Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
4. Малые размеры.
Морфология грибов
1)Более крупных размеров
2)эукариоты
3)размножаются спорами
4) кл.ст. состоит из целлюлозоподобных и хитиноподобных веществ.
5)Гр+
6) вегетативные клетки — некислотоустойчивые
Виды спорообразования
1)Вегетативные –образование на любом участке мицелия – отшнуровка, обычных
гиф путем их септирования(бластоспоры, артроспоры, хламидоспоры)
2)Бесполый способ – споры на мицелии образуются при помощи плодоносящих
гифов(конидиев и спорангиев) – макроконидии, конидиоспорты, спорангиоспоры.
Выделяют эндо- и экзоспоры(конидии – образуются на концевых участках особых
гиф – конидиеносцы, которые могут быть простыми или разветвленными. У
аспергиллов кониединосец на конце имеет округлое вздутие, на поверхности
которого сплошным слоем расположены клетки в один или два ряда – стеригмы).
3) Половой способ(зигоспоры – рузультат слияния гифов, аскоспоры – в сумках
образуются споры)
Принципы классификации
1)По структуре (одноклеточные, многоклеточные)
2)По содержанию ядер(многоядерные, одноядерные)
3)По строению (мицелиальные, псевдомицелиальные, дрожжевые)
4) По способу размножения(совершенные – способны к половому размножению,
несовершенные – не способны к половому размножению)
5)По септированию (высшие, низшие)
Особенности морфологии
1) Размеры от 5 до 30 мкм.
2) Покрыты плотной эластичной мембраной
— пелликулой, образуемой периферическим слоем цитоплазмы
3) К ней прилегает внешний более плотный и гомогенный слой цитоплазмы
эктоплазма.
4)эукариоты
5)одно или несколько ядер
6)имеют органоиды передвижения
7)образуют цисты – как способ защиты от неблагоприятных факторов окружающей
среды(особенность, в отличие от спор – циста – это целая клетка, покрытая
защитной оболочкой)
8) Для проникновения в клетку хозяина у простейших имеются специальные
приспособления, например у токсоплазм – сложный комплекс органелл – коноид с
фибриллами, трихомонады и лямблии имеют специальные присоски.
9) Органоиды пищеварения
10) Большинство простейших - одноклеточные, реже колониальные организмы.
Особенности жизнедеятельности простейших
Подавляющее большинство простейших — гетеротрофы. Непереваренные остатки
удаляются через порошицу (специальное, постоянно существующее отверстие (у
инфузорий)) или через любое место клетки (у амебы). Через сократительные
вакуоли осуществляется осмотическая регуляция, удаляются продукты обмена.
Дыхание, т. е. газообмен, происходит через всю поверхность клетки.
Раздражимость представлена таксисами (двигательными реакциями).
Размножение простейших
Бесполое — митозом ядра и делением клетки надвое (у амебы, эвглены, инфузории),
а также путем шизогонии — многократного деления (у споровиков).
Половое — копуляция. Клетка простейшего становится функциональной гаметой; в
результате слияния гамет образуется зигота.
Для инфузорий характерен половой процесс — конъюгация. Он заключается в том,
что клетки обмениваются генетической информацией, но увеличения числа особей
не происходит.
Многие простейшие способны существовать в двух формах
— трофозоита (вегетативной формы, способной к активному питанию и
передвижению) и цисты. При этом клетка обездвиживается, обезвоживается,
покрывается плотной оболочкой, обмен веществ резко замедляется. В такой форме
простейшие легко переносятся на большие расстояния животными, ветром и
расселяются. При попадании в благоприятные условия обитания происходит
эксцистирование, клетка начинает функционировать в состоянии трофозоита. Таким
образом, инцистирование не является способом размножения, но помогает клетке
переживать неблагоприятные условия среды.
Принципы классификации
Основной принцип классификации – вид органоида передвижения
Подтип Sarcodina
1) ложноножки-псевдоподии.
2)Размножаются делением
3) способны образовывать цисты
4)патогенные виды, поражающие кишечник (Entamoeba histolytica) и органы ЦНС
(Naegleriafowleri и виды Acanihamoeba).
Тип Ciliophora
1) реснички
2)размножаются путём деления, способны к конъюгации.
3) образуют цисты
4) патогенное значение имеет Balantidium coli
Тип Apicomplexa
1) только паразитические виды
2) исключительно половой путь развития или чередование полового и бесполого
поколений, обычно связанное с переменой хозяев.
3) Своим названием обязаны способности образовывать скопления клеток,
защищенные общей плотной оболочкой.
Сходство с грибами
1)Гр+
2)имеют ветвящуюся структуру(образуют видимый, не имеющий перегородок
мицелий)
3)размножаются обрывками мицелия или спорами – образуют конидии(образование
спор – сходство с бактериями, но не по функции)
Отличия от грибов
1)ядро типа нуклеоида(прокариот, как и бактерии)
2)Не содержат в клеточной стенке хитина, стенка имеет строение
грамположительных бактерий
3) Резистентны к противогрибковым средствам.
4) Мицелий примитивен
Принципы классификации.
Тип, число завитков, шаг, высота, угол наклона спирали играют играют важную
систематическую роль
Патогенные спирохеты подразделяются на 3 рода: Borrelia; Treponema; Leptospira.
Функции:
2) защита;
4) антигенность.
3. Извитые формы имеют изгибы в виде одного или нескольких оборотов спирали.
Клетки отличаются по длине и толщине, по количеству и характеру завитков. Длина
клеток варьирует от 5 до 30 мкм при толщине 0,25-1 мкм.
