Вы находитесь на странице: 1из 14

Лекция Инструментальные (физические и физико-химические) методы

анализа

1. ФИЗИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА.................................................................................. 1


2. ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА ... 3Классификация физико-химических
методов анализа ......................................................................................................................... 3
3. Выбор метода и подготовка пробы к анализу ....................................................................... 4

Эти методы анализа используют зависимость между физическими свойствами веществ и


их качественным и количественным составом. Физические свойства измеряются с помощью
приборов – «инструментов» – отсюда их название- инструментальные.
Достоинства этих методов:
– возможность автоматизации;
– низкий предел обнаружения (1 – 10−9 мкг) и малая предельная концентрация до 10−12
г/мл;
– высокая чувствительность – величина тангенса угла наклона градуировочной кривой
зависимости физического параметра (ось ординат) от концентрации (ось абсцисс). Чем больше
тангенс угла, тем чувствительнее метод, т.е. для получения одинакового изменения физического
свойства требуется меньшее изменение концентрации или количества определяемого вещества;
– высокая селективность;
– малая продолжительность.
Недостатки:
– воспроизводимость хуже классических методов;
– погрешности ±5,0 % (в классических методах: 0,1 – 0,5 %);
– сложность аппаратуры, ее высокая стоимость.

1. ФИЗИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА


Эти методы основаны на использовании зависимости физических свойств вещества
от их химического состава.
Наиболее распространены следующие физические методы анализа.

1 Спектральный анализ основан на исследовании спектров поглощения и


испускания исследуемого вещества.
По интенсивности характеристических спектральных линий судят о количественном
составе. Излучение света нагретыми твердыми телами можно наблюдать довольно часто. Когда
нагревают кусок стали, то он вначале раскаляется и испускает красный свет; при более высокой
температуре свечение становится белым. Этот белый свет состоит из всех цветов видимого
спектра, такое излучение называется непрерывным. Если нагревать кристаллы NaI, то они
испускают желтый свет, т.е. в состав этого излучения входит лишь несколько
характеристических типов излучения – Na+.

1
Природа излучения различна для различных веществ. Наиболее часто наблюдается линия
испускания, соответствующая переходу из первого возбужденного состояния в основное, т.е. в
состояние с наименьшей энергией. Подобную линию называют резонансной.
Преимущества метода: низкий предел обнаружения (до 10 −5 %), экспрессность, для
анализа требуется небольшое количество вещества, возможность проведения анализа на
расстоянии (натриевый пояс Земли на расстоянии 80 км от поверхности был обнаружен этим
методом). Однако по точности он уступает классическим методам.
Приборы: стилометры, стилоскопы, спектрографы и фоторегистрирующие квантометры.

2 Люминесцентный анализ основан на зависимости интенсивности


люминесценции (свечения) от концентрации вещества. Эту зависимость впервые
установил русский ученый С. М. Вавилов.
молекула + hν → молекула* (возбужденное состояние)
Эту реакцию можно осуществить за счет: света – фотолюминесценция; рентгеновских
лучей – рентгенолюминесценция; радиоактивного излучения – радиолюминесценция;
химических реакций – хемилюминесценция. Эти методы, обладая очень низким пределом
обнаружения (10−6 – 10−8 %, иногда до 10−9 %) оказались весьма эффективными при анализе
редких и рассеянных элементов, высокочистых веществ Е.А. Божевольнов говорил, что
применять химические методы для анализа высокочистых веществ равносильно определению
веса шерсти верблюда путем взвешивания его до и после стрижки.

3 Рефрактометрия – зависимость показателя преломления от концентрации.


Преломление (рефракция) – изменение направления прямолинейного распространения
при переходе из одной среды в другую, при этом происходит взаимодействие света со
средой.
Рефрактометрия – измерение преломления света, которое оценивается величиной
показателя преломления. Метод отличается простотой выполнения и обеспечивает точность до
10−3 %, поэтому находит широкое применение.
4 Денсиметрия – зависимость плотности от концентрации. Определение проводят с
помощью денсиметра (ареометра). Имеются таблицы зависимости концентрации от плотности
растворов различных кислот, оснований и солей. Метод находит широкое применение в
аналитической химии, так как от концентрации реагентов зависят многие параметры протекания
химических реакций.
По изменению плотности костей судят об их состоянии при лечении остеопороза.

