www.askaboutvalidation.

com (Обогащение ваших

профессиональных знаний)

ПРОТОКОЛ ВАЛИДАЦИИ ТЕСТА НА ПРЕДЕЛЬНОЕ СОДЕРЖАНИЕ МИКРООРГАНИЗМОВ

Протокол №

Эффективно
Дата

Название и адрес компании

Подготовлено Рассмотрено Одобрено

Подпись

Дата:
Обозначение
n:
страниц

www.askaboutvalidation.com
Номер протокола:

Новый / заменяет:................. Дата:

..................
ИСПЫТАНИЕ НА ПРЕДЕЛЬНУЮ КОНЦЕНТРАЦИЮ МИКРООРГАНИЗМОВ
ПРОТОКОЛ ВАЛИДАЦИИ Рассмотрено:

Дата вступления в силу:

Срок рассмотрения:

Страница №: 2 из 11

Содержание

1.0 ПРЕДВАРИТЕЛЬНОЕ ОДОБРЕНИЕ ...................................................................

Номера

ЦЕЛЬ 2.0............................................................................

ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ 3.0....................................................................................

СПРАВОЧНЫЙ ДОКУМЕНТ 4.0.........................................................

5.0 ОТВЕТСТВЕННОСТЬ.....................................................................

МЕТОДОЛОГИЯ ВАЛИДАЦИИ 6.0......................................................

7.0 КРИТЕРИИ ПРИЕМЛЕМОСТИ .........................................................

8.0 КРИТЕРИИ ПОВТОРНОЙ ВАЛИДАЦИИ......................................................

9.0 ОТЧЕТ О РЕЗУЛЬТАТАХ...............................................................

10 ЗАКЛЮЧЕНИЕ...........................................................................

11 КЛЮЧЕВЫХ СООБРАЖЕНИЙ........................................................

12 АБЕРИВАЦИЙ......................................................................

13 ТЕХНОЛОГИЧЕСКАЯ СХЕМА ......................................................

14 ПОСЛЕДУЮЩЕЕ УТВЕРЖДЕНИЕ......................................................................

Подготовлено Рассмотрено Одобрено

Подпись

Дата:
Обозначение
n:
 www.askaboutvalidation.com
Номер протокола:

Новый / заменяет:................. Дата:

..................
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬНЫЙ ТЕСТ
ПРОТОКОЛ ПРОВЕРКИ Рассмотрено:

Дата вступления в силу:

Срок рассмотрения:

Страница № 3 из 11

ЦЕЛЬ 2.0:

Установить документальное подтверждение того, что метод определения предельной концентрации микроорганизмов
для нестерильных материалов способен правильно оценивать количество микроорганизмов
в Материалах. Достоверность результатов испытаний в значительной степени зависит от адекватности
демонстрации того, что тестируемые образцы, на которые они наносятся, сами по себе
не подавляют размножение
микроорганизмов, которые могут присутствовать в условиях испытаний.

Проверка должна продемонстрировать, что используемый метод способен

для правильного подсчета микроорганизмов без отрицательного воздействия на
рост даже в случае материалов, обладающих противомикробной активностью.

3.0 ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ:

Настоящий протокол валидации применим для подтверждения предельного уровня микробиологии

стерильных продуктов и сырья.

Протокол должен использоваться для валидации методов, применимых ко всем дозировочным

формам и материалам, для которых требуется испытание на предельное содержание микроорганизмов.

Всякий раз, когда метод используется для испытания на предельное содержание микроорганизмов при увеличении / уменьшении объема
Рецептуры, валидация должна проводиться только для одной крепости продукта.