Клон - совокупность особей, происходящих от одной родительской клетки. К-
ры, полученные клонированием,генетически идентичны и фенотипически относител
ьно однородны. К. выделяют из одной изолированнойклетки путем
ее культивирования или из одной колонии.
Морфология бактерий
У бактерий выделяют обязательные и необязательные органоиды клетки.
Рибосомы. Строение: 50% РНК и 50% белки; имеют округлую форму; две
субъединицы (малая и большая). Функция: биосинтез белка. Рибосомы бактерий
имеют 70 S (коэффициент осаждения), а у эукариот – 80 S. Поэтому некоторые
антибиотики, которые подавляют биосинтез белка на рибосомах, связываются с
рибосомами бактерий, но не с рибосомами эукариотических клеток.
Жгутики выявляют:
Классификация бактерий
Назначение окрасок
1) По Граму
Сущность окраски по Граму: так как грамм + бактерии содержат в клеточной
стенке мало липидов, красители хорошо впитываются клеточной стенкой, при
этом комплекс генцианового фиолетового и йода прочно связывается с
большим количеством пептидогликана и присутствующими тейхоевыми
кислотами. После обработки спиртом поры в клеточной стенке суживаются,
что задерживает красители, и клеточная стенка приобретает сине-фиолетовую
окраску.
Методика:
1.Генцианвиолет – 2 мин
2.Р-р Люголя – 1 мин
3.Спирт – 20сек
4.Фуксин – 3 мин
2) Окрашивание по Бурри-Гинсу является негативным методом окраски:
окрашивается фон, а не сами микроорганизмы. Для этого используют
красители, не окрашивающие бактерии, например тушь. Готовят тушевой
препарат: каплю материала смешивают с каплей туши, готовят мазок (как
мазок крови) и высушивают. Клетки окрашиваются в красный цвет(фуксин),
капсулы бесцветные, тушь создает темный фон (негативное
контрастирование).
Методика
1.Мазок окрашивают карболовым фуксином Циля (основной краситель) при
нагревании 3-5 мин.
2.Обесцвечивают раствором серной кислоты (дифференцирующее вещество) в
течение 1-2 мин.
3.Промывают водой.
4.Докрашивают 3-5 мин метиленовым синим (дополнительный краситель).
Сущность
Клеточная стенка кислотоустойчивых бактерий отличается высоким
содержанием липидов. Они с трудом окрашиваются, но затем удерживают
основной краситель при обесцвечивании кислотой. Некислотоустойчивые
бактерии легко окрашиваются, а затем легко обесцвечиваются кислотой и
окрашиваются дополнительным красителем.
Сущность
Мазок окрашивается уксуснокислым метиленовым синим 2-3 минуты, при этом
происходит химическое взаимодействие красителя и волютина. Зерна волютина
окрашиваются в черный цвет. При промывке водой тело клетки
обесцвечивается и затем в течение 1 мин докрашивается везувином в желто-
коричневый цвет.
1.Цитопатический эффект.
2.Выявление телец включений.
3. Выявление вирусов методом флюоресцирующих антител (ИФА), электронной
микроскопией, авторадиографией.
4.Цветная проба. Обычный цвет используемых культуральных сред,
содержащих в качестве индикатора рН феноловый красный, при оптимальных для
клеток условиях культивирования (рН около 7,2)- красный. Размножение клеток
меняет рН и соответственно- цвет среды с красного на желтый за счет смещения рН в
кислую сторону. При размножении в клеточных культурах вирусов происходит лизис
клеток, изменения рН и цвета среды не происходит.
5.Выявление гемагглютинина вирусов- гемадсорбция, гемагглютинация.
6.Метод бляшек (бляшкообразования). В результате цитолитического действия
многих вирусов на клеточные культуры образуются зоны массовой гибели клеток.
Выявляют бляшки- вирусные “ клеточно- негативные” колонии.
У различных вирусов геном могут образовывать нити +РНК либо -РНК, а также
двойные нити, одна из которых -РНК, другая (комплементарная ей) — +РНК.
1.Субстратное фосфорилирование
•Гликолитический путь – присущ облигатным и факультативным анаэробам,
бродильный метаболизм
Химические методы.
1. Прибор Омелянского — для поглощения кислорода используется пирогаллол.
2. Среда Вильсон — Блера. Содержит глюкозу, сернисто-кислый натрий, хлорид
железа. Анаэробы образуют черные колонии за счет восстановления сернисто-
кислого натрия в сернистый натрий, который, соединяясь с хлоридом железа,
образуют осадок черного цвета -сернистое железо.
Физические способы.
1.Удаление воздуха из питательных сред перед засевом кипячением в водяной бане
в течение 15 минут и последующим быстрым охлаждением до 45—50°. Для того
чтобы не дать возможности воздуху вновь проникнуть в среду, пробирки запаивают,
либо поверхность среды заливают стерильным парафиновым маслом.
2.Получение изолированных колоний в глубоких слоях среды по способу Виньяля.
Метод Виньяль-Вайона основан на том, что исследуемый материал разводят в
расплавленном до 45 °С сахарном МПА. Затем из каждой пробирки быстро
насасывают агар в стерильную пастеровскую пипетку. Тонкий конец пипетки
запаивают. Запаянные пипетки помещают в термостат в стеклянном цилиндре. В
зависимости от исходной концентрации в той или иной пипетке через 2-3 суток
после посева можно наблюдать образование изолированных колоний. При
необходимости исследовать колонию, трубку надпиливают и разламывают, а
столбик агара выдавливают в чашку Петри и извлекают колонии
бактериологической петлей
.3.Удаление воздуха (а следовательно, и кислорода) из среды механическим путем.
