Cobpemehhыe Metoды Диaгhoctиkи Octpыx Eйkoзob У Дeteй И Bзpoc Ыx

MИHИCTEPCTBO ЗДPABOOXPAHEHИЯ PECПУБ ИKИ БE APУC@
METOДИЧECKИE PEKOMEHДAЦИИ
COFЛACOBAHO YTBEPЖДAЮ
Зaмectиteль haчaльhикa Пepbый зaмectиteль
Fлabhoгo yпpabлehия кaдpoboй пoлиtики, миhиctpa дpabooxpahehия
yчe6hыx зabeдehий и hayки H.И. Дocta B.M.Opexobcкий
26 дeкa6pя 2000 г. 26 дeкa6pя 2000 г.

Peгиctpaциohhый № 172-0012
COBPEMEHHЫE METOДЫ ДИAГHOCTИKИ

OCTPЫX EЙKOЗOB У ДETEЙ И BЗPOC ЫX
Mиhcк 2001
Пepeйtи к oглabлeнию
Coвpeme++ыe memoды дuas+ocmuкu ocmpыx лeŭкozoв y дemeŭ u вzpocлыx
Учpeждeнuя-paзpaбomчuкu:Pecпy6ликahcкий hayчho-пpaкtичecкий цehtp дetcкoй

ohкoлoгии и гeмatoлoгии, HИИ гeмatoлoгии и пepeлиbahия кpobи
Aвmopы: д-p мeд. hayк O.B. Aлeйhикoba, кahд. мeд. hayк O.H. Cыцкebич, д-p мeд. hayк
M.П. Пotaпheb, кahд. мeд. hayк C.E. Бyглoba, кahд. 6иoл. hayк T.B. Cabицкaя, P.И. Юцкebич,
Л.Ю. Фeдopoba, O.F. Caxapoba, A.M. Kyctahobич, K.B. Caльhикob, B.B.
Cмoльhикoba,
A.B. Hobик, д-p мeд. hayк, пpoф. A.И. Cbиphobcкий.
Peцeнзeнm: кahд. мeд. hayк, дoц. Л.A. Cмиphoba
Излoжehhыe b мetoдичecкиx peкoмehдaцияx пpиhципы клиhичecкoй и лa6opatophoй

диaгhoctики octpыx лeйкoзob y дeteй и bзpocлыx bключaюt кaк o6щeклиhичecкиe пoдxoды,
taк и cпeциaльhыe мetoды yctahobлehия дetaлизиpobahhoгo диaгhoзa octpoгo лeйкoзa. 7to
o6ecпeчиbaet pahhюю и aдpechyю tepaпию зa6oлebahия, eгo мohиtopиhг и oцehкy
octatoчhoй (peзидyaльhoй) 6oлeзhи. Metoдичecкиe peкoмehдaции paccчиtahы ha bpaчeй-
гeмatoлoгob, bpaчeй-лa6opahtob, мoгyt 6ыtь пoлeзhы для tepaпebtob и пeдиatpob
cмeжhыx cпeциaльhocteй.
Metoдичecкиe peкoмehдaции ytbepждehы Mиhиctepctboм здpabooxpahehия Pecпy6лики

Бeлapycь b кaчectbe oфициaльhoгo дoкyмehta.
2 Пepeйtи к oглabлeнию
Oглabлehиe
BBEДEHИE..............................................................................................................................................4
K ИHИЧECKИE OCOБEHHOCTИ OCTPЫX EЙKOЗOB У ДETEЙ И BЗPOC ЫX.................5
Kлиhиuecкиe ocoбehhoctи octpыx лeйкoзob y дeteй..........................................................................................5
Kлиhиuecкиe ocoбehhoctи octpыx лeйкoзob y bзpocлыx...................................................................................7
METOДЫ AБOPATOPHOЙ ДИAГHOCTИKИ OCTPЫX EЙKOЗOB.......................................9
1.Циtoмopøoлoгиuecкoe и циtoxимиuecкoe иccлeдobahиe.........................................................................................9
2.Иммyhoøehotипиpobahиe лeйкoзhыx клetoк мetoдoм пpotouhoй циtoøлyopимetpии..........................14
3.Циtoгehetиuecкий мetoд иccлeдobahия..........................................................................................................38
4.Metoд пoлимepaзhoй цeпhoй peaкции.............................................................................................................42
OT ИЧИTE @HЫE ПPИЗHAKИ OCTPЫX EЙKOЗOB
У ДETEЙ И BЗPOC ЫX..............................................................................................................53
3
BBEДEHИE
Octpыe лeйкoзы (OЛ) coctabляюt 30–35% ohкoлoгичecкиx зa6oлebahий дetcкoгo
boзpacta и 3% ohкoлoгичecкиx зa6oлebahий y bзpocлыx. Y дeteй ha дoлю octpoгo
лимфo6лacthoгo лeйкoзa (OЛЛ) пpиxoдиtcя 80%, octpoгo миeлoидhoгo лeйкoзa (OMЛ) —
15–17%. Y bзpocлыx OЛЛ coctabляet 25%, OMЛ — 75% bcex octpыx лeйкoзob. Чactota OЛ b
Бeлapycи coctabляet 4,10±0,4 cлyчaeb ha 100 000 дetcкoгo haceлehия b boзpacte дo 15 лet
и 3,37±0,13 cлyчaeb ha 100 000 bзpocлoгo haceлehия, чto cootbetctbyet миpobым
дahhым(Иbahob E.П. и дp., 2000; Coebergh J.W.W. et al., 1989).
Cyщectbehhый пpoгpecc b лeчehии OЛ зa пocлeдhиe дbaдцatь лet oзhaмehobaлcя
пobышehиeм ypobhя bыжиbaeмoctи c 5–20% дo 60–80% y дeteй и c 5–10% дo 40–60% y
bзpocлыx (пo дahhым 5-лetheй oцehки). 7tot ycпex 6ыл дoctигhyt 6лaгoдapя иcпoльзobahию
haи6oлee эффeкtиbhыx кoм6иhaций paзличhыx циtoctatичecкиx пpeпapatob, bыпoлhehию
tpahcплahtaции кocthoгo мoзгa, a taкжe paциohaлизaции tepaпии, ochobahhoй ha
yглy6лehhoй диaгhoctикe зa6oлebahия(Weinstein H.J. et al., 1983; Miller D.R., 1995).
Цeлью мetoдичecкиx peкoмehдaций яbляetcя oзhaкoмлehиe cпeциaлиctob-гeмatoлoгob,
bpaчeй-лa6opahtob и bpaчeй cмeжhыx cпeциaльhocteй c cobpeмehhым coctoяhиeм
клиhичecкoй и лa6opatophoй диaгhoctики OЛ y дeteй и bзpocлыx.
Пpeдctabлehhыe мatepиaлы bключaюt кaк o6o6щehиe лиtepatyphыx дahhыx, taк и
peзyльtatы ahaлизa co6ctbehhыx дahhыx, пoлyчehhыx b пpoцecce o6cлeдobahия и лeчehия
6oльhыx c octpыми лeйкoзaми.
K ИHИЧECKИE OCOБEHHOCTИ OCTPЫX

EЙKOЗOB У ДETEЙ И BЗPOC ЫX
Kлиhиuecкиe ocoбehhoctи octpыx лeйкoзob y дeteй

Cpeди ha6людabшиxcя haми b 1997–2000 гг. 165 дeteй c octpым лeйкoзoм y 73,9%
yctahobлeh диaгhoз OЛЛ и y 24,3% — OMЛ. B tpex cлyчaяx (1,8%) octpый лeйкoз 6ыл
6ифehotипичecким.
Kлиhикa OЛ y дeteй xapaкtepизyetcя paзhoo6paзhыми пpoяbлehиями. Haи6oлee чacto пpи
OMЛ (y 74% пaциehtob) otмeчaetcя aнeмuuecкuŭ cuндpoм, oдhaкo aheмия III cteпehи (Hb <
69 г/л) bctpeчaetcя c oдиhaкoboй чactotoй (y 25–30% пaциehtob) кaк пpи OЛЛ, taк и пpи
OMЛ. Koжhый seмoppasuuecкuŭ cuндpoм, чacto coчetaющийcя c кpobotoчиboctью
cлизиctыx, 6oлee bыpaжeh пpи OMЛ (y 50% пaциehtob), oco6ehho пpи bapиahte
M3 пo FAB- клaccификaции. Иhtehcиbhoctь гeмoppaгичecкиx пpoяbлehий
paзhoo6paзha: ot мeлкotoчeчhыx и мeлкoпяthиctыx eдиhичhыx или peдкиx bыcыпahий
ha кoжe и cлизиctыx дo o6шиphыx кpoboизлияhий, дechebыx, hocobыx и дaжe
кpoboteчehий b жeлyдoчho-
кишeчhый tpaкt.
Инmoкcuкaцuoнныŭ cuндpoм b bидe лиxopaдки 6oлee bыpaжeh пpи OMЛ (y 80%
пaциehtob), чeм пpи OЛЛ (y 64% пaциehtob). Taкoй пoкaзateль иhtoкcикaции, кaк chижehиe
мaccы teлa, bctpeчaetcя c oдиhaкoboй чactotoй пpи OMЛ и OЛЛ (b 15% cлyчaeb).
Бoлee xapaкtepeh для OЛЛ sunepnzacmuuecкuŭ cuндpoм, кotopый bключaet
лимфaдehoпatию (ЛAП), кotopaя bыяbляetcя y 51,6% пaциehtob, гeпatoмeгaлию (83%),
cплehoмeгaлию (70%), ybeличehиe лимфatичecкиx yзлob cpeдoctehия (75%). Дoboльho
peдкo (b 2,6% cлyчaeb) bыяbляюtcя лeйкeмиды ha кoжe.
Бoлee peдкo bctpeчaetcя кoctho-cyctabhoй cиhдpoм, кotopый ha6людaetcя y 22,3%

6oльhыx c OЛЛ, toгдa кaк y 6oльhыx c OMЛ oh otcytctbyet. Иccлeдobahия кocthoгo мoзгa
bыяbляюt 6лacthыe клetки, пpoцeht кotopыx пpи OЛЛ b cpeдheм coctabляet 81%, a пpи
OMЛ — 65,5%. Kaptиha пepифepичecкoй кpobи b paзbephytoй ctaдии octpoгo лeйкoзa
becьмa xapaкtepha.
Y дeteй c OЛ o6ычho bыяbляюt aheмию, tpoм6oциtoпehию, a taкжe измehehиe чиcлa
лeйкoциtob, кotopoe bapьиpyetcя b дoboльho шиpoкиx пpeдeлax. Пpи OЛЛ и OMЛ y дeteй b
6oльшиhctbe cлyчaeb (62–63%) кoличectbo лeйкoциtob he пpebышaet 20 × 109/л, b 25%
ha6людaetcя гипepлeйкoциtoз cbышe 50 × 10 9/л. Peжe (13–14%) bыяbляetcя лeйкoциtoз b
диaпaзohe ot 20 × 109/л дo 50 × 109/л. Aлeйкeмичecкaя фopмa octpoгo лeйкoзa, t.e.,
otcytctbиe 6лacthыx клetoк b пepифepичecкoй кpobи, otмeчaetcя y 26,5% 6oльhыx c
OЛЛ и y 20% 6oльhыx c OMЛ.
Пopaжehиe ЦHC пpи OЛ диaгhoctиpyetcя, пo haшим дahhым, y 12,6% 6oльhыx, oдhaкo
пpи OЛЛ heйpoлeйкoз bctpeчaetcя b 2,5 paзa чaщe, чeм пpи OMЛ.
Ha ochobahии пpeждe bceгo фehotипичecкиx мapкepob octpыe лимфoлeйкoзы
paздeляюt ha B-лиheйhыe и T-лиheйhыe. T-лиheйhыe OЛЛ coctabляюt 14,5% cлyчaeb
bcex OЛЛ. Kлиhичecкaя кaptиha T-лиheйhoгo OЛЛ y дeteй xapaкtepизyetcя haличиeм b
100% cлyчaeb sunepnzacmuuecкoso cuндpoмa co зhaчиteльhым ybeличehиeм paзмepob
пeчehи и ceлeзehки. Feмoppasuuecкuŭ cuндpoм ha6людaetcя y пoлobиhы 6oльhыx и
o6ычho пpeдctabлeh пetexиaльho-пяthиctoй cыпью. Aнeмuuecкuŭ cuндpoм bctpeчaetcя
toлькo b 16% cлyчaeb b bидe aheмии I cteпehи. Пpи T-лиheйhoм OЛЛ чacto (b 42,6%
cлyчaeb) имeet мecto bobлeчehиe ЦHC (heйpoлeйкoз). Иccлeдobahиe пepифepичecкoй
кpobи b 91% cлyчaeb bыяbляet гипepлeйкoциtoз (дo 260 × 109/л). Пpи 6иoxимичecкoм
иccлeдobahии кpobи для 6oльhыx c T-лиheйhым OЛЛ xapaкtepho зhaчиteльhoe ybeличehиe
лaкtatдeгидpoгehaзы (ЛДF), чto he xapaкtepho для дpyгиx фopм OЛЛ.
Kлиhиuecкиe ocoбehhoctи octpыx лeйкoзob y bзpocлыx

Cpeди o6cлeдobahhыx haми bзpocлыx 6oльhыx c octpыми лeйкoзaми OMЛ 6ыл
диaгhoctиpobah b 78% cлyчaeb и OЛЛ — b 19% cлyчaeb, чto cootbetctbyet дahhым
дpyгиx abtopob (75% и 25% cootbetctbehho) (Lanzkowsky Ph., 1995; Williams M.G., Coller
B.S., 1995). B-лиheйhый фehotип OЛЛ bctpeчaetcя гopaздo чaщe (y 88,9%
пaциehtob), чeм T-лиheйhый (y 11,1% пaциehtob). Mopфoлoгичecкий bapиaht L2 (пo
FAB-клaccификaции) cpeди bcex OЛЛ яbляetcя дoмиhиpyющим (77,8%). Cpeди OMЛ
пpeo6лaдaet (47,3% cлyчaeb) M1 bapиaht.
Kлиhичecкиe пpoяbлehия octpoгo лимфoлeйкoзa y bзpocлыx haи6oлee чacto
xapaкtepизyюtcя лимфaдehoпatиeй (b 89% cлyчaeb), гeпatoмeгaлиeй (83%) и
cплehoмeгaлиeй (61%). Пpи OMЛ эtи пpизhaки sunepnzacmuuecкoso cuндpoмa
o6hapyжиbaюtcя peжe. Teм he мehee, cpeди cy6tипob OMЛ bapиahtы M4, M5 и M0
чacto coпpoboждaюtcя гeпatocплehoмeгaлиeй (b 89–100% cлyчaeb), кotopaя peжe
bctpeчaetcя (b 33–67% cлyчaeb) пpи M1 и M2 bapиahtax OMЛ и пpaкtичecки he
bctpeчaetcя (0–15% cлyчaeb) пpи octpoм пpoмиeлoциtaphoм лeйкoзe (OПЛ, M3).
Пpoяbлehия uнmoкcuкaцuoннoso cuндpoмa (лиxopaдкa c teмпepatypoй 6oлee 38° C)
o6hapyжиbaюtcя y 43–78% 6oльhыx c OMЛ, hecкoлькo peжe (y 39% 6oльhыx) пpи OЛЛ.
Пpизhaки seмoppasuuecкoso cuндpoмa otмeчaюtcя b 67% cлyчaeb OЛЛ и 75–80% cлyчaeb
OMЛ, зa иcключehиeм OПЛ (M3), гдe oh яbляetcя дoмиhиpyющим и ha6людaetcя y bcex
6oльhыx. Aнeмuя и tpoм6oциtoпehия bctpeчaюtcя 6oлee чeм y пoлobиhы 6oльhыx c OMЛ
(M3, M4 и M5 фopмы пo FAB-клaccификaции), hecкoлькo peжe пpи OЛЛ.
Coдepжahиe лeйкoциtob b пepифepичecкoй кpobи b 6oльшиhctbe cлyчaeb y bзpocлыx c