5 Рентгеноструктурный анализ – для исследования веществ используют


рентгеновские лучи (анализ сплавов, металлов, строительных материалов).

6 Магнитная спектроскопия. В последнее время метод ядерного магнитного резонанса


(ЯМР) и электронного парамагнитного резонанса (ЭПР) нашли широкое применение в
аналитической химии. ЯМР основан на использовании обусловленного ядерным
магнетизмом резонансного поглощения электромагнитных волн исследуемым

2
веществом. ЭПР – использование явления резонансного поглощения электромагнитных
волн парамагнитными частицами в постоянном магнитном поле.

7 Атомно-абсорбционный метод - основан на способности атомов металлов в


газах пламени поглощать световую энергию при определенном значении длины волны.
Атомно-абсорбционный метод позволяет определять примеси до 10−12 %. Около 70 % элементов
периодической системы Д.И. Менделеева определены этим методом. Одна из японских фирм
изготавливает приборы, позволяющие одновременно определять 71 элемент.
В последнее время в аналитической практике используют гибридные методы анализа –
это методы анализа, в которых органически объединено предварительное разделение и
концентрирование и последующее определение компонентов тем или иным методом. Такая
гибридизация реализуется в одном компактном приборе. Типичным примером таких методов
является хроматографическое разделение Cu2+ – и Fe3+– ионов и последующее количественное
определение Cu2+– титриметрическим, а Fe3+ – фотометрическим методами. Достоинства этих
методов: высокая степень разделения, относительная простота, низкий предел обнаружения,
возможность автоматизации.

2. ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА


Физико-химические методы анализа основаны на изменении физических свойств
исследуемой системы, происходящих в результате определенных химических реакций.

Классификация физико-химических методов анализа


Согласно классификации Пиккеринга

По группам:
 оптические (спектральные) - нефелонометрия, спектрофотометрия,
рефрактометрия
 электрохимические – потенциометрия, кондуктометрия, полрографические
 хроматографические – тонкослойная хроматография (ТСХ), ионообменная
хроматография, газовая (ГХ), жидкостная, высокоэффективная жидкостная
хроматография (ВЭЖХ)
 радиометрические
 масс-спектрометрические

На основе явления:
 поглощение излучения – УФ-, ИК-спектроскопия, атомно-абсорбционная
спектроскопия
 испускание излучения – люминисцентный и флуоресцентный
 поглощение теплоты – термографиметрический
 взаимодействие электромагнитных полей – ядерно-магнитный резонанс (ЯМР)

3
Большое применение ФХМА получили при анализе лекарственных форм
(рефрактометрические), при стандартизации растительных настоек лекарственных растений
(спектрофотометрические методы, ВЭЖХ)

3. Выбор метода и подготовка пробы к анализу


При выборе метода анализа необходимо учитывать примерное (ожидаемое,
регламентированное) содержание определяемого вещества в образце, повторяемость анализа,
экспрессность, а также учитывать вредность метода анализа.
Осуществление анализа вне зависимости от метода включает следующие этапы:
1. Методика отбора пробы.
2. Пробоподготовка: растворение пробы, при необходимости удаление мешающих
примесей, концентрирование и получение раствора.
3. Подготовка и проверка исправности прибора.
4. Приготовление стандартных растворов и оценка фактической точности данного
метода.
5. Проведение анализа и статистическая обработка полученных результатов.
Для подготовки пробы к анализу в большинстве случаев необходимо анализируемую
пробу перевести в раствор. Наиболее часто применяют два способа разложения образцов:
1. Сплавление образца со смесью соды и буры (Na2O4B7·10H2O). Образец помещают
в специальную посуду, добавляют смесь соды и и помещают в муфельную печь
(900ºС). Полученный сплав растворяют в горячей воде и добавляют разбавленную
(1:1) HCl, переносят количественно в мерную колбу и доводят объем до метки. Из
полученного раствора отбирают аликвотную часть, которую используют в
анализе.
2. Растворение навески образца в смеси кислот. Для растворения используют
кислоты: плавиковую, серную, соляную, иногда хлорную. После этого,
полученный раствор упаривают, остаток растворяют в HCl (1:1), разбавляют
водой, переносят количественно в мерную колбу и доводят объем до метки.

