Подпишитесь на DeepL Pro для редактирования данного док

Дополнительную информацию можно найти на странице www.DeepL.com/Pro

Лаборатория № 4: Морфология грибов и актиномицетов

      Цель лабораторного занятия: Изучение морфологии грибов (Mukor, Aspergillus,

Penicillium) и дрожжей с помощью препарата "Раздавленная капля". Микроскопические
препараты актиномицетов (окрашенный мазок)
Оборудование и материалы.Чашки Петри и/или пробирки с 24- и 48-часовой
культурой Мукора и Aspergillus и/или Penicillium соответственно; культуры
Актиномицетов и Дрожжей; изотонический раствор хлорида натрия;
микробиологические петли; препаровальная игла; предметные и покровные стекла;
пинцет; микробиологическая петля; горелка Бунзена; растворы красителей: Фуксин
Пфейффера, метиленовый синий и др; растворы Люголя, изотонический раствор хлорида
натрия; предметные и покровные стекла; лоток для окрашивания; микроинсинератор или
горелка Бунзена; микроскопы; иммерсионное (кедровое) масло.

Грибы. Гриб (множественное число: грибы или грибницы) - это любой

представитель группы эукариотических организмов, включающей такие
микроорганизмы, как дрожжи и плесени, а также более известные грибы. Эти
организмы классифицируются как царство, грибы, которое отделено от
других царств эукариотической жизни - растений и животных.
Грибки могут быть одноклеточными или очень сложными
многоклеточными организмами. Они встречаются практически в любой
среде обитания, но большинство живет на суше, в основном в почве или на
растительном материале, а не в морской или пресной воде. Группа,
называемая разлагателями, растет в почве или на мертвой растительной
массе, где они играют важную роль в круговороте углерода и других
элементов. Некоторые из них являются паразитами растений, вызывая такие
заболевания, как милдью, ржавчина, парша или рак. Грибковые заболевания
сельскохозяйственных культур могут привести к значительным денежным
потерям для фермера. Очень небольшое количество грибков вызывает
заболевания у животных. У людей это кожные заболевания, такие как стопа
атлета, стригущий лишай и молочница.
Для своего питания грибы используют углерод только из готовых
органических соединений, то есть являются гетеротрофами. Вегетативное
тело - мицелий, состоящий из тонких ветвящихся гиф, есть у всех грибов,
кроме примитивных низших грибов и некоторых высших (дрожжи). У
низших грибов мицелий одноклеточный, у высших - многоклеточный (рис.7).
    
Рис.7 - Классификация грибов
   
Пищеварительные ферменты выделяются из кончика гифы. Эти ферменты
расщепляют органические вещества, находящиеся в почве, на более мелкие
молекулы, которые используются грибом в качестве пищи.
Спорангиофоры или конидиофоры - плодовые тела отходят от мицелия.
Спорангиофоры заканчиваются отростками - спорангиями с эндоспорами. В
случае разрыва спорангия эндоспоры высвобождаются, а попадая в
благоприятные условия, они дают начало новой плесени. Конидии или
экзоспоры образуются на конидиеносцах. Они имеют различную форму:
шаровидную, булавовидную, продолговатую и т.д. Споры - это
специализированные структуры с защитной оболочкой, которая защищает их от
неблагоприятных условий окружающей среды, таких как высыхание и высокие
температуры. Споры похожи на семена, поскольку они позволяют грибу
размножаться.
 Приготовление "Раздавленной капли". Образец культуры грибов
распределяют в капле изотонического раствора хлорида натрия или
стерильной воды на предметном стекле с помощью препаровальных игл.
Мукор рассматривают при малом увеличении микроскопа (рис. 8).
 Рис.8 - Мукор
(https://www.nastroy.net/post/grib-mukor-osobennosti-stroeniya-i-jiznedeyatelnosti)

Конидиофоры Aspergillus сначала обнаруживаются при малом

увеличении, а затем более детально исследуются при среднем увеличении
(рис.9).
 

