МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЕ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ

ФЕДЕРАЦИИ

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ АВТОНОМНОЕ

ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ
«Национальный исследовательский университет ИТМО»

Мегафакультет компьютерных технологий и управления

Центр химической инженерии
Образовательная программа: Биоинженерия

Отчет по лабораторной работе №1

По дисциплине: «Биофизика»

«ФИЗИОЛОГИЯ РАСТИТЕЛЬНЫХ КЛЕТОК И ТКАНЕЙ.

Основные свойства цитоплазмы.»

Выполнили:
Мельникова Яна Павловна
Талибуллина Карина Ильясовна
Насонова Ксения Данииловна
Группа №3223(2)

Преподаватель:
Преподаватель практики
Фатеев Арсений Дмитриевич

Санкт-Петербург, 2023
 Теоретическая часть
В отличие от всех других эукариотических организмов для растительной
клетки характерны:
● пластидная система, возникающая в связи с
фототрофным способом питания;
● полисахаридная клеточная стенка, окружающая клетку;
● отсутствие центриолей у делящейся клетки;
● центральная вакуоль, играющая важную
физиологическую роль.
Основными структурными компонентами клетки служат клеточная стенка,
протопласт и вакуоль. Пограничными мембранами являются наружная –
плазмалемма и внутренняя – тонопласт.
Наружная цитоплазматическая мембрана клетки (плазмалемма) отделяет
клетку от окружающей среды, контролирует транспорт веществ внутрь клетки и из
нее, первой получает информацию о внешней среде. Внутриклеточные мембраны
обеспечивают пространственную упорядоченность многочисленных процессов,
протекающих в растительной клетке. Они создают изолированные пространства
(компартменты), благодаря чему в ней одновременно могут происходить
противоположно направленные процессы. В мембраны встроено большое
количество мультиферментных комплексов, транспортных систем, рецепторных
молекул, способствующих протеканию основных жизненных процессов.
Одним из важнейших физиологических свойств растительной клетки
является осмотическое поглощение воды. Осмосом называется прохождение
растворителя в раствор, отделенный от него полупроницаемой мембраной.
Полупроницаемость – способность мембраны пропускать растворитель, но не
молекулы растворенных веществ. Плазмалемма, выполняющая барьерную
функцию, обладает свойством избирательной проницаемо сти, или
полупроницаемости. Она хорошо пропускает молекулы одних веществ (например,
воды) благодаря наличию белковых пор – водных каналов, или аквапоринов, и
совершенно не пропускает или пропускает с трудом молекулы других.
Избирательная проницаемость мембраны сохраняется до тех пор, пока клетка
остается живой. После ее гибели мембраны становятся полностью проницаемыми.
Растительная клетка, окруженная клеточной стенкой определенной
эластичности, способной к растяжению, представляет собой осмотическую
систему (рис. 1).

Рис. 1. Схема растительной клетки как осмотической системы

Цитоплазма и вакуоль содержат большое количество осмотически

активных веществ: сахаров, органических кислот, солей. Мембраны клетки –
плазмалемма и тонопласт – избирательно проницаемы, и вода проходит через них
значительно легче, чем вещества, растворенные в клеточном соке и цитоплазме.
Благодаря избирательной проницаемости при помещении клетки в воду последняя
по законам осмоса будет поступать внутрь клетки. Разность в концентрациях
растворов, разделенных полупроницаемой перегородкой, определяет величину
осмотического давления (Р). От его величины зависит сила, с которой вода
поступает в клетку. Эта сила носит название сосущей силы клетки (S). В
плазмолизированной клетке осмотическое давление равно сосущей силе (Р = S).
По мере поступления воды в клетку объем вакуоли увеличивается, она давит на
цитоплазму и заставляет протопласт прижиматься к клеточной стенке. Клеточная
стенка эластична, она растягивается, отчего клетка переходит в напряженное
состояние – тургор. Давление протопласта на клеточную стенку носит название
тургора (Т). Если бы клеточная стенка могла растягиваться неограниченно, то
поступление воды в вакуоль шло бы до тех пор, пока бы концентрации растворов
внутри и снаружи клетки не сравнялись. Однако клеточная стенка имеет
ограниченную эластичность и оказывает противодавление на протопласт. Это
давление клеточной стенки на протопласт называется тургорным давлением.
Возникающее тургорное давление сначала уменьшает сосущую силу в
соответствии с формулой S = Р – Т, а затем, когда Т становится равным Р,
поступление воды прекращается, сосущая сила в этом случае равна нулю (S = 0).
Таким образом, поступление воды в клетку определяется разницей между
осмотическим давлением клеточного сока и противодавлением клеточной стенки.
Если клетку поместить в раствор, концентрация которого больше
концентрации клеточного сока (гипертонический раствор), то вода из клетки будет
выходить в наружный раствор, разбавляя его.
Вследствие выхода воды из клетки объем протопласта будет уменьшаться,
и он начнет отставать от клеточной стенки. Это явление называется плазмолизом
(рис. 2).