4
Лекция. №4 Оптические методы анализа.
Молекулярно-абсорбционный спектральный анализ (фотометрия).
План
1. Общая характеристика методов, классификация. Электромагнитный спектр
2. Основной закон поглощения (закон Бугера – Ламберта - Бера)
3. Отклонения от закона Бугера - Ламберта -Бера
4. Основные приемы фотометрических измерений
5. Виды, устройство и принцип работы спектральных приборов

1. Общая характеристика методов, классификация


Оптические методы основаны на измерении эффектов взаимодействия веществ с
электромагнитными волнами оптического диапазона. К оптическому диапазону относят область
электромагнитных волн с длиной волны (λ) от 100 до 100000 нм., диапазон которого
подразделяют на ультрафиолетовую (180-400нм) (УФ), видимую (400-670 нм) и инфакрасную
(670-1100 нм) (ИК) область.
Взаимодействие электромагнитных волн с веществом может быть различным и по типу
взаимодействия оптические методы классифицируются на методы основанные на измерении
эффектов:
 поглощения веществом светового излучения:
абсорбционные (фотометрические), которые в свою очередь делятся на 2гр:
1. молекулярно-абсорбционные методы - (спектрофотометрический,
фотоэлектроколометрический, колориметрический методы),
2. атомно-абсорбционные (ААС);
 поляризационных взаимодействий:
-рефрактометрия (преломление света),
-поляриметрия (вращение плоскости поляризации плоскополяризованного света);
 интенсивности света, излучаемого веществом:
эмиссионные методы (флюориметрия, пламенная фотометрия)
 светорассеяния (нефелометрия) или светопоглощения (турбидиметрия) суспензией
 испускания излучения(вторичное свечение): люминесцентный и флуоресцентный.
На практике наибольший практический интерес находят методы первой группы.
1. Абсорбционная спектроскопия (фотометрия), т.е. анализ по поглощению излучения
(света):
1.1 спектрофотометрический анализ – основан на определении спектра поглощения или
измерении светопоглощения при строго определенной длине волны (λ), эта спектральная линия
соответствует максимуму кривой поглощения данного вещества;
Спектрофотометрия основана на измерении поглощения
монохроматоического света однородной, нерассеивающей системой в
видимой, ультрафиолетовой и инфракрасной областях.
1.2 фотоколориметрический анализ – основан на измерении интенсивности окраски
исследуемого окрашенного раствора или сравнении ее с интенсивностью окраски стандартного
раствора.
Фотоколориметрия – это анализ по поглощению полихроматоческого
излучения, она основана на поглощении света окрашенными растворами.
1.3 Колориметрический анализ – основан на сравнение интенсивности окраски
анализируемого раствора с окраской стандартных растворов различных концентраций
визуальным способом.
В фотометрическом анализе используют поглощение электромагнитного излучения в
УФ, видимой и ИК областях спектра. Наибольшее распространение получили фотометрические
5
методы анализа, основанные на поглощении в видимой области спектра, т.е. в интервале длин
волн 400-760 нм. Это объясняется возможностью получения множества интенсивно окрашенных
органических и неорганических соединений, пригодных для их фотометрического определения
в видимой области спектра с помощью достаточно несложных и относительно недорогих
приборов.
Химические реакции, используемые в фотометрическом анализе, несмотря на различия в
их химизме, должны обязательно сопровождаться возникновением или ослаблением
светопоглощения раствора. Как и каждая реакция, используемая в количественном анализе,
цветная реакция должна протекать избирательно, быстро, полностью и воспроизводимо. Кроме
того, окраска образующейся аналитической формы должна быть устойчивой во времени и к
действию света, а поглощение раствора, несущее информацию о концентрации поглощающего
вещества, должно подчиняться физическим законам, связывающим поглощение и
концентрацию, конкретно – закону Бугера – Ламберта – Бера.
В неорганическом фотометрическом анализе наиболее часто используют реакции
комплексообразования ионов определяемых элементов с неорганическими и, особенно, с
органическими реагентами; реже – реакции окисления-восстановления, синтеза и других типов.
В органическом фотометрическом анализе чаще применяют реакции синтеза окрашенных
соединений, которыми могут быть азосоединения, полиметиновые и хинониминовые красители,
ациформы нитросоединений и др. Иногда используют собственную окраску веществ.
Электромагнитный спектр
Схематическое изображение элементарной системы:
Сплошными стрелками обозначены излучательные переходы,
R3
пунктиром - безизлучательные; возбуждению соответствуют
R1
R3
стрелки направленные вверх; потере энергии возбуждения –
стрелки, направленные вниз.
Поглощение энергии происходит при возбуждении
элементарной системы (ядерной, молекулярной, атомной) и переходе ее с более низкого
энергетического уровня на более высокий (переход R1).
Излучение энергии в виде света происходит при переходе элементарной системы с боле
высокого энергетического уровня на более низкий (переходы R2 и R3). Если система была
возбуждена светом, то ее излучение называют фотолюминесцентной (или просто
люминесцентной); если рентгеновским излучением, то рентгеновской флуоресценцией. Атомы и
молекулы могут быть переведены в возбужденное состояние и другими способами: термическим
путем (в высокотемпературных газах и плазмах), посредством химической реакции,
электронного удара и проч.
Испускание возбужденных частиц может быть спонтанным (самопроизвольным), то есть
происходящим в отсутствии внешнего излучения, и вынужденным, происходящим под
действием внешнего излучения. Поглощение всегда является вынужденным процессом.
Для процессов поглощения (абсорбционных) в аналитической химии чаще всего
используют оптическую плотность А, реже – связанную с ней величину пропускания Т.
В молекулярной спектроскопии используют возбуждение молекул под действием
электромагнитного поля. При этом молекула поглощает фотоны с энергией, равной разности
энергий ее орбиталей.
В Совокупность всех поглощенных частот составляет спектр поглощения молекулы
(молекулярный абсорбционный спектр).
Число энергетических состояний молекул велико и энергии отдельных переходов
бывают настолько близки, что различить их невозможно. Поэтому в молекулярных спектрах
спектральные линии с близкими длинами волн (частотами) сливаются в отдельные полосы
поглощения.

