Infektsionnye Bolezni Sobak I Koshek

Информация получена из открытых источников и не предназначена для коммерческого использования.
Вниманию правообладателей!
Если Вы считаете, что нарушены Ваши авторские права, сообщите в администрацию webvet.ru@gmail.com
Добавить свой материал в библиотеку или внести коррективы в уже опубликованный - пишите в отдел контента content.webvet@gmail.com
Смотреть ещё материал на: ЛитРес и My-shop.ru
Британская Ассоциация ветеринарии мелких домашних животных
Практическое руководство по инфекционным

болезням собак и кошек
Редакторы:
Ян Рэмси и Брин Теннант
библиотека портала
Ветеринарная Энциклопедия webvet.ru
Руководство по инфекционным заболеваниям собак и кошек
Первое издание включает полезную клиническую информацию о вирусных, бактериальных,

грибковых, протозойных и паразитарных заболеваниях, встречающихся у собак и кошек в
Великобритании. Особое внимание уделено заболеваниям, характерным для Великобритании, но
кратко описаны также экзотические заболевания, например, бабезиоз или гельминтозы сердца,
которые можно обнаружить у ввезенных животных.
В руководстве по инфекционным заболеваниям собак и кошек BSAVA, созданном для удобства

занятого практикующего врача, использован уникальный проблемно-ориентированный подход с
группировкой заболеваний по принципу поражения систем организма, а не по таксономической
классификации. Если возбудитель поражает несколько систем, на главы, в которых подробно
описаны клинические признаки, диагностика, лечение и контроль, даются перекрестные ссылки.
Вопросы, не имеющие непосредственной важности для практического врача, например, строение
микроорганизмов, репликация, молекулярная биология и паталогоанатомические изменения, не
рассматриваются.
Описаны диагностические методы, включая молекулярно-биологические, а также современные

достижения в производстве вакцин. Обсуждаются антимикробные и антипаразитаные препараты;
отдельно в приложении предусмотрен мини-справочник. Кроме того, описаны специальные
контрольные процедуры в местах содержания животных.
Чтобы выделить основные моменты, во всех разделах приводятся таблицы и цветные

иллюстрации.
Руководство Британской Ассоциации ветеринарии мелких домашних животных по
инфекционным болезням собак и кошек
Редакторы:
Ян К. Рэмси,
Бакалавр ветеринарных наук, доктор философии, член Королевского ветеринарного общества
Департамент по клиническим исследованиям в ветеринарии
Университет Глазго
Брин Теннант
Бакалавр ветеринарных наук, доктор философии, член Королевского ветеринарного общества
(Общая диагностика)
Отделение ветеринарии SAC
Содержание:
Список авторов
Предисловие
Введение
1. Лабораторная диагностика инфекционных заболеваний
Диана Эдди и Ян Рэмси
2. Антимикробная и антипаразитарная терапия
Джонатан эллиот
3. Вакцинация
Освальд Джаннетт и Ян Рэмси
4. Контроль над инфекционными заболеваниями в местах содержания животных
Даниэлла Ганн-Мур
5. Система кроветворения и лимфоретикулярная система.
Ян Рэмсли, Даниэлла Ганн-Мур и Сюзан Шоу
6. Дыхательная система
Ким Уиллогби и Сюзан Доусон
7. Сердечно-сосудистая система
Клайв Элвуд
8. Пищеварительный тракт
9. Брюшная полость
Даниэлла Ганн-Мур и Диана Эдди
10. Мочевыделительная система
11. Печень, поджелудочная железа и селезенка
12. Репродуктивная система и новорожденные
Гэри Ингланд
13. Кожа
Ян Мейсон, Росс Бонд, Даниэлла Ганн-Мур и Эндрю Спаркс
14. Опорно-двигательный аппарат
Крис Мэй
15. Нервная система
Клер Русбридж
16. Глаз
Дэвид Гоулд
Приложение
Дозировка лекарств
Алфавитный указатель
АВТОРЫ
Диана Эдди, бакалавр ветеринарных наук, доктор философии, член Королевского колледжа
ветеринарных наук
Департамент Ветеринарной патологии, Университет Глазго, ветеринарная школа
Росс Бонд, бакалавр ветеринарной медицины, доктор философии, член Королевского колледжа
Королевский ветеринарный колледж, Лондонский университет
Сюзан Доусон, бакалавр ветеринарии, доктор философии, член Королевского колледжа

Департамент клинической ветеринарии и сельского хозяйства, Ливерпульский университет, клиника
мелких животных
Джонатан Эллиотт, бакалавр ветеринарных наук, доктор философии, , член Королевского колледжа
Департамент Общей ветеринарии, Королевский ветеринарный колледж, Лондонский университет
Клайв М. Элвуд, бакалавр ветеринарных наук, доктор философии, член Королевского колледжа
Проф. Гэри С. В. Ингланд, бакалавр ветеринарии, доктор философии, доктор ветеринарной

медицины
Профессор курса разведения животных, Королевский ветеринарный колледж, Лондонский
университет
Дэвид Гоулд, бакалавр естественных наук, бакалавр ветеринарной медицины, доктор философии,
член Королевского колледжа ветеринарных наук
Бристольский университет, департамент ветеринарии
Даниелла Ганн-Мур, бакалавр естественных наук, бакалавр ветеринарии, доктор философии, член
Королевского колледжа ветеринарных наук
Эдинбургский университет, клиника мелких животных
Проф. Освальд Джарретт, бакалавр ветеринарных наук, доктор философии, член Королевского
колледжа ветеринарных наук, Департамент ветеринарной патологии, Университет Глазго,
ветеринарная школа
Ян С. Мейсон, бакалавр ветеринарных наук, доктор философии, член Королевского колледжа

Консультации по ветеринарной дерматологии
Крис Мей, бакалавр ветеринарной медицины, доктор философии, член Королевского колледжа
Уиллоуз, справочная служба
Ян К. Рэмси, бакалавр ветеринарных наук, доктор философии, член Королевского колледжа

Департамент по ветеринарным клиническим исследованиям, Университет Глазго, Ветеринарная
школа
Клер Русбридж, бакалавр ветеринарных наук, член Королевского колледжа ветеринарных наук
Ветеринарный центр Stone Lion
Сюзан Шоу, бакалавр ветеринарии, магистр естественных наук, член Королевского колледжа
Департамент ветеринарной медицины, Бристольский университет
Эндрю Х. Спаркс, бакалавр ветеринарии, доктор философии, член Королевского колледжа

Департамент клинических исследований, управление по охране животных
Брин Дж. Теннант, бакалавр ветеринарии, доктор философии, член Королевского колледжа
Общая диагностика, отделение ветеринарии SAC
Ким Уиллоугби, бакалавр ветеринарии, член Королевского колледжа ветеринарных наук

Ливерпульский университет, клиника мелких животных
Предисловие
Любой ветеринарный врач, работающий с мелкими животными, каждый день сталкивается с
диагностикой и лечением инфекционных заболеваний у собак и кошек.
В данном руководстве инфекционные болезни сгруппированы в разделы по принципу поражения
какой-либо системы организма, что значительно облегчает поиск информации и позволяет практикующему
врачу быстро найти нужные сведения в сложных диагностических случаях. Описаны болезни вирусные,
бактериальные, паразитарные, грибковые и протозойные; заболевания, передающиеся человеку, отмечены
особо.
В книге представлены не только инфекции, распространенные в Великобритании, но также и
экзотические болезни. Безусловно, описано бешенство, а также диагностика, лечение, предупреждение и
контроль над заболеваниями, которые могут быть занесены на территорию Великобритании, и введение в
схему ввоза домашних животных.
В книге не дается подробных сведений по микробиологии, но описываются современные методы,
необходимые для точной диагностики многих патологий и приобретающие все большее значение по мере
расширения научного кругозора.
Редакторов и издателя BSAVA можно поздравить с выпуском этого руководства за его клинические и
научные материалы, структуру и представление информации. Чтобы создать эту замечательную книгу, они
объединили опыт всех ее авторов.
Это превосходное новое руководство из серии справочников BSAVA, несомненно, будет иметь
огромный успех, так как поможет быстро найти подробную справку, подойдет для занятого практикующего
врача и будет желанным приобретением для любой учебной библиотеки.
Линн Тернер, бакалавр ветеринарии, член Королевского колледжа ветеринарных наук

Президент BSAVA 2000–2001 гг.
Введение.
Инфекционные заболевания – одни из самых распространенных в ветеринарии мелких домашних
животных. В данном совершенно новом руководстве описаны заболевания собак и кошек, вызванные
бактериями, грибами, вирусами, простейшими и другими паразитами. Наибольшее внимание уделено
инфекциям, распространенным в Великобритании, таким, как грипп кошек, инфекционная диарея и
пиодерма, но также описаны многочисленные экзотические болезни. Представлена подробная информация
о важнейших заболеваниях, встречающихся у животных, ввезенных в Великобританию в соответствии со
Схемой ввоза. Остальные инфекционные болезни, которые можно обнаружить у животных, находящихся
на карантине, описаны не так подробно. Важнейшие способы дифференциальной диагностики от
неинфекционных болезней указаны в соответствующих разделах текста.
Авторы применили скорее проблемно-ориентированный подход, чем систематику. Инфекции
сгруппированы в основном по признаку поражения систем организма, а не по таксономической
классификации. Таким образом, все вирусы, бактерии и паразиты, поражающие желудочно-кишечный
тракт, рассматриваются в одной главе. Если возбудитель вызывает заболевание, протекающее в разных
формах (например, вирус чумы собак), основные сведения о клинических признаках, диагностике, лечении
и предупреждении следует искать в одной главе. В остальных главах даны детали, касающиеся конкретных
систем, и перекрестные ссылки, отсылающие читателя к основной главе. Это позволило сгруппировать
возбудителей, относящихся к разным таксономическим группам, но вызывающих сходные клинические
проявления. Авторы надеются, что такой подход будет удобнее для занятого практикующего врача.
Руководство не дает подробных сведений о строении микроорганизмов, репликации, молекулярно-
биологических показателях и патологоанатомических изменениях, не имеющих непосредственной
важности для практикующего врача. Описаны современные диагностические средства, в том числе
молекулярно-биологические методы. В такой бурно развивающейся области, как молекулярная биология,
технологии неизбежно становятся доступными для применения, позволяя идентифицировать новых
возбудителей и определять уже известных с большей точностью. Перед началом массового использования
таких технологий необходима их тщательная проверка в сравнении с признанными стандартами. Об их
применении в клинической практике многое еще предстоит изучить. Авторы надеются, что данная книга
поможет ветеринарным врачам в выборе методов и интерпретации результатов.
Мы сделали все возможное, чтобы избежать ошибок или пробелов в книге, но мы будем
благодарны за любые предложения читателей по ее улучшению.
Редакторы хотели бы поблагодарить всех авторов, уделивших время этому проекту и передавших
ему свой опыт. Они также выражают благодарность Марион Джоветт и персоналу BSAVA за их помощь и
тяжелую работу. Книга посвящается членам семей редакторов в знак признания их любви и поддержки.
Ян Рэмси, бакалавр ветеринарных наук, доктор философии, член Королевского колледжа
Брин Теннант, бакалавр ветеринарных наук, доктор философии, член Королевского колледжа
ветеринарных наук, сертификат по ветеринарной радиологии
Февраль 2001
Глава 1.
Лабораторная диагностика инфекционных болезней

Диана Эдди и Ян Рэмси
План
Введение
Выбор лабораторного метода
Отправка образцов в лабораторию
Вирусологические методы
Выделение вируса
Электронная микроскопия
Гемагглютинация
Гистопатология
Бактериологические методы
Непосредственное определение
Культуральные методы
Микологические методы
Культуральные методы
Паразитологические методы
Эктопаразиты: чистка шерсти, мазки из фолликулов, смывы из ушей, соскобы с кожи,
гистопатология, анализы кала
Эндопаразиты: мазки из фекалий, флотационные методы, бронхиальный лаваж, мазки крови,
методы концентрации микрофилярий
Серологические методы
Определение вируснейтрализующих антител
Иммунодиффузия в агаровом геле
Торможение гемагглютинации
Латексная агглютинация
Иммунофлуоресценция
Иммуноблоттинг
Твердофазный иммуноферментный анализ
Иммуномиграционный экспресс-анализ
Список литературы и дальнейшее чтение
ВВЕДЕНИЕ
Выбор лабораторного метода
Лабораторные тесты – краеугольный камень диагностики большинства инфекционных болезней.
Специальные рекомендации по выбору метода диагностики конкретной инфекции описаны в
соответствующих главах.
В Великобритании нет надзорных органов, регулирующих снабжение диагностическими
средствами для ветеринарии. Для получения достоверных результатов необходимо пользоваться методами,
утвержденными научным ветеринарным обществом. Ветеринарный врач обязан дать гарантию надежности
метода, независимо от того, применяет его в собственной или коммерческой лаборатории. Хорошие
коммерческие лаборатории приводят контрольные данные, которые публикуются в реферативных
журналах, например, Journal of Small Animal Practice, или в соответствующих руководствах. При оценке
теста нужно обращать внимание на его чувствительность, специфичность и предсказательную ценность.
Определения этих терминов даны на рис. 1.1.
Решение об отправке образца в специализированную лабораторию или выполнении анализа на
месте зависит от стоимости, опыта и возможности. Многие тесты должен производить только опытный
персонал, в лаборатории, оснащенной специальным оборудованием. Преимущество лабораторий – в
обученном персонале, обладающим большим опытом проведения специфических исследований. Тем не
менее, некоторые исследования можно выполнять самостоятельно; для этого очень желательно иметь
собственную хорошо оборудованную лабораторию. Анализами, проведенными на месте, можно быстро
подтвердить диагноз некоторых инфекционных болезней. Все практические лаборатории должны
соблюдать строгие стандарты безопасности (консультацию можно получить у инспектора по гигиене и
охране труда). Тест-системы для определения вирусов очень удобны и позволяют быстро получить
результат, однако, необходимо иметь в виду ограничения для их использования; ни один тест не обладает
100% чувствительностью или 100% специфичностью.
Отправка образцов в лабораторию.

Практикующие ветеринарные врачи, желающие отправить образцы в диагностическую
лабораторию для бактериологического исследования, должны приготовить обычные мазки, а также взять
мазки тампонами с угольной средой. Последнее необходимо для грамотрицательных и анаэробных
микроорганизмов, быстро погибающих в сухом мазке. Предпочтительнее присылать образцы фекалий, а не
ректальные мазки. Транспортные среды для бактерий могут храниться при комнатной температуре.
Транспортные среды для вирусов и хламидий должны храниться в холодильнике (до 6 месяцев).
Некоторые среды для вирусов могут храниться годами в замороженном состоянии.
Результаты теста
Определяющий тест
a
Чувствительность =
ab
d
Специфичность =
cd
a
Предсказательная ценность положительного результата =
ac
d
Предсказательная ценность отрицательного результата =
bd
Чувствительность
Это мера способности правильно идентифицировать заболевание данным методом. Количественное
отношение отрицательных результатов, полученных от больных животных (ложноотрицательных
результатов), имеет обратную зависимость от чувствительности. Чем выше чувствительность, тем меньше
получается ложноотрицательных результатов. Относительное число ложноположительных результатов
вывести из этого значения нельзя.
Специфичность.
Это мера способности правильно идентифицировать здоровых животных данным методом.
Количественное отношение положительных результатов, полученных от здоровых животных
(ложноположительных результатов), имеет обратную зависимость от специфичности. Чем выше
специфичность, тем ниже количество ложноположительных результатов. Относительное число
ложноотрицательных результатов вывести из этого значения нельзя.
Предсказательная ценность положительного результата.

Это мера оценки положительного результата. Связана с чувствительностью, но также зависит от
распространенности болезни (в то время как на чувствительность это не влияет), и, следовательно, имеет
большее значение для клинициста.
Предсказательная ценность отрицательного результата.

