Биотехнологии животных

1. ДНК – технологии в
животноводстве
2. Трансплантация, in vitro,
клонирование
Основные направления использования
ДНК-маркеров в селекции с.х. животных

• Детерминирующих качественные и количественные

признаки продуктивности;
• Детерминирующих устойчивость к наследственным и
инфекционным заболеваниям;
• Диагностирующих возбудителей инфекционных
заболеваний;
• Для оценки достоверности происхождения животных
(генетическая паспортизация с.-х. животных);
• Для изучения и сохранения генетического разнообразия
пород с.-х., домашних и диких животных
 Диагностика наследственных
заболеваний
• BLAD • CVM
CD18 TL/BL-наличие Дания – 34%
мутации:
Голландия и Франция до
Дания - до 22,6% 40%
США - 14,1% США - 20%
Россия - 5,6-6,7%
Россия до 18%
Украина - 14-17%
Беларусь:
- производители 0,9- 3%
- коровы до 11%
Диагностика инфекционных
заболеваний
• Диагностика возбудителей
(лейкоз, туберкулез - до
40% ложно положительные
либо отрицательные
результаты, мастит-
заболеваемость 20-40%, 80%
микробная этиология,
снижение продуктивности- 10-
15% на сумму 55-57 млн $)
• Маркеры генетической
резистентности к
инфекционным заболеваниям
 ДНК-маркеры, детерминирующие
качественные и количественные признаки
продуктивности

Оршанское

Могилевское

Гомельское

АА
Витебское
АВ
ВВ
Гродненское

Брестское

Минское

0% 20% 40% 60% 80% 100%

 Для оценки достоверности происхождения
животных (генетическая паспортизация с.-х.
животных);

• Микросателлитный анализ генотипа

импортируемых животных по 11-13
локусам выявил в 30% случаев не
соответствие заявленным в
генетических сертификатах
• Исскуственное осеменение привело к
снижению генетического разнообразия
пород
Сохранение генетического
разнообразия пород с.-х.,
домашних и диких
животных
• Потери домашнего скота в мире
составляют 5% пород в год (6
пород в месяц)
• Прогноз (в скором будущем) –
исчезновение 3 пород каждые 2
недели
• По данным ФАО, из 4000-5500
пород домашнего и дикого скота и
птицы 1200-1500 угрожает
вымирание
 Трансгеноз в
животноводстве
Трансгенные животные – это животные, в
геном которых искусственно введена
дополнительная генетическая
информация.

Трансген – это искусственно введённый и

интегрировавшийся в ДНК животных
чужеродный ген.

Таким образом, под трансгенозом

понимают процесс переноса и
интеграции чужеродной генетической
информации в геном животного.
Среди большого разнообразия способов
внедрения экзогенной ДНК в геном животных
можно выделить следующие, которые нашли
широкое применение в практике трансгеноза:

метод микроинъекции;
опосредованный ретровирусами перенос
генов;
перенос трансформированных ядер
генеративных и соматических клеток;
использование спермиев и сперматогониев
как
переносчиков ДНК.
 Метод микроинъекции
Суть метода заключается во введении
раствора генных конструкций в мужской
пронуклеус зигот.
На частоту интеграции при этом
оказывают влияние такие факторы, как
степень очистки инъекционного
раствора, форма и концентрация ДНК,
состав буферного раствора, качество
эмбрионов, а так же способ пересадки
эмбрионов реципиентам
(нехирургический, хирургический,
лапораскопический)
 Применение ретровирусных векторов
Ретровирусы – семейство эукариотических
вирусов, генетический материал которых
представлен одноцепочечной РНК.
Наиболее часто используются векторы
на основе ретровирусов мыши типа С
(вирус лейкемии мыши).
Векторные системы со-
стоят из:
1) векторной конструкции
и
2) линии клеток-упаковщиц
 Использование сперматозоидов как
переносчиков ДНК.
Сперматозодиды используют в качестве
природного вектора, доставлющего ДНК в клетки.
Для повышения эффективности связывания ДНК
со сперматозоидами используют различные
методы:

ДНК-липосомные комплексы;
инъекцию в семенники;
инъекцию в семенные канальцы и придатки;
инъекцию в семенные канальцы с последующей
электропорацией;
ко-инъекцию головок спермиев и ДНК в ооциты.
 Достижения в использовании трансгенных
технологий
1971 г. -доставка чужеродной ДНК в ооциты кролика сперматозодами
1985 г. -получение трансгенных с/х животных методом
микроинъекции
1986 г. – эмбриональные химеры с использованием ЭСК; получение
овец посредством пересадки ядер
1987 г. – получение КРС методом пересадки ядер
1988 г. – получение кроликов методом пересадки ядер
1989 г. – получение трансгенных мышей и свиней с помощью спермиев
в качестве векторов; трансгенного КРС методом микроинъекции; свиней
методом пересадки ядер
1995 г. – получение трансгенного КРС с помощью спермиев
1996 г. – получение овец методом пересадки ядер; ЭСК приматов
1997 г. – получение овец методом пересадки ядер фетальных и
соматических клеток; трансгенные овцы методом ядер
трансформированных культивируемых клеток
1998 г. – получение трансгенного КРС псевдотипных ретровирусных
векторов, с помощью пересадки ядер фетальных фибробластов, пересадки
ядер дифференцированных клеток
2000 г. – получение свиней методом пересадки ядер соматических клеток
 Применение трансгенных животных.
1)Трансплантация
Человеческий организм отторгает донорские органы, причиной
этого являются белки, локализованные на внешней
поверхности
мембраны. У трансгенных животных эти белки заменены на
человеческие.
2)Получение устойчивых к болезням животных
3)Введение генов, кодирующих антисмысловую РНК
Проблема лейкозов, вызываемых РНК-вирусами
4) Изучение наследственных заболеваний мозга и нервной
системы
Трансгенные животные в Республике Беларусь.
Стажировка в Институте Биологии
гена РАН
Яйцеклетки мыши
 Стадии микроинъекции
рекомбинантной ДНК в зиготы
мыши
Доение трансгенной мыши
Биотехнологический центр с
опытным производством
Цитологический блок
Экспериментальное стадо
Хирургическая операция по извлечению
биоматериала
Множественная овуляция у козы-
донора
Зигота козы с пронуклеусами
Микроинъекция чужеродной ДНК в зиготу
козы
 Ультразвуковая диагностика
беременности животных-реципиентов
Трансгенный приплод
 Получение трансгенного приплода

Показатели Всего

Количество трансплантированных 281

микроинъецированных клеток
Количество реципиентов 113

Количество полученных козлят, 30

из них живых трансгенных 2