Взаимодействие антитела с

антигеном.Образование иммунных
комплексов.Валентность антител.Полные и
неполные антитела.Первичный и Вторичный
иммунный ответ.Современная теория синтеза
антител

Билалов Ниязи
121R1b
 Взаимодействие антитела с антигеном
­ ­ – специфич
В её основе ­ ­ . связывание
­ ­ ­ ­ ­ ­ с антителом
антигена ­ ­ ­ , приводящее
­ ­ ­ ­ ­ ­ ­
к образованию ­ ­ ­
иммунно
­ ­ , в котором
го комплекса ­ ­ ­ ­ обычно
антиген ­ утрачивает
­ ­ ­ ­ свою биологич
­ . активность
­ ­ . Для осуществления
­ ­ ­­ ­
­ процесса
этого ­ ­ требуется
­ ­ ­ тесное
­ ­ ­ ­ ­
взаимодействие ­ ­ определёнными
между ­ ­ ­ ­ ­ участками­ ­ ­ молекул
­ ­ антиге
­ ­ ­
на (антигенными
­ ­ ­ ­ детерминантами
­ ­ ­ ­ ­ ,эпитопов) и антитела
­ ­ ­ (активным
­ ­ ­
центром ,паратопов ), что достига
­ ­ ­
­ благодаря
ется ­ ­ ­ их комплементарности
­ ­ ­ ­ ­ . Функциональные
­ ­ ­ ­ молекул
участки ­ ­ в области
­ ­ контакта
­ ­ удер ­
­ ­ ­ слабыми
живаются ­ ­ водородными
­ ­ ­ ­ связями­ ­ , а также
­ межмолекулярными
­ ­ ­ ­ ­ ­ взаимодействиями
­ ­ ­ ­ .

­ ­ ­
Подчинение А. – а. р. закону
­ ­ действующих
­ ­ ­ масс позво­ ­
­ рассчитать
ляет ­ ­ ­
константу­ равновесия
­ ­ ­ (связывания
­ ­ ­ ),
­ ­
служащую ­
мерой cродства (аффинности
­ ­ ­ ) антигенной
­ ­ ­
­ ­ ­ ­ и активного
детерминанты ­ ­ ­ центра­ . При участии
­ в А. –
а. р. антигенов
­ ­ , имеющих ­ ­
две или более ­ ­ ­ ­
детерминанты
(поливалентные
­ ­ ­ ­ ), взаимодействие
­ ­ ­ ­ ­­
каждой ­
новой ­
пары
­ ­ ­
детерминант ­ ­
и активных ­
центров ­ ­
облегчается­ ранее
­ ус­
­ ­ ­ ­ связями
тановленными ­ ­ (кооперативный
­ ­ ­ ­ ­
эффект ). Сум­
­
марное ­ ­ всех комплементарных
сродство ­ ­ ­ ­ ­ ­
участков ­ ­
назы
­ авидностью
вают ­ ­ .
Взаимодействие антитела с
антигеном
Типы межмолекулярных взаимодействий антиген-антитело