Это мера оценки отрицательного результата. Связана со специфичностью, но также зависит от
распространенности болезни (в то время как на чувствительность это не влияет), и, следовательно, имеет
большее значение для клинициста.
Рис. 1.1. термины, использующиеся при сравнении лабораторных методов. Чувствительность,

специфичность, положительную и отрицательную предсказательную ценность можно подсчитать для
любого лабораторного теста, сравнимого с определяющим методом, например, с гистопатологией.
Важен выбор подходящих контрольных популяций чисел, так как это влияет на значение
предсказуемости. Буквы a, b, с и d относятся к количеству результатов в каждой категории. Например,
b – число отрицательных результатов теста при положительном результате определяющего теста, то
есть ложноотрицательных результатов.
ВИРУСОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ
Выделение вируса.
Выделение вируса является одним их определяющих методов его выявления. Этот метод широко
используется для диагностики вируса лейкоза кошек (рис. 1.2.), кальцивируса кошек, герпесвируса кошек и
поксивируса кошек. Также возможен при подозрении на аденовирусную и герпесвирусную инфекции
собак, однако, чаще применяют другие методы. Для выделения вируса требуется длительное время, оно
дорого стоит и может производиться только в специализированных лабораториях. Для культивирования
разных типов вирусов требуются различные типы клеток, иногда с постоянным субкультивированием.
Выделить вирус не сможет неспециалист. Данный метод предпочтителен для определения и
культивирования неизвестных вирусов или новых штаммов.
Подпись к рисунку.
Рис. 1.2: Культура клеток QN10S, зараженная вирусом лейкоза кошек. Вирус вызвал
трансформацию клеток в виде изменения морфологии и уменьшения количества клеток на пластике, где
растет культура. Образовавшийся фокус инфекции подтверждает присутствие инфекционного вируса
лейкоза кошек в образце. Другие вирусы, например, вирус иммунодефицита кошек, не трансформируют
клетки QN10S. (с любезного разрешения проф. Освальда Джарретта).
Некоторые вирусы, например, вирус чумы плотоядных и коронавирус кошек, очень трудно
выделить в культуре клеток, поэтому эти инфекции обычно диагностируют серологическими методами.
Вирусы могут отсутствовать в секретах, крови или тканях на момент появления клинических признаков,
или погибать вне организма даже при использовании транспортных сред.
Электронная микроскопия.
Электронная микроскопия – экспресс-метод, обычно используется для идентификации семейств по
их характерным структурам, а не отдельных вирусов. Возможности данного метода ограничены высокой
стоимостью оборудования и необходимостью значительного опыта. Другая проблема – в том, что
некоторые вирусы относительно легко изменяют свою морфологию. Например, коронавирусы могут терять
свою характерную шарообразную форму.
Метод относительно малочувствителен, так как при естественном заражении вирусные частицы
редко образуются в достаточном количестве. Исключением является поксивирусная инфекция кошек, при
которой вирусные частицы в большом количестве накапливаются в корках засохшего экссудата. После
заражения культур клеток также образуется большое количество поксивирусных частиц, которые можно
увидеть под электронным микроскопом (рис. 1.3).
Рис. 1.3. Электронная микрофотография поксивируса кошек из корки засохшего экссудата. Это
один из немногих вирусов, реплицирующийся в количестве, достаточном для его идентификации методом
электронной микроскопии.
Гемагглютинация.
Некоторые вирусы (особенно парвовирусы) вызывают агглютинацию эритроцитов определенных
видов животных. Самый распространенный пример этого явления – агглютинация эритроцитов свиньи
парвовирусами кошек или собак. Определение этих вирусов методом гемагглютинации требует
значительного опыта; свиная кровь должна быть свежей. Метод не подходит для использования в
практической работе. Он относительно малочувствителен и требует высокой концентрации вирусных
частиц. Тест неспецифичен, но позволяет дифференцировать парвовирус собак (вызывающий
агглютинацию при рН 7,2) от парвовируса кошек (рН 6,4). Существует улучшенный вариант метода
гемагглютинации – метод задержки гемагглютинации, обладающий большей специфичностью (см. ниже).
Тест можно использовать для подтверждения результатов при идентификации вируса, но обычно его
применяют для титрования противовирусных антител.
Цепная полимеразная реакция.

Цепная полимеразная реакция (ЦПР) позволяет многократно реплицировать ДНК, содержащуюся в
очень малой концентрации, при помощи фермента – термостабильной ДНК-полимеразы, создающей копию
молекулы на матрице ДНК. Участком начала амплификации служит короткий участок ДНК, так
называемый праймер, связанный со специфичной областью ДНК микроорганизма. После каждой фазы
полимеризации реакционную смесь нагревают для разъединения цепей ДНК, и, таким образом, появляются
новые участки для связывания праймеров и запуска новых циклов полимеризации. Амплифицированную
ДНК затем отделяют от смеси нуклеотидов в геле. Это можно сделать различными способами (чаще всего
с помощью окраски красителем, флуоресцирующем в ультрафиолетовом свете). Эта технология может
применяться и для определения РНК-содержащих вирусов; в этом случае сначала добавляют обратную
транскриптазу, создающую ДНК-копию вирусной РНК. Принцип «обратной ЦПР» показан на рис. 1.5.
Главным преимуществом этого метода является его высокая чувствительность. Теоретически возможно
определить одиночный организм, но на практике часто требуются большие их количества, до нескольких
сотен. Метод ЦПР очень специфичен (имеющиеся праймеры подвергаются тщательному отбору).
Главный недостаток метода ЦПР – возможность ложноположительных результатов из-за высокой
чувствительности. Причиной может служить контаминация образца, праймеров, фермента или
нуклеотидов. И если лаборатории могут контролировать контаминацию своих реагентов, то контаминация
образца возможна в процессе работы. Высокая чувствительность затрудняет интерпретацию
положительных результатов. Большинство тест-систем на основе ЦПР предназначены для качественного
анализа, хотя возможен и полуколичественный. Качественный анализ показывает только наличие или
отсутствие организма. При некоторых инфекциях присутствие микроорганизмов в небольшом количестве
не имеет клинического значения, и, следовательно, при использовании метода ЦПР возможна
гипердиагностика. Другая проблема, не столь значительная, возникает из-за высокой специфичности
реакции. Подбор неподходящих праймеров может дать ложноотрицательный результат. При методе
обратной ЦПР ложноотрицательный результат может получиться в результате разрушения РНК
посторонними ферментами. Праймеры нужно получать из ДНК с известной последовательностью, не
менее нескольких лет определяемой у вирусов различных штаммов, происходящих из различных
географических районов.
На данный момент существуют тест-системы для диагностики широкого спектра возбудителей,
включая вирусы лейкоза, иммунодефицита, герпесвирус и коронавирус кошек, парвовирус собак,
Clamiydophila felis (ранее Chlamidia psittaci var. Felis) и Haemobartonella felis. В будущем их станет больше.
При интерпретации результатов, полученных данным методом, нужно всегда учитывать клиническую
информацию; не следует ставить диагноз только по результатам ЦПР.
Подписи к рисункам.
Рис. 1.4: Цепная полимеразная реакция. Пара праймеров, связывающихся со специфичными
комплементарными участками одноцепочечной ДНК (образовавшейся после нагревания двойной спирали
ДНК), служат точками начала полимеризации. В результате повторяющегося (от 20 до 30 раз) цикла
разделения, связывания праймеров и полимеризации происходит амплификация определенного участка
ДНК. Получившаяся смесь затем разделяется методом электрофореза в геле. Гель, содержащий ДНК,
окрашивается (часто используются красители, содержащие флуоресцентный компонент – бромид
этидия). На фото: исследуемые образцы – от С35/1 до С210, левая полоса содержит маркеры
определенных размеров; самые правые полосы – “neg” и “pos” – отрицательный и положительный
контроли.(с любезного разрешения Майкла МакДональда)
Рис. 1.5. Обратная цепная полимеразная реакция. Это модификация ЦПР (см. рис. 1.4.), в которой
фермент обратная транскриптаза синтезирует одноцепочечную ДНК на матрице РНК.
Комплементарная ДНК образуется в одиночном цикле полимеризации.
Надписи на рис. 1.4.

1. Двухцепочечная ДНК разделяется нагреванием
2. «Отжиг» праймеров, которые соединяются с ДНК
3. При помощи термостабильной ДНК-полимеразы создается копия ДНК
4. Цепи ДНК снова разделяются нагреванием
5. При охлаждении смеси большее количество праймеров соединяется с ДНК
6. Образуется больше копий ДНК, но длина некоторых матриц препятствует дальнейшей
элонгации
7. Новый цикл нагревания, «отжига» и элонгации приводит к образованию новых копий коротких
фрагментов первоначальной молекулы ДНК
8. После 30 циклов репликации число копий одной ДНК достигает 264 миллионов.
Надписи на рис. 1.5

РНК-содержащий вирус (например, коронавирус кошек)
Разрушение вируса
Экстракция ДНК
кДНК
обратная транскрипция
РНК
ЦПР (см. рис.1.4.)
Множественные копии ДНК можно идентифицировать методом электрофореза в геле.
Гистопатология, иммуногистохимия и методы in situ.

Не следует недооценивать гистопатологические методы диагностики вирусных инфекций. Многие
вирусы вызывают характерные патологические изменения и образуют тельца включения. К основным
недостаткам этого метода относятся необходимость биопсии и длительный процесс интерпретации
результатов, который должен выполнять опытный персонал.
Для определения возбудителя можно применять иммуногистохимические методы. Принцип
иммуногистохимии сходен с принципом иммунофлуоресценции (см. ниже), правда, при этом используют
фиксированные ткани, а не культуры клеток. Кроме того, необходимы различные конъюгаты и разные
способы обработки.
Гибридизация in situ используется для выявления специфических последовательностей ДНК
(например, вирусных регуляторных генов) в фиксированных тканях. Для такой технологии требуются
специальные фиксаторы, так как ткани, фиксированные формалином, могут оказаться непригодны. Мы не
знаем примеров клинической диагностики инфекционных болезней при помощи данного метода.
Возможно, техника ЦПР in situ станет более популярной в будущем, но в настоящее время ее применение
ограничено экспериментальной работой.
Серологические методы.
Существует несколько методов серологической диагностики вирусных инфекций. Они будут
описаны ниже в этой главе.
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ.
Бактерии часто видны в окрашенных мазках, но обычно этого недостаточно для постановки
окончательного диагноза. Точно идентифицировать организм, основываясь только на его морфологии или
способе окраски, невозможно. Для определения большинства видов бактерий необходим посев на среды.
Это можно сделать самостоятельно, либо отправить образец в лабораторию. Обычно, анализ в лаборатории
предпочтительнее по следующим причинам:
 Существуют правила техники безопасности для персонала, выполняющего анализы, а также
правила утилизации культуральных материалов. В Великобритании работы с обычными
образцами требуется проводить в лабораториях второй катергории, а работы с такими
микроорганизмами, как Mycobacterium spp и Chlamydophila felis – в лабораториях третьей
категории, оборудованных кабинетом безопасности 1 класса. (см. МакКандлиш и Тэйлор,
1998).
 Для многих бактерий необходим термостат с температурой выше комнатной.
Культивирование при разных температурах может помочь при дифференциации различных
штаммов некоторых видов бактерий (например, Pseudomonas, Campylobacter и др.).
 Для культивирования разных микроорганизмов (например, Staphilococcus, Campylobacter)
необходимы различные селективные среды, подавляющие рост остальной микрофлоры. С
помощью селективных сред можно быстро идентифицировать некоторые бактерии
(например, Salmonella, Bordetella, Streptococcus). Кроме того, необходимы среды
обогащения для усиления роста некоторых требовательных микроорганизмов.
 Для того, чтобы правильно идентифицировать бактерии в культуре и провести тесты на
чувствительность, нужно обладать значительным опытом.
Очень важен способ отбора проб для бактериологического исследования: образец берут с
пораженных участков и отправляют в лабораторию с точным указанием места взятия пробы. Такая
информация необходима для выбора подходящей культуральной среды и определения чувствительности к
антибиотикам. Рекомендуется сделать мазок-отпечаток на стекле, непосредственно с пораженного места
или из смыва. Мазок можно окрасить по Граму и исследовать под микроскопом, это поможет выбрать
подходящую культуральную среду. Некоторые микроорганизмы, например, Campylobacter spp.,
Helicobacter spp., Brachyspire spp. и дрожжи можно идентифицировать в мазке, окрашенном по Граму, но
нельзя выделить либо из-за их требовательности к составу среды, либо из-за подавления посторонней
микрофлорой (например, протеем).
Непосредственное определение.
Микроскопия в темном поле.
Большинство бактерий не поддаются идентификации с помощью микроскопии; однако, некоторые
микроорганизмы, например, лептоспиры, присутствующие в моче, можно увидеть при микроскопии в
темном поле. К сожалению, это возможно только в течение 30 минут после выделения мочи, так как
изменение рН быстро убивает микроорганизм. Кроме того, для определения лептоспир данным методом
необходим некоторый опыт и подходящий микроскоп.
Гематологические и цитологические красители.

Бактерии можно окрашивать любыми красителями для крови и тканей. Чаще всего в лабораториях
используют краситель Романовского (то есть модификация красителей Райта, Май-Грюнвальда-Гимзы и
Лейшмана). Этот краситель окрашивает бактерии в темно-синий цвет и очень хорошо подходит для
определения внутриклеточных бактерий или паразитов на поверхности эритроцитов (например,
Haemobartonella felis) (см. рис. 5.8).
Некоторые практикующие врачи предпочитают использовать экспресс-красители, например, Diff-
Quick®. Однако, они окрашивают эукариотические клетки в более темный синий цвет, чем обычные
красители, поэтому нужно быть особенно внимательным при исследовании на внутриклеточные бактерии
или паразитов, обитающих в эритроцитах. При экспресс-окраске большой проблемой является осаждение
красителя. Образующийся при этом осадок можно легко принять за бактерии, особенно при недостаточном
опыте.
Окраска по Граму.
Это основной способ, использующийся в бактериологии. Основан на реакции основного пара-
розанилинового красителя (например, кристаллического фиолетового, метилового фиолетового или их
смеси, так называемого генцианвиолета) с йодом. Продуктом этой реакции является нерастворимое
соединение темно-красного цвета в клеточной стенке бактерий. Это вещество удаляется
обесцвечивающими растворителями (такими, как ацетон или спирт). Степень обесцвечивания зависит от
структуры и толщины клеточной стенки. Для демонстрации обесцвеченных микроорганизмов используют
более светлый докрашивающий краситель. Грамположительные микроорганизмы устойчивы к
обесцвечиванию и остаются темно-пурпурными. Эта устойчивость не постоянна, и при продолжительном
обесцвечивании краситель все же смывается. Грамотрицательные микроорганизмы, как и весь
цитологический препарат, окрашиваются в розовый цвет. В культурах и образцах, содержащих
грамположительные микроорганизмы, может содержаться какое-то количество грамотрицательных клеток,
особенно если образцы старые.
В литературе описано 4 различных схемы окраски по Граму. Ключевыми моментами являются
только порядок добавления реагентов, время обесцвечивания и тщательное удаление всех реагентов (рис.
1.6). Существуют готовые наборы для окраски по Граму, к которым должна прилагаться инструкция от
производителя.
Окраска по Цилю-Нильсену
Краситель Циля-Нильсена (ЦН) используется для определения кислотоустойчивых бактерий.
Способ основан на способности клеточных стенок некоторых видов бактерий, окрашенных анилиновыми
красителями (например, фуксином), сохранять окраску после обработки концентрированными кислотами.
Такие клеточные стенки трудно поддаются окрашиванию; для того, чтобы краситель мог проникнуть
внутрь, препарат обрабатывают фенолом в комбинации с нагреванием. Затем его докрашивают
метиленовым синим для контрастирования с красной окраской кислотоустойчивых бактерий (рис. 1.7).
Метод окраски по ЦН имеет большое значение для определения микобактерий и некоторых
штаммов Nocardia, которые трудно культивировать и которые потенциально зоонозны. Определение
кислотоустойчивых микроорганизмов в цитологических мазках всегда важно.
Методика.
1. Зафиксируйте мазок, проведя его несколько раз над пламенем
2. Залейте мазок 0,5% метиловым фиолетовым или 1% кристаллическим фиолетовым и оставьте
на 1 минуту
3. Смойте водой
4. Залейте мазок 1% йодным раствором люголя и оставьте на 1 минуту
6. Залейте 95% спиртом и осторожно покачайте, пока краска не перестанет смываться с мазка.
Это займет не менее 30 секунд. Если мазок очень толстый, можно добавить свежий спирт для
ускорения обесцвечивания.
7. Промойте стекло однократно водой
8. Покрасьте мазок 0,5% основным фуксином в течение 30 секунд, 0,1% нейтральным красным в
течение 2 минут, или 0,5% сафранином в течение 10 секунд.
Примечания.
 Для обесцвечивания можно использовать ацетон. Он действует быстрее, чем спирт (2
секунд бывает достаточно), но есть опасность слишком сильного обесцвечивания.
 Ацетон более опасен при попадании на кожу или на одежду.
Подписи к фото:
Грамположительные бактерии Грамотрицательные кокки
Рис. 1.6: окраска по Граму (с любезного разрешения д-ра Дэвида Тейлора)
Рис. 1.7: Окраска по Цилю-Нильсену. Фотография микобактерий туберкулеза, выделенных от
Методика.
1. Залейте мазок 1% карболовым фуксином
2. Подогрейте стекло над пламенем, пока не пойдет пар
3. Периодически нагревайте стекло в течение 5 минут, чтобы оно оставалось горячим
4. Не позволяйте красителю высохнуть. При необходимости добавьте еще
карболового фуксина
5. Смойте остатки красителя водой
6. Залейте стекло 20% серной кислотой и оставьте на 5 минут
8. Повторяйте обработку кислотой до тех пор, пока краситель не перестанет стекать
со стекла (на это потребуется не менее 10 минут)
9. Залейте стекло 95% спиртом и оставьте на 2 минуты
11. Покрасьте метиленовым синим Леффлера или 0,1% малахитовым зеленым в
течение 20 секунд.
 Некоторые растворы, использующиеся в данном методе, обладают
сильным коррозирующим действием. При работе используйте защитные
очки. Соблюдайте правила техники безопасности при работе в
лаборатории.
 При модифицированном способе окраски по Цилю-Нильсену на 6 ступени
используется 5% серная кислота.
Подпись к рисунку: Положительный результат окраски по Цилю-Нильсену
кошки. С любезного разрешения д-ра Дэвида Тейлора.
При подозрении на микобактериальную инфекцию на основании окраски по ЦН образец с хорошо

