Оглавление

1. ВВЕДЕНИЕ .................................................................................................. 5
2. ТЕХНИКА БЕЗОПАСНОСТИ...................................................................... 5
2.1. Правила работы с кислотами и щелочами ............................................. 6
2.2. Правила пожарной безопасности ........................................................... 7
2.3. Эксплуатация электрооборудования...................................................... 8
2.4. Правила работы под уменьшенным давлением ..................................... 9
2.5. Оказание первой помощи....................................................................... 9
3. ЛАБОРАТОРНАЯ ПОСУДА И ОБОРУДОВАНИЕ................................... 12
3.1. Материалы для химической посуды .................................................... 12
3.2. Классификация лабораторной посуды ................................................. 16
3.3. Использование, мытье и хранение химической посуды в
лаборатории ....................................................................................................... 27
4. ПЕРЕГОНКА ОРГАНИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ ............................................ 29
4.1. Простая перегонка................................................................................ 29
4.2. Перегонка при пониженном давлении (вакуумная перегонка) ............ 32
4.3. Фракционная перегонка ....................................................................... 35
4.4. Перегонка с водяным паром................................................................. 37
4.5. Обезвоживание растворителей............................................................. 38
4.6. Лабораторная работа «Очистка этанола методом перегонки» ............. 41
4.7. Лабораторная работа «Очистка дихлорметана методом перегонки»... 42
5. ЭКСТРАКЦИЯ ........................................................................................... 44
5.1. Общие сведения ................................................................................... 44
5.2. Жидкостно-жидкостная экстракция..................................................... 44
5.3. Выбор растворителя для экстракции.................................................... 47
5.4. Однократная экстракция ...................................................................... 48
5.5. Многократная экстракция .................................................................... 49
5.6. Методика проведения экстракции ....................................................... 53
5.7. Экстракция БАС................................................................................... 57
3
 5.8. Лабораторная работа «Выделение вещества методом экстракции» .... 59
6. ХРОМАТОГРАФИЯ................................................................................... 61
6.1. Общие закономерности ........................................................................ 61
6.2. Тонкослойная хроматография.............................................................. 65
6.3. Лабораторная работа «Анализ органических соединений методом
ТСХ» .................................................................................................................. 77
7. ФИЛЬТРОВАНИЕ ...................................................................................... 81
7.1. Фильтрующие материалы .................................................................... 81
7.2. Фильтрование при атмосферном давлении .......................................... 83
7.3. Фильтрование при пониженном давлении ........................................... 85
8. ПЕРЕКРИСТАЛЛИЗАЦИЯ ........................................................................ 88
8.1. Выбор растворителя ............................................................................. 88
8.2. Перекристаллизация из органического растворителя .......................... 90
8.3. Лабораторная работа «Очистка вещества методом
перекристаллизации» ......................................................................................... 92
9. СПЕКТРОФОТОМЕТРИЯ ......................................................................... 93
9.1. Общие закономерности ........................................................................ 93
9.2. Закон Бугера-Ламберта-Бера................................................................ 96
9.3. Пробоподготовка.................................................................................. 97
9.4. Лабораторная работа «Определение концентрации комплексов
железа» ............................................................................................................... 98
СПИСОК РЕКОМЕДУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ .............................................101

4
 1. ВВЕДЕНИЕ

Освоение таких сложных и многогранных дисциплин как «Химия и

технология биологически активных соединений» было бы неполным без
практической составляющей. Лабораторные работы позволяют студентам не
только подкрепить теоретический материал, но и приобрести навыки работы в
химической лаборатории. В частности, данное учебно-методическое пособие
призвано быть настольной картой для освоения студентами методов безопасной
работы в лаборатории, связанных с выделением, очисткой и идентификацией
биологически активных соединений, а также подготовкой реагентов к
проведению тонких синтезов. Каждый метод приведен в отдельном разделе и
содержит подробное описание соответствующей лабораторной работы с
примером ее оформления в лабораторном журнале. В конце разделов
приведены контрольные вопросы для проверки степени освоения изложенных
методов. Студент должен не только знать алгоритм действий, но и понимать,
чем обусловлен тот или иной шаг.
Авторский коллектив надеется, что данное пособие поможет студентам
получить базовые навыки работы в химической лаборатории.

2. ТЕХНИКА БЕЗОПАСНОСТИ

Работа в лаборатории сопряжена с определенными рисками, поэтому для

допуска к лабораторному практикуму студенты должны пройти инструктаж по
технике безопасности и знать ее правила. Несоблюдение правил техники
безопасности может причинить вред здоровью не только самому нарушителю
правил, но и окружающим его людям. В зависимости от вида работ меры
предосторожности могут отличаться, однако существуют и общие правила,
актуальные в любой ситуации.
1. Любой человек, находясь в лаборатории, должен быть в лабораторном
халате, застегнутом на все пуговицы. Длинные волосы собираются в хвост
(пучок), который прячется под халат. Нельзя работать в лаборатории одному,
поскольку при несчастном случае некому будет оказать помощь и
ликвидировать последствия нештатной ситуации.
2. В лаборатории запрещено бегать, размахивать руками и совершать
резкие движения, нельзя принимать еду и питье. Нельзя пробовать химические
реагенты на вкус, наклоняться над сосудом и вдыхать пары полной грудью.
Нюхать вещества можно, лишь аккуратно направляя к себе его пары легким

5
движением руки.
3. Каждый работающий в лаборатории должен знать, где в лаборатории
находятся средства пожаротушения: огнетушитель, песок, асбестовое одеяло, а
также аптечка для оказания первой помощи.
3. Студенту следует быть внимательным и аккуратным. В случае
возникновения любых нештатных ситуаций следует немедленно сообщить об
этом преподавателю. Категорически запрещается оставлять действующие
приборы и установки без присмотра.
4. Приступая к работе, необходимо заранее изучить свойства
используемых веществ, обсудить с преподавателем план работы и схему
установки.
5. Все емкости, в которых хранятся вещества, должны иметь этикетки с
названиями. Бутыли и склянки следует одной рукой поднимать за горлышко, а
второй поддерживать за дно снизу.

2.1. Правила работы с кислотами и щелочами

При контакте с щелочами и сильными кислотами возникают химические
ожоги различной степени тяжести, раздражение слизистых оболочек и верхних
дыхательных путей, поражения внутренних органов.
Степень поражения зависит от концентрации, температуры, времени
воздействия. Наиболее опасны следующие кислоты: серная, азотная, соляная,
хлорсульфоновая, трифторуксусная, плавиковая. Кислоты, применяемые
одновременно, усиливают действие друг друга. Очень опасны ожоги хромовой
смесью. Щелочи опасны как в безводном виде, так и в концентрированных
растворах.
Некоторые кислоты (например, хлорсульфоновая) реагируют с водой со
взрывом. Воздействие кислот на металлы, стоящие левее водорода в ряду
напряжения, сопровождается выделением водорода, что может приводить к
взрыву.
При работе с кислотами и щелочами следует придерживаться следующих
правил:
1. Все работы следует проводить в защитных очках и перчатках и только в
вытяжном шкафу.
2. Разбавление кислот и растворение твердых щелочей можно проводить,
порциями добавляя кислоту или щелочь в холодную воду при постоянном
перемешивании. При сильном разогреве раствора процесс прекращают,
дожидаются охлаждения и только потом прибавляют следующую порцию.
6
Твердые щелочи берут шпателями или щипцами (пинцетом), но не руками. При
смешивании кислот приливают кислоту с большей плотностью к кислоте с
меньшей плотностью. Нейтрализацию проводят только после разбавления.
3. Нельзя хранить кислоты и щелочи рядом. Сосуды с
концентрированными кислотами нельзя закрывать резиновыми пробками.
Сосуды с концентрированными щелочами закрывают только резиновыми или
пластиковыми пробками.
4. Запрещается слив в канализацию концентрированных кислот и щелочей.
Отработанные кислоты и щелочи собирают в специальную посуду,
нейтрализуют до рН = 7, потом сливают в канализацию.

2.2. Правила пожарной безопасности

Многие реактивы, как твердые, так и жидкие, являются горючими и
легковоспламеняющимися веществами. Некоторые из них взрывоопасны или
образуют взрывоопасные смеси, детонирующие при определенных условиях.
Пожар может возникнуть при контакте сильных окислителей (например,
перманганат или дихромат калия) с восстановителями (водород, фосфор,
дерево, бумага, жиры, масла, тряпки), искры от статического электричества или
неисправной электропроводки, контакта воспламеняющихся паров с горячими
поверхностями. Необходимо соблюдать следующие правила:
1. Не оставлять без присмотра работающие установки и приборы.
2. При работе с легковоспламеняющимися веществами (например, эфиром,
петролейным эфиром, ацетоном, бензолом и др.) источники огня и сильного
нагрева должны быть на безопасном расстоянии. Нагревать такие вещества
можно только в вытяжном шкафу в колбах, снабженных водяными
холодильниками. На лабораторном столе или в вытяжном шкафу должны
находится только необходимые на текущий момент растворители в закрытой
таре объемом не более 1 л.
3. Нельзя проводить перегонку досуха, так как многие вещества (в первую
очередь простые алифатические и циклические эфиры) образуют
взрывоопасные пероксиды. Перед использованием таких растворителей в
работе их необходимо проверить на наличие пероксидов.
4. Запрещено выбрасывать легковоспламеняющиеся вещества в раковины
и мусорные ведра.
5. При окончании работы в лаборатории дежурные должны выключить
электричество, вентиляцию, воду и проверить состояние помещения. После
чего сдать помещение преподавателю.
7
 При возникновении пожара необходимо оповестить преподавателя,
вызвать пожарную охрану по телефону 101 или 112 и приступить к ликвидации
возгорания. По возможности следует выключить все электроприборы,
предварительно убедившись, что это не приведет к новой опасности. Емкости с
горючими жидкостями нужно отставить на безопасное расстояние. Очаг
возгорания можно накрыть асбестовым одеялом, гасить огонь огнетушителем
или песком. При использовании пенного огнетушителя необходимо обесточить
помещение. Щелочные металлы нельзя тушить углекислотным огнетушителем,
только песком! Использование воды, как правило, приводит лишь к
увеличению площади пожара.
Для приведения в действие углекислотного огнетушителя необходимо
направить раструб на огонь снизу и отвернуть вентиль до отказа, раструб не
трогать во избежание обморожения. В случае пенного огнетушителя рукоятку
поднимают вверх и перекидывают до отказа, огнетушитель переворачивают и
направляют струю на огонь. Если ликвидировать или локализовать возгорание
не удается, если произошло задымление помещения и возникла угроза для
жизни, то необходимо провести организованную эвакуацию.
При загорании на человеке одежды его нужно быстро накрыть асбестовым
одеялом или халатом, чтобы исключить доступ воздуха к огню. Нельзя давать
человеку бежать, это только усилит пламя, при необходимости
запаниковавшего человека нужно повалить на пол. Пламя на человеке можно
потушить обливанием водой.

2.3. Эксплуатация электрооборудования

Электрический ток является источником повышенной опасности.
Опасность поражения зависит не только от напряжения, но и влажности,
характера помещения и одежды. Поражения бывают двух видов: электрический
удар и электротравма.
Электрический удар возникает при непосредственном контакте человека с
токоведущей частью сети. В первый момент, когда сопротивление тела еще
велико, а поражающий ток мал, удар проявляется в незначительной судороге
(обычно пальцев рук). Если в этот момент человек не успел освободиться от
тока, сопротивление его тела падает, а поражающий ток увеличивается, что
усиливает сокращение мышц – человек уже не может освободиться
самостоятельно. Необходимо как можно быстрее обесточить пострадавшего.
Для этого нужно выключить рубильник, подводящий ток к месту поражения,
(при наличии) или физически разорвать контакт. В последнем случае лучше
8
использовать деревянную палку (швабру). Прикасаясь к пораженному человеку
напрямую, высока вероятность замкнуть цепь еще и на себя. Электротравма
проявляется в виде ожога или электрометаллизации. Поражение возникает при
контакте с отдельными узлами и частями электроприборов, неизолированными
или с поврежденной изоляцией проводами.
Помимо поражения электрическим током, нарушение правил эксплуатации
электроприборов приводит к возникновению пожаров и взрывов. Поэтому
перед включением прибора в сеть необходимо убедиться в целостности
изоляции, в исправности самого прибора. При отключении прибора из розетки
нужно держать за вилку, а не за провод. Не следует одновременно касаться
включенного в сеть прибора и металлических конструкций. Нельзя оставлять
приборы без присмотра!
Использование высокого напряжения и водных буферных растворов
создает повышенную опасность поражения электрическим током. Это
относится в первую очередь к работе с электрофорезом. На включенном
приборе следует размещать предупреждающую табличку.
При работе на центрифуге следует тщательно уравновешивать ротор перед
включением. Крышка центрифуги должна быть снабжена исправной защитной
блокировкой доступа к вращающемуся ротору.

2.4. Правила работы под уменьшенным давлением

При работе с вакуумом следует придерживаться следующих правил:
1. Перед началом любых работ под уменьшенным давлением обязательно
надевают защитные очки.
2. Запрещается вакуумирование плоскодонных колб. Только толстостенная
посуда, такая как колба Бунзена и вакуум-эксикатор, способны выдержать
небольшой вакуум, создаваемый водоструйным насосом. Перед
использованием вся стеклянная посуда тщательно проверяется на наличие
трещин, «звездочек» и сколов. Поврежденную посуду при пониженном
давлении использовать запрещено.
3. После перегонки в вакууме нельзя соединять прибор с атмосферой, пока
он не охладился до комнатной температуры. Впуск воздуха в нагретый прибор
может привести к разрушению стекла или детонации образовавшейся смеси
паров перегоняемого вещества с воздухом!

2.5. Оказание первой помощи

В каждой лаборатории находится аптечка для оказания первой помощи, а
9
ее расположение должен знать каждый работающий в лаборатории. Аптечка
содержит бинты, гигроскопическую вату, набор пластырей, жгут, спиртовой
раствор иода, раствор перекиси водорода, бикарбонат натрия, борную кислоту,
мазь от ожогов.
При порезах стеклом нужно обязательно удалить осколки из раны, при
необходимости промыть водой. Убедившись в отсутствии осколков пораненное
место обрабатывают (вокруг, но не саму рану!) спиртовым раствором иода и
перевязывают. При сильном загрязнении раны ее обрабатывают раствором
перекиси водорода.
В случае обильного кровотечения из раны на конечности следует выше
раны (примерно на 5 см) наложить жгут, засечь время и вызвать врача. Жгут
нельзя держать более часа! При сильном кровотечении в других местах рану
туго перебинтовывают стерильной марлей.
При термических ожогах к пораженному месту рекомендуется немедленно
приложить ватный тампон, смоченный разбавленным в три раза водой спиртом.
Если ожог вызван попаданием горячего вещества, то сначала нужно снять это
вещество ватой, смоченной водой или спиртом! При сильных ожогах рану
смазывают мазью от ожогов и перевязывают стерильным бинтом. За
исключением ожогов 1 степени (покраснение без пузырей, небольшой отек)
пострадавшего направляют к врачу. Сильные ожоги могут осложнятся шоком,
который может сам по себе привести к смерти. В случае шока необходимо
вызвать скорую помощь (по телефону 103 или 112). Пострадавшего уложить,
голову повернуть набок, ослабить одежду и накрыть одеялом (в аптечке
находится специальное изотермическое покрывало, в данном случае им
укрывают серебристой стороной внутрь).
При ожогах кислотой нужно немедленно промыть обожженное место
большим количеством проточной прохладной воды, затем промыть 3%
раствором бикарбоната натрия и смазать мазью от ожогов.
При попадании щелочи также обильно промывают пораженный участок
водой, затем 2% раствором борной кислоты, обрабатывают мазью от ожогов.
Крайне опасны ожоги глаз, которые возникают даже в случае
разбавленных кислот и щелочей! В таком случае глаза обильно промывают
водой, затем 1% раствором бикарбоната натрия или борной кислоты для
кислоты и щелочи, соответственно. Затем глаза снова промывают водой, при
необходимости цикл повторяют. При поражении глаз обращение к врачу
должно быть обязательным и немедленным!
Если человек случайно вдохнул пары или газ, почувствовал недомогание,
10
ему необходимо выйти (с сопровождением!) на свежий воздух.
При отравлении хлором или бромом пострадавшего выносят на свежий
воздух и применяют искусственное дыхание. Если человек в сознании, то
применяют ингаляцию нашатырным спиртом и полоскание горла раствором
пищевой соды. Аналогично действуют и при отравлении аммиаком, только
ингаляцию проводят 1% раствором пищевой уксусной кислоты.
При потере сознания пострадавшего нужно уложить (голову высоко не
поднимать, лучше положить набок), ослабить одежду, обеспечить приток
свежего воздуха, дать понюхать ватку, смоченную нашатырным спиртом. Когда
человек придет в сознание, дать ему горячий чай или кофе.
При остановке дыхания (например, в случае поражения электрическим
током) проводят искусственное дыхание до восстановления или прибытия
скорой помощи.
При переломах накладывают шину, делают фиксирующую повязку и
отправляют пострадавшего в травмпункт.

11
 3. ЛАБОРАТОРНАЯ ПОСУДА И ОБОРУДОВАНИЕ

3.1. Материалы для химической посуды

В лабораторной практике используется множество различных
конструкционных материалов, однако самым распространенным из них
является стекло, которое представляет собой сплав, главным образом
состоящий из диоксида кремния и различных силикатов (табл. 3.1). Стекло не
имеет ярко выраженной кристаллической решетки, хотя и состоит из отдельных
микрокристаллических структур, беспорядочно рассредоточенных в толще
материала. Вследствие этого, оно обладает следующими свойствами:
изотропностью (свойства материала одинаковы во всех направлениях),
отсутствием спайности (при раскалывании образуется «раковистый» излом) и
отсутствием строго определенной температуры плавления. В отличие от
бытового стекла, лабораторные стекла должны обладать рядом особенностей.
Одним из самых важных параметров является их способность противостоять
разрушающему действию агрессивных сред. В целом, все стекло обладает
высокой химической стойкостью, однако слабее всего противостоит щелочам.
Добавки оксидов щелочных и щелочноземельных металлов, а также некоторых
других окисей, решают данную проблему.
Другим важным свойством химических стекол является их низкий
коэффициент линейного термического расширения (КЛТР), поскольку ряд
процессов при химическом синтезе проводится при высоких температурах.
КЛТР — это отношение увеличения длины образца стекла при нагревании на
1 °С к его изначальной длине. С учетом того, что в установках для синтеза
зачастую присутствует множество соединений, низкий КЛТР позволяет
проводить процессы при нагревании, не опасаясь разрушения стеклянных
деталей.
В состав различных марок лабораторного стекла, кроме оксидов натрия и
кальция входят оксид калия, магния, и алюминия. В некоторые стекла также
входят оксиды цинка, свинца, бария и циркония. Наиболее широко в
лабораторной практике применяется боросиликатное стекло, которое содержит
13% оксида бора в своем составе. Такое стекло обладает достаточной
термостойкостью, малым КЛТР равным 3.3×10-6 К-1, высокой прочностью и
химической стойкостью. Другим важным достоинством боросиликатных стекол
является простота их обработки горячими способами, благодаря чему
лабораторная посуда из данной марки стекла стала широкодоступной.
В лабораториях также встречается посуда, изготовленная из
12
молибденового стекла, которое было так названо поскольку его КЛТР имеет
близкое значение с таковым у молибдена, что позволяет давать согласованные
спаи с ним и применять его в электронике. Данное стекло также содержит
оксид бора в своем составе, однако по сравнению с боросиликатным стеклом
3.3 имеет более высокий КЛТР. На сегодняшний день лабораторная посуда из
молибденового стекла практически полностью вытеснена изделиями из
боросиликатного стекла 3.3.
Кварцевое стекло является самым термостойким стеклом c очень высокой
долговременной рабочей температурой. Оно обладает крайне низким КЛТР, что
позволяет использовать такое стекло для приборов и сосудов, работающих при
температурах более 1000 °С. Благодаря низкому содержанию примесей,
кварцевое стекло является прекрасным материалом для ампул, используемых в
ЯМР спектроскопии, в частности для регистрации борных спектров. По этой же
причине, кварцевое стекло хорошо пропускает ультрафиолетовое, видимое и
инфракрасное излучение, и широко применяется в изготовлении кювет для
спектроскопии и деталей лабораторных оптических приборов. Недостатком
такого стекла является его низкая стойкость к действию щелочей, в которых
оно достаточно быстро растворяется.
Помимо этого, в лабораторной практике активно применяется и «простое»
натрий-кальциевое стекло, преимущественно используемое в быту и
строительстве. Такое стекло не является термостойким, однако имеет низкую
стоимость. Из такого стекла изготавливается мерная посуда, пипетки Пастера,
тара для хранения реактивов.
Особое место в лабораторной практике занимает свинцовое стекло.
Благодаря его высокой оптической плотности и способности к преломлению
света, свинцовое стекло нашло применение в оптических приборах, например, в
рефрактометрах. Помимо этого, данное стекло частично защищает от радиации,
и изделия из него применяются в радиохимии. Свинцовое стекло является
достаточно мягким, поэтому с изделиями из него стоит обращаться бережно
для предотвращения механических повреждений.
При работе со стеклянной посудой необходимо помнить, что стекло
обладает значительной хрупкостью. Поэтому при использовании стеклянных
предметов и их хранении нужно сделать все возможное, чтобы избежать порчи
посуды и травм от разбитого стекла.
Помимо стекол, в лаборатории используется множество изделий из
полимеров. Наиболее часто применяются такие пластики как полиэтилен (PE),
полипропилен (PP), полистирол (PS), а также фторопласты –
13
политетрафторэтилен (PTFE), поливинилиденфторид (PVDF),
политрифторхлорэтилен и их сополимеры. Среди эластомеров широко
применяются резины и полиорганосилоксаны, самыми распространенными из
которых являются бутидиеновый (IIR) и силиконовый (VMQ) каучуки. По
сравнению со стеклом изделия из полимеров обладают более
привлекательными механическими характеристиками, однако имеют более
низкую химическую стойкость, особенно в отношении органических
растворителей, однако фторопласты обладают исключительной химической
стойкостью (табл. 3.2). Термическая устойчивость полимеров также уступает
стеклу (табл. 3.3). Таким образом, перед применение пластика или эластомера в
работе следует учитывать условия проведения процесса. Ряд изделий может
быть выполнен из данных материалов целиком, например, центрифужные
пробирки, пробки, наконечники для автоматических пипеток. Часто полимеры
применяются в составе стеклянной посуды как составные части (кран
делительной воронки, лопасти мешалки, уплотнения и т.д.).
Таблица 3.1. Свойства некоторых стекол, применяемых в лаборатории.
Максимальная
Содержание Температура
КЛТР Плотность, рабочая
Вид стекла диоксида размягчения,
×10-6 К-1 г/см3 температура,
кремния, % °С
°С
Кварцевое
0.6 99.5 2.20 1000 1680
стекло
Боросиликатное
3.3 81 2.23 500 825
стекло 3.3
Электровакуум
ное стекло 5 68 2.29 440 720
(молибденовое)
«Простое»
натрий-
9 68 2.54 400 650
кальциевое
стекло
Свинцовое
12 45 4 260 445
стекло