Рис. 2. Плазмолизированная клетка чешуи лука

Если такую плазмолизированную клетку поместить в воду, то произойдет

обратный процесс – вода поступит в клетку.
Передвижение воды с помощью диффузии из одной системы в другую
зависит от разницы в свободной энергии. Энергия молекул характеризуется
величиной их химического потенциала. Химический потенциал воды 8 называется
водным потенциалом (Ψ). Водный потенциал клетки (Ψкл) – это разность между
свободной энергией воды внутри и вне клетки при одинаковой температуре и
одинаковом атмосферном давлении.
Время наступления плазмолиза при помещении клетки в гипертонический
раствор определяется разными факторами, в том числе вязкостью цитоплазмы.
Вязкость – это сила, которую нужно приложить для перемещения одного слоя
вещества относительно другого. Вязкость зависит от количественного и
качественного состояния тех соединений и структур, которые входят в состав
цитоплазмы.

Практическая часть
Опыт 1. Явления плазмолиза и деплазмолиза
Растительная клетка является осмотической системой, в которой роль
раствора осмотически активных веществ играет клеточный сок, а роль
полупроницаемой перегородки – цитоплазматические мембраны. Клеточный сок
обладает определенным о смотиче ским давлением, которо е прямо
пропорционально числу частиц (молекул, ионов) в единице объема, т. е.
концентрации растворенных веществ. Раствор, отделенный от чистой воды
полупроницаемой мембраной (пропускающей воду и не пропускающей
растворенные вещества), поглощает воду с силой, численно равной его
осмотическому давлению, которое нужно приложить к системе, чтобы
воспрепятствовать передвижению воды в сторону раствора.
По отношению к клеточному соку растворы делятся:
– на гипотонические, осмотическое давление которых ниже осмотического
давления клеточного сока;
– изотонические, осмотическое давление которых равно давлению
клеточного сока;
– гипертонические, осмотическое давление которых выше, чем у
клеточного сока.
 При погружении в гипертонический раствор вследствие выхода воды из
клеток происходит плазмолиз. В ходе плазмолиза форма плазмолизированного
протопласта меняется (рис. 3).

Рис. 3. Формы плазмолиза растительной клетки:1 – тургесцентная клетка, 2 –

уголковый плазмолиз, 3 – вогнутый плазмолиз, 4 – выпуклый плазмолиз, 5 –
судорожный плазмолиз (при быстром действии концентрированного плазмолитика
и высокой вязкости цитоплазмы)