6
Спектр – важнейшая характеристика электромагнитного излучения (ЭМИ) –
совокупность различных значений, которые может принимать данная физическая величина.
Графически электромагнитный спектр можно изобразить в виде кривой, по оси абцисс которой
отложена одна из величин, характеризующих энергию кванта, а по оси ординат – интенсивность
излучения (процессы эмиссии и люминесценции), либо оптическую плотность А (процессы
абсорбции). В методах молекулярной абсорбционной и люминесцентной спектроскопии в УФ- и
видимой областях в большинстве случаев в качестве величины, характеризующей энергию
квантов, применяют длину волны. Цвет – свойство света вызывать определенное зрительное
ощущение в соответствии со спектральным составом отражаемого или испускаемого излучения.
Отдельные узкие участки спектра видимого излучения дают цветовое ощущение семи основных
цветов и множества различных оттенков между ними

Рис. Схема
вращательного,
колебательного и
электронного спектров
молекул и атомов

2. Основной закон поглощения (закон Бугера – Ламберта - Бера)


Рассмотрим поглощение ЭМИ в видимой области спектра, воспринимаемый глазом как
белый свет. При прохождении через стеклянный сосуд (кювету) с окрашенным, прозрачным
раствором монохроматического излучения с
интенсивностью (мощностью) (I0) происходит его
ослабление: часть светового пучка (с интенсивностью
Iотр) отражается на границе: стекло-воздух и стекло-
раствор, другая часть его рассеивается (Iр)
присутствующими взвешенными в растворе частицами
(включениями), главным же образом свет ослабляется
за счет поглощения (абсорбции) световой энергии (Iа)
раствором и часть (Iв) пройдет через него. Поэтому
между этими величинами будет следующая
зависимость:
I0= Ia+ Iотр+Iр+Iв (1)
При использовании одной и той же кюветы, для которой интенсивность отраженного
света постоянна и невелика и ею можно пренебречь. При работе с истинными растворами
достаточно чистых веществ потери света за счет рассеяния также незначительны. Поэтому
уравнение (1) можно записать в более простом виде:
I0= Ia+Iв (2)
Iа – зависит от наличия в растворе молекул или ионов вещества, и непосредственно эту
величину определить нельзя. Она узнается по разности интенсивности падающего света I0 и
света, прошедшего через раствор Iв.
Таким образом, проходя через раствор, световой поток теряет интенсивность, и тем
большую, чем больше молекул или ионов будет в растворе. Степень светопоглощения в

