PK126.

23

ПРОЦЕДУРА ИММУНОФИКСАЦИИ БЕНСА-ДЖОНСА:

▪ Interlab G26
▪ Interlab G26 Easy Fix
Коды набора: SRE625K-SRE626K-SRE640K с НАБОРОМ АНТИСЫВОРОТОК ДЛЯ БЕЛКА БЕНС-ДЖОНСА С
ФИКСАТОРОМ SCE280M
SRE625K - SRE626K - SRE640K С НАБОРОМ АНТИСЫВОРОТОК ОБЩЕГО ПРОФИЛЯ МОЧИ С ФИКСАТОРОМ
SCE639M

Содержание
1. Названия наборов .............................................................................................................................................. 2
2. Целевое назначение .......................................................................................................................................... 2
3. Принцип работы теста ....................................................................................................................................... 2
4. Материалы, входящие с набор, и необходимые материалы, не входящие в набор ................................... 3
5. Описание реагентов и материалов, входящих в набор .................................................................................. 5
6. Указания по утилизации и сопутствующие риски ......................................................................................... 11
7. Забор и обработка образцов .......................................................................................................................... 11
8. Процедура использования .............................................................................................................................. 11
9. Интерпретация результатов ............................................................................................................................ 18
10. Контроль качества ......................................................................................................................................... 18
11. Обнаружение дефектов ................................................................................................................................ 20
12. Клинические характеристики ....................................................................................................................... 20
13. Нормативные ссылки .................................................................................................................................... 22
14. Библиография ................................................................................................................................................ 23
15. Информация о производителе ..................................................................................................................... 23
16. Приложение I. Подготовка ............................................................................................................................ 24

Ред. N. Дата Редакция

Обновление сведений об опасности в пункте 5 для адаптации к Регламенту
23 09/05/2023
2020/878
22 28/01/2022 Изменение объема K000214 (с 80 мл на 40 мл)
Добавление информации о промывочном растворе K000214
21 04/03/2021 Интеграция с набором антисывороток общего профиля мочи с фиксатором
SCE639M

1
 PK126.23

1. Названия наборов
Набор для иммунофиксации Бенса-Джонса.
Коды Interlab: SRE625K - SRE626K - SRE640K.

2. Целевое назначение
Наборы для иммунофиксации Бенса-Джонса (IFE BJ) SRE625K, SRE626K и SRE640K позволяют
осуществлять количественную идентификацию белков Бенса-Джонса в неконцентрированной
человеческой моче.

Моча образуется путем ультрафильтрации плазмы через стенки гломерулярных капилляров,

которые фильтруют белки плазмы на основании их размера, строения и электрического заряда.
Только молекулы с молекулярной массой ниже 50 кДа проходят через гломерулярный барьер: они
всасываются проксимальной трубочкой, перевариваются ферментами, а затем возвращаются в
кровь.
Белки Бенса-Джонса (BJP) были описаны в 1962 году как «свободные легкие моноклональные
цепочки», они синтезируются из единого клона клеток B. Нормальные плазматические клетки
производят небольшой излишек легких цепочек (LC), в то время, как неоплазии клеток B могут
производить эти цепочки в очень большом излишке. Из-за своего низкого молекулярного веса эти
легкие цепочки могут проходить через гломерулярный барьер. По окончании процесса тубулярного
впитывания излишек BJP попадает в мочу. Молекулярный вес BJP достаточно изменчив; BJP могут
появляться в моче как мономеры (22 кДа), димеры (44 кДа), фрагменты низкого молекурного веса
(5-18 кДа), или же иметь высокий уровень полимеризации.

Иммуноэлектрофоретические методы (иммунофиксация) позволяют определять два

патогномонических качества легких цепочек: моноклональность и отсутствие тяжелых цепочек.
Иммунофиксация также считается лучшим методом выявления исчезновения моноклональных
белков (полной ремиссии). Когда, вследствие электрофоретической миграции образца мочи, в зоне
гамма глобулинов и бета глобулинов протеинограммы появляются аномальные пики, наборы
иммунофиксации Бенса-Джонса (IFE BJ) используются для идентификации возможного присутствия
BJP.

Наборы Interlab SRE625K, SRE626K и SRE640K для иммунофиксации белков Бенса-Джонса должны
использоваться с автоматизированным оборудованием Interlab G26 (с Easy Mask) и Interlab G26
Easy Fix в сочетании с набором антисывороток для белка Бенс-Джонса с фиксатором SCE280M.

Наборы Interlab SRE625K, SRE626K и SRE640K для иммунофиксации белка Бенс-Джонса также
могут использоваться в комбинации с набором антисывороток общего профиля мочи с
фиксатором SCE639M. Он предназначен для диагностики протеинурии и определения ее
характеристик путем иммунофиксации с целью обнаружения и типирования белка Бенс-
Джонса или любых других моноклональных общих иммуноглобулинов, а также любых
поражений почек, таких как канальцевое, клубочковое или смешанное поражение.

Данные наборы предназначены исключительно для клинической диагностики в лабораторных

условиях.

3. Принцип работы теста

Метод электрофореза белков основывается на разделении серопротеинов путем пропускания
электрического тока через соответствующий электрофоретический раствор и твердое
вспомогательное вещество, такое как агароза. В основе принципа иммунофиксации лежит
визуализация определенных белков путем образования осадка антигенов-антител после
электрофоретического разделения.
Образцы мочи пациентов наносятся на отдельные участки пластины из агарозного геля. Разделение
наиболее важных белков производится путем электрофореза на агарозном геле с щелочным pH.
По окончании миграции один из участков обрабатывается фиксирующим раствором для осаждения
всех белков и получения протеинограммы.

2
 PK126.23
В наборах для электрофореза с иммунофиксацией белка Бенс-Джонса SRE625K, SRE626K,
SRE640K, используемых в сочетании с SCE280M, поликлональные антитела наложены
следующим образом: анти-тривалентной (связывает тяжелые цепочки γ, μ и α [GAM]), анти-κ
(связывает свободные и связанные легкие цепочки и цепочки κ [k tot]), анти-λ (связывает
свободные и связанные легкие цепочки и цепочки λ [λ tot]), анти-k free (связывает свободные
легкие цепочки k) и анти-λ free (связывает свободные легкие цепочки λ).

В наборах для электрофореза с иммунофиксацией белка Бенс-Джонса SRE625K, SRE626K,

SRE640K, используемых в сочетании с SCE2639M, поликлональные антитела наложены
следующим образом: Антитела к белкам средне-низкой молекулярной массы (для
обнаружения белков, связанных с тубулярной протеинурией), антитела к белкам средне-
высокой молекулярной массы (для обнаружения белков, связанных с гломерулярной
протеинурией), бивалентные антитела к легким цепям (для обнаружения свободных и
связанных легких каппа- и лямбда-цепей), антитела к свободным каппа-цепям (для
обнаружения свободных легких каппа-цепей) и антитела к свободным лямбда-цепям (для
обнаружения свободных легких лямбда-цепей).

В результате взаимодействия антигена (иммуноглобулина в образце) и антител антисыворотки

образуется нерастворимое соединение, видимое как полоса осадка, при условии надлежащего
соотношения между антителами и антигенами. Количество осадка зависит от температуры, от pH и
от ионной силы раствора. После инкубации с антисывороткой и фиксирующим раствором агарозный
гель подвергается «блоттингу» для удаления излишка белков. Затем пластина из агарозного геля
высушивается, проходит цикл промывки для удаления излишка неосажденных белков,
окрашивается «кислым фиолетовым», обесцвечивается и сушится.
Сравнение позиций на протеинограмме иммунофиксированной полосы и полосы, потенциально
содержащей моноклональный компонент, позволяет произвести оценку биохимического характера
белка, является ли он полным иммуноглобулином или же несвязанной легкой цепочкой.

