Раздел 2.

Обзор доклинических исследований

Название препарата:

Анальгин (Metamizole sodium)

Производитель:

ОАО «Борисовский завод медицинских препаратов», Республика Беларусь.

Республика Беларусь, 222518, Минская область, г. Борисов, ул. Чапаева,
64/27, тел/факс +375(177)735612, 731156.
Оглавление
2.4.1 Обзор лекарственного препарата........................................................................................3
2.4.2 Фармакология........................................................................................................................4
2.4.3 Фармакокинетика..................................................................................................................8
2.4.4 Токсикология.........................................................................................................................9
2.4.5 Другая информация....................................................................................................................19
Литература.............................................................................................................................................21

2
2.4.1 Обзор лекарственного препарата

Согласно информации, представленной в Энциклопедии лекарств и товаров

аптечного ассортимента, метамизол натрия в химическом отношении представляет собой
натриевую соль [(2,3-дигидро-1,5-диметил-3-оксо-2-фенил-1H-пиразол-4-ил)метиламино]
метансульфоновой кислоты, брутто-формула: C13H16N3O4SNa. Производное пиразолона.
Вещество представляет собой белый или белый с едва заметным желтоватым оттенком
кристаллический порошок, в присутствии влаги быстро разлагается. Легко растворим в
воде (1:1,5), водный раствор имеет pH 6–7,5. Трудно растворим в этаноле (1:60–1:80),
практически нерастворим в эфире, хлороформе, ацетоне. Угнетает активность
циклооксигеназы, снижает образование эндоперекисей, брадикининов, некоторых ПГ,
свободных радикалов, ингибирует перекисное окисление липидов. Препятствует
проведению болевых экстра- и проприоцептивных импульсов по пучкам Голля и Бурдаха,
повышает порог возбудимости таламических центров болевой чувствительности,
увеличивает теплоотдачу. При приеме внутрь быстро и полно абсорбируется. В стенке
кишечника гидролизуется с образованием активного метаболита, неизмененный
метамизол в крови отсутствует (только после в/в введения незначительные его
концентрации обнаруживаются в плазме). Уровень связывания активного метаболита с
белками составляет 50–60%. Разрушается в печени. Экскреция проходит через почки.
Действие развивается через 20–40 мин и достигает максимума через 2 ч. Эффект
препарата усиливают барбитураты, кодеин, кофеин, H2-антигистаминные средства,
пропранолол (замедляет инактивацию). Сарколизин и тиамазол увеличивают вероятность
развития лейкопении. Седативные средства и транквилизаторы усиливают
обезболивающее действие метамизола натрия. Трициклические антидепрессанты,
пероральные контрацептивы, аллопуринол нарушают метаболизм и повышают
токсичность препарата. Одновременное применение с другими анальгетиками-
антипиретиками, НПВС может привести к взаимному усилению токсических эффектов, с
хлорпромазином или другими производными фенотиазина — к развитию выраженной
гипертермии. Миелотоксичные лекарственные средства усиливают проявление
гематотоксичностиметамизола натрия. Фенилбутазон и другие индукторы
микросомальных ферментов печени ослабляют действие препарата. Метамизол натрия,
вытесняя из связи с белками крови, повышает активность пероральных
гипогликемических препаратов, непрямых антикоагулянтов, глюкокортикостероидов,
индометацина. Усиливает седативный эффект алкоголя. Снижает концентрацию
циклоспорина в плазме. Рентгеноконтрастные вещества, коллоидные кровезаменители и
пенициллин не должны применяться во время лечения метамизолом натрия. Из-за
высокой вероятности фармацевтической несовместимости нельзя смешивать с другими
лекарственными средствами в одном шприце [1].

3
2.4.2 Фармакология

В обзоре A. Jasiecka и соавт. приведены фармакологические характеристики

метамизола. Указано, что метамизол (дипирон) является неопиоидным обезболивающим
препаратом, который широко применяется у человека и в ветеринарной медицине. В
некоторых случаях данное лекарственное средство некорректно классифицируется как
нестероидный противовоспалительный препарат (НПВС). Метамизол является
пролекарством, которое после приема внутрь подвергается спонтанному распаду до
структурно схожих соединений пиразолона. Помимо обезболивающего эффекта, данный
препарат также оказывает жаропонижающее и спазмолитическое действие. Механизм
обезболивающего действия метамизола является сложным и, наиболее вероятно, основан
на ингибировании центральной циклооксигеназы-3 и активации опиоидэргической
системы и системы каннабиноида. Метамизол может блокировать как PG-зависимые, так и
PG-независимые механизмы развития лихорадки под действием LPS. Данный факт
указывает на то, что лекарственный препарат обладает профилем жаропонижающего
действия, который существенно отличается от такового НПВС. Механизм
спазмолитического действия метамизола связан с ингибированием высвобождения
внутриклеточного Сa2+ в результате снижения синтеза фосфата инозитола. Метамизол
главным образом применяется в лечении болевого синдрома различной этиологии,
спастических состояний (в особенности с поражением пищеварительного тракта), а также
для купирования лихорадки, рефрактерной к другим лекарственным препаратам.
Одновременное назначение морфина и метамизола сопровождается развитием
супераддитивного антиноцицептивного эффекта. Метамизол является относительно
безопасным лекарственным препаратом, однако он также имеет ряд побочных эффектов.
Наиболее серьезным из них является миелотоксичное действие препарата. Вместе с тем,
представляется вероятным, что в прошлом риск метамизол-индуцированного
агранулоцитоза был преувеличен. Несмотря на наличие данных, указывающих на
отсутствие риска тератогенного либо эмбриотоксического эффектов, данный препарат не
следует назначать беременным женщинам. Вместе с тем, разрешается применение
метамизола у животных в период беременности и лактации [2].

Целью исследования S. Kumbasar и соавт. являлось изучение влияния метамизола

на ишемическое/реперфузионное (И/Р) повреждение, а также анализ биохимических
данных, экспрессии молекулярных генов и гистопатологических данных яичников крыс-
альбиносов линии Wistar. В ходе исследования животные были разделены на четыре
группы: 1) контрольная группа с индуцированным ишемическим/реперфузионным
повреждением (IRC); 2) ишемическое/реперфузионное повреждение + 100 мг/кг
метамизола натрия (IRM-100); 3) ишемическое/реперфузионное повреждение + 200 мг/кг
метамизола натрия (IRM-200); 4) группа здоровых животных, которым была выполнена
имитация операции. Согласно полученным результатам, наблюдалось значительное
увеличение миелопероксидазной активности и экспрессии генов в тканях яичников крыс в
группах IRC и IRM-100 по сравнению с группой SG (P < 0.0001). Вместе с тем,
наблюдалось значительное снижение миелопероксидазной активности и экспрессии генов
в группе IRM-200 по сравнению с группами IRC и IRM-100 (P < 0.0001). Согласно
гистопатологическим данным, в тканях яичников крыс в группах IRC и IRM-100
наблюдались выраженный застой, расширение сосудов, кровотечение, отек, наличие
дегенеративных клеток, а также миграция нейтрофилов и их адгезия к эндотелию. В
группе IRM-200 наблюдалось небольшое количество застойных расширенных сосудов,
умеренный застой и отек, однако не было выявлено миграции и адгезии к эндотелию
4
нейтрофилов, также не было выявлено дегенеративных клеток. Авторы делают вывод о
том, что метамизол в дозе 200 мг/кг предотвращал повреждение яичников,
индуцированное ишемическим/реперфузионным повреждением. Полученные данные
указывают на то, что метамизол может использоваться в лечении
ишемических/реперфузионных повреждений яичников [3].

S. Espiridiao и соавт. изучали морфологическое и биохимическое действия

дипирона в отношении плаценты крыс-альбиносов путем кариометрии трофобластных
гигантских клеток, а также путем определения содержания ДНК, РНК и общего белка. В
ходе исследования животные получали препарат однократно в дозе 50 мг/кг массы тела в
течение 5 различных периодов беременности: с 9 по 12, с 11 по 14, с 13 по 16, с 15 по 18 и
с 17 по 20 дни беременности. Результаты кариометрии указывают на то, что объем ядер
клеток плаценты у крыс, получавших дипирон в течение первых трех периодов,
значительно превышал соответствующие значения у контрольных животных. Увеличение
содержания ДНК, РНК и белка в плаценте (по сравнению с контрольной группой)
наблюдалось только в группе животных, получавших препарат с 9 по 12 дни
беременности. Результаты исследования указывают на то, что дипирон обладает
блокирующим эффектом в отношении деления плацентарных клеток, причем данный
эффект реализуется главным образом на начальных этапах развития плаценты [4].

