УДК 612.

821
ВЛИЯНИЕ СОЦИАЛЬНОЙ ИЗОЛЯЦИИ И ОБОГАЩЕННОЙ СРЕДЫ НА
ИМПУЛЬСИВНОЕ ПОВЕДЕНИЕ КРЫС С РАННИМ ПРОВОСПАЛИТЕЛЬНЫМ
ЛИПОПОЛИСАХАРИДНЫМ СТРЕССОМ.

В.А. Груздева, Ф.Х. Закиров, М.И. Зайченко

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки

Институт Высшей Нервной Деятельности и Нейрофизиологии РАН, Москва
e-mail: Work.gruzdeva@gmail.com

Аннотация: Исследовали влияние условий содержания крыс на импульсивное

поведение крыс. Животные, содержавшиеся в обогащенной среде, были более
импульсивными, чем находившиеся в социальной изоляции. Ранний провоспалительный
стресс не влиял на проявление импульсивности. Самки, содержащиеся в условиях
обогащенной среды, оказались импульсивнее самцов.

Ключевые слова: Импульсивность, стресс, воспаление, социальная изоляция, обогащенная

среда

Известно, что стресс, пережитый в раннем возрасте, приводит к развитию целого ряда
психопатологий в зрелом периоде жизни. К ним относится и проявления чрезмерной
импульсивности. Нейровоспаление является одним из возможных механизмов, через
который ранний стресс оказывает отрицательное влияние на развитие и формирование
многих функций. Ранее нами было показано, что ранний провоспалительный
липополисахаридный (ЛПС) стресс статистически значимо усиливал импульсивное
поведение у взрослых животных. Целью настоящей работы было исследование влияния
условий содержания животных (социальная изоляция, обогащенная среда) на проявление
импульсивного поведения у крыс в норме и с ранним ЛПС стрессом. Социальная
изоляция является одной из важных форм стресса в подростковом периоде. Она лишает
крысят игрового поведения, безобидных схваток, хватания зубами за шерстку партнеров и
других форм социального взаимодействия, которые некоторые авторы рассматривают в
качестве предподготовки для формирования защитных реакций в будущем. В то же время
имеются данные, что проживание в условиях обогащенной среды может смягчать влияние
острого и хронического стресса (Keymoradzadeh et al., 2020; Dandi et al., 2018). Мы
предполагали, что социальная изоляция, оказывая дополнительное стрессорное действие,
будет усиливать влияние раннего ЛПС стресса на проявление импульсивного поведения, а
обогащенная среда, наоборот, противодействуя отрицательным эффектам ЛПС стресса,
будет снижать импульсивность, смещая поведение к самоконтрольным реакциям.
В задачи работы входило: создать ранний провоспалительный стресс, обеспечить
различные условия содержания животных (изоляция и обогащенная среда) и исследовать
у них импульсивное поведение методом delay-discounting.