4. Материалы, входящие с набор, и необходимые материалы,

не входящие в набор

МАТЕРИАЛЫ, ВХОДЯЩИЕ В НАБОР

Код набора: SRE625K: 20 тестов, 2 образца для гелевой пластины

Код набора: SRE626K: 40 тестов, 4 образца для гелевой пластины
Код набора: SRE640K: 60 тестов, 6 образцов для гелевой пластины

SRE625K SRE626K SRE640K

Код Описание
Количество Количество Количество

SFE191M Пластины из агарозного геля Нет 10 Нет

SFE192M Пластины из агарозного геля 10 Нет Нет

SFE211M Пластины из агарозного геля Нет Нет 10

SCE160M Пропитанные губки (2 шт.) 10 10 10

SRE634L Краситель «кислый фиолетовый» (500 мл) 1 1 1

Промывающий раствор для

SRE160M 1 1 1
Иммунофиксации (100 мл)

SRE153M Растворитель для иммунофиксации (6 мл) 1 Нет Нет

SRE152M Растворитель для иммунофиксации (10 мл) Нет 1 1

SAE606M Одноразовый держатель образцов (10 шт.) 1 1 1

3
 PK126.23

SCE602A Впитывающая бумага А (10 шт.) 3 3 3

SCE602N Впитывающая бумага N (10 шт.) 1 1 1

Моющий раствор для игл/аппликаторов

K000214 1 1 1
(80 мл)

НЕОБХОДИМЫЕ ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ, НЕ ВХОДЯЩИЕ В НАБОР

Код Описание Количество

Набор антисыворотки Бенса-Джонса

SCE280M
с фиксирующим раствором

SCE240M Фиксирующий раствор (1,5 мл) 1

SCE270M Anti-Human-GAM (1 мл) 1

SCE238M Anti-Human-Kappa (1 мл) 1

SCE239M Anti-Human-Lambda (1 мл) 1

SCE268M Anti-Human-Kappa free (1 мл) 1

SCE269M Anti-Human-Lambda free (1 мл) 1

Набор антисывороток и фиксаторов для общего

SCE639M
профиля мочи

SCE240M Фиксирующий раствор (1,5 мл) 1

Антисыворотка к человеческим белкам средне-

SCE637M 1
низкой молекулярной массы (1 мл)

Антисыворотка к человеческим белкам средне-

SCE638M 1
высокой молекулярной массы (1 мл)

Антисыворотка к человеческим белкам, бивалентная

SCE636M 1
(1 мл)

Антисыворотка к свободным каппа-цепям

SCE268M 1
человеческого иммуноглобулина (1 мл)

ВАЖНО: Наборы имеют заявленные технические характеристики только в том случае, когда они
используются в сочетании с наборами антисыворотки Бенса-Джонса и фиксирующим раствором
SCE280M или с набором антисывороток общего профиля мочи с фиксатором SCE639M.

Interlab G26 и Interlab G26 Easy Fix (SSE203M или SSE204M)

Код Описание Количество

SRE201M Упаковка обесцвечивающего раствора 6 X 100 мл

4
 PK126.23
Interlab G26 с Easy Mask (SSE203M или SSE204M)

Код Описание Количество

SAE910M Easy Mask для Interlab G26 1
Жесткая пластина для 2 образцов
R000167 1
(использованных с SRE625K)
Жесткая пластина для 4 образцов
R000168 1
(использованных с SRE626K)
Жесткая пластина для 6 образцов
R000169 1
(использованных с SRE640K)

Interlab G26 Easy Fix (SSE204M)

Код Описание Количество

0000474 Подставка для антисыворотки 1
0000475 Держатель средств для блоттинга 1
Жесткая пластина для 2 образцов
R000132 1
(использованных с SRE625K)
Жесткая пластина для 4 образцов
R000133 1
(использованных с SRE626K)
Жесткая пластина для 6 образцов
R000134 1
(использованных с SRE640K)

Другие необходимые материалы, не входящие в набор:

• Микро-пипетка для высвобождения 5 μl, 30 μl; 1000-2000 μl;

• Дистиллированная вода.

5. Описание реагентов и материалов, входящих в набор

Все реагенты готовы к использованию. Для корректного использования реагентов см. руководство
по использованию и/или описание соответствующей процедуры.
Хранение и стабильность: Хранить все реагенты при комнатной температуре (от 15° до 30°C).
Хранить ферментативные реагенты при температуре от 2 до 8°C.
Все реагенты сохраняют свою стабильность до истечения срока годности, указанного на этикетке,
даже после открытия бутылок. Не использовать реагенты после истечения срока годности.

1. Гелевые пластины (SFE191M-SFE192M-SFE211M)

Состав: Каждая пластина содержит агарозу в щелочном буферном растворе, с добавкой

консерванта. Используется в качестве вспомогательного средства для электрофореза и
иммунофиксации белков.
Продукт не классифицируется как опасный, в соответствии с положениями, упомянутыми в
Регламенте (ЕC) 1272/2008 (CLP). Продукт, содержащий опасные вещества в таких концентрациях,
что требует заявления об этом (cпецификация данных по безопасности, разделе 3), требует
паспорта безопасности вещества, содержащего необходимую информацию, согласно положениям
Регламента (EC) 2020/878.

Этикетирование опасности, согласно Регламенту (ЕC) 1272/2008 (CLP) и последующим изменениям

5
 PK126.23
и дополнениям.

Указания на опасность:
EUH032 В контакте с водой выделяет очень токсичный газ.
EUH210 Спецификация безопасности предоставляется по требованию.

Подготовка к использованию: пластины в упаковке готовы к использованию.

Хранение и стабильность: Хранить гелевые пластины в горизонтальном положении при
комнатной температуре (15°C – 30°C). Не охлаждать и не замораживать пластины. Не использовать
гель после истечения срока годности.

Признаки утери продуктом необходимых характеристик:

• Наличие жидкости или влажности внутри упаковки геля;
• Неравномерная толщина геля указывает на дегидратацию;
• Наличие бактерий или плесени в результате загрязнения.

2. Пропитанные губки (SCE160M)

Состав: Щелочной буферный раствор с добавкой консерванта. Это запас буферного раствора,
использующийся для обеспечения контакта геля с электродами.
Продукт не классифицируется как опасный, в соответствии с положениями, упомянутыми в
Регламенте (ЕC) 1272/2008 (CLP). Продукт, содержащий опасные вещества в таких концентрациях,
что требует заявления об этом (cпецификация данных по безопасности, разделе 3), требует
паспорта безопасности вещества, содержащего необходимую информацию, согласно положениям
Регламента (EC) 2020/878.

Этикетирование опасности, согласно Регламенту (ЕC) 1272/2008 (CLP) и последующим изменениям

и дополнениям.

Указания на опасность:
EUH032 В контакте с водой выделяет очень токсичный газ.
EUH210 Спецификация безопасности предоставляется по требованию.

Подготовка к использованию: пропитанные губки готовы к использованию.

Хранение и стабильность: хранить при комнатной температуре (15°C - 30°C). Пропитанные губки
сохраняют свою стабильность до истечения срока годности, указанного на этикетке. Не
использовать изделие после истечения срока годности. Не замораживать губки.
Признаки утери изделием необходимых характеристик: если упаковка открыта, или губки
кажутся сухими, утилизировать их.
Примечание: иногда на пропитанных губках могут появляться черные или коричневые пятна; они
никак не влияют на надежность результатов.

3. Краситель «кислый фиолетовый» (SRE634L)

Состав: Кислый фиолетовый в кислотном растворе. Он используется для окрашивания геля после
электрофореза и иммунофиксации.
Продукт не классифицируется как опасный, в соответствии с положениями, упомянутыми в
Регламенте (ЕC) 1272/2008 (CLP). Продукт, содержащий опасные вещества в таких концентрациях,
что требует заявления об этом (cпецификация данных по безопасности, разделе 3), требует
паспорта безопасности вещества, содержащего необходимую информацию, согласно положениям
Регламента (EC) 2020/878.

Этикетирование опасности, согласно Регламенту (ЕC) 1272/2008 (CLP) и последующим изменениям

и дополнениям.

Указания на опасность:
EUH210 Спецификация безопасности предоставляется по требованию.

Подготовка к использованию: готов к использованию.

Хранение и стабильность: хранить при комнатной температуре (15 ° - 30 °C). Раствор сохраняет

6
 PK126.23
свою стабильность до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Примечание: Необходимо заменять раствор в ванночке для окрашивания после 5 циклов

окрашивания (5 пластин с агарозным гелем).
Признаки утери продуктом необходимых характеристик: Не имеется.

4. Промывающий раствор для иммунофиксации (SRE160M)

Состав: Концентрированный водный раствор PBS с консервантом. Используется для удаления

излишка белков, не осажденных после иммунофиксации.
Продукт классифицируется как опасный, в соответствии с положениями, упомянутыми в Регламенте
(EС) 1272/2008 (CLP) (и последующих изменениях и дополнениях). Поэтому продукт требует
паспорта безопасности вещества, согласно положениям Регламента (EC) 2020/878.

Этикетирование опасности, согласно Регламенту (ЕC) 1272/2008 (CLP) и последующим изменениям

и дополнениям.

Пиктограммы:

Указания на опасность:
H317 Может вызывать аллергическую реакцию на коже.

Рекомендации по мерам предосторожности:

P280 Носить защитные перчатки.
P261 Избегать вдыхать пыль / дым / газ / туман / пар / аэрозоль.
P333+P313 В случае раздражения и высыпаний на коже: обратиться к врачу.
P362+P364 Снимите загрязненную одежду и выстирайте ее перед тем, как надевать снова.