СПРАВОЧНЫЙ ДОКУМЕНТ 4.0:

При составлении протокола используются следующие документы

Название документа Номер документа

СОП для определения предельного уровня микробиологииххххххххххххххххх

Подготовлено Рассмотрено Одобрено

Подпись

Дата:
Обозначение
n:
 www.askaboutvalidation.com
Номер протокола:

Новый / заменяет:................. Дата:

..................
ИСПЫТАНИЕ НА ПРЕДЕЛЬНУЮ КОНЦЕНТРАЦИЮ МИКРООРГАНИЗМОВ
ПРОТОКОЛ ВАЛИДАЦИИ Рассмотрено:

Дата вступления в силу:

Срок рассмотрения:

Страница №: 4 из 11

5.0 ОТВЕТСТВЕННОСТЬ:
Квалифицированный микробиолог или соответствующее обученное уполномоченное лицо

МЕТОДОЛОГИЯ ВАЛИДАЦИИ 6.0

6.1 ОБЩЕЕ КОЛИЧЕСТВО ЖИЗНЕСПОСОБНЫХ АЭРОБОВ

% Твина 20 в буферном %Восстановления микроорганизмов

растворе пептона
хлорида натрия
0.025 % Восстановление не получено
0.050% Восстановление не получено
0.075% Восстановление менее 70%
0.1 % Восстановление до 70%

6.1.1 10 г/мл образца + 90 мл забуференного пептона хлорида натрия + 0,1%

Подросток 20/80. (Раствор А) 1:10.
15 мл раствора А + 60 мл забуференного пептона хлорида натрия + 0,1% Твин
20 1:50.
10 мл раствора А + 90 мл забуференного пептона хлорида натрия + 0,1%
Твин 20 1:100.

6.1.2 Подготовили шесть пробирок, содержащих по 10 мл каждая из раствора А (1:10) и

проделайте то же самое для другого препарата, т.е. раствора В (1:50) и раствора
С (1:100) соответственно.

6.1.3 Выращивать бактериальные культуры отдельно на среде для переваривания соевого казеина при
0 0
30 C до 35 С в течение 24 часов и отдельно с культурами грибов в соевом казеине

Подготовлено Рецензировано Утверждено

Подпись

Дата:
Обозначение
n:
www.askaboutvalidation.com
Номер протокола:

Новый / заменяет собой:................. Дата:

..................
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬНЫЙ ТЕСТ
ПРОТОКОЛ ПРОВЕРКИ Рассмотрено:

Дата вступления в силу:

Срок рассмотрения:

Страница №: 5 из 11
0 0
переварите на 20-м носителе От C до 25 C в течение 48 часов. Используемые организмы, как
указано
ниже.
- Кишечная палочка
- S. aures
- Сальмонелла
- Синегнойная палочка
- C. albicans
- A. niger
-Устойчивые к желчи грамотрицательные бактерии (заменена процедура EP
"Тест на энтеробактерии и некоторые другие грамотрицательные
бактерии")
6.1.4 Приготовить эталонную суспензию отдельно из вышеуказанных организмов путем разбавления
3
получить бульонные культуры с содержанием не менее 10 жизнеспособные
микроорганизмы на мл.

6.1.5 Добавить отдельно 1 мл культуральных растворов золотистого стафилококка, кишечной палочки, сальмонеллы,
Pseudomonas aeruginosa, C. albicans, A. niger и другие виды бактерий,
полученные выше, во всех трех наборах из шести пробирок, приготовленных из каждого
раствора A,B,C.

6.1.6 Из каждого набора пипеток выводят по 1 мл отдельно в две предварительно простерилизованные чашки Петри
.Влейте 20-22 мл сжиженного соево-казеинового агара для культивирования
бактерий и 20-22 мл сжиженного декстрозного агара Сабуро для культивирования
грибов.

0 0
6.1.7 Инкубировать чашки с агаром для переваривания соевого казеина при температуре 30 C до 35 С в течение 5 дней
0 0
и тарелки с декстрозным агаром Сабуро при температуре 20 От C до 25 C в течение 5 дней.

6.1.8 Контрольные образцы:

Подготовлено Рассмотрено Одобрено

Подпись

Дата:
Обозначение
n:
www.askaboutvalidation.com
Номер протокола:

Новый / заменяет:................. Дата:

..................
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬНЫЙ ТЕСТ
ПРОТОКОЛ ПРОВЕРКИ Рассмотрено:

Дата вступления в силу:

Срок рассмотрения:

Страница №: 6 из 11

Инокулируют по 1,0 мл раствора A, B и C в двух экземплярах и добавляют 20-22 мл

агара для переваривания соевого казеина для подсчета бактерий и агара декстрозы Сабуро
0
для общего количества плесени и дрожжей соответственно. Инкубировать при температуре 30 С по
0 0 0
35 C для определения количества бактерий за 5 и 20 дней От C до 25 C для общего количества плесени
количество дрожжей рассчитывают на 5 дней.