Вначале протопласт отстает от клеточной стенки лишь в отдельных местах,

чаще всего в уголках. Плазмолиз такой формы называют уголковым. Затем
протопласт продолжает отставать от клеточных стенок, сохраняя связь с ним лишь
в отдельных местах. На этом этапе плазмолиз называется вогнутым. Постепенно
протопласт отрывается от клеточных стенок по всей поверхности и принимает
округлую форму. Такой плазмолиз носит название выпуклого. Если у протопласта
связь с клеточной стенкой сохраняется, то при дальнейшем уменьшении объема в
ходе плазмолиза протопласт принимает неправильную форму. Такой плазмолиз
носит название судорожного. Временем плазмолиза является период с момента
погружения растительной клетки в раствор до наступления выпуклого плазмолиза.
Время, в течение которого вогнутый плазмолиз становится выпуклым, позволяет
оценить вязкость цитоплазмы.
При сравнении вязкости цитоплазмы в растворах солей калия и кальция
можно отметить, что ионы калия, проникая в цитоплазму, повышают ее
гидрофильность, уменьшают вязкость и способствуют ее быстрому отрыву от
клеточной стенки. Поэтому в растворах солей калия плазмолиз быстро принимает
форму выпуклого. Ионы кальция, наоборот, повышают вязкость цитоплазмы,
увеличивают силы сцепления ее с клеточной стенкой, и плазмолиз наступает
медленнее.
Плазмолиз является обратимым процессом. При помещении клетки в воду
он прекращается. Это явление называется деплазмолизом.
Ход работы.
1. Приготовили 1М раствор сахарозы: растворили 34,2 г сахарозы в 100
мл воды
2. Срез эпидермиса с выпуклой чешуи окрашенного лука поместили на
предметное стекло в каплю воды, накрыли покровным стеклом и рассмотрели
под микроскопом
3. Заменили воду 1 М раствором сахарозы: нанесли на предметное стекло
рядом с покровным каплю раствора сахарозы, с другой стороны покровного
стекла отсосали воду полоской фильтровальной бумаги (повторили это до
полной замены воды раствором)
4. Наблюдали под микроскопом изменения, происходящие в клетке
5. Ткань с плазмолизированными клетками поместили в воду.
6. Наблюдали процесс деплазмолиза
7. Зафиксировали клетки, нагревая препарат над пламенем спиртовки,
вновь поместили срез в раствор сахарозы
8. Ре зульт аты наблюдений запис а ли. Плазмолизированные и
деплазмолизированные клетки сфотографировали.
Результаты:

Рис. 4. Клетки Рис. 5. Клетки

эпидермиса лука в растворе эпидермиса лука в
с водой (изначально) (x10) растворе с сахарозой
(плазмолиз) (x10)
 Рис. 8. Клетки
Рис. 6. Клетки Рис. 7. Клетки эпидермиса лука в
эпидермиса лука в эпидермиса лука после растворе с сахарозой
растворе с водой огня (разрыв клетки) (пигмент окончательно
(деплазмолиз) (x10) (x10) вымылся) (x10)

Выводы: Клетки эпидермиса лука имеют особенности строения и формы.

В 1 М растворе сахарозы происходит плазмолиз клеток - клетки теряют свою
исходную форму и размер. При помещении плазмолизированных клеток в воду
происходит деплазмолиз - клетки возвращаются к своему исходному состоянию.
Фиксация клеток препаратом позволяет сохранить их структуру и особенности.
Замена воды раствором сахарозы может приводить к изменению
эндоплазматического ретикулума клеток и другим изменениям внутри клетки.
Также при нагревании клеток эпидермиса лука над спиртовкой они умирают,
поэтому плазмолиз и деплазмолиз не происходит, а получается лишь вымывание
пигмента из мертвых клеток.
Таким образом, лабораторная работа позволила изучить особенности
клеток эпидермиса лука и наблюдать изменения, происходящие в них при
воздействии раствора сахарозы и температуры.

Опыт 4. Колпачковый плазмолиз

Колпачковый плазмолиз возникает под влиянием солей, проникающих
через плазмалемму и вызывающих набухание мезоплазмы. При длительном
нахождении клеток в растворе нитрата калия (более 15 мин) цитоплазма набухает
в удлиненных клетках; там, где протопласт не касается клеточных стенок,
образуются так называемые колпачки цитоплазмы. Такой плазмолиз носит
название колпачкового (рис. 4).Еще интенсивнее набухание происходит в
растворах роданистого калия (KCNS), в которых колпачки цитоплазмы образуются
сразу же после начала плазмолиза.
Увеличение объема плазмы (колпачок) обуславливается разжижающим
воздействием ионов калия, которые относительно быстро проникают через
плазмолемму в протопласт и гораздо медленнее проникают далее в вакуоль.