OЛ bышe 50 × 109/л. Пpи ahaлизe coдepжahия 6лacthыx клetoк haи6oлee hизкиe зhaчehия
cpeди bcex OMЛ кaк для кocthoгo мoзгa, taк и для пepифepичecкoй кpobи otмeчaюtcя
y 6oльhыx c M2 bapиahtoм (cpeдhиe зhaчehия — 59% и 44% 6лacthыx клetoк
cootbetctbehho). Cpeдhиe зhaчehия coдepжahия 6лacthыx клetoк b кocthoм мoзгe (80%) и
пepифepичecкoй кpobи (50–60%) 6oльhыx c OMЛ и OЛЛ пpaкtичecки he paзличaюtcя.
METOДЫ AБOPATOPHOЙ ДИAГHOCTИKИ OCTPЫX EЙKOЗOB

Диaгhoctикa OЛ 6aзиpyetcя ha peзyльtatax кaк o6щeклиhичecкиx (гeмoгpaммa,
6иoxимичecкий ahaлиз кpobи, гeмoctaзиoгpaммa), taк и cпeциaльhыx мetoдob
иccлeдobahия (миeлoгpaммa, b pядe cлyчaeb — tpeпaho6иoпcия, циtoмopфoлoгичecкoe и
циtoxимичecкoe иccлeдobahиe 6лacthыx клetoк, циtoгehetичecкий ahaлиз,
иммyhoфehotипиpobahиe лeйкoзhыx клetoк мetoдoм пpotoчhoй циtoфлyopoмetpии, пo
пoкaзahиям — мoлeкyляpho- 6иoлoгичecкиe иccлeдobahия мetoдoм пoлимepaзhoй
цeпhoй peaкции).
1. Циtoмopøoлoгиuecкoe и циtoxимиuecкoe иccлeдobahиe
Циtoмopфoлoгичecкoe иccлeдobahиe bыпoлhяetcя мetoдoм cbetoboй микpocкoпии пpи
ybeличehии b 700–1000 paз мaзкob acпиpatob кocthoгo мoзгa и/или пepифepичecкoй кpobи,
oкpaшehhыx пo Poмahobcкoмy—Fимзe. Mopфoлoгичecкиe и циtoxимичecкиe пpизhaки,
пoзboляющиe yctahobиtь bapиahtы octpoгo лeйкoзa, ochobahы ha кpиtepияx FAB-
клaccификaции, кotopыe cyммиpobahы b ta6лицax 1, 2, 3. Cpeди циtoxимичecкиx peaкций
oкpacкa ha фocфoлипиды cyдahoм чephым яbляetcя oдhим из haи6oлee дoctobephыx
кpиtepиeb диффepehциaльhoй диaгhoctики OЛЛ и OMЛ. Для OMЛ xapaкtepha
пoлoжиteльhaя peaкция, b to bpeмя кaк для OЛЛ — otpицateльhaя.
Mиeлo6лactы дaюt пoзиtиbhyю oкpacкy ha миeлoпepoкcидaзy, лимфo6лactы —
otpицateльhyю. Для 6лacthыx клetoк пpи OMЛ xapaкtepho диффyзhoe oкpaшиbahиe ha
hecпeцифичecкyю эctepaзy (H7), для 6лacthыx клetoк пpи OЛЛ — гpahyляphoe. Peaкция ha
гликoгeh (ШИK-peaкция) пoлoжиteльha (b гpahyляphoй фopмe) b лимфo6лactax, ho he
миeлo6лactax.
Peaкция ha киcлyю фocфataзy (KФ) яbляetcя oдhoй из haи6oлee чybctbиteльhыx и

пoзboляet oпpeдeлиtь пpиhaдлeжhoctь лимфo6лactob к T-лиheйhoмy OЛЛ (пoлoжиteльhaя
peaкция ha KФ) или B-лиheйhoмy OЛЛ (otpицateльhaя peaкция ha KФ).
Cyммиpyя bышeизлoжehhый мatepиaл, cлeдyet otмetиtь, чto микpocкoпичecкoe и
гиctoxимичecкoe иccлeдobahиe 6лacthыx клetoк пpи octpыx лeйкoзax bo мhoгиx
cлyчaяx пoзboляet bыяbиtь иx пpиhaдлeжhoctь к otдeльhым poctкaм кpobetbopehия и
oпpeдeлehhoмy эtaпy диффepehциpobки, xotя hobaя клaccификaция BOЗ he tpe6yet
oпpeдeлehия L1, L2, L3 клetoк (Xeppиc H.Л. и дp., 2000).
Ta6лицa 1
[nmonosnnec ne npnsna n Ll-, LŁ- n L3- MopØonosnn
вapnanmoв
ne osnыx nemo npn ocmpoM nnMØo6nacmnoM ne ose
(ba ayn Л.B., l997; Lanz§o-s§y Ph., l995)
Циtoлoгиuecкиe
L1 L2 L3
пpизhaки
Paзмepы kлetok пpeo6лaдaюt he6oль- 6oльшиe kлetkи, 6oльшиe kлetkи, oд-
шиe kлetkи heoдhopoдhaя пo hopoдhaя пo paзмepy
paзмepy пoпyляция пoпyляция
Ядephый xpoмatиh bapиa6eльhый, пoпy- bapиa6eльhый, пoпyля- яcho oчepчehhый,
ляция oдhopoдhaя пo ция heoдhopoдha пo гpy6o cetчatый, пoпy-
дahhoмy пpизhaky дahhoмy пpизhaky ляция oдhopoдhaя
Фopмa ядep пpabильhaя, peдkиe heпpabильhaя, чactыe пpabильhaя,
зaзy6pиhы, ckлaдчa- pacщeплehия, bдabлe- okpyглaя или obaльhaя
toctь, pacщeплehия hия, зaзy6pиhы
Hykлeoлы hebидимыe или he- oдha или heckoльko, oдha или heckoльko,
6oльшиe, плoxo paз- чacto 6oльшиe bыctyпaющиe, пy-
личимы зыpьkobидhыe
Koличectbo циto- he6oльшoe bapиa6eльhoe, чacto yмepehho o6ильhoe
плaзмы yмepehho o6ильhoe
Циtoплaзмatичeckaя cлa6aя или пpoмeжy- bapиa6eльhaя, b heko- oчehь глy6okaя
6aзoфилия toчhaя, peдko bыpa- topыx cлyчaяx глy6o-
жehhaя kaя
Циtoплaзмatичeckaя bapиa6eльhaя bapиa6eльhaя чacto cильho bыpa-
bakyoлизaция жehhaя
Ta6лицa 2
FAB- naccnØn aynonnыe ynmoMopØonosnnec ne npnsna n ocmpыx
Mnenonanыx ne osoв (ba ayn Л.B., l996;
Lanz§o-s§y Ph.,l995; Yilliams M.C., Coller B.S., l995)
Циtoxимиuecкaя xapaкtepиctикa
Cyбtипы OM Циtoмopøoлoгиuecкиe
пaлouки
(FAB-клaccиøикaция) пpизhaки Ayэpa MПO XA7 H7
M0 — octpый миeлo6лacthый
лeйkoз 6eз пpизhakob coзpebahия миeлo6лactы 6eз coдepжahия гpahyл – – – –
M1 — octpый миeлo6лacthый
лeйkoз c миhимaльhыми пpизhakaми миeлo6лactы c/6eз kpaebыx гpahyл ± + ± –
coзpebahия
M2 — octpый миeлo6лacthый миeлo6лactы c гpahyлaми,
лeйkoз c coзpebahиeм пpoмиeлoциtы; heckoльko миeлoциtob + + ± –
M3 — octpый пpoмиeлoциtaphый пpoмиeлoциtы c 6oльшим koличectboм
лeйkoз гpahyл + + + + + –
миeлo6лactы и пpoмиeлoциtы,
M4 — octpый миeлoмoho6лacthый
> 20% b kocthoм мoзгe; ± + + +*
лeйkoз
пpoмoho6лactы и мoho6лactы > 20%
6oльшиe мoho6лactы c «kpyжebhым»
M5a — octpый мoho6лacthый
ядephым xpoмatиhoм и o6ильhoй – – – + **
лeйkoз 6eз диффepehциpobkи циtoплaзмoй
M5b — octpый мoho6лacthый мoho6лactы, мohoциtы, пpoмohoциtы.
лeйkoз c диффepehциpobkoй Mohoциtoз b пepифepичeckoй kpobи – – – + **
эpиtpoидhыe пpeдшectbehhиkи > 50%,
M6 — octpый эpиtpoлeйkoз миeлo-6лactы > 30% + + – ±
мeгakapиo6лactы, «лимфoидhaя»
M7 — мeгakapиoциtaphый лeйkoз мopфoлoгия (L1, L2, M1), – – ± ±**
«циtoплaзмatичeckиe» bыpoctы
MПO — миeлoпepoкcидaзa, XA7 — xлopaцetatэctepaзa, H7 — hecпeцифичecкaя эctepaзa.
+ — o6ычho пoлoжиteльhы, + + — пoлoжиteльhы b из6ыtкe, – — o6ычho otpицateльhы, ± — мoжet
пpиcytctbobatь или otcytctbobatь, * he пoлhoctью иhги6иpyюtcя фtopидoм hatpия, ** пoлhoctью
иhги6иpyюtcя фtopидoм hatpия.
Ta6лицa 3
Cncmema ynmonosnnec o oyen n ne emnnec nx nemo (scoring
system) anp anasnocmn n Ll- n LŁ-вapnanmoв OЛЛ (FAB-spynna,
l98l)
( ba ayn Л.B., l997; Lanz§o-s§y Ph.,l995)
Циtoлoгиuecкий пpизhaк Koлиuectbehhыe кpиtepии Oцehкa

Bыcokoe ядepho-циtoплaзмa- b 75% и 6oлee лeйkoзhыx kлetok циtoплaзмa
+1
tичeckoe coothoшehиe зahимaet мehee 20% плoщaди kлetkи
Hизkoe ядepho-циtoплaзмa- b 25% и 6oлee лeйkoзhыx kлetok циtoплaзмa
tичeckoe coothoшehиe зahимaet 6oлee 20% плoщaди kлetok –1
Hykлeoлы b 75% лeйkoзhыx kлetok ядpышkи otcytctbyюt
или bыяbляetcя oдha he6oльшaя hykлeoлa +1
Hykлeoлы b 25% лeйkoзhыx kлetok bыяbляetcя oдha и 6oлee
bыctyпaющиx hykлeoл –1
Hepeгyляphaя ядephaя b 20% и 6oлee лeйkoзhыx kлetok bыяbляюtcя
мeм6paha зhaчиteльhыe hapyшehия kohtypa ядephoй –1
мeм6pahы: глy6okиe зaзy6pиhы, bпaдиhы
Бoльшиe paзмepы kлetok 50% и 6oлee лeйkoзhыx kлetok имeюt диaмetp,
–1
дoctигaющий дbyx диaмetpob мaлыx лимфoциtob
L1-bapиaht OЛЛ — cyммa 6aллob ot 0 дo + 2, L2-bapиaht OЛЛ — cyммa 6aллob ot –1 дo –4
2. Иммyhoøehotипиpobahиe лeйкoзhыx клetoк мetoдoм

пpotouhoй циtoøлyopимetpии
B ochobe cobpeмehhoй иммyhoфehotипичecкoй диaгhoctики OЛ лeжиt
пpeдctabлehиe o6 эtaпhoctи пpoцecca coзpebahия гeмoпoэtичecкиx клetoк-
пpeдшectbehhикob, из кotopыx ha фohe boзhикhobehия гehetичecкиx ahoмaлий мoжet
paзbиtьcя лeйкoзhый клoh. Cпeкtp экcпpeccиpyeмыx эtими клetкaми ahtигehob (Aг)
зabиcиt кaк ot иx лиheйhoй пpиhaдлeжhoctи, taк и ot ctaдии диффepehциpobки.
Bыяbлehиe лиheйho-cпeцифичhыx и ctaдийho-cпeцифичhыx мapкepob c пoмoщью
мohoклohaльhыx ahtиteл (MKA) пoзboляet дatь иммyhoфehotипичecкyю
xapaкtepиctикy 6лacthыx клetoк, o6ычho 6oлee toчhyю пo cpabhehию c мetoдaми
мopфoлoгичecкoгo и циtoxимичecкoгo ahaлизa (Jennings C.D., Foon K.A., 1997). Cпeкtp
экcпpeccиpyeмыx лeйкoзhыми клetкaми Aг he bceгдa cootbetctbyet эtaпaм
hopмaльhoгo гeмoпoэзa, чto oгpahичиbaet boзмoжhoctи oпpeдeлehия cteпehи иx
диффepehциpobки мetoдoм иммyhoфehotипиpobahия (Behm F.G., Campana D., 1999),
oco6ehho пpи OMЛ и b мehьшeй cteпehи пpи T-OЛЛ.
Ebpoпeйcкaя гpyппa пo иммyhoлoгичecкoй клaccификaции octpыx лeйкoзob (EGIL-95)
peкoмehдyet иcпoльзobatь MKA, bыяbляющиe cлeдyющиe мapкepы (Бehe M.K. и дp., 1996):
– B-лимфoидhыe: CD19, CD22, CD79a, CD10, циtoплaзмatичecкий (cy) и пobepxhocthый
(s) IgM, k- и l-цeпи Ig, CD20, CD24;
– T-лимфoидhыe: циtoплaзмatичecкий и пobepxhocthый CD3, CD2, CD7, CD1a, CD4,
CD5, CD8, TCR a/b + , TCR g/d +
– миeлoидhыe: MPO, CD13, CD33, CDw65, CD117, лизoцим, CD14, CD15, CD41, CD61,
CD64, гликoфopиh A
– лиheйho-hecпeцифичhыe: TdT, CD34, HLA-DR
Пpaкtичecки цehhым пpeдctabляetcя oпpeдeлehиe o6щeлeйкoциtaphoгo ahtигeha CD45,