Целью исследования J.J. Jaroszewski и соавт. являлось определение влияния

нестероидных противовоспалительных средств (НПВС), принадлежащих к разным
химическим группам, в отношении выработки прогестерона (Р4) культивированными
телячьими стероидогенными клетками желтого тела. Клетки подвергались
ферментативному выделению из желтого тела, которое забиралось на 8-12 дни
эстрального цикла. После 24 часов предварительной инкубации осуществлялась
инкубация клеток в течение 24 часов только с питательной средой (контроль), либо со
стимуляцией телячьим лютеинизирующим гормоном (ЛГ, 100 нг/мл, положительный
контроль), либо с нарастающими концентрациями (от 10-8 до 10-4 М) ацетилсалициловой
кислоты, индометацина, ибупрофена, напроксена, пироксикама, фенилбутазона, дипирона
и нимесулида. Концентрация Р4 в питательной среде определялась путем
иммуноферментного анализа. Наблюдалось значительное увеличение выработки Р4 при
назначении дипирона во всех концентрациях, пироксикама в концентрациях 10 -8, 10-7 и 10-5
М, фенилбутазона и напроксена в концентрациях 10-7 и 10-6 М, а также ибупрофена в
концентрациях 10-5 и 10-4 М. Полученные результаты указывают на то, что НПВС могут
изменять выработку Р4 в телячьих клетках желтого тела, однако эти изменения зависят от
применяемого лекарственного препарата [5].

S. Tanyildizi и T. Bozkurt изучали влияние ацетилсалициловой кислоты и

метамизола в отношении гиалуронидазной активности семенной жидкости и
характеристик сперматозоидов у баранов. Бараны получали ацетилсалициловую кислоту и
метамизол в дозах 75 мг/кг и 50 мг/кг, соответственно, с последующим забором образцов
семенной жидкости через 1, 2, 4, 24, 48, 96, 120 и 144 часа. Для всех временных точек
было выявлено значительное увеличение гиалуронидазной активности семенной
жидкости по сравнению с контрольной группой (Р < 0.001). Кроме того, наблюдалось
значительное увеличение подвижности сперматозоидов в обеих опытных группах по
сравнению с контрольной группой (Р < 0.05). Также у животных, получавших
ацетилсалициловую кислоту и метамизол, во всех временных точках наблюдалось
значительное снижение концентрации сперматозоидов и объема семенной жидкости (Р <
0.01, Р < 0.05). Авторы делают заключение о том, что применение ацетилсалициловой
кислоты и метамизола в течение 6 дней приводит к усилению гиалуронидазной
активности и подвижности сперматозоидов, однако указанные препараты приводят к
5
снижению концентрации сперматозоидов и количества семенной жидкости. На основании
полученных результатов, не рекомендуется использование указанных препаратов в
течение сезона спаривания у баранов, которые содержатся в качестве осеменителей [6].

В работе G.P. Hernаndez-Delgadillo и S.L. Cruzу казано, что одновременное

назначение морфина и дипирона обеспечивает острое и хроническое потенцирование
антиноцицептивного эффекта у крыс, ранее не получавших лечения. В ходе данного
исследования эффективность комбинации лекарственных препаратов оценивалась у крыс,
ранее получавших морфин или дипирон. В девяти группах крысы мужского пола получали
3.1 мг/кг морфина, 600 мг/кг дипирона либо комбинацию морфина с дипироном два раза в
день в течение пяти дней (три группы для каждого режима лечения). С 6-го по 10-е
применение препарата в одной из трех групп каждой ветви лечение продолжалось без
изменений, в то время как в двух других группах лечение заменялось на одно из двух
других вариантов лечения из соседних ветвей. У крыс с толерантностью к морфину
применение данного препарата в комбинации с дипироном приводило к преходящему
потенцированию антиноцицептивного эффекта. У животных, получавших дипирон,
указанная комбинация препаратов приводила к длительному потенцированию
антиноцицептивного эффекта. У животных, получавших только комбинацию препаратов,
отмечался четкий антиноцицептивный эффект с самого начала лечения, однако отмечалось
его снижение после 6-го применения препарата. Не было выявлено перекрестной
толерантности между морфином и дипироном. Полученные данные указывают на то, что
дипирон потенцирует морфин-индуцированный антиноцицептивный эффект у крыс,
получавших дипирон, а также у крыс с толерантностью к морфину [7].

В работе G.G. dos Santos и соавт. указано, что метаболизм дипирона (метамизола)
осуществляется до двух основных биологически активных метаболитов: 4-
метиламиноантипирина (4-МАА) и 4-аминоантипирина (4-АА). Целью данного
исследования являлось изучение участия активации периферических каннабиноидных
рецепторов СВ1 и СВ2 в антигипералгезическом эффекте дипирона, 4-МАА или 4-АА. В
ходе исследования проводилось местное введение ПГЕ2 (100 нг / 50 мкл / животное) в
заднюю лапу крыс мужского пола линии Wistar, при этом проводилось количественное
определение механического ноцицептивного порока путем электрического теста фон Фрея
до инъекции и через 3 часа после нее. Дипирон, 4-МАА или 4-АА вводились за 30 минут
до выполнения теста фон Фрея. АМ251 (селективный антагонист рецептора СВ1), АМ630
(антагонист рецептора СВ2), ODQ (ингибиторcGMP) или блокатор КАТФ-каналов
глибенкламид вводились за 30 минут до инъекции дипирона, 4-МАА или 4-АА. Согласно
полученным результатам, наблюдалось дозозависимое ингибирование механической
гипералгезии под действием ПГЕ2 в результате введения дипирона, 4-МАА и 4-АА.
АМ251 и ODN (но не АМ630) нивелировали антигипералгезический эффект,
опосредованный 4-АА, но не дипироном или 4-МАА. С другой стороны, анти-
гипералгезический эффект дипирона или 4-МАА нивелировался под действием
глибенкламида или ODQ. Полученные результаты указывают на то, что активация
нейронального рецептора СВ1 (но не СВ2) в периферических тканях участвует в анти-
гипералгезическом эффекте 4-аминоантипирина. Кроме того, 4-метиламиноантипирин
опосредует антигипералгезический эффект путем активации cGMP и открытия КАТФ-
каналов [8].

Целью исследования G.E. De Souza и соавт. являлось сравнение антипиретических

эффектов дипирона и индометацина. В ходе исследования у крыс индуцировалась
лихорадка под действием LPS, интерлейкинов (ИЛ), простагландинов (ПГ), арахидоновой
кислоты (АК), предобразованного пирогенного фактора (ПОПФ), фактора некроза
опухоли-альфа (ФНО-альфа) либо кортикотропин-высвобождающего гормона (КВГ).
6
Блокирующая активность циклооксигеназы (ЦОГ-1/-2) оценивалась в
трансфектированных клетках COS-7. Высвобождение КВГ из изолированного
гипоталамуса определялось при помощи метода ELISA. Согласно полученным
результатам, под действием индометацина и дипирона наблюдалось снижение
выраженности лихорадки, индуцированной LPS, ИЛ-1 бета, ИЛ-6 или ФНО-альфа, а также
снижение высвобождения КВГ из гипоталамуса крысы. Только под действием дипирона
наблюдалось снижение выраженности лихорадки, индуцированной ИЛ-8, ПОПФ или ПГ2-
альфа. Только под действием индометацина наблюдалось снижение выраженности
лихорадки, индуцированной АК или ИЛ1-бета совместно с АК. Ни один из
жаропонижающих препаратов не оказывал влияния на лихорадку, индуцированную ПГЕ2
или КВГ. Наблюдалось блокирование антипиретической активности индометацина под
действием d(CH2)5Tyr(Me)AVP. Дипирон в очень высоких концентрациях (10 мМ)
ингибировал только ЦОГ-1, в то время как индометацин в концентрации 0.1 мМ
блокировал ЦОГ-1 и ЦОГ-2 в клетках COS-7. Авторы делают вывод о том, что
антипиретический эффект дипирона отличается от такового индометацина и не зависит от
высвобождения AVP или ингибирования синтеза ПГ [9].

В исследовании H. Akman и соавт. изучался антиноцицептивный эффект дипирона

(нестероидного и противовоспалительного препарата) в рамках серии экспериментов с
моделями отдергивания хвоста и горячей пластины, а также абдоминального
констриктивного теста. Согласно полученным результатам, дипирон не оказывал
обезболивающего действия в ходе тестов с отдергиванием хвоста и с горячей пластиной,
однако наблюдалось дозозависимое ингибирование количества растяжений в рамках
абдоминального констриктивного теста. Наблюдалось практически полное разрешение
антиноцицептивного эффекта дипирона под действием налоксона. Полученные результаты
указывают на то, что дипирон может оказывать центральное антиноцицептивное действие,
которое ингибируется налоксоном [10].