6.1.9 Положительный контроль

Инокулируйте по 1 мл каждой разведенной бактериальной и грибковой культуры в две
чашки каждую и добавьте 20-22 мл агара для переваривания соевого казеина и декстрозного агара Сабуро
0 0
соответственно. Инкубировать при температуре 30 C до 35 C для бактериальной культуры в течение
0 0
5 дней И через 20 От C до 25 C для общего количества плесени и дрожжей рассчитывайте в течение 5
дней.

6.1.10 Негативный контроль для СМИ:

Инокулируют 1,0 мл забуференного раствора пептона хлорида натрия в четыре
чашки и добавляют 20-22 мл агара для переваривания соевого казеина в 2 чашки и
0
декстрозного агара Сабуро в другие 2 чашки соответственно. Инкубировать при температуре 30 С
0 0 0
до 35 C для бактериальной культуры в течение 5 дней и при 20 От C до 25 C для общего количества
количество плесени и дрожжей в сочетании рассчитано на 5 дней.

6.2 ТЕСТЫ На ПАТОГЕННЫЕ МИКРООРГАНИЗМЫ:

6.2.1 Подготовка образца:

1,0 г образца + 100 мл соево-казеиновой переваривающей среды + 4% творога 20%

1,0 г образца + 100 мл жидкой лактозной среды + 4% Твин 20

100 мл жидкой лактозной среды + 4% Твин 20 (Положительный контроль)

100 мл соево-казеиновой переваривающей среды + 4% Твин 20 (Положительный контроль)

6.2.2 Хорошо перемешайте до получения однородного раствора или суспензии:

Подготовлено Рецензент Утверждено

Подпись

Дата:
Обозначение
n:
www.askaboutvalidation.com
Номер протокола:

Новый / заменяет:................. Дата:

..................
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬНЫЙ ТЕСТ
ПРОТОКОЛ ПРОВЕРКИ Рассмотрено:

Дата вступления в силу:

Срок рассмотрения:

Страница №: 7 из 11

6.2.3 Выращивать бактериальную культуру отдельно на среде для переваривания соевого казеина при
0 0
30 C до 35 C в течение 24 часов. Используемые организмы такие, как указано
ниже.

- Кишечная палочка
- S. aures
- Сальмонелла
- Синегнойная палочка

6.2.4 Приготовить эталонную суспензию отдельно от вышеуказанных организмов путем разведения

3
Бульонных культур до получения не менее 10 жизнеспособных организмов на мл. Смешайте
равный объем каждой суспензии.

6.25 Пипеткой по 1,0 мл смешать суспензию микроорганизма отдельно в пробирке

Среда для переваривания соевого казеина и жидкая лактозная среда, содержащие
образец, подлежащий исследованию.

6.2.5 Инкубировать пробирку со средой для переваривания соевого казеина и жидкой лактозой
0 0
среда при температуре 30
C до 35 Выдерживают в течение 24-48 часов и приступают к выделению и
идентификации золотистого стафилококка, синегнойной палочки,
сальмонеллы, кишечной палочки из этого бульона в соответствии с указанными инструкциями.
7.0 КРИТЕРИИ ПРИЕМЛЕМОСТИ

7.1 Извлечение тестируемых организмов должно составлять не менее 70% от расчетного

должна быть получена суспензия инокулята.

7.2 Не должно быть сбоев в выделении и идентификации организмов,

инокулированных в среду вместе с материалом.

7.3 Отрицательный контроль не должен показывать роста.

Подготовлено Рецензент Утверждено

Подпись

Дата:
Обозначение
n:
www.askaboutvalidation.com
Номер протокола:

Новый / заменяет:................. Дата:

..................
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬНЫЙ ТЕСТ
ПРОТОКОЛ ПРОВЕРКИ Рассмотрено:

Дата вступления в силу:

Срок рассмотрения:

Страница №: 8 из 11

8.0 КРИТЕРИИ ПОВТОРНОЙ ВАЛИДАЦИИ / ДЕМОНСТРАЦИЯ ПРИГОДНОСТИ МЕТОДА

Изменение рецептуры при добавлении нового компонента.

