Лекция 9. Этот вариант распечатан .

Биофизика сократительных систем. Молекулярные основы биологической подвижности.

МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МОТОРЫ.

Основные типы сократительных и подвижных систем. Немышечные формы подвижности

клеток. Молекулярные механизмы немышечной подвижности . Структура и функционирование
поперечнополосатой мышцы позвоночных. Молекулярные механизмы подвижности белковых
компонентов сократительного аппарата мышц. Принципы преобразования энергии в
механохимических системах.

Движение одноклеточных и многоклеточных организмов в пространстве, движение

органоидов и других компонентов внутри клетки осуществляется за счет работы специфических
механохимических преобразователей энергии, т.н. молекулярных моторов. В настоящее время
известны два типа таких двигателей, использующих энергию различных источников:
потребляющие энергию переноса ионов и потребляющие энергию АТФ. К первому типу относятся
флагеллярные моторы, которые обеспечивают движение бактерий и протонные АТР-синтазы. Оба
эти двигателя содержат вращающиеся детали и движущей силой для их функционирования
является энергия разности концентрации ионов водорода на мембране (электрохимический
потенциал). Ко второму типу молекулярных моторов относятся белки актомиозинового комплекса
мышечных клеток, комплекс двигательных белков одноклеточных эукариот, белок кинезин и другие
двигательные белки, выполняющие функции переносчиков органоидов (митохондрий, лизосом и др.).
Ниже будут рассмотрены механизмы генерации и реализации движения у прокариот, у
одноклеточных эукариот, у многоклеточных организмов. Также будут приведены сведения о
механизме осуществления движения внутриклеточных структур.
Движение прокариотических клеток
Движение бактерий в пространстве происходит за счет вращения специальных образований
на мембране - жгутиков. Жгутик представляет собой нитевидный вырост с поверхности бактерии.
Жгутик состоит филамента, крюка и базального тела. Филамент образован полимерным белком
флагеллином. Мономером флагеллина является глобулярный белок с молекулярной массой около 53
кД и диаметорм глобулы около 4,5 нм. Филамент состоит из нескольких флагеллиновых тяжей,
закрученных в левую спираль. Крюк жгутика служит связкой между филаментом и базальным
телом. Он состоит из белковых глобул. Базальное тело представляет собой сложную структуру,
ответственную за генерацию движения. Он представляет собой комплекс белковых молекул и
мембранных липидов (Рис. 1). Движение бактериальной клетки осуществляется за счет быстрого
вращения жгутика (жгутиков). Электромоторы бактерий работают очень эффективно и экономично.
Скорость вращения жгутика доходит до 50-100 оборотов в секунду ( у некоторых видов бактерий
скорость вращения превышает 1000 об/с.). При этом на генерацию движения расходуется не более
1% энергетических ресурсов бактериальной клетки. В жидкой среде бактерии двигаются со средней
скоростью около 25 мкм/с, а некоторые виды могут двигаться поступательно со скоростью больше
100 мкм/с.
Механизмы генерации движения бактериальной клетки рассмотрим на примере Е. сoli. Из тела
бактерии наружу выступают шесть жгутиков, каждый из которых представляет собой спира-
левидную нить диаметром 15 нм и длиной 10 мкм. Когда жгутики начинают синхронно вращаться
против часовой стрелки, они сплетаются в единый пучок, который образует своеобразный пропеллер
(рис 1, А). Вращение пропеллера создает силу, заставляющую бактерию двигаться почти по прямой
линии. Для прекращения движения в данном направлении, жгутики начинают вращаться в
противоположную сторону, пучок расплетается, и бактерия останавливается. Она начинает
хаотически вращаться, ее ориентация изменяется. В тот момент, когда все жгутики бактерии снова
начнут синхронно вращаться против часовой стрелки, образовав пропеллер, толкающий бактерию,
направление ее поступательного движения будет отличаться от первоначального. Таким способом
бактерия может изменять направление своего движения. Электромоторы бактерий являются
устройствами, которые в качестве источника энергии используют разность протонных потенциалов
на цитоплазматической мембране. Мотор состоит из ротора, статора и некоторых вспомогательных
белковых субъединиц, выполняющих роль подшипника, внутри которого вращается стержень
ротора.
 Рис. 1. А - схематическое изображение электромотора, вращающего жгутики бактерий. Центры
двух соосных дисхов (М и S) соединены с вращающимся стержнем, выступающим наружу. На
периферии диска М находятся моторные белки Mot В. Белки Mot А встроены в мембрану и
примыкают к краям дисков М и S;
Б - схема возможного расположения субъединиц Mot А и Mot В, образующих каналы, через
которые протоны из периплазматического пространства переносятся в цитоплазму бактериальной
клетки Вращающий момент, вызывающий поворот ротора мотора, возникает за счет взаимодействия
субъединиц Mot В с белковыми субъединицами Mot A, расположенными на статоре электромотора

Подвижными узлами бактериального электромотора являются два соосных диска (называемые М- и