заметной предупредительной надписью необходимо отослать в соответствующую лабораторию.
Целесообразно перед этим позвонить в лабораторию.
Слабо-кислотоустойчивые микроорганизмы не обесцвечиваются 5% серной кислотой
(модифицированный метод ЦН), но обесцвечиваются 20%. К таким микроорганизмам относятся бруцеллы
и нокардии.
Гистопатология.
Микроорганизмы можно идентифицировать гистопатологическими методами, хотя ими
определяют только морфологию (например, палочки, кокки). В некоторых случаях возможна более точная
идентификация, например, лептоспир в биоптатах почек, геликобактерий в биоптатах желудка, или
кампилобактерий в биоптатах толстого кишечника.
Культивирование микроорганизмов.
Выделение микроорганизма – окончательный метод подтверждения его присутствия, подходящий
для большинства видов. Для этой цели подходят мазки, жидкости, ткани или фекалии. Многие
антикоагулянты, включая ЭДТА, гепарин и цитрат, обладают бактериостатическим или бактерицидным
действием на некоторые организмы; не следует допускать их попадания в жидкости или кровь для посева.
Подробный список подходящих сред, требования к температуре и культуральные свойства разнообразных
микроорганизмов, вызывающих инфекции у собак и кошек, представлен в публикации МакКандлиша и
Тейлора (1988). Точную идентификацию микроорганизмов лучше предоставить специалистам-
бактериологам.
При культивировании бактерий обычно проводят дополнительные тесты по определению
чувствительности к антибиотикам. Для этого используют диски, пропитанные разнообразными
антибиотиками; диски накладывают на поверхность засеянной среды в чашке Петри. Микроорганизмы
разделяются на «чувствительные» и «резистентные» в зависимости от роста вокруг дисков. Ограничения
этого метода и использование минимальных ингибирующих концентраций (МИК) в качестве
альтернативного метода оценки чувствительности бактерий обсуждаются в главе 2. Метод дисков плохо
подходит для оценки чувствительности медленно растущих микроорганизмов, например,
кампилобактерий, а также анаэробов, так как скорость диффузии препарата с диска намного превышает
темп роста бактерий. Когда один антибактериальный агент диффундирует в область другого, тест теряет
смысл.
Существуют тест-системы для культивирования микроорганизмов и определения их
чувствительности, подходящие для самостоятельного использования. Достоинство таких тест-систем – в
быстроте получения результата. Главный недостаток – в ограниченном количестве культуральных сред, и,
следовательно, возможности исследования только некоторых видов бактерий.
Самостоятельный посев предпочтителен при определении уреазо-положительных бактерий,
выделенных из биоптатов желудка.
Посевы крови
Посев крови, содержащей микроорганизмы – широко распространенная методика, для которой,
однако, требуются специальные жидкие среды и тщательный отбор проб. Большая часть антикоагулянтов
обладает бактериостатическим или бактерицидным действием на некоторые микроорганизмы, а
свернувшаяся кровь не годится для культивирования. Важно отметить, что культивирование нужно
начинать как можно скорее после забора крови. По этой причине перед отправкой в лабораторию образцы
высевают на жидкие среды. Это предотвращает гибель микроорганизмов при комнатной температуре.
Присутствие в крови антител, комплемента и антибактериальных агентов может привести к
ложноотрицательному результату. Попадание же в образец микроорганизмов с кожи во время забора крови
может дать ложноположительный результат.
Культивирование уреазо-положительных бактерий из биоптатов желудка

Некоторые бактерии, в том числе Helicobacter, образуют уреазу, расщепляющую мочевину на
аммиак и диоксид углерода. Об этой реакции можно судить по изменению цвета рН-индикатора,
входящего в состав среды. Если реакция происходит в культуре биоптата желудка, полученного
эндоскопически, это указывает на возможное присутствие геликобактерий. Изменение цвета обычно
происходит в течение 2 часов.
Цепная полимеразная реакция.

Технология ЦПР была описана ранее в этой главе (см. рис.1.4). Некоторые патогенные бактерии,
плохо растущие в культуре, идентифицируются методом ЦПР. Один из самых известных примеров –
Bartonella henselae, вызывающая бактериальный ангиоматоз («болезнь кошачьих царапин» у человека.
Метод ЦПР позволяет определить бартонеллы прямо в крови кошки, в то время как для роста культуры
требуется несколько недель. Эту технологию используют также для определения Chlamiydophila felis;
описаны методики определения сальмонелл и кампилобактерий.
Серологические методы.
Серологические методы определения бактерий будут описаны ниже в этой главе. Области их
применения ограничены. Пример серологического метода – роз-бенгал проба для определения Brucella
canis, применяющаяся в странах, где инфекция широко распространена.
МИКОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ
Непосредственное определение.
Флуоресценция в ультрафиолетовом свете
Некоторые дерматофиты флуоресцируют яблочно-зеленым цветом в ультрафиолетовом свете
определенной длины волны. Из всех грибов, обитающих в организме собак и кошек, флуоресцируют около
50–60% штаммов Microsporum canis; остальные не обладают такой способностью. Точная природа
флуоресцентного вещества неизвестна; возможно, это какой-то экскрет или измененный компонент
стержня волоса.
Многие практикующие врачи пользуются лампой Вуда для диагностики этих грибов у животных;
очень важно правильно выполнять процедуру, в особенности:
 Исследование проводить в темной комнате.
 Для получения света нужной длины волны лампа Вуда должна разогреться.
 Нельзя направлять свет в глаза человека или животного во избежание повреждения
сетчатки ультрафиолетовыми лучами.
Кроме того, нужно отличать флуоресценцию, вызванную дерматофитами, от голубоватой
автофлуоресценции кожных чешуек и корочек. Положительные результаты, полученные при осмотре с
помощью лампы Вуда, необходимо подтвердить микроскопией и культуральными методами.
Отрицательный результат не исключает дерматофитоза.
Микроскопия собранной шерсти

Микроскопия шерсти – эффективный метод диагностики дерматофитоза, особенно при
исследовании волосяного покрова участков, флуоресцирующих под лампой Вуда. Волосы помещают на
стекло с каплей 10%-ного гидроксида калия, накрывают покровным стеклом и оставляют на 30 минут. На
пораженных стержнях волос под микроскопом видны гифы или споры. Несмотря на быстроту и
специфичность метода, он не очень чувствителен, и во всех случаях подозрения на дерматофитоз нужно
делать посев.
Микроскопию окрашенных препаратов из соскобов с пораженных участков кожи применяют для
диагностики инфекций, вызванных Malassezia. Дрожжи имеют специфическую морфологию в форме
земляного ореха (см. главу 13).
Культивирование грибов
Культивируют грибы для подтверждения диагноза. Этот метод подходит для дерматофитов,
Malassezia, Candida albicans Aspergillis fumigatus. Посев можно сделать в собственной лаборатории. Для
этого потребуется следующее:
 Специальные термостаты: при неправильных условиях культивирования из-за колебаний
температуры можно получить атипичные результаты.
 Специальные культуральные среды: к сожалению, имеют ограниченный срок хранения.
 Опытный персонал: правильная идентификация грибных культур сложна, иногда требуется
исследование макроконидий и т.п.
Перед отправкой образца в лабораторию для посева необходимо убедиться, что в лаборатории
имеется нужное оборудование и персонал для работы с материалом. Волосы отбирают на границе
пораженных участков и помещаются в помеченный бумажный конверт, который затем упаковывают в
герметичный пластиковый контейнер. Не следует класть шерсть прямо в пластиковые емкости, так как
статическое электричество затрудняет исследование.
Некоторые грибы, включая дерматофиты, Candida и Aspergillis fumigatus, потенциально
инфекционны для человека, и работать с их культурами должен только опытный лабораторный персонал.
Среды для дерматофитов
Для культивирования дерматофитов можно использовать готовые наборы, содержащие среды с рН-
индикатором (рис. 1.8). Небольшое количество волос и чешуек, взятых с пораженных участков, помещают
на поверхность среды и накрывают пластиковой крышкой. Большинство наборов могут храниться и
использоваться при комнатной температуре. Чашки необходимо ежедневно исследовать на предмет
изменения цвета среды и роста грибов.
Дерматофиты образуют белые колонии, в отличие от сапрофитов, колонии которых коричневого,
зеленого или сероватого цвета. Рост дерматофитов приводит к изменению цвета среды с желтого на
красный перед появлением видимых признаков роста, или одновременно с ними (обычно через 2–12 дней).
При росте сапрофитов цвет среды изменяется только после появления признаков роста (обычно через 12
дней или более). Некоторые дерматофиты растут медленно; поэтому среды инкубируют в течение 21 дня, и
только при отсутствии роста по истечении этого срока их можно признать отрицательными. Microsporum
можно отличить от Trichophyton по морфологии колоний:
 Колонии Microsporum белые, крупные и рыхлые, похожие на куски ваты. Цвет нижней
поверхности колоний – от бледно-желтого до коричневатого.
 Колонии Trichophyton меньшего размера, цвет – от белого до кремового, с
порошкообразной структурой. Нижняя поверхность колоний светло- или темно-коричневая.
Рис. 1.8. Готовый набор для культивирования дерматофитов.
Даже если колонии имеют вид, характерный для патогенных грибов, необходимо подтвердить, что
микроорганизмы действительно являются дерматофитами. Обычно такие положительные культуры
отправляют опытному микологу для идентификации конидий. Для исследования колонии под
микроскопом нужно прижать к ней прозрачную ленту, наложить ее на стекло, окрашенное
лактофеноловым синим, и исследовать под микроскопом на наличие макроконидий.
Если макроконидии не выявлены, необходимо пересеять первичную культуру на агар Сабуро и
исследовать повторно.
 Макроконидии Microsporum canis многочисленные, веретенообразные, с толстыми
неровными стенками. Микроконидии образуются в меньшем количестве, они гладкие и
имеют круглую форму.
 Макроконидии Microsporum gypseum образуются в больших количествах, имеют
сигарообразную форму с закругленными концами. Микроконидии же шарообразной формы с
тонкими стенками.
 Макроконидии Trichophyton mentagrophytes обнаруживаются редко. Если они есть, то имеют
сигарообразную форму и тонкие стенки. Микроконидии круглые и собраны в грозди на
кониденосцах.
ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ
Эктопаразиты
Таких паразитов, как вши (Trichodectes canis, Linognathus setosus, Felicola subrostratus),
краснотелковые клещи (Neotrombicula autumnalis) и блохи (Ctenocephalis spp), можно увидеть на шерсти
невооруженным глазом. Чувствительность непосредственного осмотра зависит от цвета и густоты шерсти,
остроты зрения и времени, затраченного на исследование животного. Очень удобно пользоваться лупой.
Взрослые вши легко заметны, но чаще обнаруживаются их яйца. Яйца Trichodectes (кусающих
вшей) желтого цвета, Linognatus (сосущих вшей) – голубоватого. Felicola (кусающая вошь) – единственный
вид, обнаруженный у кошек. Яйца клещей N.animatis ярко-оранжевые, обычно обнаруживаются в виде
гроздей, имеют размер булавочной головки.
Отпечатки на липкой ленте можно использовать как вспомогательный метод идентификации
мелких паразитов, например, Cheyletiella. Так как большую часть времени блохи проводят вне животного,
выявление их экскрементов является более чувствительным методом, чем осмотр с целью обнаружения
взрослых особей.
Чистка шерсти щеткой

Чистка щеткой удобна для выявления экскрементов блох и Cheyletiella spp. Техника описана в главе
13. Новой или простерилизованной зубной щеткой можно отбирать образцы для культуры дерматофитов.
Для посева щетку прижимают к поверхности подходящей среды.
Мазки из фолликулов/пустул
Мазки из фолликулов/пустул используют для выявления Demodex spp, обитающих в волосяных
фолликулах. Техника описана в главе 13. Гидроксид калия может повредить клещей Demodex, поэтому его
использовать не рекомендуется.
Мазки из ушей.
Берут для определения ушных клещей Otodectes cynotis. Ушные выделения осторожно собирают
ватным тампоном, помещают на стекло, смешивают с равным объемом 5–10%-ного раствора гидроксида
калия и немедленно исследуют под микроскопом. Если результат первого исследования отрицательный,
выделения нужно исследовать повторно после 20–30-минутной очистки. Клещи крупные, с длинными
конечностями.
Соскобы с кожи.
Техника взятия соскоба с кожи описана в главе 13. Соскобы с кожи необходимо исследовать в
течение нескольких часов, очень желательно делать это в лаборатории, оборудованной для подобных
анализов. При отправке образцов для исследования их следует законсервировать минеральным маслом,
либо добавить каплю воды. В растворе гидроксида калия образцы хранить нельзя, так как это приводит к
обезвоживанию клещей.
Гистопатология.
При исследовании биоптатов кожи иногда обнаруживаются клещей Demodex, и, изредка, Sarcoptes
и Notoedres, хотя этот метод слабо пригоден для диагностики данной инвазии.
Исследования кала
При сильной степени инвазии животные могут проглатывать клещей, и тогда их обнаруживают в
кале.
Серология
Серологические методы будут описаны ниже в этой главе. Основное применение находят тест-
системы для определения антигена слюны блох.
Эндопаразиты.
Мазки из фекалий
В мазках из фекалий определяют подвижных паразитов. Обычно их приготовляют из жидких или
слизистых образцов. Фекалии должны быть как можно более свежими. Методика описана на рисунке 1.9.
Методика
1. Нанесите каплю солевого раствора на чистое предметное стекло.
2. Возьмите пробу кала из прямой кишки пальцем в резиновой перчатке (или дотроньтесь
пальцем до уже отобранного свежего образца).
3. Нанесите очень тонким слоем на чистое стекло и накройте покровным стеклом.
4. Просмотрите под микроскопом; освещение не должно быть очень ярким, так как
большинство неокрашенных паразитов прозрачные.
Примечания
Высушенные мазки можно окрасить красителями Циля-Нильсена, карболовым фуксином или
Diff-Quick®.
Рис. 1.9: мазки из фекалий
К сожалению, отрицательные результаты неубедительны; если при исследовании всех образцов

получены отрицательные результаты, необходимо повторное исследование другими методами, например,
флотации в растворе сульфата цинка или центрифугирования. Идентификация яиц паразитов несложна с
помощью соответствующих справочников (см. главу 8). Определение личинок паразитов гораздо сложнее,
лучше проконсультироваться с опытным паразитологом или воспользоваться авторитетным справочником.
Cryptosporidium parvum можно определить с помощью модифицированного метода окраски по
Цилю-Нильсену (см. выше); а также флуоресцентным методом (рис. 1.10).
Методика
1.Высушите мазки из фекалий на воздухе и зафиксируйте этанолом.
2.Поместите в формалин и инкубируйте 20 минут при комнатной температуре.
3.Покрасьте фенол/аурамином (0,03 г аурамина, 3,0 г фенола, дистиллированная вода до
100 мл) в течение 10 минут.
4.Смойте водой.
5.Обесцветьте 1%-ным раствором соляной кислоты в 70%-ном денатурате в течение 5
минут.
6.Покрасьте 0,01%-ным синим Эванса в течение 30 секунд.
Микроскопируйте под ультрафиолетовым светом для обнаружения флуоресцирующих
криптоспоридий.
Рис. 1.10: Флуоресцентная окраска мазков фекалий для обнаружения Cryptosporidium parvum.
Флотационные методы.
Сульфат цинка: Многих кишечных паразитов, например, Giardia spp., Ancylostoma spp., Toxocars
spp., Toxascaris leonine, toxoplasma gondii, Trichirus vulpis, удобнее идентифицировать по их яйцам или
ооцистам в фекалиях. Кроме того, личинки некоторых паразитов дыхательного тракта животные могут
откашливать и проглатывать, и, следовательно, они обнаружатся в кале, например, Aelurostrongylus
adstrusus, Angiostrongylus vasorum.
Флотационные методы основаны на использовании жидкости с плотностью большей, чем у яиц и
личинок. Следовательно, старые растворы, в которых начинают выпадать кристаллы, бесполезны и их надо
утилизировать.
Для выполнения такого анализа свежий образец фекалий хорошо перемешивают с равным объемом
раствора сульфата цинка (33 г ZnSO4•7 H2O)(приблизительно 6 или 7 чайных ложек) на 100 мл воды) и
ставят отстояться на 15 минут. Относительная плотность раствора должна быть в пределах 1,20–1,25. Яйца
и личинки всплывают на поверхность, и их можно собрать на покровное стекло, прикоснувшись им к
поверхности воды, а затем поместить на предметное стекло (рис. 1.11).
Рис. 1.1..: Личинки Angistrongylus vasorum во флотационном растворе сульфата цинка.
Сахар: Более доступен, чем сульфат цинка, но цисты Giardia и яйца некоторых круглых червей в
его растворе деформируются. Методика описана выше. Раствор сахара определенной плотности 1,20–1,25
приготовляют, растворяя 45 г сахарозы в 35 мл воды (при необходимости раствор осторожно
подогревают). В качестве консервантов можно добавить 1 мл формалина или 0,1 г фенола.
Центрифугирование.
Центрифугирование можно использовать для концентрации яиц кишечных гельминтов, личинок,
цист простейших и ооцист кокцидий. Фекалии смешивают с 5–10%-ным раствором формалина и
уксусноэтилового эфира и центрифугируют 10 минут при 500 g. Паразиты опускаются на дно
центрифужной пробирки. Органические остатки фекалий и жир концентрируются на границе между
формалином и уксусноэтиловым эфиром. Эти растворы опасны и их центрифугируют только в герметично
закрытых пробирках. Центрифуги с фиксированным углом использовать нельзя.
Седиментация личинок легочных гельминтов (метод Баерманна)

В большинстве случаев личинки легочных гельминтов определяют методом седиментации, а не
флотации. Фекалии помещают в сито с размером отверстий 0,25 мм, которое кладут на воронку с
резиновой трубкой, пережатой зажимом. Затем добавляют воду до тех пор, пока она не покроет фекалии.
Установку оставляют на ночь при комнатной температуре. На следующее утро зажим снимают и первые
капли воды исследуют под микроскопом при небольшом увеличении. Для этого метода не нужны
специальные растворы, но требуется соответствующее лабораторное оборудование.
Упрощенный вариант этого метода: 10 г фекалий помещают в сито, которое кладут в большой
стакан, наполненный умеренно теплой водой, и оставляют на 6 часов или более. Личинки мигрируют из
холодных фекалий через сито и после остывания воды оседают на дне стакана. После удаления большей
части надосадочной жидкости осадок исследуют под микроскопом при небольшом увеличении.
Эндоскопия и личинки в бронхах