Рис. 9. Колпачковый плазмолиз: 1 – набухшая протоплазма, образовавшая

колпачки, 2 – ядро, 3 – вакуоль с окрашенным клеточным соком

Ход работы.
1. Приготовили раствор роданистого калия: растворили 9,7182 г KCNS в
100 мл воды
2. Срез эпидермиса чешуи окрашенного лука поместили на предметное
стекло в каплю 1 М раствора роданистого калия (KCNS) и накрыли покровным
стеклом
3. Рассмотрели препарат сначала при малом, а затем при большом
увеличении
4. Сфотографировали клетки с колпачковым плазмолизом
Результаты:
 Рис. 10. Клетки эпидермиса Рис. 11. Клетки эпидермиса
лука с раствором роданистого калия лука с раствором роданистого калия
(колпачковый плазмолиз, малое (колпачковый плазмолиз, большое
увеличение) (x10) увеличение) (x40)

Выводы: В результате проведения лабораторной работы был получен

препарат эпидермиса чешуи окрашенного лука, окрашенного в 1 М растворе
роданистого калия (KCNS). Просмотр препарата сначала при малом, а затем при
большом увеличении позволил наблюдать различные структуры клеток
эпидермиса и их изменения. В ходе наблюдений были зафиксированы клетки с
колпачковым плазмолизом. Колпачковый плазмолиз – это процесс, при котором
клетка потеряла воду и ее протопласт сместился от клеточной стенки. В
результате этого плазмолиза клетка стала меньше размером и изменена по форме.
Рассмотрение клетки с колпачковым плазмолизом позволяет наглядно
представить изменения, происходящие в клетке при плазмолизе. Проведение
экспериментов с применением раствора роданистого калия позволяет изучить
процессы плазмолиза и понять влияние концентрации раствора на изменения
клеток.

Опыт 5. Движение цитоплазмы

Цитоплазма представляет собой метаболический аппарат клетки, в ней
протекают основные обменные процессы. Об их активности свидетельствует
движение цитоплазмы. В естественных условиях в клетках растений происходит
быстрое или почти незаметное движение цитоплазмы. На скорость движения
оказывают влияние различные факторы: свет, температура, химические и
механические воздействия и др.
Ход работы.
1. Отделили от мха лист близкий к верхушечной почке
2. Поместили его на предметное стекло в каплю воды, взятой из сосуда, в
котором находилось растение
3. Через 10 мин, когда установился стационарный уровень движения
цитоплазмы, клетки листа рассмотрели под микроскопом.
4. Выбрали наиболее четко просматриваемые участки листа и по
движению хлоропластов проследили за движением цитоплазмы.
5. Сфотографировали просматриваемый участок
Результаты:

Рис. 12. Участок листа мха (x4)

Выводы: Наблюдение за движением цитоплазмы наблюдалось на примере

листьев мха, из проведенного эксперимента можно сделать следующие выводы: в
клетках листа растений происходит движение цитоплазмы, которое можно
наблюдать под микроскопом, также движение цитоплазмы происходит благодаря
движению хлоропластов, которые передвигаются по цитоплазме. Наблюдаемое
движение хлоропластов связано с фототропизмом - ориентацией растения к
источнику света. Хлоропласты перемещаются к верхушке растения, где
находятся верхушечные почки, где происходит активный фотосинтез. Движение
цитоплазмы и хлоропластов в них может происходить по-разному и зависеть от
условий и характеристик растений. Наблюдаемое движение цитоплазмы и
хлоропластов свидетельствует о жизнедеятельности клеток растения и их
способности к адаптации и реагированию на изменяющиеся условия
окружающей среды.

Общий вывод по работе: В ходе лабораторной работы мы изучили

явление плазмолиза и деплазмолиза, проводя опыты над срезами чешуи
окрашенного лука, в ходе которых обращали внимание на форму плазмолиза в
различных растворах. Цитоплазма представляет собой метаболический аппарат
клетки, в ней протекают основные обменные процессы. Об их активности
свидетельствует увиденное нами движение цитоплазмы.