S-дисками), центры которых соединены с вращающимся стержнем, выступающим наружу. На пери-
ферии диска М находятся многочисленные копии белка, названного Mot В. Несколько копий белка
Mot А, входящего в состав статора, встроены в мембрану и примыкают к краям дисков М и S. Меха-
низм генерации силы, приводящей ротор во вращение, по-видимому, имеет ту же природу, что и в
случае АТР-синтазы. Вращающий момент возникает за счет взаимодействия субъединиц Mot В с
белковыми субъединицами Mot А, расположенными на статоре электромотора. Считается, что в
состав субъединицы Mot А входят два несоосных протонных полуканала. Подобно протонному
каналу АТРФ-синтазы, путь переноса протонов через мембрану проходит через протонные
полуканалы субъединиц Mot A и Mot В. В результате переноса протонов через белки Mot А и Mot В,
направленного внутрь бактериальной клетки, происходит вращение ротора. Один полный оборот
ротора связан с переходом через мембрану около 1000 протонов.
Рассмотренными примерами не ограничивается все разнообразие вращающихся моторов, которые
встречаются в природе. Существуют бактерии, у которых АТФ-синтазы используют энергию не
протонного, а натриевого потенциала.

Движение эукариотических клеток

Перемещение одноклеточных эукариот в пространстве определяется развитой сетью белковых

филаментов цитоплазмы, которые образуют опорно-двигательный аппарат клетки ( цитоскелет).
Эти белковые филаменты условно можно разделить на три типа: микрофиламенты (d ~ 5 нм),
промежуточные филаменты (d ~ 10 нм), микротрубочки (d ~ 25 нм).
Микрофиламенты представляют собой полимерные белковые тяжи, мономером которых
являются глобулярные белки. Основным компонентом этих структур является белок актин с м.м.
42 кДа. С актиновыми филаментами могут взаимодействовать другие белки, например миозин. У
экуритотических клетках обнаруживаются протофибриллы длиной до 300 нм, мономером которых

2
являются миозиновые молекулы. Такие протофибриллы взаимодействуют с актиновыми
микрофиламентами при генерации амебоидного движения. В циоскелете обнаружен также
немышечный тропомиозин, филамин, α –актинин. Они участвуют в образовании гибких связей
между микрофиламентами, в результате чего формируется трехмерная сетчатая структура
цитоскелета.
Промежуточные филаменты цитоскелета выполняют главным образом структурную функцию
и представляют собой полимерные белки. В различных типах эукариотических клеток обнаружены
промежуточные филаменты, состоящие из разных белковых молекул. Например, эпителиальные
клетки содержат кератиновые филаменты, которые состоят из креатиподобных белков с м.м. от 40 до
65 кДа. Нейроны содержат нейрофиламенты, состоящие из трех типов белков с м.м. 68, 145, 220
кДа. В фибробластах промежуточные филаменты построены из белка виментина с м.м. 55 кДа.
Микротрубочки- основные сократительные элементы ресничек и жгутиков одноклеточных
эукариот. Они представляют собой полые цилиндры с наружным диаметром около 25 нм,
внутренним- 15 нм. Длина микротрубочек может составлять несколько микрометров.
Микротрубочки состоят из димерного белка тубулина с м.м. 110 кД. Каждый димер включает две
молекулы глобулярных белков: α –тубулина и β -тубулина с м.м. каждой глобулы 55 кД. При
соответствующих условиях мономеры тубулина полимеризуются, образуя длинные полимерные
структуры. Сначала образуется димерная молекула, а затем α –тубулин одного димера соеденяется с
β –тубулином другого димера, образуя длинные тяжи – протофибриллы. Несколько протофибрил
объединяются, сворачиваются , образуя замкнутые и незамкнутые цилиндры. Например,
субфибрилла А жгутика эукариот является замкнутой микротрубочкой, состоящим из 13
протофибрилл. Незамкнутые микротрубочки (субфибрилла В) состоят из 10 протофибриллярных
тяжей.
Микротрубочки и филаменты образуют в клетках эукариот динамическую взаимосвязанную сеть,
которая находится под контролем клетки и обеспечивает изменение ее формы, различные виды
клеточной подвижности и внутриклеточный транспорт веществ.
Создаваемое этими структурами движение одноклеточных эукариот и некоторых клеток
многоклеточных организмов в пространстве, реализуется в основном двумя способами: при помощи
ресничек и жгутиков или амебоидным способом.
Движение при помощи ресничек и жгутиков – наиболее распространенная форма подвижности
одноклеточных организмов в жидкой среде. Реснички и жгутики это белковые образования
диаметром до 250 нм , длина их может достигать нескольких микрометров. Генерация движения в
этих образованьях осуществляется комплексом, состоящим из микротрубочек и вспомогательных
белков. Ультраструктура ресничек и жгутиков у различных типов клеток в основном сходна, однако,
по способу движения они различаются. Например, жгутик спермотозоонов и многих простейших
производит волнообразные движения, по всей длине жгутика распространяются симметричные
волны изгибания в направлении от базальной части к вершине жгутика. В отличие от жгутика,
ресничка совершает гребные движения. Цикл движения реснички длится 0,1-0,2 с и состоит из фазы
упругого удара и возвратного удара. При упругом ударе ресничка в выпрямленном состоянии
проталкивает жидкость вдоль поверхности клетки. При возвратном ударе ресничка расслабляется и,
изгибаясь, возвращается в исходное положение. Движение осуществляется за счет синхронной
работы многочисленных ресничек на поверхности клетки. По механизму движения такую клетку
можно сравнить с лодкой с многовесельным экипажем.
Генерация движения ресничек и жгутиков происходит в аксонеме. Аксонема находится у
основания жгутика и представлена она комплексом взаимосвязанных микротрубочек и отдельных
белковых молекул(рис. 2). В центре аксонемы располагаются две микротрубочки, окруженные
центральной оболочкой. На периферии находится 9 пар микротрубочек, соединеных между собой
поперечными нексиновыми мостиками (белок нексин с м.м. 165 кДа). Каждая периферическая пара
состоит из двух типов микротрубочек А и В. Субфибрилла А представляет собой полый цилиндр, а
микротрубочка В имеет серповидную (незамкнутую) форму и открытой частью примыкает к
субфибрилле А. Каждая субфибрилла А имеет двойной ряд боковых динеиновых ручек длиной около
14 нм (белок динеин с м.м. 400 кДа). Из субфибриллы А в сторону центральной части выступают
радиальные спицы. Все эти белковые структуры расположены вдоль периферических субфибрилл
через определенный интервалы: динеиновые ручки – через 24 нм, радиальные спицы – через 29 нм,
нексиновые мостики- через 86 нм.

