Внутриматочная

инсеминация
Эмбр. Хашимова А.Р.
В данной лекции будут рассматриваться:

 Показания и важные условия перед проведением ВМИ

 Понятие о базовых исследованиях эякулята перед проведением ВМИ
 Условия, необходимые для обработки эякулята
 Виды обработки эякулята для ВМИ
Показания
 Легкая и среднетяжелая форма эндометриоза
 СПКЯ, ановуляция или проблемы в фолликулярной фазе.
 Невозможность попадания спермы во влагалище из-за ретроградной
эякуляции, вагинизма , преждевременной эякуляции или эректильной
дисфункции.
 Легкие проблемы с мужской фертильностью , т.е. изменения параметров
спермы.
 Необъяснимое бесплодие
 Иммунное бесплодие : возникает при несовместимости женской
репродуктивной системы и спермы
Важные условия:
 Исключение любого риска заражения гепатитом С, гепатитом
В, ВИЧ, сифилисом или токсоплазмозом. Этот шаг очень важен,
чтобы гарантировать отсутствие риска заражения партнера и/или
будущего ребенка.
 Проходимые трубы
 Наличие минимального количества сперматозоидов
 Возраст до 36 лет
Информирование пациента перед подготовкой к ВМИ

 -Мужчина должен получить четкие письменные и устные указания относительно

сбора образца эякулята.
 -Врач должен предоставить пациенту такую же информацию. Основная
рекомендация -сбора эякулята путем мастурбации.
 -Эякулят должен быть собран полностью, и мужчина должен сообщить о любых
потерях части образца.
 -Эякулят должен быть собран минимум через 2 дня и максимум через 7 дней
воздержания от эякуляции.
Важно!!
-если пациент по какой-либо причине должен собрать эякулят в другом месте, то ему
следует держать контейнер с образцом во время транспортировки близко к телу под
одеждой, например в подмышечной впадине, и доставить его в лабораторию
предпочтительно в течение 30 минут после сбора, но не позднее чем через 50 минут
после сбора.
-следует транспортировать при температуре не ниже 20°C и не выше 37°C.

! Противозачаточные и латексные презервативы не могут быть использованы из-за

спермицидов
! Следует избегать использования лубрикантов – загрязнение эякулята и
изменение его параметров
Сбор образца

 Информирование пациента в устной и письменной форме

 Выдаются направительный бланк и стерильный одноразовый контейнер
 Пациент направляется в комнату для сдачи спермы
 Пациент указывает свои ФИО и ФИО супруги, дату и время сдачи эякулята,
подпись
Базовые исследованиях эякулята перед
проведением ВМИ
Определяемые параметры

 Объем
 Концентрация в 1 мл (>10 млн/мл)
 Подвижность
 Лейкоциты ?
Для чего нужна обработка эякулята?
 Имитировать молекулярную трансформацию, происходящую in vivo , чтобы дать
сперме возможность оплодотворить яйцеклетку.

Капацитация включает в себя ремоделирование плазматической мембраны

сперматозоида (потеря холестерина и экзоцитоз специфических фосфолипидов из
внутренней мембраны), изменение рН сперматозоидов, тирозиновое
фосфорилирование белков сперматозоидов и гиперактивированную подвижность;
в конечном итоге приводит к акросомной реакции.
 Схема оплодотворения яйцеклетки

 Капацитация
 Гиперактивация
 Преодоление 3-х естественных барьеров:
1 клетки кумулюса и лучистого венца
(гиалуронидаза).
2 связывание с zona pellucida (гликопротеины ZP1,
ZP2, ZP3, ZP4), акросомный экзоцитоз
проникновение сквозь zona pellucida
3 Цитоплазматическая мембрана ооцита
(оолемма), сплавление мембран спермия и ооцита,
поглощение спермия ооцитом
(фагоцитоз)
 деконденсация ядерного материала и
образование мужского пронуклеуса
Harper и соавт., 2008
In Vivo:
 Воздействие эстрогенов (расширение цервикального канала,
снижение вязкости и кислой реакции цервикальной слизи)
 Прохождение части сперматозоидов через цервикальную слизь с
последующим освобождением от факторов семенной жидкости 
капацитация сперматозоидов (способность к оплодотворению)
 Cлияние мужских и женских гамет (ооцит+сперматозоид) в маточной
трубе
 Завершение мейоза 2 в женской гамете
 Блок полиспермии
 Формирование зиготы
При проведении in vitro процесс капацитации можно выполнить одним из
следующих методов:
 Центрифугирование в градиенте плотности
 Отмывание спермы методом всплытия
Центрифугирование в градиенте плотности

 сперматозоиды отделяются от семенной жидкости и разделяются на

основе их подвижности и морфологии
Оснащение:
Расходный материал:

 Ламинарный бокс микробиологической

 Пробирки конусовидные стерильные – 14 мл
безопасности II класса
 Фазово-контрастный микроскоп  Пипетки Пастера градуированные
 пластиковые стерильные, или Пастера
Центрифуга
стеклянные стерильные
 Счетная камера Маклера (в случае
 Шприцы стерильные – 1мл, 2мл, 5мл
отсутствия – камера Горяева)
 Термостат  Одноразовые стерильные баночки 100 мл с

закручивающейся крышкой для сбора
Микродозаторы
эякулята
 Штативы для пробирок
 Наконечники для микродозаторов
 Холодильник стерильные, с фильтром, DNase/RNase free
 Таймер  Маска одноразовая
 Лабораторный счетчик  Перчатки одноразовые неопудренные
 Перманентный маркер
Среды, используемые для ВМИ
 Градиенты плотности
 Washing Medium
 IVM medium
 Flushing medium