W. Miller, J.
P. Pandey // Environmental Health Perspectives. - 1999. – Vol. 107
(Supp 5). – P. 693 – 700.
98.De Dombal, F.T. Inflammatory bowel disease / F.T. De Dombal, J.
Myren, I. A. D. Bouchier, G. Watkinson. - Oxford University Press. –
1993. – 768 p.
99.Dias, C.C. Clinical prognostic factors for disabling Crohn's disease:
Asystematic review and meta-analysis / C.C. Dias, P.P. Rodrigues, C. P.
Altamiro, F. Magro // World J. Gastroenterol. – 2013. – Vol. 19(24). – P.
3866–3871.
100. Dorak, M.T. Statistical Analysis In HLA And Disease Association
Studies [ Электронный ресурс] / M.T. Dorak – Режим доступа:
http://www.dorak.info/hla/stat.html
101. Economou, M. Current advances of genetics in Inflammatory
Bowel Disease / M. Economou // Annals Of Gastroenterology. – 2006. –
Vol. 19(2). – P. 203-208.
102. Ekbom A. The epidemiology of inflammatory bowel disease: a
large, population-based study in Sweden / A. Ekbom, C. Helmick, M.
Zack, H.O. Adami // Gastroenterology. - 1991. – Vol. 100(2). – P. 350-
8.
103. Ekbom, A. The epidemiology of IBD: a lot of data but little
knowledge. How shall we proceed? A. Ekbom // Inflamm. Bowel. Dis.-
2004. - 10 (Suppl l). - S32-4.
104. Farrell, R. J. Ulcerative colitis / R. J. Farrell, M.A. Peppercorn //
Lancet. – 2002. – Vol. 359 (9303). - 331 – 340.
105. Faubion, W.A. The natural history of corticosteroid therapy for
inflammatory bowel disease: a population based study / W.A. Faubion,
118
 E.V. Loftus, W.S. Harmsen [et al.] // Gastroenterology. – 2001. – Vol.
121. – P. 255–260.
106. Fernandez, L. IBD1 and IBD3 Determine Location of Crohn’s
Disease in the Spanish Population / L. Fernandez, J. L. Mendoza, A.
Martinez // Inflammatory Bowel Diseases. – 2004. – Vol. 10 (6). – P.
715-722.
107. Fernando, M. M. A. Defining the Role of the MHC in
Autoimmunity: A Review and Pooled Analysis / M. M. A. Fernando, C.
R. Stevens, E. C. Walsh [et al.] // PLoS Genet. - 2008. – Vol. 4(4). -
e1000024. [Электронный ресурс] Режим доступа:
http://www.plosgenetics.org/article/info:doi/10.1371/journal.pgen.10000
24.
108. Fevelova, V.V. Participation of Indo-European tribes in ethnogeny
of the mongoloid population of Siberia: analysis of the HLA antigen
distribution in mongoloids of Siberia / V.V. Fevelova // Am. J. Hum.
Genet. – 1990. – Vol. 47(2). – P. 294-301.
109. Fisher, S.A. Genetic determinants of ulcerative colitis include the
ECM1 locus and five loci implicated in Crohn's disease / S.A. Fisher, M.
Tremelling, C.A. Anderson [et al.] // Na.t Genet. – 2008. – Vol. 40(6). –
P. 710–712.
110. Gough, S.C.L. The HLA Region and Autoimmune Disease:
Associations and Mechanisms of Action / S.C.L. Gough, M.J. Simmonds
// Current Genomics. – 2007. – Vol. 8. P. 453-465.
111. Gourraud, P. A. HLA Diversity in the 1000 Genomes Dataset / P.
A. Gourraud, P. Khankhanian, N. Cereb [et al.] // PLoS ONE. – 2014. –
Vol. 9(7). - e97282. [Электронный ресурс] Режим доступа:
http://www.plosone.org/ article/info:doi/10.1371/journal.pone.0097282
112. Guardiola, J. Control of MHC class I1 gene expression in
autoimmune, infectious and neoplastic diseases / J. Guardiola, A. Maffei
// Crit. Rev. Immunol. 1993. – Vol. 13(3-4). – P. 247- 268.