Для этого пользуются особыми приборами — анаэростатами (газ-пак)
4. Получить изолированные колонии анаэробов можно, используя метод
Перетца. Для этого в чашки Петри помещают стеклянные палочки или спички и на
них укладывают стеклянные пластинки размером 6x6 см. Исследуемый материал
разводят расплавленным и остуженным сахарным МПА. Содержимое пробирок
быстро перемешивают и выливают в чашки таким образом, чтобы агар заполнил
пространство между стеклянной пластинкой и дном чашки. Толщина агарового слоя
под стеклом должна быть равна 1-2 мм. Посевы инкубируют в термостате при 37°С.
Через 18 ч под пластинкой вырастают колонии анаэробов.
5. Метод Битнера. К крушке чашки Петри с посевом исследуемого материала
прикрепляют пакет из фильтровальной бумаги, чашку герметизируют при помощи
парафина. Кислород поглощается
6. Аппарат Киппа — замена воздуха индифферентным газом (водородом).
Биологические методы.
Метод Фортнера. Чашку Петри с толстым слоем агара делят на 2 половины на
одну половину засевают облигатный аэроб — «чудесную» палочку, на другую
половину чашки засевают исследуемую анаэробную культуру. Чашку заливают
растопленным парафином. Через 24 — 48 часов в чашке вырастают аэробы, затем,
когда запас кислорода исчерпывается, начинают размножаться анаэробы.
незначительно снижено
количество бифидобактерий и
лактобацилл. Наблюдаются
количественные и
качественные (появление
форм с атипичными
биологическими свойствами)
изменения кишечных палочек.
Высеваются в незначительном
количестве условно-
патогеннные кишечные
микроорганизмы.
5) антигенная структура;
8) географическое распространение;
9) внутриядерная или цитоплазматическая локализация;
Питательной средой
в микробиологии называют среды, содержащие различные соединения
сложного или простого состава, которые применяются для размножения
микроорганизмов, их культивирования и сохранения в лабораторных или
промышленных условиях.
Классификация сред
Потребность в питательных веществах и свойствах среды у разных видов
микроорганизмов неодинакова. Это исключает возможность создания
универсальной среды. Кроме того, на выбор той или иной среды влияют цели
исследования.
В настоящее время предложено огромное количество сред* в основу
классификации которых положены следующие признаки.
1. Исходные компоненты. По исходным компонентам различают натуральные и
синтетические среды. Натуральные среды готовят из продуктов животного и
растительного происхождения. В настоящее; время разработаны среды, в которых
ценные пищевые продукты (мясо и др.) заменены непищевыми: костной и рыбной
мукой, кормовыми дрожжами, сгустками крови и др. Несмотря на то что состав
питательных сред из натуральных продуктов очень сложен и меняется в
зависимости от исходного сырья, эти среды нашли широкое применение.
Синтетические среды готовят из определенных химически чистых органических и
неорганических соединений, взятых в точно указанных концентрациях и
растворенных в дважды дистиллированной воде. Важное преимущество этих сред в
том, что состав их постоянен (известно, сколько и какие вещества в них входят),
поэтому эти среды легко воспроизводимы. Искусственные среды разделяют на
животные [например, мясопептонный агар (МПА) или мясопептонный бульон
(МПБ)] и растительные (например, настои сена и соломы, отвары злаков, дрожжей
или фруктов, пивное сусло и др.).
2. Консистенция (степень плотности). Среды бывают жидкие, плотные и
полужидкие. Плотные и полужидкие среды готовят из жидких, к которым для
получения среды нужной консистенции прибавляют обычно агар-агар или
желатин.
Агар-агар - полисахарид, получаемый из определенных сортов морских
водорослей. Он не является для микроорганизмов питательным веществом и
служит только для уплотнения среды. В воде агар плавится при 80-100° С,
застывает при 40-45° С.
Желатин - белок животного происхождения. При 25-30° С желатиновые среды
плавятся, поэтому культуры на них обычно выращивают при комнатной
температуре. Плотность этих сред при рН ниже 6,0 и выше 7,0 уменьшается, и
они плохо застывают. Некоторые микроорганизмы используют желатин как
питательное вещество - при их росте среда разжижается.
Кроме того, в качестве плотных сред применяют свернутую сыворотку крови,
свернутые яйца, картофель, среды с селикагелем.
3. Состав. Среды делят на простые и сложные. К первым относят
мясопептонный бульон (МПБ), мясопептонный агар (МПА), бульон и агар
Хоттингера, питательный желатин и пептонную воду. Сложные среды готовят,
прибавляя к простым средам кровь, сыворотку, углеводы и другие вещества,
необходимые для размножения того или иного микроорганизма.
4. Назначение:
а) основные (общеупотребительные) среды служат для культивирования
большинства патогенных микробов. Это вышеупомянутые МПА, МПБ, бульон и
агар Хоттингера, пептонная вода;
б) элективные (избирательные) среды служат для выделения определенного
вида микробов, росту которых они благоприятствуют, задерживая или подавляя
рост сопутствующих микроорганизмов. Так, соли желчных кислот, подавляя рост
кишечной палочки, делают среду элективной для возбудителя брюшного тифа.
Среды становятся элективными при добавлении к ним определенных
антибиотиков, солей, изменении рН.