7
фотометрии определяют величиной оптической плотности -densiti -D или абсорбции- absorption
–A.
Сущность этой величины можно уяснить из следующих рассуждений: мысленно
разделим весь поглощающий слой на l участков и будем наблюдать изменение интенсивности
светового потока, проходящего через раствор. Примем интенсивность света входящего в раствор
равную I0. Когда свет пройдет первый участок, интенсивность его уменьшится в n раз:
во второй слой раствора входит световой поток с интенсивностью . Когда этот
световой поток пройдет второй слой, то его интенсивность
уменьшится в n раз:

В общем виде , где l толщина


кюветы (3)
Преобразуем уравнение (3) далее (4)
Прологарифрируем уравнение (4) lg (5)
lg n – постоянная величина, характерная для данного окрашенного раствора при
прохождении света определенной длины волны.
lg – оптическая плотность, абсорбция (светопоглощение), характеризует
поглощающую способность вещества в растворе.
Соответственно получаем А = l∙ lgn (6)
Уравнение (6) есть математическая запись Закона Бугера-Ламберта – оптическая
плотность прямо пропорциональна толщине поглощающего слоя.
Или слои вещества одинаковой толщины всегда поглощают одну и ту же часть
падающего на них светового потока
Значение поглощения А может быть считано непосредственно со шкалы прибора.
При описании фотометрических определений применяют и другие оптические
характеристики. Некоторые приборы имеют только шкалу пропускания Т( прозрачность),
измеряемую в долях от единицы или в процентах (%) эта величина обратно пропорциональна
величины оптической плотности:
(7)
Поэтому показания таких приборов при выполнении фотометрических определений
необходимо пересчитывать на поглощение по формуле:
(8)
Или A= - lgT (если Т в относительных единицах)
Установлено, что меньшая ошибка эксперимента происходит при определении в
интервалах Т= 10-90% , тогда оптимальный интервал пределов оптических плотностей
составляет:
При 10% от А = 2-lg10=1
при 90% до А = 2-lg90=0,1
Таким образом при фотометрическом измерении оптимальное значение оптических плотностей
составляет от 0,1 до 1.
Дальнейшие исследования Бора показали, что поглощение света растворами зависит
от числа частиц в единице объема, встречающихся на пути светового потока, т.е. от
концентрации вещества:
R=ε ∙ С , (9)
где ε- коэффициент поглощения, постоянный для данного раствора
С- число частиц (концентрация вещества).

8
Зависимость оптической плотности от концентрации вещества в растворе и толщины
поглощающего слоя известна под названием закона: Бугера – Ламберта – Бера.
Оптическая плотность раствора (абсорбционность) при прочих равных условиях
прямо пропорциональна концентрации вещества и толщине поглощающего слоя.
Объединенный закон Бугера – Ламберта – Бера имеет следующую математическую
запись:
А= ε ·с·l (10)

ε – молярный коэффициент поглощения (коэффициент экстинции) при данной длине


волны;
l – толщина поглощающего слоя (кюветы), см;
с – концентрация поглощающего вещества, моль/л.