Для отдельных операций в лабораторной практике также применяют

изделия из фарфора, который представляет собой керамический непрозрачный
материал, получаемый путем обжига смеси пластичной глины, каолина,
полевого шпата и кварца. Фарфор характеризуется высокой прочностью и
химической стойкостью. КЛТР фарфора составляет 4-7×10-6 К-1, что сравнимо
14
со значениями КЛТР для стекол. Главное достоинство фарфора заключается в
его высокой термической стойкости и огнеупорности. С посудой из данного
материала можно работать в муфельной печи с температурой до 1000 °С. При
этом изделия выдерживают множество циклов «нагрев-охлаждение». К
недостаткам фарфора относятся его хрупкость и высокая стоимость.
Таблица 3.2. Химическая стойкость некоторых полимеров. 1 – высокий уровень
стойкости, 2 – ограниченная стойкость, 3 – отсутствие стойкости.
Пластики Эластомеры
Среда
PE PP PS PVDF PTFE IIR VMQ
Вода 1 1 1 1 1 1 1
NaOH (насыщ. р-р) 1 1 1 2 1 3 3
Азотная кислота (конц.) 3 3 3 2 2 2 3
Серная кислота (конц.) 3 3 3 3 2 3 3
Соляная кислота (конц.) 1 1 1 1 1 2 2
Лед. уксусная кислота 1 1 2 1 1 1 2
Царская водка 3 3 3 2 1 3 3
Ацетон 2 1 3 2 1 1 2
Бутилацетат 2 2 3 1 1 2 2
Гексан 1 1 1 1 1 3 3
Диметилформамид 1 1 3 3 1 1 1
Диоксан 1 2 3 2 1 3 2
Диэтиловый эфир 3 3 2 1 1 2 2
Тетрагидрафуран 2 3 3 2 1 3 2
Толуол 2 2 3 1 1 3 3
Метанол 1 1 1 1 1 1 1
Изопропанол 2 2 1 1 1 1 1
Пиридин 1 2 2 2 1 3 3
Хлороформ 3 2 3 1 1 3 3
Тетрахлорметан 3 3 3 1 1 3 3

Таблица 3.3. Термическая стойкость некоторых полимеров.

Пластики Эластомеры
Параметр
PE PP PS PVDF PTFE IIR VMQ
Макс. рабочая температура, °С 90 100 75 140 250 100 225

В редких случаях лабораторная посуда может быть изготовлена из

металлических материалов, в частности из драгоценных металлов. Такая посуда
применяется в лабораториях для решения узкоспециализированных задач.

15
 3.2. Классификация лабораторной посуды
По своему назначению лабораторная посуда может быть разделена на
посуду общего назначения, мерную и специального применения. К первой
группе можно отнести пробирки, стаканы, воронки, пипетки Пастера,
плоскодонные и круглодонные колбы, эксикаторы, холодильники.
Пробирки представляют собой цилиндрические сосуды с круглым,
коническим или плоским дном. Они могут быть изготовлены из всех видов
стекол и применяются для отбора проб химических веществ, их
кратковременного хранения, а также проведения некоторых химических
реакций в малых объемах. В органическом синтезе пробирки чаще всего
используются для отбора фракций в ходе колоночной хроматографии. Для этих
целей хорошо подходят пробирки, имеющие шлиф, позволяющий закрывать их
стандартными пробками, предотвращая испарение летучих жидкостей и
попадание пыли, а также градуировку, которая позволяет оценить объем
отбираемой пробы. Пробирки также могут быть изготовлены из пластиков и, в
основном, применяются для центрифугирования. Они, как правило, снабжены
взаимозаменяемой винтовой крышкой или встроенной пробкой-колпачком и
имеют градуированную шкалу. Среди них наибольшее распространение
получили центрифужные пробирки объемом 1.5, 2, 15 и 45 мл, которые
совместимы практически со всеми современными центрифугами. При
необходимости сегодня доступны центрифужные пробирки других объемов.
Также они часто применяются в лаборатории для временного хранения твердых
и жидких веществ. В этом случае перед применением необходимо учесть
коррозионную стойкость материала пробирки к помещаемому образцу.
Химические стаканы сегодня преимущественно изготавливают из
боросиликатного стекла 3.3, полипропилена и фарфора. В современной
лаборатории все они имеют носик для переливания жидкости и
приблизительную мерную шкалу. Чаще всего, встречаются стаканы
вместимостью 5, 10, 25, 50, 100, 150, 250, 400, 600, 800, 1000, 2000, 3000 и 5000
мл в двух возможных исполнениях – низкие и высокие. Стаканы из стекла
могут быть использованы для проведения некоторых химических реакций и
перекристаллизации веществ. При этом данные процессы не должны
сопровождаться выделением опасных и легковоспламеняющихся паров.
Стаканы из полипропилена могут быть использованы для взвешивания твердых
веществ и для отбора некоторых жидкостей. Фарфоровые стаканы применятся
для приготовления растворов, в ходе которого происходит сильное нагревание.
Не рекомендуется использовать стаканы для длительного хранения реактивов.
16
 Также для отбора небольшого количества жидкостей в лаборатории
используются пипетки Пастера. Они могут быть изготовлены как из стекла, так
и из полиэтилена. Последние имеют встроенную грушу и в основном
предназначены для работы с водными растворами. Стеклянные пипетки
Пастера можно использовать для отбора органических растворителей и
растворов веществ в них. Для них следует использовать съемную грушу,
которая не должна разлагаться парами отбираемой жидкости.
Для переливания жидкостей и пересыпания твердых веществ из одной
емкости в другую применяют простые воронки (Рис. 3.1в). Они представляют
собой конус с широким горлом и узкой трубкой с обратной стороны. Сегодня
чаще всего их изготавливают из боросиликатного стекла 3.3, простого стекла и
полипропилена. Они используются для переливания жидкостей из одного
сосуда в другой. В случае сыпучих веществ наиболее удобными являются
воронки с более широкой трубкой. Крайне удобными являются воронки с
шлифом (Рис. 3.1г). Простые воронки также применяются для фильтрования
суспензий и для возгонки некоторых веществ. Чаще всего встречаются воронки
диаметром верхней части 25, 36, 56, 75, 100 и 250 мм, однако при
необходимости доступны воронки большего размера.

а б
Рисунок 3.1. Воронки: а – делительная; б – капельная; в – простая; г – простая
с керном; д – воронка Бюхнера

17
 Таблица 3.4. Классы пористости
стеклянных фильтров.
Класс Диаметр пор,
Обозначение
пористости мкм
5 1-1,6 ПОР1,6
4 10-16 ПОР16
3 16-40 ПОР40
2 40-100 ПОР100
1 100-160 ПОР160
Рисунок 3.2. Воронка Шотта 0 160-250 ПОР250
00 250-500 ПОР500

Воронки Бюхнера представляют собой фарфоровые или

полипропиленовые изделия, снабженные узким носиком без керна и
перегородкой с множеством отверстий (Рис. 3.1д). Они применяются для
вакуумного фильтрования, при котором на перегородку помещается
фильтровальная бумага. Для фильтрования под вакуумом также широко
используется воронка Шотта, представляющая собой воронку с впаянным в нее
пористым стеклянным фильтром (Рис. 3.2). Выделяют 7 классов пористости
стеклянных фильтров, каждому из которых соответствует определенный
диаметр пор (табл. 3.4). Наиболее распространены в лабораторной практике
фильтры, принадлежащих к классам пористости с 1 по 4. Для соединения
фильтра со стандартной посудой применяются воронки Шотта с коническим
керном. Фильтры, не снабженные керном, можно применять для фильтрования
под атмосферным давлением, а также под вакуумом с использованием
специальных эластичных уплотнителей. Фильтры Шотта могут применяться
для фильтрования агрессивных сред.
Для равномерной порционной подачи жидкостей в реакционную смесь
применяются капельные воронки конической или цилиндрической формы
(Рис. 3.1б). Такая воронка снабжена краном и шлифом для использования со
стандартной посудой. Кран может иметь специальную насечку, позволяющую
обеспечить более точную подачу реагента. Если кран изготовлен из стекла, то
перед применением на него необходимо нанести небольшое количество
подходящей смазки, притереть кран и проверить герметичность соединения. В
случае крана из фторопласта дополнительная смазка не требуется. Для

18
компенсации разницы давления в капельных воронках может быть впаяна
обводная трубка. Делительные воронки используются для проведения
экстракции или разделения двух несмешивающихся жидкостей. От капельной
воронки они отличаются отсутствием керна (Рис. 3.1а). Наиболее удобными
являются делительные воронки конической формы, которые можно быстро
зафиксировать в специальных кольцах на штативе.

а б в г д е ж з и
Рисунок 3.3. Холодильники: а – воздушный; б – шариковый воздушный;
в – холодильник Либиха; г – шариковый обратный; д – змеевиковый;
е – холодильник Димрота; ж – холодильник Либиха-Димрота; з – холодильник
Штеделера; и – погружной холодильник

Для конденсации паров различных растворителей в лаборатории

применяются холодильники (Рис. 3.3). В зависимости от способа применения
выделяют два типа холодильников: прямые (нисходящие) и обратные. Первые
применяются для конденсации паров и отвода образовавшегося конденсата,
вторые – для возврата конденсата в систему. Самыми простыми являются
воздушные холодильники (Рис. 3.3а), которые могут быть как прямыми, так и
обратными. Как нисходящих такой холодильник может применяться при
перегонке жидкостей с температурой кипения более 150 °С и при невысокой
скорости процесса. Как обратные, такие холодильники малоэффективны и
могут быть использованы для ограниченного ряда жидкостей. Использование
шарикового воздушного холодильника (Рис. 3.3б) увеличивает эффективность
конденсации паров, однако применять его при синтезе больших количеств
19
веществ, в ходе которого выделяется много тепла, не следует.
Более эффективным решением для перегонки жидкостей является
холодильник Либиха (Рис. 3.3в), состоящий из двух стеклянных трубок,
запаянных одна в другую, образующих охлаждающую рубашку. Чаще всего в
качестве хладагента в рубашку подается водопроводная вода. Реже
используются антифризы, охлаждаемые криотермостатом. Следует отметить,
что хладагент подается в него строго снизу-вверх по противоточной схеме.
Несоблюдение этого правила может привести к существенно сниженной
эффективности и поломки прибора ввиду появления локальных перегревов. Из-
за малой поверхности теплообмена и ламинарного движения паров как
обратный холодильник Либиха малоэффективен. Для конденсации жидкостей с
очень низкими температурами кипения применяется модификация
холодильника Либиха, состоящий из двух охлаждающих поверхностей
(холодильник Дэвиса).
Шариковый холодильник с рубашкой (Рис. 3.3г) может быть использован
исключительно как обратный. Из-за наличия шаровых расширений, ток паров
во внутренней поверхности становится турбулентным, что повышает
конденсирующую эффективность холодильника. Число таких шарообразных
участков обычно колеблется от 3 до 8. Подача хладагента осуществляется
снизу-вверх. В такой холодильник допускается монтировать ось
верхнеприводной мешалки. Для предотвращения захлебывания, когда
конденсат не успевает конденсироваться обратно в емкость с кипящей
жидкостью, обратный шариковый холодильник допускается устанавливать под
небольшим наклоном. Из-за особенностей конструкции в месте спая керна и
рубашки может возникать напряжение из-за большой разницы температур, что
может привести к поломке прибора. По этой причине максимально допустимая
температура кипения конденсирующейся жидкости составляет 160 °С. Еще
одним недостатком шарикового холодильника является возможность
конденсации атмосферной влаги на внешней поверхности рубашки.
Холодильник Димрота (Рис. 3.3е) лишен обоих этих недостатков и может
быть использован как обратный холодильник для веществ с температурой
кипения выше 160 °С. Поскольку внешней рубашкой такого холодильника
является воздух, применять его для кипячения низкокипящих веществ не
следует. так как они могут проскакивать зону охлаждения по внутренней
стенке. Также можно встретить модификацию такого холодильника,
сочетающего принципы холодильника Либиха и Димрота (Рис. 3.3ж).
Змеевиковый холодильник (Рис. 3.3д) не используется как обратный, так
20
как конденсат, который плохо стекает по сгибам змеевика, может быть
выброшен наружу. В вертикальном положении такой холодильник, является
достаточно эффективным нисходящим холодильником, в особенности для
низкокипящих веществ. Для веществ, кипящих при очень низких температурах,
используется модификация змеевикового холодильника (холодильник
Штеделера), в котором в качестве хладагента могут применяться смеси
водяного льда с солями, твердая углекислота и т.п. (Рис 3.3з) Для местного
охлаждения или в микросинтезах может быть использован погружной
холодильник, также часто называемый «охлаждающий палец».
Основной посудой в лаборатории являются колбы, которые в зависимости
от своего назначения могут иметь различную форму (Рис. 3.4). На сегодняшний
день, большинство таких колбы изготовлены из боросиликатного стекла 3.3.
Наиболее универсальными для синтеза являются круглодонные колбы, которые
могут иметь круглую или грушевидную форму. Отдельно стоит упомянуть
колбу с заостренным дном. Такаю колба имеет ряд достоинств, среди которых
повышенная эффективность нагревания на различных приборах, возможность
работы в широком диапазоне объемов и удобство отбора реакционной смеси из
сосуда. Все вышеперечисленные колбы могут иметь несколько горл, к которым
возможно присоединять другие лабораторные приборы.

а б в

г д е
Рисунок 3.4. Колбы: а – круглодонная; б – грушевидная; в – круглодонная
трехгорлая; г – плоскодонная коническая; д – колба Бунзена; е – грушевидная с
заостренным дном
21
 Часто можно встретить в лаборатории колбу Эрленмейера (Рис. 3.4г),
которая представляет собой конический плоскодонный сосуд. Они могут
применяться как для синтеза, так и для временного хранения жидкостей.
Крайне удобно применять такие колбы в титрометрическом анализе. Круглые
плоскодонные колбы могут быть использованы в тех же целях. Толстостенная
коническая плоскодонная колба с отводом (колба Бунзена) используется для
вакуумного фильтрования. Все остальные плоскодонные колбы категорически
запрещается эксплуатировать под вакуумом из-за опасности их взрыва.
Для соединения элементов лабораторной установки преимущественно
используют шлифовые разъемные соединения. Шлифы бывают коническими,
сферическими, цилиндрическими и плоскими (Рис. 3.5). Все современные
соединения являются притертыми.

а б в
Рисунок 3.5. Сферическое (а), плоское (б) и цилиндрическое (в) шлифовое
соединение.

Наибольшее распространение получили конические шлифы, которые

бывают нормальными, удлиненными, укороченными и короткими. Такое
шлифовое соединение состоит из керна и муфты. Как правило, шлифы
обозначаются двумя числами – наибольший внешний диаметра керна и длиной
конуса – и разделяются косой чертой (Рис. 3.6, табл. 3.5). Например, 14/23,
19/26, 24/29, 29/32, которые являются самыми распространенными в
лаборатории. Элементы таких соединений являются взаимозаменяемыми.
Зачастую в разговорной речи и в некоторой литературе такие нормальные
шлифы называют по номерам, соответствующим наибольшему внешнему
диаметру керна. В ряде случаев применяют посуду с нестандартными размерам
шлифов, в том числе с индивидуально притертыми. В этом случае керн и муфта
являются уникальными и не могут быть заменены. К хранению такой посуды
следует относится более ответственно, для того чтобы избежать потери деталей
установки.

22
 Таблица 3.5. Размеры шлифов по ГОСТ 8682-93
Короткие Укороченные Нормальные Удлиненные
- 5/9 5/13 5/18
- 7/11 7/16 7/22
- 10/13 10/19 10/25
- 12/14 12/21 12/28
- 14/15 14/23 14/30
а б 19/9 19/17 19/26 19/35
Рисунок 3.6. Нормальный - 21/19 21/28 21/37
конусный шлиф 19/26: а – 24/10 24/20 24/29 24/39
керн; б – муфта 29/11 29/22 29/32 29/43
34/12 34/23 34/35 34/47
40/13 - 40/38 -
45/13 - 45/40 -
50/14 - 50/42 -
60/15 - 60/46 -
- - 71/51 -
85/18 - 85/55 -
Рисунок 3.7. Зажим для - - 100/60 -
нормального конусного
шлифа

Для более прочного и безопасного сопряжения на шлифы рекомендуется

крепить зажимы (клипсы). Такие зажимы изготавливаются из
полиформальдегида, тефлона, стали и некоторых других материалов (Рис. 3.7).
В случае применения зажимов следует учитывать, что при высоких
температурах или агрессивных сред они могут разрушаться. Наиболее
распространены зажимы трех размеров: 14, 24 и 29 мм. При необходимости,
сегодня зажим любого замера и формы можно получить с использованием
технологии 3D-печати, однако следует учитывать свойства используемого
пластика. Менее удобным, но тем не менее, широко применяемым способом
блокировки конических шлифов является применение металлических колец и
пружин для стяжки. На некоторых старых образцах посуды встречаются
специальные стеклянные бороздки для стяжки шлифов пружинами. Наименее
надежными способами фиксации шлифов является использование
металлической проволоки или резинок. С учетом наличия более современных
крепежа такой метод является нежелательным в лабораторной практике. К
сожалению, конические шлифовые соединения могут заклинить. Для

23
предотвращения этого, а также герметизации целесообразно применять смазку
(вазелин, глицерин, вакуумные смазки и т.п.), небольшое количество которой
наносится на керн. Помимо этого, применяются уплотнения из
политетрафторэтилена. Шлиф также может заклинить при попадании в место
соединения сильных оснований или смол. Для разделения заклинившего шлифа
можно использовать ряд приемов, например, налить проникающую жидкость
(органические растворители с низкой вязкостью, жидкое мыло, глицерин) и
попытаться аккуратно разъединить керн и муфту. Можно попытаться разделить
шлиф легким постукиванием по нему деревянной или резиновой киянкой.
Зачастую отсоединить керн возможно легкими качающими движениями,
однако не стоит при этом вытягивать шлиф и, тем более, пытаться его свернуть.
В особо сложных случаях может помочь нагревание муфты над пламенем
горелки, что позволит освободить керн за счет термического расширения
последней.
Не рекомендуется длительное хранение установок или частей установок в
собранном виде. Как правило, это приводит к заклиниванию шлифов. Если по
каким-либо причинам раздельное хранение керна и муфты невозможно, то
следует проложить соединение полоской бумаги.
Для соединения лабораторной посуды с разными размерами шлифов
применяют специальные переходные адаптеры. При этом имеются адаптеры,
позволяющие перейти от одного типа соединения к другому, например от
конического шлифа на сферический или на резьбовое соединение (Рис. 3.9). По
возможности, следует избегать использования таких переходников, поскольку
увеличение количества сопрягаемых деталей увеличивает вероятность
заклинивания шлифов, снижения герметичности, а также механических
повреждений деталей установки.

Рисунок 3.9. Переходные адаптеры.

