Оглавление

Введение...................................................................................................................3

1. Общая информация по экстракционной фотометрии...................................4

1.1 Сущность экстракционно-фотометрического метода................................4

1.2. Приборы для экстракционной фотометрии...................................................7

1.3 Выбор растворителей, экстрагентов и реагентов.........................................11

1.4. Влияние красителей на проведение экстракционной фотометрии...........13

2. Экстракционная фотометрия в фармацевтическом анализе последнего

десятилетия............................................................................................................25

2.1 Анализ доксиламина.......................................................................................25

2.2.Определение азитромицина в глазных каплях и геле..................................27

2.3.Определение тимолола малеата.....................................................................27

2.4. Количественное определение суммы хинолизидиновых алкалоидов в

семенах люпина.....................................................................................................28

2.5 Количественное определение кетопрофена..................................................28

2.5 Твердофазная экстракция для фотометрического определения

розмариновой кислоты в экстрактах мелиссы....................................................30

Заключение............................................................................................................33

Литература.............................................................................................................35

Введение

2
 Актуальность. Одна из наиболее важных задач фармацевтической химии -
это разработка и совершенствование методов оценки качества лекарственных
средств. Для установления чистоты лекарственных веществ используют различные
физические, физико-химические, химические методы анализа или их сочетание.
Экстракционно-фотометрический метод основан на сочетании экстракции
определяемого вещества и его последующим фотометрировании. Этот метод
применяют при анализе сложных смесей, когда нужно определить малые
количества одних веществ в присутствии больших количеств других веществ, а
также в тех случаях, когда непосредственное определение элемента в смеси связано
с большими трудностями, поэтому изучение метода является актуальной
проблемой.
XVI издание Государственной фармакопеи РФ, содержит
ОФС.1.2.1.1.0003.15 «Спектрофотометрия в УФ и видимой областях»,
следовательно, тема работы является актуальной.
Целью работы является рассмотреть применение метода экстракционной
фотометрии в фармацевтическом анализе. Для этого нужно решить следующие
задачи:
1. Рассмотреть принципы экстракционной фотометрии в фармакопейном
анализе;
2. Привести основное аппаратное обеспечение метода.
3. Рассмотреть влияние красителей или растворителей;
4. На примере лекарственных препаратов показать применение
экстракционной фотометрии в фармацевтическом анализе;
Объект исследования - метод экстракционной фотометрии.
Предмет исследования – применение метода экстракционной фотометрии в
фармацевтическом анализе.
Методы исследования. Литературный обзор.

3
 1. Общая информация по экстракционной фотометрии
1.1 Сущность экстракционно-фотометрического метода
При экстракции малых количеств примесей происходит не только их
выделение, но и концентрирование, Поэтому экстракционно-
фотометрический метод приобретает особо важное значение в связи
с определением малых количеств примесей в веществах высокой степени
чистоты или микропримесей атмосферного воздуха, воздуха рабочей зоны
и воды. Экстракционно-фотометрические методы анализа являются
высокочувствительного методами и перспективными, особенно для
определения металлов, которые образуют разнолигандные
комплексы.
В экстракционно-фотометрических методах для определения металлов
применяют экстракционные системы различных типов, выбор которых
зависит от химической природы определяемого компонента, состава
растворенных веществ и условий проведения экстракции.
Для количественной оценки экстракционного равновесия используют
следующие характеристики.
Кд[МRn]/[МRn]-к – константа распределения – отношение
концентрации экстрагируемой формы вещества (MRn) в органической фазе
к его концентрации в той же самой форме в водной фазе в условиях
равновесия. Для каждого несмешивающегося с водой органического
растворителя константа распределения является величиной постоянной, при
нормальном давлении зависит только от температуры и ионной силы
раствора. Если обе жидкие фазы являются насыщенными относительно
твердой фазы и равновесие достигнуто, то константа распределения равна
отношению растворимостей распределяющегося вещества в органической
и водной фазах:
KD = S0/S. (1)
Dс = [См]0/[См] – коэффициент распределения [3], (отношение
распределения, коэффициент экстракции) – отношение общей аналитической
4
концентрации вещества в органической фазе к его общей аналитической
концентрации в водной фазе в условиях равновесия. Поскольку общая
аналитическая концентрация является суммой различных ионных форм,
соотношение между которыми в водной фазе зависит от рН и концентрации
комплексующих реагентов, коэффициент распределения не является
постоянной величиной, а зависит от условий эксперимента и константы
распределения.
Dm – Qо/Q – массовый коэффициент распределения – отношение
количества распределяемого вещества (ммоль) в органической фазе
к количеству этого же вещества в водной фазе в условиях равновесия.
Из сопоставления выражений Dc и Dm нетрудно заметить, что
DC = DmW/V и Dm = DcV/W, (2)
где V и W – объемы водной и органической фаз.
Если, как это часто бывает при экстракции, V/W = r = 1, то величины
Dc и Dm становятся тождественными. При оценке полноты экстракции из
выражения массового коэффициента распределения можно найти молярную
долю (или процент) вещества, оставшегося в водной фазе после однократной
экстракции:
a = (Qисх – Qo)/(Qиcx) = Q/(Qo + Q) = 1/(Dm + 1). (3)
При d-кратной экстракции:
a = (1 + Dm)–d. (4)
Вычитая из единицы часть вещества, оставшуюся после экстракции (d),
получим степень (фактор) извлечения.
Е = Qo/Qиcx = DC/(DC + W/V) = Dm/(1 + Dm). (5)
Степень извлечения представляет собой долю или процент от
исходного количества вещества в объеме W водной фазы, экстрагируемую
объемом V органической фазы при заданных условиях. Если водный раствор
обрабатывают d последовательными порциями экстрагента и каждый раз
отношение объемов огранической и водной фаз V/W – r, то степень
извлечения составляет:
5
 Ed = 1 – (rD + 1)–d. (6)
При d = l и r = 1:
E = D/(1 + D). (7)
Степень извлечения зависит от тех же факторов, что и коэффициент
распределения, и кроме того, от отношения объемов органической и водной
фаз.
SMI/MII=(QMI0/QMII0)/(QMIисх/QMIIисх) – фактор обогащения – отношение
количеств двух разделяемых веществ в фазе экстрагента, отнесенное
к исходному отношению их количеств до разделения. Фактор обогащения
представляет собою коэффициент, на который нужно умножить исходное
отношение количеств двух разделяемых веществ, чтобы получить отношение
их количеств в органической фазе после разделения.
Следовательно:
SMI/MII= ЕMI/ЕMII (8)
SMI/MII=1-(1+rDMI)-d/(1-)1+rDMII)-d)) (9)
При d = 1 и r = 1:
SMI/MII=-DMI(1+DMII)/( DMII(1+DMI)) (10)
SMI/MII=DMI/DMII – фактор разделения – отношение коэффициентов
распределения двух разделяемых элементов MI и МII.
Кэкс – константа экстракции – константа равновесия реакции
экстракции.
pH1/2 – значение рН раствора, при котором 50 % исходного количества
вещества экстрагируется в органическую фазу (D = 1).
Коэффициент распределения является наиболее распространенной
характеристикой экстракционных процессов, особенно в условиях
конкурирующих равновесий в водной фазе. Эта характеристика, зависящая
от условий проведения экстракции и взаимосвязанная с константами
распределения и экстракции, позволяет получить объективную
количественную информацию в реальных условиях анализа. Во многих
случаях коэффициенты распределения определяют экспериментально,
6
однако при определенных условиях их можно прогнозировать
и теоретически. Для этого необходимо знать состав экстрагирующихся
соединений, их константы распределения и экстракции, а также иметь
сведения о конкурирующих реакциях и образующихся соединениях в водном
растворе.
Для оценки селективности фотометрического определения исследуют
зависимость А = f (примеси) для трех концентраций вещества (крайние и
среднее значения концентраций динамического диапазона).
Жебентяев, А.И. Токсикологическая химия (в 2 частях). Ч.2: учебное
пособие/А.И.Жебентяев.-Витебск: ВГМУ, 2015 – 415с.