Нековалентные связи, обеспечивающие

взаимодействие антиген-антитело
 Взаимодействие антитела с антигеном
­ ­
Иммунные ­ ­ могут
комплексы ­ формировать
­ ­ ­ ­
­ ­ ­
ся на поверхности ­ или в жидкой
клеток ­
­ (в межклеточной
фазе ­ ­ ­ ­ ­ , сыворот
жидкости ­ ­ ­
­ и т. п.). При этом происходит
ке крови ­ ­ ­ из­
­ ­
менение ­ ­ ­
конформации ­ ­ ­ антите
молекулы ­ ­ ­
­ ­ ­
ла и некоторые ­ скрытые
до того ­ ­ ­
её участ
­ ­ ­ ­ доступными
ки оказываются ­ ­ ­ для молекул
­ ­ ,
­ ­ ­
обладающих ­ ­ : первого
с ними сродством ­ ­
­ ­ ­ (Сlq)
компонента ком­пле­мен­та ­ ­ ­
и рецепторов
­ ­ ­ ­ ­
фагоцитирующих ­
клеток – макрофагов
­ ­ ­ и
­ ­ ­
нейтрофилов (Fc-рецепторов
­ ­ ­ ). Защитное
­ ­
­ ­
действие ­ ­ ­ ­ ­ ­ связывания
непосредственного ­ ­ ­
­ ­ ­ с антигеном
антитела ­ ­ ­ ­ ­ ­ ­ ­ ­ ней­
ограничивается
­ ­ ­ ­ токсинов
трализацией ­ ­ ­ ­
белковой ­ ­
природы
­ ­ ­ ­ ­ микроорганизмов
и обездвиживанием ­ ­ ­ ­ ­ .
 Взаимодействие антигена с антителом
­ ­ благодаря
Однако ­ ­ ­ взаимодействию
­ ­ ­ ­ ­ ­ ­ ­ фагоцитирующих
с рецепторами ­ ­ ­ ­ ­ ­ антитела
клеток ­ ­ ­ , связавшиеся
­ ­ ­ с поверхно
­ ­ ­
­ ­
стью микробов ­ ­ ­
или иных чужеродных ­ , способствуют
клеток ­ ­ ­ ­ их поглощению
­ ­ ­ ­ ­ ­ ­ ­
и перевариванию . Взаимодействие
­ ­ ­ ­
Clq с фиксированными
­ ­ ­ ­ ­ на клетках
­ ­ ­ ­ ­ приводит
антителами ­ ­ ­ ­ ­
к активации ­ ­ ­ , результатом
комплемента ­ ­ ­ ­ является
чего ­ ­ ­
­
лизис ­ или усиление
клеток ­ ­ ­ ­ ­ ­ . Иммунные
их фагоцитоза ­ ­ ­ ­ , формирующиеся
комплексы ­ ­ ­ ­ ­
в жидкой ­ , в зависимо
фазе ­ ­ ­ ­
­ ­ и состава
сти от размера ­ ­ могут
­ сохранять
­ ­ ­ ­
растворимость (циркулирующие
­ ­ ­ ­ ­ ­
иммунные ­ ­ ) или отклады
комплексы ­ ­ ­
­ в тканях
ваться ­ . В последнем
­ ­ ­
случае ­ участку
к этому ­ ­ привлекаются
­ ­ ­ ­ клетки
­ , несущие
­ ­ Fc-рецепторы
­ ­ ­ , которые
­ ­ обу­
­ ­ ­ развитие
словливают ­ ­ ­ ­ ­
воспаления ­ ­ ­
и разрушение ­ .
тканей
 Основные типы антител по действию
на антиген:
Антитоксические нейтрализуют или флоккулируют антигены.

Агглютинирующие агрегируют антигены.

Преципитирующие образуют комплекс с растворимыми антигенами

только в растворах или гелях;

Лизирующие вызывают разрушение клеток-мишеней.

Опсонизирующие взаимодействуют с поверхностными структурами

клеток микробов, способствуя поглощению их
фагоцитами.

Нейтрализующие инактивируют антигены, лишая их возможности

проявлять патогенное действие.
 Аффинность АТ
Аффинность – сила связи одного
антигенсвязывающего центра с индивидуальным
эпитопом АГ.
Зависит от степени комплементарности
антигенсвязывающего центра и эпитопа.
Наибольшим аффинитетом обладают
МКА(моноклональные антигены), наименьшим –
нормальные АТ.
Аффинность антител повышается в процессе
иммунного ответа в связи с селекцией наиболее
специфичных клонов В-лимфоцитов.

