ÔÅÄÅÐÀËÜÍÎÅ ÀÃÅÍÒÑÒÂÎ

ÏÎ ÒÅÕÍÈ×ÅÑÊÎÌÓ ÐÅÃÓËÈÐÎÂÀÍÈÞ È ÌÅÒÐÎËÎÃÈÈ

ÍÀÖÈÎÍÀËÜÍÛÉ
ÑÒÀÍÄÀÐÒ
ÃÎÑÒ Ð
ÐÎÑÑÈÉÑÊÎÉ 54005—
ÔÅÄÅÐÀÖÈÈ 2010

ÏÐÎÄÓÊÒÛ ÏÈÙÅÂÛÅ
Ìåòîäû âûÿâëåíèÿ è îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà
áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae
ISO 21528-1:2004
Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal måthods for the
detection and enumeration of Enterobacteriaceae — Part 1: Determination
and enumeration by MPN technique with pre-enrichment
(MOD)

ISO 21528-2:2004
Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal måthods for the
detection and enumeration of Enterobacteriaceae — Part 2: Colony-count måthod
(MOD)

Èçäàíèå îôèöèàëüíîå
ÃÎÑÒ Ð 54005—2010

Ïðåäèñëîâèå
Öåëè è ïðèíöèïû ñòàíäàðòèçàöèè â Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè óñòàíîâëåíû Ôåäåðàëüíûì çàêîíîì îò
27 äåêàáðÿ 2002 ãîäà ¹ 184-ÔÇ «Î òåõíè÷åñêîì ðåãóëèðîâàíèè», à ïðàâèëà ïðèìåíåíèÿ íàöèîíàëüíûõ
ñòàíäàðòîâ Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè — ÃÎÑÒ Ð 1.0—2004 «Ñòàíäàðòèçàöèÿ â Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè.
Îñíîâíûå ïîëîæåíèÿ»

Ñâåäåíèÿ î ñòàíäàðòå

1 ÏÎÄÃÎÒÎÂËÅÍ Ãîñóäàðñòâåííûì íàó÷íûì ó÷ðåæäåíèåì Âñåðîññèéñêèì íàó÷íî-èññëåäîâà-

òåëüñêèì èíñòèòóòîì êîíñåðâíîé è îâîùåñóøèëüíîé ïðîìûøëåííîñòè Ðîññèéñêîé àêàäåìèè ñåëüñêî-
õîçÿéñòâåííûõ íàóê (ÃÍÓ ÂÍÈÈÊÎÏ Ðîññåëüõîçàêàäåìèè) íà îñíîâå àóòåíòè÷íûõ ïåðåâîäîâ íà ðóññêèé
ÿçûê ñòàíäàðòîâ, óêàçàííûõ â ïóíêòå 4

2 ÂÍÅÑÅÍ Òåõíè÷åñêèì êîìèòåòîì ïî ñòàíäàðòèçàöèè ÒÊ 335 «Ìåòîäû èñïûòàíèÿ àãðîïðîìûø-

ëåííîé ïðîäóêöèè íà áåçîïàñíîñòü»

3 ÓÒÂÅÐÆÄÅÍ È ÂÂÅÄÅÍ Â ÄÅÉÑÒÂÈÅ Ïðèêàçîì Ôåäåðàëüíîãî àãåíòñòâà ïî òåõíè÷åñêîìó

ðåãóëèðîâàíèþ è ìåòðîëîãèè îò 30 íîÿáðÿ 2010 ã. ¹ 598-ñò

4 Íàñòîÿùèé ñòàíäàðò âêëþ÷àåò â ñåáÿ ìîäèôèöèðîâàííûå îñíîâíûå ïîëîæåíèÿ ñëåäóþùèõ

ìåæäóíàðîäíûõ ñòàíäàðòîâ:
- ÈÑÎ 21528-1:2004 «Ìèêðîáèîëîãèÿ ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ è êîðìîâ äëÿ æèâîòíûõ. Ãîðèçîíòàëü-
íûå ìåòîäû äëÿ îáíàðóæåíèÿ è ïîäñ÷åòà áàêòåðèé Enterobacteriaceae. ×àñòü 1. Îáíàðóæåíèå è ïîäñ÷åò
ìåòîäîì MPN ñ ïðåäâàðèòåëüíûì îáîãàùåíèåì» (ISO 21528-1:2004 «Microbiology of food and animal
feeding stuffs — Horizontal måthods for the detection and enumeration of Enterobacteriaceae — Part 1:
Determination and enumeration by MPN technique with pre-enrichment»);
- ÈÑÎ 21528-2:2004 «Ìèêðîáèîëîãèÿ ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ è êîðìîâ äëÿ æèâîòíûõ. Ãîðèçîíòàëü-
íûe ìåòîäû äëÿ îáíàðóæåíèÿ è ïîäñ÷åòà áàêòåðèé Enterobacteriaceae. ×àñòü 2. Ìåòîä ïîäñ÷åòà êîëî-
íèé» (ISO 21528-2:2004 «Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal måthods for the
detection and enumeration of Enterobacteriaceae — Part 2: Colony-count måthod») ïóòåì èçìåíåíèÿ ñîäåð-
æàíèÿ îòäåëüíûõ ñòðóêòóðíûõ ýëåìåíòîâ, êîòîðûå âûäåëåíû êóðñèâîì. Îðèãèíàëüíûé òåêñò ðóññêîé
âåðñèè ýòèõ ñòðóêòóðíûõ ýëåìåíòîâ ïðèìåíåííûõ ìåæäóíàðîäíûõ ñòàíäàðòîâ è îáúÿñíåíèÿ ïðè÷èí
âíåñåíèÿ äîïîëíåíèé ïðèâåäåíû â òåêñòå â âèäå ïðèìå÷àíèé.
Ñðàâíåíèå ñòðóêòóðû íàñòîÿùåãî ñòàíäàðòà ñî ñòðóêòóðîé óêàçàííûõ ìåæäóíàðîäíûõ ñòàíäàðòîâ
ïðèâåäåíî â äîïîëíèòåëüíîì ïðèëîæåíèè ÄÂ.
Íàèìåíîâàíèå íàñòîÿùåãî ñòàíäàðòà èçìåíåíî îòíîñèòåëüíî íàèìåíîâàíèÿ óêàçàííûõ ìåæäóíà-
ðîäíûõ ñòàíäàðòîâ äëÿ ïðèâåäåíèÿ â ñîîòâåòñòâèå ñ ÃÎÑÒ Ð 1.5—2004 (ïîäðàçäåë 3.5)

