Вы находитесь на странице: 1из 17

Cf Pharma Ltd, 73B, Hebron Industrial Estate, Kilkenny, Ireland

+353 (0) 51 439 010


E-mail: info@cfpharma.ie

МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ


АРТРЕКС ДЖОЙНТ

1. Требования к качеству
Для производства кормовой добавки используют сырье, указанное в таблице 1.

Таблица 1

Наименование компонентов Количество, на 1 л


Глюкозамина гидрохлорид 200,0 г
Хондроитина сульфат 50,0 г
Марганца сульфат 2,0 г
Метилсульфонилметан 40,0 г
Витамин С 14,0 г
Гиалуроновая кислота 3,69 г
Омега-3 порошок 40 % 18,75 г
Натрия бензоат 6,4 г
Калия сорбат 4,4 г
Микрокристаллическая целлюлоза 3,5 г
Декстроза 20,0 г
Сорбитол 150 мл
Краситель «Карамельный колер» 1,25 мл
Ароматизатор «Шоколад - карамель» 3,4 мл
Меласса 5,0 г
Ксантановая камедь 0,75 г

Страница 1 из 17
Cf Pharma Ltd, 73B, Hebron Industrial Estate, Kilkenny, Ireland
+353 (0) 51 439 010
E-mail: info@cfpharma.ie

МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ


АРТРЕКС ДЖОЙНТ

По органолептическим, физико-химическим показателям кормовая добавка


должна соответствовать требованиям, указанным в таблице 2.

Таблица 2

Метод
Характеристика и
Наименование показателя испы-
норма
тания
Раствор коричневого
Внешний вид п.2.1
цвета
Количественное содержание глюкозамина
160,0 – 240,0 п.2.2
гидрохлорида, г/дм3
Количественное содержание хондроитина
40,0 – 60,0 п.2.2
сульфата, г/дм3
Количественное содержание марганца сульфата,
1,6 – 2,4 п.2.3
г/дм3
Количественное содержание
32,0 – 48,0 п.2.4
метилсульфонилметана, г/дм3
Количественное содержание витамина С, г/дм3 11,2 – 16,8 п.2.5
Количественное содержание гиалуроновой
2,952 – 4,428 п.2.6
кислоты, г/дм3
Количественное содержание омега-3 порошка 40
15,0 – 22,5 п.2.7
%, г/дм3
Должна выдерживать
Наличие патогенной микрофлоры п.2.8
испытание
По показателям безопасности (микробиологическим показателям, содержанию
токсических элементов, пестицидов) добавка должна соответствовать принятым нормам,
утвержденным органом, уполномоченным Министерством сельского хозяйства РФ и
требованиям нормативной документации производителя.
Контроль за содержанием в добавке солей тяжелых металлов, патогенной
микрофлоры осуществляется в соответствии с порядком, установленным производителем
продукции.
Страница 2 из 17
Cf Pharma Ltd, 73B, Hebron Industrial Estate, Kilkenny, Ireland
+353 (0) 51 439 010
E-mail: info@cfpharma.ie

МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ


АРТРЕКС ДЖОЙНТ

2. Методы контроля
2.1 Определение внешнего вида
Внешний вид и цвет кормовой добавки оценивают визуально.
Одновременно проверяют целостность упаковки и правильность маркировки.
Кормовая добавка представляет собой раствор коричневого цвета.

2.2 Количественное содержание глюкозамина гидрохлорида и хондроитина


сульфата
Определение проводят методом ВЭЖХ.
Средства измерений, вспомогательное оборудование, материалы и реактивы:
- ВЭЖХ система, оснащенная УФ-детектором;
хроматографическая колонка для ионообменной хроматографии 150 х 4,6мм
СТ/ДВБ 7мкм 10 % Na+, ТВЕС.414538.005-01 или аналогичная, при условии выполнения
теста «Проверка пригодности хроматографической системы»;
- фильтр-поглотитель аммиака 100 × 4,6мм СТ/ДВБ 50мкм 10% Na+,
ТВЕС.414538.005-02;
- весы лабораторные аналитические, ГОСТ Р 53228;
- посуда лабораторная, ГОСТ 1770, ГОСТ 25336, ГОСТ 29227;
ультразвуковая ванна;
магнитная мешалка;
- фильтры шприцевые одноразовые PTFE d=0,45 мкм;
шприцы медицинские одноразовые;
стандарты глюкозамина сульфата и хондроитина сульфата с известной
активностью (стандарт предприятия или аналитический стандарт);

Страница 3 из 17
Cf Pharma Ltd, 73B, Hebron Industrial Estate, Kilkenny, Ireland
+353 (0) 51 439 010
E-mail: info@cfpharma.ie

МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ


АРТРЕКС ДЖОЙНТ

- активатор нингидринового реагента, по ТУ 20.59.52-001-0117717673-2017;

- нингидриновый реагент, по ТУ 20.59.52-001-0117717673-2017;

- натрий –цитратный буфер А-1, по ТУ 20.59.52-001-0117717673-2017;

- раствор для регенерации колонки Na+, по ТУ 20.59.52-001-0117717673-2017;

- буфер для разбавления образцов - Na+, по ТУ 20.59.52-001-0117717673-2017.

Подготовка к испытанию
Активированный нингидриновый реагент
В стакан на 1000 см3 вносят 400 см3 нингидринового реагента, на магнитной
мешалке растворяют 500 мкл активатора нингидринового реагента, перемешивают в
течении 30 мин. В мерную колбу на 500 см 3 количественно переносят приготовленный
реагент и доводят нингидриновым реагентом до метки.
Срок годности активированного нингидринового реагента 7 суток.
Стандартный раствор глюкозамина сульфата.

Около 200,0 мг (точная навеска) стандартного образца глюкозамина сульфата


помещают в мерную колбу вместимостью 100 см 3, прибавляют 70 см3 буфера для
разбавления образцов, помещают на УЗ ванну до полного растворения стандарта, доводят
до метки тем же растворителем, фильтруют.

Стандартный раствор хондроитина сульфата.

Около 50,0 мг (точная навеска) стандартного образца хондроитина сульфата


помещают в мерную колбу вместимостью 100 см 3, прибавляют 70 см3 буфера для
разбавления образцов, помещают на УЗ ванну до полного растворения стандарта, доводят
до метки тем же растворителем. Раствор фильтруют..

Проверка пригодности хроматографической системы.

Результаты анализа считаются достоверными, если выполняются следующие


требования:
Страница 4 из 17
Cf Pharma Ltd, 73B, Hebron Industrial Estate, Kilkenny, Ireland
+353 (0) 51 439 010
E-mail: info@cfpharma.ie

МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ


АРТРЕКС ДЖОЙНТ

- число теоретических тарелок, рассчитанное для пиков глюкозамина


сульфата и хондроитина сульфата, должно быть не менее 3000;
- RSD рассчитанное для площадей пика глюкозамина сульфата и хондроитина
сульфата в растворах стандартов и в растворах образцов добавки не должно превышать
2 %;
- коэффициент асимметрии пика глюкозамина сульфата и хондроитина сульфата,
рассчитанный из хроматограмм растворов стандартов должен быть 0,8 – 2,0;
соотношение коэффициентов отклика первого экземпляра стандартного раствора и
второго экземпляра стандартного раствора должно находиться в пределах от 98,0 % до
102,0 %.
Испытуемый раствор
Около 1,0 см3 (точная навеска) кормовой добавки помещают в мерную колбу
вместимостью 100 см3, прибавляют 75 см3 буфера для разбавления образцов, тщательно
перемешивают и помещают на УЗ ванну на 15 минут. Доводят объем до метки тем же
растворителем, раствор фильтруют.
Проведение испытания

Условия хроматографирования:

Колонка: 50 х 4,6мм СТ/ДВБ 7мкм 10 % Na+, ТВЕС.414538.005-


01.Допускается использование альтернативной колонки,
удовлетворяющей требованиям пригодности
хроматографической системы;
Подвижная фаза: ПФ А: натрий цитратный буфер,
ПФ Б: раствор для регенерации
Скорость потока: 0,25 см3/мин;
Детектор: УФ, 570
Объем вводимой пробы: 10 мкл;
Температура колонки: 65 °С.
Программа градиентного элюирования:

натрий –цитратный раствор для регенерации


Время, мин
буфер А-1 (% v/v) колонки Na+; (% v/v)
0,01 100 0
Страница 5 из 17
Cf Pharma Ltd, 73B, Hebron Industrial Estate, Kilkenny, Ireland
+353 (0) 51 439 010
E-mail: info@cfpharma.ie

МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ


АРТРЕКС ДЖОЙНТ

8,00 100 0
9,00 20 80
14,00 20 80
15,00 100 0
25,0 100 0
Время удерживания пика глюкозамина сульфата – около 10,6 минут, пика хондроитина
сульфата – 12 мин.
Время записи хроматограммы – 35 минут.