119
113. Guarner, F. Role of microecology in chronic inflammatory bowel
diseases / F. Guarner, F. Casellas, N. Borruel [et al.] // Eur.J.Clin.Nutr.
– 2002. - 56 (l). - S34-8.
114. Gulwani‐Akolkar, B. HLA Class II Alleles Associated with
Susceptibility and Resistance to Crohn's Disease in the Jewish
Population / B. Gulwani‐Akolkar, P.N. Akolkar, X.Y. Lin [et al.] //
Inflammatory Bowel Diseases. – 2000. – Vol. 6 (2). – P. 71-6.
115. Hancock, L. Clinical and molecular characteristics of isolated
colonic Crohn's disease / L. Hancock, J. Beckly, A. Geremia //
Inflammatory Bowel Diseases. – 2008. – Vol. 14(12). – P. 1667-1677.
116. Hansen, J. The role of mucosal immunity and host genetics in
defining intestinal commensal bacteria / J. Hansen, A. Gulati, R.B.
Sartor // Curr Opin Gastroenterol. - 2010. – Vol. 26(6). – P. 564-71.
117. Hansmann, H.J. Imaging Procedures in Crohn’s Disease / H.J.
Hansmann, P. Flossdorf, J. Schmidt1 [et al.] // Dig Surg. – 2003. – Vol.
20. – P. 357 – 359.
118. Harris, P.E. Predominant HLA-Class I1 Bound Self-peptides of a
Hematopoietic Progenitor Cell Line Are Derived From Intracellular
Proteins / P.E. Harris, A. Maffei, A.I. Colovai, J. Kinne [et al.] // Blood.
– 1996. - Vol. 87(12). – P. 5104-5112.
119. Heward, J. Genetic susceptibility to the development of
autoimmune disease / J. Heward, S.C. Gough // Clin Sci (Lond). – 1997.
– Vol. - 93(6). – P. 479-91.
120. Hoentjen, F. CD4 T lymphocytes mediate colitis induced by non-
pathogenic Bacteroides vulgatus in HLA-27 transgenic rats / F.
Hoentjen, L. Tonkonogy, L. Dieleman [et al.] // Gastroenterol. – 2005. –
Vol. 128 (4). - A-206.
121. Huff, C.D. Crohn's disease and genetic hitchhiking at IBD5 / C.D.
Huff, D.J. Witherspoon, Y. Zhang // Mol Biol Evol. – 2012. – Vol.
29(1). – P. 101-11.
120
122. James, W. H. HLA markers, hormones, and disease / W. H. James
// J. Med. Genet. – 1991. – Vol. 28. – P. 358-360.
123. Jun Yun. Epidemiology and gene markers of ulcerative colitis in
the Chinese / Jun Yun, Chang-Tai Xu, Bo-Rong Pan // World J.
Gastroenterol. – 2009. – Vol. 15(7). – P. 788-803.
124. Kawasaki, A. Independent contribution of HLA-DRB1 and TNF
alpha promoter polymorphisms to the susceptibility to Crohn's disease /
A. Kawasaki, N. Tsuchiya, K. Hagiwara [et al.] // Genes Immun. –
2000. – Vol. 1(6). - P. 351-7.
125. Kim, K. Clinical usefulness of glucorticoid receptor beta
expression and NF–kappa B activity in patients with ulcerative colitis /
K. Kim, S. Myung, S. Hong [et al.] – Korean J.Gastroenterol. – 2005. –
Vol. 45(2). – P.103–110.
126. Koutroubakis, I. E. Role of Appendicitis and Appendectomy in the
Pathogenesis of Ulcerative Colitis: A Critical Review / I. E.