Подготовка к использованию: Разбавить 25 мл промывочного раствора для иммунофиксации

дистиллированной водой для получения конечного объема в 1000 мл. Тщательно перемешать
(в течение примерно 1 минуты).

ВАЖНО: Поместить готовый промывочный раствор в резервуар «Промывочный раствор».

Признаки утери продуктом необходимых характеристик: Наличие сгущения.
Хранение и стабильность: Хранить при комнатной температуре (15°C - 30°C).
Концентрированный раствор сохраняет свою стабильность до истечения срока годности, указанного
на этикетке.

5. Растворитель для иммунофиксации (SRE152-SRE153)

Состав: Бромфеноловый синий в растворе Tris-HCl. Используется для разбавления образцов.

Согласно положениям Регламента (ЕС) 1272/2008 (CLP) (и последующим изменениям и
дополнениям), продукт не входит в категорию опасных изделий.
Подготовка к использованию: Растворитель для иммунофиксации готов к использованию.
Признаки утери продуктом необходимых характеристик: Наличие осадка.
Хранение и стабильность: Хранить при комнатной температуре (15°C - 30°C). Раствор
сохраняет свою стабильность до истечения срока годности, указанного на этикетке.

6. Одноразовый держатель образцов (SAE606M)

Состав: одноразовые пластмассовые пластины с углублениями для образцов.

Подготовка к использованию: готовы к использованию.
Хранение: хранить при комнатной температуре (15°C - 30°C).

7
 PK126.23
7. Впитывающая бумага А (SCE602A)

Состав: Одноразовые нарезанные листы впитывающей бумаги для удаления излишков буферного
раствора с пластины с агарозным гелем до нанесения на нее образца, а также для «блоттинга»
антисыворотки и фиксирующего раствора после инкубации.
Подготовка к использованию: Впитывающая бумага готова к использованию.
Хранение: Хранить в сухом месте при комнатной температуре от 15 до 30 °C.

8. Впитывающая бумага N (SCE602N)

Состав: Одноразовые нарезанные листы впитывающей бумаги для удаления излишков

антисыворотки и фиксирующего раствора с поверхности пластины с агарозным гелем после
инкубации с антисывороткой и фиксирующим раствором.
Подготовка к использованию: Впитывающая бумага готова к использованию.
Хранение: Хранить в сухом месте при комнатной температуре от 15 до 30 °C.

9. Моющий раствор для игл/аппликаторов (K000214)

Состав: Промывочный раствор для очистки аппликаторов и иглы инструмента G26.

Продукт классифицируется как опасный, в соответствии с положениями, упомянутыми в
Регламенте (EС) 1272/2008 (CLP) (и последующих изменениях и дополнениях). Поэтому продукт
требует паспорта безопасности вещества, согласно положениям Регламента (EC) 2020/878.

Этикетирование опасности, согласно Регламенту (ЕC) 1272/2008 (CLP) и последующим

изменениям и дополнениям.

Указания на опасность:
H412 Вредно для водных организмов, с длительным действием.
EUH032 В контакте с водой выделяет очень токсичный газ.

Рекомендации по мерам предосторожности:

P273 Не допускать попадания в окружающую среду.

Подготовка к применению: Развести 40 мл промывочного раствора (половина содержимого

флакона) дистиллированной водой до достижения объема 2000 мл.

ВАЖНО: Приготовленный промывочный раствор поместить в бак "Дистиллированная

вода".

Признаки порчи: Наличие мутного осадка или микробного загрязнения.

Правила хранения и условия сохранения стабильности: Хранить при комнатной
температуре - от 15 до 30 °C. Концентрированный раствор сохраняет стабильность в течение
срока годности, указанного на этикетке. Разведенный раствор, готовый к использованию,
сохраняет стабильность в течение 7 дней при комнатной температуре.
ПРИМЕЧАНИЕ: Промывочный раствор содержит соли, которые могут осаждаться в
промывочном отсеке аппликатора. При необходимости аккуратно удалить отложения соли
бумажным полотенцем, предварительно выключив прибор.

10. Набор антисыворотки Бенса-Джонса с фиксирующим раствором (SCE280M)

10.1 Антисыворотка

Состав: Очищенные фракции иммуноглобулинов из антисыворотки млекопитающих. Вся сыворотка

действует против всех иммуноглобулинов человека. Антисыворотка используется для реакции
с иммуноглобулинами образца сыворотки и для образования полос осадка.
Согласно положениям Регламента (ЕС) 1272/2008 (CLP) (и последующим изменениям и
дополнениям), продукт не входит в категорию опасных изделий.
Подготовка к использованию: антисыворотка готова к использованию. Различные типы

8
 PK126.23
антисыворотки окрашены неопасными красителями разных цветов, что облегчает их
идентификацию и визуализацию во время нанесения на участки пластины.
Хранение и стабильность: Хранить антисыворотку при температуре 2-8 °C. Антисыворотка
сохраняет свою стабильность до истечения срока годности, указанного на этикетке. Не
использовать антисыворотки после истечения срока годности.
Признаки утери продуктом необходимых характеристик: при возникновении любых
изменений растворов, таких как замутненность или наличие микробного загрязнения,
утилизировать антисыворотку.
Примечание: Не смешивать различные типы антисыворотки, после использования закрыть все
флаконы соответствующими крышками. ВСЕГДА заменять наконечник микро-пипетки после каждой
смены флакона с антисывороткой.

10.2 Фиксирующий раствор

Состав: Кислый раствор и добавки. Фиксирующий раствор используется для фиксации всех белков,
разделенных при помощи электрофореза, и создания протеинограммы (ELP).
Продукт классифицируется как опасный, в соответствии с положениями, упомянутыми в Регламенте
(EС) 1272/2008 (CLP) (и последующих изменениях и дополнениях). Поэтому продукт требует
паспорта безопасности вещества, согласно положениям Регламента (EC) 2020/878.

Этикетирование опасности, согласно Регламенту (ЕC) 1272/2008 (CLP) и последующим изменениям

и дополнениям.

Пиктограммы:

Указания на опасность:
H314 Причиняет серьезные ожоги кожи и поражения глаз.
H335 Может раздражать дыхательные пути.
H334 Может вызывать аллергические симптомы или приступы астмы или трудности при дыхании,
при вдыхании.
H317 Может вызывать аллергическую реакцию на коже.

Рекомендации по мерам предосторожности:

P260 Не вдыхать пыль / дымы / газы / туман / пары / аэрозоли.
P305+P351+P338 В СЛУЧАЕ КОНТАКТА С ГЛАЗАМИ: тщательно промывать глаза несколько минут.
Снять контактные линзы, если это удобно. Продолжать промывание.
P303+P361+P353 ПРИ ПОПАДАНИИ НА КОЖУ (или на волосы): немедленно снять всю загрязненную
одежду. Промыть кожу под струей воды водой [или принять душ].
P280 Носить защитные перчатки / одежду и защищать глаза / лицо.
P310 Немедленно обратиться в ЦЕНТР ОТРАВЛЕНИЙ / к врачу / . . .
P301+P330+P331 В СЛУЧАЕ ПРОГЛАТЫВАНИЯ: промыть рот. Не вызывать рвоту.

Подготовка к использованию: фиксирующий раствор готов к использованию. Различные типы

фиксирующего раствора окрашены неопасными красителями разных цветов, что облегчает их
идентификацию и визуализацию во время нанесения на участки пластины.
Хранение и стабильность: Хранить фиксирующий раствор при температуре 2-8 °C. Фиксирующий
раствор сохраняет свою стабильность до истечения срока годности, указанного на этикетке.
Не использовать фиксирующий раствор после истечения срока годности.
Признаки утери продуктом необходимых характеристик: при возникновении любых
изменений раствора, таких как замутненность или наличие микробного загрязнения, утилизировать
фиксирующий раствор.
Примечание. Не смешивать фиксирующий раствор с антисывороткой, после использования
закрыть все флаконы соответствующими крышками. ВСЕГДА заменять наконечник микро-пипетки
после каждой смены флакона с фиксирующим раствором на флакон с антисывороткой.

9
 PK126.23
11.Набор антисывороток и фиксаторов для общего профиля мочи (SCE639M)

11.1 Антисыворотки

Состав: Очищенные фракции иммуноглобулинов из антисывороток млекопитающих. Все

антисыворотки содержат антитела к общему иммуноглобулину человека. Антисыворотки
используются для реакции с образцами иммуноглобулинов и получения полосы осадка.
В соответствии с положениями Регламента/1272/2008 (CLP) (с последующими поправками и
дополнениями) продукт не классифицируется как опасный.
Подготовка к применению: Антисыворотка готова к использованию. Для быстрого
определения типа антисыворотки и обеспечения легкой визуализации во время их нанесения
на дорожки различные антисыворотки окрашиваются различными неопасными красителями.
Правила хранения и условия сохранения стабильности: Хранить антисыворотку при
температуре 2-8 °C. Антисыворотки сохраняют стабильность до истечения срока годности,
указанного на этикетке. Не использовать антисыворотки после истечения срока годности.
Признаки порчи: Не использовать антисыворотку при возникновении в ней каких-либо
изменений, таких как мутность или микробное загрязнение.
ПРИМЕЧАНИЕ: Не смешивать антисыворотки из разных флаконов, обязательно закрывать
колпачок на каждом соответствующем флаконе после каждого использования и ВСЕГДА менять
наконечник пипетки при замене флаконов с антисывороткой.

