Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
жены отдельно, что свидетельствует о существенных сигналов зеленых лягушек требует увеличения объема
различиях в акустической структуре брачных криков данных.
географически отдаленных популяций одного вида На графике дискриминантного анализа (рис. 2)
лягушек. Таким образом, приведенные данные указы- видно, что съедобная лягушка по основным акустичес-
вают, вероятно, на отсутствие географической измен- ким параметрам занимает промежуточное положение
чивости параметров звуковых у прудовой лягушки, между родительскими видами, т. е. наследование при-
и довольно значительную географическую изменчи- знаков звуковых сигналов съедобной лягушки проис-
вость звуков озерной лягушки. Однако, окончательное ходит, видимо, по принципу, сходному с наследовани-
решение вопроса об изменчивости характера звуковых ем морфологических признаков.
Таблица 2.
Результаты пошагового дискриминантного анализа параметров звуковых сигналов
озерной (R��. ridibunda),
��������� прудовой (R��. lessonae)
�������� и съедобной (R��. esculenta)
��������� лягушек
Факторные нагрузки
Признак
Функция 1 Функция 2 Функция 3 Функция 4
Длительность 0,13 0,05 -0,57 -0,65
Доминантная частота начала -0,11 0,06 0,30 -0,66
Максимальная доминантная частота -0,07 0,01 0,09 -0,64
Количество пульсов 0,60 0,36 -0,37 -0,40
Длительность/количество пульсов -0,62 0,22 -0,62 -0,38
Интервал между пульсами -0,64 0,28 -0,49 0,14
X –����
2
тест 357,36 174,49 67,96 26,80
Степени свободы 24 15 8 3
Доля объясненной дисперсии 72,91 11,26 1,63 0,88
В связи с вышеизложенным, можно сделать вывод, 3. Лада Г. А. Среднеевропейские зелёные лягушки (гиб-
что особенности звуковой сигнализации являются хо- ридогенный комплекс Rana���������� esculenta): введение в про-
���������
рошим диагностическим признаком. Спектральные блему // Флора и фауна Черноземья. Тамбов��������� : Изд����
�������
-���
во�
характеристики звукового сигнала специфичны для Тамбовского�������������������������������������
университета������������������������
������������������������������������
, 1995. ���������������
����������������
. 88–109.
каждого из трёх видов зеленых лягушек и обнаружива- 4. Berger L. Embrional and larval development of F1 gen-
емые различия являются в большинстве случаев ста- eration of green frogs different combinations // Acta zool.
тистически достоверными. Анализ временных и часто- С��������������������������������������
racov. 1967. Vol. 12. № 7. P. 123–160.
тных параметров брачных криков представляет собой 5. Berger L. Morphology of the F1 generation of various
точный и удобный способ идентификации видов Rana� crosses within Rana esculenta-complex // Acta zool.
esculenta-комплекс. Таким образом, проведенные нами С����������������������������������������
racov. 1968. Vol. 13. № 13. P. 301–324.
исследования указывают на перспективность исполь- 6. Lode T. Character convergence in advertisement call and
зования биоакустического метода при изучении видов mate choice in two genetically distinct water frog hybri-
зеленых лягушек. dogenetic lineages (Rana kl. esculenta, Rana kl. grafi) //
J. Zool. Syst. Evol. 2001. № 39. С��������
���������
. 91–96.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 7. Roesli M., Reyer H.-U. Male vocalization and female choice
1. Боркин Л. Я., Даревский И. С. Сетчатое (гибридоген- in the hybridogenetic Rana lessonae/Rana esculenta com-
ное) видообразование у позвоночных // Журн. общ. plex // Animal behaviour. 2000. № 60. P. 745–755.
биол. 1980. Т. 41. № 4. С. 485–506. 8. Tunner H. G. Die Klonale Struktur einer Wasserfrösch-
2. Кузьмин С. Л. Земноводные бывшего СССР. М.: Това- population // Z. zool. Syst.������ und
��������������������������
Evolut.-forsch. 1974.
рищество научных изданий КМК, 1999. 298 с. Bd. 12. № 4. S����������
�����������
. 309–314.