Так как яйца, личинки и взрослые особи некоторых паразитов, перечисленных ниже, иногда
обнаруживаются в фекалиях, перед эндоскопией рекомендуется исследовать их. Анализ фекалий дешевле,
менее травматичен и не требует специального оборудования (см. выше).
При эндоскопическом исследовании можно иногда увидеть серовато-белые узелки, образуемые
Oslerus osleri. Большинство паразитов дыхательного тракта, например, Aelurostrongylus abstructus,
Angiostrongylus vasorum и O.osleri, обнаруживают в смывах из бронхов. Метод описан в главе 6.
Некоторых паразитов желудочно-кишечного тракта, например, Toxocara canis, можно увидеть при
эндоскопии. Spirocerca lupi образует узелки в пищеводе, но этот паразит не эндемичен в Великобритании и
обрнаруживается только у ввезенных собак.
Мазки крови.
Мазки крови исследуют с целью выявления некоторых кровепаразитов. Мазок должен быть
приготовлен правильно и окрашен высококачественным красителем (рис. 1.12). Его обязательно делать
сразу после взятия крови у животного. Антикоагулянты приводят к артефактам, затрудняя интерпретацию
результатов, особенно при выявлении паразитов на поверхности эритроцита, например, Haemobartonella
felis, которые могут удаляться с поверхности красных кровяных клеток. Для окраски подходят любые
красители типа Романовского (Гимзы, Лейшмана). Данным методом можно определить такие организмы,
как Haemobartonella felis, H. canis, babesia canis, Leishmania infantum, Ehrlichia canis и Dirofilaria immitus.
Некоторые из этих заболеваний не эндемичны для Великобритании, но могут иногда обнаруживаться у
ввезенных собак.
Haemobartonella felis можно также определять при окраске некоторыми ядерными красителями.
Чаще всего используют акридиновый оранжевый (рис. 1.13).
Методики концентрации микрофилярий

Существует несколько методов концентрирования кровепаразитов. Наиболее широко используется
модифицированный метод Кнотта (рис. 1.14).
Кроме того, есть готовые тест-системы для концентрирования методом фильтрации.
Отрицательные результаты, полученные данным методом, недостоверны; примерно у 25% собак,
зараженных сердечными гельминтами, микрофилярии в крови отсутствуют.
Оборудование: шприц 2 мл, игла № 23, несколько предметных стекол, одно стекло для
размазывания (его можно изготовить, отрезав уголок обычного стекла стеклорезом), краситель
типа Романовского
Приготовление красителя:
Май-Грюнвальда
Поместите 0,3 г порошка в 200–250 мл колбу. Добавьте 100 мл метанола и подогрейте до
50 оС. Остудите до комнатной температуры, встряхивайте несколько раз в течение дня. После
отстаивания в течение 24 часов профильтруйте.
Гимзы
Поместите навеску порошка массой 1 г в колбу. Добавьте 100 мл метанола и подогрейте
до 50 оС. Сохраняйте такую температуру в течение 15 минут при периодическом встряхивании,
зачем профильтруйте. При отстаивании качество красителя улучшается.
Буферный раствор Соренсена
А. 9,1 г/л КН2РО4
В. 9,5 г/л Na2HРО4 или 11,9 г/л Na2HРО4 · 2 Н2О
Для получения раствора с рН 6,8 смешайте 50,8 мл раствора А с 49,2 мл раствора В.
Методика.
1. Возьмите 1 мл крови иглой № 23
2. Нанесите небольшую каплю крови на концы обоих стекол
3. Возьмите третье стекло и прикоснитесь им к капле крови на предметном стекле; угол
наклона стекла должен быть около 45о.
4. Быстро размажьте каплю по всей длине стекла. Мазок должен быть гладким. Повторите
то же самое со вторым стеклом.
5. Высушите мазки на воздухе
6. Зафиксируйте метанолом в течение 10–20 минут
7. Поместите в емкость с красителем Май-Грюнвальда, разведенного равным объемом
буфера; краситель разводят непосредственно перед окрашиванием.
8. Через 15 минут, не смывая, переместите мазок в емкость с красителем Гимзы,
разведенным девятикратным объемом буфера; краситель разводят непосредственно
перед окрашиванием.
9. Спустя 10–15 минут перенесите стекло в стакан с буфером и промойте 3–4 раза, после
каждой промывки наливая свежую воду.
10. Оставьте в буфере на 2–5 минут
11. Поставьте стекла вертикально для просушки
12. Можно использовать экспресс-красители, например, Diff-Quick®, в соответствии с
инструкцией производителя, но качество будет хуже.
 Капля должна быть небольшой; тонкие мазки лучше толстых
 Игла небольшого диаметра позволяет лучше контролировать размер капли, при
осторожном взятии крови повреждения красных кровяных клеток можно свести к
минимуму.
 Осадок красителя легко принять за паразитов на поверхности эритроцита, например, за
Haemobartonella felis или H.canis.
Рис. 1.12: Приготовление мазка крови. На фото показана Haemobartonella canis в мазке крови
Методика.
1. Смешайте 100 мкл цельной крови с 100 мл акридинового оранжевого,
свежеразведенного в боратном буфере Соренсона с рН 9,0, в соотношении
1:20000.
2. Нанесите каплю смеси на предметное стекло, очищенное спиртом, и накройте
покровным стеклом.
3. Оставьте на 5 минут во влажной атмосфере и просмотрите под микроскопом в
ультрафиолетовом свете. До микроскопии держите стекла в темном месте.
ИЛИ
1. Залейте стекло, высушенное на воздухе, раствором акридинового
оранжевого и оставьте на 5 минут.
2. Просмотрите под микроскопом в ультрафиолетовом свете.
Небольшие флуоресцирующие включения на поверхности эритроцитов – признак
присутствия гемобартонелл.
Рис. 1.13: Окраска акридиновым оранжевым для определения Haemobartonella felis. Пример
показан на рисунке 5.8а.
Методика
1. Смешайте 1 мл цельной крови с 10 мл 2%-ного раствора формальдегида и оставьте на 15
минут.
2. Отцентрифугируйте смесь 5 минут при скорости 1500 об/мин.
3. Удалите надосадочную жидкость и суспендируйте остаток в капле метиленового синего,
разведенного 1:1000.
4. Нанесите небольшую каплю смеси на предметное стекло и накройте покровным
стеклом.
Рис. 1.14: Модифицированный способ Кнотта. На фотографии показана микрофилярия
Dirofilaria immitis. Этот паразит слабо отличается от безвредной миркрофилярии
Dipetalonema reconditum, для постановки диагноза может потребоваться консультация
эксперта. (с любезного разрешения д-ра Сюзан Шоу).
СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ.
Диагностика инфекционных болезней методом определения специфических антител стала
общепринятой практикой, особенно если постановка диагноза другими способами затруднительна или дорогая.
Серология широко используется при популяционных исследованиях, в некоторых программах скрининга и при
тестировании вакцин.
Серологические методы имеют некоторые недостатки:
 Присутствие антител не всегда является показателем активной инфекции, а может отражать
ранее перенесенные заболевания
 Антитела могут вырабатываться на непатогенный организм, родственный патогенному
 Выработка антител занимает некоторое время, следовательно, серологические тесты менее
эффективны при острых инфекционных заболеваниях
 При серологическом исследовании парных образцов концентрация антител может достичь
максимума к моменту появления клинических признаков
 Титры антител могут оставаться низкими у животных с ослабленным иммунитетом.
Большинство этих факторов создают впечатление, что значимость серологической конверсии

превышает значимость клинических проявлений. Клиницисты никогда не должны путать серологическую
конверсию с демонстрацией возбудителя.
Важно, чтобы в серологических методах использовались белки-мишени, характерные для исследуемого
заболевания. Например, при диагностике возбудителя заболевания сельскохозяйственных животных и
человека, но имеющего также штаммы, патогенные для мелких животных, можно с большой вероятностью
получить ложноотрицательный результат. В равной степени, присутствие материнских антител может
привести к ложноположительному результату. К тому же нужно помнить, что изменение условий теста может
дать ложноположительный или ложноотрицательный результат независимо от наличия или отсутствия
антител. Это может произойти либо из-за неспособности антител связывать антиген, либо в результате
неспецифической реакции антител с антигеном.
Парные образцы.
За классический показатель активной инфекции в организме принимается 4-кратное увеличение титра
антител. К сожалению, отобрать пробу в начальный период болезни часто бывает невозможно. И даже если это
возможно, некоторые заболевания, например, парвовирусный энтерит, характеризуются настолько быстрым
подъемом уровня антител, что титр будет максимальным уже в первой пробе. Кроме того, при заражении
вирусами, подавляющими иммунную систему (например, вирус чумы плотоядных), увеличения титра может не
быть вовсе. Вероятно, определение специфических IgM в будущем заменит метод парных образцов.
Классы антител.
На данный момент существует несколько тест-систем, определяющих только IgM, образующиеся в
ответ на определенные патогены, например, Тoxoplasma gondii. Обычно IgM не остаются после выздоровления,
и, следовательно, их высокий титр является показателем недавнего заражения. Длительность персистирования
IgM может варьировать в зависимости от индивидуальных особенностей животного и природы антигена.
Например, у кошек время персистирования антител класса IgM к Тoxoplasma gondii обычно составляет около 6
недель, но иногда может длиться до 6 месяцев. Определение титра IgM может вызывать затруднения;
проблемой являются перекрестные реакции с IgG.
Определение вируснейтрализующих антител

Для определения вируснейтрализующих антител образец сыворотки инкубируют с вирусом
непродолжительное время, а затем в систему вводят восприимчивые клетки, которые начинают расти. Если
вирус нейтрализован, признаки заражения не появятся. Определение вируснейтрализующей способности
сыворотки является одним из наиболее прямых методов, подтверждающих присутствие вирусных антител.
Антитела, определяющиеся данным методом, очень важны, так как свидетельствуют об иммунности
животного к вирусу (кроме некоторых вирусов, например, коронавируса кошек или вируса иммунодефицита
кошек). Главный недостаток метода – в необходимости работы с живыми вирусами и культурами клеток.
Анализ обычно требует специального оборудования, и может занимать несколько дней. При многих вирусных
инфекциях титры антител, определенные другими методами, например, иммуноферментным анализом,
коррелируют с титрами, полученными при определении вируснейтрализующих антител, таким образом,
последний представляет только академический интерес. Например, результаты измерения титров антител к
парвовирусу методом гемагглютинации коррелируют с результатами, полученными при определении
вируснейтрализующих антител. Исключение – определение титра антител к вирусу лейкоза кошек, результаты
которого не коррелируют с результатами, полученными другими методами.
Иммунодиффузия в агаровом геле

Иммунодиффузия в агаровом геле – один из простейших серологических методов. Он основан на
пассивной диффузии антигена и антитела навстречу друг другу. Область формирования иммунного комплекса
проявляется в виде белой полоски в геле. Для успешного выполнения теста необходимы очень высокие
концентрации антител и антигенов, поэтому данный метод применяется только в редких случаях.
Единственный пример – серологическое определение Aspergillis fumigatus.
Задержка гемагглютинации
Метод задержки гемагглютинации (ЗГА) является модификацией метода гемагглютинации (см. ранее)
и используется в основном для определения титров антител к парвовирусам. Тест выполняется подобно
гемагглютинации. Образец сыворотки смешивается с известным количеством вируса и оценивается
уменьшение агглютинирующей способности. Титр можно вычислить методом разведения образцов сыворотки.
Принцип ЗГА показан на рисунке 1.15.
1. Эритроциты
2. Вирус
3. Антитело
4. Сыворотка в разведении 1:128
5. Сыворотка в разведении 1:512
Рис. 1.15: Метод задержки гемагглютаниции. В нормальных условиях вирус вызывает агглютинацию
эритроцитов. Присутствие антител в достаточном количестве препятствует этому процессу. Образцы в
рядах, отмеченных стрелками, содержат антитела (положительные). По мере разведения сыворотки
концентрация антител уменьшается и, наконец, становится слишком низкой для того, чтобы подавить
агглютинацию. Регистрируют титр, при котором агглютинация возникает снова. Это фото является
репродукцией из Руководства по клинической патологии мелких животных под редакцией Дэвидсона, Элса и
Лумсдена (1998), опубликованного BSAVA.
Латексная агглютинация
Метод латексной агглютинации аналогичен методу гемагглютинации, но красные кровяные клетки
заменены латексными шариками, покрытыми слоем антигена. Тест относительно малочувствителен,
обнаруживаются только антитела в достаточно больших титрах. Этот метод часто используется для
определения Toxoplasma gondii и Aspergillus fumigatus.
Иммунофлуоресцентный анализ
В прямом методе иммунофлуоресценции (ИФА) используются антитела, маркированные
флуоресцентным веществом. Антитела связываются с белками-мишенями на поверхности клеток и
флуоресцируют при облучении ультрафиолетовым светом. Перед исследованием под микроскопом препарат
промывают для удаления несвязанных антител. Для выявления зараженных клеток в толще ткани этот метод
не подходит.
Непрямой метод иммунофлуоресценции используется для выявления антител в образце сыворотки
с помощью анти-иммуноглобулина, маркированного флуоресцентным веществом. В качестве мишеней для
антител используются клетки, зараженные в лаборатории. Принцип метода показан на рисунке 1.16.
Для обоих методов требуются темные комнаты, микроскопы с источником ультрафиолетового
света и культуры клеток.
Флуоресценция зараженных клеток при отсутствии флуоресценции незараженных указывает на
положительный результат. Обычной проблемой ИФА является неспецифическая флуоресценция, и для
ослабления этого эффекта обычно используют смесь зараженных и незараженных клеток. Если
флуоресцируют все клетки, хотя заражены только некоторые, это проявление неспецифической реакции.
Флуоресценция со временем уменьшается и при облучении ультрафиолетовым светом. Следовательно,
повторное исследование образца не допускается и тест необходимо повторить. От опытного специалиста
требуется отличать действительную флуоресценцию от неспецифической.
Рис. 1.16: непрямой метод иммунофлуоресценции. Из исследуемой сыворотки приготовляют
1. Клетки в культуре
2. Половина клеток в культуре заражается вирусом
3. Клетки, зараженные вирусом
4. Клетки инкубируются с исследуемой сывороткой. Антитела к вирусу связываются с
клетками
5. Антитело в образце
6. Клетки затем инкубируются с анти-иммуноглобудлином, связанным с флуоресцином
7. Анти-иммуноглобулин, меченый флуоресцином
Подписи к фото на рисунке:

Положительный результат – флуоресцируют только зараженные клетки
Неспецифический результат – флуоресцируют все клетки
разведения 1:4, 1:8, 1:16 и т.д.; последнее разведение, при котором наблюдается флуоресценция,
соответствует титру антител животного. Незараженные клетки служат внутренним отрицательным
контролем для каждого разведения сыворотки. Если флуоресцируют все клетки, то реакция
неспецифическая и необходимо дополнительное исследование, например, иммуноблоттинг. Фото с
примером неспецифической флуоресценции любезно предоставлено доктором Мэттом Голдером.
1. Вирус (например, вирус иммунодефицита кошек)
2. Разрушенный вирус
3. Вестерн-блот
Рис. 1.17. Вестерн-блоттинг. Вирус очищают, разрушают и разделяют электрофорезом в

полиакриламидном геле. В данном примере показан вирус иммунодефицита кошек. Вирусные белки затем
переносятся на нитроцеллюлозную мембрану, и туда же наносятся антитела. Связанные антитела можно
увидеть после окраски специальным красителем.Фото с результатами блоттинга публикуется с любезного
разрешения д-ра Маргарет Хойс.
Иммуноблоттинг
Методом иммуноблоттинга (также известного как вестерн-блоттинг) можно не только
идентифицировать связанные с вирусом антитела, но также определить, какие именно белки ими узнаются.
Принцип метода показан на рис. 1.17.
Вирусные или бактериальные белки с целью получения длинных аминокислотных цепей без
структур высшего порядка обычно денатурируют сильными детергентами. Эти цепи разделяют
электрофорезом в полиакриламидном геле. После разделения белки переносят на нитроцеллюлозную или
нейлоновую мембрану, которую затем погружают в раствор антител. Связывание антител с вирусными
белками определяют с помощью второго иммуноглобулина, меченого ферментом.
Иммуноблоттинг – длительный и дорогостоящий метод, который редко применяют для
диагностики, только в случае сомнительных результатов других иммунологических тестов. Однако, этот
метод считается определяющим для некоторых инфекций, например, иммунодефицита кошек.
А) Истинно положительный результат