3
 Рис.2. Схематичное изображение строения аксонемы жгутика эукариотических клеток.

а - продольный срез; б- поперечный срез

1 –центральные микротрубочки; центральная оболочка; 3 – динеиновые ручки; 4-
радиальные спицы; 5 - субфибрилла А; 6 - субфибрилла Б; 7- нексиновые мостики; 8 –
плазмалемма.

Аксонема генерирует движение жгутика за счет активного скольжения периферических

микротрубочек относительно центрального дублета. Для движения используется энергия АТФ.
Скольжение микротрубочек происходит за счет изменения конформации динеиновых ручек, которые
обладают АТФ-азной активностью. Нексиновые ручки закрепляют периферические субфибриллы
друг другу и поэтому они смещаются как единое целое относительно центральной части аксонемы.
Так как основание жгутика (реснички) закреплено на мембране, скольжение микротрубочек
приводит к изгибанию хвостовой части. Показано, что причиной одной из форм бесплодия человека
является неподвижность сперматозоидов, из-за отсутствия динеиновых ручек в аксонеме.
Амебоидное движение характерно для амеб и некоторых типов клеток животных тканей,
например, фагоцитов, фибробластов. Этот тип движения возможно только при перемещении по
плотной поверхности. Оно связано с изменением структуры (состояния) цитоплазмы, называемое
как переходы гель ↔ золь, которое обусловлено полимеризацией и деполимеризацией актиновых
филаментов. Жидкое состояние цитоплазмы (золь) перетекает из центральной части клетки на
периферию, образуя выросты – псевдоподии. Закрепление псевдоподии на субстрате происходит при
полимеризации актина, образовании микрофиламентов и их сшивка (состояние геля). При
взаимодействии микрофиламентов, прикрепленных к мембране, с миозином происходит их
скольжение, в результате чего мембрана сдвигается и образует псевдоподии. Этот процесс
происходит с участием ионов Са 2+ и требует затраты энергии АТФ. Переход из состояния гель в
состояние золь происходит самопроизвольно и обуславливается деполимеризация актиновых нитей.
Таким образом, воснове амебоидного движения лежит циклический процесс полимеризации и
деполимеризации актиновых филаментов.
.
Мышечное движение
Мышечное сокращение является примером работы высокоспециализированной машины,
превращающей энергию химических связей в механическую работу. Мышечная ткань своими
сокращениями создают движение всего тела, конечностей, органов, тканей. По строению и
выполнению функций мышечная ткань разделяется на гладкие, исчерченные (поперечно-полосатые)
и сердечные мышцы. Рассмотрим структуру и механизм работы мышц на примере поперечно-
полосатых мышц.
Мышцы состоят из специализированных клеток – мышечных волокон. Мышечное волокно
представляет собой многоядерную клетку цилиндрической формы диаметром 20 – 80 мкм, длина
может достигать до 100 см и более, например, у крупных млекопитающих. В мышечной ткани
волокна объединены в пучки, по 20 – 50 штук в пучке. Пучки между собой разделены тонкой
оболочкой из соединительной ткани, состоящей из коллагеновых и эластиновых волокон.
Плазматическая мембрана мышечной клетки называют сарколеммой, цитоплазму – саркоплазмой. В
саркоплазме мышечной клетки находится несколько ядер, и другие органоиды (митохондрии,
рибосомы). Кроме того, в саркоплазме располагаются специализированные сократительные