1.2. Приборы для экстракционной фотометрии

Фотометр — прибор для измерения одной или нескольких световых
величин. При использовании фотометра осуществляют определённое
пространственное ограничение потока излучения и регистрацию его
приёмником излучения с заданной спектральной чувствительностью.
Фотометр осуществляет определённое пространственное ограничение
потока излучения и регистрацию его приёмником излучения с заданной спек-
тральной чувствительностью. Фотометром для измерения освещённости яв-
ляется люксметр, яркости – яркомер, светового потока – фотометр интегри-
рующий. Ф. для измерения цвета называют колориметрами. Оптические схе-
мы фотометров обеспечивают постоянство геометрического фактора или из-
менение его по определённому закону.
Фотометр для измерений коэффициентов пропускания и отражения
света строятся по одноканальным и двухканальным оптическим схемам. В
одноканальном фотометре измеряется относит. уменьшение потока излуче-
ния при установке образца на пути пучка лучей. В двухканальном фотометре
сравниваются потоки излучения в измерительном (с образцом) и опорном ка-
налах. Коэффициенты пропускания и отражения светорассеивающих образ-
цов измеряют также с помощью интегрирующих фотометров.
7
 Рис. 1 Фотометры

Фотоэлектрический КФК-3 ПФ Фотометр UNICO модель 2100 |

Оптимум АналитПрибор

Технически спектрофотометр от фотометра отличается устройством

выбора регистрируемых длин волн. Для фотометров – это светофильтры с
достаточно широким диапазоном пропускания, для спектрофотометров – это
дифракционная решетка или призма с лучшей селективностью по длинам
волн и расширенным спектральным диапазоном.
Достоинством этого метода является простота и низкая стоимость
аппаратуры, недостатки — сложность подготовки проб к анализу и низкая
селективность метода.
Преимуществом этого метода анализа являются низкие
инвестиционные и эксплуатационные расходы для выполнения «простых»
анализов, невысокая стоимость одного определения, малые начальные
капиталовложения.
Минусы – недостаточная чувствительность и матричные влияния.

8
 Рис. 2 Устройство фотометра
Свет, собранный объективом или системой зеркал телескопа, образует
в фокальной плоскости действительное изображение участка небесной
сферы. Если в фокальную плоскость поместить фотопластинку, то можно
сфотографировать изображение участка звездного неба. При работе с
фотоэлектрическим фотометром необходимо выделить из участка звездного
неба одну звезду. Для этого в фокальную плоскость телескопа
устанавливается диафрагма  . Микрометренными (тонкими) движениями
телескопа относительно его осей нужно добиться того, чтобы изображение
звезды ``провалилось'' в диафрагму. Свет, прошедший через диафрагму,
проходит далее через светофильтр СФ, обусловливающий в основном
положение спектральной полосы пропускания. В одноканальных фотометрах
набор светофильтров располагается либо в движущейся линейке, либо на
вращающейся турели. После светофильтров свет должен попасть на
светоприемник, которым обычно является фотоумножитель (ФЭУ). Перед
фотоумножителем обязательно располагается линза ЛФ (так называемая
линза Фабри).
Итак, в устройстве любого электрофотометра есть четыре
обязательных элемента: диафрагма в фокальной плоскости, набор
светофильтров, линза Фабри и светочувствительный элемент (как правило,
фотоумножитель). Сначала мы рассмотрим некоторые частности в

9
устройстве электрофотометра, а затем подробно обсудим вопросы,
касающиеся этих четырех основных элементов.
Прежде всего отметим еще два, вообще говоря вспомогательных, но
чрезвычайно нужных при наблюдениях устройства: это подсмотры, которые
по мере необходимости вводятся в световой пучок или выводятся из него.
Передний, или внешний, подсмотр позволяет увидеть общее поле, в
котором находится измеряемая звезда. Перемещаемое наклонное плоское

зеркальце или призма полного внутреннего отражения   может вводиться в

световой пучок, и тогда появляется возможность через окулярную трубку   

непосредственно посмотреть в телескоп. В поле зрения, находится крест К,
изображенный на стеклянной пластинке и подсвечиваемый лампочкой Л  с
торца этой пластинки. Юстировками необходимо добиться того, чтобы при
введенном зеркале внешнего подсмотра изображение звезды находилось
точно на кресте, а при выведенном -- находилось бы строго в центре
диафрагмы.
Второй подсмотр находится после диафрагмы и
называется внутренним, или задиафрагменным, подсмотром. Вдвигая этот
подсмотр, вы перехватываете световой пучок призмой полного внутреннего

отражения  , чтобы убедиться, что изображение звезды на самом деле

``провалилось'' в диафрагму. Края диафрагмы слегка подсвечиваются
осветителем Л . Удобно для такой подсветки применять темно-красный
свет, которым светят некоторые типы светодиодов. Удобно также, чтобы
светофильтры находились после задиафрагменного подсмотра. Тогда их не
надо убирать из пучка, чтобы проконтролировать положение звезды в
диафрагме при наблюдениях вневидимых глазом лучах (ультрафиолетовых
или инфракрасных).
Для обеспечения правильности, точности и повторяемости результатов
лабораторных измерений наряду с квалифицированным персоналом,

10
необходимо наличие фотометрических сертифицированных средств
измерений.

1.3 Выбор растворителей, экстрагентов и реагентов

Первые методики количественного определения азотсодержащих
лекарственных веществ, основанные на образовании ионных ассоциатов с
кислотными красителями, были предложены в середине прошлого века и
получили широкое распространение [45]. В литературных данных
описывается два принципиально отличающихся механизма образования и
экстракции ионных ассоциатов. В [60, 191] предполагается, что ассоциаты
образуются в водной фазе, после чего экстрагируются в органическую (схема
I).

В работе [7] показано, что константа экстракции ионных пар

сульфофталеиновых красителей с некоторыми органическими основаниями
(эфедрин, новокаин, хинин, папаверин, пахикарпин, дионин, сальсолидин,
димедрол) является производной нескольких констант: констант ионизации
кислоты и основания, констант распределения молекулярных форм кислоты
и основания и константы образования ассоциата в органической фазе.
Экстракцию по схеме II подтверждают также данные работ [9].