В статье R.M. Rezende и соавт. указано, что обезболивающие препараты

парацетамол и дипирон являются слабыми ингибиторами 1 и 2 изоформ циклооксигеназы
(ЦОГ-1, ЦОГ-2) и более мощными ингибиторами ЦОГ-3. Оба препарата также оказывают
слабое противовоспалительное действие в сравнении с их обезболивающим и
жаропонижающим действием. В модели воспалительного болевого синдрома,
опосредованного простагландинами, оба лекарственных препарата оказывали
обезболивающее действие. Авторы проанализировали указанные эффекты препаратов с
целью определения механизмов их развития. Воспаление было индуцировано в задней
лапе крысы путем внутриподошвенного введения 250 мкг лямбда-каррагенана (КГ), в
контралатеральную лапу вводился физиологический раствор. Порог чувствительности к
механическому воздействию определялся непосредственно до и через 6 часов после
введения КГ. Согласно полученным результатам, предварительное использование
парацетамола или дипирона в дозах 60-360 мг/кг приводило к купированию гипералгезии,
индуцированной КГ и к увеличению порога чувствительности в лапе с моделью
воспаления выше исходного уровня (гипоалгезия). Под действием парацетамола (но не
дипирона) также наблюдалось увеличение порога чувствительности в контралатеральной
лапе. Применение налтрексона, специфического опиатного антагониста, приводило к
нивелированию гипоалгезии, индуцированной парацетамолом, однако не оказывало
влияния на аналгезию под действием дипирона. Авторы делают вывод о том, что хотя
парацетамол и дипирон являются ингибиторами изоформ ЦОГ и, таким образом,
биосинтеза простагландина, их обезболивающее действие в функциональном и
механистическом плане является различным. Остается актуальной задача установления
достоверных механизмов действия указанных лекарственных препаратов [11].

7
2.4.3 Фармакокинетика

В статье M. Giorgi и соавт. указано, что метамизол (МТ) является обезболивающим

и жаропонижающим препаратом, который используется у человека, лошадей, котов,
свиней и собак. МТ подвергается быстрому гидролизу до первичного активного
метаболита 4-метиламиноантипирина (МАА). МАА образуется в значительно больших
количествах по сравнению с другими метаболитами. Среди вторичных метаболитов
относительно активным также является 4-аминоантипирин (АА). Целью исследования
являлась оценка фармакокинетических профилей МАА и АА у здоровых лошадей после
получения ими МТ в дозе 25 мг/кг. Шесть лошадей были случайным образом
распределены в две равные группы лечения в соответствии с перекрестным дизайном
исследования 2 х 2. Забор крови осуществлялся в течение 24 часов через определенные
интервалы времени с последующим анализом образцов плазмы валидированным методом
ВЭЖХ-УФ. Согласно полученным результатам, у животных не наблюдалось изменений в
поведении и в параметрах жизнедеятельности как во время, так и после введения
лекарственного препарата (до 7 дней наблюдения). У всех животных концентрация МАА в
плазме крови поддавалась определению с 5 минуты и до 10 часов после введения МТ.
Плазменные концентрации АА определялись в аналогичном временном диапазоне, однако
в меньших количествах. Наблюдались статистически значимые различия между
максимальной концентрацией (Cmax), временем до достижения максимальной
концентрации (Tmax) и значением AUMC0-last для MAA в группах внутривенного и
внутримышечного введения препарата. Соотношение AUCв/м/AUCв/в для МАА составляло
1.06. Для значений AUMC0-last метаболита АА были выявлены статистически значимые
различия между группами с соотношением AUCв/м/AUCв/в, равным 0.54 (P < 0.05).
Результаты исследования указывают на то, что различия в плазменных концентрациях
МАА и АА после внутримышечного и внутривенного введения МТ могут обладать
минимальными последствиями в отношении фармакодинамики лекарственного препарата
[12].

Целью исследования B. Lebkowska-Wieruszewska и соавт. являлось определение

фармакокинетических профилей двух активных метаболитов (4-метиламиноантипирин
(МАА) и 4-аминоантипирин (АА)) обезболивающего лекарственного препарата
метамизола (дипирон) у котов после поступления препарата перорально (п/о),
внутримышечно (в/м) и внутривенно (в/в). В рамках перекрестного дизайна исследования
шесть здоровых котов смешанной породы получали метамизол (25 мг/кг) в/в, в/м или п/о.
Во всех группах были выявлены признаки побочных явлений, а именно слюноотделение и
рвота (в/в – 67%, в/м – 34%, п/о – 15%). Средние значения максимальной концентрации
МАА в плазме крови в группах в/в, в/м и п/о приема препаратов составляли
148.63± 106.64, 18.74 ± 4.97 и 20.59 ± 15.29 мкг/мл, соответственно. Для всех путей
поступления препарата период полувыведения составлял приблизительно 7 часов.
Значение площади под кривой концентрации в плазме крови (AUC) было наименьшим
после внутримышечного введения препарата, причем соотношение AUCEV/в/в было выше
при п/о, чем при в/м введении препарата, однако статистической достоверности получено
не было. Плазменные концентрации АА определялись до 24 часов после введения
препарата, причем средние значения плазменных концентраций были ниже, чем для
метаболита МАА. Полученные данные указывают на то, что превращение МЕТ в
активные метаболиты происходит у котов таким же образом, как и у человека. Для
уточнения полученных данные необходимо проведение дальнейших
фармакодинамических исследований и исследований безопасности [13].
8
9
2.4.4 Токсикология

Под руководством Т.Н. Саватеевой в 2008 году в ФМБА ФГУН «Институт

токсикологии» было проведено сравнительное исследование острой токсичности
лекарственной формы препарата «Анальгин, таблетки 500 мг» производства РУП
«Борисовский завод медицинских препаратов» и зарегистрированного препарата-аналога.
Препарат является анальгезирующим ненаркотическим средством, производным
пиразолона, неселективно блокирует циклооксигеназу и снижает образование
простагландинов из арахидоновой кислоты. Кроме того, препарат препятствует
проведению болевых экстра- и проприорецептивных импульсов по пучкам Голля и
Бурдаха, повышает порог возбудимости таламических центров болевой чувствительности,
увеличивает теплоотдачу. Отличительной чертой является незначительная выраженность
противовоспалительного эффекта, обусловливающая слабое влияние на водно-солевой
обмен (задержка Na+ и воды) и слизистую оболочку ЖКТ. Оказывает анальгезирующее,
жаропонижающее и некоторое спазмолитическое (в отношении гладкой мускулатуры
мочевыводящих и желчных путей) действие. Действие развивается через 20-40 минут
после приема внутрь и достигает максимума через 2 часа. Хорошо и быстро всасывается в
ЖКТ. В стенке кишечника гидролизуется с образованием активного метаболита –
неизмененный метамизол в крови отсутствует (только после в/в введения незначительная
его концентрация обнаруживается в плазме крови). Связь активного метаболита с белками
плазмы крови – 50-60%. Метаболизируется в печени, выводится почками. В качестве
препарата-аналога был использован «Анальгин» (метамизол натрия, таблетки по 0.5 г,
далее - «Анальгин АСФАРМА») производства ООО «АСФАРМА», г. Анжеро-Судженск
(серия № 60106, годен до 11.2011 г.), таблетки которого имеют аналогичную общую массу.
Эксперименты выполнялись на белых нелинейных мышах и крысах. Крысы и
мыши поступили из питомника РАМН «Рапполово», Ленинградская область. Крысы
массой 160-180 г, возраст 13-14 недель; мыши – 18-20 г, возраст 8-9 недель. Определение
показателей острой токсичности включало эксперименты на грызунах (мышах, крысах).
Животные распределялись по группам случайным образом методом рандомизации. В
качестве критериев приемлемости рандомизации считали отсутствие внешних признаков
заболеваний и гомогенность групп по весу тела (±20%). Таблетки препарата «Анальгин» и
препарата сравнения растирали в порошок и разводили крахмальной слизью. Введение
осуществляли внутрижелудочно (в/ж) через металлический атравматичный зонд в
возрастающих дозах по Литчфилду-Уилкоксону. Для достижения больших доз препарата
лекарственную форму вводили животным многократно в течение 6 часов. Для
исследования каждой дозы препарата использовались группы по 6 животных одного пола.
Кроме того, имелись аналогичные по численности группы контрольных животных
каждого пола, которым по тому же пути вводили эквивалентные объемы растворителя –
крахмальной слизи. Дозирование осуществлялось на общую массу таблеток. Период
наблюдения составлял 14 суток. Регистрируемые показатели: летальность, время гибели
животных, симптоматика отравления, ежедневное наблюдение общего состояния и
поведения, взвешивание, потребление корма и воды, вскрытие и макроскопическое
описание погибавших и всех выживших животных в конце исследования (эвтаназия
осуществлялась передозировкой эфира), определение массовых коэффициентов
внутренних органов.
Зависимые от доз летальные эффекты препарата «Анальгин» и препарата
сравнения «Анальгин АСФАРМА» представлены в таблицах 2.1.1-2.1.4. Полученные
данные показывают, что достоверных половых различий в показателях острой
токсичности у обоих препаратов не проявляется. Это позволяет объединить данные по
10
летальности у самцов и самок и выполнить расчет летальных доз без учета пола.
Результаты соответствующих расчетов ЛД50 приведены в таблице 2.1.5. Там же
приведены и отношения ЛД50 сравниваемых препаратов.