4
структуры мышечной клетки – миофибриллы. Миофибриллы представлены белковыми нитями
диаметром 1-2 мкм, расположенными параллельно друг другу и тянущиеся от одного конца клетки
до другого. В одной клетке их число может составлять до 2000 штук. Миофибрилла представляет из
себя комплекс из толстых и тонких протофибрилл. Высокая упорядоченность расположения этих
структур обуславливает поперечно-полосатую исчерченность мышц, наблюдаемых в электронный
микроскоп. Структурно-функциональными единицами миофибрилл являются саркомеры, которые
располагаются вдоль мышечных волокон через каждые 2 - 3 мкм. Саркомер состоит из параллельных
рядов толстых и тонких нитей. Взаимное расположение толстых и тонких нитей саркомера
схематически показано на рис. 1, а. Вертикальные темные линии Z соответствуют специальным
структурным белкам, разделяющим миофибриллы на саркомеры. Между ними видны
горизонтальные нити сократительного аппарата. От Z-линий отходят тонкие нити, которым на
электронно-микроскопических снимках соответствуют светлые полосы I. В центральной части
саркомера расположены толстые нити, которым соответствуют темные полосы А. В середине
каждой А-полосы видна более светлая полоса Н. Наличие двух темных участков полосы А
определяется тем, что в этих зонах толстые нити перекрываются с тонкими нитями. Соседние
миофибриллы в мышечном волокне располагаются так, что Z-линии находятся на одном уровне.
Более светлая полоса (Н-зона) соответствует участку саркомера, где толстые нити не перекрываются
с тонкими нитями.
Толстые нити, имеющие диаметр 15 нм, состоят в основном из молекул миозина. Тонкие нити
диаметром 9 нм содержат белковые молекулы трех основных типов : актин, тропомиозин и
тропониновый комплекс. При рассмотрении поперечного срез саркомера в области, где соседствуют
толстые и тонкие нити (темный участок полосы А), то можно увидеть, что каждая тонкая нить
окружена тремя толстыми нитями, а каждая толстая нить окружена шестью тонкими нитями (рис. 1,
б)

миозин

Рис. 2. Схематическое изображение миофибрилл мышечного волокна:

а - продольный разрез, б - поперечный разрез в области пересечения толстых и тонких нитей, в -
изменение длины саркомера в результате движения толстых и тонких нитей

5
 Толстые и тонкие нити взаимодействуют друг с другом с помощью поперечных мостиков длиной
около 13 нм, которые через регулярные промежутки выходят из толстых нитей и образуют связи
между соседними толстыми и тонкими нитями.
При сокращении мышцы ее длина может уменьшаться на 40 %. В настоящее время доказано, что
сокращение мышечного волокна достигается за счет движения толстых и тонких нитей
относительно друг друга. Такой механизм мышечного сокращения («модель скользящих нитей» )
был предложен в 50-х годах 20 века( Эндрю Хью Хаксли, Р. Нидергерк и Ж. Хэнсон). В основе этой
модели лежат следующие факты:
• при сокращении мышцы длины толстых и тонких нитей миофибриллы не изменяются;
• происходит укорачивание саркомера счет перекрывания толстых и тонких нитей, которые
скользят друг относительно друга во время сокращения мышцы. Это проявляется в том, что при
сокращении мышцы полосы Н и I укорачиваются (рис. 1, в);
• сила, развиваемая мышцей, создается в процессе движения толстых и тонких нитей
протофибриллы.
Скольжение толстых и тонких нитей друг относительно друга совершается за счет энергии
гидролиза АТФ. АТФ-азная активность миозина была открыта в 1939 году супругами В.А.
Энгельгардтом и М.Н. Любимовой. Ими было также показано, что добавление АТР к белковому
препарату, состоящему из нитей миозина, влияет на его механические свойства. Впоследствии было
показано, в растворе актин и миозин образуют так называемый актомиозиновый комплекс.
Интересно отметить, что свободный миозин слабо гидролизует АТФ, а в присутствии актина его
АТФ-азная активность возрастает до 200 раз.
Миофибриллы мышечных клеток построены из молекул белков, которые составляют около 12 %
сухой массы мышечной клетки. К настоящему времени в составе миофибрилл обнаружены
несколько десятков сократительных белков. Большая часть белков представлена двумя основными
белками: миозином (55 % массы всех белков) и актином (20 %). Другие белки в мышечной клетке
представлены в меньших ( минорных) количествах: тропомиозин (7 %), тропонин (2 %), актинин (10
%) .