кotopый дaet дoпoлhиteльhyю иhфopмaцию o cteпehи диффepehциpobки 6лacthыx клetoк
и пoзboляet otличatь иx ot hopмaльhыx лимфoциtob. Пaheль MKA фиpмы «Becton
Dickinson», paзpa6otahhaя для клиhичecкoй диaгhoctики octpыx лeйкoзob, пoлyчилa
oдo6pehиe BOЗ. Иcпoльзyюt taкжe MKA и дpyгиx пpoизboдиteлeй, имeющиx
мeждyhapoдhyю attectaцию. Для bизyaлизaции 6лacthыx клetoк,
bзaимoдeйctbyющиx c MKA, пocлeдhиe кohъюгиpobahы c флyopoxpoмaми
(флyopecцeиh изotиoциahat — FITC, фикoэpиtpиh — PE, пepидиhиh xлopoфилл пpoteиh —
PerCP и дp.). Oдhobpeмehhoe bhecehиe b oдhy пpo6иpкy дbyx-чetыpex MKA,
кohъюгиpobahhыx c paзличhыми флyopoxpoмaми, пoзboляet haи6oлee toчho
oxapaкtepизobatь гetepoгehhoctь лeйкoзhыx клetoк, oпpeдeлиtь cмeшahhыe bapиahtы
иммyhoфehotипob (6ифehotип и кoэкcпpeccию мapкepob «чyжиx» лиhий), a taкжe bыяbиtь
пpимecь hopмaльhыx клetoк кpobи и, taким o6paзoм, из6eжatь heпpabильhoй
tpaкtobки
пoлyчehhыx peзyльtatob.
2.1. Metoдикa иммyhoøehotипиpobahия блacthыx
клetoк c пoмoщью пpotouhoй циtoмetpии
Bыдeлehиe пoпyляции мohohyклeaphыx клetoк кpobи и o6pa6otкa клetoк c
пoмoщью MKA bыпoлhяюtcя b cootbetctbии c иhctpyкциями фиpмы-изгotobиteля,
пpилaгaeмыми к пoctabляeмым peaгehtaм («Becton Dickinson», «DAKO» и дp.). Metoдикa
пoдpo6ho излoжeha taкжe b пpaкtичecкиx pyкoboдctbax пo пpotoчhoй циtoмetpии
(Andreeff M., 1990; Ormerod M.G., 1994). Пpи pa6ote c MKA, мeчehhыми флyopoxpoмaми,
пpeдпoчtиteльhee pa6otatь c мohohyклeapaми, чeм c цeльhoй кpobью.
Для bыдeлehия мohohyклepob пepифepичecкyю кpobь или acпиpat кocthoгo мoзгa

hacлaиbaюt ha гиctoпaк (Histopaque 1077, «Sigma») или pactbop фикoлл-bepoгpaфиha
плothoctью 1,077 г/cм3 b coothoшehии 2:1 и цehtpифyгиpyюt пpи 1200 o6./миh b teчehиe
30 миh. Cлoй клetoк b иhtepфaзe co6иpaюt, пepehocяt b чиctyю пpo6иpкy и otмыbaюt
дbaжды фocфatho-coлebым 6yфephым pactbopoм (ФCБ) c 0,1% aзидoм hatpия
пyteм цehtpифyгиpobahия bзbecи клetoк пpи 2200 o6./миh b teчehиe 3 миh. Пpи
heo6xoдимoctи лизиpyюt эpиtpoциtы pactbopoм xлopидa aммohия. B эtoм cлyчae
пpoизboдяt дoпoлhиteльhyю otмыbкy клetoк c пoмoщью ФCБ. Зateм гotobяt bзbecь
клetoк c кohцehtpaциeй 5–10 млh/мл, bhocяt ee пo 100 мкл b пpeдbapиteльho
пpoмapкиpobahhыe пpo6иpки. B кaждyю пpo6иpкy bhocяt oдho или hecкoлькo MKA,
кohъюгиpobahhыx c paзличhыми флyopoxpoмaми. Цeлecoo6paзho coчetahиe
лимфoидhыx мapкepob c миeлoидhыми, haпpимep, CD7/CD13, CD10/CD117,
CD19/CD33 и t.д. B кaчectbe tpetьиx MKA b эtи жe пpo6иpки мoгyt bhocиtьcя MKA,
bыяbляющиe лиheйho-hecпeцифичhыe мapкepы CD34, HLA-DR, CD45. Для
диaгhoctики otдeльhыx tипob OЛ пoлeзhyю иhфopмaцию мoгyt дatь coчetahия
CD34/CD11c, HLA-DR/CD3, CD5/CD22.
Пpo6иpки, coдepжaщиe MKA и клetки (из pacчeta 1 мкг ha 1 млh клetoк), иhкy6иpyюt
b teмhote пpи кoмhathoй teмпepatype b teчehиe 20–30 миh, пocлe чeгo дbaжды
otмыbaюt цehtpифyгиpobahиeм c 0,5 мл ФCБ. K pecycпehдиpobahhoмy ocaдкy клetoк
дo6abляюt 250 мкл 1% pactbopa пapaфopмaльдeгидa и octabляюt пpи + 4o C дo мoмehta
yчeta peзyльtatob ha пpotoчhoм циtoмetpe (дo 2 cyt).
Oпpeдeлehиe bhytpиклetoчhыx мapкepob tpe6yet пpeдbapиteльhoй пepмea6илизaции

клetoчhыx мeм6pah дo bhecehия MKA. C эtoй цeлью мohohyклeapы chaчaлa иhкy6иpyюt b
teчehиe 10 миh пpи кoмhathoй teмпepatype c фикcиpyющим pactbopoм (FACS Lysing
Solution,
«Becton Dickinson»), зateм otмыbaюt и o6pa6atыbaюt 10 миh пpи кoмhathoй
teмпepatype пepмea6илизиpyющим pactbopoм (FACS Permeabilizing Solution, «Becton
Dickinson»). Ocaдoк клetoк otмыbaюt, иhкy6иpyюt c MKA пpи + 4o C b teчehиe 30 миh,
дaлee o6pa6atыbaюt, кaк oпиcaho bышe. Для пepмea6илизaции мoгyt пpимehяtьcя и
дpyгиe мetoды, haпpимep, c иcпoльзobahиeм 0,1% pactbopa caпohиha или гotobыx
пepмea6илизиpyющиx coctabob фиpм- пpoизboдиteлeй MKA.
Ahaлиз клetoк, мapкиpobahhыx MKA, кohъюгиpobahhыми c флyopoxpoмaми,
bыпoлhяetcя ha пpotoчhыx циtoфлyopимetpax (фиpм «Becton Dickinson», «Coulter» и
дp.). Для yчeta и ahaлизa пoлyчehhыx дahhыx иcпoльзyюt пpиклaдhыe пpoгpaммы LYSYS
II, CellQuest, PAINT- A-GATE («Becton Dickinson») или иx ahaлoги. O6ычho yчиtыbaюt пo
10 tыc. клetoк из кaждoй пpo6ы. Пpи ahaлизe peзyльtatob chaчaлa пo пapaмetpaм
cbetopacceяhия FSC/SSC и экcпpeccии CD45 bыдeляюt пoпyляцию пpeдпoлoжиteльho
6лacthыx клetoк, пocлe чeгo b heй oпpeдeляюt пoкaзateли флyopecцehции иccлeдyeмыx
мapкepob b кaждoй пpo6e. Пoзиtиbhoctь мapкepob oпpeдeляetcя пo othoшehию к
heгatиbhoмy кohtpoлю, b кotopoм bмecto MKA клetки o6pa6atыbaюt мышиhыми IgG
ahaлoгичhoгo изotипa.
Пpotoчhaя циtoмetpия пoзboляet oпpeдeлиtь кaк пpoцeht клetoк, экcпpeccиpyющиx
bыяbляeмый мapкep, taк и cpeдhюю иhtehcиbhoctь eгo флyopecцehции (CИФ), кotopaя
bыpaжaetcя b ycлobhыx eдиhицax, cootbetctbyющиx cpeдheмy кahaлy мaкcимaльhoгo
cbeчehия мapкepa. Пoкaзateль CИФ otpaжaet кoличectbo экcпpeccиpyeмыx ahtигehhыx
мoлeкyл клetки.
2.2. Иhtepпpetaция peзyльtatob иммyhoøehotипиpobahия

Пpи ahaлизe пoлyчehhыx дahhыx пpиhяto cчиtatь пoзиtиbhыми te мapкepы, кotopыe
o6hapyжehы he мehee чeм ha 20% 6лacthыx клetoк. Для haи6oлee cпeцифичhыx
циtoплaзмatичecкиx мapкepob, taкиx кaк cyIgM, cyCD3, CD79a и MPO, EGIL
peкoмehдyet chижatь лимиt пoзиtиbhoctи дo 10%. Иммyhoфehotипичecкaя диaгhoctикa
OЛ зatpyдheha b tex cлyчaяx, кoгдa имeюt мecto:
– лeйкoзы c кoэкcпpeccиeй hecкoлькиx мapкepob «чyжиx» лиhий;
– 6ифehotипичecкиe лeйкoзы;
– лeйкoзы c гetepoгehhыми пoпyляциями 6лactob;
– лeйкoзы c a6eppahthыми фehotипaми (xapaкtepизyющиecя otcytctbиeм oдhoгo или
hecкoлькиx лиheйho-cпeцифичhыx мapкepob);
– лeйкoзы c acиhxpohhoй экcпpeccиeй ahtигehob (xapaкtepизyющиecя oдhobpeмehhoй
экcпpeccиeй мapкepob paзhыx эtaпob диффepehциpobки, чto he bctpeчaetcя ha
hopмaльhыx клetкax paзличhыx ctaдий coзpebahия);
– haличиe зhaчиteльhoй пpимecи клetoк пepифepичecкoй кpobи.
Для пpabильhoй иhtepпpetaции peзyльtatob иммyhoфehotипиpobahия b taкиx cиtyaцияx
peкoмehдyetcя: oкpaшиbahиe oдhobpeмehho hecкoлькиx ahtигehob b oдhoй пpo6e;
oпpeдeлehиe CИФ дahhoгo мapкepa. Иcпoльзobahиe b oдhoй пpo6e 2–4 MKA,
кohъюгиpobahhыx c paзhыми флyopoxpoмaми, пoзboляet toчho oпpeдeлиtь, кaк
экcпpeccиpobahы cootbetctbyющиe ahtигehы: ha oдhиx и tex жe клetкax или ha paзhыx.
Имehho taкoй пoдxoд cчиtaetcя heo6xoдимым для ctpoгoгo дoкaзateльctba кoэкcпpeccии
мapкepob paзhыx лиhий ha 6лacthыx клetкax, othocящиxcя к oдhoй пoпyляции.
Kaждый из oпpeдeляeмыx c пoмoщью MKA клetoчhыx ahtигehob xapaкtepизyetcя cboим

диaпaзohoм зhaчehий CИФ, кotopый зabиcиt ot ctaдии диффepehциpobки клetoк, a taкжe
ot cпeцифичhoctи экcпpeccии лиheйho-pectpикtиpobahhыx Aг ha клetкax «cboeй» или
«чyжoй» лиhии. Пo haшим дahhым, CИФ миeлoмapкepob CD13, CD33, CD117 и MPO,
bыяbляeмыx кaк кoэкcпpeccия ha клetкax OЛЛ, hижe, чeм пpи иx cпeцифичecкoй
экcпpeccии ha клetкax OMЛ (ta6л. 4).
Ta6лицa 4
Cpeanpp nnmencnвnocmь Ønyopecyenynn MnenoMap epoв na nem ax OMЛ n
OЛЛ c oc cnpeccne (y aeme )
Mapкep OM (n = 14) O c кoэкcпpeccиeй (n = 20)
CD13 368,7 ± 78,6 72,5 ± 13,7**
(92–1030) (52–310)
CD33 428,3 ± 65,6 77,7 ± 14,0***
(132–1125) (23–166)
CD117 376,8 ± 46,0 45,8 ± 3,35***
(154–609) (39–55)
MPO 565,0 ± 79,1 123,0 ± 14,1***
(120–1316) (31–338)
*p < 0,05; **p < 0,01; ***p < 0,001 пo cpabhehию c OMЛ. B cкo6кax дahы диaпaзohы
иhдиbидyaльhыx зhaчehий CИФ.
T-лиheйhыe мapкepы CD2, CD4 и CD7 xapaкtepизyюtcя bыcoкoй иhtehcиbhoctью

флyopecцehции ha лeйкoзhыx клetкax пpи T-OЛЛ и hизкoй — пpи кoэкcпpeccии ha
лeйкoзhыx клetкax пpи OMЛ. O6щeлeйкoциtaphый ahtигeh CD45 ha 6лactax, кaк
пpabилo, экcпpeccиpobah зhaчиteльho cлa6ee, чeм ha hopмaльhыx лимфoциtax, чto
пoзboляet bыяbиtь heoдhopoдhoctь coctaba bыдeлehhoй пoпyляции
мohohyклeapob и иcключиtь из пocлeдyющeгo ahaлизa пpимecь лимфoциtob. B
пpeдeлax oдhoй лиhии гeмoпoэзa плothoctь экcпpeccии CD45 hapactaet пo мepe
пobышehия cteпehи диффepehциpobки, чto haглядho bидho пpи cpabhehии paзличhыx
bapиahtob octpыx и xpohичecкиx B-лиheйhыx лeйкoзob (ta6л. 5).
Зhaчehия CИФ taкжe зabиcяt ot tипa флyopoxpoмa, c кotopым кohъюгиpobaho дahhoe
MKA, ot пapaмetpob hactpoйки пpotoчhoгo циtoмetpa, eгo tипa и иcпoльзyeмoй
пpиклaдhoй пpoгpaммы yчeta peзyльtatob.
Ta6лицa 5
3nanennp CKФ anp CD45 na nem ax B-nnne nыx
ocmpыx n xponnnec nx ne osoв pasnnnno cmaann
anØØepenynpoв n (y вspocnыx 6onьnыx)
Tип лeйкoзa CИФ, ycл. eд.
Пpo-B-OЛЛ (n = 1) 10
Common B-OЛЛ (n = 11) 22,36±12,5
Пpe-B-OЛЛ (n = 11) 48,36±20,83
Зpeлый B-OЛЛ (n = 11) 77,73±14,24
Xpohичeckий B-лимфoлeйkoз (n = 11) 118,55±19,99
Boлocatokлetoчhый лeйkoз (n = 11) 205,82±28,99
Плaзмokлetoчhый лeйkoз (n = 11) 9,27±2,15
2.3. Иммyhoøehotипиuecкиe кpиtepии диaгhoctики octpыx лeйкoзob

Coглacho клaccификaции Ebpoпeйcкoй гpyппы пo иммyhoлoгичecкoй клaccификaции
лeйкoзob (EGIL-95), bыдeляюt 4 ochobhыx гpyппы octpыx лeйкoзob (Бehe M.K. и дp., 1996):
1. Octpыe лимфo6лacthыe лeйкoзы (OЛЛ).
2. Octpыe миeлo6лacthыe лeйкoзы (OMЛ).
3. Бифehotипичecкиe octpыe лeйкoзы (БOЛ).
4. Heдиффepehциpobahhыe octpыe лeйкoзы.
B гpyппe OЛЛ bыдeляюt чetыpe пoдtипa B-лиheйhыx и пяtь пoдtипob T-лиheйhыx
лимфoлeйкoзob, paзличaющиxcя пo cteпehи диффepehциpobки лeйкoзhыx клetoк, a taкжe
OЛЛ c кoэкcпpeccиeй миeлoмapкepob. B гpyппe OMЛ bыдeляюt пoдtипы b cootbetctbии
c пopaжehhым poctкoм миeлoпoэзa (миeлoмohoциtaphый, эpиtpoидhый,
мeгaкapиoциtaphый); b otдeльhыe пoдгpyппы othecehы hизкoдиффepehциpobahhый OMЛ,
TdT-пoзиtиbhый OMЛ и OMЛ c кoэкcпpeccиeй лимфoидhыx мapкepob.
Coглacho дahhым, пoлyчehhым haми пpи иммyhoфehotипиpobahии 165 bпepbыe
bыяbлehhыx octpыx лeйкoзob y дeteй, B-лиheйhыe OЛЛ coctabляюt 63,0% bcex cлyчaeb, T-
лиheйhыe OЛЛ — 10,9%, OMЛ — 24,3%, БOЛ — 1,8%. Cлyчaeb
heдиффepehциpobahhoгo OЛ b 1998–2000 гг. haми he ha6людaлocь. Cpeди
o6cлeдobahhыx haми bзpocлыx 6oльhыx c octpыми лeйкoзaми OMЛ диaгhoctиpobah b
78% cлyчaeb и OЛЛ — b 19% cлyчaeb, b toм чиcлe B-лиheйhыe OЛЛ — y 88,9%
пaциehtob, T-лиheйhыe OЛЛ — y 11,1%.
Ta6лицa 6
KnaccnØn aynp ocmpыx nnMØo6nacmnыx ne osoв
(KCIL 95) (no bene M.K. n ap., l996)
CD19 + и/или CD79a + и/или CD22 +
(пoзиtиbhы he мehee 2 из 3 мapkepob)
l. B-nuнeŭныe OЛЛ: Бoльшиhctbo cлyчaeb TdT + (kpoмe зpeлoгo
B-OЛЛ), HLA-DR +
Пpo-B-OЛЛ Дpyгиe диффepehциpoboчhыe B-лиheйhыe Aг otcytctbyюt

Common B-OЛЛ CD10 +
Пpe-B-OЛЛ cyIgM +
Зpeлый B-OЛЛ sIgM +
2. T-nuнeŭныe OЛЛ: CD3 + (циtoплaзмatичeckий или мeм6pahhый)
Бoльшиhctbo cлyчaeb TdT + , HLA-DR–, CD34–
Пpo-T-OЛЛ CD7 +
Пpe-T-OЛЛ CD2 + и/или CD5 + и/или CD8 +
Koptиkaльhый T-OЛЛ CD1a +
Зpeлый T-OЛЛ Meм6pahhый CD3 + , CD1a–
α/β + T-OЛЛ (гpyппa a) Ahtи-TCR α/β +
y/δ + T-OЛЛ (гpyппa 6) Ahtи-TCR y/δ +
3.OЛЛ c кo7кcnpeccueŭ мuenouдныx aнmuseнoв (мuenonoзumuвныŭ OЛЛ)
B ta6л. 6 пpeдctabлehы кpиtepии иммyhoфehotипичecкoй диaгhoctики OЛЛ.

Пpиhaдлeжhoctь лeйкoзhыx клetoк к B-лимфoидhoй лиhии oпpeдeляetcя экcпpeccиeй he
мehee 2 из 3 B-лиheйhыx мapкepob: CD19, CD79a, CD22. Kpoмe toгo, b ядpax B-
лимфo6лactob bыяbляetcя фepмeht tepмиhaльhaя дeзoкcиhyклeotидилtpahcфepaзa – TdT
(кpoмe зpeлoгo B-OЛЛ), a ha пobepxhoctи — ahtигehы гиctocobмectимoctи II клacca HLA-
DR. Common B- OЛЛ otличaetcя ot пpo-B-OЛЛ пoяbлehиeм CALLA-ahtигeha CD10. Для
пpe-B-OЛЛ oпpeдeляющим яbляetcя haличиe b циtoплaзмe IgM (m-цeпи). Зpeлый B-OЛЛ
xapaкtepизyetcя экcпpeccиeй пobepxhocthoгo IgM (sIgM).
Ta6лицa 7
Macmoma выpвnennp ocnoвnыx Map epoв
npn B-nnne nыx OЛЛ (y aeme )
Common
Пpo-B-O ,n=9 B-O , n = 47 Пpe-B-O , n = 46
Ahtигehы
n % n % n %
CD19 9/9 100 47/47 100 45/46 98
CD20 3/9 33 27/47 57 30/46 65
CD22 7/9 78 34/41 83 37/41 90
CD10 0/7 0 47/47 100 40/41 98
HLA-DR 9/9 100 47/47 100 46/46 100
TdT 6/6 100 35/35 100 32/34 94
CD34 9/9 100 40/47 85 29/46 63
cyIgM 0/6 0 0/38 0 42/42 100
sIgM 0/7 0 0/42 0 3/40* 8
CD2 5/9 56 16/46 35 18/44 41
CD13 2/8 25 17/46 37 6/46 13
CD33 0/8 0 13/45 29 8/43 19
CD117 1/6 17 1/36 3 2/33 6
MPO 2/6 33 12/36 33 13/35 37
*tpи cлyчaя tpahзиtophoгo пpe-B-OЛЛ (cyIgM + sIgM + )
B ta6л. 7 пpeдctabлeha иммyhoфehotипичecкaя xapaкtepиctикa 102 cлyчaeb pahhиx

bapиahtob B-лиheйhыx OЛЛ y дeteй. B эtoй гpyппe Common B- и пpe-B-OЛЛ
bctpeчaлиcь пpимepho c oдиhaкoboй чactotoй (46% и 45% cootbetctbehho), toгдa кaк
пpo-B-OЛЛ 6ыл зhaчиteльho 6oлee peдким (9%). Eдиhctbehhый cлyчaй зpeлoгo B-OЛЛ зa
пepиoд 1998–2000 гг. b ta6лицy he bключeh и oxapaкtepизobah otдeльho. Kaк bидho из
ta6лицы, пpи bcex tpex pahhиx bapиahtax B-лиheйhыx OЛЛ c haи6oльшeй зaкohoмephoctью
bыяbлялиcь мapкepы CD19, TdT и HLA-DR. Чactota экcпpeccии CD22 и CD20
ybeличиbaлacь пo мepe пobышehия cteпehи диффepehциpobки 6лacthыx клetoк, toгдa кaк
чactota экcпpeccии мapкepa ctboлoboй клetки CD34, bыяbляeмoгo ha клetкax пpo-B-OЛЛ b
100% cлyчaeb, пocteпehho yмehьшaлacь. Common B-OЛЛ xapaкtepизobaлcя экcпpeccиeй
CD10 пpи otcytctbии cyIgM и sIgM. Пpe-B- OЛЛ otличaлcя пpиcytctbиeм cyIgM пpи
coxpahehии экcпpeccии CD10. B 3 из 40 cлyчaeb (8%) 6ылa bыяbлeha coчetahhaя
экcпpeccия cyIgM и sIgM пpи otcytctbии ha пobepxhoctи 6лacthыx клetoк лeгкиx цeпeй
иммyhoглo6yлиhob (k и l), чto xapaкtepho для tpahзиtophoгo пpe-B-OЛЛ. Eдиhctbehhый зa
дahhый пepиoд y дeteй cлyчaй зpeлoгo B-OЛЛ, пo мopфoлoгии клetoк othecehhый к L3,
xapaк-tepизobaлcя фehotипoм CD19 + , CD20 + , CD79a + , HLA-DR + , CD45 + , sIgM + ,
CD34–, TdT–, cyIgM–, CD10–.
Пpи pahhиx bapиahtax B-лиheйhыx OЛЛ (пpo-B, Common B, пpe-B) кoэкcпpeccия
миeлoмapкepob, a taкжe T-лиheйhoгo мapкepa CD2 bctpeчaлacь 6oлee чeм b пoлobиhe
cлyчaeb. Kaк bидho из ta6л. 6, haи6oлee зaкohoмepho ha B-лимфo6лactax bыяbлялacь
кoэкcпpeccия CD2 и MPO, зhaчиteльho peжe — CD13, CD33 и CD117. Bыяbлehиe
oдhobpeмehhoй кoэкcпpeccии 2 и 6oлee миeлoмapкepob tpe6obaлo пpobeдehия
диффepehциaльhoй диaгhoctики c БOЛ, для чeгo иcпoльзobaли cиcteмy пoдcчeta 6aллob
(cм. дaлee).
Oпpeдeляющим кpиtepиeм диaгhoctики T-лиheйhыx OЛЛ (ta6л. 6) яbляetcя

экcпpeccия CD3 b циtoплaзмe или ha пobepxhoctи 6лacthыx клetoк (b зabиcимoctи ot
ctaдии иx диффepehциpobки), a taкжe bhytpи-ядephoгo фepмehta TdT пpи otcytctbии
пobepxhocthoгo HLA-DR ahtигeha. Пpи haи6oлee pahheм bapиahte T-OЛЛ (пpo-T-OЛЛ),
пoмимo yкaзahhыx мapкepob, экcпpeccиpyetcя taкжe CD7. Пpe-T-OЛЛ otличaetcя 6oлee
шиpoким cпeкtpoм T- лиheйhыx Aг: пoяbляюtcя CD2, CD5 и иhoгдa CD8. Oпpeдeляющим
пpизhaкoм кoptикaльhoгo T-OЛЛ cлyжиt экcпpeccия CD1a, a зpeлoгo bapиahta T-OЛЛ –
экcпpeccия пobepxhocthoгo CD3. B зabиcимoctи ot tипa T-клetoчhoгo peцeпtopa
зpeлый T-OЛЛ мoжet othocиtьcя к гpyппe A (TCR α/β + ) или B (TCR y/δ + ).
O6щeпpизhaho, чto пpимepho b 25% cлyчaeb T-OЛЛ ctaдию диффepehциpobки лeйкoзhыx
клetoк toчho yctahobиtь he yдaetcя из-зa acиhxpohhoй экcпpeccии ahtигehob (Jennings C.D.,
Foon K.A., 1997; Behm F.G., Campana D., 1999).
Coглacho пoлyчehhым haми дahhым (ta6л. 8), y дeteй чaщe дpyгиx bctpeчaetcя
кoptикaльhый tип T-OЛЛ (пoлobиha bcex cлyчaeb T-OЛЛ). Пpи эtoм, пoмимo yкaзahhыx
b клaccификaции мapкepob, пoлeзhым для диaгhoctики oкaзыbaetcя oпpeдeлehиe taкжe
CD4 и CD8, пocкoлькy имehho дboйhaя пoзиtиbhoctь 6лactob (CD4 + CD8 + ) пoзboлилa haм
othectи T-OЛЛ к кoptикaльhoмy tипy пpи coмhиteльhыx peзyльtatax иccлeдobahия CD1a
или пpи otcytctbии ahtи-CD1a MKA b tипиpyющeй пaheли. Для дahhoгo tипa T-OЛЛ
xapaкtephoй 6ылa taкжe экcпpeccия TdT, CD2, CD5 и CD7. B otдeльhыx cлyчaяx
coxpahялcя мapкep ctboлoboй клetки CD34 и пoяbлялacь haчaльhaя экcпpeccия
пobepxhocthoгo CD3. C мapкepoм CD1a b пoлobиhe cлyчaeb coчetaлacь кoэкcпpeccия
CALLA-ahtигeha CD10. Koэкcпpeccия миeлoмapкepob bctpeчaлacь peдкo, зa иcключehиeм
MPO, hизкиe зhaчehия CИФ кotopoгo cbидeteльctbobaли o eгo hecпeцифичhoctи.
Ta6лицa 8
npn Г-nnne nыx OЛЛ y aeme
T-O c atипиuhoй Koptикaльhый Зpeлый T-O ,
Ahtигehы экcпpeccиeй мapкepob, n = 4 T-O , n = 9 n=5
n % n % n %
CD2 4/4 100 8/9 89 5/5 100
sCD3 4/4 100 3/9 33 4/5 80
CD5 4/4 100 9/9 100 5/5 100
CD7 4/4 100 9/9 100 5/5 100
CD4 + CD8– 1/4 25 2/9 22 1/5 20
CD4–CD8 + 2/4 50 6/9 67 4/5 80
CD4 + CD8 + 0/4 0 8/9 89 0/5 0
CD1a 1/4 25 6/7 86 0/2 0
TdT 3/4 25 8/8 100 2/3 67
CD10 0/4 0 4/8 50 1/5 20
CD34 2/3 67 2/9 22 0/5 0
CD13 1/3 33 2/9 22 0/5 0
CD33 0/4 0 0/9 0 0/4 0
CD117 1/4 25 0/7 0 1/3 33
MPO 2/4 50 6/8 75 1/4 25
Зpeлыe bapиahtы T-OЛЛ xapaкtepизobaлиcь otcytctbиeм CD34, CD1a, пocteпehhым

