Часть 2.

Носители для иммобилизации 1

▪ Высокая механическая, химическая и биологическая устойчивость
▪ Возможность получения удобных форм (гранулы, мембраны,
капсулы, листы)
▪ Отсутствие влияния на активность фермента (клеток)
▪ Достаточная проницаемость для субстратов и продуктов реакции
▪ Высокая гидрофильность для возможности проведения реакции в
водной среде
▪ В ряде случаев достаточная площадь поверхности
▪ Дешевизна и доступность

2
3
 Полимеры/
низкомолек
улярные

Носители

Природные/
Органические/ синтетические
неорганические
4
 Органические
носители
Рассмотрим
основные из
носителей
подробнее
Природные 4 Синтетические

Полимерные Низкомолекулярные Полимерные Низкомолекулярные

1 Полисахаридные 2 Белковые 3 Липиды Полистирол Полиамидные Полиакрилаты ПАВы

5
 Рассмотрим
основные из Неорганические носители
носителей
подробнее

5 6 7 8

Макропористые Уголь и Металлы и их

Алюмосиликаты
кремнеземы подобное оксиды

6
7
1

▪Целлюлоза
▪ Преимущества:
o Высокая гидрофильность
o Большое число гидроксильных групп Надеюсь, вы закрытыми глазами уже
можете нарисовать формулу
(можно химически модифицировать) целлюлозы

o Низкая стоимость
o Возможно сделать разные формы

▪ Недостатки:
o Неустойчивость к кислотам, сильным
щелочам и окислителям
8
▪Хитин
▪ Преимущества: Хитин -это основной компонент
наружного скелета ракообразных,
o Пористая структура является отходом промышленной
переработки креветок и крабов
o Не растворим в воде, слабых кислотах и
щелочах и в органических растворителях
o Недорогой

▪ Хитозан получают из хитина

▪ Преимущества:
o Высокая каталитическая активность
o Устойчивость к микробному
взаимодействию 9
▪Декстран
▪ Преимущества:
o Гели на основе декстрана обладают высокой
стойкостью и гидрофильностью (из-за наличия
большого количества гидроксильных групп)
o Легко биодеградируют
Декстран – это -1,6-α-D-глюкопиранозил-
D-глюкопираноза – разветвленный
полисахарид из бактериальных
источников, содержащий остатки
глюкозы, связанные, в основном, 1,6-
глюкозидными связями (а также 1,2-, 1,3-
и 1,4- связями):

10
▪Агароза
▪ Преимущества:
o Нетоксичность
o Способность формировать гели при малой Агароза – это поли-β-
концентрации галактопиранозил-3,6-
ангидро-α-L-
• Недостатки: галактопираноза
o Высокая стоимость
o Невозможность автоклавировать Агар – точный состав не
o Необратимая деструкция при высушивании известен, содержат
агарозу и агаропектин
▪ Агар
▪ Преимущества (в дополнение к агарозе):
o Низкая стоимость
o Большое количество оксигрупп (для модификации)
11
12
▪Агароза
▪ Преимущества:
o Нетоксичность
o Способность формировать гели при малой Агароза – это поли-β-
концентрации галактопиранозил-3,6-
ангидро-α-L-
• Недостатки: галактопираноза
o Высокая стоимость
o Невозможность автоклавировать Агар – точный состав не
o Необратимая деструкция при высушивании известен, содержат
агарозу и агаропектин
▪ Агар
▪ Преимущества (в дополнение к агарозе):
o Низкая стоимость
o Большое количество оксигрупп (для модификации)
13
▪Альгиновые соли и их
производные
▪ Особенности: резкая зависимость их
растворимости от температуры и рН.
▪ Являются основой для производства
альгинатных гелей
▪ Для иммобилизации биопрепаратов широкое
распространение получила система с
альгинатом кальция.
Альгиновые кислоты и их
соли – это полисахариды
бурых морских
водорослей, состоящие из
связанных β-1,4-связями
остатков D-маннуроновой
кислоты
14
2

▪ Преимущества:
o Биодеградируемость
o Высокая емкость по отношению к
ферменту
o Возможность формированию
пленок/мемдран
▪ Недостаток:
o Высокая иммуногенность (для
медицинских целей)

15
▪Коллаген
Коллаген – фибриллярный
▪ Часто используют в модифицированном виде белок группы
склеропротеидов, основной
▪ Преимущества:
компонент хрящей и
o Легкость выделения сухожилий, обладает высокой
прочностью на разрыв.
o Высокое число функциональных групп для
связывания
o Нетоксичность Желатин получают путем
обработки коллагена
▪ Желатин – продукт переработки кипятком, из-за чего
коллагена происходит гидролиз
некоторых связей
▪ Также используется в качестве носителей

16
3

▪ Обычно липидные носители применяются в

виде монослоев на различных поверхностях
или бислоев (как правило, сферической
формы).
▪ Липиды, имеющие хотя бы небольшую полярную
«головку», способны образовывать
мономолекулярную пленку на границе раздела фаз
(вода –воздух, вода – неполярный растворитель).
▪ Липидные молекулы в монослое расположены таким
образом, что полярные «головки» погружены в
водную среду, а углеводные группы направлены в
воздух или неполярную среду. Такая пленка способна
сорбировать белковые молекулы.
▪ Синтетическим аналогом липидов являются ПАВы
17
4