6
Рис. 3. Строение толстой (а) и тонкой нити (б) миофибриллы
Основным структурообразующим белком толстых нитей мышечного волокна является миозин.
Эта молекула представляет собой димер, образованный из двух сплетенных друг с другом
одинаковых мономеров миозина (рис. 2, а). Каждый из этих мономеров состоит из одной тяжелой
цепи (230 кДа) и двух легких цепей с молекулярной массой около 20 кДа. На одном конце миозина
полипептидные цепи свернуты в глобулы, и образуют своеобразную "головку" миозина (фрагмент
S1). С помощью более тонкой шейки (фрагмент S2) головки миозина соединяется с длинным
хвостом, который образован протяженной полипептидной цепью, уложенной в виде вытянутой -
спирали.
Хвосты двух мономерных единиц миозина сплетены друг с другом и образуют вытянутый
стержень длиной 170 нм и толщиной 2 нм. Таким образом, миозин скелетных мышц (миозин класса
II) является крупным белком, состоящим из шести полипептидных цепей.
Моторный фрагмент миозина (S1) непосредственно взаимодействует с тонкой актиновой нитью.
Фрагмент S1 включает в себя каталитический центр, с которым связывается молекула АТФ и где
происходит ее гидролиз. В ходе реакции гидролиза АТФ выделяется энергия, за счет которой
работает миозин. Согласно данным Айвэна Рэймента с сотр. (1993) , фрагмент S1 представляет собой
глобулу размером 16,5 х 6,5 х 4 нм. Вращательная подвижность головки миозина обеспечивается за
счет шарниров, которые представляют собой гибкие участки полипептидной цепи. Один из них
находится в месте соединения фрагментов S1 и S2, Другой расположен между фрагментом S2 и
хвостом миозина (рис. 2, я). Наличие молекулярных шарниров дает возможность фрагменту S1
присоединяться и отсоединяться от нити актина, а также изменять свою ориентацию в ходе
сократительного цикла (рис. 3,4). Функционально важным звеном молекулы миозина является ее
регуляторный участок, расположенный в области шейки, соединяющей каталитическую головку с
хвостом молекулы миозина. Шейка образована α-спиралью полипептидной цепи длиной 8—9 нм,
которая окружена двумя легкими полипептидными цепями S2.

7
 В саркомерах поперечнополосатых мышц каждая толстая нить состоит приблизительно из 300
сплетенных димеров миозина. С обоих концов толстой нити выступают многочисленные подвижные
мостики (головки), которые могут связываться с окружающими их тонкими нитями актина (рис. 1, б).
Кроме мизина, в толстой протофибрилле обнаружены минорные белки с м.м. 140 кДа, 64 Кда, 50
кДа. В зоне М-полосы содержится кретикиназа (м.м. 80 кДа), М-белок (м.м. 165 кДа), миомезин
(м.м. 185 кДа).
Тонкие нити мышечных волокон состоят из нескольких белков (рис. 2, б). Основным белком
тонкой протофибриллы является фибриллярный белок F-актин. F-актин представляет собой
полимерный белок, состоящий из мономеров глобулярного белка (G-актин) с диаметром около 6 нм.
Мономер G-актина состоит из 374 остатков аминокислот и имеет молекулярную массу 42 кДа.
Полимеризация G-актина происходит с участием АТФ в присутствии ионов Mg 2+. При этих условиях
мономеры G-акгина, образуя вытянутые линейные полимеры диаметром 6—7 нм, называемые
микрофиламентами. Тонкая протофибрилла образована из двух нитей F-актина, скрученных между
собой с периодом 73-74 нм. Тонкие протофибриллы, с которыми взаимодействуют миозиновые
мостики, содержат еще один фибриллярный белок- тропомиозин (Тм) с м.м. 68 кД и три белка
тропонинового комплекса (ТnС, ТnI и ТnТ). По своей массе они составляют приблизительно треть от
всей массы тонких нитей. Эти белки находятся в составе тонкой протофибриллы в определенном
соотношении: на 7 молекул G-актина приходится по одной молекуле Тм, ТnС, ТnI и ТnТ. Молекула
тропомиозина состоит из двух вытянутых -спиралей длиной около 38 нм. Эти молекулы
располагаются в бороздках спирали актиновой нити и взаймодействуют между собой и белками
тропомиозинового комплекса. Белок ТnТ непосредственно связан с с тропомиозином, а белок ТnI - с
актином. Белок ТпС принадлежит к классу регуляторных белков, называемых кальмодулинами. Этот
белок активируется при его связывании с ионами с четырьмя ионами Са 2+. Кроме этих основных
белков, тонкая нить содержит еще минорные белковые компоненты. На концах тонких протофибрилл
находится белок β-актинин (м.м. 180 кДа), который блокирует дальнейшую полимеризацию F-
актина. Из области Z- диска выделены белки α-актинин, филамин (м.м. 240 кДа), десмин (м.м. 50
кДа),. Эти белки образуют поперечные мостики между актиновыми нитями различных саркомеров и
крепят их к Z- диску.