Koutroubakis, I. G. Vlachonikolis, E. A. Kouroumalis // Inflammatory
Bowel Diseases. – 2002. – Vol. 8(4). – P. 277-286.
127. Kumar, A. Structural and Dynamical Insights on HLA-DR2
Complexes That Confer Susceptibility to Multiple Sclerosis in Sardinia:
A Molecular Dynamics Simulation Study / A. Kumar, E. Cocco1, L.
Atzori [et al.] // Plos One. – 2013. – Vol. 8 (3). - e59711. [Электронный
ресурс] Режим доступа:
http://www.plosone.org/article/info:doi/10.1371/journal.pone.0059711
128. Laakso, S. Evaluation of High-Throughput PCR and Microarray-
Based Assay in Conjunction with Automated DNA Extraction
Instruments for Diagnosis of Sepsis / S. Laakso, J. Kirveskari, P. Tissari,
M. Mäki // PLoS One. – 2011. – Vol. 6(11). - e26655. [Электронный
ресурс] Режим доступа:
http://www.plosone.org/article/info:doi/10.1371/journal.pone.0026655

121
129. Lappalainen, M. Association of IL23R, TNFRSF1A, and HLA-
DRB1*0103 allele variants with inflammatory bowel disease phenotypes
in the Finnish population / M. Lappalainen, L. Halme, U. Turunen [et
al.] // Inflamm. Bowel Dis. – 2008. – Vol. 14 (8). – P. 1118-24.
130. Larsen, C. E. The genetics of HLA-associated disease / C. E.
Larsen, C. A. Alper // Current Opinion in Immunology. – 2004. Vol. 16.
- P. 660–667.
131. Latiano, A. Investigation of multiple susceptibility loci for
inflammatory bowel disease in an Italian cohort of patients / A. Latiano,
O. Palmieri, T. Latiano [et al.] // PLoS One. - 2011. – Vol. 6(7). -
e22688. [Электронный ресурс] Режим доступа:
http://www.plosone.org/article/info:doi/10.1371/jou rnal.pone.0022688.
132. Lebedeva, L.L. HLA-A, -B, -C haplotype frequencies in Russians
of Moscow region / L.L. Lebedeva, T.V. Pukhlikova, A.A. Chumak [et
al.] // Tissue Antigenes. – 2013. – Vol. 81(5). - P. 370 - 371.
133. Lettre, G. Autoimmune diseases: insights from genome-wide
association studies / G. Lettre, J. D. Rioux // Human Molecular Genetics.
– 2008. - Vol. 17. – Rev. Iss. 2. - R116–R121.
134. Löfberg, R. Colorectal Cancer Risk in Ulcerative Colitis – For
How Long is Surveillance Justified? / R. Löfberg // Dig Surg. – 2003. –
Vol. 20. – P. 370 - 371.
135. Loftus E.V. Jr. Clinical epidemiology of inflammatory bowel
disease: Incidence, prevalence, and environmental influences / E.V.
Loftus Jr. / Gastroenterology. – 2004. - Vol. 126(6). – P. 1504 – 17.
136. Long, M. Challenges in Designing a National Surveillance
Program for Inflammatory Bowel Disease in the United States / M.
Long, S. Hutfless, M. Kappelman [et al.] // Inflammatory Bowel
Disease. – 2014. – Vol. 20(2). – P. 398-415

122
137. MacDonald, T.T. What's the next best cytokine target in IBD? /
T.T. MacDonald, P. Biancheri, M. Sarra, G. L. Monteleone // Inflamm.
Bowel. Dis. – 2012. – Vol. 18(11). – P. 2180-9.
138. Maggio-Price, L. Lineage Targeted MHC-II Transgenic Mice
Demonstrate the Role of Dendritic Cells in Bacterial-driven Colitis / L.
Maggio-Price, A. Seamons, H. Bielefeldt-Ohmann [et al.] //
Inflammatory Bowel Diseases. – 2013. – Vol. 19 (1). - P. 174–184.