Таблица 2.1.1
Летальные эффекты (пало/всего) препаратов при в/ж введении мышам-самцам

Доза, мг/кг 1000 2000 3000 4000 6000 8000

Анальгин 016 1/6 2/6 3/6 4/6 6/6
Анальгин АСФАРМА 0/6 1/6 3/6 3/6 5/6 6/6

Анальгин Анальгин АСФАРМА

ЛД50 = 3900 ± 100 мг/кг ЛД50 = 3500 ± 300 мг/кг

Таблица 2.1.2
Летальные эффекты (пало/всего) препаратов при в/ж введении мышам-самкам

Доза, мг/кг 1000 2000 3000 4000 6000 8000

Анальгин 0/6 1/6 2/6 4/6 5/6 6/6
Анальгин АСФАРМА 0/6 1/6 3/6 4/6 5/6 6/6

Анальгин Анальгин АСФАРМА

ЛД50 = 3400 ± 200 мг/кг ЛД50 = 3300 ± 100 мг/кг

Таблица 2.1.3
Летальные эффекты (пало/всего) препаратов при в/ж введении крысам-самцам

Доза, мг/кг 1000 2000 4000 6000 7000 8000

Анальгин 0/6 1/6 2/6 4/6 5/6 6/6
Анальгин АСФАРМА 0/6 0/6 2/6 4/6 4/6 6/6

Анальгин Анальгин АСФАРМА

ЛД50 = 5000 ± 300 мг/кг ЛД50 = 5500 ± 300 мг/кг

Таблица 2.1.4
Летальные эффекты (пало/всего) препаратов при в/ж введении крысам-самкам

Доза, мг/кг 1000 2000 4000 6000 7000 8000

Анальгин 0/6 1/6 2/6 4/6 5/6 6/6
Анальгин АСФАРМА 0/6 116 3/6 4/6 5/6 6/6

Анальгин Анальгин АСФАРМА

ЛД50 = 5000 ± 300 мг/кг ЛД50 = 4200 ± 400 мг/кг

11
Таблица 2.1.5
Значения ЛД50 (мг/кг) сравниваемых препаратов при в/ж введении без учета пола

Вид животного ЛД50

Анальгин Анальгин АСФАРМА
Мыши 3650 ± 150 3400 ± 200
Крысы 5000 ± 300 4850 ± 300

Как можно видеть, различия в значениях ЛД50 сравниваемых препаратов для двух
видов лабораторных животных не являются достоверными; отношения их ЛД50 близки к
1 и попадают в 10% интервал. Таким образом, по показателям острой токсичности оба
препарата являются практически эквивалентными (эквитоксичными).
Гибель мышей и крыс при введении высоких доз (более 2000 мг/кг) наблюдалась в
течение первых суток. Первыми внешними проявлениями действия обоих препаратов
являлись возбуждение, одышка, атаксия, общий тремор, которые сменялись сопорозным
состоянием и комой. У мышей через 1 час после введения препаратов появлялись
судороги, которые в дальнейшем сменялись комой и параличом. Вскрытие погибших
животных выявило венозное полнокровие внутренних органов, жидкую кровь в полостях
сердца, темно-бурую кровь в просвете желудка. В стенках желудка наблюдались
единичные эрозии и кровоизлияния в подслизистом слое. Половых различий в течении
интоксикации не наблюдалось. Результаты измерения массы тела животных, переживших
интоксикацию в дозах, вызывающих летальные эффекты (2000 мг/кг), представлены в
таблицах 2.2.1 и 2.2.2.

Таблица 2.2.1
Влияние острого введения сравниваемых препаратов на массу тела мышей, г

Время Экспериментальные группы

наблюдения Контроль Анальгин Анальгин АСФАРМА
M F M F M F
Фон 19.4±0.3 19.2±0.1 19.6±0.5 19.7±0.2 20.3±0.4 18.6±0.1
2-й день 19.7±0.3 19.0±0.3 19.9±0.1 20.0±0.1 19.8±0.1 19.1±0.4
7-й день 20.3±0.3 20.1±0.3 20.6±0.2 21.0±0.3 21.9±0.3 21.2±0.3
14-й день 20.6±0.5 21.5±0.3 21.2±0.4 22.0±0.1 22.3±0.2 20.2±0.4

Таблица 2.2.2
Влияние острого введения сравниваемых препаратов на массу тела крыс, г

Время Экспериментальные группы

наблюдения Контроль Анальгин Анальгин АСФАРМА
M F M F M F
Фон 185.6±4.7 179.5±2.1 181.6±4.4 184.6±2.9 169.2±3.3 180.0±2.4
2-й день 194.7±3.6 185.6±3.1 181.3±4.6 177.1±3.9 178.5±4.5 177.7±2.5
7-й день 191.0±4.3 187.2±2.9 188.5±5.4 197.0±3.3 201.2±4.7 199.0±2.8
14-й день 202.7±4.4 200.2±3.8 202.3±5.2 195.5±2.8 200.6±3.4 197.9±2.7

Анализ полученных данных показывает некоторое снижение средней массы тела у

всех животных, получавших препараты, на второй день после введения. Этот эффект был
более заметен у крыс, чем у мышей (но в обоих случаях он не являлся статистически
12
значимым). В последующие дни динамика массы тела опытных животных во всех группах
не отличалась от контроля. Достоверных различий в динамике массы тела в группах
животных, получавших сравниваемые препараты, также не выявляется.
На вскрытии крыс и мышей в конце эксперимента (через 14 дней) различий между
животными, получавшими сравниваемые препараты, не установлено. Шерсть опытных
животных имела опрятный вид, была блестящей, без очагов облысения. Питание
животных было удовлетворительным. При осмотре грудной и брюшной полостей
нарушений в расположении внутренних органов не отмечалось. Подчелюстные
лимфатические узлы и слюнные железы имели овальную или округлую форму,
однородный розоватый или желтоватый цвет и умеренную плотность. Щитовидная железа
плотно прилежала к гортани, имела обычные размеры и плотность, розовато-красноватый
цвет. Тимус имел треугольную форму, беловатый цвет и умеренно плотную
консистенцию. Величина и форма сердца изменений не представляли. Мышца сердца
была коричневатой, плотной. Поверхность легких имела бледно-розовую окраску; легкие
спадались при вскрытии грудной клетки. Ткань на разрезе также имела однородную
бледно-розовую окраску. Слизистая оболочка внелегочных бронхов была гладкой,
блестящей, бледно-розовой. Селезенка имела темно-вишневый цвет, гладкую поверхность
и плотноватую консистенцию. Желудок имел обычную форму и размеры, просвет был
заполнен плотным пищевым содержимым. Слизистая тела желудка была бледно-розовой,
блестящей, складчатой. Слизистая тонкой и толстой кишки была блестящей, гладкой. У
части животных наблюдались эрозии слизистой оболочки желудка и кровоизлияния в
подслизистом слое. Поджелудочная железа была бледно-розовой, дольчатой. Величина и
форма печени изменений не представляли. Капсула печени была тонкой, прозрачной.
Ткань печени имела коричневатый цвет и умеренно плотную консистенцию. Величина и
форма почек не отличались от контроля, капсула легко снималась. Поверхность органа
была гладкой, однородной коричневато-сероватой окраски. На разрезе почек отчетливо
различались корковое и мозговое вещество. Форма, размеры и плотность надпочечников,
яичников или яичек не отличались от контроля. Оболочки головного мозга были тонкими,
прозрачными. Вещество головного мозга имело умеренную плотность. Расширения
желудочков мозга не наблюдалось. В таблицах 2.3.1 и 2.3.2 приведены массовые
коэффициенты внутренних органов мышей и крыс, усредненные по группам.