Выделяют кровяные и сывороточные среды (например, Леффлера, Борде-Жангу),
яичные среды (например, Левенштайна-Йенсена) и др
( среды Уилсона-Блэра, Эндо, Плоскирева, Мак-Конки)
Жидкие элективные среды называют средами накопления. Примером такой
среды служит пептонная вода с рН 8,0. При таком рН на ней активно
размножается холерный вибрион, а другие микроорганизмы не растут;
в) дифференциально-диагностические среды позволяют отличить
(дифференцировать) один вид микробов от другого по ферментативной
активности, например среды Гисса с углеводами и индикатором. При росте
микроорганизмов, расщепляющих углеводы, изменяется цвет среды;
Дифференциально-диагностические среды (например, среды Хисса, Кларка)
применяют для изучения и идентификации отдельных типов, видов и групп
бактерий. В качестве основы применяют различные органические и неорганические
соединения, гидролизаты казеина, пептонную воду, бульон Хоттингера-Мартена,
дополненные углеводами, спиртами, мочевиной и другими веществами; при их
расщеплении происходит сдвиг рН в кислую (углеводы, спирты, липиды) или
щелочную (белки) сторону. Соответственно, выделяют среды с углеводами и
спиртами, среды с мочевиной, среды для определения индолообразоваиия, среды
для определения протеолитической активности и комбинированные (политропные)
среды. В такие среды также часто вносят различные индикаторы (например,
бромтимоловый синий, индикатор Андраде, бромкрезоловый пурпурный и
крезоловый красный), помогающие визуально определить изменение рН,
характерное для различных микроорганизмов. В частности, сдвиг в кислую сторону
вызывает покраснение среды с реактивом Андраде или пожелтение при
использовании среды с бромтимоловым синим, тогда как при защелачивании
реактив Андраде и индикатор бром-тимоловый синий не меняют цвет среды. Все
дифференциально-диагностические среды разделяют на четыре основные группы.
Среды, содержащие белки, дающие характерные изменения под действием
бактериальных ферментов (кровь, желатина, молоко и др.), применяют для
определения гемолитических или протеолитических свойств. Наиболее
распространены мясопептонная желатина (МПЖ), свернувшаяся лошадиная
сыворотка, молоко и кровяной агар (КА).
Простые Сложные
Жидкие: ПВ, МПБ Специальные: сахар. МПА (Рис. 1), МПБ,
асцитический МПА
Элективные: Ру, 1% щелочная ПВ
Диференциально-диагностические:
(МПБ, ПВ)
(кров.МПА)
Чистая культура –
совокупность микробов одного вида или варианта, полученная из одного образца ма
териала исодержащаяся в определенном объеме среды
Метод Шукевича.
Метод прогревания.
Бактериостатический метод (метод ингибирования)
Метод заражения лабораторных животных.
Принципы выделения
1.микроскопия не является основным методом, а ориентировочным, чтобы
определить сопутствующую микрофлор(если имеется – добавление аб)
5. спорообразование
СМОТРИ МЕТОДИЧКУ!!
Асептика – система мероприятий, направленная на предотвращение попадания
микроорганизмов в рану.
Стерилизация – полное уничтожение вегетативных форм микроорганизмов и их
спор в различных материалах.
Основные методы:
1.Физические
• воздействием высокой температуры
прокаливание в пламени спиртовки или газовой горелки – стерилизуют
бактериологические петли, препаровальные иглы, пинцеты; режим – пламя.
кипячением кипятильником – не менее 30 мин; стерилизуют мелкий
хирургический инструментарий, предметные и покровные стёкла. Режим- 100
сухим жаром в сухожаровом шкафу – воздух нагревается до 165 – 170˚С в
течении 2 часа т; стерилизуют стеклянную посуду
текучим паром в автоклаве – температура 100 ˚С, -30 минут 3 х кратно.
паром под давление в автоклаве - давление 0,5 – 2 атм, время 15 – 30 мин
тиндализация на водяной бане– дробная стерилизация при 56–58 ˚С в течение 1 ч
5 – 6 дней подряд; для стерилизации легко разрушающихся при высокой t˚ веществ
(сыворотка крови, витамины и др.)
пастеризация в специальных стерилизаторах – нагревание при t˚ 60 в течение 1
часа с последующим быстрым охлаждением; не уничтожает споры;
• воздействием ионизирующих излучений
пастеризуют напитки и продукты путём ультрафиолетового облучения –
используется УФ-излучение с длиной волны 260 – 300 мкм; используют
бактерицидные лампы разной мощности (БУВ-15, БУВ-30) для стерилизации
воздуха в боксах, операционных, детских учреждениях
2.Механическая стерилизация (фильтрование) – через асбестовые и мембранные
фильтры с разным диаметром пор; стерилизация жидких материалов,
невыдерживающих нагревания (сыворотка крови, антибиотики, компоненты
питательных сред для бактерий и культур клеток)
3.Химические – 70% этиловый спирт, 5% спиртовой раствор йода, 2% раствор
хлорамина, 0,1% раствор перманганата калия, перекись водорода, окись этилена и
др.
Методы контроля эффективности стерилизации
Используют биологические индикаторы – известные микроорганизмы, наиболее
устойчивые к данному способу обработки:
- споры Bacillus stearothermophilus для контроля эффективности автоклавирования
- Bacillus subtilis – для контроля сухожаровой стерилизации
Физико-химические индикаторы – вещества, которые претерпевают видимые
изменения (изменяют цвет, агрегатное состояние и т.д.) только при соблюдении
правильного режима обработки.
Микробиологический контроль объектов, подвергшихся стерилизации в
повседневной практике не производится. Его заменяет косвенный контроль –
контроль работы стерилизаторов.