Б) Вторичное антитело, связанное с цветообразующим соединением
В) Первичное антитело
Г) Связывающее антитело – «ловушка»
Д) Отрицательный
Е) Слабо положительный
Ж) Определенно положительный
Рис. 1.18. Твердофазный иммуноферментный анализ. В данном примере определяется белок р27
вируса лейкоза кошек. Фотография результатов теста любезно предоставлена профессором Освальдом
Джареттом.
Твердофазный иммуноферментный анализ
Твердофазный иммуноферментный анализ – один из самых многофункциональных серологических
методов диагностики инфекционных заболеваний, который применяют для определения с равной
эффективностью как антигенов, так и антител. Принцип метода показан на рис. 1.18. Он основан на
связывании антигена антителами, иммобилизованными на поверхности пластиковой лунки. Связавшийся
антиген затем определяют с помощью второго антитела. Комплекс антитело-антиген-антитело затем
определяют с помощью антииммуноглобулина, меченого ферментом. Существует множество вариантов этой
схемы.
Главное преимущество метода – усиление, так как каждое антитело с ферментной меткой способно
реагировать со многими молекулами субстрата с образованием окрашенного продукта. Это дешевый и
надежный метод, который может найти разнообразное применение. Главный недостаток твердофазного
иммуноферментного анализа – в том, что реакции происходят в жидкой фазе, и, следовательно, требуется
аккуратно отмеривать растворы. Перекрестная контаминация между лунками может иметь катастрофические
последствия. По этим причинам твердофазный иммуноферментный анализ выполняется только в
специализированных лабораториях опытными специалистами. Созданы тест-системы для практического
использования (так называемые CITE тесты). В большинстве случаев твердая лунка заменена специальной
мембраной. Так как реакция происходит в жидкой фазе, важно следить за тем, чтобы мембрана не высыхала.
Иммуноиммиграционный экспресс-анализ
Иммуноиммиграционный экспресс-анализ (рис. 1.19) имеет много общего с твердофазным
иммуноферментным анализом и CITE. Доказано, что этот метод подходит для использования на практике; в
настоящее время он очень популярен для диагностики многих вирусных инфекций или для определения
серологической конверсии, вызванной возбудителем. Метод основан на связывании частиц коллоидного
золота или латекса, покрытых антителами, с вирусными белками или сывороточными антителами (рис. 1.19).
Комплекс диффундирует вдоль мембраны, пока не достигнет полосы специфичных антител к определяемому
белку. Комплекс коллоид-белок-антитело образует агрегаты вдоль этой линии, что приводит к изменению
цвета полосы. Имеется также контрольная полоса, показывающая, что тест проведен правильно и комплексы
коллоид-белок-антитело диффундировали достаточно далеко (рис. 1.19). Если контрольная полоса не
появилась, тест недействителен. В таком случае образец нужно послать в лабораторию для дальнейшего
исследования.
Рис. 1.19: пример иммуноиммиграционного экспресс-теста
А) Кровь или плазма, содержащая антиген
Б) Тестовая полоска
В) Контрольная полоска
Г) Мембрана
Д) После нанесения крови на фильтр частицы коллоидного золота, импрегнированные
антителами, связываются с антигеном и мигрируют вдоль мембраны.
Е) Антитела к определяемому антигену
Ж) Антитела к коллоидному золоту
З) Кровь или плазма
Фильтр
И) При положительной реакции появляется видимая полоса преципитата антител.
К) Результатом контрольной реакции является видимая полоса преципитата.
Рис. 1.20: Принцип иммуноиммиграционного экспресс-метода
ЛИТЕРАТУРА И ДАЛЬНЕЙШЕЕ ЧТЕНИЕ
Глава 2
Антимикробная и антипаразитарная терапия

Джонатан Эллиот
ПЛАН.
Введение
Механизм действия
Избирательная токсичность
Гибель микроорганизмов или торможение их роста
Синергические и антагонистические реакции
Резистентность
Антибактериальные препараты
Спектр действия
Определение чувствительности микроорганизмов
Сочетания препаратов
Фармакокинетика
Метод введения и скорость всасывания
Распределение в области инфекции
Выведение из организма
Правила дозирования
Ингибиторы действия антибактериальных препаратов
Побочное действие
Устранение побочных эффектов:
Обсуждение фармакодинамики
Отбор в сторону устойчивости в бактериальной популяции
Антивирусные препараты
Ацикловир
Трифлуридин
Препараты против ретровирусов
Цидовудин
Другие препараты против ретровирусов
Антигрибковые препараты
Терапевтическая классификация антигрибковых препаратов
Антигрибковые препараты при систематическом применении
Антипаразитарные препараты
Эндопаразитоциды
Спектр действия и фармакокинетика
Токсичность
Эктопаразитоциды
Нежелательные эффекты
Антипротозойные препараты
_________________________________________________________________________________
ВВЕДЕНИЕ.
Антимикробные и антипаразитарные препараты настолько широко используются для лечения мелких
домашних животных, что кажется, их можно применять бесконтрольно. Логический подход к выбору этих
важных препаратов необходим по двум причинам:
 Большое разнообразие в продаже антимикробных и антипаразитарных препаратов для
лечения мелких животных затрудняет выбор
 Назначение препаратов ветеринарными врачами необходимо тщательно контролировать,
иначе возможно развитие резистентности к антибиотикам у возбудителей заболеваний
человека.
Подходящий препарат подбирают с учетом условий, которые можно разделить на три группы:
 Патоген
- Вызваны ли клинические проявления микроорганизмом?
- Какие патогены могут вызвать процесс?
- Какова чувствительность патогена к антибиотикам?
 Хозяин
- Каковы естественные защитные силы организма хозяина против патогена?
- Какие барьеры в организме хозяина могут помешать препарату достичь патогена?
- Какова будет реакция на препарат со стороны ослабленного организма хозяина?
 Препарат
- Каково действие препарата на патоген?
- Какая доза потребуется, и каким курсом нужно давать препарат?
- Каково побочное действие препарата на организм хозяина?
Отношения между хозяином, патогеном и препаратом можно изобразить в виде «терапевтического
треугольника» (рис. 2.1.)
А) организм-хозяин
Б) препарат
В) патоген
Г) фармакокинетика, токсичность
Е) фармакокинетика, спектр действия
Д) иммунитет, факторы вирулентности
Рис. 2.1: терапевтический треугольник
Механизм действия
Понимание механизма действия антимикробных и антипаразитарных препаратов помогает объяснить
их важные клинические свойства. Механизмы действия основных групп этих препаратов представлены на
рисунках 2.2–2.4. Зная механизм действия препарата, можно прогнозировать:
 Степень избирательной токсичности, достигаемая при его применении
 Действие на патоген (-«цидное» или –«статическое»)
 Будет ли препарат взаимодействовать с другими как синергетик, антагонист, или дополнять
их действие
 Развивается ли резистентность
Избирательная токсичность.
Избирательная токсичность является целью антимикробной и антипаразитарной терапии и основана
на использовании различий между микроорганизмом и организмом млекопитающего во время лечения.
Препарат обладает полной избирательной токсичностью, если при концентрации в тканях хозяина он
повреждает патоген, но оставляет незатронутыми клетки организма. Чем меньше физиологических связей
между возбудителями и организмом хозяина, тем труднее достичь полной избирательности. Например,
вирусы используют многие ферменты хозяина для собственной репликации, и, следовательно, найти способ
остановить их репликацию без повреждения клеток хозяина очень сложно.
Гибель микроорганизмов и торможение роста

Зная механизм действия препарата, можно сказать, убьет ли он микроорганизм или паразита
(-цидное действие), или просто затормозит их рост (-статическое действие). Например, бета-
лактамные антибиотики разрушают бактериальные клеточные стенки, и, следовательно,
бактерицидны. В отличие от этого, многие антибактериальные препараты замедляют биосинтез
белка у бактерий, что скорее останавливает рост клеток, чем убивает микроорганизмы.
Исключением из последней группы являются аминогликозиды, нарушающие процесс считывания
кода мРНК, что приводит к синтезу дефектных белков и гибели микробной клетки.
Группа препаратов Примеры Механизм действия Действие на
микроорганизмы
Пенициллины Ампициллин Подавляют синтез клеточной стенки Бактерицидное
Цефалоспорины Цефалексин или активируют ферменты,
Гликопептиды Ванкомицин разрушающие ее
Полимиксины Полимиксин В Изменяют проницаемость клеточной Бактерицидное
мембраны, что приводит к потере (фунгицидное)
внутриклеточных компонентов
Ацетамиды Хлорамфеникол Связываются с 30S субъединицей Бактериостати-
Макролиды Тилозин рибосом, что приводит к обратимому ческое
Линкозамиды Циндамицин ингибированию биосинтеза белка
Фусидовая кислота
Аминогликозиды Стрептомицин Связываются с 30S-субъединицей Бактерицидное
Аминоциклитолы Спектиномицин рибосом, нарушая считывание кода (аминогликозиды)
Тетрациклины Доксициклин или ингибируя стадию инициации или бактериоста-
биосинтеза белка тическое
Фторхинолоны Энрофлоксацин Ингибируют ферменты, Бактерицидное
Рифамицины Рифампицин участвующие в синтезе ДНК, (для всех групп)
Нитроимидазолы Метронидазол например, ДНК-гиразу и ДНК-
зависимую РНК-полимеразу, либо
разрушают матрицу ДНК
Сульфонамиды Сульфадиазин Ингибируют синтез нуклеиновых По отдельности –
Диаминопиримидины Триметоприм кислот бактериостати-
(ингибиторы ческое, в
дигидрофолатредук- комбинации –
тазы) бактерицидное
Рис. 2.2: механизмы действия антимикробных препаратов.
Циндамицин может обладать бактерицидным действием на облигатных анаэробов
Группа препаратов Примеры Механизм действия Фунгициды или
фунгистатики
Полиены Амфотерцин В Связываются с эргостеролом и фунгициды
Нантамицин разрушают плазматическую
Нистатин мембрану, делая ее проницаемой
Азолы Клотримазол Ингибируют цитохромы Р450, фунгистатики
Миконазол участвующие в синтезе эргостерола
Энилконазол
Кетоконазол
Флуконазол
Итраконазол
Гризеофульвин - Связывается с микротрубочками фунгистатики
грибных клеток и разрушают
митотическое веретено
Флуцитозин - Деаминируется до 5`-фторурацила, Фунгициды в
включающегося в состав мРНК высоких
концентрациях (в
5 раз
превышающих
МИК)
Аллиламины Тербинафин Нарушает синтез эргостерола фунгициды
благодаря ингибированию грибного
фермента сквален-эпоксидазы, что
приводит к накоплению токсичного
сквалена
Рис. 2.3: механизмы действия антигрибковых препаратов
Группа Примеры Механизм действия Результат

препаратов
Авермектины/ Селамектин Открывает глицин-зависимые Парализует паразитов, что
милбемицины хлоридные каналы приводит к их удалению из
организма
Бензимидазолы Фенбендазол Связывают турбулин, часть Нарушают энергетический
Мебендазол клеточного цитоскелета метаболизм паразита, черви
Фебентал Ингибируют фумарат-редуктазу погибают от истощения в течение
(предшественник) 2–3 дней
Дихлорофен Разобщают окислительное Убивают червей, препятствуя
фосфорилирование энергетическому обмену
Имидатиазолы Левамизол Ганглиостимулятор Вызывает постоянные
(холиномиметик) мышечные сокращения
(спастический паралич),
приводящие к быстрому
выведению паразита
Никлозамид Ингибирует усвоение глюкозы и Убивает цестод, приводя к
разобщает окислительное накоплению молочной кислоты
фосфорилирование
Нитросканат Механизм действия не описан -
Пиперазин Антихолинэргический препарат Периферический паралич
Ингибирует синтез янтарной взрослых червей, приводящий к
кислоты их выведению
Празиквантел Разрушает наружные покровы Увеличивает проинцаемость
паразита паразитов для глюкозы и
чувствительность к протеолизу
Тетрагидропи- Пирантел Ганглиостимулятор Вызывает спастический паралич
римидины (холиномиметик) у червей
Рис. 2.4: механизмы действия антипаразитарных препаратов (а) Эндопаразиты (продолжение на
следующей странице)
Группа препаратов Примеры Механизм действия Результат

Амидины Амитраз Стимулирует октопаминовые Усиление нервной
рецепторы насекомых деятельности, ведущее к
спастическому параличу
Авермектины/ Селамектин Открывают глицин-зависимые Вызывают паралич паразита
милбемицины Ивермектин хлоридные каналы
Карбаматы Карбарил Обратимо ингибируют Вызывают спастические
Пропоксур холинэстеразу параличи у насекомых
Хлороникотинила Имидаклоприд Связывается с никотиновыми Приводят к параличу и гибели
нитрогуанид рецепторами центральной паразита
нервной системы насекомых и
блокирует их
Регуляторы роста
насекомыхb
а) аналоги Метопрен Имитирует действие Останавливают цикл развития и
ювенильных Пирипроксифен ювенильных гормонов нарушают развитие личинок
гормонов насекомых
b) ингибиторы Луфенурон Блокирует образование хитина Ингибируют развитие личинок,
синтеза хитина Циромазин таким образом, нарушают цикл
развития
Органические Цитиоат Необратимо ингибируют Вызывают спастические
фосфаты Дихлорвос холинэстеразу параличи у насекомых
Димпилат
Фенитротион
Фосмет
Фенилпиразолы Фипронил Блокируют действие тормозного Вызывают быструю гибель
медиатора γ-аминомасляной беспозвоночных
кислоты
Пипронил Ингибирует микросомальную
бутоксид систему насекомых
Пиретрины и Фенвалерат Активаторы натриевых каналов Вызывают возбуждение и затем
синтетические Перметрин паралич паразита
пиретроиды Пиретрин
Рис. 2.4: механизм действия антипаразитарных препаратов. (b) Эктопаразиты
а
селамектин более предпочтителен. Ивермектин не лицензирован для собак и кошек в
Великобритании, и его не следует использовать.
b
эти продукты – форма контроля окружающей среды. Они должны использоваться с самого
начала вместе с препаратами, убивающими взрослых насекомых, в случае сильного заражения животных.
Метопрен входит в состав веществ, использующихся больше для обработки объектов окружающей среды,
чем для обработки животных.
Синергические и антагонистические реакции
Два препарата с разными механизмами действия могут взаимодействовать друг с другом, проявляя
антагонизм или синергизм. Многие препараты дополняют действие друг друга при их комбинировании (то
есть конечный эффект является суммой индивидуальных эффектов препаратов), но некоторые действуют
синергически (то есть конечный эффект превышает сумму индивидуальных). Пример синергизма – усиление
проникновения аминогликозидов в грамотрицательные микроорганизмы в присутствии β-лактамных
антибиотиков. Пример антагонизма – сочетание аминогликозидов с антибиотиками, ингибирующими
биосинтез белка (например, тетрациклинами). Поскольку действие аминогликозидов основано на синтезе
дефектных белков, который также подавляется, это уменьшит активность антибиотика.
Резистентность.
Резистентность патогенных микроорганизмов развивается в случаях, когда основной белок, на
который направлено действие антибиотика, способен изменять свою структуру. Например, для
проникновения тетрациклинов в микробные клетки необходим транспортный белок. Изменения в его
структуре могут помешать связыванию с тетрациклинами и концентрации их внутри микробной клетки.
Гликопептид ванкомицин, напротив, связывается с частью молекулы пептидогликана в оболочке микробной
клетки. Изменение структуры этой макромолекулы, препятствующее связыванию с ванкомицином, привело
бы к изменению физиологии всей бактериальной клетки.
Антимикробные препараты
Антимикробные препараты – одни из самых широко используемых в ветеринарии мелких домашних
животных. Они имеют фундаментальное значение для лечения инфекционных болезней и контроля над
ними. Неудивительно, что число существующих антибактериальных препаратов, из которых нужно выбрать
антибиотик для какого-то конкретного пациента, огромно и способно поставить в тупик. При выборе
препарата нужно исходить из:
 Спектра действия
 Фармакокинетики
 Нежелательных эффектов
 Склонности к развитию резистентности возбудителя
Спектр действия.
Лучший способ изучения действия различных препаратов – определение чувствительности
микроорганизмов в культуре (in vitro). Однако, такой подход осуществим не во всех случаях, где требуется
применение антибактериальных препаратов. Подходящих образцов может не оказаться под рукой, или,
возможно, микроорганизм плохо растет в культуре. В отдельных случаях постановка диагноза предполагает
наличие определенного микроорганизма-возбудителя, что позволяет прогнозировать его чувствительность к
антимикробным препаратам. Например, поверхностная пиодерма у собак в большинстве случаев вызывается
Spaphylococcus intermedius, часто образующим β-лактамазу. Для получения более детальной информации
можно провести несложные и недорогие тесты, например, приготовить мазки из экссудата и окрасить по
Граму. С помощью этих данных можно установить, необходимо ли определять чувствительность.
Для практических целей полезно разделять антимикробные препараты на категории по их активности
в отношении разных групп (грамотрицательные аэробы, грамположительные аэробы и облигатные
анаэробы). На рис. 2.5. приведена сводная информация о спектре действия антимикробных препаратов. На
рисунке отмечен отправной момент, на котором принимается решение о выборе препарата для лечения
конкретной инфекции. Однако, важно помнить, что эта схема очень упрощена. В клинических случаях
необходимо определить действие на возбудителей, особенно коагулазо-положительных стафилококков,
многих грамотрицательных энтеробактерий и Pseudomonas aerugenosa, чувствительность которых
непредсказуема и может изменяться благодаря переносу плазмид резистентности.
Выбор антимикробного препарата зависит от локализации инфекции, а также от способности
проникновения препарата в ткани организма. Например, тетрациклины не очень эффективны в отношении
грамотрицательных микроорганизмов, таких, как Pseudomonas aerugenosa, но при вызванных ими инфекциях
мочевой системы эти антибиотики предпочтительны из-за выведения их с мочой в больших концентрациях.
В общем, антибиотики, эффективные против устойчивых грамотрицательных микроорганизмов
(например, гентамицин, амикацин, тобрамицин и фторхинолоны), нужно оставлять как резерв для лечения
только этих инфекций, несмотря на то, что они эффективны в отношении многих видов бактерий.
Рис. 2.5. не отражает относительной эффективности препаратов, действующих на конкретную
группу. Например, аминогликозиды и фторхинолоны, несмотря на широкий спектр действия, гораздо менее
эффективны против стрептококков, чем пенициллины и цефалоспорины.
Следует помнить, что спектр действия некоторых семейств антибиотиков остался неизменным
(например, тетрациклинов, сульфонамидов, макролидов и линкозаминов), в то время как препараты других
семейств подверглись изменениям, увеличившим или изменившим спектр их действия (например,
пенициллины, цефалоспорины, хинолоны и аминогликозиды).
Важно знать организмы, чувствительность которых непредсказуема. Они перечислены на рис. 2.6.
При подозрении на присутствие таких микроорганизмов для выбора подходящего антибиотика необходимо
сделать посев с определением чувствительности. Это также требуется в случае возникновения рецидива у
животного, недавно (в течение последних 2–3 мес.) прошедшего курс лечения антибиотиками.
Определение чувствительности микроорганизмов