Таблица 2.3.1
Массовые коэффициенты (МК) органов у белых мышей при остром введении
сравниваемых препаратов (г/кг веса тела)

Орган Экспериментальные группы

Контроль Анальгин Анальгин
АСФАРМА
M F M F M F
Сердце 3.2±0.2 3.5±0.4 3.9±0.09 3.3±0.3 3.5±0.4 3.6±0.5
Легкие с трахеей 6.4±0.3 6.7±0.2 6.0±0.1 6.6±0.2 6.5±0.4 6.6±0.1
Тимус 0.90±0.05 0.87±0.07 0.88±0.03 0.89±0.06 0.89±0.08 0.85±0.06
Печень 41.0±0.8 36.5±1.4 39.4±2.6 38.1±2.4 37.4±0.6 37.4±1.4
Селезенка 3.1±0.09 3.3±0.1 3.4±0.6 3.5±0.4 3.0±0.1 3.1±0.1
Почка (левая) 4.4±0.3 4.3±0.5 4.3±0.5 4.6±0.1 4.3±0.4 4.4±0.3
Надпочечники 0.17±0.01 0.17±0.01 0.18±0.02 0.15±0.01 0.19±0.08 0.17±0.01
Головной мозг 15.6±0.6 15.6±0.5 15.6±0.4 15.8±0.6 14.6±0.3 15.5±0.6
Яички или яичники 4.1±0.09 0.26±0.03 3.4±0.4 0.19±0.01 3.5±0.2 0.19±0.01

Таблица 2.3.2

13
Массовые коэффициенты (МК) органов у белых крыс при остром введении сравниваемых
препаратов (г/кг веса тела)

Орган Экспериментальные группы

Контроль Анальгин Анальгин
АСФАРМА
M F M F M F
Сердце 3.9±0.2 4.1±0.4 4.1±0.4 4.0±0.2 4.4±0.1 4.4±0.2
Легкие с трахеей 7.2±0.2 7.2±0.7 7.9±0.2 8.5±0.6 7.8±0.1 8.2±0.5
Тимус 1.38±0.14 1.29±0.07 1.42±0.11 1.29±0.09 1.25±0.07 1.27±0.12
Печень 37.0±1.6 36.6±1.8 38.6±1.5 36.3±2.1 32.7±2.0 35.2±1.4
Селезенка 4.2±0.1 4.5±0.3 3.7±0.1 3.9±0.2 4.0±0.4 3.5±0.4
Почка (левая) 4.4±0.1 4.5±0.3 4.4±0.09 4.4±0.3 5.0±0.2 4.5±0.09
Надпочечники 0.11±0.02 0.09±0.01 0.10±0.02 0.08±0.01 0.09±0.01 0.11±0.01
Головной мозг 8.8±0.5 8.2±0.3 8.8±0.2 8.8±0.1 8.6±0.2 8.9±0.2
Яички или яичники 13.2±0.09 0.32±0.02 12.2±0.09 0.27±0.01 12.1±0.3 0.23±0.03

Анализ величин массовых коэффициентов не выявил каких-либо достоверных

отличий как между группами животных, получавшими два сравниваемых препарата, так и
по отношению к контрольной группе.
При исследовании острой токсичности на грызунах при внутрижелудочном пути
введения значения ЛД50 препарата «Анальгин» составили 3650 ± 150 мг/кг (мыши) и
5000 ± 300 мг/кг (крысы) и практически не отличались от значений для препарата
сравнения – 3400 ± 200 мг/кг и 4850 ± 300 мг/кг, соответственно. Клиническая картина
интоксикации у обоих препаратов была идентичной. Состояние животных, переживших
интоксикацию, нормализовалось в течение 1,5-2 суток. В дальнейшем оно не отличалось
от такового в контрольной группе. Вскрытие животных спустя 14 дней после острого
введения обоих препаратов не показало наличия каких-либо остаточных явлений,
связанных с перенесенной интоксикацией. Таким образом, результаты токсикометрии,
данные наблюдений за экспериментальными животными на протяжении 14 дней после
острого введения, а также данные некропсии позволяют отнести препарат «Анальгин,
таблетки 500 мг к IV классу малотоксичных лекарственных веществ (Н. Hodgeetal.Clinical
Toxicology of Commercial Products. Acute Poisoning. Ed. IV, Baltimore, 1975, 427 р.;
К.К.Сидоров, 1973). Проведенные исследования свидетельствуют об отсутствии различий
по показателям острой токсичности между препаратом «Анальгин» и зарегистрированным
препаратом-аналогом.
Также было проведено сравнительное исследование подострой токсичности
лекарственной формы препарата «Анальгин, таблетки 500 мг» производства РУП
«Борисовский завод медицинских препаратов» и зарегистрированного препарата-аналога.
Постановка исследований включала следующие позиции: 1. Животные: крысы обоего
пола, нелинейные, масса 180-190 г.; 2. Путь введения: внутрижелудочно (через
металлический атравматичный зонд); 3. Дозы: 50 мг/кг (максимальная суточная
терапевтическая доза для взрослого человека) и 1000 мг/кг (в 20 раз большая доза); 4.
Частота введения: 1 раз в день в течение 30 дней; 5. Экспериментальные группы:
Анальгин (1 доза – 15 самцов, 15 самок; 2 доза – 15 самцов, 15 самок), Анальгин
АСФАРМА (1 доза – 15 самцов, 15 самок; 2 доза – 15 самцов, 15 самок), контроль (15
самцов, 15 самок). Общее количество – 150 животных, из них 30 – контрольная группа; 6.
Длительность наблюдения: общая продолжительность наблюдения – 30 дней. После
окончания введения животные всех групп были забиты передозировкой эфира и
направлены на вскрытие и патоморфологическое исследование; 7. Регистрация
показателей: общее состояние оценивалось при ежедневном осмотре животных.

14
Взвешивание, измерение ректальной температуры, потребления воды и корма
выполнялось раз в неделю и после окончания введения. Физиологические,
гематологические и биохимические исследования проводились до начала опыта и через 30
дней после начала исследования. Макроскопическое и гистологическое исследование
внутренних органов проводилось посмертно после окончания введения.
Проводилась оценка влияния препаратов на массу тела. Точность используемых
весов была верифицирована до начала исследования. Анализ приведенных в таблицах
данных показывает, что вес животных равномерно увеличивался на протяжении всего
срока исследования как в контрольной, так и во всех опытных группах. Каких-либо
различий, связанных с уровнем дозирования или видом используемого препарата, не
отмечалось.
Проводилась оценка влияния препаратов на ректальную температуру. Измерения
ректальной температуры крыс выполнялись с помощью электрического медицинского
термометра ТПЭМ-1 (допустимая основная погрешность от диапазона измеряемых
температур ± 1%) через 1 час после введения препарата. Анализ полученных данных
показал, что введение обоих препаратов достоверно снижало ректальную температуру
белых крыс через две недели от начала эксперимента.
Проводилась оценка влияния препаратов на суммационно-пороговый показатель
(СПП). Согласно полученным данным, в опытных группах не наблюдалось изменения
величин СПП по отношению как к фону, так и к контролю.
Проводилась оценка влияния препаратов на двигательную и исследовательскую
активность животных. Оценивались данные по влиянию препарата «Анальгин» и
препарата сравнения на спонтанную двигательную активность крыс (СДА). Крысы по
одной помещались в регистрационную камеру автоматического регистратора «Coulburn
lnstruments», где за каждые 5 минут на протяжении 35 минут у них регистрировалось
количество движений. Данные по контрольным животным свидетельствуют, что на
протяжении исследования имело место общее снижение СДА (типичное явление в
условиях длительных исследований).
Проводилась оценка данных по влиянию препарата «Анальгин» и препарата
сравнения на структуру поведения крыс в «открытом поле». Как видно из представленных
данных, практически во всех экспериментальных группах животных (включая
контрольные группы) отмечается достоверное укорочение латентного периода, а также
недостоверное увеличение активности, оцениваемое по количеству вертикальных стоек,
пересечений и заглядываний по сравнению с фоновыми данными, что является
характерным для животных, вторично помещаемых в условия «открытого поля». При
этом каких-либо статистически достоверных отличий в структуре поведения животных
опытных групп от групп контроля не отмечается.
Проводилась оценка влияния препаратов на сердечно-сосудистую деятельность, а
именно изучение данных по влиянию подострого введения препарата на систолическое
артериальное давление. Из полученных результатов следовало, что имеется тенденция
(местами достоверная) к увеличению уровня артериального давления при введении обоих
препаратов. При анализе данных о влиянии препарата «Анальгин, таблетки 500 мг» и
препарата сравнения на частоту сердечных сокращений, было выявлено явное, но
недостоверное увеличение ЧСС, одинаковое при введении обоих препаратов.
Проводилась оценка влияния препарата «Анальгин» и препарата сравнения на
основные биохимические показатели крови белых крыс, а также на активность ферментов
и баланс ионов. Как следовало из представленных данных, каких-либо значимых
изменений по сравнению с фоном и контролем не отмечалось ни в одной из опытных
групп, кроме незначительного снижения уровня сахара и повышения активности
трансаминаз на максимальной дозе. Это позволяет заключить, что как препарат
«Анальгин», так и препарат-аналог в обеих испытанных дозах не оказывают заметного

15
влияния на основные биохимические показатели крови, на активность ферментов плазмы
крови и ионный баланс.
Проводилась оценка влияния препаратов на морфологические показатели
периферической крови. Гематологические исследования проводились до начала введения
препарата и через 30 дней после ежедневного введения во всех группах. Кровь получали
пункцией хвостовой вены.
Статистическая обработка результатов проводилась по методам Стьюдента-
Фишера. Из полученных данных следовало, что введение препаратов достоверно (р <
0,05) увеличивало продолжительность свертывания крови, особенно на максимальной
дозе. Кроме этого, имелась тенденция к снижению уровня гемоглобина, количества
эритроцитов и лейкоцитов, не носящая достоверного характера. При анализе
лейкоцитарной формулы (таблица 3.8.2) единственным заметным эффектом является
незначительное увеличение процентного числа плазматических клеток в крови животных
опытных групп по сравнению с контрольными. Этот эффект не обнаруживается простым
сравнением средних по Стьюденту, но выявляется методом дисперсионного анализа и
связан с фактором «введение препарата без учета дозы». Однако этот эффект, являясь
статистически достоверным при р < 0.90, не выводит данный показатель за пределы
физиологической нормы.
Согласно результатам патоморфологического исследования, достоверных отличий
массовых коэффициентов внутренних органов крыс ни в одной из опытных групп от
контрольных нет. Патологических сдвигов не отмечено. Таким образом,
внутрижелудочное применение препарата «Анальгин» в дозах 50 и 1000 мг/кг, а также
препарата-аналога не вызывает патологических морфологических изменений внутренних
органов, в том числе головного мозга, и не вызывает раздражения пищевода, желудка и
кишечника.
Согласно результатам некропсии и гистологического исследования, ежедневное
внутрижелудочное введение лекарственной формы препарата «Анальгин» и препарата-
аналога в дозах 50 и 1000 мг/кг в течение 30 дней крысам обоего пола не вызывает
раздражения, воспаления или деструкции тканей ЖКТ, а также не сопровождается
развитием дистрофических, деструктивных, очаговых склеротических изменений в
паренхиматозных клетках и строме внутренних органов.
В целом, результаты исследований подострой токсичности препарата «Анальгин»
при его внутрижелудочном введении один раз в сутки в течение 30 дней в дозах 50 и 1000
мг/кг у крыс обоих полов в сравнении с зарегистрированным аналогом показали, что оба
препарата не вызывают каких-либо заметных сдвигов биохимических показателей крови.
Патоморфологические исследования также не выявили каких-либо изменений внутренних
органов, свидетельствующих о негативном побочном действии препаратов. По
результатам морфологических и гистологических исследований, внутрижелудочное
введение препаратов не оказывало раздражающего действия на пищевод, желудок и
кишечник. Все это свидетельствует о хорошей переносимости и безвредности
лекарственных форм этих препаратов. Выявленные негативные тенденции действия
препаратов в максимальной дозе 1000 мг/кг (угнетение эритро- и лейкопоэза, увеличение
времени свертываемости крови, повышение уровня артериального давления,
возбудимости центральной нервной системы) являются следствием их фармакодинамики.
Величины изменений физиологических показателей, вызванные применением препарата
«Анальгин», сравнивались с аналогичными изменениями в случае применения препарата-
аналога. Во всех тестах степень изменения показателей, вызванная обоими препаратами,
была практически одинакова: ни в одном случае достоверного различия между
препаратами не отмечалась. Это позволяет утверждать, что в условиях подострого
применения у крыс в дозах 50 и 1000 мг/кг оба препарата являются практически
эквивалентными. Полученные результаты позволили рекомендовать лекарственную форму
препарата «Анальгин» производства РУП «Борисовский завод медицинских препаратов» г.
16
Борисов (Республика Беларусь) в МЗ СР РФ в качестве малотоксичного средства для
проведения клинических испытаний и регистрации [14].

Дипирон является ненаркотическим обезболивающим и жаропонижающим

препаратом, который используется как в периатрической практике, так и у взрослых
пациентов. Вместе с тем, дипирон не является стабильным в жидком состоянии. S. Mao и
соавт. была разработана стабильная лекарственная форма дипирона с последующим
изучением ее жаропонижающего эффекта у кроликов и крыс. Для обеспечения точности
дозирования в исследованиях на животных, было проведено изучение эффекта дозы в
отношении распределения раствора дипирона в полости носа у кроликов с
использованием генцианвиолета в качестве индикатора. Кроме того, проводилось изучение
потенциальной токсичности дипирона. В ходе исследования было выявлено, что объем
носовой полости кролика может содержать до 100 мкл раствора. Наблюдалось улучшение
фармакодинамических параметров при использовании разработанной лекарственной
формы дипирона по сравнению со стандартными лекарственными формами. Также
наблюдалось значимое снижение температуры тела через 10 минут после применения
препарата. Токсичность препарата, выявленная по результатам исследования, была
незначительной. Авторы делают вывод о том, что разработанная лекарственная форма
дипирона является эффективной и безопасной для клинического применения [15].

В исследовании V.V. Arkhipchuk применялся комплексный подход по оценке

токсичности, цитотоксичности и генотоксичности двух лекарственных препаратов
(метамизол натрия и ацетилсалициловая кислота), при их воздействии в концентрации
ic(50) в отношении клеток млекопитающих. Указанный подход был основан на
использовании организмов, принадлежащих к различным системным группам (растения,
беспозвоночные и позвоночные), ядерных биомаркеров, а также на исследовании
микроядрышек клеток. Ацетилсалициловая кислота использовалась в концентрации
1.6х103 мг/л, которая является нетоксичной при биологических исследованиях на рыбах
(Carassius auratus gibelio) и гидрах (Hydra attenuata). В то же время, указанная
концентрация характеризуется острой токсичностью при биологических исследованиях на
цериодафниях (Ceriodaphnia affinis) и луке (Allium cepa). Раствор метамизола натрия
(6.25%) обладал острой токсичностью по отношению ко всем исследуемым организмам.
Оба препарата через 30-360 минут после начала действия в отношении исследуемых
организмов, вначале изменяли размер ядра в клетках растений и животных (т.е. наиболее
значимым изменениям подвергалась транскрипционная активность рибосомных генов).
Более того, раствор метамизола натрия вызывал структурные повреждения ядра в 90%
клеток гидры через 30 минут от начала воздействия. Раствор ацетилсалициловой кислоты
главным образом ингибировал частоту деления клеток в меристеме корня лука
(наблюдалось снижение митотического индекса до 9.6 на тысячу, в сравнении с 51.7 на
тысячу для контрольной группы). Инкубация карпа и проращивание лука в растворе
ацетилсалициловой кислоты приводило к воспроизводимому увеличению частоты
появления клеток с микроядрышками (в 2 и 5.5 раз, соответственно) и с двойным ядром (в
3 и 1.5 раза, соответственно). Описанный подход может быть применен для быстрого и
экономически эффективного получения данных о различных типах токсичности
лекарственных препаратов, а также при разработке лекарственных средств [16].