Для проведения микробиологического контроля производят посев кусочков
материала, смывов с предметов, подвергшихся стерилизации, на среды,
позволяющие обнаружить аэробные и анаэробные бактерии, грибы. Отсутствие
роста после 14 дней инкубации в термостате свидетельствует о стерильности
предмета
Физические методы.
2. Окислители(Н2О2 – 6%)
Если изменение цвета среды при росте кишечной палочки бывает недоостаточно
отчетливым, то рекомендуют отлить из пробирки 1 - 2 мл среды в фарфоровую
чашку и добавить 1 каплю 1 % спиртового раствора метилового красного (1 г
метилового красного, 62 мл спирта и 38 мл дистиллированной воды). При наличии
кишечной палочки жидкость принимает устойчивый малиновый или кирпично-
красный цвет, во всех остальных случаях - желтый, оранжевый или (редко)
красноватый, медленно исчезающий цвет.
• Антибиотики
По направленности действия химиотерапевтические препараты делят на:
1) противопротозойные;
2) противогрибковые;
3) противовирусные;
4) антибактериальные.
По химическому строению выделяют несколько групп химиотерапевтических
препаратов:
1) сульфаниламидные препараты (сульфаниламиды) – производные сульфаниловой
кислоты. Они нарушают процесс получения микробами необходимых для их жизни
и развития ростовых факторов – фолиевой кислоты и других веществ. К этой группе
относят стрептоцид, норсульфазол, сульфаметизол, сульфометаксазол и др.;
2) производные нитрофурана. Механизм действия состоит в блокировании
нескольких ферментных систем микробной клетки. К ним относят фурацилин,
фурагин, фуразолидон, нитрофуразон и др.;
3) хинолоны. Нарушают различные этапы синтеза ДНК микробной клетки. К ним
относят налидиксовую кислоту, циноксацин, норфлоксацин, ципрофлоксацин;
4) азолы – производные имидазола. Обладают противогрибковой активностью.
Ингибируют биосинтез стероидов, что приводит к повреждению наружной
клеточной мембраны грибов и повышению ее проницаемости. К ним относят
клотримазол, кетоконазол, флуконазол и др.;
5) диаминопиримидины. Нарушают метаболизм микробной клетки. К ним относят
триметоприм, пириметамин;
6) антибиотики – это группа соединений природного происхождения или их
синтетических аналогов.
ИЗМЕНЧИВОСТЬ
1.ЭПИГЕНЕТИЧЕСКАЯ
2.ГЕНОТИПИЧЕСКАЯ
Рекомбинантная(трансформация, трансдукция, конъюгация)
Мутация
Диссоциация – связана с ростом на одной и той же среде. Под влиянием
продуктов метаболизма образуются S-формы (гладкие)и R-
форм(шероховатые)
3. ФЕНОТИПИЧЕСКАЯ
I. Бактерицидные препараты
1. Ингибиторы синтеза клеточной стенки (пенициллины, цефалоспорины, другие
бета-лактамные антибиотики, ристомицин, циклосерин, бацитрацин, ванкомицин,
рифампицин). Препараты подавляют активность ферментов, участвующих в синтезе
пептидогликана, лишая клетку основного каркаса, а также способствуют активации
аутолитических процессов. Действуют только на делящиеся клетки.
Рациональная антибиотикотерапия должна строиться на основе знания
индивидуальных особенностей больного, течения заболевания, характера
возбудителя и свойств препарата. К ним можно отнести:
· химиотерапию, назначаемую строго по показаниям, т.е. только в тех случаях,
когда без нее нельзя обойтись;
· химиотерапию, назначаемую с учетом противопоказаний, например,
повышенной чувствительности или аллергической реакции к препаратам той или
иной группы. Выбор препарата для химиотерапии может проводиться в различных
вариантах возникающих ситуаций;
· при этиологически расшифрованных заболеваниях выбор препарата должен
определяться с учётом чувствительности возбудителя (антибиотикограмма),
выделенного от данного конкретного больного в результате бактериологического
исследования;
· при выделении возбудителя без определения его чувствительности к
химиопрепаратам, или при эмпирической инициальной химиотерапии заболевания
с не идентифицированным, но предполагаемым возбудителем выбор препарата для
химиотерапии должен основываться на показателях антибиотикочувствительности
соответствующих микроорганизмов - наиболее вероятных возбудителей данной
нозологической формы заболевания, по данным литературы, или при ориентации на
данные о региональной чувствительности тех или иных инфекционных агентов -
возбудителей заболевания;
·
· и проведение курсов антибиотикотерапии необходимой продолжительности вплоть
до стойкого закрепления лечебного эффекта;
·, рекомендованной для выбранного химиопрепарата (способ и кратность введения
препарата, длительность лечения), а также с учетом коэффициента увеличения
концентрации препарата в целях создания эффективных концентраций препарата
непосредственно в органах и тканях (примерно 4 МПК - минимальная подавляющая
концентрация, определённая, по возможности, методом серийных разведений);
· длительность приёма химиопрепаратов должна составлять как минимум 4-5
дней в целях профилактики формирования устойчивости возбудителя к данному
препарату, а также формирования бактерионосительства;
Капельные ядрышки — мелкие капельки аэрозоля (до 100 нм); высыхая, остаются в
воздухе во взвешенном состоянии и образуют устойчивую аэродисперсную систему.
В них частично сохраняется влага, поддерживающая жизнеспособность
микроорганизмов. Последние в составе капельных ядрышек могут переноситься на
значительные расстояния.