139. Mallas, E.G. Histocompatibility antigens in inflammatory bowel
disease. Their clinical significance and their association with arthropathy
with special reference to HLA-B27 (W27) / E.G. Mallas, P. Mackintosh,
P. Asquith, W.T. Cooke. // Gut. - 1976. – Vol. 17. - P. 906-910.
140. Marcelletti, J. Anti-microbial antibody markers as prognostic
indicators of Inflammatory bowel disease course / J. Marcelletti, D.
Moskowitz, J. Stempak // Gastroenterol. – 2005. – Vol. 128 (4). - A-305.
141. McGovern, D.P. Genome-wide association identifies multiple
ulcerative colitis susceptibility loci / D.P. McGovern, A. Gardet, L.
Törkvist [et al.] // Nat Genet. – 2010. – Vol. 42 (4). - P. 332–337.
142. Mochida, A. Butyrophilin-like 2 gene is associated with ulcerative
colitis in the Japanese under strong linkage disequilibrium with HLA-
DRB1*1502 / A. Mochida, Y. Kinouchi, K. Negoro [et al.] // Tissue
Antigens. – 2007. – Vol. 70 (2). P. 128-35.
143. Molodecky, N.A. Increasing incidence and prevalence of the
inflammatory bowel diseases with time, based on systematic review /
N.A. Molodecky, I.S. Soon, D.M. Rabi // Gastroenterology. – 2012. –
Vol. 142(1). – P. 46-54.
144. Munkholm, P. Frequency of glucocorticoid resistence and
dependency in Crohn’s disease / P. Munkholm, E. Langholz, M.
Davidsen [et al.] // Gut. – 1994. – Vol. 35. – P. 360–362.

123
145. Naser, S.A. Role of ATG16L, NOD2 and IL23R in Crohn’s
disease pathogenesis / S.A. Naser, M. Arce, A. Khaja [et al.] // World J
Gastroenterol. – 2012. – Vol. 18(5). – P. 412–424.
146. Nunes, J. M. The HLA-net GENE[RATE] pipeline for effective
HLA data analysis and its application to 145 population samples from
Europe and neighbouring areas / J. M. Nunes, S. Buhler, D. Roessli [et
al.] // Tissue Antigens.- 2014.- Vol. 73(5). – P. 307 - 323.
147. Nunes, J. M. Analysis of the HLA population data (AHPD)
submitted to the 15th International Histocompatibility/Immunogenetics
Workshop by using the GENE[RATE] computer tools accommodating
ambiguous data (AHPD project report) / J. M Nunes, M. E. Riccio, S.
Buhler [et al.] // Tissue Antigens.- 2010.- Vol. 76(1). – P. 18–30.
148. Okada, Y. HLA-Cw*1202-B*5201-DRB1*1502 haplotype
increases risk for ulcerative colitis but reduces risk for Crohn's disease /
Y. Okada, K. Yamazaki, J. Umeno [et al.] // Gastroenterology. – 2011.
– Vol. 141(3). P. 864-71.
149. Olerup, O. HLA-DR typing by PCR amplification with sequence-
specific primers (PCR-SSP) in 2 hours: An alternative to serological DR
typing in clinical practice including donor-recipient matching in
cadaveric transplantations / O. Olerup, H. Zetterquist // TissueAntigens.
– 1992. – Vol. 39. – P. 225-235.
150. Olerup, O. HLA-DRB1*01 subtyping by allele-specific PCR-
amplification: A sensitive, specific and rapid technique / O. Olerup, H.
Zetterquist // Tissue Antigens. – 1991. – Vol. 37. – P. 197-204.
151. Oliver, R. T. D. The HLA system and immunological defence
against cancer: a review / R. T. D. Oliver // Journal of the Royal
Society of Medicine. - 1978. – Vol. 71. – P. 50-54.