11.2 Фиксирующий раствор

Поскольку один и тот же фиксирующий раствор SCE240M используется с антисывороткой для

белка Бенс-Джонса и в наборе фиксаторов SCE280M, пожалуйста, следует обратиться к
параграфу “10.2 Фиксирующий раствор” для получения информации о составе, категории
опасности и мерах предосторожности, подготовке к применению, правилах хранения и
сохранении стабильности и признаках порчи антисывороток.

12. Обесцвечивающий раствор (SRE201M)

Состав: Концентрированный водный раствор лимонной кислоты.

Продукт классифицируется как опасный, в соответствии с положениями, упомянутыми в Регламенте
(EС) 1272/2008 (CLP) (и последующих изменениях и дополнениях). Поэтому продукт требует
паспорта безопасности вещества, согласно положениям Регламента (EC) 2020/878.

Этикетирование опасности, согласно Регламенту (ЕC) 1272/2008 (CLP) и последующим изменениям

и дополнениям.

Пиктограммы:

Указания на опасность:
H319 Вызывает серьезное раздражение глаз.

Рекомендации по мерам предосторожности:

P280 Носить защиту для глаз и лица.
P337+P313 Если раздражение глаз не проходит, следует обратиться к врачу.

Подготовка к использованию: разбавить 1 мл раствора SRE201A дистиллированной водой для

получения конечного объема в 1 л.
Хранение и стабильность: хранить при комнатной температуре (15°C - 30°C) до истечения срока
годности, указанного на этикетке. Разбавленный раствор сохраняет свою стабильность при
комнатной температуре в течение 2 недель.
Признаки утери продуктом необходимых характеристик: наличие сгущения и черных пятен.

10
 PK126.23

6. Указания по утилизации и сопутствующие риски

Для корректной и безопасной утилизации следовать положениям применимого действующего
законодательства.
Информация о мерах безопасности, необходимых для предотвращения рисков, связанных с
использованием и утилизацией продуктов, включая особые меры защиты, содержится в
паспортах безопасности, которые можно запросить в службе технической поддержки
поставщика или скачать с веб-сайта Interlab www.Interlab-srl.com\public.

7. Забор и обработка образцов

Забор образцов должен производиться в соответствии с правилами лаборатории, а также
Принципами Надлежащей Лабораторной Практики (Good Laboratory Practice, GLP). Рекомендуется
использовать свежие образцы мочи, забор которых был произведен максимум за 24 часа до анализа
(когда это невозможно, рекомендуется использовать для анализа мочу первого или второго
утреннего мочеиспускания).

Образцы могут храниться в пробирках с крышкой в течение максимум 72 часов при температуре 2–
8°C и в течение максимум одного месяца при температуре –20°C.

Подготовка образца: Использовать мочу в чистом виде.

Объем для помещения в каждую лунку: 30 μl.

Для получения специальных протеинограмм белков Бенса-Джонса, в целях повышения

чувствительности рекомендуется увеличить концентрацию образцов до 1 г/л.
Для получения протеинограммы ELP рекомендуется разбавить мочу с протеинурией, превышающей
2 г/л, растворителем для иммунофиксации.

Образцы, не подлежащие использованию

Не использовать мочу с высокой концентрацией солей. В случае необходимости, во избежание
деформации геля во время миграции и последующего искажения протеинограмм, подвергнуть
образец диализу до иммунофиксации.
Не использовать образцы мочи, подвергшиеся длительному хранению, поскольку могла произойти
ферментативная деградация белков.

Для INTERLAB G26 без автоматического пробоотборника: распределение образцов должно

быть выполнено вручную.

Для INTERLAB G26 с автоматическим пробоотборником и INTERLAB G26 Easy Fix:

распределение образцов выполняется инструментом в автоматическом режиме.

8. Процедура использования

Процедура для инструментов Interlab G26 с Easy Mask

Для иммунофиксации при помощи Interlab G26 с Easy Mask используется полуавтоматическая
процедура. Автоматизированные операции включают в себя: распределение образцов, нанесение
образцов на пластину с агарозным гелем, электрофоретическую миграцию, промывку,
окрашивание, обесцвечивание геля и конечную сушку.
По окончании электрофоретической миграции агарозный гель проходит следующие операции,
выполняемые вне инструмента при помощи Easy Mask: нанесение фиксирующего раствора и
антисыворотки, инкубация агарозного геля, «блоттинг» и денатурация.
Использовать программное обеспечение Elfolab/Interlab G26 для лабораторного анализа.

11
 PK126.23
1. Подготовка к проведению электрофоретического анализа
1. Наполнить резервуары растворами с указанном ниже объеме:

Резервуар Раствор Объем (л)

Обесцвечивающий Обесцвечивающий раствор, готовый к использованию
5
раствор (5 мл SRE201A до 5 л дистиллированной воды)
Дистиллированная Моющий раствор для игл/аппликаторов
2
вода (40 мл K000214, долить дистиллированной водой до 2 л)
Промывающий Промывающий раствор для иммунофиксации
1
раствор (25 мл SRE160M до 1 л дистиллированной воды)
Раствор красителя «кислотный фиолетовый», готовый к
Краситель 2 0,21
использованию

2. Включить инструмент.
3. Использовать программу Elfolab/Interlab G26 для выбора типа электрофоретического анализа.
4. Удостовериться в том, что аппликаторы занимают надлежащие позиции (рис. 1).
5. Поместить одноразовую полоску для образцов (код SAE606M) на держатель образцов (рис. 2).
6. Поместить металлическую крышку на одноразовый держатель образцов (рис. 2).
7. Вставить держатель образцов в инструмент (рис. 2).

2. Подготовка миграционной камеры (рис. 3)

1. Вынуть миграционную камеру из инструмента.

2. Вынуть пропитанные губки из упаковки.
ВАЖНО: к пропитанным губкам можно прикасаться чистым пинцетом или чистыми перчатками.

3. Вставить 2 пропитанные губки в боковые выемки. Оставить центральную выемку свободной.

ВАЖНО: не вставлять пропитанные губки в центральную выемку.

4. Вставить миграционную камеру в инструмент до упора, надавив на нее, чтобы убедиться, что
произошло ее корректное подсоединение.
ВАЖНО: удалять губки после каждого электрофоретического хода.

3. Подготовка пластины из агарозного геля (рис. 4)

1. Поместить лист впитывающей бумаги А (код: SCE602A) на поверхность пластины из агарозного

геля для устранения излишков буферного раствора; убедиться в том, что лист впитывающей
бумаги А полностью покрывает поверхность геля, затем быстро снять его.

ВАЖНО: не оставлять впитывающую бумагу на геле в течение слишком длительного времени, во

избежание его дегидратации.

2. Вставить гелевую пластину в специальную раму (рис. 5).

3. Удостовериться в том, что гелевая пластина была корректно вставлена в раму.
4. Вставить раму в соответствующую выемку, соблюдая нумерацию (рис. 6).

ВАЖНО: запустить анализ в течение максимум 5 минут с момента установки рамы.

4. Загрузка образцов

ИНСТРУМЕНТ С ПРОБООТБОРНИКОМ:

Для загрузки образцов, подлежащих автоматическому распределению/разбавлению, действовать,

как описано ниже:
1. Извлечь подставку для пробирок N.1 из инструмента (рис. 7).

12
 PK126.23
2. Вставить пробирки, всегда начиная с позиции N 1 первой подставки, убедиться в том, что они
корректно вставлены до самого дна.
3. Вставить подставку в инструмент таким образом, чтобы он скользил по специальным
направляющим. В случае использования бар-кода необходимо, чтобы этикетки с бар-кодом
смотрели направо, в направлении боковых прорезей выемок для пробирок (рис. 8).
4. Поместить растворитель для иммунофиксации (SRE152M или SRE153M) в инструмент в
предназначенную для него позицию.

ВАЖНО: До запуска анализа убедиться в том, что со всех пробирок были сняты крышки.

ИНСТРУМЕНТ БЕЗ ПРОБООТБОРНИКА.

Информация о превентивном разбавлении содержится в параграфе «Забор и обработка
образцов».
Приступить к ручному распределению разбавленных образцов, действуя, как описано ниже.