В то же время некоторые вещества способны образовывать устойчивые

ионные ассоциаты в водной фазе, что подтверждается изменением
спектральных характеристик растворов красителей, после прибавления

11
органического основания. Большинство методик количественного
определения органических оснований с анионными красителями связано с
экстракцией ионных пар в органическую фазу. При проведении
экстракционной фотометрии значительное влияние на величину оптической
плотности оказывает природа экстрагента.
Сравнительное исследование пригодности различных экстрагентов для
проведения экстракционной фотометрии. Наилучшими являются
малополярные экстрагенты (хлороформ, 1,2-дихлорэтан). Неполярные
растворители (тетрахлорметан, бензол, толуол и др.) ионные ассоциаты
практически не экстрагируют. Полярные растворители (высшие спирты,
эфиры) наряду с ионными ассоциатами экстрагируют окрашенные формы
свободных красителей. Как правило в качестве экстрагента используют
хлороформ, как более доступный. В работах [8] в качестве экстрагента
применяют 1,2-дихлорэтан. Авторы работы [9] используют дихлорметан. В
работе [4]— толуол. При анализе димедрола и папаверина в виде ионных пар
с сульфоназо проведено сравнительное исследованние диоксана, бензола,
толуола, тетрахлорметана, н-бутилового, изобутилового, амилового и
изоамилового спиртов — ассоциаты наиболее полно экстрагировались н-
бутанолом. В работе изучена экстракция эфедрина и сальсолина с тимоловым
синим в органическую фазу с различным содержанием хлороформа,
нитробензола и бензилового спирта. Показано, что в экстракционных
системах, содержащих органические кислоту и основание, экстракцию
ионных пар можно рассматривать как процесс, складывающийся из
экстракции ионов кислоты и основания в органическую фазу и ассоциацию
этих ионов. С ростом диэлектрической проницаемости среды происходит
уменьшение константы ассоциации (Касс) и увеличение константы
экстракции ионов. Так, при введении в хлороформ, обладающий низким
значением диэлектрической проницаемости, 60% нитробензола
(обладающего высоким значением диэлектрической проницаемости),
увеличивается константа экстракции в 2 раза за счёт увеличения 0 при
12
относительно меньшем снижении Касс. В работе [7] показано, что
хлороформ и 1,2 -дихлорэтан, благодаря наличию активных атомов водорода,
способны эффективно сольватировать полярные группировки ионных
ассоциатов, облегчая тем самым их переход в органическую фазу. В
некоторых работах для увеличения экстрагируемости ионных ассоциатов
неполярными растворителями используют добавки спиртов. Так, при
определении тубокурарина с бромтимоловым синим (БТС) и бензогексония с
бромфеноловым синим (БФС) в хлороформ прибавляют 5% н-бутанола, при
определении низкомолекулярных алифатических аминов — 4% этанола [2].
С увеличением длины углеводородной цепочки вводимого спирта с Ci до С4
экстрагируемость циклогексиламина [9] с метиловым оранжевым
увеличивается, а толуидинов [6] с БФС, напротив, уменьшается. Увеличение
экстрагируемости ионных ассоциатов в присутствии добавок спиртов можно
объяснить стабилизацией ионов в органической фазе, благодаря
донорноакцепторному взаимодействию с молекулами спирта. На примере
добавок бензилового спирта к бинарным смесям хлороформ-нитробензол
показано, что вначале при постепенном увеличении доли спирта возрастает
значительно сильнее, чем уменьшается Касс, что положительно сказывается
на проведении экстракционной фотометрии. Затем увеличение происходит
медленнее, чем уменьшение Касс, что приводит к уменьшению константы
экстракции [9].