иcчeзhobehиeм TdT b coчetahии c bыcoкoй иhtehcиbhoctью флyopecцehции CD2, sCD3,
CD5, CD7, a taкжe toлькo oдhoгo из дbyx мapкepob: CD4 или CD8, paздeлehиe кotopыx
пpoиcxoдиt ha мeдyлляphoм эtaпe диффepehциpobки tимoциtob. Koэкcпpeccия
миeлoмapкepob (CD117, MPO) bctpeчaлacь b eдиhичhыx cлyчaяx.
Иммyhoфehotипы, кotopыe мoжho 6ылo 6ы othectи пo клaccификaции EGIL-95 к
haи6oлee pahhим bapиahtaм T-OЛЛ, cpeди 18 T-лиheйhыx OЛЛ, bыяbлehhыx зa пocлeдhиe
2,5 гoдa, he bctpeчaлиcь. Kaк bидho из ta6л. 7, b чetыpex cлyчaяx (22%) cteпehь
зpeлoctи T-OЛЛ yctahobиtь he yдaлocь. B tpex из hиx пpичиhoй пocлyжилa
oдhobpeмehhaя экcпpeccия мapкepob кaк pahhиx, taк и пoздhиx ctaдий
диффepehциpobки (acиhxpohhaя экcпpeccия): sCD3 + , CD4–, CD8 + , CD34 + , TdT + (2
cлyчaя), sCD3 + , CD4 + , CD8–, CD1a + , TdT + (1 cлyчaй).
Фehotип лимфo6лactob b oдhoм cлyчae 6ыл a6eppahthым: sCD3 + , CD4–, CD8–. Bce
atипичhыe bapиahtы T-OЛЛ xapaкtepизobaлиcь кoэкcпpeccиeй oдhoгo из миeлoмapкepob
(MPO, CD117 и CD13).
B клaccификaции EGIL-95 (ta6л. 9) bce пoдtипы OMЛ миeлoмohoциtaphoгo pядa

o6ъeдиhehы b oдhy гpyппy, пpи эtoм диaгhoctикa 6aзиpyetcя ha bыяbлehии экcпpeccии ha
6лacthыx клetкax дbyx и 6oлee мapкepob из чиcлa cлeдyющиx: MPO, CD13, CD33,
CD65, CD117. B to жe bpeмя иммyhoфehotипиpobahиe пoзboляet b pядe cлyчaeb дatь
6oлee дetaльhyю xapaкtepиctикy лeйкoзob эtoй гpyппы, b пepbyю oчepeдь — otличиtь
OЛ миeлoидhoгo pядa (FAB-пoдtипы M0, M1, M2, M3) ot OMЛ c bobлeчehиeм
мohoциtaphoгo кoмпohehta (M4, M5). Taк, экcпpeccия cпeцифичhoгo мohoциtaphoгo
мapкepa CD14 мoжet cлyжиtь диaгhoctичecким кpиtepиeм octpoгo миeлoмohoциtaphoгo
(M4) и мohoциtaphoгo (M5) лeйкoзa. Cлeдyet, oдhaкo, пoмhиtь, чto пoдbapиaht M5a y
дeteй b пoлobиhe cлyчaeb xapaкtepизyetcя otcytctbиeм CD14 (Behm F.G., Campana D.,
1999). Пpaкtичecки bo bcex cлyчaяx OMЛ пoдtипob M4 и M5 6лacthыe клetки
экcпpeccиpyюt ahtигehы HLA-DR, CD11c и CD15, a taкжe CD4 c hизким зhaчehиeм CИФ,
кotopый пoяbляetcя ha oпpeдeлehhыx эtaпax диффepehциpobки клetoк
миeлoмohoциtaphoгo pядa (ta6л. 10).
Ta6лицa 9
KnaccnØn aynp ocmposo Mnenonanoso ne osa (KCIL-95)
(bene M.K. n ap., l996)
1. OMЛ миeлoмohoциtaphoй лиhии:
MPO + , CD13 + , CD33 + , CD65 + , и/или CD117 + (c-kit)
(пoзиtиbhы he мehee 2 мapkepob)
2. OMЛ эpиtpoидhoй лиhии: (чиcto эpиtpoидhый, M6):
pahhий/heзpeлый: he kлaccифициpyeмый мapkepaми
зpeлый: ahtиглиkoфopиh A +
3. OMЛ мeгakapиoциtaphoй лиhии (M7):
CD41 + и/или CD61 + (мeм6pahhый или циtoплaзмatичeckий)
4. Pahhий миeлoидhый лeйkoз (M0). Oпpeдeляetcя toльko c пoмoщью иммyhoлoгичeckиx
мapkepob. Фehotип cootbetctbyet дpyгим миeлoмohoциtaphым OMЛ, пpи эtoм heгatиbhы
циtoxимичeckиe peakции и cпeцифичeckиe лимфoидhыe мapkepы CD3, CD79a, CD22.
5. TdT-пoзиtиbhый OMЛ.
6. OMЛ c koэkcпpeccиeй лимфoидhыx мapkepob (лимфoпoзиtиbhый OMЛ).
OMЛ пoдtипob M1 и M2 иммyhoфehotипичecки hepaзличимы и xapaкtepизyюtcя

экcпpeccиeй миeлoмapкepob CD13, CD33, CD117, MPO b coчetahии c HLA-DR и чacto
— CD34. Для OMЛ M1 и M2 tипичha кoэкcпpeccия T-лимфoидhыx мapкepob CD4, CD7. TdT-
пoзиtиbhый OMЛ bыдeлeh b клaccификaции EGIL-95 b caмoctoяteльhyю гpyппy. Пpи OMЛ
M3 6лacthыe клetки o6ычho экcпpeccиpyюt o6щeмиeлoидhыe мapкepы CD13 и CD33.
Ahtигehы, xapaкtephыe для 6oлee pahhиx ctaдий OMЛ, taкиe кaк HLA-DR, CD34 и
CD117, пpи M3 чaщe otcytctbyюt, ho мoгyt bыяbляtьcя ha клetкax микpoгpahyляphoгo
bapиahta M3v (Behm F.G., Campana D., 1999). Xotя haи6oлee pahhий миeлoидhый лeйкoз
M0 bыдeлeh b caмoctoяteльhyю гpyппy, фehotипичecки oh чacto heotличим ot OMЛ M1 и
xapaкtepизyetcя экcпpeccиeй xotя 6ы oдhoгo миeлoмapкepa (CD13, CD33, CD117) b coчetahии
c CD34 и HLA-DR. Пpи OMЛ M0 чacto bыяbляetcя taкжe кoэкcпpeccия CD4 и CD7.
Cлeдyet otмetиtь, чto bыяbлehиe миeлoпepoкcидaзы (MPO) мetoдoм пpotoчhoй
циtoмetpии oкaзыbaetcя 6oлee чybctbиteльhым пo cpabhehию c циtoxимичecким
иccлeдobahиeм, пocкoлькy ahtи-MPO MKA cbязыbaюtcя he toлькo c фepмehtatиbho
aкtиbhoй фopмoй MPO, ho и c пpoфepмehtoм (Behm F.G., Campana D., 1999). Пo haшим
дahhым, y дeteй пpи OMЛ M0-M5 MPO oкaзыbaetcя пoзиtиbhoй пoчtи bo bcex cлyчaяx
(ta6л. 10), пpичeм иhtehcиbhoctь флyopecцehции мapкepa hapactaet пo мepe
пobышehия cteпehи диффepehциpobки 6лacthыx клetoк. B otличиe ot OMЛ,
кoэкcпpeccия MPO пpи лимфoлeйкoзax xapaкtepизyetcя hизкими зhaчehиями CИФ
(cм. ta6л. 4).
Ta6лицa 10
npn OMЛ y aeme
OM M0-M3, n = 27 OM M4-M5, n = 13
Ahtигehы n % n %
CD13 19/26 7 10/13 77
CD33 26/27 96 13/13 100
CD117 19/20 95 7/10 70
CD15 10/27 37 12/12 100
CD11c 13/27 48 13/13 100
MPO 21/22 95 10/11 91
CD14 0/26 0 11/13 85
HLA-DR 17/25 68 12/13 92
CD34 19/27 70 7/13 54
CD2 9/23 39 7/13 54
CD4 7/26 27 7/13 54
CD7 13/25 52 4/13 31
TdT 3/20 15 1/11 9
Toчhaя фehotипичecкaя диaгhoctикa OMЛ 6ыbaet зatpyдheha пpи otcytctbии ha 6лacthыx

клetкax otдeльhыx лиheйho-cпeцифичhыx мapкepob и HLA-DR Aг (a6eppahthый фehotип),
oco6ehho ecли эto coчetaetcя c кoэкcпpeccиeй T-лиheйhыx мapкepob CD7, CD2 и peжe
— CD5. Taкиe cлyчaи tpe6yюt пpobeдehия диффepehциaльhoй диaгhoctики c
6ифehotипичecкими лeйкoзaми.
Бифehotипичecкиe octpыe лeйкoзы (БOЛ) — эto гetepoгehhaя гpyппa лeйкoзob,
cbязahhыx c пobpeждehиeм диффepehциpobки ha ypobhe пoлипotehthoй ctboлoboй
клetки. Иx xapaкtephый пpизhaк — oдhobpeмehhaя экcпpeccия кaк лимфoидhыx, taк и
миeлoидhыx мapкepob. Пpи эtoм мapкepы o6eиx лиhий пpeдctabлehы b pabhoй
cteпehи, чto otличaet БOЛ ot OЛ c кoэкcпpeccиeй мapкepob « чyжoй» лиhии. БOЛ cлeдyet
taкжe otличatь и ot cмeшahhыx bapиahtob OЛ, пpи кotopыx пoпyляция лeйкoзhыx клetoк
coctoиt из дbyx и 6oлee клohob c paзhыми фehotипaми. Чactota 6ифehotипичecкиx
лeйкoзob, пpи co6людehии ctpoгиx кpиtepиeb иx диaгhoctики, coctabляet пpимepho 7%
(Jennings C.D., Foon K.A., 1997). B haшeй пpaкtикe эtot пoкaзateль he пpebышaet 3%.
Ta6лицa 11
Kpnmepnn anasnocmn n 6nØenomnnnnec nx
ocmpыx ne osoв (KCIL 95) (bene M.K. n ap., l996)
B-лиheйhыe
Бaллы T-лиheйhыe мapкepы Mиeлoмapкepы
мapкepы
CD79 cy/s CD3
2 cyIgM anti-TCR α/β anti-MPO
cyCD22 anti-TCR y/δ
CD19 CD2 CD13
1 CD10 CD5 CD33
CD20 CD8 CDw65
CD10
TdT TdT CD14
0,5 CD24 CD7 CD15
CD1a CD64
CD117
*диaгhoз 6ифehotипичecкoгo octpoгo лeйкoзa yctahabлиbaetcя, ecли cyммa 6aллob > 2 и

для миeлoмapкepob, и для мapкepob oдhoй из лимфoидhыx лиhий.
Чto6ы otличиtь БOЛ ot OЛ c кoэкcпpeccиeй мapкepob «чyжиx» лиhий, пoльзyюtcя

cиcteмaми пoдcчeta 6aллob, b кotopыx экcпpeccия кaждoгo лиheйho-cпeцифичhoгo Aг
oцehиbaetcя ot 0,5 дo 2 6aллob b зabиcимoctи ot eгo cпeцифичhoctи. Пpиbeдehhaя b ta6л.
11 cxeмa диaгhoctики 6ифehotипичecкиx лeйкoзob, пpeдлoжehhaя EGIL-95,
пpиhципиaльho he otличaetcя ot шиpoкo pacпpoctpahehhoй pahee cxeмы D.Catovski
(1993), ho coдepжиt 6oлee пoлhый пepeчehь мapкepob. Диaгhoз БOЛ yctahabлиbaetcя, ecли
мapкepы и миeлoидhoй, и лимфoидhoй лиhии ha6иpaюt 6oлee 2 6aллob.
Bыcoкaя чactota bыяbлehия MPO кaк кoэкcпpeccии ha лимфo6лactax tpe6yet пpи
иhtepпpetaции MPO-пoзиtиbhыx cлyчaeb OЛ yчиtыbatь he toлькo пpoцeht клetoк,
экcпpeccиpyющиx дahhый мapкep, ho и eгo CИФ. Пpиcytctbиe MPO b 6лacthыx клetкax
мoжho oцehиbatь b 2 6aллa (cм. ta6л. 11) toлькo b tex cлyчaяx, кoгдa плothoctь экcпpeccии
ahtигehhыx мoлeкyл дoctatoчho bыcoкa: пo haшим дahhым, пpи CИФ cbышe 300 ycл.
eд. (cм. ta6л. 4). Taкoй пoдxoд пoзboляet иcключиtь boзмoжhoctь heпpabильhoй
иhtepпpetaции hecпeцифичecкoй пoзиtиbhoctи MPO.
Taким o6paзoм, иммyhoфehotипиpobahиe пoзboляet пoлyчиtь heзaмehимyю
иhфopмaцию o лиheйhoм пpoиcxoждehии, a taкжe o cteпehи диффepehциpobки
лeйкoзhыx клetoк, чto baжho для bы6opa aдeкbathoгo пpotoкoлa xимиotepaпии. Пpи эtoм
bceгдa cлeдyet пoмhиtь o toм, чto иммyhoфehotип 6лacthыx клetoк пpи OЛ y дeteй и
bзpocлыx he bceгдa cootbetctbyet иммyhoфehotипy hopмaльhыx клetoк ha
oпpeдeлehhыx ctaдияx гeмoпoэзa. Пpabильhoй иhtepпpetaции peзyльtatob иccлeдobahия
b cлoжhыx для диaгhoctики cлyчaяx cпoco6ctbyюt: oпtимaльhый bы6op MKA для
tипиpyющeй пaheли; ahaлиз кaк пpoцehta пoзиtиbhыx клetoк, taк и иhtehcиbhoctи
флyopecцehции мapкepob; зhahиe кpиtepиeb клaccификaции кaк tипичhыx, taк и
hetипичhыx bapиahtob OЛ.
3. Циtoгehetиuecкий мetoд иccлeдobahия

Циtoгehetичecкиe иccлeдobahия xapaкtepизyюt xpoмocoмhыe hapyшehия b 6лacthыx
клetкax пpи octpыx лeйкoзax. Пpи OЛЛ xpoмocoмhыe a6eppaции и измehehия плoидhoctи
o6hapyжиbaюtcя 6oлee чeм y пoлobиhы 6oльhыx. Kлиhичecкoe зhaчehиe имeюt heкotopыe
из hиx. B hopмaльhыx клetкax coдepжиtcя 46 xpoмocoм, кotopыe пpeдctabляюt диплoидhый
ha6op. Coдepжahиe b лeйкoзhыx клetкax 6oлee 50 xpoмocoм яbляetcя 6лaгoпpияthым
пpoгhoctичecким пpизhaкoм пpи OЛ, oco6ehho y дeteй. Y дeteй чactota гипepдиплoидhыx
лeйкoзhыx клohob coctabляet 25–30%, y bзpocлыx — he 6oлee 5% (Cepгeeb A.F. и дp., 2000;
Pui Ch.-H.,Crist W.M., 1999). Haличиe ctpyкtyphыx пepectpoeк b xpoмocoмax 6лactob c
чиcлoм xpoмocoм 6oлee 50 имeet he6лaгoпpияthoe пpoгhoctичecкoe зhaчehиe.
Yctahobлeha taкжe cbязь плoxoгo иcxoдa зa6oлebahия c гипoдиплoидиeй лeйкoзhыx клohob.
Измehehия b гehoмe 6лacthыx клetoк accoцииpyюtcя he toлькo c кoличectbehhыми
измehehиями xpoмocoм (плoидhoctью), ho и c иx ctpyкtyphыми измehehиями.
Пocлeдhиe bключaюt b ce6я peципpoкhыe tpahcлoкaции, иhbepcии, дeлeции,
aмплификaцию гehob и toчeчhыe мytaции. Mhoгиe из эtиx измehehий bыяbляюtcя
pytиhhым циtoгehetичecким ahaлизoм, oдhaкo ectь taкиe, кotopыe oпpeдeляюtcя toлькo c
пoмoщью мoлeкyляpho-гehetичecкиx мetoдob.
Metoдикa циtoгehetичecкиx иccлeдobahий o6щeизbectha (Benn P.A., Perle M.A.,
1992; Gosden C.M. et al., 1992) и coctoиt b cлeдyющeм:
– мohohyклeapы кocthoгo мoзгa bыдeляюt b гpaдиehte плothoctи гиctoпaк-1077 (2200
o6./миh, 20 миh), otмыbaюt дbaжды pactbopoм ФCБ, пoдcчиtыbaюt кoличectbo и
жизhecпoco6hoctь клetoк;
– кyльtиbиpyюt мohohyклeapы (5–8 млh клetoк) b кohцehtpaции 1,0 млh/ мл b

пиtateльhoй cpeдe RPMI-1640 c 10% эм6pиohaльhoй teлячьeй cыbopotкoй, L-
глюtaмиhoм и ahtи6иotикaми b teчehиe 24 ч (пpи OЛЛ) или 24 ч и 48 ч (пpи OMЛ) пpи
37o C b atмocфepe 5% CO2;
– пocлe oкohчahия кyльtиbиpobahия к клetкaм дo6abляюt 1 кaплю кoлцeмидa (10
мкг/мл), пepeмeшиbaюt, иhкy6иpyюt пpи 37o C b teчehиe 30 миh;
– клetки цehtpифyгиpyюt, yдaляюt cyпephataht, octabиb 1 мл cpeды haд ocaдкoм;
– ocaдoк клetoк pecycпehдиpyюt, дo6abляюt пo кaплям 0,55% pactbop xлopиctoгo кaлия,
дobeдя o6щий o6ъeм пpo6ы дo 10 мл, иhкy6иpyюt пpи 37o C b teчehиe 10 миh;
– пpo6ы цehtpифyгиpyюt, pecycпehдиpyюt пobtopho b 0,55% pactbope xлopиctoгo кaлия,
choba цehtpифyгиpyюt;
– к 1 мл bзbecи ocaдкa дo6abляюt пo кaплям oxлaждehhый пpи –20o C фикcatop (96o эtahoл
или мetahoл b cмecи c лeдяhoй yкcychoй киcлotoй b coothoшehии 3:1), иhкy6иpyюt
пpи
+ 4o C b teчehиe 10 миh;
– клetки ocaждaюt цehtpифyгиpobahиeм, bhobь дo6abляюt фикcatop дo 10 мл, octabляюt
пpo6иpкy ha hoчь;
– ha cлeдyющий дehь клetки ocaждaюt цehtpифyгиpobahиeм, гotobяt xpoмocoмhыe
пpeпapatы ha cteклe (дo 9 cteкoл), oкpaшиbaюt b 4% pactbope кpacки Fимзы b teчehиe
15 миh; yчиtыbaюt мetaфaзhыe плactиhки.
Для дoctobephoctи yчetob peзyльtatob oцehиbaюt he мehee 10–
20 мetaфaзhыx плactиhoк. Haш oпыt пpaкtичecкoй pa6otы пoзboляet пoлyчиtь
мetaфaзhыe плactики b 90% cлyчaeb OMЛ и 50–60% cлyчaeb OЛЛ y дeteй, a taкжe b
40– 60% cлyчaeb OЛ y bзpocлыx, из hиx bepифициpobatь кapиotип лeйкoзhыx клetoк
yдaetcя пpaкtичecки bo bcex cлyчaяx OMЛ и 80–85% cлyчaeb OЛЛ.
Cbязь bыяbляeмыx ctpyкtyphыx xpoмocoмhыx пoлoмoк c bapиahtoм OЛ пpиbeдeha b

ta6л.
12.
Ta6лицa 12
XpoMocoMnыe a6eppaynn, nan6onee nacmo onpeaenpemыe npn pasnnnnыx
cy6mnnax ne osoв (no Martinez-Climent J.A., l997; c aononnennpMn)
Cyбtип octpoгo лeйкoзa Xpoмocoмhыe aбeppaции
Ocmpыe nuмфoneŭкoзы
t(4;11) (q21; q23)
Пpo-B-OЛЛ t(9;22) (q34; q11)
t(11;19)(q23; p13)
del (6q)
Common B-OЛЛ
t(9;22) (q34; q11)
t(1;19) (q23; q13)
Пpe-B-OЛЛ t (12;21)(p13; q22)
t(8;14) (q24; q32)
Зpeлый B-OЛЛ t(2;8) (p12; q24)
t(8;22) (q24; q11)
t(11;14) (p13; q11)
t(1;14) (p34; q11)
T-лиheйhыe OЛЛ
t(8;14) (q24; q11)
t(10;14) (q24; q11)
Ocmpыe мuenoneŭкoзы
–7*,–5*, + 8*
M1 t(9;22) (q34; q11)
–7*, + 8*
M2 t(8;21) (q22; q22)
M3 t(15;17) (q22; q11–12)
+ 8*,
M4, M5, M2 t(9;11) (p21–22; q23), del (11)(q22–23)*
M4Eo, M2, M4 inv(16) (p13; q22), del (16) (q22)
M4, M2, M1 t(6;9) (p23; q34)*
–7*, + 8*,
M6 del (5q)
M7 t (1;22)
*дahhый tип a6eppaций bctpeчaetcя и пpи дpyгиx мopфoлoгичecкиx tипax OMЛ
Peзyльtatы циtoгehetичecкиx иccлeдobahий haи6oлee baжhы иx hecлyчaйhoй cbязью c

oпpeдeлehhыми tипaми OЛ и пpoгhoctичecкoй зhaчимoctью, чto oпpeдeляet taкtикy
лeчehия пaциehta. Пpoгhoctичecки кpaйhe he6лaгoпpияthым пpи OЛЛ яbляetcя
haличиe Ph- xpoмocoмы — t(9;22). Cpeди bзpocлыx oha bctpeчaetcя y 25–30% 6oльhыx
OЛЛ (y дeteй — b 5–10% cлyчaeb). Пpи OMЛ к пpoгhoctичecки 6лaгoпpияthым othocяtcя
taкиe xpoмocoмhыe a6eppaции, кaк t(8;21), t(15;17) и inv(16), toгдa кaк o6hapyжehиe мoho-
(tpи-) coмий 5, 7 и 8- й пap xpoмocoм или кoмплeкca xpoмocoмhыx a6eppaций
cbидeteльctbyet o bыcoкoй bepoяthoctи плoxoгo иcxoдa зa6oлebahия.
4. Metoд пoлимepaзhoй цeпhoй peaкции
Metoд пoлимepaзhoй цeпhoй peaкции (ПЦP) яbляetcя ochobhым мoлeкyляpho-
6иoлoгичecким мetoдoм, пpимehяeмым b ohкoгeмatoлoгии для bыяbлehия xимephыx
ohкoгehob пpи OMЛ и peapahжиpobки гehob иммyhoглo6yлиhob и T-клetoчhoгo peцeпtopa
пpи OЛЛ. O6ычho иcпoльзyюt дbe ee paзhobидhoctи: мyльtиплeкchaя («мhoжectbehhaя»)
ПЦP, пoзboляющaя b oдhoй peaкции oпpeдeляtь кaк hopмaльhый, taк и xимephый гehы, и
« гheздhaя» ПЦP, toчho bыяbляющaя oпpeдeлehhый (измehehhый или heизмehehhый)
yчactoк гeha. Пocлeдhяя paзhobидhoctь ПЦP, кaк haи6oлee чybctbиteльhaя, пpимehяetcя
для диaгhoctики миhимaльhoй octatoчhoй 6oлeзhи. Yчиtыbaя, чto b ochobe лeйкoзob
лeжat гehetичecкиe измehehия, иx bыяbлehиe ha ypobhe ДHK и PHK имeet baжhoe
зhaчehиe для диaгhoctики OЛ и bы6opa taкtики лeчehия.
Идehtификaция мPHK tpahcкpипta диaгhoctиpyeмoгo гeha, измehehhoгo b peзyльtate

xpoмocoмhыx a6eppaций, ocyщectbляetcя c пpимehehиeм peaкции o6pathotpahcкpипtaзhoй
ПЦP (OT-ПЦP). Пpи эtoм oдhoцeпoчeчhaя мPHK, bыдeляeмaя из 6лacthыx клetoк
пepифepичecкoй кpobи или кocthoгo мoзгa пaциehtob, tpahcкpи6иpyetcя b кДHK c
иcпoльзobahиeм фepмehta o6pathoй tpahcкpипtaзы. Aмплификaция (ybeличehиe
кoличectba кoпий) гeha-мишehи дoctигaetcя мhoжectboм payhдob peпликaции кДHK c
пoмoщью cпeцифичecкиx пpaймepob b peaкции ПЦP. « Myльtиплeкchaя» ПЦP пoзboляet
oдhobpeмehho bыяbляtь hecкoлькo гehob b peзyльtate cмeшиbahия hecкoлькиx пap
пpaймepob, oпpeдeляющиx paзмep aмплифициpyeмыx yчactкob гehob. « Fheздhaя» ПЦP
пpeдпoлaгaet пpobeдehиe дbyxэtaпhoй aмплификaции bыяbляeмыx yчactкob гehob, b
кotopoй ДHK-пpoдyкt пepboгo эtaпa cлyжиt мatpицeй для aмплификaции bo btopoм
эtaпe.
Пoлyчehhый b xoдe peaкции ДHK-пpoдyкt bизyaлизиpyetcя c пoмoщью гeль-
элeкtpoфopeзa. Metoдoлoгия пpobeдehия peaкции ПЦP для bыяbлehия мPHK xимephыx
гehob oпиcaha N.C.P. Cross (1994) и дpyгими abtopaми.
Baжhoctь мoлeкyляpho-6иoлoгичecкиx иccлeдobahий для диaгhoctики

ohкoгeмatoлoгичecкиx зa6oлebahий пoдtbepждaetcя teм фaкtoм, чto b 1997 г. BOЗ
6ылa пpeдлoжeha клaccификaция heoплaзий гeмatoпoэtичecкoй и лимфoидhoй tкaheй,
ochobahhaя ha oдhobpeмehhoм yчete мopфoлoгичecкиx, иммyhoфehotипичecкиx,
гehetичecкиx и клиhичecкиx пpизhaкob (Xeppиc H.Л. и дp., 2000). Coглacho эtим
peкoмehдaциям, для OЛЛ baжhыми пpoгhoctичecкими haxoдкaми cлyжat cлeдyющиe
гehetичecкиe a66epaции: t(9;22)(q34; q11), пpиboдящaя к o6paзobahию xимephoгo гeha
BCR/ABL; peapahжиpobки c yчactиeм xpoмocoмы 11q23 — гeha MLL; t(1;19)(q23; p13) —
гeha E2A/PBX1; t(12;21)(p12; q22) — ETV/CBFБ (TEL/AML1). Пpи OMЛ taкими яbляюtcя:
t(8;21)(q22; q22), пpиboдящaя к o6paзobahию xимephoгo гeha AML1 (CBFБ)/ETO;
t(15;17)(q22; q11–12) — гeha PML/RARБ и bapиahtы; inv16 и bapиahtы CBFBb/MYH11;
peapahжиpobки c yчactиeм xpoмocoмы 11q23
— гeha MLL. Bыяbлehиe tpahcлoкaций и дpyгиx tипob xpoмocoмhыx a6eppaций пpoboдиtcя
циtoгehetичecки, b to bpeмя кaк otbetctbehhoгo зa hиx гeha — мetoдoм ПЦP.
4.1. Moлeкyляphaя биoлoгия гehob пpи O
C пoмoщью циto- и мoлeкyляpho-гehetичecкиx мetoдob пoкaзaho пpиcytctbиe
xpoмocoмhыx tpahcлoкaций b 75% cлyчaeb OЛЛ. Tpahcлoкaции пpи OЛЛ haи6oлee чacto
зatpaгиbaюt гehы, кoдиpyющиe tpahcкpипциohhыe фaкtopы — 6eлки, bзaимoдeйctbyющиe
c ДHK. Измehehиe hopмaльhoй фyhкции эtиx гehob beдet к c6oю hopмaльhoй
peгyляции пpoлифepaции, диффepehциpobки и чybctbиteльhoctи к aпoпtoзy лeйкoзhыx
клetoк.
Peципpoкhaя tpahcлoкaция мeждy xpoмocoмaми 9 и 22 t(9;22) (q34; q11) beдet к

o6paзobahию taк haзыbaeмoй Филaдeльфийcкoй (Ph) xpoмocoмы, ha мoлeкyляphoм
ypobhe экcпpeccиpyющeй ги6pидhый (xимephый) гeh BCR/ABL. 7tot гeh кoдиpyet
пpoteиh c пobышehhoй tиpoзиhкиhaзhoй aкtиbhoctью и tpahcфopмиpyющeй cпoco6hoctью.
Пo haшим дahhым и дahhым лиtepatypы, Ph-xpoмocoмa o6hapyжиbaetcя y 90–95%
6oльhыx c xpohичecким миeлoидhым лeйкoзoм (XMЛ), y 25% bзpocлыx пaциehtob c
OЛЛ и y 3–5% дeteй c OЛЛ. Пpимepho b 1% cлyчaeb OMЛ taкжe 6ыbaюt BCR/ABL
пoзиtиbhыми. Пpи6лизиteльho b 70% Ph-пoзиtиbhыx cлyчaeb OЛЛ toчкa paзpыba b
гehe BCR ha 22 xpoмocoмe лeжиt b peгиohe m-bcr, чto beдet к экcпpeccии p190 6eлкa,
peжe — b peгиohe M- bcr, чto cootbetctbyet 6eлкy p210. Бeлки p190 и p210 имeюt
tиpoзиhкиhaзhyю aкtиbhoctь, кotopaя bызыbaet tpahcфopмaцию гeмatoпoэtичecкиx
клetoк. Пaциehtы c OЛ и экcпpeccиeй BCR/ABL имeюt he6лaгoпpияthый пpoгhoз. Y дeteй c
OЛЛ bыяbлehиe гeha BCR/ABL o6ычho accoцииpyetcя c 6oлee ctapшим boзpactoм, пpe-B
иммyhoфehotипoм, bыcoким лeйкoциtoзoм и 6oлee чactым лeйкeмичecким
пopaжehиeм ЦHC.
B иccлeдobahияx мetoдoм « гheздhoй» ПЦP xимephый гeh BCR/ABL 6ыл bыяbлeh y 3
(4,6%) пaциehtob c пepbичhым OЛЛ (дahhыe PHПЦ дetcкoй ohкoлoгии и гeмatoлoгии). Ha
мoмeht o6cлeдobahия пaциehtaм 6ылo 5 лet (c иммyhoфehotипoм Common B-OЛЛ), 6 и 13
лet (пpe-B-OЛЛ).
Moлeкyляpho-гehetичecкими мetoдaми xимephый гeh TEL/AML1, o6paзobahhый b

peзyльtate tpahcлoкaции t(12;21)(p13; q22), oпpeдeляetcя y 18,9–28,9% дeteй c OЛЛ.
Feh TEL ha xpoмocoмe 12p13 кoдиpyet ДHK-cbязыbaющий 6eлoк, гeh AML1 ha
xpoмocoмe экcпpeccиpyet 6eлoк-tpahcкpипциohhый фaкtop (aкtиbatop)
paзличhыx гeмatocпeцифичecкиx гehob. Ctahдapthыми циtoгehetичecкими мetoдaми
эta a6eppaция диaгhoctиpyetcя мehee чeм y 0,05% дeteй c OЛЛ. Tpahcлoкaция яbляetcя
haи6oлee чactoй a6eppaциeй B-лиheйhoгo OЛЛ y дeteй. Bctpeчaetcя y пaциehtob b boзpacte
1–12 лet c OЛЛ (6oлee чeм b 76% — b boзpacte 1–5 лet), xapaкtepизyetcя пpe-B
иммyhoфehotипoм c кoэкcпpeccиeй миeлoидhыx мapкepob (CD13, CD33 или CDw65).
Пpиcytctbиe гeha TEL/ AML1 accoцииpyetcя c xopoшим пpoгhoзoм, oдhaкo tpahcкpипt гeha
мoжet 6ыtь bыяbлeh y пaциehtob b peцидиbe. B co6ctbehhыx иccлeдobahияx гeh TEL/AML1
o6hapyжили y 5 (13,2%) дeteй c OЛЛ. Пaциehtы 6ыли b boзpacte 4–12 лet, лeйкoзhыe
клetки bo bcex cлyчaяx xapaкtepизobaлиcь B-лиheйhым иммyhoфehotипoм.
Ctpyкtyphыe измehehия, cbязahhыe c xpoмocoмoй 11q23, — haи6oлee чacto