На практике зависимость А от концентрации


определяемого вещества при постоянной l и конкретных
условиях аналитического определения изображают в виде Рис. Градуировочный график
градуировочного графика – прямой линии, проходящей
через начало координат.
При этом молярный коэффициент поглощения, ε, определяющий предел обнаружения
метода, будет равен тангенсу угла наклона градуировочной прямой к оси абсцисс, если
концентрация выражена в моль/дм3. Чем больше наклон градуировочного графика к оси
концентраций, тем более чувствительным является данный фотометрический метод. Для
большинства реакций интервал значений ε = n∙102---- n∙104.
Физический смысл ε становится ясным, если принять l = 1 см и c = 1моль/л,
тогда A = ε
В этом случае ε будет иметь название молярный коэффициент поглощения равный
оптический плотности одномолярного раствора при толщине слоя 1 см.
Можно рассчитывать ε по результатам измерения оптической плотности раствора
заданной концентрации по формуле: ε =
Из выражения закона Бугера – Ламберта – Бера можно определять нижнюю границу
диапазона определяемых веществ Сmin = . Если необходимо понизить предел обнаружения,
можно увеличить толщину поглощаемого слоя или сконцентрировать вещество, например,
экстракцией.
Стенки кюветы рассеивают некоторую долю падающего излучения и вместе с раствором
обусловливают частичное поглощение. Для компенсации этого эффекта на практике для
измерения I0 используют идентичную кювету с чистым растворителем (кювету сравнения).
Закон аддитивности
В реальных растворах практически всегда присутствуют несколько типов различных
поглощающих частиц, между которыми отсутствуют
взаимодействия. При этом каждая из них независимо друг
от друга может поглощать излучение, поэтому общее
поглощение будет равно сумме вкладов каждого из
компонентов.
Этот факт отражает закон аддитивности, который является
важным дополнением к закону Бугера-Ламберта-Бера.
Сущность закона аддитивности оптических плотностей:
поглощение света каким-либо веществом не
зависит от присутствия в растворе других

9
веществ, и оптическая плотность смеси веществ равна сумме оптических
плотностей каждого из них.
А=ε1 ·с1·l1+ ε2 ·с2·l2+…

3. Отклонения от закона Бугера –Ламберта - Бера


Закон Бугера – Ламберта - Бера строго справедлив лишь для разбавленных растворов при
определенных условиях. Применительно к аналитическим целям условия таковы:
– постоянство состава и неизменность поглощающих частиц в растворе, определяемые
химизмом выбранной аналитической реакции и условиями проведения;
– монохроматичность проходящего через пробу лучистого потока, его ограниченная
интенсивность и параллельность, определяемые в основном, конструктивными особенностями
фотометрического прибора, в частности, способом монохроматизации излучения;
– постоянство температуры.
Если раствор аналитической формы не подчиняется закону
Бугера – Ламберта - Бера, то это приводит к появлению
систематических погрешностей при определении концентрации
вещества в растворе по прямолинейному градуировочному
графику (см. рис.).
Причинами несоблюдения закона Бугера - Ламберта - Бера
могут быть физико-химические и инструментальные факторы.
Физико-химические причины обусловлены участием
поглощающего вещества в реакциях, конкурирующих с
основной, особенно с увеличением концентрации раствора
(процессы ассоциации, полимеризации, комплексообразования
и т.д.); а также при уменьшении концентрации раствора
(процессы диссоциации, гидролиза, сольватации). При изменении рН раствора могут
изменяться:
— степень ионизации слабого электролита;
— форма существования ионов, что приводит к изменению светопоглощения;
— состав образующихся окрашенных комплексных соединений.
Инструментальные факторы, обусловливающие отклонения от закона Бугера -
Ламберта - Бера, связаны с недостаточной монохроматичностью светового потока и
проявляются чаще всего при работе на фотоэлектроколориметрах. Это объясняется тем, что
«монохроматизация» в этих приборах достигается с помощью светофильтров, пропускающих
излучение в определенных интервалах длин волн. При работе с обычными светофильтрами,
пропускающими излучение в достаточно широком интервале длин волн, результатом измерения
является интегральное поглощение. По мере увеличения концентрации поглощающего вещества
может измениться контур полосы поглощения или какого-то участка спектра. Поэтому
поглощение, измеренное в интервале длин волн, соответствующем этому участку, будет
возрастать не вполне симметрично увеличению концентрации. При этом прямо
пропорциональная зависимость между интегральным поглощением и концентрацией
поглощающего вещества нарушается. Это явление наблюдается чаще всего для растворов
желтого цвета и при работе на приборах старых моделей. При использовании светофильтров с
меньшей полосой пропускания, например интерференционных, а также при работе на более
совершенных приборах-спектрофотометрах этот эффект сильно уменьшается или устраняется
совсем.
Указанные отклонения называют кажущимися, поскольку сам основной закон
светопоглощения не нарушается, а либо изменяется число светопоглощаюших частиц, либо

10
прибор неточно регистрирует истинную интенсивность светового потока, прошедшего через
раствор.
На практике при наличии экспериментально установленной графической зависимости A
= f (c) с использованием стандартных растворов можно проводить аналитические измерения и
без строгого соблюдения основного закона светопоглощения.