Чувствительность микроорганизмов к определенным антибиотикам может варьировать в широких
пределах. Для определения чувствительности in vitro используется 2 метода.
Дисковый метод
Это традиционный метод определения чувствительности in vitro. Диски, содержащие антимикробный
препарат, помещают на поверхность агара в чашках, предварительно засеянных культурой бактерий.
Содержание антибиотика в диске подбирают так, чтобы концентрация, образующаяся при диффузии в агаре,
была сходна с терапевтической концентрацией антибиотика в тканях. Зона подавления микробного роста
вокруг диска является показателем чувствительности микроорганизма к содержащемуся в диске
антибиотику. Тест является качественным и может давать неточные результаты. В частности, он не подходит
для определения чувствительности микроаэрофильных или медленно растущих микроорганизмов.
Метод разведения
Этим методом определяют концентрацию антибиотика, необходимую для подавления роста
конкретного штамма в жидкой среде (минимальная ингибирующая концентрация, МИК). Метод можно
использовать и для определения концентрации, убивающей 99,9% микроорганизмов (минимальная
бактерицидная концентрация, МБК). Последний вариант не имеет значения для клинической практики, но
первый способ позволяет получить количественные данные о чувствительности конкретного микробного
изолята in vitro.
Сочетания антимикробных препаратов

В некоторых случаях для лечения какой-либо инфекции необходимо сочетание антимикробных
препаратов. Причинами этого может быть следующее:
 Эффективность антибиотиков в сочетании выше, чем каждого по отдельности
 Требуется очень широкий спектр действия (смешанные инфекции; инфекции, угрожающие
жизни, когда возбудитель неизвестен)
 Комбинированная терапия может быть менее токсичной (так как доза каждого антибиотика
уменьшается)
Аэробы и факультативные аэробы Особенные микроорганизмы

Узкого спектра Широкого спектра
В основном Грамположи- В основном Многие грампо- Многие грамполо- Облигатные Микобакте-
грамположи- тельные плюс грамотрица- ложительные и жительные и грам- анаэробные рии и
тельные требовательные тельные грамотрицатель- отрицательные бактерии микоплазмы
грамотрицательные ные бактерии бактерии и прос-
(например, тейшие (П),
Haemophilus, риккетсии (Р) и
Bordetella и др) хламидии (Х)
Линкозами- Природные Аминогли- Аминогликозиды Хлорамфеникол Цефалоспори- Микобактерии
а b с
ды пенициллины козиды (амикацин , (Р, Х) ны (все) Рифампицин
Гликопеп- Активные против (канамицин, гентамицинс, Фторхинолоныс (цефокситин) Стрептомицин
с с
тиды стафилококков, неомицин , тобрамицин ) (Р) Клиндамицин Микоплазмы
образущих бета- стрепто- Аминопеницил- Сульфонамиды Хлорамфени- Фторхиноло-
лактамазу мицин) лины (П, Х) кол ныс
Изоксазоил- Налидикси- (ампициллин, тетрациклины (Р, Метронидазол линкозамиды
пенициллины новая амоксициллин) П, Х) Пенициллины макролиды
(например, кислота Карбоксипени- (все) тетрациклины
клоксациллин, Полимикси- циллиныс (пиперацилл-
флуклоксациллин ны (карбенициллин, лин)
d
Макролиды тикарциллин) (Bacteroides
Рифампицине (усиление fragilis
клавуланатом устойчивы ко
расширяет всем
спектр) пенициллинам и
цефалоспорины многим
(третьего цефалоспори-
с
поколения ) нам, кроме
триметоприм цефоксина
бакуилоприм
Рис. 2.5: спектр действия антимикробных препаратов
а
Также очень эффективны против облигатных анаэробов
b
Пенициллин G и пенициллин V: слабо активны в отношении стафилококков, образующих бета-
лактамазу
с
Антимикробные препараты, активные против Pseudomonas aerugenosa, которые должны
использоваться в качестве резервных для лечения инфекций, вызванных резистентными
грамотрицательными микроорганизмами.
d
Также эффективны против хламидий, и некоторых атипичных микобактерий, чувствительных к
кларитромицину и азитромицину.
е
Рифампицин также активен против хламидий, некоторых простейших, поксивирусов и грибов (на
практике не используется против последних двух)
Прогнозируемые непрогнозируемые
Облигатные анаэробыа Кишечные микроорганизмы
Actinobacillus spp (особенно энтеробактерии)
Пастереллы Pseudomonas spp
Коринебактерии Bordetella bronchiseptica
Актиномицеты Коагулазо-положительные
β-гемолитические стрептококки стафилококкиb
Haemophilus spp
Рис. 2.6: прогнозируемость чувствительности к антибиотикам микроорганизмов, имеющих
клиническое значение.
а
кроме Bacteroides fragilis
bВстречаются метициллин-резистентные штаммы; возможна устойчивость ко многим
антибактериальным препаратам
Примеры синергических сочетаний:

 β-лактамы и ингибиторы β-лактамазы, предотвращающие разрушение β-лактамов
ферментами резистентных микроорганизмов
 аминогликозиды и β-лактамы, усиливающие проникновение аминогликозидов к месту их
действия в клетках грамотрицательных микроорганизмов.
 Диаминопиримидины и сульфонамиды, блокирующие синтез тетрагидрофолата в двух
различных участках одной цепочки, дают больший эффект, чем при простом сложении
индивидуальных эффектов. Даже если микроорганизм устойчив к сульфонамидам, сочетание
сульфонамидов с триметопримом или бакуилопримом все равно дает синергический эффект.
При смешанных инфекциях, особенно если возбудитель неизвестен и животное серьезно больно,
сочетания препаратов используют для расширения спектра действия. Среди препаратов, применяющихся в
ветеринарии в настоящее время, нет таких, которые были бы активны против всех трех категорий
микроорганизмов – грамположительных аэробов (например, стафилококки), грамотрицательных аэробов
(псевдомонады, клебсиеллы и др.) и облигатных анаэробов. Животные с перитонитом в результате
попадания содержимого желудочно-кишечного тракта в брюшную полость, или животные с фебрильной
нейтропенией после химиотерапии злокачественных опухолей – примеры случаев, при которых необходимы
препараты очень широкого спектра действия. В этих случаях можно использовать сочетания двух или трех
различных антимикробных препаратов, например:
 Тикарциллин + клавуланат и фторхинолон либо аминогликозид
 Амоксициллин + клавуланат или цефалоспорин второго поколения и фторхинолон или
аминогликозид и метронидазол или клиндамицин
Нужно помнить, что некоторые антимикробные препараты являются антагонистами и сочетать их

нельзя. Примеры:
 β-лактамные антибиотики обладают бактерицидным действием только на активно делящиеся
клетки. Следовательно, при сочетании с бактериостатическими препаратами они теряют
эффективность.
 Аминогликозиды инициируют синтез дефектных белков в микробной клетке, что приводит к
ее гибели. При сочетании с препаратом, ингибирующим биосинтез белка (например,
хлорамфеникол), второй препарат будет препятствовать бактерицидному действию
аминогликозидов.
В некоторых случаях комбинирование антибиотиков помогает уменьшить их токсичность. Например,
используют вместе стрептомицин и дигидрострептомицин. Стрептомицин наиболее токсичен для слухового
нерва, в то время как дигидрострептомицин – для улиткового нерва. При использовании комбинации
препаратов доза каждого в отдельности меньше токсической, таким образом, возможно усилить
антимикробное действие при уменьшении совокупной токсичности.
Фармакокинетика
Фармакокинетический профиль антибактериального препарата определяется следующими
параметрами:
 Способом введения
 Распределением в тканях
 Метаболизмом
 Выведением из организма
Знание фармакокинетики антимикробных препаратов важно для выбора препарата с подходящим
спектром действия, который будет проникать к месту локализации инфекции. В идеале, если препарат
подбирают в соответствии с чувствительностью микроорганизма, зная его МИК in vitro, а также
фармакокинетику, можно прогнозировать, будет ли концентрация препарата в месте локализации инфекции в
период между введениями достаточной. При фармакокинетических исследованиях, описанных в литературе,
концентрации препаратов измеряли в основном в плазме, а не в тканях. Концентрация в плазме зависит от
способа введения, скорости всасывания и коэффициента очищения. Концентрация в тканях зависит от
способности препарата проникать через клеточные мембраны и метаболизма препарата внутри ткани.
Способ введения и скорость всасывания

Способ введения влияет на пик плазменной концентрации, достигаемой после введения
конкретной дозы. Для удобства многие антимикробные препараты выпускают для орального
введения. На рис. 2.7 подробно описано влияние кормления на биодоступность препаратов для
орального введения, всасывающихся из пищеварительного тракта.
Рекомендации Препараты или группы препаратов
Лучше давать на голодный желудок Цефалоспорины
Всасывание препарата в присутствии пищи может Эритромицин (свободное основание)
замедлиться. Не кормите по крайней мере за 1–2 Эритромицина стеарат
часа до и 1–2 часа после дачи лекарства Линкомицин
Большинство пенициллинов
Большинство сульфаниламидов
Большинство тетрациклинова
Лучше давать с пищей Доксициклинb
Повышается доступность лекарства или Эритромицина эстолат
уменьшаются желудочно-кишечные расстройства Эритромицина этилсукцинат
при даче с пищей или после кормления Метронидазол
Миноциклин
Нитрофурантоин
Без ограничений Хлорамфеникол
Можно давать перед или после кормления Эритромицин в оболочке, распадающейся в
кишечнике
фторхинолоныс
Рис. 2.7. Рекомендации по срокам орального введения антибиотиков в зависимости от кормления.
Все результаты, кроме данных по пенициллину и хлорамфениколу, получены при медицинских
исследованиях.
а
избегайте молока и пищи, богатой кальцием. Антациды также уменьшают всасывание
b
пища может уменьшить раздражение кишечника без значительных помех для всасывания
с
антациды, например, гидроксиды магния и алюминия, уменьшают всасывание; избегайте этих
сочетаний
Препараты для орального введения: некоторые препараты, характеризующиеся слабой

биодоступностью при оральном введении, все равно производят в такой форме, если они предназначены для
лечения только кишечных инфекций. К таким препаратам относятся аминогликозиды и некоторые формы
сульфаниламидов. Пища влияет на биодоступность при оральном введении, но степень влияния сильно
различается у разных препаратов, даже принадлежащих к одному семейству. Например, биодоступность
ампициллина заметно уменьшается в присутствии пищи, в то время как доступность близкородственного
препарата амоксициллина изменяется меньше, и его можно давать с кормом.
Инъекционные препараты: многие антимикробные и некоторые антипаразитарные препараты для

внутримышечного или подкожного введения образуют медленно расходующиеся депо. Они действуют
длительно благодаря медленному всасыванию из места введения, но пик концентрации в плазме (и,
следовательно, в тканях) будет ниже, чем при использовании быстро всасывающихся препаратов. Можно
привести несколько примеров β-лактамных антибиотиков на масляной основе для создания депо в месте
инъекции, что позволяет увеличить интервал между введениями. Однако, скорость выведения этих
препаратов часто бывает высокой, поэтому пик их плазменной концентрации ниже, чем у не
депонирующихся антибиотиков. Препараты, образующие депо, эффективны только против
высокочувствительных микроорганизмов.
Антибиотиков для внутривенного введения, допущенных к применению в ветеринарии мелких
животных, сравнительно мало. При соответствующих показаниях можно применять медицинские препараты.
Пик их плазменной концентрации, по сравнению с другими формами, относительно высок. Интервалы
между введениями должны быть короче, чем для депонирующихся инъекционных или оральных препаратов.
Распределение в месте локализации инфекции
Распределение препарата в тканях зависит от физико-химических свойств (рис.2.8).
Межклеточная жидкость: Для лечения инфекции, возбудитель которой находится в межклеточной
жидкости, препарат должен выйти в нее из кровяного русла. Поскольку молекулы большинства
антибиотиков имеют относительно малые размеры, это нетрудно. Даже препараты, обладающие высокой
протеин-связывающей способностью, проникают в межклеточную жидкость, связываясь с тканевыми
белками и воспалительным экссудатом, таким образом поддерживая градиент концентрации для свободного
препарата. Главным лимитирующим фактором является кровоснабжение места локализации инфекции. Для
лечения инфекции при недостаточном кровоснабжении решающее значение имеют дополнительные меры,
например, хирургическая обработка раны.
Существуют препараты, связывающиеся с определенными тканями, то есть накапливающиеся в
тканях избирательно. В качестве примера можно привести тетрациклины, связывающиеся с костной тканью,
и аминогликозиды, связывающиеся с тканями почек. Однако, прочное связывание препарата с тканевыми
компонентами не гарантирует достаточного количества свободных молекул, необходимых для
взаимодействия с бактериями на этих участках, и, следовательно, преимущество такого свойства
сомнительно. Некоторые препараты, по-видимому, способны концентрироваться внутри макрофагов и
доставляться к месту инфекции вместе с клетками-посредниками воспаления, проникающими в пораженные
ткани. Примером таких препаратов являются макролиды и фторхинолоны, внутриклеточные концентрации
которых могут превышать концентрацию в межклеточном веществе в 20–30 раз.
Полярные (гидрофильные) Препараты с липофильностью от умеренной до Высоко

препараты низкой липофильности высокой липофильные
Кислоты Основания Слабые Слабые Амфотерные
молекулы с низкой
кислоты основания
степенью
ионизации
β-лактамы Полимиксины Сульфонил- Диаминопири- Тетрациклины Фторхинолоны
пенициллины Полимиксин В амиды мидины Хлортетрацик- Данофлоксацин
ампициллин Полимиксин Е Сульфадиазин Бакуилоприм лин Дифлоксацин
амоксициллин (колистин) Сульфадимето- Орметоприм Окситетрациклин Энрофлоксацин
карбенициллин Аминогликози- ксин Триметоприм Тетрациклин Марбофлоксацин
изоксазол- ды Сульфадоксин Линкосамиды Липофильные
пенициллиныа Амикацин Сульфафуразол Клиндамицин тетрациклины
пенициллин G Дигидростреп- Сульфаметацин Линкомицин Миноциклин
иV томицин Сульфаметокса- Макролиды Доксициклин
пиперациллин Гентамицин зол Кларитромицин Разные
тикарциллин Канамицин сульфатиазол Азитромицин препараты
цефалоспорины Неомицин Эритромицин Хлорамфеникол
(все группы) Стрептомицин Спирамицин Флорфеникол
ингибиторы β- Тобрамицин Тилозин Метронидазол
лактамазы Спектиномицин рифампицин
клавуланат
Не всегда легко проникают через Легче пересекают клеточные барьеры, чем Пересекают
естественные барьеры, поэтому полярные молекулы, и выходят в межклеточные клеточные
терапевтические концентрации в жидкости в большей мере барьеры очень
спинномозговой жидкости, молоке Слабые основания концентрируются в жидкостях легко. Проникают
и других внеклеточных жидкостях с более кислой реакцией, чем плазма, то есть в жидкости,
удается создать не всегда. простатическая жидкость, молоко, например,
Адекватные концентрации можно внутриклеточная жидкость. Это возможно при простатическую и
создать в суставах, плевральной и липофильности, достаточной для проникновения бронхиальные
перитонеальной жидкостях, где (например, эритромицин). секреты. Все
барьеры ниже. (проникновение На проникновение в спинномозговую жидкость и препараты
может усиливаться при остром глазные жидкости также влияет связывание с проникают во
воспалении) плазменными белками; сульфонамиды и внутриклеточную
диаминопиримидины проникают лучше, чем жидкость. Все,
макролиды, а линкозамиды и тетрациклины не кроме
проникают вовсе. тетрациклина и
рифампицина,
проникают в
спинномозговую
жидкость.
Рис. 2.8: физико-химические свойства антибиотиков и их влияние на распределение в тканях.
а
Клоксациллин, оксациллин и флуклоксациллин обладают высокой протеин-связывающей
способностью в отношении белков плазмы у собак; необходима большая доза, чем для человека.
Внеклеточные жидкости
Некоторые инфекции локализуются не просто в межклеточном веществе, а в так называемых
внеклеточных жидкостях. В этом случае препарату нужно пройти сквозь второй эпителиальный или
мезотелиальный клеточный слой для того, чтобы достичь места локализации инфекции. Проникновение во
внеклеточные жидкости зависит от растворимости препарата в липидах и барьера, образованного
эпителиальным/мезотелиальным слоем. Наличие воспаления изменяет проницаемость эпителиальных/
мезотелиальных барьеров. К внеклеточным жидкостям относятся (в приблизительном порядке увеличения
сложности прохождения препаратов через барьер):
 Моча
 Перитонеальная, плевральная и внутрисуставная жидкость
 Желчь и желудочно-кишечные секреты
 Бронхиальные секреты
 Простатическая жидкость, молоко
 Спинномозговая жидкость, внутриглазные жидкости
Только самые липофильные препараты способны проникать через нормальный
гематоэнцефалический барьер и во внутриглазные жидкости. Проникновение в мочу и желчь связано с
выведением препарата, см. ниже.
Молоко и простатическая жидкость склонны к большей кислотности, чем плазма, и препараты,
являющиеся слабыми основаниями, будут концентрироваться внутри этих жидкостей благодаря процессу,
называемому ионным захватом. Незаряженные липофильные молекулы диффундируют через секреторную
эпителиальную мембрану; попадая во внеклеточную жидкость с низким рН, присоединяют протоны и,
следовательно, заряд, предотвращающий обратную диффузию молекулы, что создает градиент концентрации
для дальнейшей диффузии незаряженных молекул в это пространство.
Лекарства относительно легко проникают в плевральную, перитонеальную и суставную жидкости
благодаря тому, что мезотелиальные клетки, выстилающие эти полости, не прочно связаны между собой.
Многие антибиотики, даже обладающие высокой протеин-связывающей способностью, могут проникать в
эти жидкости.
Выведение антибактериальных препаратов