Рис. 9 - Aspergillus fumigatus

(https://ppdictionary.com/mycology/fumigatus.htm)

Penicillium рассматривают при среднем увеличении (рис.10). Следует

помнить, что грибы размножаются спорами. Поэтому препарирование
следует проводить вблизи предметного стекла, не допуская рассеивания
спор. Препаровальную иглу после использования осторожно сжигают над
пламенем горелки.
 Рис.10 - Penicillium
(https://mycology.adelaide.edu.au/descriptions/hyphomycetes/penicillium/)

Актиномицеты образуют пигмент, и они имеют различные цвета:

розовый, красный, коричневый, черный и т.д. Виды актиномицетов
определяются по строению воздушного мицелия.

Рис.11-Streptomyces spp.
 (https://www.the-compost-gardener.com/actinomycetes.html)

Из мицелия образуются спорангиофоры со спорами на концах

(плодовые тела). Актиномицеты являются аэробными; они растут на МПА
при температуре 30-35°C.
Приготовление мазка. Культуру с твердой среды отбирают
препаровальной иглой, помещают на предметное стекло и накрывают вторым
предметным стеклом. Культуру прижимают, затем стекла разъединяют по
поверхности, в результате чего получаются два мазка. Культура из жидкой
среды наносится микробной петлей. Мазок фиксируют, затем окрашивают
фуксином Пфейффера.
Микроскопическое изображение: тонкие ветвящиеся нити (гифы),
расположенные в виде пучков, или нитей.
Дрожжи - это маленькие, лимоновидные одиночные клетки, по размеру
примерно такие же, как эритроциты. Они размножаются путем отпочкования
дочерней клетки от исходной родительской клетки. На поверхности
дрожжевой клетки можно увидеть шрамы в местах отрыва почек. Дрожжи,
такие как Saccharomyces, играют важную роль в производстве хлеба и в
пивоварении. Дрожжи также являются одними из наиболее широко
используемых модельных организмов для генетических исследований,
например, при изучении рака. Другие виды дрожжей, такие как Candida,
являются условно-патогенными микроорганизмами и вызывают инфекции у
людей, не имеющих здоровой иммунной системы.
Дрожжевые клетки имеют мембрану, цитоплазму и, в отличие от
прокариот, ядро, которое хорошо видно на неокрашенном препарате.
Цитоплазма молодых клеток более однородна, а с возрастом появляются
вакуоли. Дрожжи крупнее бактериальных клеток, их диаметр колеблется от
10 до 15 мкм. Споры образуются внутри клеток (аски). Существуют также
артроспоры или покоящиеся клетки дрожжей. Они отличаются от
вегетативных клеток наличием двойной мембраны и большим количеством
резервных питательных веществ (гликоген, жир) и отсутствием вакуолей.
Размножение дрожжей происходит почкованием, спорами и половым путем.
Капля культуры дрожжей, приготовленная заранее, наносится на
предметное стекло микробной петлей, накрывается покровным стеклом и
исследуется с помощью иммерсионной системы микроскопа. Дрожжевые
клетки видны при меньшем увеличении (X400), но для сравнения их
размеров с другими микробами препарат лучше изучать под иммерсионной
системой.
    Микроскопическое изображение: В поле зрения микроскопа видны
округлые и вытянутые клетки, среди которых также встречаются
почкующиеся клетки (рис. 12)
 Рис.12- Saccharomyces cerevisiae (A) и Cryptococcus albidus (B)
(http://archive.bio.ed.ac.uk/jdeacon/microbes/yeast.htm)

Вопросы теста: 1. Каковы общие характеристики грибов. 2. Каковы различия между

высшими и низшими грибами, совершенными и несовершенными грибами.3. Расскажите
об общей характеристике Актиномицетов. 4. Какова морфология дрожжей и каков способ
их размножения?