152. Orchard, T.R. The prevalence, clinical features and association of
HLA-B27 in sacroiliitis associated with established Crohn's disease /

124
 T.R. Orchard, H. Holt, L. Bradbury [et al.] // Aliment Pharmacol. Ther.
– 2009. – Vol. 29(2). – P. 193-7.
153. Papadakis K.A. Role of cytokines in the pathogenesis of
inflammatory bowel disease / K.A. Papadakis, S.R. Targan // Ann. Rev.
Med. – 2000. – Vol. 51. – P. 289–298.
154. Ponder, A. A clinical review of recent findings in the
epidemiology of inflammatory bowel disease / A. Ponder, M. D Long //
Clinical Epidemiology. - 2013/ - Vol. 5. – P. 237–247.
155. Rioux J. D. Mapping of multiple susceptibility variants within the
MHC region for 7 immune-mediated diseases / J. D. Rioux, P. Goyette,
T. J. Vyse [et al.] // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. – 2009. – Vol.
106(44). – P. 18680-5.
156. Sadegh-Nasseri, S. Conformational heterogeneity of MHC class II
induced upon binding to different peptides is a key regulator in antigen
presentation and epitope selection S. Sadegh-Nasseri, S. Natarajan, C.-L.
Chou / Immunol Res. – 2010. – Vol. 47 (1-3). P. 56–64.
157. Saiki, R.K. Analysis of enzymatically amplified β‐globin and
HLA‐DQα DNA with allele‐specific oligonucleotide probes / R.K. Saiki,
T.L. Bugawan, G.T. Horn [et al.] // Nature. - 1986. – Vol. 324. -P. 163‐
166
158. Sanborn W. Steroid–dependent Crohn’s disease / W. Sanborn //
Scand. J. Gastroenterol. - 2000. – Vol. 14. (suppl. C). – 17C.
159. Sanchez-Mazas A. A New HLA Map of Europe: Regional Genetic
Variation and Its Implication for Peopling History, Disease-Association
Studies and Tissue Transplantation / A. Sanchez-Mazas, S. Buhler, J.M.
Nunes // Hum Herad. – 2013. – Vol. 76. – P. 162 – 177.
160. Sanchez-Mazas A. An apportionment of human HLA diversity /
A. Sanchez-Mazas // Tissue Antigens. - 2007. - Vol. 69. – Supp. 1. – P.
198 – 202.

125
161. Sanchez-Mazas A. The Relevance of HLA Sequencing in
Population Genetics Studies / A. Sanchez-Mazas, D. Meyer // Journal of
Immunology Research. – 2014. - Article ID 971818. Режим доступа
http://dx.doi.org/10.1155/2014/971818.
162. Sartor, R.B. Colitis in HLA-B27/beta 2 microglobulin transgenic
rats / R. B. Sartor // Int Rev Immunol. – 2000. – Vol. 19(1). – P. 39-50.
163. Sartor, R.B. Induction of mucosal immune responses by bacteria
and bacterial components / R.B. Sartor // Curr Opin Gastroenterol. –
2001. - Vol. 17(6). – P. 555-61.
164. Sartor, R.B. Microbial and dietary factors in the pathogenesis of
chronic, immune-mediated intestinal inflammation / R.B. Sartor /
Immune Mechanisms in Inflammatory Bowel Disease / R. S.
Blumberg, M. F. Neurath // Advances in Experimental Medicine and
Biology. – 2006. - Volume 579. – P. 35 – 54.
165. Sartor, R.B. Targeting enteric bacteria in treatment of
inflammatory bowel diseases: why, how, and when / R.B. Sartor // Curr.
Opin. Gastroenterol. – 2003. – Vol. 19(4). – P. 358-65.
166. Satsangi, J. Contribution of genes of the major histocompatibility
complex to susceptibility and disease phenotype in inflammatory bowel
disease / J. Satsangi, K.I. Welsh, M. Bunce [et al.] // Lancet. – 1996. –
Vol. 347 (9010). – P. 1212-7.