Обсеменение
–стафилококки
- энтерококки
- кишечные палочки
- протей
- клостридии и тд
– псевдомонады
- протей
- пенициллы
- аспергиллы
ВБИ могут вызываться более чем сотней видов УПМ. Чаще всего в их
этиологии играют роль представители следующих родов: Staphylococcus,
Streptococcus, Peptostreptococcus, Escherichia, Enterobacter, Klebsiella, Citrobacter,
Serratia, Proteus, Hafnia, Providencia, Pseudomonas, Haemophilus, Branhamella,
Acinetobacter, Moraxella, Alcaligenes, Flavobacterium, Vibrio, Propionibacterium,
Bacteroides, Fusobacterium, Bacillus, Mycobacterium, Eikenella, Mycoplasma,
Actinomyces, Candida, Cryptococcus, Pneumocysta.
Для возникновения ВБИ необходимо наличие следующих звеньев
инфекционного процесса:
источник инфекции (хозяин, пациент, медработник);
возбудитель (микроорганизм);
факторы передачи
восприимчивый организм
Источниками в большинстве случаев служат:
медицинский персонал;
носители скрытыми формами инфекции;
больные с острой, стёртой или хронической формой инфекционных
заболеваний, включая раневую инфекцию;
Посетители стационаров очень редко бывают источниками ВБИ.
Факторами передачи чаще всего выступают пыль, вода, продукты питания,
оборудование и медицинские инструменты.
Ведущими путями заражения в условиях ЛПУ являются контактно-бытовой,
воздушно-капельный и воздушно-пылевой. Также возможен парентеральный путь
(характерно для гепатитов В, С, D и др.)
Механизмы передачи инфекции: аэрозольный, фекально-оральный,
контактный, гемоконтактный
На развитие и течение оппортунистических инфекций влияет несколько
факторов, зависящих от свойств микроба, состояния организма и условий их
взаимодействия. Все оппортунистические инфекции развиваются на фоне снижения
иммунного статуса организма, что наблюдается у онкологических больных, больных
хроническими инфекционными заболеваниями, у лиц, перенесших обширные
оперативные вмешательства, у лиц преклонного воз- раста, недоношенных
младенцев, больных сердечно-сосудистыми заболеваниями с регионарными
нарушениями кровообращения (ишемия и некрозы тканей), при ожирении и сахарном
диабете, у больных, получающих иммунодепрессивную лекарственную те- рапию
(кортикостероидные гормоны, цитостатики, ряд антибиотиков и другие препараты), и
т.п.
Так как УПМ являются преобладающими представителями нормальной
микрофлоры организма человека, то подавляющее большинство оппортунистических
инфекций носит эндогенный характер. При целом ряде патологических состояний,
ведущих к снижению иммунореактивности организма, УПМ нормофлоры
приобретают способность преодолевать тканевые барьеры, в норме для них
непреодолимые, и транслоцироваться во внутреннюю стерильную среду организма.
Попадание УПМ во внутреннюю среду организма влечет колонизацию ими
различных органов и систем организма, что клинически проявляется в виде гнойно-
септического процесса различной локализации и степени тяжести.
Для оппортунистических инфекций характерны следующие особенности.
• Возбудители не имеют строго выраженного органного тропизма: один и тот
же вид может быть причиной развития различных нозологических форм (бронхитов, пневмоний, эмпием,
синуситов, отитов, менингитов, остеомиелитов, холециститов, пиелонефритов, конъюнктивитов, инфекции
госпитальным штаммам.
1) источника инфекции;
2) механизмов, путей и факторов передачи;
3) восприимчивости коллектива.
Различают фекалъно-оралъный, аэрогенный (респиратор-
ный), кровяной (трансмиссивный), контактный ивертикальный (от одного
поколения к другому, т.е. от матери плоду трансплацентарно) механизмы
передачи.
Патогенность и вирулентность
Оба понятия близки, но не идентичны. Патогенность — не абсолютная, а
относительная величина, поэтому для определения степени патогенности
возбудителя применяют термин «вирулентность».
Патогенность [от греч. pathos, болезнь, + genos, рождение] определяет
специфичность патологических процессов, вызываемых конкретным возбудителем,
что проявляется развитием соответствующего типа инфекционного заболевания
(кишечного, дыхательного и т.д.). Генотип патогена фенотипически проявляется его
вирулентными и токсигенными свойствами. Так, условно-патогенные
микроорганизмы способны вызывать заболевания лишь при значительных
нарушениях функциональных свойств местных и общих защитных факторов.
Характерными свойствами патогенных микроорганизмов являются специфичность
(способность вызывать определённую инфекционную болезнь после проникновения
в организм) и органотропность (способность предпочтительно поражать
определённые органы или ткани).
Вирулентность [от лат. virulentus, ядовитый] отражает степень
патогенности различных изолятов или штаммов конкретного патогенного вида.
Критерии вирулентности. К критериям, определяющим вирулентность
микроорганизмов, относят инфекционность, способность к колонизации,
инвазивность, токсигенность и способность к длительному персистированию. С
известным допущением столь внушительный набор факторов, определяющих
вирулентность, можно расценивать как «ответ» инфекционного агента на
многообразие защитных механизмов организма хозяина.
Инфекционность — собственно способность заражать макроорганизм.
Способность к колонизации — свойство заселять очаги первичного
инфицирования.
Инвазивность — способность проникать в ткани, лежащие за пределами
входных ворот инфекции, и размножаться в них.
Токсигенность — способность образовывать ядовитые вещества, вызывающие
болезнетворное действие.
Способность к персистированию — свойство длительно циркулировать либо
сохраняться в определённом очаге, что обусловлено способностью долгое время
противодействовать влиянию защитных факторов макроорганизма.