В статье J.H. Pamplona и соавт. указано, что использование нестероидных

противовоспалительных средств, таких как дипирон, является настолько
распространенным, что данный препарат и его метаболиты были выявлены в сточных и
поверхностных водах. Целью данного исследования являлась оценка потенциальной
токсичности дипирона в жидкой среде, с использованием в качестве объекта рыб вида
Rhamdia quelen. Рыбы подвергались воздействию дипирона в воде в трех концентрациях
17
(0.5, 5 и 50 мкг/л) в течение 15 дней, с оценкой гематологических, биохимических,
генетических и морфологических биомаркеров. Согласно полученным результатам, при
использовании препарата в наиболее высокой концентрации наблюдалось снижение
активности глутатионовой S-трансферазы по сравнению с контрольной группой. Кроме
того, во всех трех группах наблюдалось снижение гематокрита, количества эритроцитов и
тромбоцитов по сравнению с контролем. По результатам кометного анализа было
выявлено повреждение ДНК при использовании дипирона в наименьшей концентрации, а
также значительное повреждение почек. Результаты исследования указывают на то, что
постоянное воздействие дипирона на живые организмы в водной среде может оказывать
токсические эффекты [17].

Целью исследования Y. Guvenc и соавт. являлось изучение эффектов метамизола

натрия в отношении развития нервной трубки на ранних стадиях в модели эмбриона
цыпленка, которая соответствует первому месяцу эмбрионального развития у
млекопитающих. В ходе исследования 40 оплодотворенных куриных яиц были разделены
на 4 равные группы. Проводилась инкубация яиц при температуре37.8±2°Cи влажности
60±5%. Группа А являлась контрольной, в группе В применялся физиологический раствор,
в группе С применялся метамизол натрия в концентрации 30 мг/кг (на основании
диапазона терапевтического индекса, применяемого у человека), в группе D применялся
метамизол натрия в концентрации 90 мг/кг. Все эмбрионы были извлечены из яиц через 48
часов с последующей их морфологической и гистологической оценкой. Согласно
полученным результатам, нормальное развитие с закрытием нервной трубки наблюдалось
у 17 эмбрионов в группах А и В. Дефект нервной трубки был выявлен у 2 эмбрионов в
группе А и у 1 эмбриона в группе В. Дефект закрытия нервной трубки был выявлен у всех
эмбрионов в группе С и у 9 эмбрионов в группе D. В группе D был выявлен 1 погибший
эмбрион. Авторы делают вывод о том, что метамизол натрия приводил к образованию
дефекта нервной трубки в модели эмбриона цыпленка [18].

K. Izumi и соавт. провели оценку канцерогенного потенциала и мутагенности

дипирона, жаропонижающего препарата, с использованием дипирона А, производимого в
Японии и/или дипирона В, производимого в Германии. В ходе оценки канцерогенного
потенциала дипирона А в отношении печени крысы, 8-недельные мужские особи крыс
линии F344 получали 0.01% диэтилнитрозамин (ДЭН) с питьевой водой в течение 2
недель, а затем, после 1-недельного перерыва, 0.4% дипирон с питьевой водой, 5 раз в
неделю в течение 72 недель. После 8-недельного периода восстановления все выжившие
крысы были выведены из эксперимента в возрасте 83 недель. Согласно полученным
результатам, наблюдалось более частое развитие печеночноклеточной карциномы в группе
ДЭН + дипирон (18 из 29 крыс, 62%), чем в группе ДЭН (9 из 29 крыс, 31%), причем
различие было статистически значимым (Р < 0.05). Не наблюдалось канцерогенной
активности дипирона у животных, получавших 0.4% дипирон в течение 72 недель, а также
у животных, получавших 0.4% дипирон в течение 25 недель, с последующим приемом
0.05% фенобарбитала (ФБ) в течение 50 недель. Вместе с тем, в указанных группах с
более высокой частотой, чем в контрольной группе (Р < 0.01) наблюдались
предопухолевые очаги в печени, положительные в отношении глутатионовой S-
трансферазы Р (GST-P+). При оценке влияния дипирона А и дипирона В в отношении
развития ДЭН-индуцированных GST-P+ очагов в печени в рамках среднесрочного
биологического анализа было выявлено, что 0.4% дипирон А в питьевой воде и 0.57%
дипирон А или дипирон В в порошкообразной пище после начала приема ДЭН обладали
схожим усиливающим действием в отношении развития очагов GST-P+ (Р < 0.001). По
результатам мутационного теста Эймса, проведенного на микроорганизмах рода
Salmonella, как дипирон А, так и дипирон В обладали слабым мутагенным воздействием в
отношении штамма ТА100 в присутствии либо в отсутствие фракции S9 [19].
18
 В статье V.B. Veronesi и соавт. указано, что дипирон (метамизол) является мощным
лекарственным препаратом, который широко используется с обезболивающей и
жаропонижающей целями. Вместе с тем, достоверна не установлена безопасность его
использования в период лактации и потенциальное влияние на потомство. Целью данного
исследования, проведенного на мышах, являлось определение влияния получаемого
материнским организмом дипирона в период лактации на развитие и эмоциональное
поведение потомства, а также на поведение матерей. В ходе исследования со 2 по 9 дни
после родоразрешения кормящие матери получали либо питьевую воду, либо питьевую
воду, содержащую дипирон в концентрациях 100, 300 и 500 мг/кг/сутки. После этого все
животные получали обычную питьевую воды. На 2 день после родоразрешения все
приплоды были уменьшены до 8 особей (4 мужского пола и 4 женского пола). Поведение
матерей оценивалось на 3, 6, 9 и 12 дни после родоразрешения; на 7 день проводилась
оценка двигательной активности животных на открытой площадке. В ходе периода
лактации проводился анализ рефлекторных параметров и физического развития
потомства. На 7 день после родоразрешения был проведен анализ ультразвуковой
вокализации (УЗВ). При достижении потомством половозрелого возраста проводилась
оценка двигательной активности животных на открытой площадке, в приподнятом
крестообразном лабиринте и в тесте «закапывания шариков». Полученные данные
указывают на то, что прием дипирона в ходе периода лактации не только изменял
поведение матерей и оказывал влияние на физическое и неврологическое развитие
потомства, но также приводил к изменению поведения потомства с преобладанием
возбуждения [20].

2.4.5 Другая информация

19
 S. Rupp и соавт. изучали влияние пиразолонового производного метамизола на
моторику верхних отделов желудочно-кишечного тракта у крыс. В ходе исследования
использовалась животная модель одновременного количественного определения
опорожнения желудка и транспорта содержимого по тонкому кишечнику. Животные
получали порции пищи с различными радиоактивными метками через предварительно
установленные зонды в желудок (1.0 мл; 51Cr) и в двенадцатиперстную кишку (0.25 мл;
99mTc). Пространственное распределение обоих изотопов в желудочно-кишечном тракте
определялось через 30 минут после начала их введения. Согласно полученным
результатам было показано, что внутривенное введение метамизола приводит к
значительному снижению в процентном отношении количества пищи, которая выводится
из желудка (контроль: 70.9 +/- 2.8; метамизол 50 мг/кг: 26.3 +/- 6.9, р < 0.001; метамизол
250 мг/кг: 3.8 +/- 1.5, р < 0.001; метамизол 1250 мг/кг: 1.1 +/- 0.3, р < 0.001).
Лекарственный препарат в дозах 50 мг/кг и 250 мг/кг не оказывал отрицательного влияния
на моторику тонкого кишечника. Дозировка метамизола 1250 мг/кг приводила к
значительному снижению скорости транспорта содержимого по тонкому кишечнику (р <
0.001) [21].

В статье F.J. Lopez-Munoz и соавт. указано, что комбинация обезболивающих

препаратов может обеспечить оптимальное купирование болевого синдрома с
минимальным количеством побочных эффектов. Было продемонстрировано, что
комбинации трамадола с рядом нестероидных противовоспалительных препаратов
обладают синергичными антиноцицептивными эффектами, а также приводят к
значительному снижению частот побочных эффектов. Целью данного исследования
являлось изучение влияния трамадола и метамизола в отношении болевого синдрома и
моторики кишечника при изолированном и комбинированном использовании указанных
препаратов у крыс. Также целью исследования являлось установление типов
существующих лекарственных взаимодействий с использованием кривых «доза-ответ» и
изоболографического анализа. В ходе исследования проводилась количественная оценка
обезболивающего эффекта трамадола и метамизола при их изолированном и
комбинированном применении в различных соотношениях с использованием «модели
функциональных нарушений под воздействием болевого раздражителя у крысы». Также
оценивалось влияние препаратов в отношении моторики кишечника с добавлением в пищу
активированного угля. Согласно полученным результатам, для трамадола (в дозах 3.2-56.2
мг/кг) и метамизола (в дозах 56.2-562.3 мг/кг) был характерен дозо-зависимый ответ,
причем трамадол обладал большей эффективностью и более мощным действием, чем
метамизол. Был проведен анализ двадцати пяти различных комбинаций трамадола с
метамизолом, по результатам которого наблюдался либо аддитивный антиноцицептивный
эффект, либо его потенцирование. Было установлено, что оптимальной является
комбинация, включающая 3.2 мг/кг трамадола и 316.2 мг/кг метамизола. Вместе с тем,
нарушения моторики кишечника (запоры), которые наблюдались при использовании
подобной комбинации, являлись более выраженными по сравнению с таковыми на фоне
изолированного применения трамадола. Результаты исследования указывают на
возможность взаимодействия между двумя изучавшимися лекарственными препаратами,
которое может иметь фармакокинетическую и/или фармакодинамическую природу.
Доклинические антиноцицептивные взаимодействия и побочные эффекты комбинации
трамадола и метамизола указывают на необходимость осторожности при назначении
указанной комбинации в клинической практике для купирования болевого синдрома [22].