На рис. 2.9 показаны пути метаболизма и выведения широко используемых антимикробных
препаратов. Препараты, выводящиеся неизменными с мочой или желчью, будут правильным выбором для
лечения инфекций мочевой системы или желчного пузыря.
Выводимые с мочой Выводимые с желчью в
Метаболизируются в Основной путь выведения – выделение с мочой в
неизменном виде
печени перед неизменном виде
выведением
Фильтрация + Фильтрация + Фильтрация + активная Выделяются с желчью и
значительная/ средняя незначительная секреция в обычно претерпевают
реабсорбция реабсорбция (или без проксимальных извитых круговорот в печени и
реабсорбции) канальцах кишечнике
Хлорамфеникол Аминогликозиды Цефалоспорины Цефоперазон
Флорфеникол Полимиксины (большинство) Хлорамфениколb
Диаминопиримидины Тетрациклины, Фторхинолоны Фторхинолоны
(особенно в щелочной например, Пенициллины (все Линкозамиды
моче), например, окситетрациклин, группы) Макролиды
баквилоприм, тетрациклин Сульфонамиды Рифампицин
орметоприм, (короткого действия), Тетрациклины (кроме
триметоприм например, миноциклина)
линкозамиды сульфадиазин,
макролиды (особенно в сульфадимидин,
щелочной моче) сульфафуразол,
метронидазол сульфаметоксазол,
сульфонамиды сульфатиазол
(особенно в кислой
моче), например,
сульфадиметоксин,
сульфадоксин
тетрациклины
Рис. 2.9: важные пути выведения антибиотиков.
а
Даже препараты, реабсорбирующиеся после фильтрации, в моче могут достигать концентраций,
достаточных для лечения заболеваний мочевого тракта
b
Глюкурониды хлорамфеникола могут гидролизоваться в кишечнике и активный препарат
всасывается оттуда.
Моча – особый пример внеклеточной жидкости. Выделение с мочой – основной способ выведения
лекарств из организма. Многие гидрофильные препараты выделяются с мочой в неизменном виде и активны
против патогенов мочевого тракта. Поскольку в почках реабсорбируется большая часть воды из
клубочкового фильтрата, в случае, если препарат фильтруется, но не реабсорбируется в сколько-нибудь
значительных количествах, соотношение концентраций препарата в моче и плазме может достигать 100:1
(например, аминогликозиды и водорастворимые тетрациклины). Даже липофильные препараты,
реабсорбирующиеся в большей мере, будут накапливаться в моче в больших концентрациях, чем в плазме, в
зависимости от рН мочи (примеры – баквилоприм, сульфадоксин, макролиды). В некоторых случаях этого
достаточно для эффективного лечения инфекций мочевого тракта (пример – потенцированные
сульфонамиды). Другие препараты активно секретируются в мочу и, если они гидрофильны и не
реабсорбируются, соотношение концентраций в моче и плазме может достигать 300:1 (пример – все
пенициллинны, многие цефалоспорины и сульфонамиды короткого действия, например, сульфадиазин).
Такие препараты очень эффективны при лечении инфекций мочевого тракта. Фторхинолоны занимают
промежуточное положение, так как активно секретируются, а затем в определенной степени
реабсорбируются, но все-таки достигают высоких эффективных концентраций в моче.
Желчь: определенные препараты активно выделяются с желчью. В некоторых случаях они
изменяются в процессе метаболизма, образуя конъюгаты, лучше растворимые в воде. Эти конъюгаты могут
расщепляться в кишечнике с освобождением активного препарата, снова попадающего в систему воротной
вены. Этот процесс, названный кишечно-печеночной рециркуляцией, может происходить с
хлорамфениколом, макролидами, линкозамидами и водорастворимыми тетрациклинами. К остальным
препаратам, выделяющимся с желчью, относятся фторхинолоны, аминопенициллины и некоторые
цефалоспорины (особенно цефоперазон)
Порядок дозирования
Бактериостатические препараты: целесообразно выбирать режим дозирования
бактериостатического препарата таким образом, чтобы концентрация его в месте локализации инфекции в
периоды между введениями была выше МИК. Это не позволит бактериям размножиться перед введением
следующей дозы. Это чрезмерное упрощение реальной ситуации in vivo, так как антибиотики все же
оказывают какое-то действие и при концентрациях меньше МИК, что может помочь организму освободиться
от инфекции. Тем не менее, расчет доз препаратов для клинического применения производят исходя из
данной концепции.
Бактерицидные препараты: определение режимов дозирования бактерицидных препаратов более
сложно из-за наличия двух групп с различными механизмами действия:
 Действие зависит от времени: по свойствам очень похожи на бактериостатические препараты.
Убивают микроорганизмы в пороговых концентрациях в период между введениями. Чем
дольше воздействие препарата в данной концентрации на микроорганизм, тем сильнее
действие. Увеличение концентрации намного выше пороговой дает только незначительный
терапевтический эффект. К этой группе относятся β-лактамы – пенициллины и
цефалоспорины.
 Действие зависит от концентрации: чем выше концентрация препарата, действующего на
микроорганизмы, тем сильнее его бактерицидное действие. Создание высокой концентрации
антибиотика в короткий период позволяет достичь большего эффекта, чем поддержание
концентрации, превышающей пороговую, в течение всего интервала между введениями.
Показано, что эти препараты имеют заметный «послеантибактериальный эффект». Примеры
препаратов такого типа – аминогликозиды и, в известной мере, фторхинолоны. Пульсовую
терапию этими препаратами можно успешно использовать в клинической практике.
Ингибиторы действия антибактериальных препаратов.

В идеале, выбор подходящего антибиотика делается на основании данных о его МИК, полученных in
vitro, в сочетании с фармакокинетическими данными, что дает возможность предсказать концентрацию
антибиотика в месте локализации инфекции. Однако, существует несколько факторов, влияющих на
активность определенных антибиотиков в месте инфекции, и, следовательно, на результат лечения. К таким
факторам относятся:
 Продукты гнойного воспаления, связывающие и инактивирующие определенные препараты,
например, сульфаниламиды и аминогликозиды. Во многих случаях для облегчения
антибактериальной терапии при гнойных процессах необходим дренаж
 Уменьшение рН и давления кислорода может снижать активность некоторых антибиотиков.
Летальное действие β-лактамов зависит от активности микробных автолитических ферментов,
которая снижается в кислой среде. Низкие значения рН также существенно понижают
активность аминогликозидов, эритромицина и фторхинолонов.
 Инородное тело в месте локализации инфекции, уменьшающее эффективность
антимикробной терапии.
Все эти факторы указывают на то, что антимикробная терапия – лишь один из элементов лечения
инфекционных болезней. Дренирование и санация инфицированной области с целью облегчить
проникновение антибиотика также имеют важнейшее значение.
Нежелательные эффекты
Заключительный фактор, который нужно учитывать при выборе препарата – возможный
вред терапии данным препаратом для пациента или лица, проводящего лечение. Обобщенные
данные о прямых токсических эффектах антимикробных препаратов приведены на рис. 2.10.
Многие из них зависят от физиологического состояния животного и сопутствующей
лекарственной терапии; некоторые виды животных или породы внутри одного вида могут иметь
большую чувствительность. Следовательно, потенциальную токсичность можно оценить только
индивидуально. Другими важными факторами, которые необходимо учитывать, являются
серьезность заболевания и эффективность альтернативного, возможно, менее токсичного,
лечения. Существуют препараты, применения которых нужно избегать при наличии у животных
почечной или печеночной недостаточности по причине их органотоксичности и/или способа
выведения из организма. Рекомендации по препаратам, которые можно безопасно применять для
животных с заболеваниями почек и печени, а также препаратам, которых нужно избегать, даны на
рис. 2.11 и 2.12. На этих рисунках представлена полезная сводная информация, однако, бывают
обстоятельства, при которых она неприменима.
Препарат Нежелательное действие Комментарии
Ацетамиды, Подавление функции У кошек анемия обратима (по сравнению с
например, костного мозга человеком).
хлорамфеникол, Взаимодействие со Подавляют превращения других препаратов в
флорфеникол многими препаратами печени
кардиотоксичность
Подавляют активность сердечной мышцы и
обладают сосудорасширяющим действием
Аминогликозиды, Нейротоксичность Нервы преддверия и улитки поражаются в
например, различной степени.
гентамицин, Нефротоксичность Концентрируются в клетках проксимальных
амикацин канальцев и оказывают прямое токсическое
действие.
Кардиотоксичность Подавляет активность сердечной мышцы и
обладают сосудорасширяющим действием (см.
примечание 3 ниже)
Нервно-мышечные См. примечание 2 ниже
блокады
Цефалоспорины Нефротоксичность Особенно цефалоридин и цефалотин
Нарушения Особенно препараты, выделяющиеся с желчью,
свертываемости крови например, цефоперазон
Раздражение в месте Особенно цефалотин
инъекции
Выраженное действие на См. примечание 1 ниже
кишечную микрофлору
Фторхинолоны Повреждение суставных Проявляется у молодых животных
хрящей
Нейротоксичность Применять с осторожностью при эпилепсии
Линкозамиды Нервно-мышечные См. примечание 2 ниже
блокады
Подавление сердечной
деятельности
Выраженное действие на
кишечную микрофлору
Макролиды, Изменение кишечной См. примечание 1 ниже. Эритромицин также влияет
например, микрофлоры на моторику кишечника.
эритромицин Раздражение в месте
инъекции
Взаимодействие со Подавляют превращения препаратов в печени
многими препаратами (особенно эритромицин)
Нитроимидазолы Нейротоксичность Описана у людей и подозревается у собак
Тератогенность
Пенициллины Иммуноаллергены Перекрестная чувствительность к любым
Выраженное действие на пенициллинам
кишечную микрофлору См. примечание 1 ниже
Полимиксины Раздражение в месте При применении сульфатов, но не сульфонатов
инъекции
Нервно-мышечные См. примечание 2 ниже
блокады
Нефротоксичность
Рифамицины Тератогенность
Пртенцированные Иммуноалергены Проявляется в виде сухого кератоконъюнктивита,
сульфаниламиды, полиартрита иммунного происхождения, кожных
например, реакций и др.
триметоприм, Недостаток фолиевой Проявляется у кошек после нескольких недель
баквилоприм в кислоты терапии
сочетании с Подавление синтеза Понижение концентрации тироксина через 4 недели
сульфадимидином, тироксина терапии
сульфаметоксазолом Кристаллурия Кислая моча способствует образованию кристаллов.
При существующих почечных заболеваниях
состояние может ухудшиться
Кардиотоксичность См. примечание 3 ниже
Раздражение в месте Особенно соли натрия
инъекции
Тетрациклины, Кардиотоксичность Подавляют активность сердечной мышцы и
например, обладают сосудорасширяющим действием
окситетрациклин, Гепатотоксичность Гепатотоксичны только в высоких дозах
доксициклин Нефротоксичность Причиной может быть недостаточная чистота
старых препаратов
Нервно-мышечные В результате способности связывать кальций, см.
блокады примечание 2 ниже
Тератогенность Окрашивают зубную эмаль (описано только у
Раздражение в месте человека)
инъекции
Изменение кишечной
микрофлоры
Рис. 2.10: Сводные данные по возможным нежелательным эффектам антибиотиков.

Примечания:
1. Большинство антибиотиков изменяет кишечную микрофлору и может вызвать диарею.
Показаны только те, которые имеют выраженное действие на желудочно-кишечный тракт.
Наименьшим вредным действием на кишечную микрофлору обладают фторхинолоны и потенцированные
сульфаниламиды.
2. Побочные реакции антибиотиков, вызывающих нервно-мышечные блокады, скорее всего
проявятся при парентеральном введении или при сочетании с анестетиками и другими блокаторами
нервно-мышечных соединений.
3. Кардиотоксичное действие антибиотиков чаще всего проявляется при внутривенном введении.

Возможно, безопасны Хлорамфеникол
В корректировке дозы нет необходимости, так как Клиндамицин
выделение почками – не основной путь выведения, либо Доксициллин
препараты имеют широкий терапевтический индекс Макролиды
Пенициллины (включая клавуланат)а
Требуется корректировка дозы Цефалоспорины (большинство)
Умеренная доза, во избежание тяжелых нарушений в Фторхинолоны
результате увеличения концентрации креатинина в крови Линкомицин
(см. Трепаньер и Элиот, 1998, для дальнейшего Сульфонамиды
обсуждения) Сульфонамид-триметоприм
Опасные, по возможности избегать Нитрофунантоин
Накопление препарата или его метаболитов может усилить Тетрациклинb (кроме доксициклина)
побочное действие или не-почечную токсичность
Нефротоксичные, нужно избегать Аминогликозиды
Препараты усугубят повреждение почек
Рис. 2.11: рекомендации по системному использованию антибактериальных препаратов для собак и
кошек с почечной недостаточностью. Более подробно см. Уотсон (1994)
а
Натриевые и калиевые соли могут привести к нарушению электролитного баланса
b
Есть несколько сообщений о нефротоксичности тетрациклинов, возможно, обусловленной
недостаточной очисткой или нарушениями условий хранения.

Возможно, безопасны Аминогликозиды
Гепатотоксическое действие не отмечено, препараты Цефалоспорины
выделяются почками и, следовательно, не накапливаются Пенициллины
Применять с осторожностью Хлорамфеникол a,b
Препараты, метаболизирующиеся в печени, способные Линкозамины
накапливаться до токсического уровня при гепатопатии Макролиды
Метронидазол
Сульфонамиды
Тетрациклины
Потенциально токсичны Хлортетрациклин
Могут привести к повреждению печени Эритромицина эстолата
Рифампицина
Сульфонамид-триметоприм
Рис. 2.12: рекомендации по системному введению антибиотиков собакам и кошкам с печеночной
недостаточностью. См. Уотсон (1994) для дальнейшей информации. Влияние печеночной
недостаточности на кинетику антибиотиков и побочные эффекты исследовалось мало, данные получены
экстраполяцией известных фактов, взятых из медицины.
а
Эти препараты могут влиять на превращения других лекарств в печени (хлорамфеникол и
эритромицин являются ингибиторами ферментов, а рифампицин – индуктором)
b
Следует избегать при лечении кошек с заболеваниями печени из-за токсичности для костного мозга
у данного вида животных.
Предотвращение побочных реакций

Некоторые препараты, особенно те, которые действуют на сердечно-сосудистую систему и нервно-
мышечные функции, оказывают острое токсическое действие, зависимое от концентрации, и
проявляющееся только при быстром внутривенном введении. Следовательно, токсического действия
можно избежать при медленном введении лекарства или при выборе другого пути.
При сочетанной лекарственной терапии риск токсичности может увеличиться из-за
фармакодинамических взаимодействий; их нужно по возможности избегать. Если избежать сочетания
препаратов невозможно, следует определить возможные взаимодействия между лекарствами. Есть
примеры подобных взаимодействий, читателям следует обратиться к соответствующим источникам. Ниже
приведены примеры взаимодействий антибиотиков:
 Блокада нервно-мышечных соединений потенцируется при введении некоторых
антибиотиков перед анестезией или после введения анестетика
 Фуросемид ототоксичен; сочетание с аминогликозидами усилит этот побочный эффект
 Фуросемид может привести к обезвоживанию, усиливающему нефротоксичность некоторых
антибиотиков, например, аминогликозидов
 Сульфаниламиды и продукты их метаболизма осаждаются в кислой моче, следовательно, не
должны применяться для животных, получающих корма или препараты для закисления мочи.
Фармакодинамические концентрации: некоторые нежелательные эффекты антибиотиков
возникают в результате фармакокинетических взаимодействий при сочетании лекарств. Например,
хлорамфеникол является обратимым ингибитором системы цитохрома Р 450 в печени, отвечающей за
метаболизм барбитуратов, фенитоина, антикоагулянтов (варфарин) и гипогликемических препаратов.
Следует избегать использования хлорамфеникола для лечения пациентов, получающих такие препараты с
узким терапевтическим индексом. Ингибирующее действие однократной дозы хлорамфеникола на
выведение барбитуратов отмечают в период до трех недель, что связано с необратимым механизмом этого
процесса. Эритромицин также является потенциальным ингибитором цитохрома Р 450, и в медицине есть
данные о смертельных сочетаниях препаратов при лечении пациентов, принимавших терфенадин
(антигистаминное средство). В общем, в ветеринарии мало примеров фармакокинетических
взаимодействий лекарств, и часто приходится полагаться на данные медицины, которые могут оказаться
актуальными для ветеринарии или нет.
Отбор в сторону усиления резистентности в бактериальной популяции