▪ Стирол и производные
▪ Преимущества:
o Возможность создания носителя с различными Полистиро́л —
геометрическими характеристиками (размер пор, продукт
удельная поверхность) полимеризации
o Возможность создания носителей с различными стирола
функциональными группами (винилбензола)
o Возможность создания полимеров с высокой
вместимостью ферментов
▪ Полимеры получают сополимеризацией с различными
сшивающими агентами:
o Дивенилбензол
o Монохлордиметиловый эфир

18
 Акриловая
кислота
▪ Полиакрилаты и производные:
▪ Полиакриламид – носитель, часто используемый для
включения ферментов и клеток, не обладает
полиакрила
ионообменными свойствами. Полиакриламидный гель мид
(ПААГ) получают путем сополимеризации акриламида
с сивающим агентом.
▪ Есть существенный недостаток: полиакриламидный
гель вследствие токсичности используемых для его
получения мономеров (акриламида, бисакриламида)
и выделении тепла при полимеризации снижает
жизнеспособность клеток и ферментов.

19
▪ Полиамиды и производные:
▪ Полиамидные носители – это группа различных
гетероцепных полимеров с повторяющейся амидной
группой –С(О)–NН–
▪ Преимущества:
o Носители на основе поливинилового спирта обладают
высокой реакционной способностью
o Соответствующая обработка позволяет вводить в них
различные функциональные группы: альдегидные,
хлортриазиновые, дисульфидные и др.
o высокое содержание реакционно-способных групп
o большая вместимость по отношению к белкам

20
▪ Поливиниловый спирт
▪ Преимущества:
o Возможность введения функциональных групп
o Большая вместимость по отношению к ферменту

21
▪ Полиуретаны
▪ являются достаточно удобными материалами для
включения препаратов в гель; процедура
иммобилизации в этом случае состоит в простом
смешивании компонентов. Полиуретанты обладают
большой стойкостью по отношению к воде и
окислителем по сравнению с полиамидами.

22
▪ Преимущества:
o легкость их регенерации
o возможность придания им любой
конфигурации (в виде порошков, шариков, так
и монолита)
o Возможность подбора как пористых, так и
непористых носителей
o Некоторые (не все) являются дешевыми и
доступными

23
5 ▪ Макропористые кремнеземы:
▪ силикагели, силохромы и макропористые стекла
Силикагель – аморфное вещество,
▪ Преимущества:
получаемое в результате поликонденсации
o механическая прочность ортокремниевой кислоты
o химическая инертность ко многим растворителям
o наличие жесткого скелета с заданным размером пор
o устойчивость к воздействию микроорганизмов
o Поверхность частиц кремнеземов покрыта
гидрофильными и гидроксильными группами Силхром – получают путём
агрегирования аэросила
▪ Недостатки: (мелкодиспергированный диоксид кремния)
o использование их в ограниченном диапазоне рН
o некоторая неспецифическая сорбция на поверхности
o дорогие
24
6 ▪ Алюмосиликаты:
▪ Глины, цеолиты, пористая керамика
▪ Преимущества:
o Высокая плотность поверхностных групп
o Дешевизна и доступность
Глина – мелкозернистая порода, состоит
из одного или нескольких минералов ,
47 % (от массы) оксида кремния
(IV) (SiO2), 39 % оксида алюминия (Al2О3)
и 14 % воды
Цеолиты – группа минералов, в
основном включает
водные алюмосиликаты кальция и
натрия из подкласса
каркасных силикатов
Пористая керамика – это материал,
который производится на базе кордиеритов
или оксида алюминия, а также методом
химического порообразования,
вспенивания
25
7 ▪ Уголь и графитовая сажа:
▪ Преимущества:
o однородность и электрическая проводимость
поверхности (важно при создании
биоэлектрокаталитических систем на основе
иммобилизованных препаратов)
▪ Недостатки:
o Низкая механическая прочность

26
8 ▪ Металлы и их оксиды:
▪ Чаще всего аллюминий, никель, титан
▪ Преимущества:
o высокая механической прочностью
o относительная дешевизна
o Стабильность
o Хорошие гидродинамические свойства

▪ Металлические поверхности, используемые в

качестве носителей, как правило
модифицируют, либо создавая оксидную пленку
на поверхности матрицы, либо покрывая их
слоем полимера (производные полистирола,
целлюлозы и т. д.). Это позволяет значительно
повысить сорбционную вместимость носителя. 27
▪ Березин, И. П. Иммобилизованные ферменты / И.П. Березин Н.Л. Клячко, А.В.
Левашов и др. М.: Высш. школа, 1987.

▪ Биотехнология: теория и практика : учебник для вузов / Н. В. Загоскина [и др.]. -

Москва: Оникс, 2009. Глава 7.2
▪ Егорова Т.А. Основы биотехнологии: учеб. пособие для вузов/ Т.А. Егорова, С.М.
Клунова, Е.А. Живухина : учеб. пособие для вузов / Т.А. Егорова, С.М. Клунова, Е.А.
Живухина. - Москва: Academia, 2005. глава 4.6

28