При изменении концентрации консерванта.

Существенное изменение в методе определения микробного предела, аналогичном методу дезактивации

антимикробной активности.

Три партии каждого продукта / материалов должны быть проверены на

предельное содержание микроорганизмов.

Тесты на "отсутствие определенных организмов", обеспечивающие процедуры для

подтверждения отсутствия золотистого стафилококка, синегнойной палочки
, сальмонелл и кишечной палочки.

9.0 ТРЕБОВАНИЯ К ОТЧЕТУ О РЕЗУЛЬТАТАХ / ПРОВЕРКЕ

Сообщайте обо всех результатах в форме отчета о проверке метода. Если результаты
неприемлемы,
соответствующий метод для исключения влияющего фактора.

10.0 ЗАКЛЮЧЕНИЕ
…………………………………………………………………………………………………….
……………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………
………

11.0 ОСНОВНЫЕ СООБРАЖЕНИЯ:

Подготовлено Рецензент Утверждено

Подпись

Дата:
Обозначение
n:
www.askaboutvalidation.com
Номер протокола:

Новый / заменяет:................. Дата:

..................
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬНЫЙ ТЕСТ
ПРОТОКОЛ ПРОВЕРКИ Рассмотрено:

Дата вступления в силу:

Срок рассмотрения:

Страница № 9 из 11

Принимая во внимание последние международные правила гармонизации, некоторые ключевые

соображения следует обсудить как рабочей группе по контролю качества, так и CQU.

1. Фундаментальные недостатки этих тестов в отношении

текущих требований надлежащей производственной практики (CGMP) к
"отсутствию нежелательных организмов" должны быть обсуждены
научными группами.

2. Анализ риска продукта, включая использование продукта и способ его получения

введение, потенциал роста, сохранность и другие
соображения, которые рекомендуются в текстах фармакопеи, должны быть должным образом приняты во внимание.
Группа качества должна
применять надлежащий и разумный научный подход к обращению,
валидации и тестированию в особых случаях отзыва продукции из-за
присутствия нежелательных организмов.

3. Повторная валидация существующих тестов для приведения их в соответствие с текущими гармонизированными

стандарты и уровень детализации должны быть должным образом обсуждены и
произведены с использованием матричного подхода.

4. Надлежащий формат отчетности должен быть разработан как специалистами по качеству

, так и группами документации.

5. Подготовка микробиологов к пересмотренным тестам должна быть

рассмотрена как приоритет как группой валидации, так и группой контроля качества
во время передачи процедур.
12.0 СОКРАЩЕНИЯ

Сокращения
QA Гарантия качества
SOP Стандартная операционная процедура
GMP Надлежащая производственная практика

Подготовлено Рассмотрено Одобрено

Подпись

Дата:
Обозначение
n:
www.askaboutvalidation.com
Номер протокола:

Новый / заменяет:................. Дата:

..................
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬНЫЙ ТЕСТ
ПРОТОКОЛ ПРОВЕРКИ Рассмотрено:

Дата вступления в силу:

Срок рассмотрения:

Страница №: 10 из 11

Центральный контрольный пункт

13.0 Технологические схемы

14.0 ПОСЛЕ УТВЕРЖДЕНИЯ

Подготовлено

Подготовлено Рецензент Одобрено

Подпись

Дата:
Обозначение
n:
www.askaboutvalidation.com
Номер протокола:

Новый / заменяет:................. Дата:

..................
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬНЫЙ ТЕСТ
ПРОТОКОЛ ВАЛИДАЦИИ Рассмотрено:

Дата вступления в силу:

Срок рассмотрения:

Страница №: 11 из 11

……………………… ……………………….
………………………..
(Имя) (Подпись) (Дата)

Проверено

……………………… ……………………….
………………………..
(Имя) (Подпись) (Дата)

Одобрено

……………………… ……………………….
………………………..
(Имя) (Подпись) (Дата)

Подготовлено Рецензент Одобрено

Подпись

Дата:
Обозначение
n: