Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
Каждая область науки и искусства имеет свою элементарную единицу изучения. В музыке это нота, в
танцевальном исскустве - па, в физике - атом, в химии - молекула и т.д. Медицина - это и искусство, и
наука. Ее основной единицей, как у искусства, всегда был пациент, а как у науки - клетка.
Повреждение клетки является начальным звеном в патогенезе болезни. Действие патогенных факто-
ров может вызвать повреждение на различных уровнях организации живого организма: субклеточном,
клеточном, тканевом, органном, системном и организменном. Так как клетка является структурно-
функциональной единицей организма, то в основе развития любой патологии лежит повреждение клетки.
Изменения структуры, метаболизма, физико-химических свойств и функции клетки, развивающихся
под воздействием патогенного фактора и приводящие к нарушению ее жизнедеятельности, называются
повреждением клетки.
Из определения следует, что влияние патогенного фактора не всегда приводит к повреждению клет-
ки (рис. 2.1). Благодаря запуску адаптивных механизмов клетка в определенной степени способна поддер-
живать внутриклеточный гомеостаз. В связи с этим существенную роль играет также уязвимость клетки по
отношению к данному фактору. Например, недостаточное поступление кислорода в течение нескольких
минут может серьезно повредить нейроны и вызвать их гибель, тогда как повреждение кардиомиоцитов в
этих же условиях может быть еще обратимым, а фибробласты в целом существенно при этом сопротив-
ляются. Приведет ли патогенное воздействие к адаптации или к повреждению зависит от характера
фактора, силы действия, длительности, внутриклеточных условий и микросреды клетки: степени
дифференциации, кровоснабжения, температуры и т.д.
Исследования выявили следующие общие закономерности: чем быстрее клетка делится и чем боль-
ше она потребляет кислород, тем больше вероятность ее повреждения. Например, наиболее чувствитель-
ными к гипоксии являются клетки коры головного мозга, а к ионизирующему излучению – клетки кожи,
слизистых, имунная ткань. Если воздействие слишком сильное или длительное, то защитные и восстанови-
тельные системы клетки становятся неэффек-
Нормальная клетка
тивными и она повреждается необратимо, т.е.
Обратимое
(гомеостаз) повреждение погибает. Термин «смерть» может
Повреждающий фактор Умеренное,
использоваться как синоним необратимого
проходящее
ПОВРЕЖДЕНИЕ повреждения биологических структур, начиная
АДАПТАЦИЯ КЛЕТКИ
Если адаптация не
возможна
с клеточного уровня организации.
Повторяю-
Тяжелое,
прогрессирующее щееся Под влиянием повреждающего фактора
СТАРЕНИЕ
КЛЕТКИ
клетки способны поддерживать жизнедеятель-
Необратимое
повреждение
ность в широком диапозоне путем изменения их
обмена, размера и формы. Например, при не-
СМЕРТЬ КЛЕТКИ достаточном поступлении кислорода для синте-
Некроз Апоптоз за АТФ клетки могут использовать анаэробный
Рис. 2.1. Изменения, развивающиеся под действием гликолиз. Конечно, у этого процесса есть свои
3
1
Кафедра Патофизиологии, Патофизиология повреждения клетки, стом. ф-т, 2020г.
1По некоторым данным одним из видов гормезиса был применен тестем Тиграна Великого, Мигрдатом VI, который
боялся, что его, как и отца, могут отравить и с этой целью он принимал небольшие дозы ядов. Вот почему явление
получило название мигрдатизм. Однако, этой идеей не следует слишком увлекаться, т.к. вместо положительного
воздействия может развиться хроническое отравление и клетки в конечном итоге гибнут.
2
Кафедра Патофизиологии, Патофизиология повреждения клетки, стом. ф-т, 2020г.
3
Кафедра Патофизиологии, Патофизиология повреждения клетки, стом. ф-т, 2020г.