Механизм мышечного сокращения

В основе мышечного сокращения лежит взаимодействие между тонкими и толстыми
протофибриллами ( актиномиозиновый комплекс), регулируемое ионами Са 2+. Концентрация ионов
Са2+ в саркоплазме клеток покоящейся (расслабленной) мышцы низкая (< 10 -7 М), так как кальциевые
насосы, постоянно перекачивают ионы Са 2+ из саркоплазмы в цистерны эндоплазматического
ретикулюма. Под действием нервного импульса, открываются кальциевые ионные каналы на
мембранах эндоплазматического ретикулюма и ионы Са 2+ по электрохимическому градиенту
выходят в саркоплазму. Связывание 4 –х ионов с ТпС, приводит к запусканию цепи
конформационных превращений других белков тропонинового комплекса актиновой нити, в
результате чего происходит ее связывание с миозиновой головкой.
Тянущая сила, которая вызывает движение молекул миозина вдоль нитей актина, возникает за
счет структурных изменений, происходящих в каталитическом центре миозина после гидролиза
молекулы АТФ. Механизм работы миозина можно сравнить с функционированием механического
устройства, в котором головка и шейка миозинового мостика выполняют роль своеобразного рычага,
позволяющего существенно увеличить амплитуду смещения миозинового хвоста. Этот рычаг одним
из своих концов опирается на актиновую нить, другой конец рычага соединен с хвостом молекулы
миозина (рис. 3). При гидролизе АТФ в головке миозина происходят структурные перестройки, в
результате которых зацепленная за нить актина головка миозина поворачивается на угол 30 - 40°,
увлекая за собой хвост миозина . Так возникает сила, вызывающая скольжение толстых нитей
миозина вдоль нитей актина.
Структурные перестройки, которые происходят в каталитическом центре фрагмента S1, характери-
зуются сравнительно небольшими смещениями атомов в активном центре. Однако эти изменения
вызывают значительное перемещение хвоста миозина (3-5 нм для миозина скелетных мышц). Это
происходит в результате того, что рычаг, передающий смещение от каталитического центра к хвосту
миозина, имеет неравные плечи - точка опоры рычага находится существенно ближе к активному
центру моторного фрагмента S1, чем конец шейки миозинового мостика, соединяющийся с хвостом
миозиновой нити (см. рис. 3). Интересно, что у молекул миозина, принадлежащих различным клас-

8
сам, амплитуда смещения хвоста за один рабочий шаг может заметно отличаться. Это определяется
тем, что длина рычага у разных форм миозина неодинакова (рис. 2, в). Так, например, у молекул ми-
озина V, выполняющего функции транспортного белка, шейка в несколько раз длиннее, чем у миози-
на скелетных мышц (миозина II). Поворот головки миозина V на угол а - 30-40° приводит к
смещению хвоста на расстояние 20 нм, что приблизительно в пять раз больше рабочего шага миозина
скелетных мышц.
В процессе сокращения мышцы каждая головка миозина совершает многократные повороты,
периодически изменяя угол своего наклона относительно нити актина. В расслабленной мышце
миозиновый мостик отделен от актиновой цепи (рис. 4, состояния 1 и 2). Свободная головка миозина
обладает определенной степенью подвижности; за счет шарниров, расположенных в местах
соединения фрагментов S1 и S2, угол ее наклона относительно хвоста может изменяться. При
связывании молекулы АТФ с активным центром миозина его головка остается отсоединенной от
актина ( состояние 7). В каталитическом центре миозина молекула АТР расщепляется на ADP и Р,
(рис. 4, переход "состояние 1" —" "состояние 2"). Образующиеся при этом молекулы ADP и Р,
остаются прочно связанными с каталитическим центром. Однако вслед за гидролизом молекулы АТР
происходит присоединение головки миозина к актиновой нити: сначала образуется слабая связь
(состояние 3), затем возникает более прочная связь (состояние 4). При этом вращательная
подвижность миозинового мостика становится ограниченной. Прочное связывание головки миозина с
актином инициирует освобождение фосфата Р, из активного центра (переход "состояние 4" —-—-
"состояние J"). Изменения, происходящие в каталитическом центре после диссоциации Р;, вызывают
дополнительное увеличение сродства миозина к актину. В результате этого появляется сила,
вызывающая поворот мостика в сторону хвоста (переход "состояние 5" —- "состояние 6"). Вместе с
поворотом мостика смещается вдоль нити актина
хвост миозина, который соединен с мостиком с помощью "шарнирного" сочленения. Благодаря про-
дольному смещению хвоста миозина происходит сокращение длины саркомера. После смещения го-
ловки миозина, инициированного диссоциацией фосфата, молекула ADP диссоциирует из каталити-
ческого центра, а ее место занимает новая молекула АТР (переход "состояние 7" —- "состояние /").
Это превращение сопровождается отсоединением головки миозина от актина, завершающим цикл
структурных преобразований, происходящих в активном центре миозина. В результате многократно
повторяющихся циклов гидролиза АТР возникает направленное скольжение нитей миозина и актина
друг относительно друга.