24
 С нормальными коническими шлифами изготавливают плоскодонные и
круглодонные колбы, аллонжи, насадки, холодильники, капельные воронки,
пробки и др. Короткие конические шлифы чаще всего применяются в бюксах.
Укороченные конические шлифы можно обнаружить на делительных воронках.
Удлиненные конические шлифы можно встретить на некоторых вакуумных
приборах и холодильниках. Сферические шлифы применяются в специальных
аппаратах, в частности вакуумных. Такие шлифы не заклинивают и являются
более герметичными, однако для использования требуются специальные
зажимы. Плоские шлифы применяются для соединения крышек эксикаторов и
хроматографических камер, а также деталей некоторых специальных приборов.
Цилиндрические шлифы в основном используют для уплотнения вертикальных
перемешивающих устройств.
Помимо шлифов для соединения деталей химических установок
применяют резьбовые соединения, используемые с уплотнителями из резины
или силикона. Такие соединения особо удобны для подвода теплоносителя или
хладагента в холодильники. В некоторых случая допустимо соединять
химическую посуду с помощью силиконовых или резиновых шлангов.
Наиболее архаичным способом является соединение химической посуды при
помощи резиновых или корковых пробок, в которых может быть сделано
отверстие. Данный метод на сегодняшний день применяется крайне редко.
Для измерения объемов жидкостей и твердых сыпучих веществ в
лаборатории применяется мерная посуда, а именно мерные цилиндры,
градуированные пипетки, мензурки, мерные колбы, дозаторы жидкости,
бюретки. Чаще всего она изготовлена из обычного стекла и не предназначена
для проведения химических реакций, тем более, процессов,
предусматривающих нагревание. От всей другой посуды она отличается
наличием меток, которые позволяют точно определять объем налитой
жидкости. Вся такая посуда перед продажей проходит поверку, в результате
которой ей присваивают класс точности. Погрешность для емкостей первого
класса не превышает половину цены деления, для второго соответствует
наименьшей цене деления. Мерные колбы представляют собой плоскодонный
сосуд с длинным горлом, на которое нанесена метка. Выпускаются колбы от
5 мкл до 5 л. Класс точности и объем обязательно указывается на стенке сосуда.
Удобными приборами для измерения объема являются мерные цилиндры,
выпускаемые в 2-х классах точности объемом от 5 мл до 2 л. Такой сосуд
может иметь несъемное или съемное основание. Мензурки и градуированные
пробирки используются для тех же целей, однако имеют меньший объем и
25
меньший класс точности.
Незаменимым измерительным прибором в лаборатории являются пипетки,
которые представляют собой стеклянные или пластиковые трубки с нанесенной
градуировкой. Бывают пипетки с одной меткой (пипетка Мора) или
градуированные, шкала которых может идти сверху вниз или в обратном
направлении. Встречаются пипетки от 0.5 до 200 мл. Также доступны
микропипетки, позволяющие отбирать до 0.001 мкл. Для работы с обычными
пипетками требуется средство для закачки жидкости в нее. Используют
обыкновенные и трехклапанные груши, ручные или электромеханические
пипетаторы. На сегодняшний день, в лабораторной практике часто применяют
автоматические пипетки со сменными наконечниками (Рис. 3.10). Как и
обычные пипетки, такие дозаторы могут быть фиксированного или
настраиваемого объема. Большинство таких пипеток предназначено для работы
с водными растворами. При работе с органическими растворителями следует
уточнить совместимость прибора с той или иной жидкостью в инструкции от
производителя. Как правило некорректное использование таких дозаторов
приводит к их быстрой поломке. Для органических растворителей лучше всего
подходят автоматические пипетки с позитивным вытеснением. В наконечники
таких пипеток интегрирован поршень, что исключает контакт жидкости с
механизмом. Также встречаются многоканальные автоматические дозаторы,
которые более распространены в микробиологических лабораториях.

а б

Рисунок 3.10. Автоматическая пипетка и ее типы (а – воздушного

вытеснения, б – позитивного вытеснения)
26
 В лабораторной практике возникает необходимость временного хранения
продуктов в условиях пониженной влажности или в бескислородной среде. Для
решения подобных задач используются эксикаторы, представляющие собой
сосуд, изготовленный из толстостенного стекла с плотно пришлифованной
крышкой. На его дно помещается осушитель. Выделяют два основных типа
эксикаторов: обычные и вакуумные. Последние снабжены краном, через
который путем откачки воздуха вакуумным насосом в емкости создается
разрежение.
Для измерения температуры в различных средах используются
термометры. Наиболее распространены ртутные термометры с рабочим
диапазоном от -5 до 250 °C. Для измерения отрицательных температур
используют спиртовые термометры или электронные термометры. Для
автоматического поддержания нужной температуры применяются контактные
термометры, подключаемые к исполнительному устройству. На сегодняшний
день преимущественно используются цифровые приборы с термопарами,
которые зачастую интегрированы в какой-либо аппарат, например, в
магнитную мешалку. Однако в лаборатории встречаются и аналоговые ртутные
контактные термометры с управляющими устройствами релейного типа.

3.3. Использование, мытье и хранение химической посуды в лаборатории

При проведении работ по синтезу и очистке веществ из отдельных
элементов химической посуды собирают установки различной сложности.
Такие установки и посуда в отдельности может быть закреплена на штативах
или стационарных стендах с помощью зажимов (лапок), которые бывают
нескольких видов (стандартный, универсальный, трехпальцевый, цепной,
специальный). Как правило, такие зажимы снабжены прокладками из пробки
или полимерных материалов. Закреплять посуду в них следует осторожно:
элемент зажимается лапкой «от руки», после чего винт докручивается до
легкого усилия, при этом закрепляемый элемент следует слегка поворачивать
вокруг оси и перемещать вверх и вниз. Для надежного и безопасного
закрепления посуды на стенде или штативе рекомендуется это делать в
следующем порядке:
1) выставить высоту элемента;
2) выставить лапку по наклону и вылету;
3) зафиксировать элемент между «пальцами» зажима.
Порядок разборки установки обратный.
Перед началом работы вся химическая посуда должна быть чистой.
27
Существует несколько способов очистки стеклянных приборов: физические
(кипячение, обработка паром, холодом), химические (применение моющих
средств и растворителей) и механические (обработка щетками, ершиками и
т.п.). Чаще всего эти способы комбинируют, учитывая степень загрязненности
посуды и характер загрязнителя.
Порядок мытья стеклянной посуды, следующий:
1) изделие ополаскивают проточной водой;
2) обрабатывают ершиком с мылом с последующей отмывкой проточной
водой;
3) если загрязнение не было удалено применяют специальные моющие
средства (хромовая смесь, концентрированные кислоты и щелочи,
органические растворители);
4) посуда тщательно промывается проточной водопроводной водой не
менее 4-5 раз;
5) промывают изделие дистиллированной водой не менее 3 раз.
В том случае, если вода стекает со стеклянной поверхности равномерно,
посуда считается чистой. Если наблюдается образование капель или подтеков,
то мытье следует повторить. Изделие следует осмотреть, поместить в
сушильный шкаф или высушить при комнатной температуре. На сегодняшний
день, для очистки стеклянных изделий все чаще применяются
специализированные посудомоечные машины, перед использованием которой
следует тщательно ознакомиться с руководством по эксплуатации.
Чистую посуду следует хранить в строго определенных местах для
изделий каждого типа (ящик для круглодонных колб, ящик для пипеток, полка
для мерных колб и т.д.). Рекомендуется хранить посуду в местах, надежно
защищенных от пыли. Для предотвращения попадания пыли внутрь емкостей,
изделия укрывают фильтровальной бумагой или фольгой.

28
 4. ПЕРЕГОНКА ОРГАНИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ

Перегонка является способом очистки органических соединений,

основанный на различии состава жидкости и ее пара. При кипении смеси
жидкостей, отличающихся температурой кипения, образующийся пар будет
содержать большее количество низкокипящей фракции, чем исходная жидкая
фаза. Последующая конденсация пара приведет к жидкости, обогащенной
низкокипящей фракцией. Исключение составляют азеотропные смеси, которые
перегоняются без изменения состава или температуры кипения. Например,
максимальное содержание спирта в смеси этанол-вода, которого можно
добиться с помощью перегонки, составляет 95%. Эта точка называется
азеотропной, при ее достижении дальнейшего разделения смеси не происходит.
Перегонку применяют для удаления растворителей, разделения нескольких
продуктов реакции с различными температурами кипения, очистки
растворителей от примесей.
Перегонка может быть простой или фракционной (ректификация). Также
способы перегонки можно разделить по условиям проведения: при
атмосферном или пониженном давлении, а также перегонка с водяным паром.

4.1. Простая перегонка

Разделяющую способность перегонки часто переоценивают. Для простой
перегонки разница температур кипения компонентов разделяемой смеси
должна быть не менее 50 °С. Если разница меньше, то используют
фракционную перегонку.
Простейший прибор для перегонки состоит из перегонной колбы, насадки
Вюрца, термометра, холодильника, аллонжа и колбы-приемника (Рис. 4.1).
В качестве перегонной колбы используют круглодонную или
грушевидную. При перегонке небольших количеств веществ (меньше 50 мл)
целесообразно выбирать сердцевидную колбу, в таком случае кубовый остаток
может быть меньше. Не следует использовать в качестве перегонной колбы
плоскодонные!
В горло насадки помещают термометр, ртутный шарик которого должен
находиться на 5 мм ниже отводной трубки и полностью омываться
конденсирующимися парами (Рис. 4.1). При разделении высококипящих
веществ насадку и перегонную колбу допустимо обернуть асбестовым одеялом
для уменьшения потерь тепла.

29
 Рисунок 4.1. Установка для перегонки при атмосферном давлении

Для конденсации паров к боковому отводу насадки присоединяют

холодильник, его тип зависит от температуры кипения. Для жидкостей с
температурой кипения 40-150 °С используют холодильник Либиха. Вода
подается в нижний отвод рубашки холодильника и выходит через верхний. При
температуре выше 150 °С в месте спайки рубашки холодильника будет
наблюдаться слишком большой перепад температур, что может привести к
разрушению стекла, поэтому вместо водяного охлаждения используют
воздушный холодильник (стеклянную трубку). Важно отметить, что риск
разрушения холодильника возникает уже при температуре выше 120 °С,
поэтому при температурах 120-150 °С холодильник Либиха заполняют
непроточной водой или используют его без воды. При температуре кипения
ниже 40 °С холодильник Либиха недостаточно эффективен, поэтому
используют холодильник Дэвиса с двойной рубашкой охлаждения.
К нижнему концу холодильника присоединяют аллонж для направления
конденсата в колбу-приемник. В качестве последней можно использовать
плоскодонные колбы. Если необходимо предотвратить попадание влаги из
воздуха в дистиллят, то используют аллонж с отводом, на котором при помощи
резинового шланга закрепляют осушительную трубку, заполненную безводным
хлоридом кальция или аморфным силикагелем в гранулах.
При сборке прибора для перегонки важно обеспечить надежное
соединение частей между собой, при необходимости шлифы фиксируют
зажимами. Термометр фиксируется зажимом в обязательном порядке! Также
30
необходимо обеспечить крепление самого прибора на штативах минимум в
двух точках: шлиф перегонной колбы и холодильник. Перед тем, как затягивать
фиксирующий винт на лапках, необходимо убедиться, что все шлифы надежно
соединены, а установка не испытывает напряжений на изгиб – для этого важно
правильно выбрать высоту крепления холодильника! Не следует затягивать
фиксирующие винты слишком сильно – можно раздавить стекло! С другой
стороны, необходимо обеспечить сообщение прибора с атмосферой, иначе при
нагревании произойдет взрыв. Для этого использует колбу-приемник без
шлифа или аллонж с отводом. При перегонке безводных, легколетучих или
токсичных жидкостей обязательно используется колба-приемник со шлифом и
аллонж с отводом!
Нагрев перегонной колбы осуществляют с помощью водяной или
масляной бани или с помощью специального колбонагревателя, у которого для
колбы есть выемка с асбестовой сеткой. Колбонагреватель следует поместить
на лабораторный столик и обеспечить достаточный ход по высоте от рабочей
поверхности до перегонной установки, чтобы в случае возникновения
нештатной ситуации была возможность быстро убрать нагрев от установки,
опустив столик с колбонагревателем вниз.
В случае перегонки при атмосферном давлении перегонную колбу
заполняют жидкостью не более, чем на 2/3 ее объема. В колбу помещают
несколько (2-3 шт.) «кипелок» - кусочки пористого фарфора или короткие
капилляры, запаянные с одной стороны. Они позволяют распределять пузырьки
воздуха во всем объеме жидкости, что обеспечивает равномерное кипение.
Важно отметить, что «кипелок» нельзя использовать повторно, как только
кипение прекращается, поры заполняются жидкостью, и выделение пузырьков
воздуха более невозможно.
Перед началом перегонки необходимо проверить следующее:
1. Правильность сборки прибора и крепление деталей;
2. Сообщение прибора с атмосферой
3. Исправность колбонагревателя и целостность изоляции сетевого
шнура;
4. Подключение охлаждающей воды к холодильнику (в случае
низкокипящих жидкостей);
5. Наличие свежих «кипелок».
После проверки начинают процесс перегонки. Температура нагрева
выбирается, по меньшей мере, на 20 °С выше температуры кипения жидкости.
Затем температура корректируется с учетом скорости перегонки: в приемник
31
должно стекать не более 2 капель дистиллята в секунду.
Чистое вещество обычно перегоняется в узком интервале температур
(1-2 °С). Если в ходе перегонки температура поднимается больше, это означает,
что перегоняется смесь веществ. В начале перегонки показания термометра
могут быть несколько ниже ожидаемого, что связано или с инерцией
термометра или наличием летучих примесей. Поэтому первые порции
дистиллята собираются в отдельный приемник. Объем такой фракции
варьируется от 1-2 мл до 10% от исходного объема перегоняемой жидкости и
определяется по установлению постоянной температуры. После этого собирают
вторую, как правило основную, фракцию. Если температура кипения вновь
растет, то приемник меняют и собирают следующую фракцию. В конце
перегонки может наблюдаться перегрев паров и превышение показаний
термометра на 1-2 °С по сравнению с ожидаемой температурой. Перегонку
нельзя проводить досуха, на дне обязательно оставляют небольшой слой
жидкости, так как в противном случае перегонная колба может треснуть из-за
перепада температур. Последние капли дистиллята (0.5-1 мл) собирают в
отдельную колбу. Разбор установки проводят только после ее охлаждения до
комнатной температуры.

4.2. Перегонка при пониженном давлении (вакуумная перегонка)

Многие органические соединения невозможно перегнать при атмосферном
давлении, поскольку они подвергаются частичному или полному разложению
при температуре ниже температуры кипения. При пониженном давлении
(1-30 мм рт. ст.) температура кипения существенно уменьшается, что позволяет
перегнать такие соединения без риска их разложения. Ориентировочно
температуру кипения вещества в вакууме можно оценить с помощью
номограммы (рис 4.2). Для этого на шкале В отмечают температуру кипения
вещества при атмосферном давлении, а на шкале С – достигнутый вакуум.
Через две точки проводят прямую линию, пересечение которой со шкалой А
укажет на примерную температуру кипения при данном давлении. Например,
при давлении 100 мм рт. ст. температура кипения воды составит примерно
45 °С.

32
 Рисунок 4.2. Номограмма для определения температуры кипения при
пониженном давлении

Вакуум создается с помощью водоструйного или масляного насоса,

который подключают к установке через отвод на аллонже и
предохранительную склянку. Эффективность водоструйного насоса зависит от
напора и температуры воды. Водоструйный насос понижает давление
максимум до 4-6 мм рт. ст., масляный насос обеспечивает вакуум
0.5-1 мм рт. ст. Наблюдаемое разрежение сильно зависит от герметичности
соединения всех элементов прибора. Все шлифы должны быть обработаны
специальной вакуумной смазкой и тщательно притерты. Стекло должно быть
проверено на наличие сколов и трещин. Малейшие дефекты при пониженном
давлении вкупе с повышенной температурой приведут к разрушению
установки!

33
 Рисунок 4.3. Установка для вакуумной перегонки

Установка для перегонки при пониженном давлении несколько отличается

от таковой для атмосферной перегонки (Рис. 4.3). Прежде всего, вместо насадки
Вюрца используют насадку Кляйзена. Это связано с тем, что при пониженном
давлении «кипелки» неспособны обеспечить перемешивание жидкости.
Поэтому через насадку Кляйзена в перегонную колбу вводят тонкий капилляр,
через который в жидкость будет пробулькивать воздух или инертный газ, что
обеспечит равномерное кипение. Нижний конец капилляра не должен доходить
до дна колбы на 1-2 мм. Если капилляр недостаточно тонок, то на верхний его
конец одевают кусочек резинового шланга, в него вставляют тонкую проволоку
и зажимают шланг винтовым зажимом. Проволока не позволит полностью
перекрыть входное отверстие. При перегонке малых количеств допускается
вместо капилляра использовать магнитное перемешивание. В таком случае в
перегонную колбу помещают магнитный якорь в тефлоновой оболочке, колбу
погружают в масляную баню, под которой размещают колбонагреватель с
функцией магнитного перемешивания. Однако, эффективность данного способа
перемешивания ниже, и могут наблюдаться местные перегревы и «толчки»
жидкости. Во второе горло насадки Кляйзена вставляют термометр.
Для сбора фракций при атмосферном давлении можно легко менять колбы-
приемники. В случае вакуумной перегонки используют аллонж-паук, к
которому присоединяют несколько приемников. В качестве приемников
используют только круглодонные колбы! Во время перегонки, поворачивая
«паук», можно сменить приемник без отключения вакуума.
34
 В отличие от перегонки при атмосферном давлении перегонную колбу
заполняют лишь на половину объема во избежание переброса жидкости через
насадку и холодильник. Перед началом перегонки внимательно проверяют
собранную установку аналогично тому, как это описано для перегонки при
атмосферном давлении. Затем одевают защитные очки или защитный экран!
Подключают вакуум к системе, еще раз проверяют установку. Проверяют
работу капилляра. Через него должен проходить воздух со скоростью 4-5
пузырьков в секунду. Только после всех проверок начинают нагрев. При
достижении нужных температур осуществляют сбор фракций, меняя приемник
поворотом «паука». Скорость перегонки также должна составлять 1-2 капли в
секунду, нельзя отгонять вещество досуха. По окончанию перегонки
прекращают нагревание и дают установке охладиться до комнатной
температуры. Впуск воздуха в нагретую систему может привести к взрыву!
Только после охлаждения медленно соединяют установку с атмосферой и
отсоединяют ее от насоса. Выключать вакуум-насос можно только при
атмосферном давлении, в противном случае происходит выброс воды или масла
из насоса! В конце разбирают установку, удаляют смазку со шлифов
бумажными салфетками или бумажным полотенцем. Если смазка не является
водорастворимой, то затем шлифы протирают неполярным растворителем,
например, петролейным эфиром.

4.3. Фракционная перегонка

Если разница температур кипения компонентов смеси не позволяет
разделить их с помощью простой однократной перегонки, то применяют
фракционную. В таком случае между перегонной колбой и насадкой Вюрца
(Кляйзена при пониженном давлении) присоединяют дефлегматор, в остальном
прибор повторяет установку для простой перегонки (Рис. 4.4). Дистиллят
собирают в виде нескольких фракций в различных температурных интервалах,
чем больше – тем эффективнее разделение.
Дефлегматор сконструирован так, чтобы в нем происходила частичная
конденсация и обогащение пара низкокипящим компонентом. Жидкость,
которая возвращается из дефлегматора в колбу, богаче высококипящим
компонентом. Дефлегматоры бывают различных типов, наиболее
эффективными являются елочный дефлегматор и дефлегматор с насадкой.
Насадка увеличивает площадь поверхности, на которой происходят циклы
испарения-конденсации, что повышает эффективность разделения. В качестве
насадок используют стеклянные или фарфоровые бусы и кольца,
35
металлические или стеклянные спирали и другие. Материал насадки не должен
реагировать с перегоняемым веществом.

Рисунок 4.4. Установка для фракционной перегонки

Для повышения эффективности разделения необходимо привести работу

дефлегматора как можно ближе к адиабатическому режиму, при котором
система не обменивается теплом с окружающей средой. В этом случае
равновесие между жидкостью и паром достигается быстрее, пар в дефлегматоре
больше обогащается низкокипящим компонентом. Для приближения к
адиабатическому режиму дефлегматор изолируют, обматывая его асбестовым
одеялом или шнуром.
В некоторых случаях однократной фракционной перегонки недостаточно
для удовлетворительного разделения компонентов смеси. Тогда перегонку
повторяют для каждой собранной фракции отдельно, начиная с первой. Из нее
собирают дистиллят, пока не будет достигнута температура отбора второй
фракции. Перегонку прекращают, прибор охлаждают. Затем в перегонную
колбу добавляют вторую фракцию и повторяют перегонку до достижения
следующего температурного интервала. Повторяя данные циклы, удается
достаточно хорошо разделить компоненты смеси.

36
 4.4. Перегонка с водяным паром
Данный тип перегонки является эффективным способом очистки
органических веществ, не растворимых или малорастворимых в воде. Часто
используется в случаях, когда продукт реакции загрязнен большим
количеством смолистых примесей. При этом высококипящий компонент вместе
с водой будет перегоняться при температуре чуть меньше 100 °С (при
атмосферном давлении), поскольку смесь воды и несмешивающегося с ней
вещества закипает, когда сумма давлений паров обоих компонентов будет
равна атмосферному. Схема одного из вариантов установки для перегонки с
паром изображена на рис. 4.5.

Рисунок 4.5. Установка для перегонки с водяным паром.

В качестве парообразователя можно использовать металлический (медный)

сосуд, круглодонные или плоскодонные колбы большого объема, в которые
вставлена отводная трубка и длинная предохранительная трубка, доходящая
почти до дна парообразователя. Эта трубка предохраняет систему от перепадов
давления при изменении температуры. Если через трубку выбрасывается вода,
то необходимо уменьшить нагревание. Сосуд соединяют с перегонной колбой
резиновым шлангом. В середине нужно предусмотреть трехходовой кран для
соединения с атмосферой.
Желательно, чтобы перегонная колба имела длинное горло и была
расположена под наклоном, как изображено на рисунке, чтобы капли жидкости
не забрасывались через пароотводящую трубку в холодильник. В колбу также
37
вставляют стеклянную трубку, доходящую почти до дна, для подачи водяного
пара из парообразователя. Кобла должна соединяться с холодильником
пароотводящей трубкой. Холодильник через аллонж соединяют с приемником.
Парообразователь заполняют водой на 2/3 объема и доводят до кипения.
Колбу заполняют перегоняемым веществом с небольшим количеством воды не
более, чем на 1/3 объема, и нагревают выше температуры кипения воды, но
ниже температуры кипения очищаемого вещества. После этого трехходовой
кран поворачивают так, чтобы парообразователь был соединен с перегонной
колбой, а выход на атмосферу был закрыт. Сразу начинается перегонка. В
холодильнике конденсируются пары обоих компонентов, дистиллят в виде
эмульсии поступает в колбу-приемник, где расслаивается на две фазы.
Перегонку заканчивают, когда из холодильника начинает поступать одна вода.
Вначале следует открыть трехходовой кран на атмосферу, только после этого
выключают нагрев. В противном случае при охлаждении установки жидкость
из перегонной колбы может затянуть в парообразователь. В конце дистиллят
переносят в делительную воронку, отделяют органическую фазу, которую
сушат от остатков воды в соответствии с природой вещества.