УДК 612.015
ВЫДЕЛЕНИЕ ПЕПТИДНЫХ ФРАКЦИЙ СЫВОРОТКИ КРОВИ
БОЛЬНЫХ АЛКОГОЛИЗМОМ И ИССЛЕДОВАНИЕ ИХ ВЛИЯНИЯ
НА АКТИВНОСТЬ ОСНОВНЫХ КАРБОКСИПЕПТИДАЗ
А. К. КОРНЕВА, А. Г. БОБЫЛЁВ, А. В. КУЗНЕЦОВА, А. А. ВИНОГРАДОВА, М. Т. ГЕНГИН
Пензенский государственный педагогический университет им. В. Г. Белинского
кафедра биохимии
Из сыворотки крови здоровых людей и больных алкоголизмом выделены пептидные фракции. Были использованы
два метода – осаждение белков при кипячении (�����������������������������������������������������������
t����������������������������������������������������������
-МСМ) и при добавлении трихлоруксусной кислоты (ТХУ-МСМ).
181
ÈÇÂÅÑÒÈß ÏÃÏÓ Ñåêòîð ìîëîäûõ ó÷åíûõ ¹ 6 (10) 2008 ã.
Обнаружено, что выделенные пептидные фракции сыворотки крови влияют на активность основных карбоксипеп-
тидаз, карбоксипептидазы Н и ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы, участвующих в регуляции биосинтеза
активных пептидов.
Традиционно критерием состояния организма яв- Уровень содержания пептидов во фракциях ТХУ-
ляется баланс протеиназной системы сыворотки крови. МСМ и ���������������������������������������
t��������������������������������������
-МСМ определяли спектрофотометрически
При патологических состояниях, связанных с воспали- (СФ-2000). Индекс интоксикации (ИИ) А280/А260
тельными процессами, этот баланс нарушается, вследс- рассчитывали аналогично [6].
твие чего в крови изменяется соотношение белков и
Определение активности карбоксипептидаз
пептидов [1, 11]. Показано, что изменение содержания
пептидов в сыворотке крови может служить маркером Активность ферментов определяли по расщепле-
воспаления [10]. В настоящее время активно исследу- нию флуорогенных субстратов: для карбоксипептида-
ются функции пептидов сыворотки крови у здоровых зы Н – дансил-�����������������������������������
Phe��������������������������������
-�������������������������������
Ala����������������������������
-���������������������������
Arg������������������������
, селективный ингибитор
людей и при различных заболеваниях [13, 14]. гуанидиноэтилмеркаптоянтарная кислота (��������
GEMSA���),
Целью настоящей работы было получить пеп- для ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы дан-
тидные фракции сыворотки крови здоровых людей и сил-�������������������������������������������
Phe����������������������������������������
-���������������������������������������
Leu������������������������������������
-�����������������������������������
Arg��������������������������������
, селективный ингибитор фенилме-
больных алкоголизмом и исследовать их влияние на тилсульфонилфторид.
В качестве источника КП Н использовали 1 %-ный
активность протеолитических ферментов – карбокси-
гомогенат мозга крысы, в качестве источника ФМСФ
пептидазы Н и ФМСФ-ингибируемой карбоксипеп-
КП использовали 1 % гомогенат печени крысы.
тидазы.
Для экстракции продукта реакции в пробы добав-
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ляли хлороформ и после отделения хлороформной
фазы и измеряли флюоресценцию на флюориметре
Клинические группы
ФМ-Ц-2 (λex 360 нм, λem 530 нм).
Исследована сыворотка крови 65 больных алкого-
лизмом в возрасте от 25 до 55 лет, госпитализирован- Определение влияния пептидных фракций сыво-
ных в отделение неотложной наркологической помо- ротки крови на активность карбоксипептидаз
щи (ОННП) Областной наркологической больницы Для определения влияния фракции МСМ на ак-
г. Пензы. Контрольную группу составили 6 клиничес- тивность ферментов к 150 мкл 50 мМ натрий-аце-
ки здоровых людей. татного буфера, рН 5,6 прибавляли 20 мкл фракции
Группа 1 – больные алкоголизмом с клинически- МСМ. В случае контрольной пробы 140 мкл буфер-
ми проявлениями металкогольных психозов (алко- ного раствора и 20 мкл фракции МСМ смешивали с
гольного делирия (АД)). 10 мкл селективного ингибитора (25 мкМ водного
Группа 2 – больные алкоголизмом с выраженны- раствора ��������������������������������������
GEMSA���������������������������������
в случае КП Н и 25 мМ спиртовой
ми симптомами алкогольно-абстинентного синдрома раствор ФМСФ в случае ФМСФ-КП).