1.4. Влияние красителей на проведение экстракционной

фотометрии
Экстракционная фотомерия изначально применялась в двух вариантах:
стехиометрическом и субстехиометрическом. В стехиометрическом варианте
проводилась многократная экстракция несколькими порциями экстрагента до
полного извлечения основания, после чего порции объединялись. В
субстехиометрическом варианте проводится однократная экстракция. В
работе [4] показано, что ионы алкалоидов присоединяют одно и то же
13
количество ионов красителя. Поэтому при стехиометрическом варианте
определения оптической плотности красителя после реэкстракции
происходит нивелирование индивидуальных свойств алкалоида, и для всех
алкалоидов одного заряда получается один и тот же калибровочный график.
Общим недостатком стехиометрического метода является неизбежное
разбавление комплекса или красителя, что сопряжено с потерей точности [4,
4]. Кроме того, стехиометрический метод усложняет процесс анализа [7],
требует больших затрат времени и органических экстрагентов. Поэтому в
настоящее время субстехиометрический метод применяют значительно чаще.
Азореагенты широко используются для количественного определения
веществ основного характера в виде ионных пар. Для экстракционно-
фотометрического определения димедрола проведено сравнительное
исследование 11 азореагентов: кислотный красный (КК), кислотный
яркокрасный, кислотный хром тёмно-синий, люмогаллион, метиловый
оранжевый (МО), сульфонафтолазорезорцин, тропеолин О (ТО), тропеолин
00 (ТОО), тропеолин 000-II (T000-II), хромоген чёрный ЕТ-00. Показано, что
наибольшей чувствительностью обладают фотометрические реакции с МО,
ТОО, T000-II и хромогеном чёрным ЕТ-00.
В большинстве работ, где используются фотометрические реакции с
азореагентами, лекарственные вещества определяют в лекарственных
средствах.
Так, ТОО применяется для количественного определения тиодипина,
промедола, арпенала, фентанила, тримекаина, мелликтина, оксоламина,
верапамила, дилтиазема;
МО применяется при определении нанофина, дезоксипеганина,
тубокурарина, клофелина, фентанила , новокаина, этацизина, флуоксетина,
оксоламина , нонахлазина, трифтазина, дилтиазема, ридинола, носкапина ,
тропафена.
Кислотный хром тёмно-синий— для количественного определения
тифена, дипрофена, димедрола и папаверина.
14
 Кислотный ярко-оранжевый — для ганглерона, спазмолитина,
апрофена, дипрофена, амизила, кватерона, бензацина, тифена, дибазола.
Магнезон Х С — для имехина; магнезон И РЕА — для дибазола; Т000
— для оксифенциклимина г/х и гликопиррония бромида, пропантелина,
полимерных четвертичных аммониевых соединений эудрагит RS100 и
RL100, тразодона, офлоксацина, энрофлоксацина, цизарпида.
T000-II — для определения пентоксиверина цитрата; эриохром чёрный
Т — для определения дилтиазема.
Хромотроп 2В и 2R — для определения меклозина и папаверина.
Предложена методика количественного определения папаверина в виде
разнолигандного комплекса с цирконием и ксиленоловым оранжевым.
Известны ряд работ, в которых с помощью экстракционной
фотометрии изучали влияние значения pH на экстракцию органических
оснований различными растворителями (гелиотрина, инкамина,
триходесмина с ТОО; промедола, хлорпротиксена и этмозина с МО).
Разработанные методики обладают высокой чувствительностью и
селективностью по отношению к веществам основного характера. Так,
например, в работе описана методика экстракционно-фотометрического
определения димедрола с МО в присутствии сульфаниламидов. Авторы
работы предлагают проводить фотометрическую реакцию димедрола с
метиловым оранжевым при рН=1, если в лекарственной форме присутствует
бромизовал и теофиллин, и при рН=6 , если присутствует барбамил,
теобромин. Оптимальное значение pH выбирали таким образом, чтобы в
присутствии других лекарственных веществ чувствительность реакции была
максимальна. В работе разработана методика количественного определения
L-гиосцинбутилбромида с МО в комбинированных лекарственных формах,
содержащих парацетамол. В работе предложена методика определения
диаверидина в присутствии сульфадимедина по реакции с ТОО.
Разработана селективная методика определения тропафена с МО в
присутствии продукта гидролиза — тропина. Методика основана на том, что
15
предел обнаружения фотометрической реакции метилового оранжевого с
тропином примерно на 2 порядка выше, чем с тропафеном. Авторы
объясняют это тем, что молярная масса тропина в 3 раза ниже, чем
тропафена.
В свете современных представлений о механизме экстракции ионных
пар можно предположить, что тропафен более гидрофобен, чем тропин. Это
и обусловливает меньшую экстрагируемость ионных ассоциатов с тропином.
Предложена методика определения диронила с ТОО в присутствии
продуктов разложения. Последние не дают фотометрическую реакцию с
красителем.
В ряде работ предложено раздельное определение веществ основного
характера при совместном их присутствии, основанное на различной
экстрагируемости их ассоциатов в зависимости от значения pH. Так,
предложены методики раздельного определения папаверина и сальсолина,
димедрола и эфедрина с МО в комбинированных лекарственных формах 14].
В работе разработана методика определения консерванта
диметилдодецилбензиламмония (ДМДБА) хлорида в глазных каплях,
содержащих тропановые алкалоиды (атропин, скополамин). Методика
основана на том, что в сильнокислой среде ионные ассоциаты тропановых
алкалоидов с метиловым оранжевым разрушаются. Сам же ДМДБА в этих
условиях образует экстрагирующиеся ионные ассоциаты. Авторы работ
предлагают методику количественного определения папаверина и димедрола
в комбинированных лекарственных формах. Использование кислотного хром
тёмно-синего в качестве экстракционно-фотометрического реагента
позволяет определять эти вещества в присутствии других азотсодержащих
оснований (эфедрин, анальгин, дибазол, сальсодин, сальсолидин, теобромин,
кофеин, платифиллин, атропин, келлин).
В работе в качестве фотометрического реагента выбран сульфоназо,
который позволяет проводить количественное определение димедрола в
лекарственных формах, содержащих новокаин и эфедрин, а также
16
папаверина в присутствии анестезина. Селективность количественного
определения веществ основного характера можно повысить путём
предварительного разделения методом тонкослойной хроматографии (ТСХ).
Так в работе проводили предварительное отделение тилидина, пятна
детектировали в ультрафиолетовом свете. Вещество элюировали смесью
метанол + фосфатный буфер с рН=4. Прибавляли МО или ТОО и
экстрагировали в хлороформ. В работе после предварительного разделения
методом ТСХ проведено количественное определение апоатропина и
тропановых алкалоидов в присутствии продуктов их разложения по реакции
с ТОО. Азореагенты применяются и для определения алкалоидов в более
сложных матрицах: фотометрические реакции с метиловым оранжевым
позволяют проводить количественное определение скополамина в семенах
дурмана индейского, тропановых алкалоидов в сырье , экстракте и настойке
красавки, алкалоидов термопсиса в микстуре и сухом экстракте,
пиролизидиновых алкалоидов в извлечениях из лекарственного
растительного сырья. Экстракционная фотометрия при анализе таких
сложных матриц, как кровь, моча, внутренние органы, применяется
сравнительно редко. Предложены методики количественного определения
тубокурарина , азафена, сиднофена, хлорацизина, дикаина с помощью МО и
фентанила , дибазола с помощью ТОО. Проведено сравнительное изучение
методов выделения из биоматериала клофелина и этмозина с помощью
фотометрической реакции с МО, триходесмина [51] по реакции с ТОО.
Авторы работы [7] предлагают для определения димедрола, промедола,
фентанила, циклодола в моче использовать новый азокраситель на основе
теофиллидина (4-метиламино5-М-метилкарбамоил-имидазолил-2-азо-4'-
бензолсульфокислота), который обладает высокой чувствительностью к
некоторым «лекарственным ядам» и низкой чувствительностью к биогенным
примесям. При фотометрическом определении морфина проводилась
предварительная химическая модификация молекул с помощью уксусного