4.5. Обезвоживание растворителей

Метод перегонки используется не только для выделения и очистки
продуктов органического синтеза, но и для подготовки к реакции реагентов и
растворителей. Поскольку многие реакции в органическом и, особенно, в
биоорганическом синтезе чувствительны к присутствию даже минимальных
количеств воды, обезвоживание реагентов и растворителей является
обязательным этапом подготовки. В большинстве случаев обезвоживание
растворителей происходит при их взаимодействии с осушающими агентами.
При этом не существует универсального осушающего агента, его выбор
определяется природой растворителя и требуемой степенью осушки.
Осушающие агенты можно разделить на три типа: обратимо
взаимодействующие с водой, необратимо реагирующие с водой и
молекулярные сита. Осушители первого типа при контакте с водой образуют
кристаллогидраты. Важно учитывать температуру, при которой осушитель
используется, поскольку при нагревании кристаллогидраты разрушаются с
высвобождением воды. Каждый осушающий агент характеризуется двумя
параметрами – осушающая эффективность и осушающая емкость.
Эффективность подразумевает остаточное содержание воды в веществе, а
емкость – количество поглощаемой воды на единицу массы осушителя.
38
Таблица 4.1. Характеристики некоторых осушающих агентов
Остаточн. Осушающ.
Регене
Не применимо кол-во способность
Осушитель Применимо для рация,
для воды (г Н2 О/г
˚С
(мг Н2 О/л) осушителя)
Углеводороды,
Al2 O3 - 0.003 0.2 175
эфиры, газы
Галогено- Спирты, амины,
водороды, эфиры, амиды, фенолы,
CaCl2 насыщенные и альдегиды, 0.14-0.25 0.2-0.3 250
ароматические аминокислоты,
углеводороды кетоны
Углеводороды,
галогеноводороды
Хлороформ,
CaH2 (кроме 0.0001 н.д.* -
кислоты
хлороформа!),
сложные эфиры
Спирты, амины, Кислоты,
CaO 0.007 0.3 1000
аммиак сложные эфиры
Большинство
CaSO4 органических - 0.005 0.066 235
соединений
Сложные эфиры,
CuSO4 спирты, бензол, - 1.4 0.6 200
толуол
Большинство Кислото-
MgSO4 органических чувствительные 1.0 0.2-0.8 200
соединений соединения
Большинство
NaSO4 органических - 12 1.2 150
соединений
Кислоты, фенолы,
NaOH Амины сложные эфиры, 0.16 н.д. -
амиды
Амины, Кислоты, фенолы,
KOH органические сложные эфиры, 0.3 0.1 -
основания амиды, альдегиды
Спирты, нитрилы,
K2 CO3 кетоны, сложные Кислоты, фенолы 0.26 0.2 300
эфиры, амины
Насыщенные и
ароматические
углеводороды,
эфиры, галогено-
Спирты, кислоты,
P2 O 5 водороды, 3×10-5 0.5 -
амины, кетоны
нитрилы,
ангидриды,
нитриты, сложные
эфиры
Мол. сита См. ниже Кислоты 0.001-0.003 0.18 250
* н.д. – нет данных
39
 Молекулярные сита – это осушающие агенты на основе кристаллических
алюмосиликатов. При их нагревании вода удаляется из кристаллической
решетки, оставляя в ней поры определенного размера. В зависимости от
размера пор в них могут сорбироваться различные молекулы, в том числе вода.
Размер пор может быть изменен (в ограниченных пределах) добавлением в
кристаллическую решетку различных катионов. В настоящее время существует
4 типа молекулярных сит:
• Тип 3А представляет собой алюмосиликат калия с размером пор
3 Ангстрема. Пригоден для осушки ацетона, ацетонитрила,
метанола, 2-пропанола и этанола, а также некоторых газов.
• Тип 4А – алюмосиликат натрия с размером пор 4 Ангстрема.
Используется для осушения хлороформа, дихлорметана,
диметилформамида, диизопропилового эфира, диэтилового эфира,
этилацетата, циклогексана, бензола, толуола, ксилена, пиридина.
• Тип 5А – алюмосиликат кальция с размером пор 5 Ангстрем.
Обычно используется для осушения газов, но пригоден также для
тетрагидрофурана и диоксана.
• Тип 13Х – алюмосиликат натрия с размером пор 10 Ангстрем.
Такие сита применяются для промышленной осушки газов и
удаления из них сероводорода и меркаптанов.
Следует отметить, что молекулярные сита разрушаться в присутствии
сильных кислот, их можно использовать в диапазоне рН 5-11. Молекулярные
сита можно регенерировать, прогревая в вакууме или токе инертного газа в
течение 2-3 часов. Поскольку в порах могут сорбироваться не только молекулы
воды, но и примеси, то нагревание проводят постепенно, чтобы дать
возможность примесям десорбироваться при более низкой температуре и
избежать их полимеризации. Молекулярные сита нельзя нагревать выше
250 °С, иначе произойдет разрушение пор.
Для обезвоживания растворителей можно руководствоваться следующим
общим подходом. Если растворитель содержит большое количество воды, то
его предварительно выдерживают (3-24 ч) над подходящим осушителем с
высокой емкостью. Затем отфильтровывают или декантируют, добавляют
осушитель для более глубокой осушки. Во многих случаях требуется кипячение
растворителя с осушителем в течении нескольких часов, за чем следует
перегонка.
Помимо использования осушающих агентов для удаления воды
используют азеотропную отгонку. Для этого к растворителю, требующему
40
осушки, добавляют небольшое количество другого растворителя, образующего
с водой азеотропную смесь. При перегонке полученной смеси вода будет
отгоняться в виде азеотропа. Как правило, требуется провести несколько
циклов. Например, для обезвоживания этанола к нему добавляют около 5%
бензола и проводят фракционную перегонку.

4.6. Лабораторная работа «Очистка этанола методом перегонки»

Цель работы: подготовить безводный этанол.
Оборудование: круглодонная колба (250 мл), колбы-приемники (2 шт.,
100 мл), насадка Вюрца, водяной холодильник, аллонж, термометр, пробки
(2 шт.), мерные цилиндры на 100 мл (2 шт.), наливная воронка, резиновые
шланги, клипсы, пипетка Пастера, шпатель, колбонагреватель, рефрактометр.
Реактивы: 95% этанол, безводный сульфат меди.
Ход работы:
1. Студенту или группе студентов (2-3 человека) выдается набор
лабораторной посуды для проведения перегонки. В круглодонную колбу на
250 мл помещают 100 мл 95% этанола и 5 мг безводного сульфата меди.
2. Собирают установку для простой перегонки при атмосферном давлении,
к отводу аллонжа присоединяют осушительную трубку. До начала нагревания
помещают в колбу несколько кипелок, подают воду в рубашку холодильника.
3. После проверки установки преподавателем начинают перегонку,
включив колбонагреватель. Необходимо собрать две фракции. В первую
отбирают первые 5-10 мл дистиллята или пока на термометре не установится
температура 78 ˚С. После этого меняют приемник и собирают основную часть
дистиллята. Записывают в журнал температуру первой капли и температуру
смены приемника. Собранные фракции закрывают пробками. Следят за
температурой, досуха не перегоняют. По окончанию перегонки измеряют
объем обеих фракций для расчета практического выхода.
4. Определяют показатель преломления с помощью рефрактометра. Для
этого открывают измерительную камеру и на нижнюю призму прибора с
помощью пипетки Пастера наносят 1 каплю основной фракции. Пипетка не
должна касаться призмы! Осторожно закрывают измерительную камеру.
Вращая регулирующий маховик, совмещают границу света и тени с
перекрестием на шкале. Записывают полученное значение показателя
преломления с точностью до 4 знака после запятой и температуру в
помещении. Открывают измерительную камеру и аккуратно протирают обе
призмы смоченной ацетоном ватой. Дают ацетону испариться и закрывают
41
камеру. Рассчитывают температурную поправку.
5. Разбирают установку, ход работы, результаты и расчеты заносят в
лабораторный журнал. Пример таблицы для оформления результатов приведен
ниже.
Таблица 4.2. Оформление результатов работы по перегонке
Ткип, ˚С Объем/Масса
М, ρ, Выход,
Вещество до после
г/моль г/мл лит. эксп. %
перег. перег.
1)
2)

4.7. Лабораторная работа «Очистка дихлорметана методом перегонки»

Цель работы: подготовить безводный дихлорметан.
Оборудование: круглодонная колба (250 мл), колбы-приемники (2 шт.,
100 мл), насадка Вюрца, водяной холодильник, аллонж, термометр, пробки
(2 шт.), мерные цилиндры на 100 мл (2 шт.), наливная воронка, резиновые
шланги, клипсы, пипетка Пастера, шпатель, колбонагреватель, рефрактометр.
Реактивы: дихлорметан, гидрид кальция.
Ход работы:
1. Студенту или группе студентов (2-3 человека) выдается набор
лабораторной посуды для проведения перегонки. В круглодонную колбу на
250 мл помещают 100 мл дихлорметана и 4 мг гидрида кальция.
2. Собирают установку для простой перегонки при атмосферном давлении,
к отводу аллонжа присоединяют осушительную трубку. До начала нагревания
помещают в колбу несколько кипелок, подают воду в рубашку холодильника.
3. После проверки установки преподавателем начинают перегонку,
включив колбонагреватель. Необходимо собрать две фракции. В первую
отбирают первые 5-10 мл дистиллята или пока на термометре не установится
температура 39 ˚С. После этого меняют приемник и собирают основную часть
дистиллята. Записывают в журнал температуру первой капли и температуру
смены приемника. Собранные фракции закрывают пробками. Следят за
температурой, досуха не перегоняют. По окончанию перегонки измеряют
объем обеих фракций для расчета практического выхода.
4. Определяют показатель преломления с помощью рефрактометра. Для
этого открывают измерительную камеру и на нижнюю призму прибора с
помощью пипетки Пастера наносят 1 каплю основной фракции. Пипетка не

42
должна касаться призмы! Осторожно закрывают измерительную камеру.
Вращая регулирующий маховик, совмещают границу света и тени с
перекрестием на шкале. Записывают полученное значение показателя
преломления с точностью до 4 знака после запятой и температуру в
помещении. Открывают измерительную камеру и аккуратно протирают обе
призмы смоченной ацетоном ватой. Дают ацетону испариться и закрывают
камеру. Рассчитывают температурную поправку.
5. Разбирают установку, ход работы, результаты и расчеты заносят в
лабораторный журнал. Пример таблицы для оформления результатов приведен
выше.

Контрольные вопросы:
1. Для чего нужна перегонка и на чем основан данный метод?
2. Опишите логику выбора типа перегонки в зависимости от свойств
перегоняемой жидкости.
3. Какие меры предосторожности нужно соблюдать при проведении
перегонки?
4. Что такое «кипелки» и для чего их добавляют в перегонную колбу?
Можно ли добавлять «кипелки» в уже нагретую жидкость?
5. Если при атмосферном давлении жидкость кипит при температуре
265 ˚С, то какой будет температура кипения при 15 мм рт. ст.?
6. Как выбрать осушитель для обезвоживания растворителя?

43
 5. ЭКСТРАКЦИЯ

5.1. Общие сведения

Экстракция – процесс извлечения растворителями соответствующих
веществ из различных объектов. Объекты, из которых извлекают
соответствующие соединения, могут быть твердыми веществами и жидкостями.
Процессы извлечения разделяют на экстракцию в системе твердое тело-
жидкость и на экстракцию в системе жидкость-жидкость (жидкостную
экстракцию).
Экстракция является распространенным методом, используемым в
органической химии для выделения целевого соединения. В процессе
экстракции растворенное вещество переносится из одной фазы в другую для
отделения его от непрореагировавших исходных материалов или примесей.
Экстракция также используется для облегчения выделения растворенного
вещества из реакционного растворителя, который трудно удалить испарением,
например, растворителя с высокой температурой кипения. Обычно выделяют
три типа экстракции. Во-первых, при твердожидкостной экстракции
растворенное вещество переходит из твердой фазы в жидкую. При экстракции
жидкость-жидкость растворенное вещество переносится из одной жидкости в
другую. При кислотно-щелочной экстракции растворенное вещество
превращается в ионное соединение и переносится из органической фазы в
водную фазу. Типичный пример экстракции – заваривание кофе или чая.
Твердая фаза, содержащая кофеин и ароматизаторы растений, экстрагируется
горячей водой в жидкую фазу.

5.2. Жидкостно-жидкостная экстракция

Экстракция жидкость-жидкость либо переносит органическое соединение,
растворенное в водной фазе, в органический растворитель, либо она
используется для переноса непрореагировавших реагентов, солей и других
водорастворимых примесей в водную фазу, оставляя при этом целевое
соединение в органической фазе. Для проведения жидкостно-жидкостной
экстракции важно использовать несмешивающиеся жидкости, которые никогда
не образуют гомогенного раствора, даже при тщательном перемешивании.
Вместо этого несмешивающиеся жидкости разделяются на разные фазы, такие
как масло и вода.
Сначала водный раствор, содержащий растворенное вещество, добавляется
в делительную воронку. Затем в делительную воронку добавляют
44
нерастворимый в воде органический растворитель. Когда содержимое воронки
хорошо перемешано, органическое соединение переходит в органический
растворитель за счет более высокой растворимости в органической фазе, чем в
водной.
Поскольку жидкости не смешиваются, образуются два отдельных слоя,
при этом жидкость с большей плотностью находится внизу, а с меньшей –
вверху. Большинство органических жидкостей имеют более низкую плотность,
чем вода, за исключением хлорированных органических растворителей – этот
момент крайне важен для правильной идентификации верхнего и нижнего
слоев. После формирования четкой границы раздела фаз, слои разделяют,
открывая запорный кран делительной воронки и давая возможность одному
слою вытекать в приемную колбу (обычно плоскодонную). Жидкость, из
которой было удалено растворенное вещество, называется рафинатом, а
жидкость, в которую перешло растворенное вещество, называется экстрактом.
Органическое соединение распределяется между двумя слоями в
зависимости от его растворимости в каждой фазе. Равновесие достигается,
когда химический потенциал растворенного вещества одинаков в двух фазах.
Установленное равновесие может быть описано коэффициентом распределения
растворенного вещества (K), который представляет собой отношение
концентрации образца в органическом слое к его концентрации в водной фазе.
Например, коэффициент распределения морфина в этилацетате и воде
составляет примерно 6. Если темные круги представляют молекулы морфина,
1.00 г морфина распределяется, как показано на рис. 5.1.

а б
50 мл 25 мл
этилацетата этилацетата

50 мл 50 мл
воды воды

Kа = [Морфин]этилацетат/ [Морфин]вода = 0.0600 М / 0.0101 М = 5.95

Kб = 0.1050 М / 0.0177 М = 5.93
Рисунок 5.1. Распределение морфина в этилацетате и воде

Обратите внимание, что при равных объемах органической и водной фаз

коэффициент распределения представляет собой соотношение частиц в каждом
45
слое (Рис. 5.1). При использовании равных объемов K, равный 6, означает, что
в органическом слое будет в шесть раз больше молекул морфина, чем в водном
слое. Коэффициент распределения является константой, зависящей как от
растворенного вещества, так и от пары растворителей, используемых при
экстракции. В петролейном эфире и воде морфин имеет K примерно 2, а в
диэтиловом эфире и воде – примерно 0.33. Когда K меньше единицы, это
означает, что соединение переходит в водную фазу больше, чем в
органическую. Фактически коэффициенты распределения определяются
экспериментально, но их можно предварительно оценить, используя данные о
растворимости соединения. Значения K, рассчитанные с использованием
значений молярности и растворимости, не идентичны, поскольку
задействованы разные состояния равновесия. Истинный K представляет собой
равновесие между водным и органическим растворами, в то время как данные о
растворимости представляют собой равновесие между насыщенным раствором
и твердой фазой.
Разновидностью жидкостно-жидкостной экстракции является кислотно-
основная экстракция, при которой органические соединения отделяются на
основе их кислотно-основных свойств. Если растворенное вещество
представляет собой кислоту или основание, его заряд изменяется при
изменении pH. Как правило, большинство органических соединений
нейтральны и поэтому лучше растворимы в органических растворителях, чем в
воде. Однако, если органическое соединение становится ионным, оно
становится более растворимым в воде. Это полезно для извлечения
органической кислоты или основного соединения из органической фазы в
водную фазу. Кислотно-основная экстракция использует это свойство,
превращая растворенное вещество в его водорастворимую солевую форму, тем
самым изменяя его растворимость. Чтобы методика была эффективной,
растворимость органического соединения и его соли должна резко отличаться.
Например, рассмотрим смесь, содержащую органическую карбоновую
кислоту, амин и нейтральное соединение. Карбоновые кислоты, состоящие из
шести или более атомов углерода, нерастворимы в воде и полностью
растворимы в органических растворителях. Однако их сопряженные основания
(ионное соединение) растворимы в воде и нерастворимы в органических
растворителях. Амин, состоящий как минимум из семи атомов углерода,
нерастворим в воде, но растворим в органических растворителях.
Конъюгированная кислота этого амина (ионного соединения) растворима в
воде и нерастворима в органических растворителях.
46
 При взаимодействии с основанием карбоновая кислота нейтрализуется до
своей солевой формы. Остальные соединения в смеси остаются нейтральными.
Как только карбоновая кислота превращается в соль, она переходит в водную
фазу, в то время как нейтральные соединения остаются в органической фазе.
Кислотно-основная экстракция также используется для разделения двух
слабых кислот или двух слабых оснований со значительной разницей в их pKa.
В случае кислот относительно более сильная кислота, имеющая небольшое
значение pKa, нейтрализуется до соли с использованием слабого основания.
Слабое основание не реагирует эффективно с более слабой кислотой, и только
более сильная кислота превращается в соль. Затем соль экстрагируется в
водную фазу во время экстракции. Этот процесс аналогичен для слабых
оснований, где относительно более сильное основание нейтрализуется до соли
с помощью слабой кислоты.

5.3. Выбор растворителя для экстракции

Определение, какую пару растворителей использовать для экстракции,
является важным шагом. При выборе растворителей следует учитывать
следующее: во-первых, растворенное вещество должно быть более
растворимым в растворителе, чем в воде. Следовательно, необходимо знать
коэффициент распределения растворенного вещества в потенциальной паре
растворителей. Во-вторых, пара растворителей не должна смешиваться с водой
и не должна образовывать гомогенный раствор при смешивании. В-третьих,
растворители должны быть инертными и не вступать в реакцию с
растворенным веществом. Растворитель также должен быть летучим, чтобы его
можно было легко отделить от растворенного вещества. Несмешивающийся с
водой органический растворитель обычно обладает низкой полярностью.
Выше уже было сказано, что данные о растворимости можно использовать
для оценки коэффициента распределения, а значит и для выбора подходящего
растворителя для экстракции. Например, представьте, что кофеин нужно
экстрагировать из чайной гущи в кипящую воду, а затем экстрагировать в
органический растворитель. Кофеин хорошо растворяется в хлороформе,
причем лучше, чем в воде. В этом случае коэффициент распределения К
рассчитывается следующим образом:
Растворимость кофеина в хлороформе 181.82 г/л
К~ ~ ~ 8.36
Растворимость кофеина в воде 21.74 г/л
При экстракции другими растворителями K будет меньше единицы, и
извлечь кофеин из воды будет нелегкой задачей. Поэтому хлороформ будет
47
лучшим выбором с точки зрения максимальной степени экстракции кофеина.
Еще одним соображением является растворимость других компонентов,
присутствующих в смеси. Если цель состоит в том, чтобы преимущественно
извлечь целевое соединение и оставить другие компоненты, один растворитель
может быть более селективным в этом отношении.
5.4. Однократная экстракция
Однократная экстракция является наиболее простым методом, при
котором весь исходный раствор, содержащий целевое вещество, и экстрагент
контактируют один раз. Эффективность процесса относительно невелика,
поэтому однократная экстракция используется только в лабораторной практике.
Для примера рассмотрим выделение из воды гиосциамина, алкалоида растения
семейства пасленовых, который используется в медицине для облегчения
различных заболеваний желудочно-кишечного тракта.
Представьте, что почти насыщенный раствор 0.50 г гиосциамина в 150 мл
воды нужно экстрагировать в 150 мл диэтилового эфира (Рис. 5.2). Сколько
гиосциамина будет извлечено в слой диэтилового эфира в этом процессе?
0.40 г
+ 150 мл 150 мл 150 мл
эфира эфира эфира

150 мл 150 мл 0.50 - х 150 мл

воды воды воды
0.50 г 0.10 г
Рисунок 5.2. Однократная экстракция гиосциамина из воды диэтиловым
эфиром

Это количество может быть приблизительно определено с использованием

данных о растворимости. Если взять соотношение растворимости соединения в
диэтиловом эфире по сравнению с водой, то получится приблизительное
значение K равное 4.
Растворимость гиосциамина в эфире 14.40 г/л
К~ ~ ~ 4.07
Растворимость гиосциамина в воде 3.54 г/л
Если «х» представляет собой количество в граммах гиосциамина,

48
экстрагированного в слой диэтилового эфира, то «0.50 г - х» останется в водном
слое после установления равновесия. Зная значение K, значение x можно найти
с помощью следующего уравнения:
x�
150 мл эфира
4.07 =
(0.5 г − x)
�150 мл воды

После решения алгебры x = 0.40 г. Этот результат означает, что 0.40 г

(80%) гиосциамина из исходных 0.50 г экстрагируют диэтиловым эфиром за
одну экстракцию. Таким образом, распределение соединения между двумя
слоями привело к неполной экстракции образца.

5.5. Многократная экстракция

Если коэффициент распределения соединения в растворителе невысок, то
однократной экстракции будет недостаточно для эффективного извлечения
вещества. В таком случае требуется многократная экстракция раствора,
поскольку этот метод более эффективен.
В процессе многократной экстракции некоторое количество растворителя
используется для экстракции одного слоя (часто водного) несколько раз
подряд. Экстракцию повторяют два-три раза или, возможно, больше раз, если
соединение имеет низкий коэффициент распределения в органическом
растворителе. На рис. 5.3 представлена диаграмма, на которой водный раствор
дважды экстрагируется диэтиловым эфиром. Диэтиловый эфир имеет
плотность ниже 1 г/мл, следовательно, органический слой в воронке будет
находиться сверху.
При многократной экстракции водного слоя первая экстракция процедурно
идентична однократной экстракции. При второй экстракции водный слой из
первой экстракции возвращается в делительную воронку (Рис. 5.3б) с целью
извлечения дополнительного соединения. Поскольку органический слой после
первой экстракции уже достиг равновесия с водным слоем, было бы мало толку
вернуть его в делительную воронку и снова подвергнуть воздействию водного
слоя. Вместо этого к водному слою добавляют свежий диэтиловый эфир, так
как он может извлекать больше соединения.

