ЛЕКЦИЯ

ОБМЕН БЕЛКОВ. РАСПАД БЕЛКОВ

Обмен белка занимает центральное место среди многообразных

процессов метаболизма, свойственных живой материи. Все другие виды
обмена — углеводный, липидный, нуклеиновый, минеральный и др. прежде
всего обслуживают обмен белков и в т.ч. специфический биосинтез белка.
Белковый обмен весьма строго специфичен, обеспечивает непрерывность
воспроизводства и обновления белковых тел организма.

белков происходит в желудке и в тонком кишечнике. Оно сводится к

ферментативному гидролитическому расщеплению белков пищи до
аминокислот. Переваривание белков в желудочно-кишечном тракте имеет
ряд особенностей:

 протеолитические ферменты выделяются в неактивном состоянии

(защитный механизм от переваривания тканевых белков);
 их активирование происходит в просвете желудочно-кишечного тракта
путём частичного протеолиза;
 протеазы желудочно–кишечного тракта отличаются субстратной
специфичностью, могут относиться или к эндопептидам, или
экзопептидазам.

В желудке основным ферментом, расщепляющим белки,

являетсяпепсин.Он выделяется в неактивном состоянии в виде профермента
пепсиногена. При участииHClпроисходит частичный протеолиз пепсиногена
и превращение его в активную форму пепсин. При частичном протеолизе
уменьшается молекулярная масса, изменяется структура фермента,
обнажается его активный центр.

Пепсин относится к эндопептидазам, разрывает в белках внутренние

пептидные связи, образованные с участием остатков тирозина и
фенилаланина..

Роль HCl в переваривании белков:

 участвует в активации пепсиногена;

 обеспечивает оптимум рН для пепсина (рН = 1-2);
 вызывает частичную денатурацию белка, способствует их набуханию;
 является бактерицидным барьером.
 Слизистая желудка имеет целый ряд защитных механизмов от
агрессивного действия пепсина и соляной кислоты. К ним относятся:

а) выработка слизи (основной её компонент протеогликаны);

Дальнейшее переваривание белков осуществляется в тонком

кишечнике под действием ферментов поджелудочной железы и
собственных ферментов слизистой оболочки кишечника. К
ферментам поджелудочной железы относятся трипсин, химотрипсин,
эластаза, карбоксипептидазы.

Трипсин выделяется поджелудочной железой в неактивном состоянии в

виде трипсиногена, который активируется ферментом энтеропептидазой
(энтерокиназой), вырабатываемой слизистой кишечника. Активация
трипсиногена происходит путём частичного протеолиза с отщеплением 6
аминокислот и освобождением активного центра. В зоне связывания
активного центра трипсина преобладают кислые аминокислоты
(глютаминовая, аспарагиновая), поэтому трипсин расщепляет в пищевых
белках внутренние пептидные связи, образованные щелочными
аминокислотами (лизином и аргинином). Трипсин, в свою очередь,
активирует в кишечнике другие протеолитические ферменты.

Химотрипсинвырабатывается в неактивном состоянии в виде

химотрипсиногена, активируется частичным протеолизом трипсином.
Химотрипсин относится к эндопептидазам, содержит в активном центре
гидрофобные аминокислоты, расщепляет в белках связи, образованные
СООН – группами ароматических аминокислот (фенилаланин,
тирозин).Эластазаобразуется из проэластазы под действием трипсина путём
частичного протеолиза. В активном центре эластазы преобладают
аминокислоты с разветвлённым радикалом, поэтому она расщепляет в белках
внутренние пептидные связи, образованные глицином, не содержащим
радикала.

Карбоксипептидазыотносятся к экзопептидазам, отщепляют от белков

концевые аминокислоты. Карбоксипептидазы «А» отщепляют С-концевые
ароматические аминокислоты (фенилаланин, тирозин), карбоксипептидазы
«В» отщепляют С-концевые аминокислоты лизин и аргинин.

К ферментам кишечника относятся аминопептидазы и дипептидазы.

Аминопептидазы– экзопептидазы, отщепляютN-концевые

аминокислоты. К аминопептидазам относится, в частности,
лейцинаминопептидаза (ЛАП).