4. Основные приемы фотометрических измерений


Концентрация веществ в растворе в известных пределах связана с некоторыми их
физическими свойствами прямой пропорциональной зависимостью, например, потенциал- Е,
абсорбция- А, электропроводность - æ меняются в определенных границах пропорционально
концентрации.
1) Метод градуировочного (калибровочного) графика
Готовят серию эталонных (стандартных) растворов. Затем измеряют характеристику
анализируемого раствора. Далее строят график зависимости в координатах показатель прибора
от концентрации анализируемого вещества. Если оптическая плотность А=f(С), потенциал
системы Е=f(С), электропроводность æ=f(С), h=f(С) и S=f(С), где h и S –высота и площадь
пика в хроматографическом методе анализа. Затем измеряют характеристику анализируемого
раствора и по графику определят искомую концентрацию.
На рис. представлена зависимость А=f(С). Закон Бугера – Ламберта - Бера аналитически
выражается уравнением прямой зависимости А от концентрации. Однако в силу химических и
инструментальных причин эта линейная зависимость часто не выполняется. В таких случаях
необходимо значительно увеличить число точек градуированного графика зависимости A
стандартных растворов от их концентрации. Однако, даже в отсутствие нарушений линейности,
нужно иметь не менее 3-4 точек, чтобы быть уверенным в надежности анализов.
Недостатки метода: трудности приготовления эталонных растворов и влияние «третьих»
компонентов (сами не определяются, но влияют на результаты измерения). Этот метод обладает
высокой точностью, потому получил широкое применение.

2) Метод интерполяции (нахождения промежуточной величины между двумя


известными крайними).
откуда выразим

Ix- показатель прибора анализируемого раствора,


I1, I2 –показатели прибора меньше и больше (выше и
ниже) показателей анализируемого раствора,
СХ- концентрация исследуемого раствора,
С1, С2 – концентрации стандартных растворов.
3) Метод сравнения или метод стандарта
(математический метод)
Используется при условии, когда линия зависимости
«состав-свойство» имеет прямолинейный характер и
проходит через начало координат. На приборе измеряют
характеристики свойств стандартного и анализируемого
растворов. Расчет ведут по формуле:
, откуда
Менее точный метод, так как используется одно измерение стандарта.

11
4) Метод добавок заключается в следующем. Сначала определяют оптическую
плотность анализируемого раствора Ах с концентрацией Сх. После этого в исследуемый раствор
добавляют известное количество определяемого компонента Сст и снова фотометрируют,
измеряя Ах+ст. Оптические плотности растворов равны:

Поделим эти выражения:

или

Отсюда

Концентрацию искомого вещества по методу добавок можно определять графически (см.


рисунок).

5. Виды, устройство и принцип работы спектральных приборов


Назначением спектральных приборов является выделение излучения в узких спектральных
интервалах в пределах заданной области спектра. В основу действия спектральных приборов
могут быть положены самые разнообразные принципы, поэтому схемы действия конструкции
приборов могут быть весьма различными.
Виды спектрофотометров: КФК-3-01 «ЗОМЗ», ПЭ-5300ВИ, Unico 1201, ПЭ-5400ВИ, ПЭ-
5400В ПромЭколаб, Unico 2100 и др.

Рис. Основная схема спектральных приборов


Типы абсорбционных спектрометров
1. Колориметры и фотоколориметры
Фотоколориметры - приборы, предназначенные для определения количества окрашенного
вещества путем измерения величин поглощения и пропускания в
видимой части электромагнитного спектра.
2. Спектрофотометры
Основное отличие спектрофотометра от фотоколориметра
состоит в возможности пропустить через исследуемый образец
световой поток любой требуемой длины волны, проводить
фотометрические измерения, сканируя (просматривая) весь диапазон
длин волн не только видимого (VIS) света - от 380 до 750 нм, но и
ближнего ультрафиолета (UV) - от 200 до 380 нм.
Принцип работы спектральных приборов
Спектрофотометры позволяют разлагать белый свет в