Для набора SRE625K: поместить в лунки 30 µl образца, как указано ниже:
• Образец 1 Позиция IFE1 (лунки от 1 до 6)
• Образец 2 Позиция IFE2 (лунки от 8 до 13)

Для набора SRE626K: поместить в лунки 30 µl образца, как указано ниже:
• Образец 1 Позиция IFE1 (лунки от 1 до 6)
• Образец 2 Позиция IFE2 (лунки от 8 до 13)
• Образец 3 Позиция IFE3 (лунки от 14 до 19)
• Образец 4 Позиция IFE4 (лунки от 21 до 26)

Для набора SRE640K: поместить в лунки 30 µl образца, как указано ниже:
• Образец 1 Позиция IFE1 (лунки от 1 до 6)
• Образец 2 Позиция IFE2 (лунки от 8 до 13)
• Образец 3 Позиция IFE3 (лунки от 14 до 19)
• Образец 4 Позиция IFE4 (лунки от 21 до 26)
• Образец 5 Позиция IFE5 (лунки от 27 до 32)
• Образец 6 Позиция IFE6 (лунки от 34 до 39)

5. Запуск электрофоретического анализа

Использовать программу Elfolab/Interlab G26 для запуска отбора образцов и/или анализа, и
выбрать номер рамы с гелевой пластиной, подлежащей обработке.

ВАЖНО: До начала нового цикла удостовериться в следующем:

• резервуар 2 окрашивающего раствора должна содержать количество раствора в диапазоне от

МИН. до МАКС. Уровня;
• резервуар для обесцвечивающего раствора должен содержать как минимум 2 л
обесцвечивающего раствора;
• резервуар для промывающего раствора для иммунофиксации должен содержать как минимум
1 л di готового к использованию промывающего раствора для иммунофиксации;
• Резервуар дистиллированной воды вмещает не менее 1 л промывочного раствора c
K000214;
• уровень жидкости в резервуаре для слива реагентов должен быть достаточно низким для
продолжения поступления в него реагентов.

6. Фазы анализа иммунофиксации

После запуска анализа Interlab G26 в автоматическом режиме выполняет следующие операции:
разбавление, распределение, нанесение образцов на пластину из агарозного геля,
электрофоретическую миграцию и помещение рамы в соответствующую выемку.
Операции нанесения фиксирующего раствора и антисыворотки, инкубации, удаления излишка
белков и первого высушивания выполняются вне инструмента Interlab G26, с использованием Easy
Mask (см. параграф «Обработка агарозного геля с помощью Easy Mask»).

13
 PK126.23
По окончании обработки при помощи Easy Mask рама вновь помещается в соответствующую выемку
инструмента Interlab, где проводятся автоматические операции промывки, высушивания,
окрашивания, обесцвечивания и конечной сушки геля.

Обработка агарозного геля с помощью Easy Mask

По окончании фазы миграции, когда программа Interlab G26 укажет на то, что необходимо вынуть
раму из инструмента, действовать, как описано ниже:

1. Поместить раму в Easy Mask и опустить контрраму, не закрывая защелки.

2. Выбрать программу N 1 на Easy-Mask (кнопка «Program»).
3. Вставить жесткую пластину для иммунофиксации в черную контрраму Easy-Mask таким
образом, чтобы она хорошо контактировала с гелем.

ВАЖНО: Обращаться с жесткой пластиной осторожно, во избежание повреждения маленьких

пластмассовых компонентов на ее основании.
4. Нанести фиксирующий раствор и антисыворотку согласно таблице, соответствующей
используемому набору; удостовериться в том, что все участки полностью и однородно покрыты
раствором, затем нажать на кнопку «Start/Cont» на Easy-Mask:

SRE625K
SRE640K
Участок Реагенты SRE626K Объем (μl)
Объем (μl)
SPE Фиксирующий раствор 34 85

Anti-Human-GAM Антисыворотка к GAM-цепям

Anti-Hu-GAM человека (или к белкам средне-низкой 25 75
молекулярной массы)

Anti-Human-Kappa Антисыворотка к каппа-цепям

Anti-Hu-Kappa человека (или к белкам средне-высокой 25 75
молекулярной массы)

Anti-Human-Lambda Антисыворотка к лямбда-

Anti-Hu-Lambda цепям человека (или бивалентная к каппа- и 25 75
лямбда-цепям)

Anti-Hu-K Free Anti-Human-Kappa Free 25 75

Anti-Hu- ʎ Free Anti-Human-Lambda Free 25 75

5. По окончании инкубации (6 минут) Easy-Mask издаст звуковой сигнал: осторожно снять

жесткую крышку.
6. Поднять контрраму Easy-Mask.
7. Поместить лист бумаги А на поверхность геля таким образом, чтобы она полностью с ним
контактировала, по прошествии 10 секунд снять его.
8. Повторить шаг 7.
9. Поместить лист бумаги N на поверхность геля таким образом (до того, как положить бумагу N,
оторвать боковые крылышки).
10.Поместить на бумагу N пластмассовую крышку; опустить контрраму, закрыть зажимы, а затем
нажать на кнопку «Start/Cont» на Easy-Mask.

ВАЖНО: Важно промывать жесткую пластину во время блоттинга, во избежание засыхания на

ней антисыворотки. Промыть ее при помощи зубной щетки, жидкого мыла и воды. Промыть в
дистиллированной воде.

11. По окончании фазы блоттинга (5 минут при 40°C) Easy-Mask издает звуковой сигнал: снять

14
 PK126.23
пластмассовую крышку и бумагу, нажать на кнопку «Start/Cont» на Easy-Mask.
12. По окончании фазы высушивания (3 минуты при 60°C) нажать на кнопку «Start/Cont» на
Easy-Mask, чтобы вернуться к первой фазе, затем установить раму в соответствующую выемку
внутри инструмента.
13. Нажать на кнопку «Riprendi» (Возобновить) и завершить цикл анализа.

Операции после проведения анализа

По окончании аналитического цикла рекомендуется провести следующие операции по

техобслуживанию инструмента:

1. Вынуть обработанную гелевую пластину из рамы.

2. Вынуть пропитанные губки из миграционной камеры и очистить каждую выемку мягкой
бумагой, слегка смоченной дистиллированной водой; высушить выемки.
3. Вынуть одноразовую пластину из держателя образцов.
Примечание: См. описанную в руководстве процедуру ежедневного техобслуживания.

Процедура для инструментов Interlab G26 с Easy Fix

Interlab G26 Easy Fix проводит процедуру иммунофиксации Бенса-Джонса в полностью
автоматическом режиме.
Автоматизированные операции включают в себя: разбавление, распределение, нанесение образцов
на пластину с агарозным гелем, электрофоретическую миграцию, нанесение фиксирующего
раствора и антисыворотки, инкубацию агарозного геля, блоттинг, высушивание, промывку,
окрашивание, обесцвечивание и конечную сушку.
Использовать программное обеспечение Elfolab/Interlab G26 для лабораторного анализа.

1. Подготовка к проведению электрофоретического анализа

1. Наполнить резервуары растворами с указанном ниже объеме:

Резервуар Раствор Объем (л)

Обесцвечивающий Обесцвечивающий раствор
5
раствор (5 мл SRE201A до 5 л дистиллированной воды)
Моющий раствор для игл/аппликаторов
Дистиллированная
(40 мл K000214, долить дистиллированной водой 2
вода
до 2 л)
Промывающий Промывающий раствор для иммунофиксации
1
раствор (25 мл SRE160M до 1 л дистиллированной воды)
Раствор красителя «кислотный фиолетовый»,
Краситель 2 0,21
готовый к использованию

2. Включить инструмент.
3. Использовать программу Elfolab/Interlab G26 для выбора типа электрофоретического анализа.
4. Удостовериться в том, что аппликаторы занимают надлежащие позиции (рис. 1).
5. Поместить одноразовую полоску для образцов (код SAE606M) на держатель образцов (рис.
3).
6. Поместить металлическую крышку на одноразовый держатель образцов (рис. 3).
7. Вставить держатель образцов в инструмент (рис. 3).
8. Удостовериться в том, жесткая пластина для распределения антисыворотки корректно
установлена в соответствующей выемке (рис. 9).
9. Поместить бумагу в держатель средств для блоттинга. Затем вставить держатель в
специальную выемку (рис. 9).

15
 PK126.23
2. Подготовка миграционной камеры (рис. 3)

1. Вынуть миграционную камеру из инструмента.

2. Вынуть пропитанные губки из упаковки.

ВАЖНО: к пропитанным губкам можно прикасаться чистым пинцетом или чистыми перчатками.
3. Вставить 2 пропитанные губки в боковые выемки. Оставить центральную выемку свободной.
4. Вставить миграционную камеру в инструмент до упора, надавив на нее, чтобы убедиться, что
произошло ее корректное подсоединение.