Летальная доза. За единицу измерения вирулентности принята летальная
доза (DL. от лат. dosis letalis) наименьшее количество патогенных
микроорганизмов или токсина, способное вызвать гибель определённого количества
лабораторных животных. На практике примет ют несколько производных от
величин DL.
DCL (dosis certe letalis) — количество микробов или токсина, вызывающее
гибель 100% лабораторных животных.
LD50 — количество патогенных микроорганизмов, способное вызывать гибель
50% экспериментально заражённых лабораторных животных. Применяют также
величины LD?0, LD75, LD90 и т.д.
Инфицирующая доза (ID [от англ. infectious dose]) — минимальное
количество патогенны микроорганизмов, способное вызвать развитие заболевания у
определённого количества лабораторных животных. По аналогии с летальным
эффектом определяют ID100, ID50 и т.д.
СМОТРИ 57 ВОПРОС
ферменты агрессии – факторы вирулентности патогенных бактерий:
Антигены бактерий
Антигены вирусов:
1) суперкапсидные антигены – поверхностные оболочечные;
2) белковые и гликопротеидные антигены;
3) капсидные – оболочечные;
4) нуклеопротеидные (сердцевинные) антигены.
Все вирусные антигены Т-зависимые.
материнских антител через плаценту, а в период грудного вскармливания - при поглощении ребенком антител,
содержащихся в молоке.
иммунокомпетентным клеткам, а бактерии и вирусы используют этот путь для своей транслокации через
эпителиальный барьер.
Благодаря ферментативной активности анаэробных бактерий в кишечнике происходит деконъюгация желчных кислот
с образованием дезоксихолиевой кислоты, токсичной для патогенных и условно-патогенных бактерий.
Муцин наряду с полисахаридами, продуцируемыми резидентными бактериями (в
частности, лактобактериями), образует на поверхности слизистых оболочек
выраженный гликоналикс (биопленку), который эффективно экранирует сайты
адгезии и делает их недоступными для случайных бактерий. Бокаловидные клетки
образуют смесь сиало- и сульфомуцинов, соотношение которых различается в
различных биотонах. Своеобразие состава микрофлоры в различных экологических
нишах в значительной степени определяется количеством и качеством муцина.
дают все эукариотические клетки. Именно таким образом внутрь клеток проникают
многие патогенные микроорганизмы. Однако в большинстве инфицированных
клеток отсутствуют механизмы (либо они слабы), обеспечивающие деструкцию
патогена. В процессе эволюции в организме многоклеточных сформировались
специализированные клетки, имеющие мощные системы внутриклеточного
киллинга, основной «профессией» которых является фагоцитоз (от греч. phagos -
пожираю, cytos - клетка) - поглощение частиц диаметром не менее 0,1 мкм (в
отличие от пиноцитоза - поглощения частиц меньшего диаметра и макромолекул) и
уничтожение захваченных микробов. Такими свойствами обладают полиморфно-
ядерные лейкоциты (в основном нейтрофилы) и мононуклеарные фагоциты (эти
клетки иногда называют профессиональными фагоцитами).
Ключевым событием для системы комплемента является его активация. Она может
происходить тремя путями: классическим, лектиновым и альтернативным (рис. 9.3).
Окончание табл.
9.2
Физико-химическая защита
.Иммунобиологическая защита
Фагоцитоз
Тромбоциты
Комплемент
Природа и характеристика комплемента. Комплемент является одним из важных
факторов гуморального иммунитета, играющим роль в защите организма от антигенов.
Он был открыт в 1899 г. французским иммунологом Ж. Борде, назвавшим его «алекси-
ном». Современное название комплементу дал П. Эрлих. Комплемент представляет со-
бой сложный комплекс белков сыворотки крови, находящийся обычно в неактивном
состоянии и активирующийся при соединении антигена с антителом или при агрега-
ции антигена. В состав комплемента входят 20 взаимодействующих между собой
белков, девять из которых являются основными компонентами комплемента; их
обозначают цифрами: С1, С2, СЗ, С4... С9. Важную роль играют также факторы В, D и
Р (пропердин). Белки комплемента относятся к глобулинам и отличаются между собой
по ряду физико-химических свойств. В частности, они существенно различаются по
молекулярной массе, а также имеют сложный субъединичный состав: C1-C1q, C1r, Cls;
СЗ-СЗа, СЗb; С5-С5а, С5b и т. д. Компоненты комплемента синтезируются в большом
количестве (составляют 5—10 % от всех белков крови), часть из них образуют
фагоциты.
Лизоцим
Интерферон
Лимфоциты составляют 20% клеток красного костного мозга, из них 3/4 приходятся
на развивающиеся и зрелые В-лимфоциты; встречаются также Т- и НК-клетки. В
ходе созревания В-лимфоциты контактируют с клетками эндоста, ретикулярными
клетками и концентрируются возле синусоидов, в просвет которых они мигрируют
по его завершении. При дифференцировке в геноме В-клеток происходит
реаранжировка, которая обеспечивает образование на их поверхности
иммуноглобулиновых рецепторов к разнообразным антигенам. Созревшие В-клетки
покидают костный мозг и заселяют В-зависимые зоны периферических органов
иммунной системы. Большая часть (75%) В-лимфоцитов, образовавшихся в костном
мозгу, здесь же погибают механизмом апоптоза в процессе отбора, включающего
положительную селекцию (выживание клеток с нужными рецепторами) и
отрицательную селекцию (гибель клеток с рецепторами к собственным антигенам).
Погибшие клетки захватываются макрофагами
АПК (ДК):
- Для ДК2 характерны маркёры лимфоцитов (CD2, CD5, CD7, мРНК α-цепи пре-
TCR).