Дипептидазыкишечника расщепляют дипептиды. В тонком кишечнике

происходит полное гидролитическое расщепление пищевых белков до
аминокислот, которые не обладают видовой специфичностью.
Образовавшиеся аминокислоты подвергаются всасыванию.

Гниение белков в толстом кишечнике

Процессу гниения в толстом кишечнике под действием ферментов

гнилостной микрофлоры подвергаются не полностью расщепившиеся белки
и отдельные не всосавшиеся аминокислоты. При гниении белков образуется
большое количество газообразных и негазообразных веществ. К продуктам
гниения белков относятся CO2,CH4,NH3,H2S, меркаптаны, альдегиды, кетоны,
карбоновые кислоты, диамины, вещества циклической структуры.

Диамины образуются при декарбоксилировании диаминокислот лизина и

орнитина

Диамины могут выводиться из кишечника или обезвреживаться в печени

При гниении белков могут образовываться токсичные циклические

продукты. Гниение тирозина ведёт к появлению крезола и фенола, гниение
триптофана сопровождается образованием скатола и индола.

Продукты гниения белков чрезвычайно токсичны, по системе venaporta, они

. Обезвреживание продуктов гниения белков в печени

Выделяют несколько вариантов обезвреживания в печени токсичных

продуктов гниения белков.
 1. Синтез нетоксичной мочевины из чрезвычайно токсичного NН3.
2. Микросомальное окисление токсичных веществ при участии
ферментов монооксинегаз. В результате процесса гидроксилирования
снижается токсичность, повышается водорастворимость,
увеличивается реакционная способность обезвреживаемого вещества.

3. Образование парных нетоксичных соединенийпутём присоединения к

обезвреживаемым продуктам Н2SО4, глюкуроновой кислоты, глицина.

Динамическое состояние белков в тканях организма

Белки тканей организма постоянно обновляются, то есть подвергается

распаду, и постоянно замещаются вновь синтезированными белками. Период
полуобмена белков в таких тканях как кровь, слизистая кишечника, печень
составляет приблизительно 10 дней. В таких тканях, как кожа, мышцы
период полуобмена белков более продолжителен,

Распад тканевых белков (катаболизм) осуществляют особые тканевые

протеолитические ферменты катепсиныКатепсины локализованы как в
лизосомах, так и в цитозоле. Лизосомальные катепсины называются кислыми
катепсинами, так как оптимум рН для них равен 4,5-5,5. Катепсины могут
относиться как к эндопептидазам, так и к экзопептидазам. В активном центре
катепсинов могут присутствовать цистеин, аспарагиновая кислота, серин.

Биологическая роль катепсинов:

 участвуют в обновлении тканевых белков;

 разрушают дефектные, денатурированные белки (обычно подобные
белки вначале соединяются с особым белком убиквинтином,после чего
разрушаются катепсинами);
 реконструктивная функция – катепсины переводят неактивные формы
белков в активные белки;
 при голодании, кровопотере, интоксикации катепсины обеспечивают
мобилизацию белков из депо белков (плазма крови, мышцы, печень).

Пути образования и использования аминокислот в тканях

 В ткани всегда существует определённый запас аминокислот. Он
поддерживается на достаточно постоянном уровне благодаря
сбалансированности путей образования и использования аминокислот.

Пути пополнения запаса тканевых аминокислот:

1. аминокислоты, всосавшиеся из кишечника в результате переваривания

пищевых белков (1/3 фонда);
2. аминокислоты, образовавшиеся при распаде тканевых белков;
3. синтезированные в тканях заменимые аминокислоты.

Пути расходования аминокислот в тканях:

1. синтез тканевых белков и пептидов;

2. образование небелковых N-содержащих веществ (пуриновые
основания, креатинин, биогенные амины, фосфолипиды);
3. использование на энергетические цели;
4. расходование на синтез углеводов (глюконеогенез);
5. образование из аминокислот некоторых метаболитов липидного
обмена (кетоновые тела).