9
Рис. 5. Цикл структурных превращений актино-миозинового комплекса, приводящих к смещению
молекулы миозина вдоль нити актина

В мышечных волокнах молекулы миозина работают не индивидуально, а кооперативно, в составе

крупных макромолекулярных ансамблей. Как мы уже отмечали, в миофибриллах молекулы миозина
собраны в жгуты, из которых выступает множество миозиновых мостиков в сторону нитей актина
(см. рис. 1). Установлено, что во время сокращения мышцы лишь сравнительно небольшая часть мос-
тиков (10—15%) одновременно находится в контакте с окружающими их нитями актина. Это значит,
что каждый из мостиков большую часть времени проводит в свободном состоянии, когда он непо-
средственно не создает тянущей силы. При этом молекулы миозина, у которых мостики отсоединены
от актиновых нитей, во время сокращения саркомера перемещаются вместе с остальными
молекулами миозинового жгута. Такое движение свободных (несвязанных) мостиков происходит за
счет работы других мостиков, которые в это время непосредственно взаимодействуют с нитями
актина. Это значит, что каждый мостик не просто шагает вдоль нити, равномерно ступая между
соседними звеньями актиновой цепи, а как бы прыгает вдоль нее. Длина таких прыжков составляет
36—38 нм (рис. 5, а), что многократно превышает размер индивидуального шага (As = 4 нм). Таким
образом, сокращение мышечных волокон обеспечивается за счет кооперативной работы большого
количества молекул миозина, собранных в толстые нити. Движение пучка молекул миозина вдоль
нити актина можно сравнить с перетаскиванием бревна большой группой работников, из которых
лишь небольшая часть тружеников (10—15%) опирается ногами на землю, в то время как остальные
работники в это время висят на бревне, не касаясь земли. Подобно мостикам миозина, работники
периодически меняются ролями, однако в каждый момент времени активно работает лишь небольшая
часть тружеников, несущих бревно вместе с висящими на нем товарищами (рис. 5,6).
Кооперативный способ работы молекул миозина, характерный для скелетных мышц, встречается
также в некоторых других сократительных системах. Известна, однако, большая группа моторных
белков, которые работают индивидуально; цикл их механохимических превращений протекает в рав-
номерном режиме, а перемещение происходит отдельными шагами, без длинных прыжков, харак-
терных для миозина скелетных мышц. К таким молекулярным моторам относятся некоторые классы
внемышечных миозинов, работающих в клетках животных и растений в качестве перевозчиков мем-
бранных частиц. Простейшие молекулы миозина, выполняющие работу индивидуальных переносчи-
ков (например, миозин класса I), имеют глобулярную головку и короткий хвост.

Рис. 5. Схема перемещения молекулы миозина вдоль нити актина

10
 Двигаясь вдоль нити актина цитоскелета, молекула-переносчик может тащить за собой органоид, к
которой она прикрепляется своим хвостом. Таким способом молекулы миозина осуществляют
перенос различных частиц и органоидов в клетке.
Движение органоидов при помощи белков-переносчиков хорошо исследована в гигантских
клетках зеленой водоросли Nitella. На периферии клетки, рядом с плазматической мембраной,
находится слой хлоропластов. Хлоропласты примыкают к так называемому кортикальному слою,
который содержит пучки актиновых нитей. Между неподвижными кортикальным слоем и мембраной
вакуоли расположен слой движущейся цитоплазмы, в котором находятся ядра, митохондрии и другие
органеллы. Молекулы миозина совершают круговое движения внутри клетки, равномерно
перемещаясь вдоль нитей актина и увлекая за собой сравнительно крупные органеллы (митохондрии,
эндоплазматический ретикулум, ядра и др.). Скорость перемещения органелл составляет 50-75 мкм/с.
Благодаря такому движению в гигантской клетке водоросли возникает циркуляция цитоплазмы, за
счет которой ее содержимое перемешивается гораздо быстрее, чем это происходило бы путем
простой диффузии. Гигантские клетки зеленых водорослей достигают длины 2-5 см, поэтому без
принудительной циркуляции цитоплазмы молекулам белков потребовалось бы около 10 суток для
диффузии с одного конца клетки на другой.
Пока не разгадан механизм движения хлоропластов в цитоплазме клеток водорослей и высших
растений. Известно, что при освещении растений хлоропласты быстро перемещаются внутри клетки,
собираясь вблизи клеточной стенки. Хлоропласты зеленой водоросли Chara могут часами вращаться
(один оборот за 2-3 с) в одном и том же направлении в капле протоплазмы, выдавленной из клетки.
В работах В.П. Скулачева с сотрудниками показано, что вращение хлоропластов - это
энергозависимый процесс, который поддерживается за счет протонного потенциала. Однако,
механизмы использования энергии мембранного потенциала для движения хлоропластов пока
неизвестны.
Хорошо изученным из внутриклеточных двигательных белков являются молекулы кинезинового
типа . Кинезин в животных клетках выполняет функцию переносчика различных органоидов
(митохондрии, лизозомы) и внутриклеточных частиц. В клетках дрожжей найдено шесть белков,
похожих на кинезин. В клетках мышей обнаружено более двух десятков подобных белков. Двигаясь
вдоль микротрубочек (рис. 6), молекула кинезина может тянуть за собой сравнительно крупные
субклеточные частицы.

