Современное общество волнуют три важнейшие проблемы: мир, питание и

сохранение окружающей среды. Наиболее острым аспектом проблемы питания

является дефицит белка, особая роль которого объясняется многообразием его
биологических функций. Белок— основа тканей человека и животных. Ферменты и
многие гормоны, обеспечивающие жизненно важные процессы в организме человека,
также являются белками.

В настоящее время население земного шара составляет свыше 6 млрд. человек.

Мировая потребность в белке возрастает. Но уже сегодня более половины
населения испытывает недостаток в белке. Это в первую очередь относится к
развивающимся странам, население которых получает в 2 раза меньше белка и в 5
раз меньше белков животного происхождения по сравнению с высокоразвитыми
странами, что приводит к снижению средней продолжительности жизни людей.
 Дефицит высокоценного белка определяется миллионами тонн в год. Покрытие его
наряду с увеличением производства продуктов растительного происхождения, рыбной муки и
некоторых других возможно за счет микробиологического синтеза. Одной из важнейших
народнохозяйственных задач сегодняшнего дня является расширение промышленного
производства белково-витаминных концентратов для сельского хозяйства. Наиболее
перспективно получение белка микробиологическим путем. При этом не требуется посевных
площадей, и промышленное производство не зависит от климатических условий, а также
поддается точному планированию и регулированию.
Микроорганизмы как продуценты белка имеют ряд преимуществ по сравнению с
высокоурожайными сельскохозяйственными растениями и животными и главное из них —
высокая скорость роста.
Большое разнообразие микроорганизмов — продуцентов белковых веществ и типов их
питания позволяет использовать самые различные виды сырья. При этом 500 кг культуры
одноклеточных микроорганизмов в состоянии производить за сутки почти 1000 кг белка. По
своему аминокислотному составу он весьма сходен с животным белком. Содержание белка,
например, в водорослях колеблется от 40 до 60% сухой биомассы. А 250 г. этой массы
достаточно для покрытия ежедневной потребности человека в белках и витаминах. Чтобы
показать преимущества микробных белков по сравнению с белками животного и
растительного происхождения, достаточно привести следующие данные: тонна белка в виде
гороха за сутки производится на посевной площади 360 га, столько же белка в виде говяжьего
мяса за сутки производится при откорме 2000 голов крупного рогатого скота. При
использовании микроорганизмов такое же количество белка может быть получено с помощью
10 кг дрожжевых клеток в ферментере емкостью 100 м 3. Иными словами, микроорганизмы в
104 раза продуктивнее, чем животные.
 В настоящее время уже широко используются в корм животным дрожжи,
обладающие способностью в короткие сроки продуцировать большое количество
биомассы, которая в высушенном виде представляет ценный белково-витаминный
концентрат.
Многочисленные исследования, проведенные как в нашей стране, так и за рубежом,
свидетельствуют о высокой кормовой ценности белков микроорганизмов. Применение их
в комбикормах дает возможность получить значительное количество свинины, говядины,
птицы, яиц. Так, в килограмме пищевых дрожжей содержится столько белка, сколько в 3
кг мяса. То же самое можно сказать и о кормовых дрожжах. Добавка тонны этого
продукта в корма для птицы позволяет получить дополнительно 1,5—2 т мяса или 25— 30
тыс. штук яиц, в свиноводстве эта же тонна высвобождает около 5 т фуражного зерна .
 Производство белка микроорганизмов

С технологической точки зрения наилучшими из продуцентов белка являются дрожжи. Их преимущество

заключается прежде всего в "технологичности": дрожжи легко выращивать в условиях производства. Они
характеризуются высокой скоростью роста, устойчивостью к посторонней микрофлоре, способны
усваивать любые источники питания, легко отделяются, не загрязняют воздух спорами. Клетки дрожжей
содержат до 25% сухих веществ. Наиболее ценный компонент дрожжевой биомассы - белок, который по
составу аминокислот превосходит белок зерна злаковых культур и лишь немного уступает белкам молока
и рыбной муки. Биологическая ценность дрожжевого белка определяется наличием значительного
количества незаменимых аминокислот. По содержанию витаминов дрожжи превосходят все белковые
корма, в том числе и рыбную муку. Кроме того, дрожжевые клетки содержат микроэлементы и
значительное количество жира, в котором преобладают ненасыщенные жирные кислоты. При
скармливании кормовых дрожжей коровам повышаются удои и содержание жира в молоке, а у пушных
зверей улучшается качество меха.  Интерес представляют и дрожжи,  обладающие гидролитическими
ферментами и способные расти на полисахаридах без их предварительного гидролиза. Использование
таких дрожжей позволит избежать дорогостоящую стадию гидролиза полисахаридсодержащих отходов.
Известно более 100 видов дрожжей, которые хорошо растут на крахмале как на единственном источнике
углерода.
 В последнее время в качестве продуцентов белка стали использовать бактерии, которые
отличаются высокой скоростью роста и содержат в биомассе до 80% белка. Бактерии
хорошо поддаются селекции, что позволяет получать высокопродуктивные штаммы. Их
недостатками являются трудная осаждаемость, обусловленная малыми размерами клеток,
значительная чувствительность к фаговым инфекциям и высокое содержание в биомассе
нуклеиновых кислот. Последнее обстоятельство неблагоприятно только в том случае, если
предусматривается пищевое использование продукта. Снижать содержание нуклеиновых
кислот в биомассе, употребляемой на корм животным, нет необходимости, так как мочевая
кислота и ее соли, образующиеся при разрушении азотистых оснований, превращаются в
организме животных в алантоин, который легко выделяется с мочой. У человека избыток
солей мочевой кислоты может способствовать развитию ряда заболеваний.
 Источниками белковых веществ могут служить и водоросли. При
фототрофном способе питания и образования биомассы они используют
углекислый газ атмосферы. Выращивают водоросли, как правило, в
поверхностном слое прудов, где с площади 0,1 га можно получить
столько же белка, сколько с 14 га посевов фасоли. Белок водорослей
пригоден не только для кормовых, но и пищевых целей.
Хорошими продуцентами белка являются рясковые, которые
накапливают протеина до 45% от сухой массы, а также до 45% углеводов.
Однако, несмотря на свои малые размеры, они не принадлежат к
вышеперечисленным производителям белка (микроорганизмам), так как
не только являются многоклеточными организмами, но и относятся к
высшим растениям.
 Мицелиальные грибы – продуценты белковых веществ