Последовательно хроматографируют по 3 раза растворы стандартного образца и


испытуемый растворы.
Обработка результатов
Содержание глюкозамина сульфата и хондроитина сульфата, г/дм 3, (Х) вычисляют
по формуле:

S0×mст×А×1000
Х=
Sст×m0
S0 – средняя площадь пика испытуемого раствора;
Sст – средняя площадь пика стандартного раствора;
m0 – масса навески испытуемого раствора, мг;
mст – масса навески стандартного образца, мг;
А – активность стандарта, мг/г.
За окончательный результат анализа принимают среднее арифметическое не менее
четырех параллельных определений, рассчитанных по двум стандартным растворам,
удовлетворяющим критериям пригодности системы. Относительное стандартное
отклонение среднего результата не должно превышать 2 % при доверительной
вероятности Р=0,95.
Содержание глюкозамина гидрохлорида в добавке должно быть от 160,0 до
240,0 г/дм3.

Содержание хондроитина сульфата в добавке должно быть от 40,0 до


60,0 г/дм3.

Страница 6 из 17
Cf Pharma Ltd, 73B, Hebron Industrial Estate, Kilkenny, Ireland
+353 (0) 51 439 010
E-mail: info@cfpharma.ie

МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ


АРТРЕКС ДЖОЙНТ

2.3 Количественное содержание марганца сульфата


Определение проводят методом атомно-абсорбционной спектрометрии по ГОСТ
32343.
Средства измерений, вспомогательное оборудование, материалы и реактивы - по
ГОСТ 32343 (п. 4, 5).
Подготовка к испытанию - по ГОСТ 32343 (п. 7).
Проведение испытания - по ГОСТ 32343 (п. 8).
Обработка результатов - по ГОСТ 32343 (п. 9).
Содержание марганца сульфата рассчитывают по формуле:

X ( MnSO 4 )= X ( Mn ) × 2,745 ,

где
X(Mn) – содержание марганца в испытуемом растворе
Содержание марганца сульфата в добавке должно быть от 1,6 до 2,4 г/дм3.

2.4 Количественное содержание ментилсульфонилметана (МСМ)


Определение проводят методом ГЖХ.
Средства измерений, вспомогательное оборудование, материалы и реактивы:
газовый хроматограф с пламенно-ионизационным детектором;
ультразвуковая ванна с термастотироованием;
хроматографическая колонка кварцевая капиллярная 30 м × 0,53 мм, покрытая
слоем поли(диметил)силоксана, 5 мкм;
весы лабораторные аналитические, ГОСТ Р 53228;
- посуда лабораторная, ГОСТ 1770, ГОСТ 25336, ГОСТ 29227;
стандартный образец метилсульфанилметана с известной активностью;
- стандартный образец диэтиленгликоля метилового эфира с известной
активностью;
- метанол для хроматографии;
гелий для хроматографии.
Страница 7 из 17
Cf Pharma Ltd, 73B, Hebron Industrial Estate, Kilkenny, Ireland
+353 (0) 51 439 010
E-mail: info@cfpharma.ie

МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ


АРТРЕКС ДЖОЙНТ

Подготовка к испытанию
Раствор внутреннего стандарта.
В мерную колбу вместимостью 1 дм3 помещают 950 см3 метанола, прибавляют 0,6
см3 диэтиленгликоля метилового эфира, доводят объём раствора метанолом до метки и
перемешивают.
Срок годности раствора 24 ч при хранении в защищённом от света месте.