49
 Добавление Перемешивание
а эфира и разделение слоев

Эфир

Водный Водный
слой слой

Водный слой Эфир

1 экстракция 1 экстракция

б
Объединение органических слоев
Водный слой
1 экстракция
Перемешивание Эфир
Добавление и разделение слоев 1 экстракция
эфира

Эфир
Эфир
2 экстракция

Водный
слой

Водный слой Эфир

2 экстракция 2 экстракция

Рисунок 5.3. Многократная экстракция водного слоя, когда органический слой

находится сверху: а – первая экстракция, б – вторая экстракция

Процесс часто повторяют с третьей экстракцией (не показан на рисунке),

при этом водный слой из второй экстракции возвращают в делительную
воронку, за которой следует еще одна порция свежего органического
растворителя. При нескольких экстракциях органические слои объединяют
вместе, поскольку цель состоит в том, чтобы извлечь соединение в
органический растворитель.

50
 Когда водный раствор экстрагируется более плотным, чем вода,
органическим растворителем (например, дихлорметаном, CH2Cl2),
единственное отличие в методике состоит в том, что нет необходимости когда-
либо сливать водный слой из делительной воронки. После слива органического
слоя из первой экстракции свежий растворитель можно добавить к водному
слою, оставшемуся в воронке, чтобы начать вторую экстракцию (Рис. 5.4).
Добавление Перемешивание
а
CH2 Cl2 и разделение слоев

CH2 Cl2

Водный Водный Водный

слой слой слой

CH2 Cl2
1 экстракция

Добавление Перемешивание
б
CH2 Cl2 и разделение слоев
CH2 Cl2
1 экстракция

CH2 Cl2

Водный Водный CH2 Cl2

слой слой 2 экстракция

CH2 Cl2
2 экстракция

Рисунок 5.4. Многократная экстракция водного слоя, когда органический слой

находится на дне: а – первая экстракция, б – вторая экстракция

Чтобы продемонстрировать эффективность многократной экстракции,

давайте вернемся к проблеме из раздела 5.4, где раствор 0.50 г гиосциамина в
51
150 мл воды необходимо экстрагировать в диэтиловый эфир. Вместо того,
чтобы использовать одну порцию 150 мл, давайте вместо этого разделим
растворитель на три порции диэтилового эфира по 50 мл. Сколько гиосциамина
можно извлечь с помощью этого метода?
В предыдущем разделе данные о растворимости использовались для
оценки коэффициента распределения K, и он оказался равным 4.07. Как и
раньше, мы можем присвоить количеству гиосциамина, экстрагированного в
диэтиловый эфир, значение «х», в результате чего в водном слое первой
экстракции останется «0.50г - х». Расчет с использованием K идентичен
предыдущему обсуждению, отличаясь только меньшим объемом органического
слоя (50 мл вместо 150 мл).
x�
50 мл эфира
4.07 =
(0.5 г − x)
�150 мл воды
После решения уравнения x = 0.29 г. Этот результат означает, что 0.29 г
экстрагируется диэтиловым эфиром при первой экстракции, а 0.21 г остается в
водном слое (0.50-0.29 г). Когда водный слой возвращается в делительную
воронку, остаточное количество 0.21 г является количеством, подлежащим
дальнейшей экстракции, что меняет расчет для второй экстракции, заменяя
значение 0.50 г.
x�
50 мл эфира
4.07 =
(0.21 г − x)
�150 мл воды

После решения алгебры x = 0.12 г. Этот результат означает, что 0.12 г

экстрагируется диэтиловым эфиром при второй экстракции, а 0.09 г остается в
водном слое. Расчет для третьей экстракции выглядит следующим образом:
x�
50 мл эфира
4.07 =
(0.09 г − x)
�150 мл воды

После решения алгебры x = 0.05 г. Этот результат означает, что 0.04 г

остается в водном слое после третьей экстракции. Если объединить экстракты
диэтилового эфира объемом 50 мл, то суммарно в них будет 0.46 г
гиосциамина. Из 0.50 г гиосциамина в исходном водном слое 92% вещества
экстрагируется в органический слой. Это больше, чем было получено при
однократной экстракции 150 мл диэтилового эфира, в результате чего было
52
экстрагировано только 0.40 г гиосциамина (80 %).

0.29 г 0.12 г 0.05 г 0.46 г

Эфир Эфир Эфир Объединенные

1 экстракция 2 экстракция 3 экстракция экстракты
Рисунок 5.5. Объединенные органические слои, содержащие гиосциамин из
нескольких экстракций в диэтиловый эфир

Эти расчеты показывают, что использование нескольких порций

растворителя максимизирует его экстракционную способность. В лабораторной
практике часто трехкратная экстракция является оптимальным компромиссом
между затраченными усилиями и максимальным извлечением материала.

5.6. Методика проведения экстракции

В этом разделе методика показана на примере однократной экстракции
ретинола из водно-спиртового раствора в хлороформ. Вода подкрашена
медным купоросом для наглядности.
Для проведения экстракции возьмите делительную воронку (Рис. 5.6).
Если в делительной воронке есть тефлоновый запорный кран, соберите
запорный кран, если он был разобран для просушки, разместив детали в
соответствующем порядке. Убедитесь, что тефлоновый запорный кран
умеренно затянут, чтобы он все еще мог легко поворачиваться, но не настолько
ослаблен, чтобы жидкость могла просочиться вокруг стыка. При использовании
стеклянного крана, на него наносят очень тонкий слой смазки для герметизации
шлифа и предотвращения заклинивания. Если доступны как стеклянные, так и
тефлоновые запорные краны, тефлон является лучшим выбором, поскольку
всегда существует вероятность того, что растворитель может растворить
смазку, используемую для стеклянных запорных кранов, и загрязнить образец.
В качестве смазки можно использовать графит.
Также подберите по размеру пробку (тефлоновую или стеклянную
пришлифованную), которая хорошо подходит к верхнему стыку воронки
(Рис. 5.8а).
Закрепите делительную воронку на штативе с помощью лапки (Рис. 5.6в)
или расположите в кольцевом зажиме. Воронку легко сломать, поэтому на
металлический зажим помещают кусочки разрезанной резины или
пластмассовой трубки.
53
Рисунок 5.6. Подготовка к экстракции: a – закрытые и открытые запорные
краны; б – сульфат натрия для осушения органического слоя, колба для сбора
экстракта; в) установка для экстракции в сборе

Прежде чем наливать что-либо в делительную воронку, убедитесь, что

кран находится в положении «закрыто», а кран находится в горизонтальном
положении (Рис. 5.6а). В целях безопасности всегда помещайте плоскодонную
колбу под делительную воронку перед заливкой (Рис. 5.6в). Это может
привести к сохранению веществ в случае, если запорный кран случайно
останется открытым или если запорный кран ослаблен и жидкость случайно
вытечет наружу.
С помощью воронки залейте экстрагируемую жидкость в делительную
воронку. Избегайте использования сильно нагретых или сильно охлажденных
жидкостей. Шлиф на делительной воронке склонен к прилипанию к пробке,
если в какой-то момент на него попал раствор. Заливка жидкости в
делительную воронку с помощью воронки позволяет избежать намокания
шлифа, что снижает вероятность его заклинивания.
Вылейте необходимое количество экстрагента в делительную воронку, как
указано в методике (Рис. 5.7). Нет необходимости использовать точные
количества растворителя для экстракции. Если методика требует 20 мл
54
растворителя, допустимо, если каждый раз используется от 20 до 25 мл.

Рисунок 5.7. Экстрагент (сверху), дистиллированная вода, подкрашенная

медным купоросом (снизу)

Рисунок 5.8. Проведение экстракции: a – удерживание пробки на делительной

воронке; б – поддерживание воронки снизу другой рукой; в – вспенивание из-за
выделения газа в процессе смешения слоев
55
 Смешайте растворы. Поместите пробку на воронку и удерживайте воронку
так, чтобы пальцы одной руки надежно закрывали пробку, а другой рукой
держались за дно воронки (Рис. 5.8). Осторожно переверните воронку и
немного перемешайте смесь.
На шлиф горла воронки нередко попадает жидкость, но ее количество
должно быть минимальным. Если при переворачивании воронки на пальцы или
перчатки капает жидкость, вероятно, пробка неправильного размера или имеет
дефекты.
При смешивании растворов внутри делительной воронки может
повышаться давление, поэтому сразу после встряхивания и при перевернутой
воронке «выпустите воздух» из воронки, на короткое время открыв запорный
кран в сторону вытяжного шкафа или переверните воронку и откройте крышку,
чтобы сбросить давление. Второй метод позволяет избежать попадания смеси в
кран.
Давление в воронке возрастает по мере того, как растворитель испаряется в
свободное пространство и вносит дополнительный пар в начальное давление
воздуха в воронке, примерно равное 1 атмосфере. С легколетучими
растворителями (например, диэтиловым эфиром), определенный звук можно
услышать при сбросе давления, небольшое количество жидкости может даже
распылиться при открытии крана. Если жидкость выливается из крана,
попробуйте дать ей стечь обратно в воронку. Шум, связанный с
вентилированием, обычно прекращается после второго или третьего
переворачивания, поскольку свободное пространство над водой насыщается
парами растворителя, и давления внутри и снаружи воронки выравниваются.
Примечание по безопасности: никогда не направляйте запорный кран на
кого-либо во время сброса давления.
Закройте кран и перемешайте растворы еще более энергично,
периодически останавливаясь для вентиляции системы.
Существуют разногласия относительно того, насколько интенсивно и как
долго следует перемешивать растворы в делительных воронках. Как правило,
достаточно мягкого перемешивания в течение 10-20 секунд. При работе с
некоторыми растворами (например, дихлорметаном) следует проявлять
осторожность, чтобы не взбалтывать слишком сильно, поскольку эти растворы
часто образуют эмульсии. Для растворов, склонных к образованию эмульсий,
воронку следует осторожно покачивать в течение одной минуты.
Установите делительную воронку вертикально в кольцевой зажим, чтобы
слои полностью разделились. Граница между слоями должна быть четкой.
56
Рисунок 5.9. Разделение слоев: a – общий вид; б – слив нижнего слоя до границы
раздела фаз; в – пропускание экстракта через осушитель

Далее слейте нижний слой. Жидкость не будет хорошо стекать из

делительной воронки, если пробка остается на месте, так как воздух не может
попасть в воронку для замены вытесненной жидкости. Если бы жидкость
действительно стекала из воронки без замены равным объемом воздуха, в
воронке образовалось бы отрицательное давление. Поэтому перед тем, как
слить жидкость из делительной воронки, снимите пробку.
Слейте большую часть нижнего слоя в чистую коническую колбу,
расположив кольцевой зажим так, чтобы кончик делительной воронки
находился в колбе для сбора экстракта, чтобы предотвратить разбрызгивания
(Рис. 5.9б). В случае использования осушителя, кончик делительной воронки не
должен касаться осушителя. Прекратите слив, когда граница раздела окажется в
пределах 1 см от верхней части крана. Осторожно покрутите воронку, чтобы
удалить капли, прилипшие к стеклу. Для сбивания устойчивых прилипших
капель можно использовать стеклянную палочку. Далее слейте нижний слой,
закройте кран, когда граница раздела подойдет к верхней части крана. В случае
необходимости подпишите колбы с экстрактом.

5.7. Экстракция БАС

Экстракция — это один из наиболее удобных методов выделения
природных биологически активных соединений (БАС) из сырья. Методы
57
экстракции включают экстракцию растворителем, метод дистилляции,
прессование и сублимацию по принципу экстракции. Экстракция
растворителем – наиболее широко используемый метод. Экстракция
природных БАС проходит через следующие стадии: (1) растворитель проникает
в твердую матрицу; (2) растворенное вещество растворяется в растворителе; (3)
растворенное вещество диффундирует из твердой матрицы; (4) происходит
сбор экстрактов. Любой фактор, повышающий коэффициент диффузии и
растворимость на вышеуказанных этапах, облегчает экстракцию. Свойства
экстракционного растворителя, размер частиц сырья, соотношение
растворителя и твердого вещества, температура экстракции и
продолжительность экстракции будут влиять на эффективность экстракции.
Выбор растворителя имеет решающее значение для экстракции
растворителем. При выборе растворителей следует учитывать селективность,
растворимость, стоимость и безопасность. Основываясь на законе подобия и
смешиваемости (подобное растворяет подобное), растворители со значением
полярности, близким к полярности растворенного вещества, вероятно, будут
работать лучше, и наоборот. Спирты (метанол, этанол, пропанол-2) –
универсальные растворители при экстракции твердое-жидкость, так как в них
растворяется большинство биологически активных соединений, выделяемых из
растений.
Как правило, чем мельче размер частиц, тем лучше результат экстракции.
Эффективность экстракции будет повышена за счет небольшого размера частиц
из-за улучшенного проникновения растворителей и диффузии растворенных
веществ. Однако слишком мелкий размер частиц будет стоить чрезмерного
поглощения растворенного вещества в твердом веществе, и затруднить
последующую фильтрацию.
Высокие температуры увеличивают растворимость и диффузию. Однако
слишком высокие температуры могут вызвать потерю растворителей, что
приведет к экстракции нежелательных примесей и разложению
термолабильных компонентов.
Эффективность экстракции увеличивается с увеличением
продолжительности экстракции в определенном временном диапазоне.
Увеличение времени также не повлияет на экстракцию после достижения
равновесия растворенного вещества внутри и снаружи твердого материала.
Чем больше соотношение растворителя и твердого вещества, тем выше
выход экстракции; однако слишком высокое отношение растворителя к
твердому веществу вызовет чрезмерное выделение растворителя и потребует
58
длительного времени для концентрирования.
Традиционные методы экстракции, включая мацерацию, перколяцию и
экстракцию с обратным холодильником, обычно используют органические
растворители, требуют большого объема растворителей и длительного времени
экстракции. Некоторые современные или более экологичные методы
экстракции, такие как суперкритическая жидкостная экстракция (SFC),
жидкостная экстракция под давлением (PLE) и микроволновая экстракция
(MAE), также применяются при экстракции натуральных продуктов, и они
предлагают некоторые преимущества, такие как более низкий расход
органических растворителей, более короткое время экстракции и более высокая
селективность. Однако некоторые методы экстракции, такие как сублимация,
прессование экспеллера и анфлераж, редко используются в текущих
фитохимических исследованиях, и не будут обсуждаться в этом пособии.

5.8. Лабораторная работа «Выделение вещества методом экстракции»

Цель работы: Провести экстракцию целевого вещества и определить её
концентрацию в смеси.
Оборудование: Делительные воронки, конические колбы, круглодонная
колба, воронка, вата.
Реактивы: Студенту выдается водный раствор целевого вещества,
экстрагент и сульфат натрия.
Перед началом лабораторной работы требуется изобразить структурную
формулу каждого из соединений и получить у преподавателя концентрацию
целевого вещества в водном растворе.

Таблица 5.1. Состав водных растворов

№ Состав Экстрагент
Вода, изопропиловый спирт, Гексан или петролейный эфир
1
смесь каротиноидов.
Вода, изопропилвый спирт, Хлористый метилен или
2
пурпурин хлороформ
Вода, изопропилвый спирт, Хлористый метилен или
3
феофорбид а хлороформ
Вода, гидроксид натрия, Этилацетат
4
метиловый эфир хлорина е6
5

59
 Ход работы:
1. Закрепить делительную воронку в штативе.
2. Положить кусочек ваты в воронку и засыпать сульфат натрия.
3. Проверить делительную воронку на протекание, водой и экстрагентом.
В случае если воронка протекает провести смазывание крана или обратиться к
преподавателю.
4. Проверить, закрыт ли кран.
5. Залить водный раствор. Не больше 1/3 делительной воронки.
6.Залить экстрагент. Немного меньше объема водного раствора.
7. Закрыть делительную воронку крышкой.
8. Провести экстракцию, путем энергичного встряхивания делительной
воронки.
9. Установить воронку в штатив и открыть крышку для удаления газов.
10. Взвесить круглодонную колбу и записать её вес.
11. В зависимости от того, где по отношению к воде находится экстрагент
слить его в круглодонную колбу, через воронку с сульфатом натрия.
12. Повторно провести экстракцию водного слоя (повторить шаги 5-10).
При необходимости сделать это еще раз.
13. Упарить экстрагент и взвесить колбу с веществом. Рассчитать массу
вещества.
14. Записать все наблюдения по ходу работы.

Ниже представлен пример таблицы для отчетов по лабораторной работе:

Таблица 5.2. Оформление результатов работы по экстракции
№ раствора Концентрация К (водный К (экстрагент) m (целевого
целевого, раствор) вещества), мг
моль/л

Контрольные вопросы:
1. Что такое экстракция?
2. Как экстрагируют жидкое-жидкое?
3. Как экстрагируют твердое-жидкое?
4. Опишите процесс непрерывной экстракции.
5. Напишите, как будет проходить экстракция смеси CuSO4 : Подсолнечное
масло в системе Гексан : Вода

60
 6. Как экстрагировать?
А. Хлорфилл из листьев шпината.
Б. Диазометан из реакционной смеси, в которой он получается.
В. Каротиноиды из биомассы бактерий.

6. ХРОМАТОГРАФИЯ

6.1. Общие закономерности

Хроматография – это метод разделения или анализа смесей, основанный на
различном распределении веществ между двумя фазами – подвижной (ПФ) и
неподвижной (НФ). Разделяемые компоненты распределяются между ПФ и НФ
в соответствии с их коэффициентами распределения, которые могут быть
определены по формуле:
𝑐𝑐(НФ)
𝐾𝐾 = ,
с(ПФ)
где с(НФ) и с(ПФ) содержание компонента смеси в двух фазах. Каждому
из веществ, входящих в состав смеси, соответствует свой коэффициент
распределения. Равновесный обмен вещества между НФ и ПФ осуществляется
в результате многократного повторения актов сорбция-десорбция (или других
форм взаимодействия с фазами) по мере движения ПФ вдоль НФ. Чем больше
значение К, тем дольше вещество удерживается на НФ. Если различные
компоненты смеси будут иметь одинаковые значения К для выбранных НФ и
ПФ, то разделить их не получится. В случае даже небольшого различия
значений коэффициентов распределения хроматографическое разделение
становится возможным, причем чем больше разница значений К, тем проще это
осуществить.
Существует множество способов классификации хроматографических
методов:
1. По цели проведения процесса хроматография может быть аналитической,
полупрепаративной, препаративной или промышленной.
2. По характеру взаимодействия вещества с ПФ и НФ хроматография
бывает адсорбционной (разделение за счет различной адсорбируемости веществ
на адсорбенте), распределительной (разделение за счет различной
растворимости веществ в ПФ и НФ), ионообменной (разделение за счет
различных констант ионообменного равновесия), эксклюзионной (разделение
за счет различной проницаемости компонентов смеси в НФ), аффинной
(разделение за счет специфических взаимодействий с различными лигандами).
61
 3. По агрегатному состоянию НФ и ПФ хроматография может быть
газоадсорбционной, газо-жидкостной, жидко-жидкофазной, твердо-
жидкофазной.
4. По технике исполнения выделяют колоночную, планарную и
капилярную хроматографию, а также хроматографию в полях (магнитных,
электрических и т.п.).
5. По способу ввода компонентов выделяют элюентную, фронтальную и
вытеснительную хроматографию.
6. По рабочему давлению выделяют хроматографию низкого давления
(FPLC), высокого давления (HPLC) и ультравысокого давления (UHPLC).

Рассмотрим хроматографический процесс на примере разделения тройной

смеси методом колоночной жидкостной адсорбционной хроматографии
(Рис. 6.1). В качестве НФ будет выступать сорбент, помещенный в трубку и
удерживаемый фильтрами. Через данную систему непрерывно перемещается
растворитель (элюент), который является ПФ. Введем в верхнюю часть колонки
разделяемую смесь, состоящую из компонентов А, В и С. В результате тока
элюента разделяемые вещества будут диффундировать внутрь пор сорбента и
адсорбироваться на НФ. Одновременно с этим будет происходить десорбция
компонентов смеси и их растворение в ПФ. Время, в течение которого
компоненты А, В и С будут находиться в адсорбированном состоянии будет
определяться силой их межмолекулярного взаимодействия с сорбентом. В
случае вещества С наблюдается слабая сорбция и его молекулы почти все
время перемещаются вниз по колонке со скоростью, сравнимой со скоростью
движения ПФ. Напротив, вещество А практически полностью сорбировано и
его скорость движения по колонке незначительна. Вещество В обладает
промежуточной скоростью движения по колонке относительно скорости потока
ПФ. Такое явление замедленного движения в хроматографии называется
удерживанием. Скорость движения компонентов смеси по колонке связана с их
коэффициентами распределения между НФ и ПФ. Так, у вещества А значение
K стремится к бесконечности, у вещества С к 0. Поскольку на практике на
колонку наносят не единичные молекулы, то компонент, введенный в колонку
«импульсно», выйдет из нее более широким фронтом. Данное явление
размывания связано с различной скоростью движения одних и тех же молекул и
вызвано целым комплексом обстоятельств.
Оценить эффективность разделения смеси можно с помощью
«теоретических тарелок». Данное понятие пришло в хроматографию из теории
62
ректификации и используется в аналогичном значении. Высота слоя сорбента, в
котором успевает совершиться в среднем один акт сорбции-десорбции
принимается за высоту эквивалентной теоретической тарелки. Число
теоретических тарелок зависит как от свойств сорбента, так и от способа его
упаковки.

а б в г
Рисунок 6.1. Пример хроматографического разделения смеси веществ:
а – устройство модельной хроматографической колонки; б – модельная смесь
в начальный момент времени; в – разделение смеси веществ после прокачки
системы растворителей равной половины объема колонки; г – разделение
смеси веществ после прокачки системы растворителей равной одному объему
колонки

Для эффективного разделения смесей требуется верно подобрать ПФ и

НФ. Так, в адсорбционной хроматографии, в первую очередь, необходимо
исходить из свойств разделяемых соединений (гидрофильность,
гидрофобность, наличие функциональных групп). Например, для веществ,
обладающих слабым сродством, используют активные слои и слабополярные
растворители (Рис. 6.2). Активность сорбента снижается при повышении
содержания воды в нем. Для характеризации активности оксида алюминия
используется шкала Брокмана, составленная на основе разделения различных
красителей (табл. 6.1). Для силикагеля как правило указывается процентное
содержание воды в нем.
В хроматографии используют различные сорбенты, среди которых чаще
всего в лаборатории применяется силикагель. Помимо него для решения ряда
задач используют оксид алюминия, кизельгур (для разделения полярных
63
соединений методом распределительной хроматографии), гипс, флоризил,
полиамиды, целлюлоза. Решающее значение для эффективности
хроматографии играет размер частиц и пористость сорбента. Так,
использование частиц меньшего размера увеличивает эффективность
разделения, но потребуется увеличить необходимое давление тока ПФ.
Пористость сорбента также влияет на эффективность разделения. Сорбенты с
мелкими порами имеют большую площадь поверхности, чем таковые с
крупными порами. Однако НФ с крупными порами обладают более
предсказуемой кинетикой процесса разделения.
Таблица 6.1. Активность по Брокману
Степень Содержание
активности воды, %
I 0
II 3
III 6
IV 10
V 15

Рисунок 6.2. Схема подбора условий

хроматографирования

В качестве ПФ в адсорбционной хроматографии используют различные

растворители. В табл. 6.2 представлены элюотропные ряды растворителей для
силикагеля и оксида алюминия. В них растворители располагаются в порядке
увеличения их элюирующей силы (способности десорбировать вещества с НФ)
от неполярных (гексан, пентан) к полярным. Для получения элюентов с
промежуточными полярностями используют смеси различных смешивающихся
растворителей, например хлороформ: метанол, этилацетат: гексан, толуол:
ацетон и т.п. Такие смеси могут применяться в хроматографии в нескольких
режимах элюирования: изократическое и градиентное. При изократическом
элюировании в ходе всего процесса используется система растворителей
постоянного состава, например, этилацетат: гептан в соотношении 2 : 3. При
градиентном элюировании состав смеси изменяется по заранее разработанному
алгоритму. Соотношение растворителей может изменяться ступенчато или
64
непрерывно, в соответствии с заданной функцией. Такой способ
хроматографирования позволяет добиться лучшего разделения компонентов
смеси. Как правило, для предотвращения явления размывания, в ходе
градиентного элюирования увеличивают содержание более полярного
растворителя.
Таблица 6.2. Элюотропный ряд растворителей
№ SiO2 Al2O3
1 Гексан Пентан
2 Пентан Гексан
3 Циклогексан Циклогексан
Четыреххлористый Четыреххлористый
4
углерод углерод
5 Толуол Толуол
6 Хлороформ Диэтиловый эфир
7 Хлористый метилен Хлороформ
8 Диэтиловый эфир Хлористый метилен
9 Уксусная кислота Ацетон
10 Ацетон Уксусная кислота
11 Этанол Пиридин
12 Метанол Этанол
13 Пиридин Метанол
14 Вода Вода

6.2. Тонкослойная хроматография

Тонкослойная хроматография (ТСХ) представляет собой
хроматографический метод, в котором в качестве неподвижной фазы
используется тонкий слой сорбента, нанесенный на подложку. В качестве
подложки используется алюминий, пластики или стекло. Чаще всего в
лабораторной практике применяют адсорбционную тонкослойную
хроматографию, для которой соблюдаются те же закономерности, что и для
колоночной адсорбционной хроматографии. Выделяют аналитическую и
препаративную тонкослойную хроматографию.
Процесс осуществляется следующим образом. На слой сорбента с нижнего
края (линия старта) наносятся растворы исследуемой смеси и известных
веществ («свидетели») в виде точек, а затем пластина помещается в систему
растворителей (элюент). По мере движения жидкости по пластине происходит
65
разделение смеси веществ (Рис. 6.3а). По окончании процесса отмечают
верхнюю границу подъема жидкости (линия фронта), высушивают пластину и,
при необходимости, проявляют. Отмечают положения пятен на пластине и
измеряют расстояние от линии старта до центра пятна (отрезок АВ), а также от
линии старта до линии фронта растворителя (отрезок АС). Отношение
расстояний АВ к АС обозначается через константу Rf, которая характеризуется
положение компонента смеси на данной хроматограмме:
𝐴𝐴𝐴𝐴
𝑅𝑅𝑓𝑓 =
𝐴𝐴𝐴𝐴

а б
Рисунок 6.3. Тонкослойная хроматография: а – хроматограмма, где
анализируемая смесь состоит из веществ-«свидетелей» 1 и 2; б – зависимость
значения Rf и формы пятна от количества мкг нанесенной пробы

Полученная величина характерна для данного вещества в данной системе

растворителей для данного адсорбента. Для надежности идентификации
компонентов смеси часто применяют известные вещества «свидетели». В
тонкослойной хроматографии используют как изократическое элюирование,
так и градиентное, как правило, ступенчатое.
Зачастую хроматографируют бесцветные вещества или смеси цветных и
бесцветных веществ. В таком случае требуется проявить разделенные
компоненты. В первую очередь пользуются физическими методами
проявления, которые основаны на оптических свойствах разделяемых веществ.
Для обнаружения веществ, поглощающих свет в УФ спектре, применяют слои
содержащих флуоресцирующее вещество. При облучении таких пластин УФ
лампой компоненты обнаруживаются в виде темных пятен. Большинство
применяемых в лаборатории пластин уже содержат флюорофор (на упаковке
таких пластин можно найти пометку UV254, F254, UV365 и т.п.). Если в
составе сорбента нет флуоресцирующего компонента, то его можно нанести
66
самостоятельно после элюирования, пропитав пластину нужным веществом и
высушив ее. Ряд веществ способны флуоресцировать при облучении УФ
лампой. В таком случае пятна будут светиться различными оттенками.
Если оптические методы не работают или являются недостаточными для
идентификации, применяют химические проявители. Возможно использование
как универсальных проявителей (водный раствор перманганата калия, пары
иода), так и проявителей, отличающихся специфичностью к веществам
определенного строения или содержащих определенные функциональные
группы. За счет химических реакций зоны становятся окрашенными и их
возможно идентифицировать. Наиболее часто встречающиеся методы
проявления приведены в табл. 6.3. Примеры использования представлены на
Рис. 6.4.
Огромное значение при разделении или анализе веществ при помощи ТСХ
играет количество наносимого образца. Большие количества вещества дают
большие пятна вытянутой формы, которые могут сливаться с пятнами веществ,
имеющих близкое значение Rf. При этом большие количества вещества
снижают значения Rf данного вещества (Рис. 6.3б). Напротив, малые количества
вещества могут быть слабодетектируемыми. Для подбора оптимального
количества наносимой смеси на пластинку наносят пробы с различным
количеством веществ, а затем элюируют в выбранной системе и проявляют в
выбранном проявителе. Таким образом, удается подобрать наилучшие условия
разделения с учетом чувствительности выбранного проявителя. Как правило,
наилучших результатов получается добиться при хроматографировании
0.5-1 мкг смеси, однако данная цифра не является универсальной и в каждом
случае следует подбирать количество наносимого вещества.
В некоторых случаях применяют специальные приемы
хроматографирования в тонком слое сорбента. Наиболее частым приемом
является многократное элюирование, которое может осуществляться либо в
одной и той же системе растворителей, либо в различных системах
(ступенчатое элюирование). Повторное элюирование в одной и той же системе
применяется в том случае, если определяемое вещество обладает низким
значением Rf или для разделения смеси компонентов с очень близкими
значениями Rf. Вычислить значение Rf’ при применении такого способа можно
следующим образом:

,
где n – количество повторов.
67
Таблица 6.3. Проявители для идентификации веществ на хроматограмме
Вещества Реактив Техника исполнения
Большинство Иод Приготовления проявителя: Способ 1. В стеклянную
органических емкость с широким горлом и со шлифом или винтовой
соединений резьбой помещается несколько кристаллов иода. Сосуд
закрывается крышкой и хранится в темноте. Желательно
использовать посуду из темного стекла.
Способ 2. Аналогично методике, описанной выше, на
дно сосуда дополнительно насыпают небольшой слой
порошкообразного силикагеля или окиси алюминия.
Обнаружение: Пластина, высушенная от растворителя,
помещается в камеру с иодом на несколько секунд до
появления окрашенных пятен на пластине. При
реактиве, приготовленному по способу 2 необходимо
встряхивание. Процесс проводить под вытяжной
вентиляцией.
Проявления веществ с помощью паров иода может
происходить по различным механизмам, в том числе
одновременно по нескольким
1) Образование полииодидов и их последующее
взаимодействие электронноизбыточными атомами
(анионы, N, S, O и др.)
2I2 = I+ + I3 -
I3 - + I2 = I5 -

2) Иодирование ненасыщенных соединений

68
Продолжение таблицы 6.3
Вещества Реактив Техника исполнения
Большинство Иод 3) Иодирование ароматических соединений
органических
соединений

Алкены, Перманганат Приготовление проявителя: Навеску из 1.5 г

алкины, калия перманганата калия и 10 г карбоната калия растворяют в
альдегиды, 200 мл воды. К полученному раствору приливают
кетоны, спирты 1.25 мл 10% раствора гидроксида натрия.
Обнаружение: Высушенную от растворителя пластину
опрыскивают или пропитывают полученным раствором.
Вещества проявляются в виде бело-желтых пятен на
фиолетовом фоне. В некоторых случаях для более
четкой идентификации требуется нагреть пластину.
Остатки перманганата калия смываются с пластины
тонкой струей холодной воды.
Пример реакции, протекающей в ходе проявления:

В случае первичных спиртов и альдегидов протекает

окисление до солей карбоновых кислот.
Альдегиды, Анисовый Приготовления проявителя: Смешать 135 мл
кетоны, альдегид безводного этилового спирта, 5 мл концентрированной
спирты, амины (п-метокси- серной кислоты, 1.5 мл ледяной уксусной кислоты,
бензальдегид) 3.5 мл пара-метоксибензальдегида. Полученный раствор
хранить без доступа света (емкость из темного стекла,
обернутая светонепроницаемым материалом) в
холодильнике не более 6 месяцев.
Обнаружение: Пластина смачивается или
опрыскивается раствором проявителя и подвергается
незначительному нагреву до изменения цвета сорбента
до желто-розового. Пятна разделяемых веществ
окрашиваются в различные цвета (красный, синий,
фиолетовый, серый и др.).
69
Продолжение таблицы 6.3
Вещества Реактив Техника исполнения
Альдегиды, Анисовый При проявлении могут протекать следующие
кетоны, альдегид химические реакции с образованием окрашенных
спирты, амины (п-метокси- продуктов:
бензальдегид) 1) Альдольно-кротоновая конденсация с
енолизующимися альдегидами и кетонами. Например, с
ацетофеноном:

2) Образование ацеталей:

3) Образование иминов:

Альдегиды, Ванилин Приготовление проявителя: Растворить 15 г ванилина

кетоны, в 250 мл этанола и добавить 2.5 мл концентрированной
спирты, серной кислоты. Полученный раствор хранить без
некоторые доступа света (емкость из темного стекла, обернутая
карбоновые светонепроницаемым материалом) в холодильнике.
кислоты Обнаружение: см. п. Анисовый альдегид.

При проявлении возможно протекание тех же реакций,

что и для анисового альдегида. Однако благодаря
гидроксильной группе в составе ванилина возможно
образование сложных эфиров с карбоновыми кислотами.

70
Продолжение таблицы 6.3
Вещества Реактив Техника исполнения
Альдегиды, Ванилин Например, при проявлении коричной кислоты:
кетоны,
спирты,
некоторые
карбоновые
кислоты

Однако чувствительность проявителя к карбоновым

кислотам существенно ниже, чем для альдегидов и
кетонов.
Спирты, Фосфорно- Приготовление проявителя: Приготовления: 5 г
фенолы, молибденовая фосфорномолибденовой кислоты растворить в 500 мл
алкены, кислота этанола. Хранить в светонепроницаемой емкости, так
карбонильные как раствор обладает высокой светочувствительностью.
соединения, Обнаружение: Промакнуть или опрыскивать пластину
алкилиодиды раствором проявителя и затем нагреть в течении
короткого времени. Зоны идентифицируемых веществ
окрасятся в зеленый или синий цвет.
Механизм работы данного проявителя связан с
окислением веществ фосфорномолибденовой кислотой.
При этом образуются молибденовые сини различного
строения и цвета. Ниже представлен один из вариантов
протекания реакции восстановления
фосфорномолибденовой кислоты:
PMoVI12 O40 3- + 4e = PMoV4 MoVI8 O40 7-
Фенолы, Хлорид Приготовление проявителя: 100 мг хлорида железа
некоторые железа растворить в 5 мл воды и 5 мл метилового спирта.
енолизущиеся Хранить в закрытой стеклянной таре.
карбонильные Обнаружение: Промакнуть или опрыскивать пластину
соединения раствором проявителя. Зоны с идентифицируемыми
веществами проявляются в виде зеленый или
фиолетовых пятен. В некоторых случаях для повышения
контрастности можно промакнуть проявленную
пластину 5% раствором карбоната калия. Пятна сменят
цвет на красный или буро-красный цвет.

71
Продолжение таблицы 6.3
Вещества Реактив Техника исполнения
Фенолы, Хлорид Принцип визуализации веществ связан с образованием
некоторые железа комплексов фенолов с ионом железа:
енолизущиеся
карбонильные
соединения

Кислоты Бромкрезоло- Приготовление проявителя: Растворить 40 мг

вый зеленый бромкрезола зеленого в 100 мл безводного этилового
спирта. Добавлять 0.1 М водный раствор NaOH по
каплям до изменения окраски с желтой на сине-зеленую.
Обнаружение: Промакнуть или опрыскивать пластину
раствором проявителя. Зоны идентифицируемых
веществ будут отображаться в виде бело-желтых пятен
на голубом фоне. Для повышения контрастности в
некоторых случаях пластину можно слегка нагреть.
Принцип обнаружения основан на способности
бромкрезола зеленого изменять цвет на желтый при
значениях pH ниже 3.8

72
Окончание таблицы 6.3
Амины, Нингидрин Приготовление проявителя: Растворить 240 мг
аминокислоты нингидрина в 100 мл 1-бутанола. Раствор хранить в
емкости с закрытой крышкой.
Обнаружение: Промакнуть или опрыскивать пластину
раствором проявителя и нагреть пластину. Зоны
идентифицируемых веществ будут отображаться в виде
сине-фиолетовых пятен (первичные амины), желто-
оранжевых (вторичные и третичные амины) пятен.

Образование окрашенных зон связано с протеканием

следующих реакций:

Ступенчатое элюирование применяют в том случае, когда не все

компоненты смеси хорошо разделяются в выбранной системе растворителей.
Сначала применяют системы, в которых разделяются менее полярные
компоненты смеси, затем пластину высушивают и применяются более
полярные элюенты. При этом на каждой «ступени» разделения возможно
укорачивать расстояния до фронта движения ПФ. В особых случаях пластину
допускается развернуть на 180о и хроматографировать с обратной стороны.

73
 а б в г

д е ж з
Рисунок 6.4. Примеры использования проявителей: а – разделяемые вещества;
б – проявление в УФ на пластинах без флуоресцентной метки; в - проявление в
УФ на пластинах с флуоресцентной меткой; г – проявление в парах иода;
д – проявление раствором перманганата калия; е – обработка пластины
раствором ванилина; ж – проявление фосфорномолибденовой кислотой; з – без
проявителя

Частным случаем ступенчатого элюирования является двумерная ТСХ. В

этом случае повторное разделение осуществляют в направлении
перпендикулярном изначальному. Готовят пластинку квадратной формы и
наносят пробу вещества на небольшом расстоянии от одного из углов на
диагональ. Движение элюента проходит сначала в одном направлении, при
этом пятна слабо разделяются и лежат на одной линии, после чего пластину
высушивают, поворачивают на 90о и хроматографируют в другой системе
растворителей, добиваясь разделения (Рис 6.5а). Такой вид хроматографии
эффективен для разделения многокомпонентных смесей. Помимо этого, при
таком способе возможно комбинирование сразу двух видов хроматографии –
адсорбционной и распределительной (ПФ и НФ – две несмешивающиеся
жидкости). Например, возможно использование пластинки со слоем
силикагеля, на которую наносят пробу вещества и хроматографируют в
74
выбранной системе растворителей. Пластину высушивают, пропитывают
водой, которая будет выступать в качестве НФ, поворачивают на 90о и
хроматографируют в несмешивающимся с водой растворителе.

б в
Рисунок 6.5. Специальные техники тонкослойной хроматографии: а –
двумерная ТСХ; б – круговая ТСХ; в – метод Матиасса.

В некоторых случаях на хроматограмме появляются два пятна с близкими

значениями Rf и неясно, является ли второе пятно примесью или оно
соответствует продукту превращения данного вещества во время
взаимодействия с сорбентом (окисления, изомеризация, полимеризация и т.п.)
Для того, что выяснить это применяют двумерную ТСХ с применением одной и
той же системы растворителей. Если химических превращений в ходе
хроматографирования не происходило, то пятна будут лежать на диагонали
пластины, а в случае взаимодействия с сорбентом – существенно выше или
ниже диагонали.
Еще одним приемом разделения смесей является круговая хроматография.
Вещество наносится на центр пластинки и, затем, в это же место подается
элюент с помощью капилляра или жгутика. Разделяемые вещества наблюдают в
виде концентрических колец (Рис. 6.5б). Данный способ разделения
эффективен при комбинировании элюирования с вращением пластины, однако
75
аппаратурное исполнение такого метода весьма затруднительно и практически
не применяется в лабораторной практике. Частным случаем круговой
хроматографии является разделение по методу Маттиаса. Часть сорбента
снимают с пластинки (Рис. 6.5в), а смесь наносят на узкую полосу. В ходе
элюирования происходит разделение в секторе круга. Такой способ используют
для разделения веществ с очень маленькой разницей в значениях Rf и позволяет
получить достаточно резко разграниченные зоны.
Помимо хроматографирования под действием капиллярных сил
(восходящая хроматография) в ряде случаев удобно применять нисходящую
ТСХ, при которой система растворителей подается по пластине сверху вниз. В
этом случае растворитель движется по пластине проточно и непрерывно, в
отличие от восходящей хроматографии, где процесс останавливается при
достижении растворителем верхнего края пластины. При применении
нисходящей ТСХ возможно применение градиентного элюирования с
непрерывным изменением состава системы растворителей.
В ряде случаев ТСХ также возможно применять для количественного
анализа, который позволяет быстро определить примерный состав разделяемой
смеси. Точность определения составляет от 2 до 10%. Так, можно оценить
состав смеси по измерению площади пятен, при этом важно использовать
«свидетели» с известной концентрацией. Более точно оценить состав смеси
можно с использованием фотометрии. Данный способ применим для
окрашенных веществ или соединений, которые дают окрашенные зоны при
проявлении. Хроматографируют «свидетели» с известной концентрацией и
затем измеряют интенсивность окраски фотометром в отраженном свете (для
спектрофотометра требуется специальная приставка). По полученным
значениям строится калибровочная кривая, благодаря которой возможно
оценить количество вещества в анализируемом веществе. При количественном
анализе важную роль играет пробоподготовка, а также воспроизводимые
условия хроматографирования. На сегодняшний день метод количественной
ТСХ применяется все реже из-за большей доступности ГЖХ и ВЭЖХ.
Для получения воспроизводимых результатов при использовании метода
ТСХ следует соблюдать ряд правил:
1) размер пластинок для аналитической ТСХ не менее 20х50 мм;
2) хранение пластинок в закрытой емкости с осушителем (прокаленный
силикагель, гранулированный силикагели с цветной индикацией влажности);
3) расстояние от линии старта до края пластины не менее 10 мм;
4) длина пробега от линии старта до линии фронта не менее 40 мм;
76
 5) насыщенность камеры парами элюента (камера плотно закрыта
крышкой);
6) погружение пластинки в растворитель не менее чем на 3 мм;
7) применение очищенных растворителей;
8) применение в качестве метчиков стандартных красителей (индофенол,
судан красный, масляный желтый, масляный синий и др.).
Таким образом, тонкослойная хроматография является простым в
реализации и одновременно крайне информативным методом анализа.