Однако до настоящего времени при получении биосинтетического белка в качестве

продуцентов чаще всего традиционно используются дрожжи и бактерии. Мицелиальным же
грибам не уделяется достаточного внимания. Вместе с тем в ряде стран Востока и Азии
микроскопические грибы являются основой многих национальных способов приготовления
пищи.
Промышленное культивирование мицелиальных грибов появилось задолго до эры ан­
тибиотиков. Истоки его восходят к глубокой древности. Так, сыр рокфор изготовляли на юге
Франции из молока овец еще тысячу лет назад. Другие виды «голубых» сыров также имеют
древнюю историю. Вместе с тем лишь сравнительно недавно была выяснена роль
микроскопических грибов в процессах приготовления сыров. Из них наиболее
распространенными оказались Penicillium roqueforti, P. camemberti, P. casei colum.
Очень давнюю историю имеет и применение грибов в качестве пищи. Два века тому назад в
Китае и Японии выращивали организм, называемый «schi-ta-кё». Культивирование его
осуществлялось в специально приготовленных древесных колодах, которые инокулировались
спорами. Инкубация протекала несколько месяцев, после чего спороформы собирали для
еды. Наиболее известным из культивировавшихся в Европе грибов оказался Agaricus
campestris. Во Франции этот гриб используют для пищевых целей с XVIII в.
 На Востоке мицелиальные грибы играют такую же роль, как солод на Западе. Они
высоко ценятся за способность повышать усвояемость и вкусовые качества довольно
пресных и неусвояемых продуктов, являющихся важными источниками белков в
вегетарианской или полувегетарианской диетах. Эти продукты перспективны для
промышленности из-за ограничения животных белков и высоких цен на них.
Мицелиальные грибы используются для приготовления многих национальных
блюд.
 В последние годы в связи с проблемой белкового дефицита микроскопические
грибы рассматриваются и как продуценты белка для животных и даже человека
(Жемойц, Орехов, 1975; Лобанок, Бабицкая, 1976; Бабицкая, Лобанок, 1976; Стахеев,
1978). По ряду показателей грибы имеют преимущества по сравнению с другими
микроорганизмами. Как известно, людям свойственны привычки, укоренившиеся
традиции. Человек ест пищу, которая ему нравится. Представления же о питательной
ценности ее стоят, как правило, на втором месте. Опыт показал, что ввести новый вид
пищи, даже очень хорошей, среди населения, привыкшего к пище с другими
свойствами, очень трудно. Что же касается грибов, то они как пища общеприняты и в
ряде стран являются деликатесом. Преимущества грибов как продуцентов белка
обусловлены и рядом других, более ценных свойств.
Ввиду высокого содержания и особенностей нуклеиновых кислот дрожжей и
бактерий только до 10% белка в рационе можно заменить дрожжевым или
бактериальным. Грибной же белок может употребляться в пищу в любых
количествах, вплоть до полного замещения животного белка. Немаловажное
преимущество грибов — легкое и дешевое отделение мицелия. Мицелиальная
структура его — ценное свойство при получении структурированных пищевых
продуктов. Грибной белок легко подвергается кулинарной обработке, его нитчатая
структура позволяет имитировать общепринятые виды пищи.
 Микроскопические грибы синтезируют большой набор ферментов, что позволяет
превращать им в съедобный белок отходы от производства бумаги, текстильной
промышленности, пищевого производства и т. д.
Говоря о микроорганизмах — продуцентах белковых веществ, следует напомнить о
некоторых предъявляемых к ним требованиям: высокое содержание протеина, высокие
питательные качества его, безвредность по отношению к человеку, животным, рыбам и
растениям; удовлетворительная скорость роста, высокая продуктивность, способность расти
на простых культуральных средах в подходящей форме, а не пеллетами.
Следует отметить, что, несмотря на имеющиеся обширные данные о белках
одноклеточных, сравнительно мало литературы об использовании грибного мицелия.
Причина кроется, возможно, в общераспространенном мнении (которое не разделяют
многие микологи), что грибы часто «ядовиты», растут медленно, имеют низкое содержание
протеина, а тот протеин, который они содержат, низкого качества.
 Трансгенные растения как
биопродуценты
белков медицинского назначения