Испытуемый раствор
В мерную колбу темного стекла на 50 мл вносят около1,0 см 3 (точная навеска)
добавки, добавляют 20 см3 раствора внутреннего стандарта, обрабатывая ультразвуком
при 50°C в течение 1 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём
раствора тем же растворителем до метки.
Срок годности растворов 24 ч при хранении в защищённом от света месте.
Стандартный раствор
Около 40,0 мг (точная навеска) стандартного образца метилсульфанилметана
помещают в мерную колбу вместимостью 50 см 3, растворяют в 20 см3 раствора
внутреннего стандарта, обрабатывая ультразвуком при 50 °C в течение 1 мин, охлаждают
до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.
Срок годности растворов 24 ч при хранении в защищённом от света месте.
Проведение испытания
Условия хроматографирования:

Колонка - кварцевая капиллярная 30 м × 0,53 мм, покрытая слоем


поли(диметил)силоксана, 5 мкм;
Детектор - пламенно-ионизационный;
Газ-носитель - гелий для хроматографии;
Деление потока - 1:5;
Скорость потока - 3,0 мл/мин;
Объем инжекции - 1 мкл;
Температура - колонки 120 °С;
- инжектора 250 °С;
- детектора 250 °С;
Время удерживания - диметилсульфон – около 8,5 мин;
Страница 8 из 17
Cf Pharma Ltd, 73B, Hebron Industrial Estate, Kilkenny, Ireland
+353 (0) 51 439 010
E-mail: info@cfpharma.ie

МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ


АРТРЕКС ДЖОЙНТ

- диэтиленгликоля метиловый эфир – около 11 мин;


Время - 3-кратное от времени удерживания пика
хроматографирования метилсульфонилметана.
В испаритель газового хроматографа, выведенного на рабочий режим, вводят
последовательно по 2 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца и
регистрируют хроматограммы.
Время удерживания пика МСМ на хроматограмме испытуемого раствора должно
соответствовать времени удерживания пика МСМ на хроматограмме раствора
стандартного образца.
Пригодность хроматографической системы.
Хроматографическая система считается пригодной, если:
- разрешение (RS) между пиками МСМ и диэтиленгликоля метилового эфира
должно быть не менее 3,0;
- относительное стандартное отклонение отношения площади пика МСМ к
площади пика диэтиленгликоля метилового эфира должно быть не более 1 % (6
определений).
Обработка результатов
Содержание МСМ в кормовой добавке, г/дм3 (Х) рассчитывают по формуле:

В1×m0×A×1000
Х=
В0×m1
где:
B1 – отношение площади пика метилсульфонилметана к площади пика
диэтиленгликоля метилового эфира на хроматограмме испытуемого раствора;
B0 – отношение площади пика метилсульфонилметана к площади пика
диэтиленгликоля метилового эфира на хроматограмме стандартного раствора;
m1 – масса навески кормовой добавки, мг;
m0 – масса навески стандартного образца диметилсульфона, мг;
А – активность стандарта, мг/г.
Содержание МСМ в добавке должно быть от 32,0 до 48,0 г/дм3.

Страница 9 из 17
Cf Pharma Ltd, 73B, Hebron Industrial Estate, Kilkenny, Ireland
+353 (0) 51 439 010
E-mail: info@cfpharma.ie

МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ


АРТРЕКС ДЖОЙНТ

2.5 Количественное содержание витамина С


Определение подлинности и содержания витамина С (аскорбиновой кислоты)
проводят методом капиллярного электрофореза по ГОСТ 31483.
Средства измерений, вспомогательное оборудование, материалы и реактивы - по
ГОСТ 31483 (п. 6.1).
Подготовка к испытанию – по ГОСТ 31483 (п. 6.2).
Проведение испытания – по ГОСТ 31483 (п. 6.3).
Обработка результатов – по ГОСТ 31483 (п. 6.4).
Содержание витамина С в добавке должно быть от 11,2 до 16,8 г/дм3.