ВАЖНО: удалять губки после каждого электрофоретического хода.

3. Подготовка пластины из агарозного геля (рис. 4)

1. Поместить лист впитывающей бумаги А (код: SCE602A) на поверхность пластины из агарозного

геля для устранения излишков буферного раствора; убедиться в том, что лист впитывающей
бумаги А полностью покрывает поверхность геля, затем быстро снять его.

ВАЖНО: не оставлять впитывающую бумагу на геле в течение слишком длительного времени, во

избежание его дегидратации.
2. Вставить гелевую пластину в специальную раму (рис. 5).
3. Удостовериться в том, что гелевая пластина была корректно вставлена в раму.
4. Вставить раму в соответствующую выемку, соблюдая нумерацию (рис. 6).

ВАЖНО: запустить анализ в течение максимум 5 минут с момента установки рамы.

4. Загрузка образцов и антисыворотки

Для загрузки образцов, подлежащих автоматическому распределению, действовать, как описано

ниже:
1. Извлечь подставку для пробирок N.1 из инструмента (рис. 7).
2. Вставить пробирки, всегда начиная с позиции N 1 первой подставки, убедиться в том, что они
корректно вставлены до самого дна
3. Вставить подставку в инструмент таким образом, чтобы он скользил по направляющей N°1.
В случае использования бар-кода необходимо, чтобы этикетки с бар-кодом смотрели направо,
в направлении боковых прорезей выемок для пробирок (рис. 8).

ВАЖНО: До запуска анализа убедиться в том, что со всех пробирок были сняты крышки.

4. Поместить растворитель для иммунофиксации (SRE152M или SRE153M) в инструмент

в предназначенную для него позицию.

Для загрузки антисыворотки использовать подставку для антисыворотки:

5. Вставить пробирки с антисывороткой в подставку для антисыворотки, начиная с первой

позиции и соблюдая очередность.
6. Вставить подставку для антисыворотки в инструмент таким образом, чтобы он скользил по
направляющей N°3 (рис. 9).

ВАЖНО: До запуска анализа убедиться в том, что со всех пробирок были сняты крышки.

5. Подготовка вспомогательных средств Easy Fix

1. Поместить жесткую пластину для распределения антисыворотки в соответствующую выемку.

2. Поместить бумагу N в держатель средств для блоттинга, затем поместить держатель в
соответствующую выемку.

16
 PK126.23

Примечание: по окончании анализа тщательно очистить жесткую пластину. Промыть ее при

помощи щетки, жидкого мыла и воды. Промыть в дистиллированной воде. Высушить бумагой и
поместить в соответствующую выемку.

Примечание: по окончании анализа вынуть бумагу из держателя средств для блоттинга. Поместить
держатель в соответствующую выемку. Для нового цикла анализа использовать новую бумагу N.

6. Запуск электрофоретического анализа

Использовать программу Elfolab/Interlab G26 для запуска отбора образцов и/или анализа, и
выбрать номер рамы с гелевой пластиной, подлежащей обработке.

ВАЖНО: До начала нового цикла удостовериться в следующем:

• резервуар 2 окрашивающего раствора должна содержать количество раствора в диапазоне от

МИН. до МАКС. уровня;
• резервуар для обесцвечивающего раствора должен содержать как минимум 2 л
обесцвечивающего раствора;
• резервуар для промывающего раствора для иммунофиксации должен содержать как минимум
1 л di готового к использованию промывающего раствора для иммунофиксации;
• Резервуар дистиллированной воды вмещает не менее 1 л промывочного раствора c
K000214;
• уровень жидкости в резервуаре для слива реагентов должен быть достаточно низким для
продолжения поступления в него реагентов;
• вспомогательные средства Easy fix должны быть корректно подготовлены и установлены
в правильной позиции.

7. Фазы анализа иммунофиксации

После запуска анализа Interlab G26 проводит следующие автоматизированные операции:

распределение, нанесение образцов на пластину с агарозным гелем, электрофоретическую
миграцию, нанесение фиксирующего раствора и антисыворотки, инкубацию агарозного геля,
удаление излишков белков путем блоттинга, высушивание, промывку, окрашивание,
обесцвечивание и конечную сушку.

Операции после проведения анализа

По окончании аналитического цикла рекомендуется провести следующие операции по

техобслуживанию инструмента:

• Вынуть обработанную гелевую пластину из рамы;

• Вынуть пропитанные губки из миграционной камеры и очистить каждую выемку мягкой
бумагой, слегка смоченной дистиллированной водой; высушить выемки;
• Вынуть одноразовую пластину из держателя образцов;
• Вынуть жесткую пластину для распределения антисыворотки и тщательно промыть ее
проточной водой и мылом, используя щетку. Затем промыть ее дистиллированной водой и
высушить бумагой. Затем поместить бумагу в специальную выемку в инструменте;
• Вынуть бумагу N из держателя средств для блоттинга, затем поместить держатель в
специальную выемку в инструменте.

Примечание: См. описанную в руководстве пользователя процедуру ежедневного

техобслуживания.
Примечание: проверить корректность впитывания антисыворотки впитывающей бумагой
N. Наличие целых цветных следов является признаком правильного распределения
антисыворотки. Отсутствие следа в 1-2 мм не влияет на результат.

17
 PK126.23

9. Интерпретация результатов
ВАЖНО: По окончании анализа, до визуальной оценки протеинограмм очистить заднюю
поверхность гелевых пластин мягкой бумагой или ватой, пропитанной этиловым спиртом.

НАБОР АНТИСЫВОРОТОК К БЕЛКУ БЕНС-ДЖОНСА И ФИКСАТОРОВ SCE280M

НОРМАЛЬНАЯ ПРОТЕИНОГРАММА:
Участок ELP: Полосы альбумина и трансферрина.
Другие участки: Не имеется.

АНОМАЛЬНАЯ ПРОТЕИНОГРАММА:
• Наличие в моче белков Бенса-Джонса характеризуется:
− Моноклональной полосой, выявленной антисывороткой anti-Kappa или anti-Lambda
(свободные и связанные легкие цепочки [K tot, λ tot]);
− Той же самой моноклональной полосой, выявленной соответствующей антисывороткой anti-
Kappa free или anti-Lambda free (только свободные легкие цепочки [k free, λ free]);
− Отсутствием реакции с тривалентной антисывороткой [GAM].

• Наличие в моче парапротеинов сыворотки, не связанных с белками Бенса-Джонса,

характеризуется:
− Моноклональной полосой, выявленной тривалентной антисывороткой (GAM);
− Той же самой моноклональной полосой, выявленной антисывороткой anti-Kappa или anti-
Lambda (свободные и связанные легкие цепочки [K tot, λ tot]);
− Отсутствием реакции с соответствующей антисывороткой против свободных легких цепочек
(k free, λ free).

• Наличие в моче парапротеинов сыворотки, связанных с белками Бенса-Джонса,

характеризуется:
− Моноклональной полосой, выявленной тривалентной антисывороткой (GAM);
− Той же самой моноклональной полосой, выявленной антисывороткой anti-Kappa или anti-
Lambda (свободные и связанные легкие цепочки [K tot, λ tot]);
− Второй моноклональной полосой, выявленной антисывороткой anti-Kappa или anti-Lambda
(свободные и связанные легкие цепочки [K tot, λ tot]); как правило, она не мигрирует на
тот же уровень, что и полоса, выявленная с помощью тривалентной антисыворотки;
− Той же самой моноклональной полосой, выявленной антисывороткой anti-Kappa free или
anti-Lambda free (эта полоса никак не связана с полосой, выявленной с помощью
тривалентной антисыворотки).

Примечание: моноклональная полоса, выявленная антисывороткой anti-Kappa или anti-Lambda

(K tot, λ tot) более насыщенна, нежели моноклональная полоса, выявленная антисывороткой anti-
Kappa free или anti-Lambda free, поскольку эта антисыворотка менее чувствительна.
Примечание: Антисыворотки anti-Kappa и anti-Lambda (все легкие цепочки, свободные или
связанные) не в состоянии отличить свободные легкие цепочки (k free или λ free) от цепочек,
связанных с соответствующими тяжелыми цепочками.
Примечание: антисыворотка anti-GAM не в состоянии различать три тяжелые цепочки G [IgG],
A [IgA], M [IgM].

Особые случаи:
Белки Бенса-Джонса в моче могут полимеризироваться и образовывать единые скопления. Если это
затрудняет интерпретацию, следует деполимеризовать легкие цепочки, используя восстановитель
(2меркаптоэтанол или дитиотреитол).

10. Контроль качества

Лаборатория должна определить параметры приемлемости каждой партии контрольного материала.
В том случае, если результаты, полученные с использованием контрольной сыворотки, не входят
в установленный диапазон, необходимо повторить анализ.