17
ангидрида или а-хлортолуола в ацетоне. В результате продукт реакции
образовывал экстрагирующиеся ионные ассоциаты с МО и ТОО.
При взаимодействии катионных поверхностно-активных веществ
(ПАВ) с метиловым оранжевым в водной фазе, происходит образование
устойчивых ассоциатов, что сопровождается гипсохромным смещением
максимума поглощения с 465 нм до 358 нм. В работе предложена
безэкстракционная методика количественного определения октадециламина
с метиловым оранжевым. Авторы работы разработали методику косвенного
определения анионных ПАВ (додецилфенилсульфоната и натрия
лаурилсульфата) по конкурирующей реакции взаимодействия анионных
ПАВ с цетилпиридинием, что сопровождается разрушением ассоциатов
цетилпиридиния с МО и увеличением оптической плотности при 465 нм.
Авторы работ показывают, что при экстракционно-фотометрическом
определении, кроме измерения оптической плотности ионных ассоциатов
часто используют измерение поглощения свободного красителя после
разрушения окрашенных соединений. В этом случае увеличивается
чувствительность определения. Разрушение ионных ассоциатов проводят
прибавлением к органической фазе 1% раствора серной кислоты в метаноле.
Таким способом определяют оптическую плотность также в работах. В
некоторых работах ассоциаты разрушают раствором серной кислоты в 95%
этаноле . В работах проводят определение оптической плотности красителя в
водной фазе после реэкстракции 0,1-0,05М хлороводородной кислотой.
Особый интерес представляет проточно-инжекционный метод
количественного определения. Так, в работе описана проточно-
инжекционная методика определения бромгексина в сыворотке крови и
лекарственных средствах, основанная на образовании экстрагирующихся в
дихлорэтан ассоциатов с ТОО.
При проведении экстракционно-фотометрического определения
веществ основного характера применяются преимущественно
галогенпроизводные сульфофталеиновых красителей. Фотометрические
18
реакции с галогенпроизводными более чувствительны. Так, среди наиболее
распространенных сульфофталеиновых красителей наибольший
коэффициент распределения был у ионных ассоциатов четвертичных
аммониевых соединений (ацетилхолин, карбахолин, пентамин,
бензогексоний, дитилин, орнид, прозерин, метацин, нафтамон, кватерон,
оксазил, котарнин, цетилпиридиний, гигроний, метиленовый синий,
димеколин, диколин) [1], производных хинуклидина (ацеклидин, оксилидин,
квалидил, фенкарол, темехин, имехин) [1, 2] и аминазина [7] с
бромпроизводными сульфофталеинов: бромтимоловым синим (БТС),
бромкрезоловым пурпурным (БКП), бромкрезоловым зелёным (БКЗ) и
бромфеноловым синим (БФС). Сравнительное исследование реакции
оксоламина [13] с БТС, БФС и тимоловым синим показало, что максимальная
чувствительность реакции с БФС. Это объясняется тем, что атомы галогенов
усиливают гидрофобные свойства молекул красителей [2, 3]. Поэтому
переход таких производных в неполярную органическую фазу облегчается.
Тем не менее, фотометрические реакции с менее гидрофобными красителями
(феноловый красный, крезоловый красный, тимоловый синий) являются
более селективными, так как образовывать ионные ассоциаты с ними
способен лишь ограниченный круг сильногидрофобных оснований. Поэтому,
несмотря на меньшую чувствительность фотометрических реакций с этими
красителями, авторы работы [2] рекомендуют их использование для
повышения избирательности анализа, а в работе [76] для идентификации
некоторых производных хинуклидина (оксилидина, фенкарола).
Значительное количество работ, основанных на экстракционно-
фотометрическом методе, посвящено анализу веществ основного характера в
относительно простых матрицах, например, в лекарственных средствах.
Чаще всего в качестве экстракционнофотометрического реагента применяют
БТС. С ним проводят определение пентамина, метдилазина, прометазина,
изотипендила, метацина, циклодола, стефаглабрина, диколина и димеколина,
прозерина, бензогексония, тропацина, пилокарпина , хинотилина , октадина,
19
темехина , атропина , алкалоидов красавки , сиднофена , теоникола ,
антипирина ацебутолола , индинавира , офлоксацина и ломефлоксацина ,
дилтиазема , носкапина, эритромицина , лоперамида , ребоксетина ,
спарфлоксацина , низкомолекулярных алифатических аминов (н-бутиламин,
диэтиламин, н-гексиламин, триэтиламин, нгептиламин, н-октиламин, ди-н-
бутиламин, н-дециламин, три-н-бутиламин, ди-нгексиламин) , фенкарола и
гигрония, тримебутина. Бромфеноловый синий применяют при определении
эритромицина , новокаина и новокаинамида , бисакодила и пирибедила ,
галидора , ризинола, циклодола, дроперидола , галоперидола,
трифлуперидола , анабазина, никотина , левамизола , анальгина , вератрина,
атровастатина, офлоксацина и ломефлоксацина , циннаризина, дилтиазема ,
лоперамида, цетеризина, эноксацина , низатидина, бензгексола и биперидена,
офлоксацина , квалидила, тримебутина , о- и м-толуидинов . Сиднокарб,
физостигмин и платифиллин, цетилпиридиний, декамин и дегимин,
гуанетидин, гуанфацин, гуаноклор, гуаноксан и дебрисохин , индинавир ,
офлоксацин и ломефлоксацин , циннаризин , эноксацин , офлоксацин,
метдилазин, прометазин, изотипендил, антагонисты гистаминовых
рецепторов (цетеризин, фексофенадин, лоратадин и акривастин) , бисакодил
и пирибедил определяют с помощью фотометрической реакции с БКП.
Силденафила цитрат (виагра) , хинин, хлоргексидин, атровастатин,
циннаризин , дилтиазем , носкапин , эритромицин , молсидомин ,
ребоксетин , производные фенотиазина (хлорпромазин, тиоридазин,
трифлуоперазин, трифлуопромазин, прохлорперазина дималеат,
тиопроперазина дималеат), бисакодил и пирибедил , диазепам , тримебутин
— по реакции с БКЗ. Для изучения влияния pH и природы растворителя на
экстрагируемость этилморфина , промедола , аймалина , цитизина ,
сиднофена , теоникола применялась фотометрическая реакция с БТС,
циклодола , триседила, галоперидола— реакция с БФС. Аналитические
реакции с сульфофталеиновыми красителями обладают в ряде случаев
высокой селективностью по отношению к веществам основного характера,
20
что позволяет анализировать комбинированные лекарственные формы. Так,
фотометрическая реакция с БФС позволяет провести количественное
определение амидопирина в комбинированной лекарственной форме,
содержащей амидопирин и бутадион. При анализе сложных матриц в
некоторых работах проводят предварительное отделение определяемого
вещества. Так, при изучении стабильности ампульных растворов новокаина
лекарственное вещество предварительно отделяют от продуктов разложения
экстракцией в хлороформ при рН=9, после чего проводят фотометрическую
реакцию с БТС при рН=6,0 [5]. При определении диазепама в плазме крови,
перед проведением фотометрической реакции с БКЗ, проводили
предварительное его сорбционное концентрирование и очистку в колонках,
заполненных модифицированным силикагелем Cis. Избирательность анализа
повышает также правильный подбор значения pH. Так, в работе [9]
разработана методика определения промежуточного продукта синтеза
имехина — темехина. Исследование фотометрических реакций с БТС, БКП,
БФС, БТС показало, что с БТС при рН=11,5 можно определять примесь
темехина даже в присутствии 400-кратного избытка имехина. В работе [8]
избирательность анализа повышается путём правильного подбора кислотного
красителя. Так, среди исследованных бромпроизводных сульфофталеиновых
красителей, фотометрическая реакция с БКЗ обладает наименьшей
чувствительностью по отношению к продукту деструкции ацеклидина и
оксилидина — 3-оксихинуклидину. Поэтому даже 10-кратное увеличение
концентрации 3-оксихинуклидина по отношению к этим веществам не
мешает их количественному определению. При количественном определении
тубокурарина в биоматериале , атропина и скополамина в настойке красавки,
пипекурония бромида в присутствии продуктов деструкции предварительно
очищают определяемые вещества методом ТСХ и проводят
фотометрическую реакцию с БТС. Аналогично проводят предварительное
разделение папаверина и атропина при анализе таблеток келлатрин. В
качестве аналитического реагента применяют БФС. В работе [2] проведено
21
сравнительное исследование различных методов выделения аймолина из
биоматериала с помощью реакции с БТС, амитриптиллина , пиразидола ,
сиднофена, хлорацизина [11] по реакции с БФС. Хинин , сферофизин,
паракват в биоматериале определяют по реакции с БТС. Сульфофталеиновые
красители применяются для выделения азотсодержащих веществ из
биоматериала и определения в виде ионных пар. Так применяется БТС для
выделения бензогексония и тубокурарина. Сам тубокурарин не
экстрагируется несмешивающимися с водой растворителями ни при каких
значениях pH. После реэкстракции препаратов раствором хлороводородной
кислоты проводят анализ экстракционно-фотометрическим методом.
Измеряют оптическую плотность экстрагированных в органическую
фазу ионных ассоциатов. Авторы работ [1,9] предлагают проводить
реэкстракцию красителя из органической фазы 0,01-0,05М раствором
гидроксида натрия и измерять оптическую плотность свободного красителя.
Молярные коэффициенты поглощения свободных сульфофталеиновых
красителей в щелочной среде выше молярных коэффициентов поглощения
ионных ассоциатов, что приводит к увеличению чувствительности
определения. Такой подход к проведению анализа характерен только для
ассоциатов с бромтимоловым синим. Бромтимоловый синий способен
образовывать экстрагирующиеся ионные ассоциаты при значениях pH около
7,6, при котором не происходит экстракция бесцветных форм свободного
красителя. В работах [8] измеряют поглощение свободного красителя в
органической фазе после разрушения ионных ассоциатов этанольным
раствором борной кислоты. Методика применима только для ионных
ассоциатов с БТС, образованных в слабощелочной среде (рН=7,5). В работе
[8] описана методика количественного определения нонахлазина с БКЗ,
основанная на измерении интенсивности флюоресценции ионного ассоциата.
В работе [11] используют БТС для сорбционно-фотометрического
определения катионных поверхностно-активных веществ (этоний,
цетилпиридиний). Методика основана на взаимодействии красителя с
22
сорбированным на силикагеле анализируемым веществом. Аналитическим
сигналом является уменьшение оптической плотности раствора БТС после
образования ассоциатов с красителем на поверхности силикагеля.
Описана также безэкстракционная методика количественного
определения этония, декамина, декаметоксина [4], основанная на
образовании ионных ассоциатов с БФС синего цвета в водной фазе. Для
стабилизации образующихся ассоциатов в раствор вводили тритон Х-305 в
концентрации, превышающей критическую концентрацию
мицеллообразования.
Сульфофталеиновые красители в растворах склонны к таутомерным
превращениям, причём бесцветные формы красителей способны переходить
в органическую фазу. Жёлтая окраска ионных ассоциатов и количество
протонов, вытесняемых из молекул красителя, указывают на то, что
ассоциаты образуются с однократно ионизированными молекулами
красителей. В литературе встречаются данные, согласно которым некоторые
вещества способны взаимодействовать с двукратно ионизированными
сульфофталеиновыми красителями, образуя при этом ионные ассоциаты
синей окраски. В работе [2] описано образование ассоциатов с соотношением
органического основания и БФС, равным 1:2, для оксилидина, фенкарола,
квалидила при рН=6 . Описано образование голубых ассоциатов диоксония
при рН=6 [9], тубокурарина при рН=7 с БТС. Этидокаин способен
образовывать с БКЗ жёлтые комплексы в кислой и синие в щелочной среде
[181].
Для количественного определения вещества в лекарственных средствах
использовали синие ассоциаты. Изучение взаимодействия БФС с некоторыми
ЧАС (тетраэтиламмония, тетрабутиламмония, децилтриметиламмония,
додецилтриметиламмония, тетрадецилтриметиламмония,
цетилтриметиламмония, стеарилтриметиламмония и
цетилдиметилбензиламмония хлориды) и цетилпиридинием показало, что в
зависимости от молярного соотношения красителя и органического
23
основания образуются экстрагирующиеся в хлороформ ассоциаты
соотношения 1:1 и 1:2. В работе [2] обнаружено, что хинин с БКЗ образует
ассоциаты состава 2 :1, 1:1 и 1:2 . Авторы работы [13] использовали
комплексы катионного ПАВ цетилпиридиния с БФС для косвенного
определения лаурилсульфата. В основе методики лежит уменьшение синей
окраски хлороформных экстрактов ассоциатов в результате конкурентной
реакции ассоциации анионного ПАВ лаурилсульфата с цетилпиридинием.
Голубые ассоциаты тубокурарина с БТС [5], бензогексония с БФС [8]
используются для количественного определения этих веществ в
биоматериале. Ассоциаты голубого цвета образуются при взаимодействии
некоторых органических оснований с БФС и хинином (хинидином).
Образование таких тройных комплексов положено в основу количественного
определения берберина [5] и некоторых катионных ПАВ (бензэтоний,
бензалконий, гексадецилпиридиний, триметилстеариламмоний) [6]. Такая же
реакция лежит в основе проточно-инжекционного определения бензэтония и
берберина [7]. Определённый интерес представляет применение проточно-
инжекционного анализа в экстракционной спектрофотометрии.
Преимуществом такого метода является высокая скорость рутинных
анализов . Предложена методика количественного определения лидокаина и
хлоргексидина с БКЗ, ранитидина , амброксола с БТС в лекарственных
средствах.