167. Satsangi, J. Genetics of inflammatory bowel disease: scientific and
clinical implications / J.1. Satsangi, J. Morecroft, N.B. Shah [et al.] //
Best Pract. Res. Clin. Gastroenterol. – 2003. – Vol. 17(1). – P. 3-18.
168. Satsangi, J. The Montreal classification of inflammatory bowel
disease: controversies, consensus, and implications / J. Satsangi, M. S.
Silverberg, S. Vermeire [et al.] // Gut. Jun. – 2006. – Vol. 55(6). – P.
749–753.
169. Schoepfer, A.M. Phenotypic associations of Crohn's disease with
antibodies to flagellins A4-Fla2 and Fla-X, ASCA, p-ANCA, PAB, and
126
 NOD2 mutations in a Swiss Cohort / A.M. Schoepfer, T. Schaffer, S.
Mueller [et al.] // Inflamm. Bowel Dis. – 2009. – Vol. 15(9). – P. 1358-
67.
170. Schultz, M. Probiotics and inflammatory bowel diseases / M.
Schultz , R.B. Sartor // Am J Gastroenterol. – 2000. – Vol. 95 (1 Suppl).
- S19-21.
171. Schultz, M. IL-2-deficient mice raised under germfree conditions
develop delayed mild focal intestinal inflammation / M. Schultz, S.L.
Tonkonogy, R.K. Sellon // Am. J. Physiol. – 1999. – Vol. 276 (6 Pt 1). –
G. 1461 – 72.
172. Scribano, M.L. Making the Diagnosis of Crohn’s Disease / M.L.
Scribano, C. Prantera // Dig Surg. – 2003. – Vol. 20. – P. 355 – 356.
173. Sellon, R.K. Resident enteric bacteria are necessary for
development of spontaneous colitis and immune system activation in
interleukin-10 - deficient mice / R.K. Sellon, S. Tonkonogy, M. Schultz
[et al.] // Infect. Immun. – 1998. – Vol. 66 (11). – P. 5524-31.
174. Shivananda, S. Incidence of inflammatory bowel diseases across
Europe: is there a difference between north and south? Results of the
collaborative study on inflammatory bowel diseases (EC-IBD) / S.
Shivananda, J. Lennard-Jones, R. Fear [et al.] // Gut. – 1996. – Vol.
39(5). – P. 690 – 7.
175. Silverberg, M S. A Population - and Family-Based Study of
Canadian Families Reveals Association of HLA DRB1*0103 With
Colonic Involvement in Inflammatory Bowel Disease / M S. Silverberg,
L. Mirea, S. B. Bull // Inflammatory Bowel Diseases. – 2003. – Vol.
9(1). – P. 1-9.
176. Silverberg, M.S. Toward an integrated clinical, molecular and
serological classification of inflammatory bowel disease: report of a
working party of the 2005 Montreal World Congress of

127
 Gastroenterology / M.S. Silverberg, J. Satsangi, T. Ahmad [et al.] // Can.
J. Gastroenterol. – 2005. –Vol. 19(Suppl. A). - P. 5–36.
177. Silverberg, M.S. Ulcerative colitis-risk loci on chromosomes 1p36
and 12q15 found by genome-wide association study / M.S. Silverberg,
J.H. Cho, J.D. Rioux [et al.] // Nat. Genet. – 2009. – Vol. 41(2). – P.
216-20.
178. Skieceviciene, J. Replication Study of Ulcerative Colitis Risk Loci
in a Lithuanian-Latvian Case-Control Sample / J. Skieceviciene, G.
Kiudelis, E. Ellinghaus // Inflammatory Bowel Diseases. – 2013. – Vol.
19 (11). P. 2349-2355.