Взаимодействие T- и B-лимфоцитов
2. Медиаторы воспаления и
иммуномодуляции: ФНО, ИЛ-1, ИЛ-3, ИЛ-
6, ИЛ-8, ИЛ-10, ИЛ-12, ИЛ-15,
интерферон, лизоцим, фактор активации
нейтрофилов, компоненты комплемента.
Гистогенез
Стволовая клетка крови Фагоцитируя антигенные вещества, макрофаги выделяют,
КОЕ-ГЭММ концентрируют, а затем выносят на плазмолемму их
КОЕ-ГМ активные химические группировки — антигенные
КОЕ-М детерминанты, а затем передают их на лимфоциты. Эта
Монобласт функция называется антиген-представляющей.
Промоноцит Посредством ее макрофаги запускают иммунные реакции,
Моноцит так как установлено, что большинство антигенных веществ
Макрофаг неспособно запускать иммунные реакции самостоятельно,
то есть действовать непосредственно на рецепторы
1. Они подразделяются лимфоцитов. Активированные макрофаги выделяют БАВ—
на фиксированные и монокины, которые оказывают регулирующее влияние на
свободные различные стороны иммунных реакций. Они принимают
(подвижные)
участие в заключительных стадиях иммунных реакций как
2. По функциональному гуморального, так и клеточного иммунитета. В гуморальном
состоянию иммунитете они фагоцитируют иммунные комплексы
макрофаги антиген-антитело, в клеточном иммунитете под влиянием
подразделяются на
резидуальные лимфокинов макрофаги приобретают киллерные свойства и
(неактивные)
Защитная
могут разрушать чужеродные, в том числе опухолевые
функцияимакрофагов проявляется в разных формах:
активированные. клетки.
неспецифическая защита — защита посредством фагоцитоза экзогенных и эндогенных частиц и
их внутриклеточного переваривания;
Антигены:
Иммунологическая стадия.
Патохимическая стадия.
Комплемент.
Активация комплемента описывается в цитотоксическом типе аллергических
реакций на конечных этапах активации, когда образовывались продукты,
оказывающие цитотоксическое действие. Они образуются и при данном типе
аллергических реакций и, очевидно, могут повреждать клетки, находящиеся рядом с
местом активации комплемента.
Однако основную роль играет образование промежуточных продуктов
компонентов комплемента 3, 4 и 5.
Очевидно, наиболее важную роль играет СЗ. Его больше всего содержится в
сыворотке крови — около 1 мг/мл. При участии этого компонента происходит
классический путь активации (иммунным комплексом) и альтернативный (не-
иммунный), о котором будет сказано позже.
Через СЗb компонент комплемента обеспечивается так называемое иммунное
прилипание комплекса к фагоцитам (у человека — к нейтрофилам, моноцитам,
макрофагам печени и селезенки), что способствует фагоцитозу комплекса. Он может
вызывать разрушение больших комплексов.
Другой его фрагмент — СЗа — играет роль анафилатоксина, который стимулирует
освобождение гистамина из тучных клеток и базофилов. Свойствами
анафилатоксина обладают также С5а и С4а.
Все эти факторы усиливают то или иное звено воспалительной реакции. Поэтому
возникло представление, что роль комплемента заключается в стимуляции развития
воспаления, в подключении к специфической (иммунной) реакции неспецифи-
ческого защитного механизма, каковым является воспалительный процесс, т. е.
комплемент является как бы системой усиления защитной функции иммунной ре-
акции.
1) инфекционную аллергию;
2)контактную аллергию;
4) аутоаллергические реакции;
Серологические реакции
М
75. Реакция преципитации: сущность, условия и способы постановки и учета,
Е диагностическое значение. Использование при определении уровня
иммуноглобулинов в крови.
Т
76. Реакция агглютинации: сущность, условия и способы постановки и учета,
диагностическое значение.
О
77. Реакция непрямой гемагглютинации: сущность, условия и способы
постановки и учета результатов, диагностическое значение.
Д
78. Реакция торможения гемагглютинации: сущность, применение,
диагностическое значение.
И
79. Реакция связывания комплемента: сущность, условия, направления,
способы постановки и учета, диагностическое значение.
Ч
80. Реакция нейтрализации токсинов и вирусов: сущность, способы постановки
и учета, диагностическое значение.
К
А
81. Иммунолюминесцентный метод: сущность, направления, способы
постановки и учета, диагностическое значение.
Проверка результата пробы производится не ранее чем через 48 часов, лучше всего на
третий день, самое позднее — через одну неделю после аппликации. Индурация
отмечается, измеряется, документируется и оценивается.
Бактериофаги
Пробиотики
Моноклональные антитела
Как известно, антитела по своей структуре и функциям очень разнородны. Каждый
В-лимфоцит синтезирует свой класс, подкласс, аллотип иммуноглобулинов.
Поэтому в ответ на введение антигена в крови появляются поликлональные
антитела, т.е. смесь иммуноглобулинов, синтезированных множеством клонов
активированных В-лимфоцитов.
Иммуномодуляторы
Очень много вакцин было создано нашими учеными: против сыпного тифа,
против гриппа, против бруцеллёза, против оспы. При определенных заболеваниях
живая вакцина это единственный прививочный препарат, являющиеся
эффективным. Живая вакцина создает иммунитет на длительное время.
Предприятие по
Должно быть разработано, построено и функционировать
фракционированию
в соответствии с GMP
плазмы
Стерилизующая То же
фильтрация и
асептическое заполнение
упаковок
Лиофильное высушивание
То же
(когда необходимо)