24
 2. Экстракционная фотометрия в фармацевтическом анализе
последнего десятилетия (по данным литературы)
2.1 Анализ доксиламина
Процедура проведения токсикологических экспертиз требует
приводить результаты определения содержания аналита в пробе, полученные
с помощью как минимум двух методик анализа, базирующихся на различных
принципах. Поэтому актуальной является разработка тандемных методик,
которые позволяют проводить определение вещества в одной пробе с
помощью двух методов анализа одновременно. Цель исследования.
Разработка тандемной УФ-спектрофотометрической/экстракционно-
фотометрической методики количественного определения доксиламина и
валидация разработанной методик с использованием предложенных ранее
подходов к процедуре валидации методик количественного определения
аналитов для химико-токсикологического анализа.
Авторами [8] проведена валидация описанной в литературе
экстракционно-фотометрической методики количественного определения
доксиламина в варианте МКГ с использованием модельных растворов с
целью подтверждения ее пригодности для количественного определения
доксиламина в биологических жидкостях – методика характеризуется
неудовлетворительной линейностью, правильностью и сходимостью.
С целью улучшения правильности и сходимости описанная методика
была модифицирована путем введения дополнительной стадии (разрушения
и реэкстракции метилового оранжевого и доксиламина в 0,1 моль/л раствор
кислоты хлористоводородной) и проведения измерения оптической
плотности метилового оранжевого и доксиламина в полученном водном
растворе с помощью спектрофотометра – следствием проведенной
модификации стала разработка тандемной
УФ-спектрофотометрической/экстракционно-фотометрической методики
количественного определения доксиламина.

25
 Проведена валидация разработанной тандемной УФ-
спектрофотометрической/экстракционно-фотометрической методики
количественного определения доксиламина в варианте МКГ – методика
характеризуется удовлетворительной линейностью, правильностью и
сходимостью для обоих подходов к оценке ее приемлемости.
С целью улучшения правильности и сходимости описанная методика
была модифицирована путем введения дополнительной стадии (разрушения
и реэкстракции метилового оранжевого и доксиламина в 0,1 моль/л раствор
кислоты хлористоводородной) и проведения измерения оптической
плотности метилового оранжевого и доксиламина в полученном водном
растворе с помощью спектрофотометра - следствием проведенной
модификации стала разработка тандемной УФ-спектрофотометрической /
экстракционно-фотометрической методики количественного определения
доксиламина. Проведена валидация разработанной тандемной УФ-
спектрофотометрической/экстракционно-фотоме-трической методики
количественного определения доксиламина в варианте метода
калибровочного графика и метода стандарта - методика характеризуется
удовлетворительной линейностью, правильностью и сходимостью для обоих
подходов к оценке ее приемлемости. Предложенная методика позволяет
одновременно определять доксиламин как по его собственному поглощению
в УФ-области спектра, так и по поглощению метилового оранжевого в
видимой области спектра, что обеспечивает дополнительную надежность
анализа и отвечает требованиям к выполнению исследований в химико-
токсикологическом анализе - определение нужно проводить с помощью как
минимум двух методик анализа, которые основаны на разных принципах. [9,
12]

26
 2.2.Определение азитромицина в глазных каплях и геле
В работе [5] сообщается о результатах исследования возможности
использования метода экстракционной фотометрии для количественного
определения азитромицина в разработанных глазных каплях и геле
азитромицина. Для этого авторами были проведены исследования, которые
позволили экспериментально обосновать выбор эозината натрия в качестве
красителя, необходимого для образования ионного ассоциата с
азитромицином. Кроме того, были определены оптимальные параметры
экстракционно фотометрического определения азитромицина по оптической
плотности ионного ассоциата с эозинатом натрия. Также было проведено
определение константы ионизации азитромицина. Проведена валидационная
оценка разработанной методики. В результате проведенных исследований
разработана методика экстракционно - фотометрического определения
азитромицина по реакции с эозинатом натрия. Обоснован выбор реагента и
условий проведения реакции образования ионного ассоциата, лежащий в
основе методики. Рассчитано значение константы ионизации азитромицина,
с помощью которого определен интервал значений рН, являющийся
оптимальным для экстракции ионного ассоциата азитромицина и эозината
натрия. Проведена валидационная оценка разработанной методики,
показавшая ее пригодность для количественного определения азитромицина
в разработанных глазных каплях [5].