Образование большей части реактивных форм кислорода (РФК) связано с митохондриями: в норме
около 2% кислорода превращается в супероксидный радикал. Затем из него образуется другая РКФ –
перекись водорода (Н2О2), в итоге может образоваться наиболее активная РФК – гидроксильный радикал.
Образование свободных радикалов усиливают прооксиданты, важными из которых являются Fe2+, Cu+,
гомоцистеин. Fe2+ является главным участником реакции Фентона2.
Противодействуют прооксидантам и свободным радикалам антиоксидантные системы клетки,
которые нейтрализуют свободные радикалы или смягчают сдвиги, вызванные их избытком. Различают
ферментные и неферментные антиоксиданты. К ферментным антиоксидантам относятся: каталаза,
супероксиддисмутаза, глутатионпероксидаза и редуктаза, которые уменьшают количество свободных
радикалов. К неферментным антиоксидантам относятся витамин Е (токоферол), убихинон, эстрогены,
аскорбиновая кислота, соединения селена, ферритин и т.д. Последний связывает железо, необходимое для
образования наиболее токсичных форм кислорода, что является главным отрицательным последствием
реакции Фентона.
Свойством свободных радикалов обладает также оксид азота - NO, который благодаря своей двойст-
венности получил название молекулы Януса. Янус считался римским богом времени, перемен и дверей.
Он обычно изображался двуликим: одно лицо смотрит в прошлое, другое - в будущее. Эта двойственность
побудила ученых называть NO молекулой Януса. С одной стороны NO активирует гуанилатциклазу, что
вызывает ряд физиологических и адаптивных сдвигов: активация ряда протеинкиназ, удаление из клеток
избыточного кальция, активация синтеза белков теплового шока, угнетение апоптоза, вазодилятация т.д.
Однако в случае взаимодействия с супероксидом она может преобразоваться в пероксинитрит,
чрезвычайно агрессивный прооксидант, который может вызвать инактивацию ферментов, повреждение
ДНК, окисление липидов, нитрацию и окисление белков, а также активацию матричных металлопротеаз.
Под воздействием свободных радикалов происходит окисление мембранных фосфолипидов с
образованием липидных перекисей. Этот процесс называется свободно-радикальным перекисным
окислением липидов - СПОЛ. Накопление конечных продуктов СПОЛ приводит к их группированию:
образованию мицелл, сопровождающееся повышением проницаемости и образованием кластеров
(структурные дефекты в мембране) (описанное получило название детергентного воздействия конечных
продуктов СПОЛ). В результате становится возможным неконтролируемый вход и выход в клетку
катионов и других органических и неорганических веществ. Окисление тиоловых (-SH) групп мембранных
белков и ферментов приводит к образованию тиоловых мостиков, к развитию конформационных
изменениий белков, т.е. инактивации.
Таким образом, усиление СРР имеет патогенное значение, являющееся следствием нарушения
динамического баланса про- и антиоксидантных систем. Повреждение макромолекул (и клетки в целом)
под воздействием активных форм кислорода называется оксидативным стрессом.
б) Компоненты, входящие в состав мембраны могут быть повреждены под действием ряда гидролити-
ческих ферментов. Большинство из них в клетке находятся в неактивном состоянии. В условиях
повреждения клеток «разрушительные» фосфолипазы и протеазы могут активироваться. Например,
избыток ионов кальция в цитоплазме активирует ряд ферментов, в том числе протеазы (например,
кальпаин), АТФ-азы, фосфолипазы. Наиболее существенна активация фосфолипазы А2, так как под его
действием происходит расщепление мембранных фосфолипидов и образуется арахидоновая кислота и
запускается арахидоновый каскад. Последний протекает двумя путями: циклооксигеназному (ЦОГ) и
липоксигеназному (ЛОГ). Под действием ЦОГ образуются простагландины и тромбоксан A2, а под
2В процессе реакции Фентона из перекиси водорода образуется наиболее активный окислитель: гидроксид радикал-
Fe2+ + H2O2 → Fe3+ + OH· + OH−. При доступности большого количества супероксида радикала (образующееся при
нарушениях функций митохондрий) образующийся Fe3+ может восстановится до Fe2+, превращаясь в главную
движущую силу данной реакции.