(ААС). Аликвоту пептидной фракции сыворотки крови
Группа 3 – больные хроническим алкоголизмом с добавляли к ферменту (1%-ному гомогената ткани
выраженными соматическими проявлениями (обост- (мозга в случае КПН и печени в случае ФМСФ-КП)),
рение хронических заболеваний, гепатоз, гепатит, ми- и пробы преинкубировали 8 минут при 37˚С. Реакцию
окардиопатия). начинали прибавлением раствора субстрата (��������
Dns�����
-����
Phe�-
Группа 4 – больные, прошедшие курс комплекс- Ala����������������������������������������������
-���������������������������������������������
Arg������������������������������������������
в случае КП Н и Dns����������������������
�������������������������
-���������������������
Phe������������������
-�����������������
Leu��������������
-�������������
Arg����������
в случае
ной терапии (инфузионная, антиседативные препара- ФМСФ-КП) и по вышеуказанным методикам опре-
ты, витамины, ноотропы, гепатопротекторы). деляли остаточную активность карбоксипептидаз как
Контроль – группа клинически здоровых людей. разность флюоресценции в пробах, содержащих МСМ
и селективные ингибиторы (�����������������
GEMSA������������
или ФМСФ).
Получение пептидных фракций сыворотки крови Влияние фракции МСМ на активность карбокси-
Пептидные фракции сыворотки крови получали пептидаз рассчитывали в процентах по отношению к
двумя методами. активности фермента без фракции МСМ.
1) ТХУ-МСМ. Белки сыворотки крови осажда-
ли при добавлении трихлоруксусной кислоты (ТХУ- РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
МСМ). Конечная концентрация ТХУ в пробе – 7%. Определение индекса интоксикации
Белки отделяли центрифугированием (7000 об/мин, При исследовании уровня МСМ сыворотки кро-
30 мин). Супернатант диализовали против рабоче- ви обычно используется осаждение сывороточных
го буферного раствора (0.05 М ацетат натрия, 0,05 М белков трихлоруксусной кислотой (ТХУ) с последу-
NaCl��������������������������������������������������
, ������������������������������������������������
pH����������������������������������������������
5,6 в течение 3-5 ч.). Изменения объема фрак- ющим определением А280/А260 в надосадочной жид-
ции после диализа не наблюдалось. кости. Этот показатель – индекс интоксикации (ИИ)
2) ��������������������������������������������
t�������������������������������������������
-МСМ. Белки сыворотки крови отделяли после коррелирует с тяжестью интоксикации при различ-
тепловой денатурации. Сыворотку крови, разбавлен- ных патологиях [6].
ную буферным раствором в соотношении 1:1, помеща- Нам представлялось интересным исследовать вли-
ли в кипящую баню на 15 мин. Белковый осадок отде- яние МСМ на активность карбоксипептидаз, но извес-
ляли центрифугированием (4000 об/мин, 15 мин). тно, что ТХУ полностью ингибирует эти ферменты.
182
åñòåñòâåííûå íàóêè
ɚ. ɛ.
ɂɧɞɟɤɫ ɢɧɬɨɤɫɢɤɚɰɢɢ t-ɆɋɆ ɂɧɞɟɤɫ ɢɧɬɨɤɫɢɤɚɰɢɢ Ɍɏɍ-ɆɋɆ
0
26
60
/Ⱥ
2
/Ⱥ
80
1,373
80
1,106
Ⱥ2
Ⱥ2
183
ÈÇÂÅÑÒÈß ÏÃÏÓ Ñåêòîð ìîëîäûõ ó÷åíûõ ¹ 6 (10) 2008 ã.