2.3.Определение тимолола малеата

Российскими авторами [17] разработан экстракционно-
фотометрический метод количественного определения малеата тимолола.
Этот метод основан на образовании ионного ассоциата с красителем
метиловый оранжевый; его раствор в хлороформе имеет максимум
поглощения на длине волны 426 нм. Метод позволяет определять содержание
малеата тимолола в диапазоне концентраций от 22,0 · 10-4 до 2,2 · 10-3 г / мл.
В ходе работы подобраны реагенты для образования ионного ассоциата
27
(0,1% раствор метилового оранжевого, pH фосфатного буферного раствора).
Изучена стабильность хлороформного раствора ионного ассоциата. Были
исследованы следующие валидационные характеристики: робастность
(аналитическое решение стабильно в течение часа), линейность (a = -0,29% ≤
max a, 5,1%; b = 1,0064; коэффициент корреляции 0,9992), точность (0,34% ≤
макс δ, 1,02%), точность (1,13% ≤ макс. Δas 3,2%); они указывают на
правильность данного метода количественного определения.

Рис. 3 Линейная зависимость оптической плотности от концентрации

малеата тимолола в нормированных координатах
2.4. Количественное определение суммы хинолизидиновых
алкалоидов в семенах люпина
Разработан новый метод количественного определения суммы
хинолизидиновых алкалоидов в семенах люпина с использованием метода
экстракционной фотометрии, основанного на образовании комплексов между
алкалоидами и пикриновой кислотой. Метрологическая аттестация показала
хорошую достоверность и повторяемость результатов. С помощью
предлагаемого метода определено содержание алкалоидов в семенах
различных видов люпина, которое варьирует от 0,095 до 0,128%.[16]

2.5 Количественное определение кетопрофена

Разработан новый простой быстрый и чувствительный
спектрофотометрический метод определения кетопрофена в

28
фармацевтических препаратах. Метод основан на реакции кетопрофена с
аналитическим реагентом - Astra Phloxin FF - при pH 8,0 - 10,8 с
последующей экстракцией образовавшегося ионного ассоциата в толуоле со
спектрофотометрическим детектированием (максимум поглощения при 563
нм, ε = 7,6 × 104 Л × моль-1 × см-1). Градуировочный график был линейным
от 0,8 до 16,0 мкг × мл-1 кетопрофена, а предел обнаружения составлял 0,037
мкг × мл-1.

Рис. 4 Калибровочная кривая для определения кетопрофена. pH 9, 3 ×

10-4 моль × л-1 Astra Phloxin FF, 1,2 моль × л-1 Na2SO4; экстрагент - толуол, λ
= 563 нм, l = 0,3 см
Один из определяющих факторов процесса образование ионных
ассоциатов – концентрация ионы водорода в растворе. Кислотность водной
фазы существенно влияет на реактивность участников реакции, как базовый
краситель, так и кетопрофен. Следовательно, благоприятное образование и
извлечение ИА в органической фазе требует условий доминирования
активных форм катиона красителя (R +) а также органического аниона
R+ + Ket ↔ R+ Ket –
R+ Cl- ↔ R+ + Cl-
Ket- + R+ ↔ (Ket-)*(R+)↓

29
 Чтобы установить оптимальный диапазон pH, кетопрофен смешивали с
Astra Phloxin FF в водном растворе со значениями pH от 2 до 12 и экстрактом
IA оптическую плотность измеряли. На рисунке 5 показано, что поглощение
увеличивается и достигает максимума плато в диапазоне pH 8,0 - 10,8.
Следовательно, pH 9 был использовались во всех последующих
экспериментальных работах. Как форма кривой поглощения и положение
максимум поглощения не зависит от pH, он был предполагается, что
образуется только один тип комплекса в этом диапазоне pH[18].

Рис. 5 Выбор оптимального диапазона pH

2.5 Твердофазная экстракция для фотометрического определения

розмариновой кислоты в экстрактах мелиссы

Целью данного исследования была оценка твердофазной экстракции

для устранения помех. Cоединения из экстрактов мелиссы, предназначенные
для фотометрического определения розмариновой кислоты. В экспериментах
оценивались следующие условия: состав и объем подвижной фазы,
соотношение между объем пробы и масса неподвижной фазы и расход

30
подвижной фазы при разделении. Результаты указали, что мешающие
соединения были устранены.
Экстракты мелиссы предварительно обработали адсорбцией на
нормальной неподвижной фазе (силикагеле) при соотношении объема пробы
к массе силикагеля 1: 1 (об. / мас.), далее проводили элюирование подвижной
фазой - диэтиловый эфир: уксусная кислота (9: 1; об. / об.) - объем - в 40 раз
больше объема неочищенного экстракта - с расходом 5 мл / мин.
Смешивали 4 мл ацетатного буфера (pH 6,0). Буфер содержал FeSO4 в
концентрации 0,5 г / л. Смесь инкубировали 1 ч при комнатной температуре в
темноте. Оптическую плотность реакционной среды считывали при 572 нм.
Калибровка была проводена со стандартом розмариновой кислоты и
контролем без розмариновой кислоты.
После выбора условий SPE метод был проверен по сравнению с
анализом ВЭЖХ.
Изучение процесса экстракции начинается с выбора экстракционного
растворителя (спектр органических алифатических спиртов (таких как
метанол, этанол, пропан-2-ол и их водные растворы). Содержание
розмариновой кислоты определяли фотометрическим анализом и анализом
ВЭЖХ. Результаты (рис. 6) показали диспропорция между концентрацией
розмариновой кислоты, определенной фотометрическим и методы ВЭЖХ.
Все концентрации розмариновой кислоты определяются фотометрическим
методом. Анализ показал лучшие результаты, чем определение концентрации
розмариновой кислоты, определенная с помощью ВЭЖХ. Этот находка
относится к присутствию других соединений, которые мешают
фотометрическому анализу. Различия результатов между обоими
аналитическими методами выше в пробах, т.к. приготовлен он был на водном
растворе с органическими алифатическми спиртами.

31
 Рис. 6 . Сравнение двух методов определения розмариновой кислоты
(РА); А - Зависимость РА- концентрация определена фотометрическим
методом и ВЭЖХ; B - Концентрации РА, определяемые ВЭЖХ и
фотометрический метод в экстрактах мелиссы, приготовленных от
экстракции до различной экстракции. Растворители: 1 - дистиллированная
вода; 2 - 25% метанол; 3 - этанол 25%; 4-25% пропан-2-ола; 5 - 50% метанол;
6-50% этанол; 7-50% пропан-2-ола; 8 - 75% метанол; 9 - этанол 75%; 10 - 75%
пропан-2-ола; 11 - метанол; 12 - этанол; 13 - пропан-2-ол.
Результаты показывают, что этот метод может быть использован для
определения розмариновой кислоты с помощью фотометрического
измерения, основанного на комплексообразовании ионов Fe2 + с
розмариновой кислотой [19].