4
Кафедра Патофизиологии, Патофизиология повреждения клетки, стом. ф-т, 2020г.
Нарушение ионообменных механизмов Na+-Ca2+ и Na+-H+, что приводит к накоплению ионов Ca2+ и
водорода в цитоплазме и его последствиям. В норме упомянутые ионообменные механизмы «работают» в
направлении натриевого градиента (два Na+ проникают в клетку, взамен один Ca2 + удаляется, или один Na+
входит в клетку, взамен один Н+ удаляется) и могут считаться возможностью освобождения клетки от
избыточного кальция и водорода. Поскольку в условиях повреждения клетки градиент натрия затухает, то
ослабевает и движущая сила указанных ионообменных механизмов.
Являясь важным участником внутриклеточной сигнализации, Ca2+ принимает участие в осуществле-
нии и регуляции функций клетки, однако его содержание в цитоплазме должна строго контролироваться.
В этом вопросе важное значение имеет накопление Ca2+ во внутриклеточных депо - митохондриях и эндо-
плазматической сети, гидрофобность цитоплазматической мембраны (ограничивает его проникновение из
внеклеточного пространства), требуемая активность Na+-Ca2+ инообменного механизма, нормальное энерго-
обеспечение клетки, при котором кальцевый насос будет полноценно функционировать, вовлекая Ca2+ из
цитоплазмы в ЭПР.
Увеличение ионов кальция в цитоплазме имеет двойное действие для большинства клеток (рис. 2.4).
Повреждение мембран Повреждение ядра Энергетический кризис
Открытие поры
Фосфолипазы Протеазы Эндонуклеазы АТФазы митохондриальной
проницаемости
Восстановление NOS ↑
ионного баланса Активация функций клетки
NO ↑
Активация
Активация
кальциевых насосов
гуанилатциклазы
При умеренном увеличении, в основном, наблюдается активация функций клеток за счет активации
кальций-зависимых ферментативных систем. Ионы кальция косвенно стимулируют также энергетические
процессы, например активируют ферменты цикла Кребса. Ca2+ также стимулирует синтез NO-синтазы,
который способствует увеличению цГМФ, последний, в свою очередь, активирует удаление избыточных
ионов кальция из цитоплазмы в межклеточное пространство или во внутриклеточные депо.
При повреждении клетки нарушается деятельность митохондрий, снижается потенциал митохонд-
риальной мембраны и прекращается окислительное фосфорилирование. В результате снижения потенциа-
ла мембраны в митохондриях уменьшается накопление Ca2+. Снижение уровня АТФ в клетке нарушает дея-
тельность эндоплазматической Ca2+-АТФазы, а увеличение концентрации Na+ в клетке отключает обмен-
ную систему Na+-Ca2+. Все это увеличивает содержание Ca2+ в цитоплазме, что запускает из неспецифичес-
ких молекулярных механизмов повреждения клетки кальциевый стресс. Заметим, что содержание Ca2+ в
цитоплазме является маркером повреждения клетки, и чем оно выше, тем тяжелее повреждение.
Механизмы кальциевого стресса.
6
Кафедра Патофизиологии, Патофизиология повреждения клетки, стом. ф-т, 2020г.
внутриклеточный ацидоз
7
Кафедра Патофизиологии, Патофизиология повреждения клетки, стом. ф-т, 2020г.