Методика
В опытах было использовано 132 крысы линии Вистар в возрасте от 6 до 10 мес (78
самцов и 54 самок). Крысята были выведены в виварии ИВНД и НФ от крыс, полученных
из филиала “Столбовая” ФГБУН НЦБМТ ФМБА, Россия. 65 крысятам на 3-й и 5-й дни
жизни с помощью шприца вводили в холку бактериальный липополисахарид в дозе 50
мкг/кг в объеме 10 мкл/г (группа ЛПС), вызывая тем самым провоспалительный стресс. 67
крысятам в этом же возрасте подкожно в том же объеме вводили физиологический
раствор (группа ФИЗ). В возрасте 25 дней крысят отлучали от матери и разделяли на
подгруппы в зависимости от пола. В дальнейшем животных содержали в виварии при
обычном 12-часовом световом режиме в свободном доступе к воде и стандартному корму
ПК-120.
В возрасте 45 дней каждую группу крыс делили на три группы в зависимости от
условий содержания, которые оставались неизменными до конца экспериментов. Одна
группа крыс содержалась в стандартных условиях по 3-5 животных в клетке (группа
СТАНД). Вторая группа крыс подвергалась социальной изоляции (СИ). При социальной
изоляции крысы содержались поодиночке в клетках размером 30х30х17.5см. Третья
группа помещалась в обогащенную среду (группа ОС), которая создавалась в камере
размером 51х40.5х30см, где находились лесенки, беличье колесо, материал для зарывания,
трубки. В обогащенную среду крыс помещали на 20 мин через день. Четвертая группа
крыс (только самцы) постоянно содержалась в обогащенной среде в клетке 38х55х90см,
где находились лесенки, гамак, беличье колесо, материал для зарывания, трубки (группа
СО).
Таким образом, в работе анализировали поведение 8 групп крыс: ФИЗ+СТАНД (30
крыс), ЛПС+СТАНД (29 крыс), ФИЗ+ОС (15 крыс), ЛПС+ОС (14 крыс), ФИЗ+СИ (13
крыс), ЛПС+СИ (14 крыс), ЛПС+СО (8 крыс), ФИЗ+СО (9 крыс).
В экспериментах соблюдали принципы гуманности, изложенные в директивах
Европейского Сообщества (2010/63/ЕU), и положения ИВНД и НФ РАН о работе с
экспериментальными животными.
Методика delay discounting. Во время проведения экспериментов по изучению
импульсивного поведения (delay-discounting) крысам ограничивали доступ к пище так,
чтобы их вес поддерживался на уровне 85% от их веса при свободном доступе к пище.
Крыс в возрасте 4-6 мес начинали обучать нажимать на педаль для получения пищи –
стандартной пелеты (dustless precision pellets) 45 мг производства фирмы “BioServ”
(США). Обучение проводилось до тех пор, пока крыса с равной вероятностью не
нажимала на каждую из педалей. Затем режим подкрепления меняли так, что нажатие на
одну из педалей предоставляло 1 пелету, тогда как нажатие на другую – 4 пелеты, но с
задержкой в 5 с. Во время ежедневной экспериментальной сессии крысам предоставляли
25 проб. Регистрировали число нажатий на обе педали (k1 – число нажатий на педаль,
предоставляющую слабое, но немедленное подкрепление, k2 – число нажатий на педаль
для получения более ценного, задержанного подкрепления). Рассчитывали долю
задержанных реакций – k2/(k1 + k2), где 1 – 100% выбор задержанного подкрепления, а 0
– 100% выбор малоценного немедленного.
Статистическая обработка результатов. При обработке результатов использовали
стандартную программу STATISTICA 10.0. Распределение исследованных параметров
было проверено на нормальность по критерию Колмогорова–Смирнова Поскольку
анализируемые параметры удовлетворяли данному критерию, то при сопоставлении групп
крыс использовали дисперсионный анализ ANOVA, раздел factorial ANOVA. При post-hoc
анализе применяли критерий Fisher LSD. Различия считали статистически значимыми при
р< 0.05. Исследовали влияние факторов ПОЛ, ГРУППА и ВОЗРАСТ крыс и
взаимодействие этих факторов.

Результаты
Влияние социальной изоляции. В целом по всем животным изолированное содержание
крыс приводит к статистически значимому (р < 0.05) снижению импульсивности по
сравнению с животными, выращенными в стандартных условиях.
Социальная изоляция оказывала более выраженное влияние (р <0.05) на самцов, хотя у
самок также происходило снижение импульсивности по сравнению с животными,
содержавшимися в стандартных условиях, но не столь очевидное. При стандартных
условиях выращивания самцы, пережившие ранний провоспалительный стресс,
демонстрировали достоверно более высокую импульсивность (р <0.05) по сравнению с
контрольными животными. При содержании в условиях изоляции показатели
импульсивности не только превышали значения контрольных животных, но и смещались
в сторону самоконтроля. У контрольных животных, и у животных ЛПС группы
происходило снижение (р <0.05) импульсивности при содержании их в условиях
социальной изоляции, однако усиление поведения самоконтроля было лучше выражено у
крыс ЛПС группы. У самок, выращенных в изоляции различий в уровне импульсивности
между группами ФИЗ и ЛПС не наблюдалось.
Влияние обогащенной среды. Пребывание в обогащенной среде, в целом по всем
животным, приводило к значимому (р <0.05) усилению импульсивности. Усиление
импульсивности проявилось за счет группы самок, которые статистически значимо (р
<0.05), по сравнению с крысами, проживающими в стандартных условиях, предпочитали в
меньшей степени немедленное подкрепление. У самцов пребывание в обогащенной среде
никак не сказалось на импульсивности, ее уровень практически не отличался от
животных, проживающих в стандартных условиях
Влияние раннего провоспалительного стресса сильнее прослеживалось у крыс самцов.
Даже при содержании в нормальных стандартных условиях происходило увеличение
уровня импульсивности у самцов, переживших ранний ЛПС стресс. Обогащенная среда не
изменила этой тенденции, хотя большой разброс не позволил различиям достичь уровня
статистической значимости. У самок же различий между группами, получившими
инъекцию физ.р-ра и липополисахарида в раннем возрасте не проявилось совсем.
Влияние постоянной обогащенной среды оказалось статистически значимо у самок по
сравнению с группой, находившейся в изоляции и со стандартной группой, приводя к
большей импульсивности.