Каждый раз после введения антибиотиков при лечении инфекций в популяции бактерий происходит
отбор наиболее устойчивых к этим препаратам. Развивается способность выживать в присутствии
антибиотика. Гены, отвечающие за резистентность, часто присутствуют в популяции, но в очень
небольшом количестве. Обычно после однократного воздействия антибиотиков бактерии, имеющие эти
гены, «разбавляются» чувствительными бактериями после того, как те снова обретают способность
размножаться. Если антибиотики используют постоянно в большой популяции животных или людей,
находящихся в непосредственной близости, резистентность к препарату может передаваться быстрее
внутри или между видами микроорганизмов. Отделения интенсивной терапии в больницах – хороший
пример такого отбора в направлении устойчивости.
Мелкие животные, находящиеся в стационаре, могут представлять собой такую популяцию, хотя
длительность их пребывания в клинике, интенсивность и длительность лечения в ветеринарной практике
обычно меньше. Однако, о близком соседстве людей и их животных и о способности бактерий
передаваться от одних к другим нужно помнить. Это означает, что при наличии потенциально зоонозных
микроорганизмов необходим тщательный подбор антибактериальных препаратов во избежание «переноса
резистентности» на популяцию бактерий у людей.
АНТИВИРУСНЫЕ ПРЕПАРАТЫ
Из всех возбудителей болезней собак и кошек вирусы труднее всего поддаются уничтожению без
причинения вреда здоровью пациента. Это происходит потому что:
 Вирусы являются облигатными внутриклеточными паразитами, репликация которых зависит
непосредственно от процессов синтеза в клетке-хозяине
 При многих вирусных инфекциях пик репликации вируса происходит до появления
клинических признаков
Большинство антивирусных препаратов, доступных на данный момент, имеют крайне низкий
терапевтический индекс, и их надо применять с большой осторожностью. Медицина ведет активный поиск
препаратов, ингибирующих вирус-специфичные функции. Основная область ветеринарной практики, где
используются антивирусные препараты – офтальмология, а именно лечение герпесвирусных инфекций
кошек.
Репликация вируса проходит в несколько стадий, каждая из которых может быть мишенью для
воздействия лекарств. Они перечислены на рис. 2.13 вместе с некоторыми примерами.
Стадия вирусной репликации Примеры
1. Адсорбция и проникновение в чувствительную Гамма глобулины (стерические препятствия)
клетку
2. Высвобождение вирусной нуклеиновой Аматадин ингибирует высвобождение РНК
кислоты вируса гриппа А
3. Синтез первичных регуляторных белков Препаратов, действующих на этой стадии, не
найдено
4. Синтез нуклеиновых кислот. Аналоги пуринов и пиримидинов, например,
дидезоксиинозин, дидезоксицитидин. Обратимые
ингибиторы транскриптаз, например,
азидотимидин
5. Синтез поздних структурных белков Препаратов, действующих на этой стадии, не
найдено
6. Сборка вирусных частиц Рифампицин
Выход вирусных частиц из клетки Препаратов, действующих на этой стадии, не
найдено
Рис. 2.13: стадии вирусной репликации, являющиеся потенциальными мишенями для воздействия
лекарств, с примерами.
Антигерпесные препараты.
Все антигерпесные препараты, использующиеся в медицине, являются аналогами нуклеотидов,
ингибирующих активность вирусной ДНК-полимеразы. Два из них используются в ветеринарной медицине.
Ацикловир (Acyclovir)
Ацикловир – ациклическое производное гуанозина, активирующееся в результате фосфорилирования
герпесвирусной тимидин-киназой. Активное вещество накапливается только внутри зараженных клеток.
Фосфорилированный ацикловир подавляет репликацию вирусной ДНК благодаря конкурентному
ингибированию вирусной ДНК-полимеразы. Когда препарат включается в вирусную ДНК, наступает
окончание синтеза цепи. Препарат выпускают для внутривенного, орального и местного применения,
последнее используется в ветеринарной практике для лечения конъюнктивитов и кератитов, вызванных
герпесвирусом кошек. Некоторые данные, полученные in vitro, свидетельствуют о недостаточной
эффективности ацикловира против герпесвируса кошек. Есть сообщения о побочных эффектах у человека
при системном введении этого препарата, но они относительно редки.
Трифлуридин
Фторированный пиримидиновый нуклеозид. Фосфорилируется внутри клетки ферментами, образуя
активную форму, конкурирующую с тимидинтрифосфатом за включение в вирусную ДНК. Поскольку
препарат активируется ферментами клетки хозяина, он не специфичен в отношении зараженных клеток и
очень токсичен при всех способах введения, кроме местного. Можно приобрести глазные капли, содержащие
1% трифлуридина (только по рецепту).
Антиретровирусные препараты
В последние несколько лет на рынке появилось несколько медицинских антиретровирусных
препаратов для лечения ВИЧ инфекции. Ветеринарная медицина находится на начальной стадии изучения
эффективности этих препаратов для лечения кошек, инфицированных вирусом иммунодефицита.
Зидовудин
Зидовудин (ранее известный как азидотимидин, АЗТ) является важнейшим антиретровирусным
препаратом, использующимся для лечения кошек, зараженных вирусом иммунодефицита. Активная форма
препарата действует как конкурентный ингибитор обратной транскриптазы. Основной путь выведения этого
препарата у человека – его метаболизм в печени с образованием неактивного производного глюкуронида.
Относительная неспособность кошек к синтезу глюкуронидов влияет на фармакокинетику препарата.
Возможны взаимодействия с другими препаратами, метаболизирующимися в печени и изменяющими
активность печеночных ферментов. Эти факторы могут влиять на эффективность и безопасность применения
данных препаратов у кошек. В литературе описаны следующие побочные эффекты у кошек: подавление
функции костного мозга, приводящее к нейтропении и анемии, а также гепатотоксичность. Нужно принять
во внимание, что зидовудин имеет очень узкий терапевтический индекс и должен применяться с
осторожностью, как препараты для химиотерапии раковых опухолей. Препарат не уничтожает инфекцию, но
может привести к улучшению состояния, кратковременному или средней длительности.
Другие антивирусные препараты.

Залцитабин (также известный как дидезоксицитидин, ДДЦ) и диданозин (также известный как
дидезоксиинозин, ДДИ) представляют собой аналоги нуклеозидов, действующие подобно зидовудину.
Ингибиторы обратной транскриптазы ненуклеотидной природы включают ламувидин и ставудин. Ни один из
них не проходил клинические испытания, и их использование для экспериментальной работы не поощряется.
АНТИГРИБКОВЫЕ ПРЕПАРАТЫ.
По сравнению с антибиотиками, антигрибковые препараты более токсичны для животных, так как
грибы относятся к эукариотам и по многим биологическим свойствам сходны с клетками млекопитающих. К
счастью, многие грибковые инфекции, встречающиеся в Великобритании, поддаются местной терапии, и нет
необходимости в действии препаратов на основные системы органов. Недавнее внедрение относительно
нетоксичных антигрибковых азолов для орального применения произвело революцию в лечении серьезных
системных заболеваний, вызванных грибами. Механизмы действия известных антигрибковых препаратов
представлены на рис. 2.13.
Терапевтическая классификация антигрибковых препаратов

К основным грибковым инфекциям, с которыми встречаются практикующие врачи в
Великобритании, относятся дерматофитозы, аспергиллез носовой полости и инфекции, вызванные дрожжами
(кандидозы, криптококкозы и инфекция Malassezia pachydermatis). В данной книге описано специфическое
лечение этих инфекций. На рис. 2.14 приведены сводные данные по спектру действия, путям введения и
клиническим показаниям для применения имеющихся антигрибковых препаратов. Антигрибковые
препараты можно разделить на местные, подходящие только для лечения локальных поверхностных
поражений, слишком токсичные, чтобы их можно было использовать системно, и средства, достаточно
безопасные для системного применения, но в большинстве случаев требующие осторожного обращения.
Системные антигрибковые препараты

Очень важно выбрать препарат, который после введения достигнет места локализации инфекции и
накопится там в достаточной концентрации, не оказывая побочного действия на организм пациента. На рис.
1.15 представлены важные данные по фармакокинетике и токсичности этих препаратов. Нужно отметить, что
новые триазолы, особенно итраконазол и флуконазол (антигрибковые препараты широкого спектра
действия) активны при оральном введении и относительно нетоксичны.
Группа Примеры Способ введения Спектр действия и основное

препаратов клиническое применение
Полиены Амфотерцин В Парентеральный или Очень широкий спектр; используется
оральный (для инфекций для лечения системных микозов,
ЖКТ) угрожающих жизни
Нистатин Только местный Широкий спектр; используется для
лечения инфекций ушей.
Азолы Хлотримазол Только местное Широкий спектр; применяются для
Энилконазол лечения дерматофитозов, кандидозов,
инфекций, вызыванных Мalassezia и
аспергиллезов.
Флуконазол Оральное (все) или Широкий спектр; итраконазол и
в/в(флуконазол) флуконазол предпочтительнее
Итраконазол Может применяться местно кетоконазола. Итраконазол
Кетоконазол используется при дерматофитозах,
трудно поддающихся лечению,
флуконазол применяется для лечения
криптококковых менингитов у человека
Гризеофульвин - Только оральное (при Только дерматофиты (все виды)
местном применении
неактивны)
Флуцитозин – Парентеральное (оральное Узкий спектр (дрожжевая инфекция,
применение возможно, но криптококкоз, кандидоз). Синергически
только по индивидуальному взаимодействуют с амфотерцином
назначению и только от Bell
& Croydon)
Аллиламины Тербинафин Оральное Узкий спектр; дерматофитозы,
особенно онихомикозы у человека
Рис. 2.14: способы введения, спектр действия и клиническое применение антигрибковых препаратов.
АНТИПАРАЗИТАРНЫЕ ПРЕПАРАТЫ
Эндопаразитоциды
В дополнение к принципам, описанным выше для антимикробных препаратов, при лечении
паразитарных заболеваний необходимо учитывать жизненный цикл паразита. Чувствительность к
препаратам на разных стадиях развития может варьировать. Механизм действия антипаразитарных
препаратов, использующихся для лечения собак и кошек, приведен на рис. 2.4.

На рис. 2.16 приведены сводные данные о спектре действия самых распространенных
эндопаразитоцидов. В некоторых случаях, для эффективного действия на некишечные формы паразитов
(прикрепленных или мигрирующих личинок, легочных и сердечных гельминтов) требуется другая
дозировка, часто более продолжительное лечение, чем при инвазии кишечными паразитами. Дихлорофен,
никлозамид и нитросканат слабо всасываются из кишечного тракта после орального введения. Всасывание
пирантела зависит от химического состава используемого препарата. Ивермектин, левамизол, пиперазин и
празиквантел легко всасываются из кишечника. Бензимидазолы всасываются медленно из-за их низкой
водорастворимости, хотя у собак и кошек этот процесс идет быстрее, чем у жвачных животных, свиней и
лошадей. Поскольку бензимидазолы убивают гельминтов, не давая им усваивать глюкозу, необходимо
длительное применение, иногда требуется многократное введение в течение нескольких дней, в зависимости
от интенсивности метаболизма паразита.
К препаратам, эффективным против круглых червей, относятся бензимидазолы, активные на
протяжении всего жизненного цикла (действуют на яйца, личинок и взрослых особей). Левамизол и
ивермектин активны против взрослых нематод и многих личиночных стадий. Пирантел активен против
личинок и взрослых форм нематод, но не действует на мигрирующие и прикрепленные личинки. Паразиты
во взрослом состоянии гораздо более чувствительны к действию пиперазина, чем на более молодых стадиях
развития, личинки, обитающие в протоках, после однократного введения этого препарата удаляются лишь
частично. Следовательно, для эффективного применения лекарств, содержащих пиперазин, необходимо
многократное и частое введение.
Препа- Биодоступность Распределение и Взаимодействие с Побочные эффекты

рат при оральном способ выведения лекарствами
введении
Амфо- Слабая; Обладает сильной Другие нефротоксичные Токсичность для почек
терцин применяется протеин- препараты, обратима. Развивается
В орально для связывающей аминогликозиды, ацидоз почечных канальцев
лечения способностью и не циклоспорин и потери калия и магния.
инфекций попадает в Развивающаяся Введение натрия может
желудочно- спинномозговую гипокалиемияа может уменьшить токсичность.
кишечного трактажидкость усилить токсичность Острая токсическая реакция
Большая часть дигоксина на инфузию препарата
введенной дозы характеризуется
превращается в гипотензией, повышением
печени, но температуры, рвотой,
небольшое слабостью и депрессией.
количество Может развиться сердечная
выводится с мочой в аритмия и тромбофлебит.
неизменном виде
Флуко- Очень хорошая; Эффективнее всех Ингибирует печеночные Наименее токсичен из всех
назол не изменяется в азолов проникает в цитохром Р450-зависимые азолов.
присутствии спинномозговую ферменты (наименее Возможные проблемы –
антацидов жидкость; с этой эффективный из азолов). гепатотоксичность и
целью можно Избегайте применения тератогенность
вводить вместе с кетоконазолом и
внутривенно. итраконазолом
Выводится почками
Инта- Различная; Плохо проникают в Ингибирует печеночные Гепатотоксичность и
коназол антациды, спинномозговую цитохром Р450-зависимые тератогенность
и адсорбенты и жидкость. ферменты (кетоконазол в Подавляют синтез
кетоко- противоязвенные Метаболизируются большей степени). Данных адреностероидов и
назол препараты в печени по собакам и кошкам гонадальных стероидов
подавляют недостаточно, но избегайте (кетоконазол только в
всасывание (для антигистаминов, терапевтических дозах), что
растворения этих циклоспорина, цисаприда, приводит к бесплодию и
слаборастворимых варфарина другим эндокринным
препаратов нарушениям
необходима
кислая среда)
Гризео- Различная; Наносится на Антиэпилептические
фуль- всасывание недавно препараты
вин усиливается при сформированную
даче с жирной кожу, где он
пищей связывается с
кератином

Язык

Infektsionnye Bolezni Sobak I Koshek

Загружено:

Сведения о документе

Оригинальное название

Авторское право

Доступные форматы

Поделиться этим документом

Поделиться или встроить документ

Параметры публикации

Этот документ был вам полезен?

Это неприемлемый материал?

Авторское право:

Доступные форматы

Infektsionnye Bolezni Sobak I Koshek

Загружено:

Авторское право:

Доступные форматы

Информация получена из открытых источников и не предназначена для коммерческого использования.

Смотреть ещё материал на: ЛитРес и My-shop.ru

Британская Ассоциация ветеринарии мелких домашних животных

Практическое руководство по инфекционным

Первое издание включает полезную клиническую информацию о вирусных, бактериальных,

В руководстве по инфекционным заболеваниям собак и кошек BSAVA, созданном для удобства

Описаны диагностические методы, включая молекулярно-биологические, а также современные

Чтобы выделить основные моменты, во всех разделах приводятся таблицы и цветные

Сюзан Доусон, бакалавр ветеринарии, доктор философии, член Королевского колледжа

Проф. Гэри С. В. Ингланд, бакалавр ветеринарии, доктор философии, доктор ветеринарной

Ян С. Мейсон, бакалавр ветеринарных наук, доктор философии, член Королевского колледжа

Ян К. Рэмси, бакалавр ветеринарных наук, доктор философии, член Королевского колледжа

Эндрю Х. Спаркс, бакалавр ветеринарии, доктор философии, член Королевского колледжа

Ким Уиллоугби, бакалавр ветеринарии, член Королевского колледжа ветеринарных наук

Линн Тернер, бакалавр ветеринарии, член Королевского колледжа ветеринарных наук

Лабораторная диагностика инфекционных болезней

Отправка образцов в лабораторию.

Предсказательная ценность положительного результата.

Предсказательная ценность отрицательного результата.

Рис. 1.1. термины, использующиеся при сравнении лабораторных методов. Чувствительность,

Цепная полимеразная реакция.

Надписи на рис. 1.4.

Надписи на рис. 1.5

Гистопатология, иммуногистохимия и методы in situ.

Гематологические и цитологические красители.

При подозрении на микобактериальную инфекцию на основании окраски по ЦН образец с хорошо

Культивирование уреазо-положительных бактерий из биоптатов желудка

Цепная полимеразная реакция.

Микроскопия собранной шерсти

Среды для дерматофитов

Чистка шерсти щеткой

Рис. 1.9: мазки из фекалий

К сожалению, отрицательные результаты неубедительны; если при исследовании всех образцов

Седиментация личинок легочных гельминтов (метод Баерманна)

Эндоскопия и личинки в бронхах

Методики концентрации микрофилярий

показан на рисунке 5.8а.

Большинство этих факторов создают впечатление, что значимость серологической конверсии

Определение вируснейтрализующих антител

Иммунодиффузия в агаровом геле

Подписи к фото на рисунке:

Рис. 1.17. Вестерн-блоттинг. Вирус очищают, разрушают и разделяют электрофорезом в

А) Истинно положительный результат

Твердофазный иммуноферментный анализ

Рис. 1.20: Принцип иммуноиммиграционного экспресс-метода

ЛИТЕРАТУРА И ДАЛЬНЕЙШЕЕ ЧТЕНИЕ

Антимикробная и антипаразитарная терапия

Гибель микроорганизмов и торможение роста

Группа Примеры Механизм действия Результат

Группа препаратов Примеры Механизм действия Результат

Синергические и антагонистические реакции

Определение чувствительности микроорганизмов

Сочетания антимикробных препаратов

Аэробы и факультативные аэробы Особенные микроорганизмы

Примеры синергических сочетаний:

Нужно помнить, что некоторые антимикробные препараты являются антагонистами и сочетать их

Способ введения и скорость всасывания

Препараты для орального введения: некоторые препараты, характеризующиеся слабой

Инъекционные препараты: многие антимикробные и некоторые антипаразитарные препараты для

Полярные (гидрофильные) Препараты с липофильностью от умеренной до Высоко

Выведение антибактериальных препаратов

Ингибиторы действия антибактериальных препаратов.