Существует также термин авидности антител,

который употребляется для описания
суммарной силы взаимодействия
поливалентного антитела с
полидетерминантным антигеном.
 Авидность АТ
Авидность – прочность связывания АТ и АГ (суммарная
сила).
Определяется аффинностью и числом
антигенсвязывающих центров.
Поливалентность АГ и АТ существенно усиливает
прочность их соединения, поскольку для диссоциации
иммунных комплексов необходим разрыв сразу всех связей.
 Иммунные комплексы и
механизм их образования
Иммунные комплексы формируются при взаимодействии образовавшихся в организме
специфических антител-иммуноглобулинов с антителами, которые индуцировали иммунный ответ и
продукцию них антител. Взаимодействие специфических антител с антигенами является
важнейшим механизмом противоинфекционный защиты:антитела нейтрализуют бактериальные
экзотоксины,нейтрализуют внеклеточные вирусы ,опсонизируют бактерии способствуя их
фагоцитозу и внутриклеточной бегали. При формировании иммунного комплекса структура и
биологическая активность антигена изменяются,претерпевая изменения и конформация самой
молекулы иммуноглобулина. Формирование ИК ведет к аггрегации молекул
иммуноглобулинов,связанных между собой антигенами. Отсюда выраженная способность ИК к
осаждению ,способность образовывать депозиты в тканях организма
 Валентность антител
Под валентностью антител понимают количество способных реагировать с антигеном активных центров. В соответствии с
указанными различиями молекулярной организации, иммуноглобулины разных классов бывают двухвалентными (IgG) или
поливалентными (IgM). Являясь пентамерами, молекулы IgM имеют десять активных центров. Это свойство антител
выявляется при взаимодействии их с антигенами: связываясь с аналогичными антигенными детерминантами,
расположенными на разных, например бактериальных клетках, IgG и IgM вызывают их видимую агрегацию. Мономерные
же молекулы IgA, хотя и имеют два активных центра, не осаждают антигены, так как их активные центры настолько
сближены, что IgA не может выполнять роль связующего мостика.
 Валентность антител
Наряду с двухвалентными, или полными, антителами, при некоторых заболеваниях в организме человека накапливаются
так называемые неполные, или моновалентные антитела. Соединяясь с антигеном, они не могут вызвать его агрегацию,
так как связь между ними происходит только в одном из двух активных центров, а лишь блокируют его. Это не значит, что
второй активный центр в таких антителах отсутствует. По неизвестным причинам он замаскирован, не проявляется.
Присутствие неполных (блокирующих) антител выявляют с помощью антиглобулиновой реакции Кумбса
 Полные и неполные антитела

Деление основано на способности образовывать в реакции агглютинации или

преципитации (in vitro) хорошо различимую глазом макромолекулярную структуру гига­
нтского иммунного комплекса. Таким свойс­твом обладают полные антитела. К ним отно­
сятся полимерные молекулы Ig (изотип М), а также некоторые IgA и IgG.
Полные и неполные антитела
Неполные антитела лишены такой способ­ности, несмотря на то что
они специфически связываются с антигеном. В связи с этим их еще
называют непреципитирующими или блокирующими антителами.
Причиной этого явления может быть экранирование одного из
антигенсвязывающих центров мономерной
молекулы Ig, а также недостаточное число или малая доступность
антигенных детерми­нант на молекуле антигена. Выявить непол­ные
антитела можно при помощи реакции Кумбса — путем использования
«вторых», антииммуноглобулиновых антител.
 Реакция Кумбса
Реакция Кумбса (R. R. А. Coombs, англ. иммунолог, 1921-2006 гг.) — антиглобулиновый тест (проводится
на основе специально приготовленного препарата — антиглобулиновой сыворотки) для определения неполных
антиэритроцитарных антител. Тест Кумбса используется для выявления антител к резус-фактору у беременных женщин и
определения гемолитической анемии у новорождённых детей с резус-несовместимостью, влекущей разрушение эритроцитов;
установления состояния изосенсибилизации, то есть обнаружения изоантител, возникающих при повторных
переливаниях крови; выполнения пробы на совместимость при гемотрансфузиях; определения в эритроцитах разновидности