18
 PK126.23
До отправки все партии наборов проходят контроль, целью которого является удостовериться
в соблюдении требования процедуры контроля качества, установленной компанией Interlab.
Результаты тестов контроля качества обеспечивают наличие у наборов технических характеристик,
заявленных в свидетельстве об анализе.

НАБОР АНТИСЫВОРОТОК ДЛЯ ОБЩЕГО ПРОФИЛЯ МОЧИ И ФИКСАТОРОВ SCE639M

НОРМАЛЬНЫЙ РЕЗУЛЬТАТ ПРОФИЛИРУЮЩЕГО ИССЛЕДОВАНИЯ:

Контрольная дорожка (ELP): Полосы отсутствуют или присутствуют полосы альбумина и
трансферрина (физиологическая протеинурия)
Гломерулярная дорожка: Полосы отсутствуют или присутствуют полосы альбумина и
трансферрина
Тубулярная дорожка: Полосы отсутствуют
Двухвалентная: Полосы отсутствуют
Свободные каппа-цепи: Полосы отсутствуют
Свободные лямбда-цепи: Полосы отсутствуют

АНОМАЛЬНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ПРОФИЛИРУЮЩЕГО ИССЛЕДОВАНИЯ:

• Гломерулярная протеинурия
Контрольная дорожка (ELP): Альбумин и/или альфа-2-макроглобулин и/или трансферрин
и/или IgG и/или диффузный профиль по всей ширине дорожки
Тубулярная дорожка: Полосы отсутствуют
Гломерулярная дорожка: Альбумин, трансферрин и/или альфа-2-макроглобулин и/или
IgG
Двухвалентная: Полосы отсутствуют или «поликлональный» профиль
Свободные каппа-цепи: Полосы отсутствуют
Свободные лямбда-цепи: Полосы отсутствуют
Примечание Гломерулярная протеинурия может быть селективной или неселективной.
При селективной г. п. наблюдаются четко видимые полосы альбумина и трансферрина. При
неселективной г. п. на электрофореграмме белков мочи наблюдается постепенное
возникновение тех же полос, что и на электрофореграмме сывороточных белков. Чем
больше полос в моче, тем сильнее повреждение почек.

• Тубулярная протеинурия:
Контрольная дорожка (ELP): может варьироваться в зависимости от степени тубулярной
протеинурии. Как правило, наблюдается диффузный профиль по всей дорожке
Тубулярная дорожка: Альфа-1-микроглобулин и/или ретинол-связывающий белок
Гломерулярная дорожка: может варьироваться в зависимости от степени протеинурии.
Обычно присутствуют как минимум полосы альбумина и трансферрина
Двухвалентная: Полосы отсутствуют или «поликлональный» профиль
Свободные каппа-цепи: Полосы отсутствуют или присутствует полоса белка Бенс-Джонса
Свободные лямбда-цепи: Полосы отсутствуют или присутствует полоса белка Бенс-Джонса
Примечание Полоса альбумина имеет очень незначительную высоту, в то время как
полосы альфа-1, альфа-2, бета и гамма являются преобладающими фракциями. Эта
картина часто наблюдается при четырех расстройствах: врожденной канальцевой
нефропатии, интерстициальном канальцевом нефрите, хроническом пиелонефрите и
поликистозе почек.

• Смешанная протеинурия
Контрольная дорожка (ELP): Как правило, наблюдается диффузный профиль по всей
дорожке
Тубулярная дорожка: Альфа-1-микроглобулин и/или ретинол-связывающий белок
Гломерулярная дорожка: Альбумин, трансферрин и/или альфа-2-макроглобулин и/или IgG
Двухвалентная: Полосы отсутствуют или присутствуют
«поликлональные»/«моноклональные» полосы
Свободные каппа-цепи: Полосы отсутствуют или присутствует полоса белка Бенс-Джонса
Свободные лямбда-цепи: Полосы отсутствуют или присутствует полоса белка Бенс-Джонса

19
 PK126.23
• Протеинурия, ассоциированная с белком Бенса-Джонса
Контрольная дорожка (ELP): может варьироваться в зависимости от степени протеинурии.
Наличие белка Бенс-Джонса на том же участке дорожек свободных каппа- и лямбда-цепей
Тубулярная дорожка: может варьироваться в зависимости от степени протеинурии.
Гломерулярная дорожка: может варьироваться в зависимости от степени протеинурии.
Двухвалентная: Моноклональная полоса
Свободные каппа-цепи: Полосы отсутствуют или присутствует полоса свободной каппа-
цепи белка Бенс-Джонса
Свободные лямбда-цепи: Полосы отсутствуют или присутствует полоса свободной лямбда-
цепи белка Бенс-Джонса

Примечание: моноклональная полоса, обнаруженная с помощью бивалентных антител (K tot

+ λ tot), является более интенсивной, чем моноклональная полоса, обнаруженная с помощью
антител к свободным каппа- или лямбда-цепям человека, потому что первые являются более
чувствительными, чем вторые.
Примечание: Анти-бивалентное антитело не способно различать связанные и свободные
моноклональные каппа- или лямбда-цепи.
Примечание: Анти-бивалентное антитело не способно различить две разных свободных
легких цепи - каппа и лямбда.

11. Обнаружение дефектов

В случае обнаружения изменения аналитических качеств набора удостовериться в том, что при
анализе была тщательно соблюдена процедура, а также инструкции по подготовке; если это так,
следует обратиться в службу технической поддержки дистрибьютора.

12. Клинические характеристики

Воспроизводимость в одной серии измерений «Intra Run» (в одной гелевой пластине)

Были проведены исследования точности в одной серии измерений «Intra-Run» для оценки
воспроизводимости внутри одного электрофоретического хода и для доказательства того, что все
протеинограммы одной гелевой пластины согласуются между собой.

- Наборы для электрофореза с иммунофиксацией белка Бенс-Джонса SRE625K, SRE626K,

SRE640K с SCE280M: в рамках этого исследования с помощью Interlab G26 был
проанализирован один образец здоровой мочи и три образца мочи с подтвержденным
наличием белка Бенс-Джонса. Для каждого образца на четырех разных пластинках
агарозного геля с применением одной и той же серии реагентов были проведены два
одинаковых анализа с использованием SRE625K, четыре - с использованием SRE626K и
шесть - с использованием SRE640K.
- Наборы для электрофореза с иммунофиксацией белка Бенс-Джонса SRE625K, SRE626K,
SRE640K с SCE639M: в рамках этого исследования с помощью Interlab G26 Easy-Fix были
проанализированы три разных образца мочи с протеинурией. Для каждого образца на трех
разных пластинках агарозного геля с применением одной и той же серии реагентов были
проведены четыре одинаковых анализа с использованием SRE626K.

Была произведена визуальная оценка результатов, а также оценка точности только на основании
соответствия данных. Исследование точности «Intra-Run» показало полное соответствие и
воспроизводимость; моноклональные полосы были количественно идентичны,
ложноположительные и ложноотрицательное результаты отсутствовали.

20
 PK126.23
Воспроизводимость в одной серии измерений «Inter Run» (нескольких гелевых
пластин)

Были проведены исследования точности в одной серии измерений «Inter-Run» для оценки
воспроизводимости различных серий реагентов одной производственной партии.

- Наборы для электрофореза с иммунофиксацией белка Бенс-Джонса SRE625K, SRE626K,

SRE640K с SCE280M: на 10 различных пластинах геля одной и той же серии SRE626K были
проведены анализы одного образца здоровой мочи и три разных образцов мочи с
подтвержденным наличием белка Бенс-Джонса.
- Наборы для электрофореза с иммунофиксацией белка Бенс-Джонса SRE625K, SRE626K,
SRE640K с SCE639M: на 10 различных пластинах геля одной и той же серии SRE626K были
проведены анализы четырех разных образцов мочи, относящихся к различным подтипам.

Была произведена визуальная оценка результатов, полученных на пластинах из агарозного геля, а

также оценка точности только на основании соответствия данных.

Исследование точности «Inter-Run» показало полное соответствие и воспроизводимость;

моноклональные полосы были количественно идентичны, ложноположительные и
ложноотрицательное результаты отсутствовали.

Воспроизводимость в одной серии измерений «Inter Lot» (нескольких гелевых пластин

различных производственных партий)

Были проведены исследования точности в одной серии измерений «Inter Lot» для оценки
воспроизводимости в нескольких электрофоретических ходах реагентов различных
производственных партий.

IFE BJ SRE625K: анализ двух образцов (с подтвержденным наличием белков Бенса-Джонса) был
произведен с использованием 3 различных гелевых пластин наборов SRE625K различных
производственных партий, в сочетании с наборами антисыворотки Бенса-Джонса и фиксирующего
раствора SCE280M трех различных производственных партий.