32
 Заключение
1. Экстракционно-фотометрический метод основан на сочетании
экстракции определяемого вещества с его последующим фотометрическим
определением. Этот метод применяют при анализе сложных смесей, когда
нужно определить малые количества одних веществ в присутствии больших
количеств других, при определении примесей в присутствии основных
компонентов, а также в тех случаях, когда непосредственное определение
интересующего элемента в смеси связано с большими трудностями. При
экстракции малых количеств примесей происходит не только их выделение,
но и концентрирование. Поэтому экстракционно-фотометрический метод
приобретает особо важное значение в связи с определением малых количеств
примесей в веществах высокой степени чистоты, широко применяемых в
фармации.
2. Приборы, используемые в этом методе анализа – фотоколориметры,
принцип работы их основан на измерении интенсивности света определённой
длины волны, проходящей через окрашенный комплекс аналита. Чем ниже
интенсивность света, тем выше содержание аналита в пробе.
3. Красители и растворители для экстракционной фотометрии
подбираются ситуационно, в зависимости от физико-химических свойств
анализируемого вещества: чаще всего в качестве растворителя выступает
вода, реже –этанол, хлороформ, эфир. Экстракционно-фотометрический
метод заключается в подборе соответствующего реагента-красителя, который
переводит определяемое вещество в окрашенное, в экстрагировании этого
соединения подходящим органическим растворителем и измерении
интенсивности окраски полученного раствора. Для количественного
определения вещества в лекарственных средствах использовали тропеолин,
синие ассоциаты.
4. Проеведенный анализ литературы показал, что экстракционную
фотометрию можно использовать в анализе доксиламина , азитромицина в
глазных каплях и геле, тимолола малеата, в количественнои определении
33
суммы хинолизидиновых алкалоидов в семенах люпина, кетопрофена,
розмариновой кислоты в экстрактах мелиссы .
Таким образом, экстракционно-фотометрические методы анализа
являются высокочувствительными методами, они быстро развиваются и
очень перспективны.

34
 Литература
1. Жебентяев А.И., Ёршик В.М. Применение кислотных красителей
для фотометрического определения веществ основного характера // Вестник
фармации № 4 (26) 2004
2. Аристов Г.Н., Ященко В.К. Устойчивость инъекционных
растворов новокаина // Фармация. - 1972. - № 6. - С. 41-45. 72 Вестник
фармации № 4 (26) 2004 6. Бщниченко Ю.Г., Крамаренко В.П. Кшыбсне
визначення стефаглабрину сульфату // Фармацевтичний журнал. - 1989. - № 6
. - С. 66-67.
3. Боковикова Т.Н., Стронова И.А., Суранова А.В. Экстракционно-
фотометрическое определение количественного содержания фентанила в
0,005% растворе для инъекций // Фармация. - 1991. - № 2. - С. 37-39.
4. Бубон Н.Т., Дуксина С.Г., Старостенко В.Е. Определение
ризинола, циклодола экстракционно-фотометрическим методом // Фармация.
- 1975. - № 3. - С. 45-47. 73 Вестник фармации № 4 (26) 2004
5. Гусов Р.М., Вергейчик Е.Н., Гусова Б.А.Экспериментальное
обоснование возможности использования метода экстракционной
фотометрии для определения азитромицина в глазных лекарственных формах
// Актуальные проблемы медицины, 2016.
6. Евтушенко Ю.М., Иванов В.М., Зайцев Б.Е. Фотометрическое
определение октадециламина метиловым оранжевым // Журнал
аналитической химии. - 2002. - Т. 57, № 1 .-С . 12-15.
7. Жебентяев А.И., Ёршик В.М. Химико-аналитические
характеристики ассоциатов верапамила с азореагентами // Весщ НАН
Беларуси сер. xiM. навук. - 2004. - № 4. - С. 20-23.
8. Жебентяев, А.И. Токсикологическая химия (в 2 частях). Ч.2:
учебное пособие/А.И.Жебентяев.-Витебск: ВГМУ, 2015 – 415с.
9. Клименко Л.Ю., Трут С.Н., Костина Т.А., Иванчук И.М.
Разработка тандемной уф-спектрофотометрической экстрационно-

35
фотометрической методики количественного определения доксиламина//
Здравоохранение Таджикистана №: 4 (327): 2015, С.: 21-29.
10. Мамина Е.А., Болотов В.В., Бондарь В.С. Использование
азокрасителя на основе теофилидина для химико-токсикологического
анализа димедрола, промедола, фентанила, циклодола // Хим. - фарм. журнал.
- 2002. - Т. 36, № 5. - С. 46-49.
11. Мирзаева Х.А., Ахмедова М.С., Рамазанов А.Ш., Ахмедов С.А.
Экстракционнофотометрическое определение димедрола и папаверина в
лекарственных формах // Журнал аналитической химии. - 2004. - Т. 59, № 3. -
С. 245-249.
12. Трут С. Н., Клименко Л. Ю. Разработка тандемной УФ-
спектрофотометрической/экстракционно-фотометрической методики
количественного определения доксиламина // Инновации в медицине и
фармации 2015. Материалы научно-практической конференции студентов и
молодых ученых С. 950
13. Чеботарёв А.Н., Паладенко Т.В., Щербакова Т.М. Сорбционно-
фотометрическое определение микроколичеств катионных поверхностно-
активных веществ // Журнал аналитической химии. - 2004. - Т. 59, № 4. - С.
349-353.
14. Черновьянц М.С., Гольева В.Е., Пыщев А.И.
Спектрофотометрическое определение полийодгалогенидов органических
азотсодержащих катионов // Журнал аналитической химии. - 2003. - Т. 58, №
2. - С. 161-165.
15. Шеряков А.А., Жебентяев А.И. Сравнительное экстракционно-
фотометрическое исследование ассоциатов димедрола с азокрасителями //
Фармация. - 1997.- № 3 .- С. 27-29.
16. M. Gavrilin;S. Senchenko;O. Popova / Extraction-photometric
determination of alkaloids in lupine seeds// Pharmaceutical Chemistry Journal.
40(5):272–275, MAY 2006

36
 17. Olha Vislous, Nataliia Yu Bevz, Victoriya Georgiyant/ Development
of the extraction-photometric method for quantitative determination of timolol
maleate// January 2014Journal of Chemical and Pharmaceutical Research
6(9):156-159
18. S. M. Raj and V. G. Jamakandi/ Estimation of ipratropium bromide by
extraction free spectro-photometric method using sulphonapthalein dye // KLE
University’s College of Pharmacy, Vidyanagar, Hubballi - 580031, Karnataka,
India.
19. Miroslav Ondrejovič . Cyril and Methodius in Trnava solid-phase
extraction for photometric determination of rosmarinic acid in lemon balm
(melissa officinalis) extracts// Nova Biotechnologica et Chimica 11-1 (2012) 63

37