резус-фактора; обнаружения аутоиммунных антител на эритроцитах больных приобретенной гемолитической анемией и другими
аутоаллергическими болезнями, а также при некоторых инфекциях, протекающих с аллергическим компонентом;
применяется также в судебно-медицинских и антропологических исследованиях[1]. Основы метода описаны в 1908 году
Мореши (С. Moreschi), в 1945 году — Кумбсом, Мураном и Рэйсом[2]. Реакция проходит в 2 этапа.
 Прямая реакция Кумбса
Прямая проба Кумбса —применяется для выявления наличия на поверхности мембран эритроцитов
эритроцит-связывающих антител (IgG) или компонентов системы комплемента (C3). Эритроциты больного
инкубируют с антителами к человеческим иммуноглобулинам IgG и С3. Если антитела класса IgG или С3
связываются с мембраной эритроцитов, происходит агглютинация эритроцитов—положительный результат.
Положительный результат свидетельствует о наличии аутоантител к эритроцитам. Может иметь место
ложноположительный результат, который не всегда соответствует гемолизу. Таким образом, результаты всегда
должны коррелировать с клиническими проявлениями и симптомами.
 Непрямая реакция Кумбса
Непрямой антиглобулиновый тест (непрямая реакция Кумбса, скрининг антиэритроцитарных антител, IAT) выявляет
антитела в сыворотке пациента.
Непрямая реакция Кумбса проводится в два этапа. На первом этапе необходимо осуществить сенсибилизацию
эритроцитов. С этой целью берут суспензию стандартных эритроцитов, добавляют к ним исследуемую сыворотку и
инкубируют при 37 °С в течение 15 минут. При наличии антител происходит их фиксация на эритроцитах. Второй
этап – выявление фиксированных антител на эритроцитах. Для этого антиглобулиновую сыворотку добавляют к
сенсибилизированным эритроцитам. Агглютинация в этом тесте говорит о наличии антиэритроцитарных антител в
исследуемой сыворотке, что может наблюдаться при резус-конфликте, после трансфузии донорских эритроцитов,
при некоторых патологических состояниях.
Первичный и Вторичный иммунный ответ
В зависимости от характера контакта с антигеном (а точнее – наличием в организме клеток иммунологической памяти,
несущих рецептор к причинному антигену) различают первичный и вторичный иммунный ответ
Первичный иммунный ответ
развивается после первого контекта с антигеном. Для него характерны следующие особенности.
– Наличие латентного периода (2-3 дня после первого контакта с антигеном). Это связано с отсутствием лимфоцитов
памяти. Все клоны лимфоцитов находятся в фазе покоя G0. При поступлении в организм антигена вначале синтезируются
IgM (антитела выявляются через 2-3 суток), а затем – IgG (пик приходится на 10-14 сутки, причем эти антитела могут
сохранятся в низком титре в течение всей жизни). Отмечается также небольшое увеличение уровней IgA, IgE и IgD.
Образуются комплексы антиген-антитело.
– Уже с третьих суток появляются иммунные Т-лимфоциты.
– Первичный иммунный ответ затихает через 2-3 недели после стимуляции антигеном.
– Появляются лимфоциты памяти и может долго поддерживаться следовой уровень IgG.
Первичный гуморальный ответ
В ответ на первое попадание антигена в организм,
развивается первичный ответ, он протекает в 4
фазы:
Лаг – фаза –антитела в сыворотке крови не
обнаруживаются.
Лог - фаза – титр антител нарастает
логарифмически (основные антитела-класса М).
Фаза плато –стабилизация титра антител.
Фаза затухания –катаболизирование или
выведение из организма антител.
Временные характеристики
первичного ответа
IgM:
При первичном иммунном ответе первыми
синтезируются антитела класса М (начало –на 3-4
сутки, пик –на 7 сутки, затухание – на 14 сутки
после попадания в организм антигена - АГ).
IgG:
Позже и в небольших количествах происходит
синтез антител класса G (начало – на 6 сутки, пик
– на 14 сутки, затухание - на 21 сутки).
Вторичный иммунный ответ
развивается после повторного контакта с тем же антигеном и имеет следующие особенности.
– В организме уже имеются долгоживущие клоны антигенспецифических Т- и В-лимфоцитов памяти,
ответственных за «память» об антигене и способных к рециркуляции, они находятся не в покое, а в фазе G1.
– Стимуляция синтеза антител и иммунных Т-лимфоцитов наступает через 1-3 дня.
– Т-клетки памяти быстро превращаются в эффекторные.
– Количество антител сразу резко увеличивается, причем синтезируются иммуноглобулины высокой
специфичности – IgG.
– Чем больше контактов с антигенами имело место в данном организме, тем выше будет концентрация и
специфичность (аффинность) антител.
Вторичный иммунный ответ
При повторном попадании в организм того же антигена,
развивается вторичный иммунный ответ, который
характеризуется:
Укороченной лаг – фазой.
Более продолжительными фазами плато и затухания.
Уровень антител во время фазы плато обычно более,
чем в 10 раз превышает количество антител при
первичном ответе.
Преобладающие антитела вторичного ответа–
высокоаффинные IgG.
Временные характеристики
вторичного ответа
IgG:
При вторичном иммунном ответе синтезируются в
больших количествах высокоаффинные антитела
класса G уже на 2-3 сутки, пик их уровня
достигается на 7 сутки, фаза плато – более
длительная.
IgM:
Антитела класса М при вторичном ответе
синтезируются лишь в небольших количествах.
Роль В- и Т-лимфоцитов в гуморальном
ответе
В-лимфоцитов:
1) Презентация антигена