2.6 Количественное содержание гиалуроновой кислоты


Определение количественного содержание гиалуроновой кислоты устанавливают
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии .
Средства измерений, вспомогательное оборудование, материалы и реактивы:
- жидкостный хроматограф с UV-детектором, автоинжектором с охлаждением и
термостатом колонки;
- персональный компьютер с соответствующим программным обеспечением;
- хроматографическая обращеннофазовая колонка Phenomenex Luna (2) C18 100 А
150 х 4,60 мм 5 микрон, с предколонкой Security Guard 4,0 х 3,0мм;
- весы лабораторные аналитические специального (I) класса точности по ГОСТ
ОIML R 76- 1;
- ультразвуковая ванна WiseClean или аналогичная по техническим
характеристикам;
- рН-метр Эксперт-рН с термокомпенсатором и погрешностью электрода не более
0,05 или аналогичный по характеристикам;
- магнитная мешалка Velp или аналогичная;
- стандарт гиалуроновой кислоты с известной активностью (стандарт предприятия
или фармакопейный стандарт);

Страница 10 из 17
Cf Pharma Ltd, 73B, Hebron Industrial Estate, Kilkenny, Ireland
+353 (0) 51 439 010
E-mail: info@cfpharma.ie

МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ


АРТРЕКС ДЖОЙНТ

- вода очищенная, ГФ РФ XIV т. 3, ФС «Вода очищенная. Aqua purificata»;


- ацетонитрил для хроматографии, ГФ РФ XIV т. 1, ОФС «Реактивы.
Индикаторы»;
- ортофосфорная кислота «хч», по ГОСТ 6552;
- триэтиламин, «чда», ГФ РФ XIV т. 1, ОФС «Реактивы. Индикаторы»;
- спирт этиловый, ГФ РФ XIV т. 3, ФС «Спирт этиловый 95 %, 96 %».
- мерный стакан вместимостью 1000 мл по ГОСТ 1770;
- колба мерная вместимостью 1000 мл по ГОСТ 1770;
- колба мерная вместимостью 50 мл по ГОСТ 1770;
- колба мерная вместимостью 10 мл по ГОСТ 1770;
- пипетки градуированные лабораторные стеклянные по ГОСТ 29227;
- фильтры шприцевые одноразовые PTFE d=0,45 мкм;
- шприцы медицинские одноразовые;
Подготовка к испытанию:
Приготовление буферного раствора.
В стакан на 1000 мл вносят 900 мл воды очищенной, на магнитной мешалке
растворяют 10 мл триэтиламина и доводят рН до 2,5±0,05 ортофосфорной кислотой. В
мерную колбу на 1000 мл количественно переносят приготовленный буфер и доводят
водой очищенной до метки. Срок годности буферного раствора 3 суток.
Приготовление подвижной фазы.
В мерную колбу на 1000 мл количественно вносят 800 мл буферного раствора, до
метки доводят ацетонитрилом, после чего подвижную фазу фильтруют и дегазируют на
УЗ ванне в течение 10 мин. Полученный раствор используют для хроматографии. Срок
годности подвижной фазы 3 суток.
Приготовление стандартного раствора гиалуроновой кислоты.
Стандартный раствор готовят в двух экземплярах непосредственно перед анализом.
В мерной колбе на 50 мл взвешивают стандарт гиалуроновой кислоты массой
около 37 мг с точностью до 4-го знака. В колбу добавляют 35 мл подвижной фазы,
помещают на УЗ ванну до полного растворения стандарта, доводят до метки тем же
Страница 11 из 17
Cf Pharma Ltd, 73B, Hebron Industrial Estate, Kilkenny, Ireland
+353 (0) 51 439 010
E-mail: info@cfpharma.ie

МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ


АРТРЕКС ДЖОЙНТ

растворителем. Аликвоту 1 мл количественно переносят в мерную колбу объёмом 10 мл,


до метки доводят подвижной фазой и тщательно перемешивают. Полученный раствор с
концентрацией гиалуроновой кислоты ~ 74 мкг/мл с помощью шприца фильтруют через
фильтр 0,45 мкм и используют для анализа.
Пригодность хроматографической системы.
Результаты анализа считаются достоверными, если выполняются следующие
требования:
- число теоретических тарелок, рассчитанное для пика гиалуроновой кислоты
должно быть не менее 5000
- RSD рассчитанное для площади пика гиалуроновой кислоты не должно
превышать 2 %, для расчёта RSD используют данные не менее четырех хроматограмм
раствора стандартов;
- коэффициент разделения с ближайшим пиком не должен быть менее 2;
- коэффициент асимметрии пика гиалуроновой кислоты, рассчитанный из
хроматограмм раствора стандартов должен быть не более 1,5;
- соотношение коэффициентов отклика первого экземпляра стандартного раствора
и второго экземпляра стандартного раствора, приготовленных по п. 7.4.2.6 - 7.4.2.8,
должно находиться в пределах от 98 % до 102 % при расчете с помощью следующего
уравнения:
S ст1∗mст 2
∗100 %
S ст2∗mст 1
где:
Sст1 – средняя площадь пика стандартного раствора первого экземпляра,
измеренная исходя из минимум четырех повторных введений стандарта в
хроматографическую систему;
Sст2 – средняя площадь пика стандартного раствора второго экземпляра,
измеренная исходя из минимум двух повторных введений стандарта в
хроматографическую систему;
mст1 – масса навески стандарта первого экземпляра, мг;
Страница 12 из 17
Cf Pharma Ltd, 73B, Hebron Industrial Estate, Kilkenny, Ireland
+353 (0) 51 439 010
E-mail: info@cfpharma.ie

МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ


АРТРЕКС ДЖОЙНТ

mст2 – масса навески стандарта второго экземпляра, мг.


Приготовление раствора препарата «Артрекс Джойнт».
Раствор препарата «Артрекс Джойнт» готовят в двух экземплярах
непосредственно перед анализом.
В мерной колбе на 50 мл взвешивают с точностью до 4-го знака 1 мл препарата
«Артрекс Джойнт». В колбу добавляют 40 мл подвижной фазы, тщательно перемешивают
и помещают на УЗ ванну на 15 минут. Доводят до метки тем же растворителем и еще раз
тщательно перемешивают. Полученный раствор с концентрацией гиалуроновой кислоты ~
74 мкг/мл, с помощью шприца фильтруют через фильтр 0,45 мкм и используют для
анализа.
Условия хроматографирования:
- подвижную фазу используют свежеприготовленной, в соответствии с
пунктом 7.3.2.5;
колонка: Luna C18(2) 100А 150х4,60мм 5 мкм;
предколонка: Security Guard 4,0 х 3,0 мм;
режим элюирования: изократический;
элюент: 100% ACN / 1% TЭA pH 2,5 (Н3РО4)
20/80;
скорость потока элюента: 1,000 мл/мин;
температура автоинжектора: 4оС
длина волны детектора: 215
объём инжекции: 10 мкл;
температура колонки: 30оС;
ожидаемое время выхода: гиалуроновой кислоты~ 4,5 мин.,
продолжительность анализа: 15 мин.
Разведения растворов стандартов и образцов, возможно, изменять обоюдократно в
зависимости от чувствительности прибора, при условии соблюдения критериев
пригодности системы.
Проведение анализа.
Страница 13 из 17
Cf Pharma Ltd, 73B, Hebron Industrial Estate, Kilkenny, Ireland
+353 (0) 51 439 010
E-mail: info@cfpharma.ie

МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ


АРТРЕКС ДЖОЙНТ

В уравновешенную хроматографическую систему вводят последовательно:


подвижную фазу;
- не менее четырех повторных введений стандартов первого экземпляра;
- не менее двух повторных введений стандартов второго экземпляра;
не менее двух повторных введений раствора «Артрекс Джойнт» первого
экземпляра;
не менее двух повторных введений раствора «Артрекс Джойнт» второго
экземпляра.
Обсчёт результатов.
Содержание анализируемого вещества в мг/мл вычисляют по формуле:

S об ∗mст∗A∗Pоб ∗K об
S ст∗mоб∗K ст
где:
Sоб – средняя площадь пика образца;
Sст – средняя площадь пика стандарта;
mоб – масса навески образца, мг;
mст – масса навески стандарта, мг;
А – активность стандарта, мг/г;
Pоб – плотность образца, г/см3;
Коб – коэффициент разведения образца;
Кст – коэффициент разведения стандарта.
За окончательный результат анализа принимают среднее арифметическое не менее
двух параллельных определений, рассчитанных по двум стандартным растворам,
удовлетворяющим критериям пригодности системы по п. 7.5.2.7. Относительное
стандартное отклонение среднего результата не должно превышать 5 % при
доверительной вероятности Р=0,95 ГФ РФ XIV т. 1, ОФС «Статистическая обработка
результатов химического эксперимента».