Особенности обмена белка

Одной из характерных особенностей белкового обмена является его
чрезвычайная разветвлённость. В превращениях 20 с лишним аминокислот
белковой молекулы в организме животных участвуют несколько сотен
промежуточных продуктов, тесно связанных с метаболитами обмена
углеводов и липидов. Блокирование какого - либо специфического пути
обмена, даже одной аминокислоты может привести к появлению совершенно
неизвестных продуктов.
Состояние белкового обмена определяется множеством факторов, как
экзогенных, так и эндогенных. Большое значение при этом играет
биологическая полноценность белков пищи. Любые отклонения от
нормального физиологического состояния организма, нарушения в обмене
углеводов, липидов и др. незамедлительно отражаются на азотистом обмене.
Основные особенности обмена белков проявляются на стадии
промежуточного обмена и их можно объяснить двумя факторами:
Во-первых, энергетическая ценность аминокислот не высока и
выполняют в клетке, прежде всего, функции строительных материалов. В
связи с этим, в обмене белков центральную роль играют не процессы
катаболизма, а анаболизма, т.е. синтеза белка.
Во-вторых, в живой клетке не существуют единые, универсальные
механизмы расщепления аминокислот. Каждая аминокислота подвергается
распаду по индивидуальному механизму.
 Катаболизм аминокислот
Если известно 20 белковых аминокислот, то в каждой клетке, как
минимум, функционируют 20 путей их катаболизма. Однако, несмотря на
такое многообразие катаболических путей, конечных продуктов тканевого
обмена аминокислот немного, т.е. 20 способов расщепления аминокислот на
определенных этапах сливаются и приводят к образованию всего лишь 5
различных продуктов, которые затем вступают в цикл трикарбоновых кислот

и окисляются полностью.

Рис. 1. Пути превращений аминокислот.

Углеродные скелеты 10 аминокислот расщепляются до ацетил-КоА.
Причем, 5 из этих 10 аминокислот (аланин, цистеин, глицин, серин, треонин)
расщепляются до ацетил-КоА через пируват. Другие 5 (фенилаланин,
тирозин, лейцин, лизин, триптофан) – через ацетоацетил-КоА. Как известно,
ацетоацетил-КоА является центральным продуктом в метаболизме
кетоновых тел. В печени из этих аминокислот могут образовываться
кетоновые тела и поэтому их называют кетогенными. Остальных –
глюкогенными, т.к. из пирувата легко синтезируется глюкоза. Однако такое
разделение аминокислот весьма условное, потому что, в целом всех
аминокислот можно называть глюкогенными, тем более некоторые
аминокислоты могут расщепляться, как с образованием пирувата, так и
ацетоацетил-КоА.
Кроме ацетил-КоА, при катаболизме аминокислот могут образоваться
α-кетоглутарат, сукцинил-КоА, фумарат и оксалоацетат (рис.1).

Катаболизм аминокислот условно делят на общие реакции (происходят

в отношении радикала, аминогрупп, карбоксильных групп) и специфические
реакци

Универсальные процессы в катаболизме аминокислот.

Каждая аминокислота подвергается распаду по индивидуальному
механизму. Некоторые катаболические пути достаточно сложные,
многоступенчатые (до 13 последовательных реакций), с образованием
большого количества метаболитов, которые в свою очередь могут
вовлекаться в различные биохимические процессы. Например, при
расщеплении триптофана образуются продукты, которые могут служить
предшественниками нейрогормона серотонина, никотиновой кислоты и др.
Известны ряд превращений, которые встречаются в способах
расщепления всех аминокислот, т.е. они являются общими для всех
катаболических путей. К ним относятся:
1. превращения по аминогруппе и
2. превращения по карбоксильной группе.
В биологии они больше известны, как универсальные механизмы
расщепления аминокислот.

Превращения по аминогруппе идут двумя путями

1. Прямое дезаминирование – отщепление аминогрупп аминокислот.
Доказано существование четырех типов дезаминирования. Во всех случаях
NH2 группа аминокислот освобождается в виде NH3.
1. Восстановительное дезаминирование

2. Гидролитическое дезаминирование.

3. Внутримолекулярное дезаминирование.
4. Окислительное дезаминирование.

Преобладающим типом для животных тканей, растений и большинства

аэробных микроорганизмов является окислительное дезаминирование
аминокислот, протекающее в две стадии с образованием неустойчивого
промежуточного продукта - иминокислоты. Однако нужно отметить, что
большинство ферментов, катализирующие окислительное дезаминирование
аминокислот, при физиологических значениях рН малоактивны. В животных
тканях наиболее активным, является фермент, катализирующий
окислительное дезаминирование глутаминовой кислоты -
глутаматдегидрогеназа. Конечным продуктом реакции является α-
кетоглутарат.
2. Трансаминирование (переаминирование) - реакции межмолекулярного
переноса аминогруппы от аминокислоты на α-кетокислоту без
промежуточного образования аммиака.
Реакции трансаминирования являются обратимыми и универсальными
для всех живых организмов. Протекают при участии специфических
ферментов - аминотрансфераз. В трансаминировании могут участвовать
любая α-аминокислота и любая α-кетокислота с образованием новой амино-
и кетокислоты. Учитывая тот факт, что в животных тканях с высокой
скоростью подвергается окислительному дезаминированию глутаминовая
кислота, можно предположить, что одним из основных субстратов для
трансаминирования является α-кетогутарат. В настоящее время считается
доказанным не только то, что практически все аминокислоты реагируют с α-
кетоглутаровой кислотой с образованием глутаминовой кислоты и
соответствующей кетокислоты, но и то, что реакции трансаминирования и
окислительного дезаминирования сопряжены в едином процессе, который
протекает по схеме:

Рис. 2. Схема непрямого дезаминирования аминокислот

Поскольку все реакции данного процесса являются обратимыми,
создаются условия для синтеза по существу любой аминокислоты, при
наличии соответствующий α-кетокислоты.

В процесс трансаминирования могут включаться практически все

аминокислоты. В качестве альфа-кетокислот, чаще используется
пировиноградная, щавелевоуксусная и альфа - кетоглютаровая кислота.

Биологическое значение реакций трансаминирования заключается в

следующем:

1. происходит потеря аминогрупп из аминокислоты без выделения

токсичного NH3;
2. возможность последующего включения безазотистого остатка
аминокислот в цикл Кребса с выделением энергии;
3. способ синтеза новых заменимых аминокислот в тканях (ПВК –> ала,
ЩУК –> асп, альфа - кетоглютаровая кислота –> глю);
4. определение активности трансаминаз имеет важное диагностическое
значение, так как в разных тканях преобладает активность
определённых трансаминаз

Превращения по карбоксильной группе

Декарбоксилирование - отщепление карбоксильной группы аминокислот
в виде углекислого газа. Реакция является необратимой и катализируется
декарбоксилазами.
 Различают несколько видов декарбоксилирования, среди которых
наибольшее распространение получило α-декарбоксилирование, т.е.
отщепление –СООН группы у α-углерода аминокислоты.

Декарбоксилирование аминокислот – ферментативный процесс

высвобождения СО2из СООН - групп аминокислот с образованием аминов.

Наиболее активно в процесс деркарбоксилирования включаются

аминокислоты гистидин, тирозин, глютамат, триптофан. Образующиеся
амины называются биогенными аминами, поскольку они, как правило,
обладают широким спектром физиологических эффектов, влияют на тонус
сосудов, являются нейромедиаторами, участвуют в воспалительных
реакциях. К основным биогенным аминам относятся гистамин, серотонин,
катехоламины, гамма-аминомасляная кислота, полиамины.

Гистамин образуется при декарбоксилировании аминокислоты

гистидина. Он синтезируется в тучных клетках, накапливается в секреторных
гранулах, выделяется при раздражении клеток.

Гистамин оказывает разнообразные биологические эффекты: вызывает

расширение сосудов, снижает артериальное давление, увеличивает тканевую
проницаемость, вызывает местный отёк, стимулирует желудочную секрецию,
обладает бронхоспатическим эффектом. В высокой концентрации он
является медиатором воспалительных и аллергических реакций.

Серотонинобразуется при декарбоксилировании гидрокситриптофана.

Он синтезируется в хромаффиннных клетках, в некоторых ядрах
подкорковых структур, в тромбоцитах.
Эффекты серотонина: вызывает спазм сосудов, повышение артериального
давления, стимулирует перистальтику кишечника, участвует в
терморегуляции, в механизмах сна, памяти, является источником для синтеза
гормона мелатонина, влияет на эмоциональные реакции человека.

Катехоламины (дофамин, адреналин, норадреналин) синтезируются из

аминокислоты тирозина.

Дофамин – возбуждающий медиатор, при его дефиците развивается болезнь

Паркинсона (адинамия, ригидность, тремор). Адреналин вызывает спазм
сосудов, повышают артериальное давление, стимулирует работу сердца,
является гормоном.