IFE BJ SRE626K: анализ четырех образцов (1 нормального образца мочи и 3 образцов мочи с
подтвержденным наличием белков Бенса-Джонса) был произведен с использованием 3 различных
гелевых пластин наборов SRE626K различных производственных партий, в сочетании с наборами
антисыворотки Бенса-Джонса и фиксирующего раствора SCE280M трех различных
производственных партий.

IFE BJ SRE640K: Анализ шести образцов (2 нормальных образцов мочи и 3 образцов мочи с
подтвержденным наличием белков Бенса-Джонса и 1 образца мочи с подтвержденным наличием
моноклональной полосы) был произведен с использованием 3 различных гелевых пластин наборов
SRE640K различных производственных партий, в сочетании с наборами антисыворотки Бенса-
Джонса и фиксирующего раствора SCE280M трех различных производственных партий.

Наборы для электрофореза с иммунофиксацией белка Бенс-Джонса SRE625K, SRE626K,

SRE640K с SCE639M: На 3 разных пластинах геля из разных серий SRE626K, используемых в
комбинации с 3 различными наборами из разных серий антисывороток и фиксаторов SCE639M,
были проведены анализы 4 образцов мочи, относящихся к различным подтипам.

Была произведена визуальная оценка результатов, полученных на пластинах из агарозного геля,

а также оценка точности только на основании соответствия данных. Исследование точности «Inter
Lot» показало полное соответствие и воспроизводимость; моноклональные полосы были
количественно идентичны, ложноположительные и ложноотрицательное результаты отсутствовали.

Существенная эквивалентность данных (Точность)

Наборы для электрофореза с иммунофиксацией белка Бенс-Джонса SRE625K, SRE626K, SRE640K с

SCE280M: Был произведен анализ ста образцов мочи, полученных как от здоровых пациентов, так

21
 PK126.23
и от пациентов с потенциальной патологией, характеризующихся возможными наличием белков
Бенса-Джонса, цельных моноклональных белков и поликлональных белков. Анализ образцов был
произведен при помощи инструмента Interlab G26 Easy-Fix путем иммунофиксации Бенса-Джонса
с антисывороткой BJ и фиксирующим раствором SCE280M. Анализ тех же самых образцов был также
произведен при помощи системы с агарозным гелем, имеющейся в продаже. Набор использованных
образцов содержал смесь трех тяжелых цепочек (IgG, IgA, IgM, идентифицированных с помощью
anti-GAM), двух свободных и связанных легких цепочек (κ и λ), и двух свободных легких цепочек
(κ free и λ free). Была произведена визуальная оценка результатов. Сравнение результатов
показало полное соответствие данных идентификации эквивалентных моноклональных полос
и отсутствие ложноотрицательных и ложноположительных результатов.

Наборы для электрофореза с иммунофиксацией белка Бенс-Джонса SRE625K, SRE626K,

SRE640K с SCE639M: были проведены анализы двадцати образцов мочи, полученных от
здоровых людей и людей с подозрением на патологию, с применением системы Interlab для
электрофореза с иммунофиксацией белка Бенс-Джонса на базе устройства Interlab G26 Easy-
Fix с антисыворотками к белку Бенс-Джонса и фиксатором SCE639M. Те же образцы были
подвергнуты анализу с применением систем с агарозным гелем, имеющимся на рынке.
Комплект образцов представлял собой сочетание различных подтипов: гломерулярного,
тубулярного, смешанного, каппа / свободного каппа, лямбда / свободного лямбда.
Полученные электрофореграммы были подвергнуты визуальной оценке. Сопоставление
результатов показало полное совпадение данных, полученных при определении
эквивалентных последовательностей полос, без ложно отрицательных и ложно положительных
результатов.

Чувствительность

Было произведено исследование чувствительности для определения способности выявления

белков Бенса-Джонса в том, что касается минимальной выявляемой концентрации белков Бенса-
Джонса, которые могут быть подвергнуты визуальной оценке. Было произведено серийное
разбавление образцов мочи с подтвержденным содержанием белков Бенса-Джонса, с
использованием геля и антисыворотки BJ трех различных производственных партий. 2 свободные
легкие цепочки были проанализированы при помощи антисыворотки anti-Kappa free и anti-Lambda
free. Каждый тип полосы белков Бенса-Джонса наименьшей концентрации был подвергнут
визуальной оценке, и данная концентрация была установлена как пороговое значение выявления.
Значения приведены в таблице ниже:

Белки Бенса-Джонса Пороговое значение

выявления (г/л)

Kappa free 0,012

Lambda free 0,012

13. Нормативные ссылки

• ПОСТАНОВЛЕНИЕ (ЕС) 2017/746 ЕВРОПЕЙСКОГО ПАРЛАМЕНТА И СОВЕТА от 5 апреля 2017 г.

касательно медицинских устройств для клинической диагностики;
• ISO 13485 «Медицинские устройства – Системы контроля качества – Требования для целей
регулирования».

22
 PK126.23

14. Библиография

1. Norden A.G.W., et all. Immunoglobulin light-chain immunoblots of urine proteins from patient
with tubular and Bence-Jones proteinuria. CCA 166, (1987), 307-315.
2. Donaldson M.D.C., Chambers R.E., Woolridge M.W., Whitcher J.T. Stability of alpha1-
microglobulin, beta2-microglobulin and retinol binding protein in urine. CCA.179,(1989),73-78.
3. Waller K.L., Ward K.M., Mahan J.D., Wismatt D.K. Current concepts in proteinuria. Clin. Chem.,
Vol. 35, N°5, (1989), 755-765
4. Nephrotoxicité des protéines de Bence-Jones. The New England Journal Of Medecine, 1991,
334 : 1845-1851.
5. Khan S.N. Dear Dr (Bence) Jones Clin.Chem. 1991, 37: N°9.
6. Andrews, A.T. Electrophoresis: Theory, Techniques and Biochemical and Clinical Applications.
2em ED.(1986). Oxford, Clarendon Press.
7. Burtis Carl A., and al.Text Book of Clinical Chemistry. 2em EC (1986) Saunders W.B. Co.
Philadelphia, Pennsylvania.
8. Widmann’s. Clinical Interpretation of Laboratory Tests. Davis F.A. Company, Philadelphia,
(1991).
9. Chevigne R. Etudes des proteines urinaires par electrophoreses sans concentrations.

15. Информация о производителе

Производитель: Interlab S.r.l., Via Rina Monti, 26 - 00155 Рим – Италия

номер телефона: +39 06 22754350

Эл. адрес: support@interlab-srl.com

страница в Интернете: http://www.interlab-srl.com

ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ
1. До начала анализа внимательно ознакомиться с инструкциями. Следует полностью понять
содержание руководства.
2. Не использовать реагенты с истекшим сроком годности.
3. Следовать Принципам Надлежащей Лабораторной Практики и Безопасности. Использовать
лабораторный халат, одноразовые перчатки и защитные очки.
4. Все химические продукты и реагенты, как подготавливаемые, так и использованные, должны
утилизироваться как потенциально опасные отходы, в соответствии с действующими местными
правилами и законами касательно безопасной утилизации опасных биологических отходов.

ОБЯЗАННОСТИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ
Производитель принимает исключительно письменные рекламации, содержащие все сведения об
условиях проведения и результатах теста. Любое изменение процедуры проведения теста или
использование компонентов различных производственных партий могут отрицательно отразиться
на результатах. В таких случаях запрос о замене набора является недействительным. Независимо
от типа рекламации, производитель обязан возместить сумму, не превышающую стоимость набора.
Производитель не несет ответственности за повреждения набора во время его транспортировки.

23
 PK126.23

16. Приложение I. Подготовка

Рис. 1: Установка аппликаторов (все серии)

Рис. 2: Установка держателя образцов (все серии)

24
 PK126.23

Рис. 3: Подготовка миграционной камеры (все серии)

25
 PK126.23

Рис. 4: Удаление излишков буферного раствора с гелевой пластины (все серии)

Рис. 5: Помещение гелевой пластины в раму (все серии)

26
 PK126.23

Рис. 6: Помещение гелевой пластины в инструмент (все серии)

Рис. 7: Помещение пробирок в подставку для пробирок

(за исключением инструмента без пробоотборника)

27
 PK126.23

Рис. 8: Установка подставки для пробирок (без пробоотборника)

Примечание для Interlab G26 Easy Fix: в качестве подставки для пробирок использовать
подставку N°1

Рис. 9: Установка дополнительных устройств Easy Fix (только для Interlab G26 Easy
Fix)

1. Подставка для антисыворотки (направляющая N 3)

2. Крышка антисыворотки
3. Держатель средств для блоттинга

28