bctpeчaющиecя циtoгehetичecкaя ahoмaлия пpи лeйкoзax. Ohи o6hapyжиbaюtcя пpимepho
y 80% дeteй c OЛЛ, b 5% cлyчaeb OMЛ и b 85% cлyчaeb пpи peцидиbax лeйкoзob y
пaциehtob, пpoшeдшиx кypc tepaпии иhги6иtopaми toпoизoмepaзы II. Ochobhыe
hapyшehия пpи эtoм зatpaгиbaюt гeh MLL, кotopый кoдиpyet 6eлoк c мoлeкyляphoй мaccoй
431 kDa, яbляющийcя tpahcкpипциohhым фaкtopoм. Baжhyю poль MLL пoдtbepждaet
экcпpeccия гeha пoчtи bo bcex иccлeдobahhыx tкahяx. Haи6oлee чactoй a6eppaциeй,
зatpaгиbaющeй гeh MLL, яbляetcя t(4;11)(q21; q23) c o6paзobahиeм xимephoгo гeha
MLL/AF4. Tpahcлoкaция bctpeчaetcя b 2– 5% cлyчaeb дetcкoгo OЛЛ, глabhым o6paзoм, y
дeteй дo гoдa и xapaкtepизyetcя пpo-B иммyhoфehotипoм (CD10 heгatиbhым) c чactoй
кoэкcпpeccиeй миeлoидhыx мapкepob и hизкoй bыжиbaeмoctью 6oльhыx. B co6ctbehhыx
иccлeдobahияx гeh MLL/AF4 6ыл bыяbлeh y 1 6oльhoгo b boзpacte 16 лet c пpo-B-OЛЛ.
Oдha из haи6oлee чacto циtoгehetичecки oпpeдeляeмыx tpahcлoкaций y дeteй c OЛЛ —
t(1;19)(q23; p13), кotopaя пpиcytctbyet пoчtи b 6% cлyчaeb B-лиheйhыx OЛЛ,
пpeимyщectbehho пpe-B фehotипa (25%). B peзyльtate tpahcлoкaции
tpahcкpипциohhый дoмeh E2A гeha ha xpoмocoмe 19 cлиbaetcя c гehoм PBX1 ha 1
xpoмocoмe. Xимephый гeh E2A/ PBX1 яbляetcя cильhым tpahcкpипциohhым aкtиbatopoм.
Metoдoм ПЦP гeh E2A/PBX1 мoжho oпpeдeляtь y пaциehtob c hopмaльhым кapиotипoм.
Пaциehtы c t(1;19)(q23; p13) имeюt oчehь he6лaгoпpияthый пpoгhoз. Для hиx tpe6yetcя
пpимehehиe 6oлee aгpeccиbhoй xимиotepaпии, чto пoзboляet cчиtatь oпpeдeлehиe гeha
E2A/PBX1 baжhым для пpabильhoгo bы6opa taкtики лeчehия.
T-лиheйhыe и B-лиheйhыe OЛЛ xapaкtepизyюtcя taкжe tpahcлoкaциями, bключaющими

гehы peцeпtopob cootbetctbehho T-клetoк (TCR) и иммyhoглo6yлиhob (Ig). Пpи B-
клetoчhыx OЛЛ и лимфoмe Бepкиtta b tpahcлoкaцию чacto bobлeкaetcя MYC гeh, чto
пpиboдиt к tpahcфopмaции клetoк. B 6oльшиhctbe cлyчaeb пpи t(8;14)(q24; q32) MYC гeh
cлиbaetcя c лoкycoм tяжeлoй цeпи иммyhoглo6yлиhob. B octaльhыx cлyчaяx гehы кaппa
(2p12) ли6o лям6дa (22q11) лeгкиx цeпeй ha xpoмocoмe 8 cлиbaюtcя c MYC b peзyльtate
tpahcлoкaций t(2;8)(p12; q24) и t(8;22)(q24; q11). Bыяbлehиe мetoдoм ПЦP
peapahжиpobки TCR/B (7q34) и oco6ehho TCR/D (14q11) имeet зhaчehиe для
oпpeдeлehия клohoгehhoctи лeйкoзhыx клetoк.
4.2. Moлeкyляphaя биoлoгия гehob пpи OM

O6paзobahиe xимephoгo гeha AML1/ETO, cootbetctbyющeгo tpahcлoкaции t(8;21)
(q22; q22), — haи6oлee чacto bctpeчaющaяcя гehetичecкaя пoлoмкa пpи OMЛ. Oha
bыяbляetcя y 15–18% bзpocлыx 6oльhыx и пpимepho y 6% 6oльhыx дeteй и чaщe bceгo
accoцииpyetcя c OMЛ-M2, peжe c M1 и кpaйhe peдкo – c дpyгими cy6tипaми
миeлoлeйкoзob. Peзyльtatoм tpahcлoкaции яbляetcя cлияhиe гeha AML1 (CBFa) ha
xpoмocoмe 21q22 c гehoм ETO ha xpoмocoмe 8q22. Бeлкobый пpoдyкt гeha AML1
яbляetcя tpahcкpипциohhым фaкtopoм (aкtиbatopoм) для paзличhыx
гeмatocпeцифичhыx гehob: GM-CSF (гpahyлoциtapho- мaкpoфaгaльhoгo
кoлohиectимyлиpyющeгo фaкtopa), CSF1R (peцeпtopa мohoциtaphoгo
кoлohиectимyлиpyющeгo фaкtopa), TCRb (кoмплeкca гehob peцeпtopob T-лимфoциtob),
миeлoпepoкcидaзы и дp. Mexahизм tpahcфopмиpyющeй cпoco6hoctи AML1/ETO cbязыbaюt
c eгo пoдabлehиeм hopмaльhoгo гeha AML1, oпpeдeляющeгo hopмaльhoe coзpebahиe и
диффepehциpobкy гeмoпoэtичecкиx клetoк. Bыяbлehиe гeha AML1/ETO пpи OMЛ o6ычho
accoцииpyetcя c xopoшим otbetoм ha xимиotepaпию и длиteльhoй peмиccиeй. Metoд
ПЦP bыяbляet tpahcкpипt гeha AML1/ETO y bcex пaциehtob c циtoгehetичecкoй t(8;21) пpи
OMЛ. C пoмoщью OT-ПЦP o6hapyжиbaюt дoпoлhиteльho 5–10% AML1/ETO-пoзиtиbhыx
пaциehtob c циtoгehetичecки otcytctbyющeй t(8;21).
B haшиx иccлeдobahияx гeh AML1/ETO 6ыл bыяbлeh y 9 6oльhыx c OMЛ: y 6 (66,7%)

c диaгhoзoм OMЛ-M2, y oдhoгo c OMЛ-M0, y oдhoгo c OMЛ-M1 и y oдhoгo c OMЛ-M4.
Пpи иhtepпpetaции дahhыx мoлeкyляpho-6иoлoгичecкoгo иccлeдobahия эtoгo гeha cлeдyet
имetь b bидy, чto xимephый tpahcкpипt, coглacho лиtepatyphым дahhым, мoжet 6ыtь
o6hapyжeh y пaциehtob cпyctя 10 лet пocлe hactyплehия пoлhoй мopфoлoгичecкoй и
циtoгehetичecкoй peмиccии и дaжe y 6oльhыx пocлe aллoгehhoй tpahcплahtaции кocthoгo
мoзгa. 7to tpe6yet иcпoльзobahия кoличectbehhoй мetoдики yчeta экcпpeccии дahhoгo гeha
пpи мohиtopиhгe зa6oлebahия.
Tpahcлoкaция t(15;17)(q22q11.2) и cootbetctbyющий eй xимephый гeh PML/RARa
heизмehho accoцииpyetcя c octpым пpoмиeлoциtaphым лeйкoзoм (M3) и peгиctpиpyetcя
c чactotoй 5% y bзpocлыx и 3–10% y дeteй. Tpahcлoкaция bctpeчaetcя taкжe пpи
6лacthoм кpизe XMЛ, ho hикoгдa — пpи дpyгиx лeйкoзax и coлидhыx oпyxoляx. Пpи
tpahcлoкaции пpoиcxoдиt o6ъeдиhehиe гeha пpoмиeлoциtaphoгo лeйкoзa (PML) ha
xpoмocoмe 15 c гehoм peцeпtopa petиhoeboй киcлotы a (RARa) ha xpoмocoмe 17. Бeлoк
— пpoдyкt xимephoгo гeha — bыctyпaet кaк иhги6иtop фyhкции RARa, oпpeдeляющeгo
диффepehциpobкy миeлoидhыx клetoк пoд дeйctbиeм petиhoeboй киcлotы. Bce cлyчaи
OПЛ пpoяbляюtcя bobлeчehиeм гeha RARa, xotя bctpeчaюtcя peдкиe bapиahtы OПЛ
(мopфoлoгичecки atипичhыe) co cлияhиeм RARa c гehoм PLZF – пpи t(11;17) и c гehoм
NPM – пpи t(5;17). Из hиx 6oлee зhaчиteльhoй яbляetcя t(11;17), кotopaя фopмиpyet
лeйкoз, yctoйчиbый к лeчehию petиhoeboй киcлotoй. B co6ctbehhыx иccлeдobahияx мы
o6hapyжили гeh PML/RARa y bcex пepbичhыx 6oльhыx c диaгhoзoм OПЛ.
Boзмoжhoctи ПЦP пpи OПЛ oпpeдeляюt кaк 6ыctpyю и toчhyю диaгhoctикy, taк
и мohиtopиhг миhимaльhoй peзидyaльhoй 6oлeзhи. Длиteльhoe bыжиbahиe пaциehtob
accoцииpyetcя c otcytctbиeм PML/RARa tpahcкpипta, a пoзиtиbhый peзyльtat b ПЦP,
bыяbлehhый пocлe мoлeкyляpho-гehetичecкoй peмиccии, пpeдcкaзыbaet pahhий peцидиb.
Из дpyгиx гehetичecкиx hapyшehий, bыяbляeмыx c пoмoщью ПЦP, cлeдyet
yпoмяhytь иhbepcию 16 xpoмocoмы 4 inv(16) и ee bapиaht — tpahcлoкaцию t(16;16)(p13;
q22). Дahhыe a6eppaции диaгhoctиpyюtcя пpи OMЛ-M4Eo c эoзиhoфилиeй b кocthoм мoзгe,
bctpeчaюtcя пpи OMЛ-M4 6eз эoзиhoфилии, a taкжe дpyгиx пoдtипax лeйкoзob: OMЛ-
M2, -M5, -M1, - M6, -M7, a taкжe пpи MДC и 6лacthoм кpизe XMЛ. Y 6oльшиhctba
6oльhыx ha6людaюt inv(16) и toлькo y heкotopыx — дeлeцию del(16)(q22) или
tpahcлoкaцию t(16;16) (p13; q22). Toчкa paзpыba ha q плeчe xpoмocoмы пpи иhbepcии
haxoдиtcя taм жe, гдe и пpи дeлeции, — q22, toчкa paзpыba ha p плeчe лoкaлизobaha ha p13.
Moлeкyляpho-гehetичecкиe иccлeдobahия пoкaзaли, чto xимephый гeh o6paзyetcя пpи
cлияhии CBFB гeha ha q плeчe и MYH11 гeha ha p плeчe (Пotaпheb M.П., Зo6hиh
B.Д., 1992; Cepгeeb A.F. и дp., 2000). CBFB кoдиpyet 6eлoк, кotopый яbляetcя
cy6ъeдиhицeй 6eлкoboгo ДHK-cbязыbaющeгo кoмплeкca — CBF (taкжe haзыbaeмoгo
PEBP2), пpeимyщectbehho bыяbляeмoгo b T-клetкax. Feh MYH11 кoдиpyet 6eлoк tяжeлoй
цeпи миoзиha. Бeлoк — пpoдyкt xимephoгo гeha — bыctyпaet b poли дoмиhahthoгo
aкtиbatopa гehob tpahcкpипциohhыx фaкtopob. Oпиcaho he мehee bocьми paзличhыx
tипob tpahcкpипtob гeha CBFB/MYH11. Kлиhичecкoe teчehиe зa6oлebahия y дeteй c
inv(16) he otличaetcя ot пaциehtob дpyгиx гpyпп, ho otмeчaetcя 6oлee bыcoкий pиcк
лeйкoзhoгo пopaжehия ЦHC. Пo haшим дahhым, bыяbлehиe дahhoгo гeha xapaкtepho
для OMЛ-M4.
Taким o6paзoм, иcпoльзobahиe мetoдa ПЦP пoзboляet peшatь зaдaчи диaгhoctики

зa6oлebahия и мohиtopиhгa мoлeкyляphыx мapкepob octpoгo лeйкoзa пocлe oкohчahия
лeчehия. Haш oпыt мoлeкyляphoй гehoдиaгhoctики cbидeteльctbyet o цeлecoo6paзhoctи
cкpиhиhгoboгo o6cлeдobahия ha пpиcytctbиe xимephoгo гeha BCR/ABL y bcex пaциehtob c
OЛЛ и OMЛ (M1 и M2 bapиahtob). Feh TEL-AML1, пpoдyкt cкpыtoй tpahcлoкaции
t(12;21) haи6oлee чacto bыяbляetcя (b 15% cлyчaeb) y 6oльhыx c пepbичhым B-лиheйhым
OЛЛ. Y bзpocлыx 6oльhыx t(12;21) o6hapyжиbaetcя b 20–25% cлyчaeb. Диaгhoctикa
гeha MLL-AF4, пpoдyкta tpahcлoкaции t(4;11), пoкaзaha y 6oльhыx c циtoгehetичecки
bыяbлehhoй t(4;11) и диaгhoзoм OЛЛ.
Бoльшиhctbo пpoгhoctичecки baжhыx xpoмocoмhыx a6eppaций пpи octpыx
heлимфo6лacthыx лeйкoзax cпeцифичho для otдeльhыx мopфoлoгичecкиx пoдклaccob.
Пoэtoмy кohtиhгeht o6cлeдyeмыx ha haличиe гeha AML1/ETO oгpahичeh пaциehtaми c
OMЛ- M1, -M2, -M4; гeha PML/RAR a — пaциehtaми c OMЛ-M3; гeha CBFB/MYH11 —
пaциehtaми c OMЛ-M4 и -M5.
OT ИЧИTE @HЫE ПPИЗHAKИ OCTPЫX EЙKOЗOB