Среди самцов различных групп наибольшая статистически достоверная разница отмечена

в группе изоляции, по сравнению с остальными группами.
Анализ импульсивного поведения группы СО показал, что постоянное содержание
животных в условиях обогащенной среды приводит к еще большему усилению
импульсивности даже по сравнению с группой ОС, что еще раз подтверждает связь
выращиванию в среде, богатой разнообразными стимулами и импульсивности.

Заключение
Таким образом, длительная социальная изоляция приводила к снижению импульсивного
поведения, оцениваемого по методике delay-discounting, у самцов по сравнению с
контрольными животными. Эта разница еще больше усиливалась у самцов, испытавших
двойной стресс (СИ+ЛПС). У самок различия между группами были менее выражены.
Пребывание в обогащенной среде приводило к усилению импульсивного поведения, но
только у самок, а не у самцов, по сравнению крысами, проживавшими в стандартных
условиях. Ранний ЛПС стресс у крыс, пребывавших в обогащенной среде, нивелировал у
них прирост импульсивности, в результате различия между ЛПС и контрольными
группами стали недостоверными, как у самок, так и у самцов. В противоположность
нашим ожиданиям, социальная изоляция привела к ослаблению импульсивности у самцов,
а обогащенная среда к ее усилению у самок, по сравнению с контрольными животными.
Ранний ЛПС стресс еще больше снижал импульсивность у самцов, подвергавшихся СИ,
но уменьшал прирост импульсивности у крыс в условиях обогащенной среды. Хотя мы
получили противоположные, чем ожидали результаты, некоторые исследователи
(Kirkpatrick et al. 2013; 2014) также наблюдали не усиление, а ослабление импульсивного
поведения у крыс, переживших социальную изоляцию. Они объясняли большей
чувствительностью крыс, бывших в СИ, к величине подкрепления при его одинаковой
задержке в случае выполнения краткосрочных и долгосрочных реакций, чем крысы,
жившие в обогащенной среде. По мнению авторов, социальная изоляция вызывает у крыс
большую чувствительность к подкрепляющим свойствам пищевого подкрепления,
проявляя более высокую степень побудительной (incentive) мотивации к подкреплению и
большую реактивность к различиям величин подкрепления. Рассмотренные практические
и теоретические вопросы требуют дальнейшего специального исследования.

Литература:
Kirkpatrick K., Marshall A.T., Clarke J., Cain M.E. Environmental rearing effects on impulsivity
and reward sensitivity. Behav Neurosci. 2013. 127(5):712-724.

Kirkpatrick K., Marshall A.T., Smith A.P, Koci J., Park Y. Individual differences in impulsive
and risky choice: effects of environmental rearing conditions. Behav. Brain Res. 2014. 269:115-
127.

Effect of social isolation and enriched environment on impulsive behavior in rats with early
proinflammatory lipopolysaccharide stress.

V.A. Gruzdeva, F.Kh. Zakirov, M.I. Zaichenko

Federal State Budgetary Institution of Science

Institute of Higher Nervous Activity and Neurophysiology RAS, Moscow
e-mail: Work.gruzdeva@gmail.com

Abstract: We investigated the influence of the social environment on the impulsive behavior in
rats. The animals raised in an enriched environment were more impulsive than rats kept in social
isolation. Early stress did not affect the impulsivity in these conditions. Females kept in an
enriched environment turned out to be more impulsive than males.

Key words: Impulsivity, stress, inflammation, social isolation, enriched environment