Норадреналин в основном выполняет нейромедиаторные функции.

Гамма-аминомасляная кислота (ГАМК)образуется при

декарбоксилировании глютаминовой кислоты, является тормозным
медиатором, улучшает кровоснабжение головного мозга, активирует
окислительные процессы в нём.

Полиамины (спермин, спермидин)синтезируются из орнитина и

метионина, участвуют в регуляции процессов трансляции, транскрипции,
репликации.

Так как биогенные амины очень активны, они быстро инактивируются в

тканях. Распад биогенных аминовосуществляется несколькими способами:
окисление, метилирование, дезаминирование. Основным способом
инактивации биогенных аминов являетсяокислительное дезаминированиепод
действием ферментов аминооксидаз (моноаминооксидаз, полиаминооксидаз).

Некоторые амины (триптамин, гистамин) обладают биологической

активностью, среди диаминов известны ядовитые вещества (кадаверин,
путресцин). Существуют специальные механизмы обезвреживания подобных
соединений, суть которых в целом сводится к окислительному
дезаминированию с выделением аммиака.
Способы обезвреживания аммиака.
Одним из конечных продуктов обмена аминокислот является
высокотоксичное соединение - аммиак. Поэтому концентрация аммиака в
организме должна сохраняться на низком уровне. Действительно, уровень
аммиака в крови в норме не превышает 60 мкмоль/л (это почти в 100 раз
меньше концентрации глюкозы в крови). В организме человека подвергается
распаду около 100 г аминокислот в сутки, следовательно, высвобождается
около 15 г аммиака. В опытах на кроликах показано, что концентрация
аммиака 3 ммоль/л является летальной. Таким образом, аммиак должен
подвергаться постоянному обезвреживанию с образованием нетоксичных
соединений, легко выделяющихся с мочой.
Можно выделить несколько основных способов обезвреживания
аммиака.
- образование амидов дикарбоновых аминокислот (восстановительное
аминирование);
- синтез мочевины;
- образование аммонийных солей;
1. Восстановительное аминирование.
Одним из путей связывания и обезвреживания аммиака в организме, в
частности в мозге, сетчатке, почках, печени и мышцах - это биосинтез
амидов глутаминовой и аспарагиновой кислот (глутамина или аспарагина).
Образование глутамина (аспарагина) является, во-первых, экспресс
способом нейтрализации аммиака и во-вторых, способом переноса аммиака
от периферических тканей к печени и почкам, где происходит окончательное
обезвреживание этого яда и выведение из организма.
Обезвреживание аммиака путем синтеза глутамина имеет и
анаболическое значение, поскольку глутамин используется для синтеза
ряда соединений. Амидная группа глутамина может использоваться для
синтеза аспарагина, глюкозамина и других аминосахаров, пуриновых и
пиримидиновых нуклеотидов. Таким образом, в этих реакциях азот
аммиака включается в разнообразные структурно-функциональные
компоненты клетки.
2. Образование аммонийных солей.
В целом, весь аммиак из организма удаляется с мочой двумя путями:
- в виде мочевины, которая синтезируется в печени;
- в виде солей аммония образующихся в эпителии канальцев почек;
 3. Основным механизмом обезвреживания аммиака в организме
является синтез мочевины. Мочевина выводится из организма с мочой в
качестве главного конечного продукта белкового обмена. На долю мочевины
приходится до 80-85 % от всего выводимого из организма азота. Основным
местом синтеза мочевины является печень. Синтез мочевины является
циклическим метаболическим процессом и носит название орнитинового
цикла мочевинообразования Кребса.

За каждый
оборот цикла
из двух
молекул
аммиака

синтезируется одна молекула мочевины, и расходуются три молекулы АТФ.

Рис. 3. Схема биосинтеза мочевины.

Ключевыми ферментами биосинтеза мочевины являются

карбамоилфосфат-синтетаза, ортиникарбамоилтрансфераза и аргиназа.
Источниками азота в мочевине являются аммиак и аспарагиновая кислота.
Орнитиновый цикл тесно связан с циклом Кребса. Фумаровая кислота из
орнитинового цикла «уходит» в цикл Кребса. Цикл трикарбоновых кислот, в
свою очередь, обеспечивает орнитиновый цикл молекулами АТФ.