Целью исследования N.F. Rocha и соавт. являлось изучение синергизма между l-

триптофаном и дипироном или парацетамолом, а также взаимодействия между
кинуреновой кислотой (метаболит l-триптофана) и указанными обезболивающими
препаратами. В ходе исследования авторы проводили тест корчей, вызванных введением
20
уксусной кислоты, с целью оценки антиноцицептивного эффекта изолированного и
комбинированного применения изучаемых препаратов у мышей. Проводилось построение
кривых «доза-ответ» со статистическим анализом значений ED50 для изолированного и
комбинированного применения препаратов. Также проводился изоболографический
анализ со сравнением экспериментальных значений с теоретическими значениями,
полученными для простого аддитивного эффекта. Согласно полученным результатам,
комбинированное лечение с использованием l-триптофана и дипирона или парацетамола
приводило к значительному снижению ED50 указанных обезболивающих препаратов по
сравнению с их изолированным применением. Изолированное использование l-
триптофана также сопровождалось антиноцицептивным эффектом. Под действием l-
триптофана наблюдалось увеличение количества 5-НТ; наблюдался обратный эффект в
отношении синергизма с дипироном при истощении запасов 5-НТ. Кинуреновая кислота
обладала антиноцицептивным дозозависимым эффектом и синергичным взаимодействием
с дипироном и парацетамолом, которые были верифицированы путем изоболографических
анализов и подтверждены экспериментальными значениями ED50 комбинированного
лечения. Указанные значения были статистически значимо более низкими по сравнению с
теоретически рассчитанными значениями для простого аддитивного эффекта. Под
действием антагониста мелатониновых рецепторов наблюдалось усиление
антиноцицептивного синергизма между l-триптофаном и дипироном. Полученные
результаты указывают на то, что увеличение количества 5-НТ в центральной нервной
системе само по себе не способно индуцировать антиноцицептивный эффект. Для l-
триптофана характерно синергичное взаимодействие с дипироном и парацетамолом.
Указанный эффект зависит от биотрансформации l-триптофана до 5-НТ и проходит с
участием кинуреновой кислоты и мелатониновых рецепторов [23].

21
Литература

1. Энциклопедия лекарств и товаров аптечного ассортимента [Электронный ресурс]. –

Режим доступа : http://www.rlsnet.ru/mnn_index_id_1756.htm. – Дата доступа :
24.11.2017.
2. Jasiecka, A., Maslanka, T., Jaroszewski, J.J. Pharmacological characteristics of
metamizole / A. Jasiecka, T. Maslanka, J.J. Jaroszewski // Pol J . – 2014. – Vol. 17(1). –
P. 207-214.
3. The effect of metamizole on ischemia/reperfusion injury in the rat ovary: An analysis of
biochemistry, molecular gene expression, and histopathology / S. Kumbasar [et al.] //
Indian J Pharmacol.– 2016. – Vol. 48(1). – P. 32-36.
4. Morphological and biochemical action of dipyrone on rat placenta / S. Espiridiao [et
al.] // Gen Pharmacol. – 1996. – Vol. 27(3). – P. 505-507.
5. Influence of nonsteroidal anti-inflammatory drugs on progesterone production by
cultured bovine luteal cells / J.J. Jaroszewski [et al.] // Pol J Vet Sci. – 2009. – Vol. 12(3).
– P. 305-310.
6. Tanyildizi, S., Bozkurt, T. Effects of acetylsalicylic acid and metamizol on hyaluronidase
activity and sperm characteristics in rams / S. Tanyildizi, T. Bozkurt // Anim Reprod Sci.
– 2003. – Vol. 76(3-4). – P. 195-204.
7. Hernаndez-Delgadillo, G.P., Cruz, S.L. Dipyrone potentiates morphine-induced
antinociception in dipyrone-treated and morphine-tolerant rats / G.P. Hernаndez-
Delgadillo, S.L. Cruz // Eur J Pharmacol. – 2004. – Vol. 502(1-2). – P. 67-73.
8. The analgesic effect of dipyrone in peripheral tissue involves two different mechanisms:
neuronal K(ATP) channel opening and CB(1) receptor activation / G.G. dos Santos [et
al.] // Eur J Pharmacol. – 2014. – Vol. 741. – P. 124-131.
9. A comparative study of the antipyretic effects of indomethacin and dipyrone in rats / G.E.
De Souza [et al.] // Inflamm Res. – 2002. – Vol. 51(1). – P. 24-32.
10. A possible central antinociceptive effect of dipyrone in mice / H. Akman [et al.] //
Pharmacology. – 1996. – Vol. 53(2). – P. 71-78.
11. Different mechanisms underlie the analgesic actions of paracetamol and dipyrone in a rat
model of inflammatory pain / R.M. Rezende [et al.] // Br J Pharmacol. – 2008. – Vol.
153(4). – P. 760-768.
12. Pharmacokinetic profiles of the active metamizole metabolites in healthy horses /
M.Giorgi [et al.] // J Vet Pharmacol Ther. – 2017. – Vol. 40(2). – P. 165-171.
13. Pharmacokinetic profiles of the two major active metabolites of metamizole (dipyrone) in
cats following three different routes of administration / B. Lebkowska-Wieruszewska [et
al.] // J Vet Pharmacol Ther. – 2017. – doi: 10.1111/jvp.12471.
14. Отчет об экспериментальном сравнительном изучении токсичности лекарственной
формы препарата «Аналгин, таблетки 500 мг» производства РУП «Борисовский
завод медицинских препаратов» и зарегистрированного препарата-аналога / ФМБА
ФГУН «Институт токсикологии» ; рук. Т.Н. Саватеева. – СПб., 2008. – 41 с.
15. Mao, S., Yang, S., Bi, D. Pharmacodynamics and potential toxicity of intranasally
administered dipyrone / S. Mao, S. Yang, D. Bi // Biol Pharm Bull. – 2006. – Vol. 29(7).
– P. 1355-1359.
16. Use of a complex approach for assessment of metamizole sodium and acetylsalicylic acid
toxicity, genotoxicity and cytotoxicity / V.V. Arkhipchuk [et al.] // J Appl Toxicol. – 2004.
– Vol. 24(5). – P. 401-407.
17. Subchronic effects of dipyrone on the fish species Rhamdia quelen / J.H. Pamplona [et
al.] // Ecotoxicol Environ Saf. – 2011. – Vol. 74(3). – P. 342-349.
18. Metamizole sodium induces neural tube defects in a chick embryo model / Y. Guvenc [et
al.] // Turk Neurosurg. – 2016. – Vol. 26(3). – P. 445-448.

22
19. Tumor promoting potential in male F344 rats and mutagenicity in Salmonella
typhimurium of dipyrone / K. Izumi [et al.] // Carcinogenesis. – 1991. – Vol. 12(7). – P.
1221-1225.
20. Maternal dipyrone treatment during lactation in mice reduces maternal behavior and
increases anxiety-like behavior in offspring / V.B. Veronesi [et al.] // Int J Dev Neurosci.
– 2017. – Vol. 58. – P. 74-81.
21. The effect of metamizole on gastric emptying and small intestine transit in the rat / S.
Rupp [et al.] // Arzneimittelforschung. – 1987. – Vol. 37(9). – P. 1051-1053.
22. Enhancement of antinociception but not constipation by combinations containing
tramadol and metamizole in arthritic rats / F.J. Lopez-Munoz [et al.] // Arch Med Res. –
2013. – Vol. 44(7). – P. 495-503.
23. Synergistic effect of the L-tryptophan and kynurenic acid with dipyrone or paracetamol
in mice / N.F. Rocha [et al.] // Chem Biol Interact. – 2013. – Vol. 205(2). – P. 148-156.

23