6.3. Лабораторная работа «Анализ органических соединений методом

ТСХ»
Цель работы: установить состав многокомпонентной смеси органических
соединений методом ТСХ.
Оборудование: Пластины ТСХ на алюминиевой подложке, камера для ТСХ
с крышкой, набор капилляров, фильтровальная бумага, пинцет, мерные
цилиндры на 10-50 мл, пипетки, груша, УФ-лампа.
Реактивы: Студенту выдается набор навесок индивидуальных веществ
«свидетелей» (по указанию преподавателя), набор растворителей и набор
реактивов-проявителей (иодная камера, раствор ванилина и др.). Студентам
также выдается раствор, в составе которого присутствует смесь из 2-3
соединений из списка в таблице 4.
Таблица 6.4. Список веществ-«свидетелей»
№ Название Растворитель
1 Холестерин Хлористый метилен
2 Цетилпальмитат Хлористый метилен
3 Пальмитиновая кислота Хлористый метилен
4 п-Ациланизол Хлористый метилен
5 Метил 3,5-дигидроксибензоат Хлористый метилен
6 Хинолин-2-карбоновая кислота Этиловый спирт
7 Изохинолин-3-карбоновая кислота Этиловый спирт
8 6-Метилпиколиновая к-та Этиловый спирт
9 1,4-Дифенилтетразин Хлористый метилен
10 Коричная кислота Хлористый метилен
а-Бензиловый эфир
11 Хлористый метилен
Boc-глутаминовой кислоты
12 Глицин Этиловый спирт
13 1,2,3-Бензотриазол Этиловый спирт
14 Гидрохинон Ацетон
15 Трифенилметанол Хлористый метилен
77
 Перед началом лабораторной работы требуется изобразить структурную
формулу каждого из соединений.
Ход работы:
1. Приготовить набор систем растворителей этилацетат/гексан в объемных
соотношениях 1/5, 1/4, 1/3, 2/3, 3/2 по 50 мл каждого. Также приготовить
системы элюентов на основе хлористого метилена/этанола в объемных
соотношениях 200/1, 100/1, 80/1, 50/1, 25/1, 20/1, 15/1, 10/1, 5/1 по 50 мл
каждого.
2. Приготовить растворы веществ свидетелей с концентрацией 1 мг/мл.
Применяемые растворители указаны в таблице.
3. Подготовить пластины размером 20х50 мм. Количество пластин
согласовывается с преподавателем.
4. Нанести 3-5 мкл пробы каждого из веществ как показано на Рис. 6.6.
Высушить пластины от растворителя. Заполнить раздел колонку «Цветность» в
таблице наблюдений.

Рисунок 6.6. Схема нанесения веществ для проверки взаимодействия с

проявителями.

5. Облучить пластину УФ-светом с длиной волны 254 нм, а затем 365 нм.
Результаты наблюдений поглощения/флуоресценции занести в таблицу
наблюдений.
6. Проявить пластины в различных проявителях (по указанию
преподавателя) и занести результаты наблюдений в таблицу.
7. Подготовить пластину размером 20х50 мм, карандашом отметить линию
старта. Нанести 3-5 мкл анализируемой смеси на пластину и высушить ее от
растворителя. Начать ступенчато элюировать смесь начиная с неполярной
системы. Проявлять пластину в УФ-свете с длиной волны 254 нм и
фиксировать в журнале положение зон. Выявить наиболее удачный элюент для
анализируемой смеси. При необходимости повторить процесс с применением
различных проявителей (по указанию преподавателя).
8. Подготовить пластину размером 20х50 мм, карандашом отметить линию
старта. Нанести 3-5 мкл анализируемой смеси на пластину и высушить ее от
78
растворителя. Хроматографировать в выбранной системе по п.7. В конце
элюирования карандашом отметить линию фронта. Проявлять пластину в УФ-
свете с длиной волны 254 нм и фиксировать в журнале положение зон.
Измерить значения Rf для каждого пятна. При необходимости выбрать и
применить химический проявитель.
9. Подготовить пластину размером 100х50 мм, карандашом отметить
линию старта. Нанести 3-5 мкл каждого из «свидетелей» на пластину и
высушить ее от растворителя. Хроматографировать в выбранной системе по
п.7. В конце элюирования карандашом отметить линию фронта. Проявлять
пластину в УФ-свете с длиной волны 254 нм и фиксировать в журнале
положение зон. Измерить значения Rf для каждого вещества. При
необходимости выбрать и применить химический проявитель. Занести значения
Rf свидетелей в таблицу.
10. Сравнить значения Rf компонентов смеси с таковыми для веществ-
«свидетелей», которые были измерены в той же системе растворителей.
Сравнить характер окрашивания зон при проявлении с таковым для
«свидетелей». Предположить состав смесь и подтвердить его сравнительными
хроматограммами с веществами-«свидетелями». Например, для
трехкомпонентной смеси готовится пластина размером 40х50 мм, наносится
проба смеси и три выбранных «свидетеля». Хроматографируют в элюенте,
выбранном в п.10. Применяют различные проявители. При совпадении
положений зон компонентов смеси с пятнами «свидетелей» задание считается
выполненным. Результаты записываются в таблицу. К отчету по лабораторной
работе прикладываются все хроматограммы.
11. Если один из компонентов смеси не удается идентифицировать, то
требуется проводить сравнительные хроматограммы с каждым из веществ-
«свидетелей»
Ниже представлены примеры таблиц для отчетов по лабораторной работе:
Таблица 6.5. Сведения об индивидуальных веществах.
Наблюдения
Соединение УФ- УФ- Проявитель Проявитель
Цветность ............
254 365 1 n
1
2
.....
n

79
Таблица 6.6. Измерение значений Rf индивидуальных веществ
Соединение Rf
1
2
.....
n
Условия хроматографирования: ______________________________________

Таблица 6.7. Результаты анализа смеси

Смесь № ______
№ компонента Соединение
1
2
3

Контрольные вопросы:
1. Возможно ли при хроматографировании смеси бензофенона и
ацетофенона в качестве проявителя использовать ванилин? Ответ поясните
уравнениями соответствующих реакций.
2. На что влияет количество наносимого вещества на сорбент при
использовании тонкослойной хроматографии?
3. Как на ТСХ можно отличить фенол от пирокатехина?
4. Почему важно точно фиксировать линию старта и фронта?
5. Вещества А и Б имеют очень близкие значения Rf в системе
растворителей хлористый метилен/метанол в объемном соотношении 25/1?
Какими способами можно повысить эффективность разделения?
6. Почему при проявлении нингидрином первичные и вторичные амины
будут давать окрашенные зоны различного цвета и интенсивности? Приведите
примеры реакций.

80
 7. ФИЛЬТРОВАНИЕ

Соединения, выпадающие в осадок, можно выделить из суспензии с

помощью фильтрования. При работе с микроколичествами веществ используют
также центрифугирование, которое дает меньшие потери. Менее эффективным
способ отделения твердой фазы от жидкой является декантация, которую
проводят путем сливания раствора с осадка. С другой стороны, декантация
позволяет лучше промыть осадок от маточного раствора (фильтрата), так как на
фильтре в толще осадка образуются каналы, по которым стекает основной
объем промывной жидкости. По возможности применяют оба способа: сначала
отделяют жидкую фазу и промывают осадок декантацией, затем фильтруют
осадок. Декантацию не применяют для мелких и легких частиц.
Эффективность фильтрования, которая включает скорость и полноту
отделения осадка от жидкости, зависит от следующих факторов:
1. Размер пор и площадь фильтрующей поверхности;
2. Разница давлений по обе стороны фильтра;
3. Характер осадка (вязкость, размер частиц, сжимаемость);
4. Вязкость жидкой фазы;
5. Температура.

7.1. Фильтрующие материалы

В качестве фильтрующего материала применяют бумагу, пористое стекло,
волокнистые материалы (например, обычная вата). Если целью фильтрования
является чистый фильтрат, а не осадок, то в качестве фильтра можно
использовать сыпучие вещества, такие как целит – осадочная горная порода,
содержащая останки окаменелых диатомовых водорослей. Целит является
достаточно эффективным фильтром, а также используется в качестве
вспомогательного материала для предотвращения забивания бумажных или
стеклянных фильтров мелкими частицами и снижения сопротивления
фильтрованию вязких осадков.
Размер пор фильтра является одним из определяющих факторов для
эффективности фильтрования. Крупные поры могут пропускать осадок, а
мелкие – снижают скорость фильтрования. Желательно, чтобы размер пор был
меньше самых мелких частиц в осадке, тогда фильтр не будет забиваться.
Размер пор некоторых фильтрующих материалов представлен в табл. 7.1.

81
Таблица 7.1. Размер пор фильтрующих материалов
Фильтрующий материал Размер пор, мкм
Стеклянные пористые фильтры 100-5
Фильтровальная бумага 20-0.8
Целит 17-0.5
Ультрафильтры 0.1-0.001

Фильтровальную бумагу производят разных сортов, отличающихся

размером пор, зольностью (актуально для аналитических целей), плотностью и
др. Также существуют различные марки целитов. Конкретные параметры
фильтрующего материала обычно указаны в спецификации и/или на упаковке.
Таблица 7.2. Маркировка фильтров
Российские Зарубежные
Размер
обозначения обозначения
пор, Комментарии
№ Обозначение Класс Обозначение
мкм
фильтра по ГОСТ фильтра по ISO*
грубый фильтр,
часто
используется в
0 ПОР 250 S0 Р 250** 250-160 качестве
перегородки в
колонках для
хроматографии
для
1 ПОР 160 S1 Р 160 160-100 грубозернистых
осадков
2 ПОР 100 S2 Р 100 100-40 универсальный
для
3 ПОР 40 S3 Р 40 40-16 мелкозернистых
осадков
для очень
4 ПОР 16 S4 Р 16 16-10 мелкозернистых
осадков
обычно
5 ПОР 1.6 S5 Р 1.6 1.6-1.0 используется для
микроорганизмов
* ISO – международная организация по стандартизации
** на фильтрах, изготовленных до 1980 года возможно обозначение «Por. №»

82
 Большим удобством отличаются воронки Шотта, в которых впаяна
пластина из пористого стекла. Такие пластины получают из частично
сплавленного стекла и различаются величиной пор, что указывается на воронке
соответствующим обозначением (табл. 7.2). Примерно оценить пористость
можно визуально: более шершавая поверхность пластины с более крупными
зернами стекла соответствует большему размеру пор; если поверхность гладкая
и отдельные зерна едва различимы, то перед вами мелкий фильтр.
В отличие от большинства других фильтрующих средств воронки Шотта
устойчивы к действию кислот, за исключением плавиковой, и умеренно
устойчивы к действию щелочей на холоду.

7.2. Фильтрование при атмосферном давлении

Как было отмечено выше, на эффективность фильтрования влияет разница
давлений по обеим сторонам фильтра. При обычном фильтровании перепад
давлений создается гидростатическим давлением фильтруемой жидкости и
слабым разрежением, создаваемом стекающим фильтратом при определенных
условиях. Для фильтрования через наливные конические воронки бумагу
складывают в гладкие или складчатые фильтры.
Гладкий фильтр должен плотно прилегать к стенкам воронки – это одно из
условий для создания разрежения под фильтром. Для этого круглый лист
фильтровальной бумаги дважды сгибают, причем во второй раз не по средней
линии, а по близкой к ней параллельной линии, затем раскрывают больший
конус (Рис. 7.1а). Если у воронки неправильная конусность (угол не равен
60 °С), то полуокружность складывают не под прямым углом, а с отклонением,
затем раскрывают или больший, или меньший конус в зависимости от угла
(Рис. 7.1б).

а б
Рисунок 7.1. Приготовление гладких фильтров: а – для воронок с углом, равным
60 °С; б – для воронок с углом, не равным 60 °С

По сравнению с гладким фильтром, складчатый фильтр позволяет

проводить фильтрование с большей скоростью. Удобнее получать его из
круглого листа фильтровальной бумаги, который складывают вдвое, затем
83
вчетверо. Дальнейшие манипуляции проводят с фильтром, сложенным вдвое.
Края 2-1 и 2-3 накладывают на линию 2-4 (Рис. 7.2). Получают новые сгибы
2-5 и 2-6. Затем края 2-1 и 2-3 по очереди накладывают на линию 2-5,
повторяют операцию с линией 2-6. Получаются новые сгибы 2-7 и 2-8, 2-9 и 2-
10. Сложенный вдвое фильтр складывают «гармошкой» по линиям сгиба, затем
раскрывают, получая складчатый фильтр.

4 7 4 7 4 10
5 6 5 6 5 6
8 9 8

1 2 3 1 2 3 1 2 3

Рисунок 7.2. Приготовление складчатых фильтров.

При использовании воронок большого диаметра, особенно при горячем

фильтровании (см. ниже), существует вероятность, что фильтр разорвется под
давлением фильтруемой жидкости. Чтобы этого избежать, рекомендуется
фильтровать большие объемы через два складчатых фильтра, вложенных один
в другой.
Поскольку фильтрование обычно является вспомогательной операцией, то
выбор приемника для сбора фильтрата определяется его дальнейшей
обработкой. В качестве приемника можно использовать кристаллизаторы,
стаканы, плоскодонные или круглодонные колбы. Последний вариант
выбирают в случае дальнейшего нагревания, перегонки или удаления
растворителя.
Воронку с фильтром помещают в металлическое кольцо на штативе или
вставляют в горло самой колбы. В последнем случае под воронку можно
положить кусочек фильтровальной бумаги, чтобы вытесняемый воздух мог
свободно выходить из колбы. Важно разумно подобрать размер воронки для
фильтрования. Чем больше ее диаметр, тем быстрее пройдет фильтрование, но
больше будут потери вещества, остающегося на фильтре и стенках воронки. С
другой стороны, через небольшую воронку неудобно фильтровать большие
объемы жидкости. Таким образом, при выборе воронки нужно ориентироваться
на цели фильтрования и объемы жидкости. Фильтр складывают в соответствии
с размерами воронки: между краем воронки и краем вложенного в нее фильтра
должно оставаться свободное пространство шириной 0.5 – 1 см (Рис. 7.3а).
Фильтр не должен выступать за края воронки, так как это может привести к
потере жидкости.

84
 а б

Рисунок 7.3. Фильтрование при атмосферном давлении: а – правильное

расположение фильтра в воронке; б – фильтрование через вату.

После стекания фильтрата осадок на фильтре промывают небольшими

порциями того же растворителя или другого, в котором осадок малорастворим.
В этот момент можно промыть и исходную колбу. Для этого ее промывают
чистым растворителем, затем переносят получившийся раствор на фильтр.
Для ускорения фильтрования при использовании гладкого фильтра можно
использовать воронку с удлиненной трубкой. Конец трубки должен быть
прямым, а не скошенным. При заполнении трубки воронки жидкостью под
фильтром будет наблюдаться слабое разрежение, что ускорит процесс
фильтрования в несколько раз. Другим способом ускорения процесса является
использование складчатого фильтра, который имеет большую поверхность
фильтрования по сравнению с гладким фильтром того же диаметра.
Складчатый фильтр является незаменимым при горячем фильтровании. Оно
необходимо, когда раствор при обычной температуре слишком вязкий и
медленно фильтруется (вязкость уменьшается при увеличении температуры)
или кристаллизуется. Для проведения горячего фильтрования в сушильном
шкафу нагревают установку (приемник, воронку и фильтр в сборе), затем
быстро выливают на фильтр горячий раствор. Осадок в таком случае не
промывают!

7.3. Фильтрование при пониженном давлении

Создание разрежения под фильтром позволяет значительно ускорить
процесс фильтрования. В качестве приемников используют толстостенную
колбу Бунзена или круглодонные колбы. В качестве фильтров удобнее
использовать воронки Бюхнера с перфорированной фарфоровой пластиной или
Шотта со стеклянной пластиной. При использовании воронки Бюхнера в нее
обязательно вкладывают круглый бумажный фильтр, диаметр которого должен
быть немного меньше диаметра воронки. В противном случае под загибы по
краям воронки будет проникать фильтруемая жидкость. Воронки Шотта можно
85
использовать как с бумажным фильтром, так и без него. Размеры воронок и
приемников должны соответствовать количеству осадка и фильтрата.
Некоторые варианты установок для фильтрования под вакуумом представлены
на рисунке 7.4.

Рисунок 7.4. Фильтрование при пониженном давлении.

Любую колбу для сбора фильтрата рекомендуется закрепить на штативе.

Перед началом фильтрования бумажный фильтр смачивают растворителем,
затем подключают вакуум (фильтр присасывается ко дну воронки) и заливают
фильтруемую жидкость. Если в качестве растворителя выступает вода, то сразу
после присасывания фильтра к воронке вакуум отключают и только потом в
воронку заливают жидкость. Затем вновь подключают вакуум и фильтруют.
При этом нужно доливать фильтруемую жидкость так, чтобы осадок постоянно
находился под слоем жидкости. Это поможет избежать образования трещин,
которые мешаю равномерному фильтрованию.
После стекания жидкости осадок на фильтре аккуратно отжимают с
помощью стеклянной пробки или, в случае микроколичеств осадка, стеклянной
палочкой, пока фильтрат не перестанет капать. Это позволяет уменьшить
влажность осадка и устранить трещины в нем. Трещины могут помешать далее
промыть осадок от фильтрата, так как жидкость будет проходить только через
трещины (по пути наименьшего сопротивления), а не через весь объем осадка.
Осадок промывают чистым растворителем (тем же или другим). Для этого
вакуум отсоединяют, пропитывают осадок на фильтре небольшим количеством
растворителя, затем подключают вакуум и фильтруют. Операцию повторяют
несколько раз, не забывая отжимать осадок. Если целью фильтрования является
86
осадок, то его собирают и сушат.
При фильтровании под вакуумом следует помнить об одном недостатке:
при использовании летучего растворителя вследствие его активного испарения
на нижней поверхности фильтра происходит сильное охлаждение и
кристаллизация вещества в порах фильтра, что может приводить к замедлению
или полной остановке процесса. Если фильтр сильно охладился, и скорость
фильтрования упала, можно отключить ненадолго вакуум, а когда температура
поднимется до обычной, продолжить фильтрование. Не рекомендуется
проводить при пониженном давлении горячее фильтрование – раствор будет
слишком быстро охлаждаться.

87
 8. ПЕРЕКРИСТАЛЛИЗАЦИЯ

Перекристаллизация является относительно простым, но важным методом

разделения твердых веществ и очистки их от примесей. При этом следует
учитывать, что прямая перекристаллизация реакционной массы не всегда
возможна, поскольку определенные примеси способны снижать скорость
кристаллизации или вовсе препятствовать образованию кристаллов. Поэтому
обычно проводят предварительную очистку реакционной массы с помощью
перегонки или экстракции.
Метод перекристаллизации основан на увеличении растворимости веществ
в данном растворителе с ростом температуры, а также разной растворимости
целевого вещества и примесей. Загрязненное вещество растворяют при
нагревании в подходящем растворителе. Растворитель нужно брать в
количестве, достаточном для полного растворения вещества при нагревании, но
не при комнатной температуре. Тогда при последующем охлаждении раствора
одно из веществ выпадает в осадок, а другое (или другие) остается в растворе.
Удобнее, чтобы в осадок выпадало целевое вещество, тогда его проще
выделить.

8.1. Выбор растворителя

Для успешного проведения перекристаллизации важно подобрать
правильный растворитель, который должен отвечать следующим требованиям:
1. Химическая инертность в отношении разделяемых веществ при
комнатной температуре и кипении;
2. Хорошая растворимость целевого вещества при нагревании и
плохая – при комнатной или более низкой температуре;
3. Плохая растворимость примесей при кипении (тогда их можно
отделить горячим фильтрованием) или хорошая растворимость
примесей при комнатной температуре (тогда при охлаждении они
остаются в растворе, а не выпадают вместе с целевым веществом);
4. Температура кипения растворителя должна быть ниже температуры
плавления вещества минимум на 10 °С (в противном случае
вещество будет выпадать из раствора в виде масла, которое
адсорбирует часть примесей).
Для известных веществ можно воспользоваться справочными данными о
растворимости или опубликованной методикой очистки. В остальных случаях
проводят пробную перекристаллизацию на небольшом количестве вещества.
88
Вначале определяют температуру плавления вещества. Это необходимо для
выполнения требования 4 к растворителю, а также для оценки чистоты
вещества после перекристаллизации по изменению температуры плавления.
При выборе растворителя учитывают принцип «подобное растворяется в
подобном»: полярные вещества будут лучше растворяться в полярных
растворителях, неполярные – наоборот. При прочих равных условиях лучше
брать растворитель с температурой кипения в диапазоне 50-90 °С. Взвешивают
10-15 мг вещества, измельчают в порошок, переносят в колбу на 10 мл или
пробирку, добавляют 1 мл растворителя. Если вещество растворилось при
комнатной температуре, то растворитель не подходит. Если вещество плохо
растворяется, добавляют еще 0.5 мл растворителя и нагревают до кипения.
Нерастворившиеся частицы отфильтровывают горячим фильтрованием.
Раствор охлаждают, выпавшие кристаллы отфильтровывают, сушат,
взвешивают и определяют температуру плавления. Если температура
плавления повысилась (чистые вещества имеют более высокую температуру
плавления, чем их смеси), а выход превышает 80%, то такой растворитель
можно использовать для перекристаллизации.
Не всегда удается подобрать растворитель, который бы позволил
избавиться сразу от всех примесей. В таких случаях используют
последовательные перекристаллизации из одного и того же или из разных
растворителей. Если подобрать растворитель не удается, используют смесь
растворителей: один из них должен хорошо растворять целевое вещество,
второй – плохо. В качестве примеров таких смесей можно назвать водные
растворы спиртов, смеси простых эфиров с хлороформом, спиртами или
петролейным эфиром и т.д. Обычно применяют одну из нескольких стратегий:
1. Смесь растворителей готовят заранее в известном соотношении.
2. Вещество растворяют при нагревании в растворителе, который его
хорошо растворяет. К горячему раствору добавляют по каплям
нагретый второй растворитель, пока не образуется устойчивое
помутнение раствора. Полученную смесь нагревают до
прозрачности, при необходимости добавляют несколько капель
первого растворителя.
3. В кипящую суспензию вещества в растворителе, который его плохо
растворяет, добавляют «хороший» растворитель до полного
растворения вещества.