2) Связывание антигенов

Т-лимфоцитов:
1) Т-хелперы могут помогать

В-лимфоцитов
2) Усиление иммунитета
После иммунного ответа
остаются В- и Т-клетки
памяти
Сравнительная характеристика первичного
и вторичного иммунного ответа
Характеристика Первичный ответ Вторичный ответ

Лаг-период 4-7 сут. 1-3 сут.

Пик ответа 7-10 сут. 4-5 сут.

Отвечающие клетки Наивные В-клетки В-клетки памяти

Изотип антител Преобладает IgM Преобладает IgG

Уровень ответа Варьирует В 100-1000 раз выше, чем

при первичном
Аффинитет антител 10-5 – 10-5 10-9 – 10-11
Продукция IgM- и IgG-антител при
первичном и вторичном иммунном ответе
При вторичном ответе существенно
возрастает не только уровень антител,
возрастает их аффинность
Фазы антителопродукции (продолжение)
1. Латентная фаза:
1) Антителопродукция практически не изменяется и
остается на базальном уровне.
2) в этот период происходит переработка и
представление антигена иммунокомпетентным
клеткам и запуск пролиферации антигенспецифичных
клонов.
2. Логарифмическая фаза:
1) интенсивный прирост количества антиген-
специфичных В-лимфоцитов =>
2) что находит отражение в существенном нарастании
титров специфических антител.
Фазы
антителопродукции
(продолжение)
3. Стационарная фаза
1) количество спец. Антител и синтезирующих их клеток
достигает максимума и стабилизируется.
2) Освобождение макроорганизма от антигена устраняет
антигенный стимул, поэтому вслед за стационарной фазой
начинается фаза снижения.

4. Фаза снижения:
1) наблюдается постепенное уменьшение численности
клонов специфических антителопродуцентов и титров
соответствующих антител.
 Современная теория синтеза антител
Современные теории образования антител можно разделить на две группы. Сторонники первой группы считают, что
антиген, введенный в организм, непосредственно участвует в образовании антител. Это инструктивные теории.
Классическим примером их является теория прямой матрицы Гауровитца — Полинга. Согласно этой теории, антиген
проникает в клетку и служит там своеобразной матрицей, на поверхности которой, как на штампе, происходит
пространственное конфигурирование гаммаглобулинов. Под влиянием антигена происходит изменение синтеза глобулинов,
касающееся не формирования полипептидной цепи, а лишь второй фазы — стадии формирования молекулы, конфигурация
которой меняется: концевые части образовавшейся молекулы точно соответствуют конфигурации детерминантной группы
антигена. Данная теория не может правильно объяснить многие иммунологические феномены, в том числе и выработку
иммуноглобулинов. Она не объясняет несоответствие между продолжительностью образования иммуноглобулинов и
временем сохранения антигена в организме (антитела сохраняются годами после введения антигена, а он — ограниченный
срок). С позиций данной теории невозможно объяснить феномены иммунологической памяти, иммунологической
толерантности, эффективность вторичного иммунного ответа.
Современная теория синтеза антител
Вторая группа — селективные теории антителообразования. Теория «боковых цепей» П. Эрлих а, созданная в 1896 г. и
имеющая лишь историческое значение, заслуживает внимания, так как в ней П. Эрлих впрвые высказал идею
селекционирующей роли антигена. Клетка, синтезирующая антитела, не создает новых специфических структур под
влиянием антигена, они в ней предсуществуют. П. Эрлих предполагал, что на поверхности клеток имеются разнообразные
химические группировки — рецепторы, с которыми антиген вследствие химического сродства соединяется, блокирует их
функции. В ответ на это клетки вырабатывают большое количество рецепторов, избыток которых обрывается и начинает
циркулировать в крови в виде специфических антител.