“Новорожденный”
Митохондриальный шаперон (напр. HSP60)
пептид
Зрелый
фолдиро-
мРНК Рибосомы ванный
митохонд-
риальный
белок
Б. Ответная реакция на нарушение фолдинга белка
Ответ дефолдированного белка
Действие Усиление
Обнов-
повреждающего фактора синтеза ление
(напр. свободные шаперонов
радикалы)
↓ трансляции белков
Убиквитин
Активация убик-
Белок витин – протеа-
Нарушение сомного пути Разрушение
Мутации фолдинга белков Протеасома белков при
Аутофагия
нарушенном
фолдинге
Активация каспаз АПОПТОЗ
Рис. 2.6. Нормальный фолдинг белков и компенсаторные механизмы запускаемые при нарушении фолдинга.
3МикроРНК этот очень короткие РНК (содержащие всего лишь 18-21 нуклеотид), которые связываясь со своими
клетками- мишенями предупреждают трансляцию белка. На сегодняшний день известно более 1000 миРНК,
изучаемых в различных областях медицины.
8
Кафедра Патофизиологии, Патофизиология повреждения клетки, стом. ф-т, 2020г.
9
Кафедра Патофизиологии, Патофизиология повреждения клетки, стом. ф-т, 2020г.
факторов, что вызывает непосредственную стимуляцию ядерного аппарата клетки. Результатом является
изменение экспрессии соответствующих генов. Так воздействуют стероидные гормоны, витамин D и т.д.
Водорастворимые лиганды, не способные преодолевать гидрофобный барьер цитоплазматических
мембран, воздействуют через мембранные рецепторы. Мембранные рецепторы передают сигнал внутрь
клетки посредством изменения свойств внутриклеточного (цитоплазматического) участка рецептора.
Например, большинство факторов, стимулирующих рост и размножение клетки, передают сигнал
благодаря тирозинкиназной активности рецептора: связывание рецептора с лигандом активирует каскад
киназных ферментов, благодаря последнему сигнал роста достигает ядра и клетка начинает делиться.
Есть группа рецепторов (численность их постоянно уменьшается), эндогенные лиганды, которых до
сих пор не выявлены. Их называют рецепторами - «сиротами». Однако бурное развитие этой области науки
способствует «усыновлению» соответствующих «сирот», т.е. выявлению эндогенных лигандов этих
рецепторов.
Внутриклеточные сигнальные молекулы (вторые медиаторы или вторичные мессенджеры) передают
информацию от мембранных рецепторов эффекторам (реализующие молекулы). Вторые медиаторы пред-
ставлены соединениями различных классов, например, циклическими нуклеотидами (цАМФ и цГМФ),
инозитолтрифосфатом, диацилглицеролом, Ca2+, Са-кальмодулиновым комплексом, протеинкиназным кас-
кадом и т.д. Последние играют важную роль в сигнализации роста, реализации эффектов инсулина и т.д.
Таким образом, регулирование внутриклеточных процессов может быть нарушено на любом или
нескольких уровнях регуляции:
a) Сигнал (лиганд). Нарушения могут быть обусловлены избытком, дефицитом сигнала (например,
гипо-, гиперпродукция гормонов) или мимикрией. В последнем случае рецептор связывается не с естест-
венным лигандом, а с имитирующим его веществом (например, антитела или лекарства), что приводит к
блокаде рецептора или его активации. Классическим примером мимикрии сигнала является стимуляция
ТТГ-рецепторов LATS-антителами при болезни Грейвса, что, увеличивает выработку тиреоидных
гормонов.
б) Рецептор. На этом уровне могут быть структурные, конформационные изменения, вследствие
которых изменяется чувствительность рецепторов к лиганду. Например, при тип II диабете снижена
чувствительность инсулиновых рецепторов к инсулину. Или в патогенезе некоторых опухолей важна
мутация гена, кодирующего рецептор фактора роста, в результате чего рецептор синтезируется и
фиксируется на мембране уже в активной конформации. В результате сигнализация роста происходит уже
без влияния фактора роста (самовозбуждение рецептора), что приводит к избыточному делению клеток.