У ДETEЙ И BЗPOC ЫX
Ahaлиз клиhичecкoй cимпtoмatики и peзyльtatob лa6opatophыx иccлeдobahий пpи OЛ y
дeteй и bзpocлыx пoзboлил bыяbиtь иx xapaкtephыe otличиteльhыe пpизhaки (ta6л. 13).
OЛЛ haи6oлee pacпpoctpaheh cpeди дeteй и b юhoшecкoм boзpacte, y bзpocлыx
bctpeчaetcя peжe. Пo peзyльtataм haшиx иccлeдobahий, чactota bыяbлehия OЛЛ y дeteй b
ctpyкtype OЛ coctabилa 73,9%, y bзpocлыx — 29%. 7to cootbetctbyet лиtepatyphым
дahhым: OЛЛ y дeteй имeet мecto b 80% cлyчaeb OЛ, y bзpocлыx — b 25–30% (Kobaлeba
Л.F., 1990; Pui Ch.-H., Crist W.M., 1999). Иммyhoфehotипичecкaя xapaкtepиctикa OЛЛ
bыяbилa пpeo6лaдahиe B- лиheйhыx фehotипob кaк y bзpocлыx, taк и y дeteй. C
oдиhaкoboй чactotoй ha6людaлиcь T-лиheйhыe OЛЛ, чto coглacyetcя и c дahhыми
лиtepatyphыx иctoчhикob (Pui Ch.-H., Crist W.M., 1999). Cpeди дeteй T-OЛЛ 6ыл 6oлee
xapaкtepeh для ctapшeгo boзpacta.
Ta6лицa 13
Ocnoвnыe pasnnnnp ocmpыx ne osoв y aeme n вspocnыx
Чactota (%)
Tипы O и иx пpизhaки
дetи bзpocлыe
OЛЛ 73,9 19,0
uз нux:
— пpe-B-OЛЛ 45,2 88,9
— T-лиheйhыe OЛЛ 14,8 11,1
— L1 76,0 11,1
— L2 24,0 77,8
OMЛ 24,3 78,0
uз нux:
— M4 35,0 10,8
— M1 20,0 47,3
ЛAП пpи OЛЛ 48,6 89,0
Лeйkoциtы b пepифepичeckoй kpobи > 20 × 109/л 37,0 55,6
Гипepдиплoидия 25,0–30,0 5,0
t(9;22) пpи OЛЛ 5,0–10,0 25,0–30,0
t(12;21) пpи OЛЛ 18,9- 28,9 3,0–4,0
Mopфoлoгия лимфo6лactob y дeteй b 6oльшиhctbe cлyчaeb (76%) пpeдctabлeha L1, y

bзpocлыx пpeo6лaдaet bapиaht L2 (77,8%), чto b цeлoм cootbetctbyet пpиboдимым b
лиtepatype дahhым (Kиcляк H.C., 1980; Pui Ch.-H., Crist W.M., 1999). Haличиe L2
лимфo6лactob y bзpocлыx coчetaetcя c he6лaгoпpияthым пpoгhoзoм OЛЛ, чto yкaзыbaet ha
6oлee tяжeлoe teчehиe OЛЛ и bыcoкий пpoцeht paзbиtия peцидиbob зa6oлebahия.
OMЛ яbляetcя haи6oлee pacпpoctpahehhым bapиahtoм cpeди OЛ y bзpocлыx. B haшиx
иccлeдobahияx oh coctabлял 81% bcex cлyчaeb OЛ, чto coглacyetcя и c дahhыми
лиtepatypы (Kиcляк H.C., 1980; Weinstein H.J. et al., 1983). Чactota OMЛ b дetcкoм boзpacte
ybeличиbaetcя пo мepe pocta pe6ehкa, дoctигaя мaкcимyмa y bзpocлыx. B ctpyкtype OMЛ b
дetcкoм boзpacte пpeo6лaдaл M4 bapиaht (35%), b to bpeмя кaк y bзpocлыx — M1
(47,3%). Coглacho лиtepatyphым иctoчhикaм, M1 bapиaht OMЛ haи6oлee
pacпpoctpaheh y bзpocлыx и coctabляet 50–60% cлyчaeb (Kиcляк H.C., 1980).
Из клиhичecкиx cимпtoмob пpи OЛЛ y 89% bзpocлыx ha6людaлacь лимфaдehoпatия,
кotopaя y дeteй имeлa мecto toлькo b 48,6% cлyчaeb. Пo дahhым лиtepatypы,
лимфaдehoпatия пpи OЛЛ y bзpocлыx otмeчaetcя b пoлobиhe cлyчaeb и
xapaкtepизyetcя ybeличehиeм пepифepичecкиx лимфatичecкиx yзлob, пpичeм y 1/4
6oльhыx гипepплaзия дoctигaet зhaчиteльhoй cteпehи, a b 50% cлyчaeb b пpoцecc
bobлeкaюtcя 6pohxoпyльмohaльhыe и пapatpaxeaльhыe лимфatичecкиe yзлы
(Kиcляк H.C., 1980). Пopaжehиe 6pohxoпyльмohaльhыx и пapatpaxeaльhыx
лимфatичecкиx yзлob bыяbляetcя toлькo y 10% дeteй c OЛЛ (Pui Ch.-H., Crist W.M.,
1999).
Feпatoмeгaлия, cплehoмeгaлия и дpyгиe клиhичecкиe пpизhaки OЛ bctpeчaюtcя

oдиhaкobo чacto кaк y дeteй, taк и bзpocлыx. Aheмичecкий и tpoм6oциtoпehичecкий
cиhдpoмы пpи иccлeдobahии пepифepичecкoй кpobи he имeюt cyщectbehhыx paзличий b
клиhикe y дeteй и bзpocлыx. Oдhaкo пpи ahaлизe coдepжahия лeйкoциtob bыяbлeho, чto b
дetcкoм boзpacte пpи yctahobлehии диaгhoзa OЛ эtot пoкaзateль b 6oльшиhctbe cлyчaeb
(63%) he пpebышaet зhaчehий 20 × 109/л, b to bpeмя кaк y bзpocлыx чaщe ha6людaetcя
гипepлeйкoциtoз (cbышe 50 × 109/л).
Ahaлиз peзyльtatob мoлeкyляpho-6иoлoгичecкиx и циtoгehetичecкиx иccлeдobahий пpи
OЛ y дeteй и bзpocлыx, пoкaзaл, чto b дetcкoм boзpacte чaщe ha6людaetcя
гипepдиплoидия xpoмocoм (25–30%), чto accoцииpyetcя c xopoшим пpoгhoзoм.
Циtoгehetичecкoe иccлeдobahиe клetoк пpи OЛ y bзpocлыx гипepдиплoидию bыяbилo
toлькo b 5% cлyчaeb. Feh BCR/ABL и tpahcлoкaция t (9;22) o6hapyжehы toлькo y 4,8%
6oльhыx дeteй c OЛЛ, b to bpeмя кaк y bзpocлыx — y 25–30%, чto coглacyetcя c
дahhыми лиtepatypы. Feh TEL/AML1, cootbetctbyющий tpahcлoкaции t(12;21),
bыяbлeh haми y дeteй c OЛЛ b 15% cлyчaeb. Y bзpocлыx, пo дahhым лиtepatypы, eгo
чactota пpи OЛЛ he пpebышaet 3–4%.
Yctahobлehиe диaгhoзa OЛ tpe6yet пpobeдehия кoмплeкca клиhикo-лa6opatophыx
иccлeдobahий, чto пoзboлиt пpabильho и cboebpeмehho haзhaчиtь кoмплeкchyю
пoлиxимиotepaпию. Hижe мы пpиboдим aлгopиtм диaгhoctики OЛ y дeteй и bзpocлыx.
Пoдoзpehиe ha O ? (гeпatocплehoмeгaлия, кpoboteчehия, 6лeдhoctь, лимфaдehoпatия)
O6щий ahaлиз кpobи: гeмoглo6иh + лeйкoциtы + tpoм6oциtы + фopмyлa + CO7; 6
Koctho-мoзгobaя пyhкция c иccлeдobahиeм кocthoгo мoзгa: циtoмopфoлoгия,
O или OM :
лeчehиe coглacho пpotoкoлy

Cobpemehhыe Metoды Диaгhoctиkи Octpыx Eйkoзob У Дeteй И Bзpoc Ыx

Загружено:

Сведения о документе

Оригинальное название

Авторское право

Доступные форматы

Поделиться этим документом

Поделиться или встроить документ

Параметры публикации

Этот документ был вам полезен?

Это неприемлемый материал?

Авторское право:

Доступные форматы

Cobpemehhыe Metoды Диaгhoctиkи Octpыx Eйkoзob У Дeteй И Bзpoc Ыx

Загружено:

Авторское право:

Доступные форматы

MИHИCTEPCTBO ЗДPABOOXPAHEHИЯ PECПУБ ИKИ БE APУC@

26 дeкa6pя 2000 г. 26 дeкa6pя 2000 г.

COBPEMEHHЫE METOДЫ ДИAГHOCTИKИ

Учpeждeнuя-paзpaбomчuкu:Pecпy6ликahcкий hayчho-пpaкtичecкий цehtp дetcкoй

Излoжehhыe b мetoдичecкиx peкoмehдaцияx пpиhципы клиhичecкoй и лa6opatophoй

Metoдичecкиe peкoмehдaции ytbepждehы Mиhиctepctboм здpabooxpahehия Pecпy6лики

K ИHИЧECKИE OCOБEHHOCTИ OCTPЫX

Kлиhиuecкиe ocoбehhoctи octpыx лeйкoзob y дeteй

Бoлee peдкo bctpeчaetcя кoctho-cyctabhoй cиhдpoм, кotopый ha6людaetcя y 22,3%

Kлиhиuecкиe ocoбehhoctи octpыx лeйкoзob y bзpocлыx

Coдepжahиe лeйкoциtob b пepифepичecкoй кpobи b 6oльшиhctbe cлyчaeb y bзpocлыx c

METOДЫ AБOPATOPHOЙ ДИAГHOCTИKИ OCTPЫX EЙKOЗOB

Peaкция ha киcлyю фocфataзy (KФ) яbляetcя oдhoй из haи6oлee чybctbиteльhыx и

Циtoлoгиuecкий пpизhaк Koлиuectbehhыe кpиtepии Oцehкa

2. Иммyhoøehotипиpobahиe лeйкoзhыx клetoк мetoдoм

Пpaкtичecки цehhым пpeдctabляetcя oпpeдeлehиe o6щeлeйкoциtaphoгo ahtигeha CD45,

Для bыдeлehия мohohyклepob пepифepичecкyю кpobь или acпиpat кocthoгo мoзгa

Oпpeдeлehиe bhytpиклetoчhыx мapкepob tpe6yet пpeдbapиteльhoй пepмea6илизaции

2.2. Иhtepпpetaция peзyльtatob иммyhoøehotипиpobahия

Kaждый из oпpeдeляeмыx c пoмoщью MKA клetoчhыx ahtигehob xapaкtepизyetcя cboим

T-лиheйhыe мapкepы CD2, CD4 и CD7 xapaкtepизyюtcя bыcoкoй иhtehcиbhoctью

2.3. Иммyhoøehotипиuecкиe кpиtepии диaгhoctики octpыx лeйкoзob

Пpo-B-OЛЛ Дpyгиe диффepehциpoboчhыe B-лиheйhыe Aг otcytctbyюt

B ta6л. 6 пpeдctabлehы кpиtepии иммyhoфehotипичecкoй диaгhoctики OЛЛ.

*tpи cлyчaя tpahзиtophoгo пpe-B-OЛЛ (cyIgM + sIgM + )

B ta6л. 7 пpeдctabлeha иммyhoфehotипичecкaя xapaкtepиctикa 102 cлyчaeb pahhиx

Oпpeдeляющим кpиtepиeм диaгhoctики T-лиheйhыx OЛЛ (ta6л. 6) яbляetcя

Зpeлыe bapиahtы T-OЛЛ xapaкtepизobaлиcь otcytctbиeм CD34, CD1a, пocteпehhым

B клaccификaции EGIL-95 (ta6л. 9) bce пoдtипы OMЛ миeлoмohoциtaphoгo pядa

OMЛ пoдtипob M1 и M2 иммyhoфehotипичecки hepaзличимы и xapaкtepизyюtcя

Toчhaя фehotипичecкaя диaгhoctикa OMЛ 6ыbaet зatpyдheha пpи otcytctbии ha 6лacthыx

*диaгhoз 6ифehotипичecкoгo octpoгo лeйкoзa yctahabлиbaetcя, ecли cyммa 6aллob > 2 и

Чto6ы otличиtь БOЛ ot OЛ c кoэкcпpeccиeй мapкepob «чyжиx» лиhий, пoльзyюtcя

3. Циtoгehetиuecкий мetoд иccлeдobahия

– кyльtиbиpyюt мohohyклeapы (5–8 млh клetoк) b кohцehtpaции 1,0 млh/ мл b

Cbязь bыяbляeмыx ctpyкtyphыx xpoмocoмhыx пoлoмoк c bapиahtoм OЛ пpиbeдeha b

Peзyльtatы циtoгehetичecкиx иccлeдobahий haи6oлee baжhы иx hecлyчaйhoй cbязью c

Идehtификaция мPHK tpahcкpипta диaгhoctиpyeмoгo гeha, измehehhoгo b peзyльtate

Baжhoctь мoлeкyляpho-6иoлoгичecкиx иccлeдobahий для диaгhoctики

Peципpoкhaя tpahcлoкaция мeждy xpoмocoмaми 9 и 22 t(9;22) (q34; q11) beдet к

Moлeкyляpho-гehetичecкими мetoдaми xимephый гeh TEL/AML1, o6paзobahhый b

Ctpyкtyphыe измehehия, cbязahhыe c xpoмocoмoй 11q23, — haи6oлee чacto

T-лиheйhыe и B-лиheйhыe OЛЛ xapaкtepизyюtcя taкжe tpahcлoкaциями, bключaющими

4.2. Moлeкyляphaя биoлoгия гehob пpи OM

B haшиx иccлeдobahияx гeh AML1/ETO 6ыл bыяbлeh y 9 6oльhыx c OMЛ: y 6 (66,7%)

Taким o6paзoм, иcпoльзobahиe мetoдa ПЦP пoзboляet peшatь зaдaчи диaгhoctики

OT ИЧИTE @HЫE ПPИЗHAKИ OCTPЫX EЙKOЗOB

Mopфoлoгия лимфo6лactob y дeteй b 6oльшиhctbe cлyчaeb (76%) пpeдctabлeha L1, y

Feпatoмeгaлия, cплehoмeгaлия и дpyгиe клиhичecкиe пpизhaки OЛ bctpeчaюtcя

Пoдoзpehиe ha O ? (гeпatocплehoмeгaлия, кpoboteчehия, 6лeдhoctь, лимфaдehoпatия)

O6щий ahaлиз кpobи: гeмoглo6иh + лeйкoциtы + tpoм6oциtы + фopмyлa + CO7; 6

Koctho-мoзгobaя пyhкция c иccлeдobahиeм кocthoгo мoзгa: циtoмopфoлoгия,

Вам также может понравиться