Рис. 6. Схема перемещения молекулы кинезина вдоль тубулиновой микротрубочки,. Буквами Т и D

обозначены головки кинезина, с которыми связаны соответственно АТФ или AДФ. В исходном
положении (состояние 1 ) головка кинезина, не связанная с микротрубочкой, содержит молекулу AДФ,
вторая головка, которая в это время контактирует с микротрубочкой, свободна от нуклеотидов. После
связывания АТФ второй головкой изменяется конформация молекулы кинезина, в результате чего
первая головка, содержащая AДФ, смещается вправо (переход 1 →2). После диссоциации AДФ
свободная головка связывается с микротрубочкой (переход 2 →3). Затем происходят гидролиз АТФ и
диссоциация фосфата (Р,), в результате чего головка, с которой связана молекула AДФ отходит от
микротрубочки (переход 3 →4). В конечном положении (состояние 4) углы наклона головок кинезина
относительно микротрубочки такие же, как в исходном состоянии 1, но при этом молекула кинезина
оказалась смещенной вдоль микротрубочки на расстояние, соответствующее двум мономерным
звеньям тубулина а и тубулина Р

11
 Как отмечали в выше, тубулиновые микротрубочки цитоскелета состоят из глобулярных белков
двух типов (α- и β-тубулин).
По структурным и биохимическим свойствам кинезин напоминает миозин. Молекула кинезина
представляет собой димер, образованный двумя одинаковыми полипептидными цепями. Подобно
молекуле миозина, с одной стороны каждой полипептидной цепи кинезина формируется глобулярная
головка, соединенная со сравнительно длинным хвостом. Линейные размеры головки сравнительно
невелики, они составляют 7,5 х 4,5 х 4,5 нм. Хвосты двух мономерных цепей сплетены вместе, а на-
клоненные в разные стороны головки образуют своеобразную рогатину, которая непосредственно
взаимодействует с глобулярными мономерами микротрубочки, вдоль которой перемещается кинезин
(рис. 6).
Каждая из двух головок кинезина обладает АТФ-азной активностью. Связывание и гидролиз
молекулы АТФ в активном центре кинезина, а также последующие события, вызванные
диссоциацией AТФ сопровождаются изменением положения головок относительно тубулиновых
мономеров, в результате чего кинезин перемещается вдоль микротрубочки. Работа головок кинезина
хорошо скоординирована: связывание и пиролиз молекулы АТФ одной головкой димерного
комплекса способствует освобождению молекулы ADP из активного центра другой головки. Головки
кинезина попеременно связываются с мономерными звеньями микротрубочки. На рис. 6 показана
одна из наиболее вероятных схем работы кинезина, которая объясняет, каким образом происходит
перемещение кинезина вдоль микротрубочек. В ходе структурных перестроек моторных участков
кинезина угол наклона головок относительно микротрубочки изменяется, вследствие чего
кинезиновый димер смещается вдоль микротрубочки. Это движение по своему характеру напоминает
перемещение двуногого существа — головки кинезинового димера попеременно опираются на
тубулиновые глобулы микротрубочки.
Один шаг димерного комплекса приводит к его смещению вдоль микротрубочки на расстояние l
= 8 нм. Длина шага l в точности соответствует размеру двух мономерных глобул (-тубулин и -
тубулин), из которых построена микротрубочка. Одна молекула кинезина обычно совершает не менее
100 шагов, прежде чем она отделяется от микротрубочки. Кинезин движется с поразительно быстрой
скоростью. За одну секунду он делает приблизительно 100 шагов, перемещаясь за это время на
расстояние 800 нм. При этом сила, развиваемая одной молекулой кинезина, составляет величину F =
6 пН. Если бы такой мощностью в расчете на единицу массы обладали автомобильные моторы, то
они могли бы легко разгонять машины до скоростей, существенно превышающих скорость звука.
Коэффициент полезного действия кинезинового мотора также велик. Совершаемая им за один шаг
работа равна W= Fl = 48 пН  нм, что составляет около 60% от энергии, выделяемой при гидролизе
одной молекулы АТФ. Работая в качестве индивидуального молекулярного извозчика, кинезин может
совершать перемещения на очень большие расстояния (до 1 мм).
Как видно из вышеизложенного, перемещение живых систем и их компонетов в пространстве
осуществляется путем взаимодействия различных типов белковых молекул, так называемых
механохимических белков. Для генерации движения эти молекулы используют энергию или
трансмембранного потенциала (у прокариот), или гидролиза молекул АТФ. В последние годы, в
клетках различных организмов, обнаружено большое количество белковых молекул, ответственных
за сократительную активность, подвижность и транспортные процессы в клетке. Одних только
механохимических белков типа миозина в клетках различных организмов насчитывается более 15
семейств и свыше 84 видов. Важным достижением в исследовании молекулярных моторов явилась
разработка новых биофизических методов регистрации подвижности белков, которые позволили
непосредственно наблюдать за движением отдельных моторных белков и их фрагментов.

12