179. Solberga, O. D. Balancing selection and heterogeneity across the
classical human leukocyte antigen loci: A meta-analytic review of 497
population studies / O. D. Solberga, S.J. Mackb, A. K. Lancaster [et al.]
// Human Immunology. – 2008. – Vol. 69(7). – P. 443-464.
180. Stallmach, A. Markers for Disease Activity in Ulcerative Colitis /
A. Stallmach, T. Giese1, C. Schmidt [et al.] // Dig Surg. – 2003. – Vol.
20. – P. 350 – 351.
181. Stavtsev, D.S. Association between HLA and development of
inflammatory bowel diseases in adults in Moscow region / D.S.
Stavtsev, L.L. Lebedeva, T.V. Pukhlikova, A.A. Chumak, T.A.
Astrelina, M.V. Yakovleva // Tissue Antigenes. – 2013. - 81(№5). -
P202. – P. 381.
182. Stephen Ahn. HLA and Disease Associations in Koreans / Stephen
Ahn, Hee-Back Choi, Tai-Gyu Kim // Immune network. – 2011. – Vol.
11 (6). – P. 324-335.
183. Thia K. T. An Update on Epidemiology of Inflammatory Bowel
Desease in Asia / K. T. Thia, E. V. Loftus, W. J. Sandborn, Suk-Kyun
Yang // Am. J. Gastroenterol. - 2008. – Vol. 103. – P. 3167–3182.

128
184. Thompson, A. I. Genetics of ulcerative colitis. / A. I. Thompson,
C. W. Lees // Inflammatory Bowel Diseases. – 2011. – Vol. 17 (3). - P.
831-848.
185. Trachtenberg, E.A. HLA class II haplotype associations with
inflammatory bowel disease in Jewish (Ashkenazi) and non-Jewish
caucasianpopulations / E.A. Trachtenberg, H. Yang, E. Hayes [et al.] //
Hum Immunol. – 2000. - 61(3). – P. 326-33.
186. Unanue, E.R. Antigen presenting functions of the macrophage / E.
R. Unanue // Annual Review of Immunology. – 1984. – Vol. 2. – P. 395-
428.
187. van Heel, D.A. Inflammatory bowel disease: progress toward a
gene / D.A. van Heel, J. Satsangi, A.H. Carey, D.P. Jewell // Can. J.
Gastroenterol. – 2000. – Vol. 14(3). – P. 207-18.
188. Vandiedonck, C. The human Major Histocompatibility Complex
as a paradigm in genomics research / C. Vandiedonck, J. C. Knight //
Briefings in functional genomics and proteomics. – 2009. – Vol. 8(5). –
P. – 379 – 394.
189. Wakefield A.J. Evidence persistent measles virus infection in
Crohn's disease / A.J. Wakefield, R.M. Pitilo, R. Sim [et al.] // J. Med.
Virol. – 1993. – Vol. 39(4). - P. 345-53.
190. Waterman, M. Distinct and overlapping genetic loci in Crohn's
disease and ulcerative colitis: correlations with pathogenesis / M.
Waterman, W. Xu, J.M. Stempak [et al.] // Inflamm Bowel Dis. -2011.
– Vol. 17(9). – P. 1936–1942.
191. Yang, H. Linkage of Crohn's disease to the major
histocompatibility complex region is detected by multiple non-
parametric analyses / H. Yang, S.E. Plevy, K. Taylor [et al.] // Gut. –
1999. – Vol. 44 (4). – P. 519-526.

129
192. Zanelli, E. HLA association with autoimmune disease: a failure to
protect? / E. Zanelli, F.C. Breedveld, R.R.P. de Vries // Rheumatology. –
2000. – Vol. 39. – P. 1060 – 1066.
193. Zhang, H.X. Association between HLA-Cw polymorphism and
inflammatory bowel disease / H.X. Zhang, J. C. Li, G. Xu, Z.J. Liu //
ZhonghuaNeiKeZaZhi. – 2011. – Vol. 50 (10). – P. 856-8.

130