в клетках высших растений происходят гликозилирование и фолдинг белков, сходные с

таковым в клетках млекопитающих. Культивирование растений не требует
дорогостоящего оборудования, а сельскохозяйственные масштабы продукции
гарантируют доступность рекомбинантного препарата в количествах, достаточных для
клинических испытаний и широкого терапевтического использования. В отличие от
животных, растительные клетки не содержат в своём составе патогенные для человека
вирусы, а также прионы и, таким образом, могут служить безопасным источником
рекомбинантных белков медицинского назначения. Хотя стоимость выделения и очистки
целевого белка из растений-продуцентов может быть сопоставима с таковой для других
систем, наработка сырого материала обходится значительно дешевле. В ряде случаев,
например, при использовании трансгенных растений в качестве "съедобных вакцин"
выделение белка в чистом виде не требуется. В дополнение ко всему перенос фрагментов
экзогенной ДНК в растительный геном и регенерация у растений происходят значительно
проще по сравнению с животными (Daniell et al., 2001).
 Известно, что аппарат транскрипции и трансляции у растений является универсальным и
может быть адаптирован не только для накопления гомологичных белков, не синтезируемых
данным видом растения, но и для синтеза гетерологичных белков как бактериального, так и
животного происхождения. С другой стороны, сами растения in vivo могут служить
благоприятной средой для развития различных организмов - бактерий и вирусов, геном
которых может быть модифицирован и адаптирован для синтеза соответствующих
гетерологичных белков. Анализируя данные литературы, необходимо отметить, что поиск
различных систем для экспрессии чужеродных генов за последние десять лет был связан с
развитием трёх основных подходов.

Первым из них был предложен путь использования трансгенных растений, в ядерный

геном которых перенесены гены, контролирующие синтез соответствующих
гетерологичных белков (De la Riva, 1998).

Дальнейшее развитие идеи использования растительного генома для синтеза

гетерологичных белков стимулировало поиск новых способов переноса фрагментов
экзогенной ДНК в геном растений. Были разработаны методы прямой доставки
чужеродных генов в растительный геном, такие, как микроинъекции

Третий путь основан на природной способности растительных вирусов проникать в

клетки растений и колонизировать растительные ткани (Mushegian, Shepherd, 1995). На
этой основе возникает реальная возможность модификации вирусного генома и
адаптации его не только в качестве вектора для доставки в растения соответствующих
генетических конструкций, но и в качестве матриц для транзиентной экспрессии генов,
кодирующих синтез белков
 Растения-продуценты фармацевтических белков

За последние несколько лет в ведущих биотехнологических центрах мира созданы трансгенные

растения-продуценты широкого спектра гормонов, цитокинов, факторов роста и ферментов,
имеющих потенциальное применение в фармакологии (табл. 3). Все они не уступали по
биологической активности аналогам, получаемым из других систем экспрессии.
По закону, принятому Всемирной организацией здравоохранения, любые предлагаемые
источники лекарственных препаратов, в частности трансгенные растения, должны быть
зарегистрированы и пройти серию клинических испытаний. Первые клинические испытания
трансгенных растений риса, синтезирующих активный человеческий a-1-антитрипсин для терапии
фиброзного кистоза, были начаты в 1998 г.
Производство рекомбинантных белков для медицинских целей с использованием традиционных
систем требует значительных финансовых затрат. Так, например, недостаток лизосомального
фермента гликоцереброзидазы в организме вызывает синдром Гоше. Единственным видом терапии
этого заболевания является внутривенное введение гликоцереброзидазы. Долгое время этот белок
получали из плаценты человека, на поддержание жизни одного пациента в течение года
требовалось 160000$. Переключение продукции гликоцереброзидазы на культуру клеток
млекопитающих снизило стоимость этого препарата, однако не вытеснило его из группы "самых
дорогих лекарств в мире". В 1999 г. сотрудниками корпорации CropTech было показано, что
трансгенные растения способны синтезировать биологически активную гликоцереброзидазу
человека. В дальнейшем были получены высокопродуктивные трансгенные растения табака, в
которых содержание гликоцереброзидазы человека варьировало от 1 до 10 % TSP. Ожидается, что
получение рекомбинантной гликоцереброзидазы из таких растений позволит значительно снизить
её стоимость (Giddings et al., 2000).