Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
анализа
1
Природа излучения различна для различных веществ. Наиболее часто наблюдается линия
испускания, соответствующая переходу из первого возбужденного состояния в основное, т.е. в
состояние с наименьшей энергией. Подобную линию называют резонансной.
Преимущества метода: низкий предел обнаружения (до 10 −5 %), экспрессность, для
анализа требуется небольшое количество вещества, возможность проведения анализа на
расстоянии (натриевый пояс Земли на расстоянии 80 км от поверхности был обнаружен этим
методом). Однако по точности он уступает классическим методам.
Приборы: стилометры, стилоскопы, спектрографы и фоторегистрирующие квантометры.
2
веществом. ЭПР – использование явления резонансного поглощения электромагнитных
волн парамагнитными частицами в постоянном магнитном поле.
По группам:
оптические (спектральные) - нефелонометрия, спектрофотометрия,
рефрактометрия
электрохимические – потенциометрия, кондуктометрия, полрографические
хроматографические – тонкослойная хроматография (ТСХ), ионообменная
хроматография, газовая (ГХ), жидкостная, высокоэффективная жидкостная
хроматография (ВЭЖХ)
радиометрические
масс-спектрометрические
На основе явления:
поглощение излучения – УФ-, ИК-спектроскопия, атомно-абсорбционная
спектроскопия
испускание излучения – люминисцентный и флуоресцентный
поглощение теплоты – термографиметрический
взаимодействие электромагнитных полей – ядерно-магнитный резонанс (ЯМР)
3
Большое применение ФХМА получили при анализе лекарственных форм
(рефрактометрические), при стандартизации растительных настоек лекарственных растений
(спектрофотометрические методы, ВЭЖХ)
4
Лекция. №4 Оптические методы анализа.
Молекулярно-абсорбционный спектральный анализ (фотометрия).
План
1. Общая характеристика методов, классификация. Электромагнитный спектр
2. Основной закон поглощения (закон Бугера – Ламберта - Бера)
3. Отклонения от закона Бугера - Ламберта -Бера
4. Основные приемы фотометрических измерений
5. Виды, устройство и принцип работы спектральных приборов
6
Спектр – важнейшая характеристика электромагнитного излучения (ЭМИ) –
совокупность различных значений, которые может принимать данная физическая величина.
Графически электромагнитный спектр можно изобразить в виде кривой, по оси абцисс которой
отложена одна из величин, характеризующих энергию кванта, а по оси ординат – интенсивность
излучения (процессы эмиссии и люминесценции), либо оптическую плотность А (процессы
абсорбции). В методах молекулярной абсорбционной и люминесцентной спектроскопии в УФ- и
видимой областях в большинстве случаев в качестве величины, характеризующей энергию
квантов, применяют длину волны. Цвет – свойство света вызывать определенное зрительное
ощущение в соответствии со спектральным составом отражаемого или испускаемого излучения.
Отдельные узкие участки спектра видимого излучения дают цветовое ощущение семи основных
цветов и множества различных оттенков между ними
Рис. Схема
вращательного,
колебательного и
электронного спектров
молекул и атомов
7
фотометрии определяют величиной оптической плотности -densiti -D или абсорбции- absorption
–A.
Сущность этой величины можно уяснить из следующих рассуждений: мысленно
разделим весь поглощающий слой на l участков и будем наблюдать изменение интенсивности
светового потока, проходящего через раствор. Примем интенсивность света входящего в раствор
равную I0. Когда свет пройдет первый участок, интенсивность его уменьшится в n раз:
во второй слой раствора входит световой поток с интенсивностью . Когда этот
световой поток пройдет второй слой, то его интенсивность
уменьшится в n раз:
8
Зависимость оптической плотности от концентрации вещества в растворе и толщины
поглощающего слоя известна под названием закона: Бугера – Ламберта – Бера.
Оптическая плотность раствора (абсорбционность) при прочих равных условиях
прямо пропорциональна концентрации вещества и толщине поглощающего слоя.
Объединенный закон Бугера – Ламберта – Бера имеет следующую математическую
запись:
А= ε ·с·l (10)
9
веществ, и оптическая плотность смеси веществ равна сумме оптических
плотностей каждого из них.
А=ε1 ·с1·l1+ ε2 ·с2·l2+…
10
прибор неточно регистрирует истинную интенсивность светового потока, прошедшего через
раствор.
На практике при наличии экспериментально установленной графической зависимости A
= f (c) с использованием стандартных растворов можно проводить аналитические измерения и
без строгого соблюдения основного закона светопоглощения.