89
 8.2. Перекристаллизация из органического растворителя
В термостойкую плоскодонную или круглодонную колбу, снабженную
обратным холодильником, помещают предварительно взвешенное вещество,
кипелки (1-2 шт., причем крупные будет легче удалить из смеси) и
растворитель в объеме явно недостаточном для полного растворения вещества
при комнатной температуре. Растворитель должен лишь покрывать твердое
вещество, на 1 г вещества обычно используют 10-50 мл растворителя.
Смесь доводят до кипения на водяной бане или колбонагревателе. Если
вещество растворилось не полностью, то колбу немного охлаждают и
добавляют пипеткой через обратный холодильник новую порцию растворителя
(5-10% от исходного объема). Дают смеси покипеть еще 1-2 минуты.
Повторяют данную операция, пока все вещество не растворится. Но, если при
добавлении новой порции растворителя, количество взвешенных частиц не
уменьшается, то это могут быть нерастворимые примеси, которые
целесообразно отфильтровать в горячем виде.
Если раствор гомогенен и не окрашен смолистыми примесями, то его
оставляют для кристаллизации. Кипелки извлекают с помощью шпателя или
пинцета, также можно декантировать раствор в другую колбу.
Если раствор содержит нерастворимые примеси, то проводят горячее
фильтрование (см. раздел 7.2). Иногда раствор может быть окрашен
смолистыми примесями, которые затрудняют кристаллизацию целевого
вещества. Как правило, данные примеси сильно отличаются по своим физико-
химическим характеристикам от остальных компонентов смеси и могут быть
удалены из раствора с помощью адсорбентов. В случае полярных
растворителей растворы кипятят с активированным углем, который измельчают
и добавляют к теплому, но не кипящему раствору. При добавлении адсорбента
в кипящий раствор возможен выброс содержимого из колбы! Затем уголь
отфильтровывают, при необходимости процедуру повторяют. В случае
неполярных растворителей растворы фильтруют на воронке Шотта или
Бюхнера через слой безводного оксида алюминия. В обоих случаях адсорбент
берут в количестве не больше 5% от массы перекристаллизуемого вещества.
Колбу с горячим раствором неплотно закрывают (например, часовым
стеклом или фильтровальной бумагой), чтобы внутрь не попадала пыль, и
охлаждают на воздухе до комнатной температуры. Не следует ставить горячую
колбу на холодную металлическую или керамическую поверхность, а также
помещать ее сразу в лед – это может привести к разрушению стекла. Колбу
ставят или на деревянную подставку или закрепляют на штативе в паре
90
сантиметров от поверхности лабораторного стола или тяги.
После достижения комнатной температуры для более полного выпадения
кристаллов колбу помещают в ледяную баню (измельченный лед и небольшое
количество воды) или в холодильник. В большинстве случаев не следует
оставлять колбу при низкой температуре дольше 2 часов, поскольку это может
привести к выпадению целевого вещества и/или примесей в виде масла, что не
позволит выделить чистый продукт.
В некоторых случаях образование кристаллов не наблюдается, тогда в
колбу вносят несколько кристаллов чистого вещества (при наличии). Таким
образом создаются центры кристаллизации, этот прием называется «введение
затравки».
Данный способ позволяет разделять смеси веществ, которые плохо
отделяются друг от друга при других условиях. В пересыщенный раствор
вносят кристалл нужного компонента смеси, что вызывает только его
кристаллизацию, а остальные вещества остаются в растворе.
Центры кристаллизации можно создать и другими способами. В одном из
них стеклянную палочку смачивают растворителем (который использовался
при перекристаллизации или другим химически инертным по отношению к
веществу) и резко охлаждают, например, погружая в жидкий азот. Иногда
процедуру повторяют несколько раз, пока на поверхности стеклянной палочки
не образуются кристаллы жидкости. Затем палочку опускают в раствор. Другой
способ заключается в потирании стеклянной палочкой о стенки сосуда. При
этом образуется стеклянная пыль, которая послужит центрами кристаллизации.
Скорость кристаллизации веществ сильно различается, поэтому никогда не
нужно спешить выбрасывать маточный раствор. Если кристаллизацию не
удалось вызвать сразу, то раствор оставляют на 1-2 суток.
Выпавший осадок отфильтровывают при пониженном давлении (Рис. 7.4).
Если сразу не удалось перенести все кристаллы из колбы на фильтр, то колбу
промывают маточным раствором. В заключении осадок на фильтре промывают
еще раз маточным раствором или охлажденным до 4 °С чистым растворителем
(чтобы снизить растворимость целевого вещества). Отжатые на фильтре
кристаллы собирают и сушат при комнатной температуре (часто под вакуумом)
от остатков растворителя. Для оценки чистоты продукта определяют
температуру плавления. Следует отметить, что в случае новых кристаллических
веществ температура плавления является обязательной физико-химической
характеристикой, которую нужно определить.

91
 8.3. Лабораторная работа «Очистка вещества методом
перекристаллизации»
Цель работы: провести очистку холестерина.
Оборудование: плоскодонная колба со шлифом (100 мл), водяной
холодильник, пробка, мерный цилиндр на 50 мл, наливная воронка, резиновые
шланги, шпатель, фильтр Шотта, колба Бунзена, бюкс с крышкой, вакуум-
эксикатор, колбонагреватель, водоструйный или мембранный насос, прибор для
определения температуры плавления и капилляры к нему.
Реактивы: холестерин, хлороформ.
Ход работы:
1. В термостойкую плоскодонную колбу со шлифом на 100 мл отвешивают
0.5 г холестерина, добавляют кипелки и расчетное количество хлороформа и
кипятят с обратным холодильником. Значения растворимости находят в
справочнике.
2. После растворения вещества колбу охлаждают до комнатной
температуры, затем помещают в ледяную баню.
3. Через 15 минут отфильтровывают выпавшие кристаллы под вакуумом,
помещают их в предварительно взвешенный бюкс и оставляют сушиться в
вакуум-эксикаторе. Ход работы записывают в лабораторный журнал.
4. После сушки кристаллы взвешивают, определяют практический выход и
температуру плавления. Данные также вносят в журнал. Пример таблицы для
оформления результатов приведен ниже.
Таблица 8.1. Оформление результатов работы по перекристаллизации
Тпл, ˚С Масса, г
М, Выход,
Вещество до после
г/моль лит. эксп. %
перекр. перекр.

Контрольные вопросы:
1. Для чего нужна перекристаллизация и на чем основан данный метод?
2. Какие требования предъявляются к растворителю для
перекристаллизации.
3. Опишите логику выбора растворителя для проведения
перекристаллизации.
4. С какой целью и каким образом проводят горячее фильтрование?
5. Опишите приемы для создания центров кристаллизации.
92
 9. СПЕКТРОФОТОМЕТРИЯ

9.1. Общие закономерности

Спектрофотометрия - это физико-химический метод исследования
веществ, основанный на изучении спектров поглощения соединений того или
иного диапазона электромагнитного излучения. Данный спектр может быть
получен, путем измерения интенсивности прохождения света через раствор
образца. Применение спектрофотометрии в УФ и видимой областях спектра
основано на поглощении электромагнитного излучения соединениями,
содержащими хромофорные (например, С=С, С≡С, С=О) и ауксохромные
(-ОСН3, -ОН, -NH2 и др.) группы. Поглощение излучения в этих областях
связано с возбуждением электронов s-, p- и n- орбиталей основного состояния и
переходами молекул в возбужденные состояния: s : s*, n : s*, p: p* и n : p*.
Переходы s : s* находятся в далекой УФ области, например у алканов при
120 нм. Переходы n : s* наблюдаются в УФ области; например, органические
соединения, содержащие n-электроны, локализованные на орбиталях атомов О,
N, Hal, S, имеют полосы поглощения при длине волны около 200 нм. Линии,
соответствующие переходам p : p*, например, в спектрах гетероциклических
соединений проявляются в области около 250-300 нм и имеют большую
интенсивность. Полосы поглощения, соответствующие переходам n: p*,
находятся в ближней УФ и видимой областях спектра. Они характерны для
соединений, в молекулах которых имеются такие хромофорные группы, как
С=О, C=S, N=N. Так, насыщенные альдегиды и кетоны имеют максимумы
поглощения при длине волны около 285 нм. Переходы типа n : p* часто
оказываются запрещенными, и соответствующие полосы поглощения обладают
очень малой интенсивностью.
Переходы типа p : p* могут сопровождаться переходом электрона с
орбитали, локализованной главным образом на одной группе (например, С=С),
на орбиталь, локализованную на другой группе (например, С=О). Такие
переходы сопровождаются переносом электрона с одного атома на другой и
соответствующие спектры называются спектрами с переносом заряда.
Последние характерны для различных комплексов (например, ароматических
соединений с галогенами), интенсивно поглощающих в видимой и УФ
областях.
Для ионов переходных металлов и их комплексных соединений
характерны переходы с участием d-электронов, а для редкоземельных
элементов и актиноидов - переходы с участием f-электронов. Соответствующие
93
соединения в растворе бывают интенсивно окрашенными, причем окраска
(спектр поглощения) зависит от степени окисления катиона и устойчивости
комплексного соединения.
На сегодняшний день, спектрофотометрия является одним из наиболее
полезных методов количественного анализа в таких областях, как химия,
физика, биохимия, материаловедение и химическая инженерия, а также в
клинических исследованиях. Например, в биохимии она используется для
изучения реакций, катализируемых ферментами. В клинических испытаниях
она используется для исследования крови или тканей во время клинической
диагностики. Существует также несколько вариантов спектрофотометрии,
таких как атомно-абсорбционная спектрофотометрия и атомно-эмиссионная
спектрофотометрия.
Спектрофотометр представляет собой прибор, который измеряет
количество фотонов (интенсивность света), поглощаемых после прохождения
через раствор образца. С помощью спектрофотометра количество известного
химического вещества (концентрации) также может быть определено путем
измерения интенсивности обнаруженного света. УФ-видимый
спектрофотометр: использует свет в ультрафиолетовом диапазоне (185-400 нм)
и видимом диапазоне (400-700 нм) спектра электромагнитного излучения.
В спектрофотометрии видимого диапазона поглощение или пропускание
определенного вещества можно ориентировочно определить по наблюдаемому
цвету. Например, образец раствора, который поглощает свет во всех видимых
диапазонах (т.е. не пропускает ни одну из видимых длин волн), теоретически
кажется черным. С другой стороны, если передаются все видимые длины волн
(т.е. ничего не поглощает), образец раствора выглядит прозрачным. Если
образец раствора поглощает красный свет (~700 нм), он выглядит зеленым,
потому что зеленый цвет является дополнительным цветом к красному
(табл. 9.1).
На практике спектрофотометры видимого диапазона используют призму
для сужения определенного диапазона длин волн (для фильтрации других длин
волн), чтобы конкретный луч света с определенной длинной волны проходил
через образец раствора.

94
Таблица 9.1. Связь цвета вещества с его спектром поглощения.
Область максимума Цвет поглощенной Кажущийся цвет
поглощения раствором, части спектра раствора
нм (светофильтр) (дополнительный цвет)
400-450 Фиолетовый Желто-зеленый
450-480 Синий Желтый
480-490 Зелено-синий Оранжевый
490-500 Сине-зеленый Красный
500-560 Зеленый Пурпурный
560-575 Желто-зеленый Фиолетовый
575-590 Желтый Синий
590-625 Оранжевый Зелено-синий
625-750 Красный Сине-зеленый

Рисунок 9.1. Схема спектрофотометра: 1- источник света, 2-линза, 3-призма,

4-разделение на спектр, 5-щель, 6-образец, 7-детектор

Рис. 9.1 иллюстрирует базовую структуру спектрофотометров. Он состоит

из источника света, коллиматора, монохроматора, селектора длины волны,
кюветы для раствора образца, фотоэлектрического детектора и цифрового
дисплея или измерителя. Подробный механизм описан ниже. Спектрофотометр,
как правило, состоит из двух устройств: спектрометр и фотометр. Спектрометр
производит, рассеивает и измеряет свет. Фотометр содержит
фотоэлектрический детектор, который измеряет интенсивность света.
Спектрометр: создает желаемый диапазон длин волн света. Сначала
коллиматор (линза) передает прямой луч света (фотоны), который проходит
через монохроматор (призму), чтобы разделить его на несколько составляющих
длин волн (спектр). Затем селектор длины волны (щель) передает только

95
желаемые длины волн, как показано на рис. 9.1.
Фотометр: после того, как желаемый диапазон длин волн света проходит
через раствор образца в кювете, фотометр определяет количество поглощенных
фотонов, а затем отправляет сигнал на гальванометр или цифровой дисплей,
как показано на рис. 9.1.
Коэффициент пропускания (T) – это доля света, проходящего через
образец:
𝐼𝐼𝑡𝑡
𝑇𝑇 = ,
𝐼𝐼𝑜𝑜
где It – интенсивность света, прошедшая через образец, Io – интенсивность
света, вошедшая в образец.
𝐼𝐼𝑡𝑡
𝐴𝐴 = −𝑙𝑙𝑙𝑙 (𝑇𝑇) = −𝑙𝑙𝑙𝑙 � �,
𝐼𝐼𝑜𝑜
где абсорбция (A) означает количество поглощенных фотонов. Зная
величину поглощения, известную из приведенного выше уравнения, вы можете
определить неизвестную концентрацию образца с помощью закона Бугера-
Ламберта-Бера.

9.2. Закон Бугера-Ламберта-Бера

Закон Бугера-Ламберта-Бера (также известный как закон Бера) гласит, что
существует линейная зависимость между поглощением и концентрацией
образца.
Он может быть записан следующим образом:
𝐴𝐴 = 𝜀𝜀𝜀𝜀𝜀𝜀,
где 𝐴𝐴 – мера поглощения, 𝜀𝜀 – молярный коэффициент экстинкции, 𝑙𝑙 –
длина оптического пути, 𝑐𝑐 – концентрация вещества в растворе.
Однако данный закон не может быть применен для веществ, у которых
зависимость между поглощением и концентрацией вещества нелинейна
(например, п-аминобензойная кислота)
Коэффициент молярной экстинкции является постоянной величиной и
варьируется для каждой молекулы при определенной волне поглощения. Если
вещество поглощает при нескольких длинах волн, коэффициент дается для
каждой из них. Так как абсорбция является безразмерной величиной, единицы
измерения для 𝜀𝜀 должны содержать единицы длины и концентрации,
следовательно, коэффициент 𝜀𝜀 имеет размерность [л·моль-1·см-1].
96
 Величина коэффициента экстинкции зависит от:
1. Природы растворенного вещества;
2. Длины волны проходящего света;
3. Температуры раствора;
Не зависит от:
1. Концентрации поглощающего свет вещества;
2. Толщины слоя растворителя (длины оптического пути)

Длина оптического пути измеряется в сантиметрах. Поскольку в

стандартном спектрометре используется кювета шириной 1 см, l, как правило,
принимается равным единице.

9.3. Пробоподготовка
Пробоподготовка является важным этапом проведения
спектрофотометрического анализа. В зависимости от коэффициента
экстинкции вещества, его образец готовят с определенным разбавлением. В
случае если коэффициент экстинкции не известен, снимают серии пробных
спектров и затем производят разбавление. Также следует обращать внимание на
склонность веществ к образованию внутренних солей и агрегатов в
определенном диапазоне концентраций. Согласно закону Бугера-Ламберта-Бера
разбавление будет приводить к снижению оптической плотности.
𝐶𝐶𝑜𝑜 = 𝐶𝐶𝑎𝑎 𝑑𝑑 ,
где 𝐶𝐶𝑜𝑜 – начальная концентрация, 𝐶𝐶𝑎𝑎 – концентрация после разбавления,
𝑑𝑑 – разбавление.
Величину разбавления можно предсказать заранее, если известен
коэффициент молярной экстинкции вещества. Например, чтобы приготовить
образец, разбавленный в 50 раз, нужно взять 1/50 часть объема исходного
образца и добавить объем растворителя равный 49/50 исходного объема
образца. После определения оптической плотности, в том случае, если
проводилось разбавление, его необходимо учесть в расчете концентрации.
Таким образом, закон Бугера-Ламберта-Бера принимает вид:
𝐴𝐴 = 𝜀𝜀𝜀𝜀𝜀𝜀𝑑𝑑
Выразив концентрацию из данного выражения, получаем:
𝐴𝐴
𝐶𝐶 =
𝜀𝜀𝜀𝜀𝜀𝜀

97
 Следует учитывать, что в растворе не должно быть осадка или других
нерастворимых примесей. Рабочий объем большинства кювет составляет 4 мл,
но также встречаются кюветы и других объемов. Еще одним важным моментом
является материал кюветы. Они могут быть стеклянными, кварцевыми или
пластиковыми. Последние предназначены только для водных растворов. Для
исследования растворов в УФ области спектра применяются только кварцевые
кюветы.

9.4. Лабораторная работа «Определение концентрации комплексов железа»

Цель работы: Установить концентрацию растворов комплексов железа
методом спектрофотометрии.
Оборудование: Спектрофотометр, кюветы (l = 1 см), пипетки, мерные
колбы.
Реактивы: Студенту выдается набор растворов с известной концентрацией
и два раствора с неизвестной концентрацией комплексов железа с
сульфосалициловой кислотой.

Метод определения концентрации ионов железа основан на их

взаимодействии в щелочной среде с сульфосалициловой кислотой с
образованием окрашенного в желтый цвет комплексного соединения.
Интенсивность окраски, пропорциональную массовой концентрации железа,
измеряют при длине волны 400-430 нм. Диапазон измерения массовой
концентрации общего железа без разбавления пробы 0.10-2.00 мг/мл. В этом
интервале суммарная погрешность измерения с вероятностью равной 0.95
находится в пределах 0.01-0.03 мг/мл.

HO3S COOH

OH
Рисунок 9.2. Сульфосалициловая кислота

Ход работы:
1. Тщательно изучить руководство по эксплуатации спектрофотометра.
2. Определить оптическую плотность растворов с известной
концентрацией.
В качестве раствора сравнения используют дистиллированную воду.

98
 А. Перенести 2 мл раствора комплекса железа в кювету и установить её в
прибор.
Б. Установить диапазон длин волн от 300 до 500 нм.
В. Запустить измерение согласно инструкции к прибору.
Г. Измерить оптическую плотность при длине волны 420 нм.
Д. Удалить кювету из прибора и вылить раствор в слив, промыть кювету,
дистиллированной водой.
Е. Повторить шаги А-Д для все растворов.
3. Построить калибровочный график по полученным данным.
(Х = концентрация, У = оптическая плотность).
4. Определить тангенс угла наклона графика и коэффициент экстинкции
комплекса железа.
5. Определить оптическую плотность растворов с неизвестной
концентрацией.
А. Перенести 2 мл раствора комплекса железа в кювету и установить её в
прибор.
Б. Установить диапазон длин волн от 300 до 500 нм.
В. Запустить измерение согласно инструкции к прибору.
Г. Измерить оптическую плотность при длине волны 420 нм.
Д. Удалить кювету из прибора и вылить раствор в слив, промыть кювету,
дистиллированной водой.
6. Рассчитать концентрацию по графику.
7. Рассчитать концентрацию по закону Бугера-Ламберта-Бера.
8. Сравнить результаты.

Ниже представлены примеры таблиц для отчетов по лабораторной работе:

Таблица 9.2. Заданные концентрации.
С, мг/дм3 С, мг/мл D, отн. Ед
0.0
0.1
0.2
0.5
1.0
1.5
2.0

99
Таблица 9.3. Работа с графиком.
Тангенс угла наклона
Коэф. Экстинкции

Таблица 9.4. Измерение концентрации по калибровочному графику.

№, образца λ , нм D, отн. ед С, мг/мл См, моль/л

Таблица 9.5. Измерение концентрации по закону Бугера-Ламберта-Бера.

№, образца D, отн. ед См, моль/л

Контрольные вопросы:
1. Какие вещества можно анализировать методами спектрофотометрии?
2. Что можно определить, зная коэффициент экстинкции?
3. Как донорные заместители влияют на спектр поглощения вещества?
4. Как акцепторные заместители влияют на спектр поглощения?
5. Какие аминокислоты в составе белка ответственны за поглощение
света в УФ области?

100
 СПИСОК РЕКОМЕДУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Практикум по органической химии / под редакцией Н.С. Зефирова. —

Москва: Лаборатория знаний, 2020. — 595 с.
2. Акимова Т.И. Органическая химия. Практикум для химиков. — Санкт-
Петербург: Лань, 2020. — 164 с.
3. Органикум: В 2 т. / [Х. Беккер и др.]; Пер. с нем. Н.А. Беликова, Г.В.
Гришина; под редакцией И.С. Беленькой. — Москва: Лаборатория знаний,
2014. — 487 с.
4. Е.А. Строганова, И.Н. Паршина, М.А. Киекпаев, П.А. Пономарева.
Органическая химия. Ч. 2. Методы выделения, очистки и идентификации
органических соединений: практикум. — Оренбург: ОГУ, 2013. — 126 с.
5. Миронов П.В. Методы выделения и анализа продуктов биосинтеза. —
Красноярск: СибГУ им. академика М. Ф. Решетнёва, 2019. — 116 с.
6. Немилов С.В. Научные основы материаловедения стекол. — Санкт-
Петербург: Лань, 2019. — 360 с.
7. А.А. Иозеп, Б.В. Пассет, В.Я. Самаренко, О.Б. Щенникова. Химическая
технология лекарственных веществ. Основные процессы химического
синтеза биологически активных веществ. — Санкт-Петербург: Лань, 2020.
— 356 с.
8. Петров Б.И. Современное состояние экстракционного метода. — Санкт-
Петербург: Лань, 2021. — 356 с.
9. Смит В.А. Основы современного органического синтеза. — Москва:
Лаборатория знаний, 2020. — 753 с.
10. Конюхов В.Ю. Хроматография. — Санкт-Петербург: Лань, 2021. — 224 с.

101
 Сведения об авторах:

Пучков Павел Анатольевич, кандидат химических наук, ассистент

кафедры химии и технологии биологически активных соединений,
медицинской и органической химии им. Н.А. Преображенского Института
тонких химических технологий имени М.В. Ломоносова, МИРЭА – Российский
технологический университет
Суворов Никита Владимирович, кандидат химических наук, ассистент
кафедры химии и технологии биологически активных соединений,
медицинской и органической химии им. Н.А. Преображенского Института
тонких химических технологий имени М.В. Ломоносова, МИРЭА – Российский
технологический университет
Тихонов Сергей Иванович, ассистент кафедры химии и технологии
биологически активных соединений, медицинской и органической химии им.
Н.А. Преображенского Института тонких химических технологий имени
М.В. Ломоносова, МИРЭА – Российский технологический университет

102