ɚ. ɛ.
ȼɥɢɹɧɢɟ t-ɆɋɆ ɧɚ ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɶ ɎɆɋɎ-Ʉɉ ȼɥɢɹɧɢɟ Ɍɏɍ-ɆɋɆ ɧɚ ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɶ ɎɆɋɎ-Ʉɉ
100 120
90
Ⱥɤɬɢɜɧɨɫɬɶ 100 Ⱥɤɬɢɜɧɨɫɬɶ
Ɉɫɬɚɬɨɱɧɚɹ ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɶ, %
80
Ɉɫɬɚɬɨɱɧɚɹ ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɶ, %
ɎɆɋɎ-Ʉɉ ɜ ɎɆɋɎ-Ʉɉ ɜ
70 ɩɟɱɟɧɢ ɩɟɱɟɧɢ
ɤɪɵɫɵ, % 80 ɤɪɵɫɵ, %
60
50 Ɉɫɬɚɬɨɱɧɚɹ 60 Ɉɫɬɚɬɨɱɧɚɹ
ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɶ ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɶ
40
ɎɆɋɎ-Ʉɉ , 40 ɎɆɋɎ-Ʉɉ,
30 % %
20 20
10
0 0
ɪɨɥ
ɶ 2 ɩɚ 3 ɩɚ 4 ɥɶ 2 3 4
ɨɧɬ ɩɚ 1ɢ
ɝɪɭɩ ɝɪɭɩ ɬɪɨ 1ɢ ɩɩɚ ɩɩɚ
ɤ ɝɪɭɩ ɤɨɧ ɩɩɚ ɝɪɭ ɝɪɭ
ɝɪɭ
ɚ. ɛ.
ȼɥɢɹɧɢɟ t-ɆɋɆɧɚ ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɶ Ʉɉ ɇ. ȼɥɢɹɧɢɟ Ɍɏɍ-ɆɋɆ ɧɚ ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɶ Ʉɉ ɇ.
147,8 189,9
160
200
Ɉɫɬɚɬɨɱɧɚɹ ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɶ Ʉɉ ɇ, %
Ɉɫɬɚɬɨɱɧɚɹ ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɶ Ʉɉ ɇ, %
140 180
120 100 160 129,9
140
100 100
120
80 100
52,2
60 80
29,7 60
40
40
20 20
0 0
ɦɨɡɝ ɤɪɵɫɵ ɤɨɧɬɪɨɥɶ (ɡɞɨɪɨɜɵɟ) ɝɪɭɩɩɚ 1 ɝɪɭɩɩɚ 2 ɦɨɡɝ ɤɪɵɫɵ ɤɨɧɬɪɨɥɶ (ɡɞɨɪɨɜɵɟ) ɝɪɭɩɩɚ 4
184
åñòåñòâåííûå íàóêè
УДК 612.015
ВЛИЯНИЕ ПРОИЗВОДНЫХ АДАМАНТАНА
НА СЕРОТОНИН - ИНДУЦИРУЕМУЮ АГРЕГАЦИЮ
ТРОМБОЦИТОВ ЧЕЛОВЕКА in������
vitro
�����
А. К. КОРНЕВА*, В. А. ЕРМОХИН**, Н. А. КЛЁНОВА***
*Пензенский государственный педагогический университет им. В. Г. Белинского
кафедра биохимии
**Самарский государственный университет
кафедра органической химии
*** Самарский государственный университет
кафедра биохимии
В результате проведённого эксперимента выявлено, что синтезированные в химической лаборатории кафедры ор-
ганической химии СамГУ адамантоиламинопиридины проявляют разнонаправленное действие на серотонин – ин-
дуцированную агрегацию тромбоцитов человека in�
����������
vitro��
�������.
Агрегирующая и вазоконстрикторная активность ти тромбоцитов и эндотелия сосудов [6]. Рецепторы
серотонина (5 - гидрокситриптамина) проявляется че- семейства 5-НТ способны к неспецифическому взаи-
рез его связывание с 5-НТ2 рецепторами на поверхнос- модействию с веществами, имеющими в своей струк-
185