11
4) Метод добавок заключается в следующем. Сначала определяют оптическую
плотность анализируемого раствора Ах с концентрацией Сх. После этого в исследуемый раствор
добавляют известное количество определяемого компонента Сст и снова фотометрируют,
измеряя Ах+ст. Оптические плотности растворов равны:
или
Отсюда
12
непрерывный спектр, выделять из этого спектра узкий интервал длин волн, в пределах которого
световой пучок можно считать монохроматическим (ширина выделяемой полосы спектра 1 – 20
нм), пропускать изолированный пучок света через анализируемый раствор и измерять с высокой
степенью точности интенсивность этого пучка. Поглощение света окрашенным веществом в
растворе измеряют, сравнивая его с поглощением нулевого раствора. В фотометрическом
спектрофотометре сочетаются два основных прибора: монохроматор, служащий для получения
монохроматического светового потока, и фотоэлектрический фотометр, предназначенный для
измерения интенсивности света.
Монохроматор состоит из трех основных частей: источника света, диспергирующего
устройства (устройства, разлагающего белый свет в спектр) и приспособления регулирующего
величину интервала длин волн светового пучка, падающего на раствор.
Для разложения света в спектр применяются стеклянные и кварцевые призмы, а также
дифракционные решетки. Призмы обладают довольно большой дисперсией и большой
светосилой. Кварцевые призмы дают возможность работать в ультрафиолетовой области
спектра. Очень важной деталью спектрофотометра является щель, с помощью которой можно
регулировать интенсивность светового потока: чем меньше ее раскрытие, тем меньше света
проходит через нее и тем уже интервал длин волн светового пучка, пропускаемого щелью.
Фотоэлектрический фотометр состоит из вакуумных фотоэлементов, усилителя постоянного
тока и компенсирующего устройства (потенциометра), шкала которого проградуирована в
единицах оптической плотности и процентах светопропускания.
В основу работы спектрофотометра положен принцип измерения отношения двух световых
потоков: потока, прошедшего через исследуемый образец, и потока, падающего на исследуемый
образец (или прошедшего через контрольный образец).
Световой пучок из осветителя попадает в монохроматор через входную щель и разлагается
дифракционной решеткой в спектр. В монохроматический поток излучения, поступающий из
выходной щели в кюветное отделение, поочередно вводятся контрольный и исследуемый
образцы. Излучение, прошедшее через образец, попадает на катод фотоэлемента в приемно-
усилительном блоке. Электрический ток, проходящий через резистор RН, который включен в
анодную цепь фотоэлемента, создает на резисторе падение напряжения, пропорциональное
потоку излучения, падающему на фотокатод.
Усилитель постоянного тока с коэффициентом усиления близким к единице, обеспечивает
передачу сигналов на вход микропроцессорной системы (далее - МПС), МПС по команде
оператора поочередно измеряет и запоминает напряжения UT и U, пропорциональные
темновому потоку фотоэлемента, потоку, прошедшему через контрольный образец, и потоку,
прошедшему через исследуемый образец. После измерения МПС рассчитывает коэффициент
пропускания Т исследуемого образца. Значение измеренной величины высвечивается на
цифровом фотометрическом табло.
Основные узлы спектрофотометра
1. Источник света
Спектрофотометр UV/VIS (ультрафиолет + видимый свет) имеет два источника света:
источник для видимого участка спектра и источник ультрафиолета - от 200 до 390 нм.
Источником видимого света служит вольфрамовая, как правило, галогенная лампа, дающая
постоянный поток света в диапазоне 380 - 950 нм, являясь стабильным и долговечным
источником световой энергии со средним сроком службы более 500 ч.
В качестве источника УФ используются водородные или дейтериевые лампы.
Ультрафиолетовые лампы, содержащие дейтерий, имеют высокую интенсивность излучаемого
потока и непрерывный спектр в диапазоне от 200 до 360 нм.
2. Кюветы
Как известно исследуемый образец помещается в специальные приставки. Для каждого вида
образцов они разные. Для твердых - это специальные зажимы, а при спектральных измерениях
13
жидких образцов используются специальные контейнеры из кварцевого стекла, так называемые
кюветы.
3. Монохроматоры.
Действие спектральных приборов - спектрофотометров - основано на том, что в некоторых
физических системах условия прохождения света оказываются различными. Такие системы
называются диспергирующими. Обычно в качестве диспергирующего элемента используют
призму или дифракционную решетку. Устройства, позволяющие разделить полихроматический
свет на монохроматический спектр излучения, называются монохроматорами.
4. Фотоэлементы. Фотоэлементы преобразовывают световую энергию в электрическую.
Электрический сигнал затем усиливается и регистрируется.
14