Возможен и генетический дефицит рецептора, например, при семейной гиперхолестеринемии в результате
мутации гена отсутствует рецептор
липопротеинов низкой плотности.
в) Внутриклеточная сигнализация. На этом
уровне регуляции (вторичный мессенджер)
также возможны блокада или активация.
Например, токсин холеры может вызвать
диарею по этому механизму, стимулируя
аденилатциклазу эпителиальных клеток
тонкого кишечника и усиленную секрецию
ионов в просвет кишки.
г) Аппарат, реализующий ответ. Поврежде-
ние этого аппарата может развиться вследствие
Рис. 2.7 Примеры порочных кругов. мутации, нарушений транскрипции и
10
Кафедра Патофизиологии, Патофизиология повреждения клетки, стом. ф-т, 2020г.
Некроз. Некроз - это «насильственная» или аварийная смерть клетки. Он развивается при сильном,
резком, быстром воздействии. Основными характеристиками являются набухание цитоплазмы и органелл,
разрыв клеточной мембраны и выход внутриклеточного содержимого, кариолиз (неупорядоченная
фрагментация хроматина, растворение). Вокруг некроза развивается воспалительный процесс.
11
Кафедра Патофизиологии, Патофизиология повреждения клетки, стом. ф-т, 2020г.
Рис. 2.8. Основные виды гибели клеток. (рис. по R.S. Hotchkiss, Cell Death, New England Journal of
medicine, october 15, 2009)
Апоптоз (от греч. слова apoptosis листопад) является одним из видов генетически запрограммирован-
ной гибели клеток. Для осуществления апоптоза необходима саморазборка клетки. Причем это должно
быть сделано «не поднимая шума», чтобы не побеспокоить соседей. Следовательно «крышу и стены»
следует сохранить полностью. Именно по этой причине при апоптозе клеточные мембраны не
разрушаются. Напротив, они используются для упаковки клеточного содержимого при ее гибели. А как
разрушить клетку изнутри? Необходимо фрагментировать цитоскелет и ядро. Этим занимаются каспазы и
эндонуклеазы. А каким образом и когда они активируются?
Каспазы разрушают цитоскелет, а эндонуклеазы разрушают ДНК клетки. Образовавшиеся
апоптотические тельца окружают себя «аппетитными» липкими веществами (например: фосфатидил-
серином, тромбоспондином, компонентами комплемента, иногда, в память об Алисе их называют
сигналами «сьешь меня») и «приглашают на ужин» макрофаги из соседних тканей. В течение нескольких
минут апоптотические тельца фагоцитируются без следов. Параллельно выделяются иммуносупрессивные
вещества, во избежание «обвинения кого-либо» в гибели клетки и развития воспаления.
Основными морфологическими характеристиками апоптоза являются: округлая форма клеток, впя-
чивание ложноножек внутрь клетки, уменьшение объема клетки и клеточного ядра (пикноз), упорядочен-
ная фрагментация ядра (кариорексис), незначительные изменения цитоплазматических органелл,
везикуляция плазматической мембраны, поглощение апоптотических телец соседними фагоцитами.
Аутофагия - это лизосомальное переваривание собственных компонентов клетки. В большинстве
случаев аутофагия развивается как адаптивная реакция, однако также может привести к гибели –
аутофагическая смерть. Аутофагия характеризуется секвестрацией4 цитоплазматического вещества в
аутофагосомах. Аутофагосомы содержат органеллы и цитоплазму. При слиянии аутофагосом и лизосом
4Секвестрация означает отделение, отторжение, изолирование. Этот термин довольно часто встречается в медицине с
определенным тонким смысловым оттенком. В данном случае секвестрация это изоляция определенного участка
цитоплазмы или органоида с двойной мембраной от остального цитоплазматического пространства, что дает
возможность сделать дальнейпий процесс более целенаправленным.
12
Кафедра Патофизиологии, Патофизиология повреждения клетки, стом. ф-т, 2020г.
13