12
непрерывный спектр, выделять из этого спектра узкий интервал длин волн, в пределах которого
световой пучок можно считать монохроматическим (ширина выделяемой полосы спектра 1 – 20
нм), пропускать изолированный пучок света через анализируемый раствор и измерять с высокой
степенью точности интенсивность этого пучка. Поглощение света окрашенным веществом в
растворе измеряют, сравнивая его с поглощением нулевого раствора. В фотометрическом
спектрофотометре сочетаются два основных прибора: монохроматор, служащий для получения
монохроматического светового потока, и фотоэлектрический фотометр, предназначенный для
измерения интенсивности света.
Монохроматор состоит из трех основных частей: источника света, диспергирующего
устройства (устройства, разлагающего белый свет в спектр) и приспособления регулирующего
величину интервала длин волн светового пучка, падающего на раствор.
Для разложения света в спектр применяются стеклянные и кварцевые призмы, а также
дифракционные решетки. Призмы обладают довольно большой дисперсией и большой
светосилой. Кварцевые призмы дают возможность работать в ультрафиолетовой области
спектра. Очень важной деталью спектрофотометра является щель, с помощью которой можно
регулировать интенсивность светового потока: чем меньше ее раскрытие, тем меньше света
проходит через нее и тем уже интервал длин волн светового пучка, пропускаемого щелью.
Фотоэлектрический фотометр состоит из вакуумных фотоэлементов, усилителя постоянного
тока и компенсирующего устройства (потенциометра), шкала которого проградуирована в
единицах оптической плотности и процентах светопропускания.
В основу работы спектрофотометра положен принцип измерения отношения двух световых
потоков: потока, прошедшего через исследуемый образец, и потока, падающего на исследуемый
образец (или прошедшего через контрольный образец).
Световой пучок из осветителя попадает в монохроматор через входную щель и разлагается
дифракционной решеткой в спектр. В монохроматический поток излучения, поступающий из
выходной щели в кюветное отделение, поочередно вводятся контрольный и исследуемый
образцы. Излучение, прошедшее через образец, попадает на катод фотоэлемента в приемно-
усилительном блоке. Электрический ток, проходящий через резистор RН, который включен в
анодную цепь фотоэлемента, создает на резисторе падение напряжения, пропорциональное
потоку излучения, падающему на фотокатод.
Усилитель постоянного тока с коэффициентом усиления близким к единице, обеспечивает
передачу сигналов на вход микропроцессорной системы (далее - МПС), МПС по команде
оператора поочередно измеряет и запоминает напряжения UT и U, пропорциональные
темновому потоку фотоэлемента, потоку, прошедшему через контрольный образец, и потоку,
прошедшему через исследуемый образец. После измерения МПС рассчитывает коэффициент
пропускания Т исследуемого образца. Значение измеренной величины высвечивается на
цифровом фотометрическом табло.
Основные узлы спектрофотометра
1. Источник света
Спектрофотометр UV/VIS (ультрафиолет + видимый свет) имеет два источника света:
источник для видимого участка спектра и источник ультрафиолета - от 200 до 390 нм.
Источником видимого света служит вольфрамовая, как правило, галогенная лампа, дающая
постоянный поток света в диапазоне 380 - 950 нм, являясь стабильным и долговечным
источником световой энергии со средним сроком службы более 500 ч.
В качестве источника УФ используются водородные или дейтериевые лампы.
Ультрафиолетовые лампы, содержащие дейтерий, имеют высокую интенсивность излучаемого
потока и непрерывный спектр в диапазоне от 200 до 360 нм.
2. Кюветы
Как известно исследуемый образец помещается в специальные приставки. Для каждого вида
образцов они разные. Для твердых - это специальные зажимы, а при спектральных измерениях

13
жидких образцов используются специальные контейнеры из кварцевого стекла, так называемые
кюветы.
3. Монохроматоры.
Действие спектральных приборов - спектрофотометров - основано на том, что в некоторых
физических системах условия прохождения света оказываются различными. Такие системы
называются диспергирующими. Обычно в качестве диспергирующего элемента используют
призму или дифракционную решетку. Устройства, позволяющие разделить полихроматический
свет на монохроматический спектр излучения, называются монохроматорами.
4. Фотоэлементы. Фотоэлементы преобразовывают световую энергию в электрическую.
Электрический сигнал затем усиливается и регистрируется.

14