Страница 14 из 17
Cf Pharma Ltd, 73B, Hebron Industrial Estate, Kilkenny, Ireland
+353 (0) 51 439 010
E-mail: info@cfpharma.ie

МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ


АРТРЕКС ДЖОЙНТ

В 1 мл препарата «Артрекс Джойнт» должно содержаться от 2,952 до 4,428 мг


гиалуроновой кислоты.

2.7 Количественное содержание омега-3 жирных кислот


Определение проводят методом ГЖХ по ГОСТ 30418.
Средства измерений, вспомогательное оборудование, материалы и реактивы - по
ГОСТ 30418 (п. 4).
Подготовка к испытанию – по ГОСТ 30418 (п. 5).
Проведение испытания – по ГОСТ 30418 (п. 6).
Обработка результатов – по ГОСТ 30418 (п. 7).
Содержание омега-3 жирных кислот в добавке должно быть от 15,0 до 22,5 г/дм3

2.8 Наличие патогенной микрофлоры.


Испытание на наличие бактерий рода Salmonella проводят в соответствии с ГОСТ
31659.
Испытание на наличие бактерий группы кишечной палочки (E. coli) проводят в
соответствии с ГОСТ ISO 16649-2.
Количество бактерий группы кишечной палочки в не должно превышать 101 КОЕ/г.
Бактерии рода Salmonella должны отсутствовать в 25 г готового продукта.
Содержание патогенной микрофлоры проверяют периодически, но не реже одного
раза в полгода.
3. Нормативные ссылки
В настоящем документе использованы ссылки на следующие стандарты и
классификаторы:

ГОСТ 1770-74 Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки,


колбы, пробирки. Общие технические условия.
ГОСТ 4204-77 Реактивы. Кислота серная. Технические условия.
ГОСТ 5962-2013 Спирт этиловый ректификованный из пищевого сырья.

Страница 15 из 17
Cf Pharma Ltd, 73B, Hebron Industrial Estate, Kilkenny, Ireland
+353 (0) 51 439 010
E-mail: info@cfpharma.ie

МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ


АРТРЕКС ДЖОЙНТ

Технические условия.
ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия.
ГОСТ 8429-77 Бура. Технические условия.
ГОСТ ISO Микробиология пищевой продукции и кормов.
16649-2-2015 Горизонтальный метод подсчета бета-глюкуронидаза-
положительных Escherichia coli (кишечная палочка). Часть 2.
Методика подсчета колоний при температуре 44 °С с
применением 5-бром-4-хлор-3-индолил бета-D-глюкуронида
ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы,
основные параметры и размеры.
ГОСТ 29227-91 Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные.
Часть 1. Общие требования.
ГОСТ 30418-96 Масла растительные. Метод определения жирнокислотного
состава.
ГОСТ 31483-2012 Премиксы. Определение содержания витаминов: В1
(тиаминхлорида), В2 (рибофлавина), В3 (пантотеновой
кислоты), В5 (никотиновой кислоты и никотинамида), В6
(пиридоксина), Вс (фолиевой кислоты), С (аскорбиновой
кислоты) методом капиллярного электрофореза.
ГОСТ 31659-2012 Продукты пищевые. Метод выявления бактерий рода
(ISO 6579:2002) Salmonella
ГОСТ 32343-2013 Корма, комбикорма. Определение содержания кальция, меди,
железа, магния, марганца, калия, натрия и цинка методом
атомно-абсорбционной спектрометрии.
ГОСТ Р 53228-2008 Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и
технические требования. Испытания.
ГОСТ Р 56372-2015 Комбикорма, концентраты и премиксы. Определение массовой
доли железа, марганца, кобальта, меди, молибдена и селена
методом атомно-абсорбционной спектрометрии.
Единые ветеринарные (ветеринарно-санитарные) требования, предъявляемые к
товарам, подлежащим ветеринарному контролю (надзору) (Утверждены решением
комиссии таможенного союза от 18 июня 2010 года № 317)
Ветеринарно-санитарные нормы и требования к качеству кормов для
непродуктивных животных. Утверждены указанием Департамента ветеринарии
Минсельхозпрода РФ 15 июля 1997 г. N 13-7-2/1010
Страница 16 из 17
Cf Pharma Ltd, 73B, Hebron Industrial Estate, Kilkenny, Ireland
+353 (0) 51 439 010
E-mail: info@cfpharma.ie

МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ


АРТРЕКС ДЖОЙНТ

Страница 17 из 17