5 ÂÂÅÄÅÍ ÂÏÅÐÂÛÅ

Èíôîðìàöèÿ îá èçìåíåíèÿõ ê íàñòîÿùåìó ñòàíäàðòó ïóáëèêóåòñÿ â åæåãîäíî èçäàâàåìîì

èíôîðìàöèîííîì óêàçàòåëå «Íàöèîíàëüíûå ñòàíäàðòû», à òåêñò èçìåíåíèé è ïîïðàâîê — â åæåìå-
ñÿ÷íî èçäàâàåìûõ èíôîðìàöèîííûõ óêàçàòåëÿõ «Íàöèîíàëüíûå ñòàíäàðòû».  ñëó÷àå ïåðåñìîòðà
(çàìåíû) èëè îòìåíû íàñòîÿùåãî ñòàíäàðòà ñîîòâåòñòâóþùåå óâåäîìëåíèå áóäåò îïóáëèêîâàíî
â åæåìåñÿ÷íî èçäàâàåìîì óêàçàòåëå «Íàöèîíàëüíûå ñòàíäàðòû». Ñîîòâåòñòâóþùàÿ èíôîðìà-
öèÿ, óâåäîìëåíèå è òåêñòû ðàçìåùàþòñÿ òàêæå â èíôîðìàöèîííîé ñèñòåìå îáùåãî ïîëüçîâà-
íèÿ — íà îôèöèàëüíîì ñàéòå Ôåäåðàëüíîãî àãåíòñòâà ïî òåõíè÷åñêîìó ðåãóëèðîâàíèþ è
ìåòðîëîãèè â ñåòè Èíòåðíåò

© Ñòàíäàðòèíôîðì, 2011

Íàñòîÿùèé ñòàíäàðò íå ìîæåò áûòü ïîëíîñòüþ èëè ÷àñòè÷íî âîñïðîèçâåäåí, òèðàæèðîâàí è ðàñ-
ïðîñòðàíåí â êà÷åñòâå îôèöèàëüíîãî èçäàíèÿ áåç ðàçðåøåíèÿ Ôåäåðàëüíîãî àãåíòñòâà ïî òåõíè÷åñêî-
ìó ðåãóëèðîâàíèþ è ìåòðîëîãèè
II
 ÃÎÑÒ Ð 54005—2010

Ñîäåðæàíèå
1 Îáëàñòü ïðèìåíåíèÿ. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1
2 Íîðìàòèâíûå ññûëêè . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1
3 Òåðìèíû è îïðåäåëåíèÿ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2
4 Ìåòîä âûÿâëåíèÿ è îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriacåàå
ïî ìåòîäó ÍÂ× . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2
5 Ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae (ïîäñ÷åò êîëîíèé) . . . . . 3
6 Ïèòàòåëüíûå ñðåäû è ðàñòâîðû ðåàêòèâîâ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4
7 Àïïàðàòóðà, ïîñóäà, âñïîìîãàòåëüíûå ìàòåðèàëû, ðåàêòèâû. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8
8 Îòáîð è ïîäãîòîâêà ïðîá . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9
9 Ïðîâåäåíèå èñïûòàíèÿ. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9
10 Ïðîòîêîë èñïûòàíèÿ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12
Ïðèëîæåíèå ÄÀ (ñïðàâî÷íîå) Ñõåìû ìåòîäîâ âûÿâëåíèÿ è îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà áàêòåðèé
ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae ïî ìåòîäó ÍÂ× . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 13
Ïðèëîæåíèå ÄÁ (ñïðàâî÷íîå) Ðàñ÷åò íàèáîëåå âåðîÿòíîãî ÷èñëà ìèêðîîðãàíèçìîâ . . . . . . . . . 15
Ïðèëîæåíèå Ä (ñïðàâî÷íîå) Ñîïîñòàâëåíèå ñòðóêòóðû íàñòîÿùåãî ñòàíäàðòà ñî ñòðóêòóðîé
ïðèìåíåííûõ â íåì ìåæäóíàðîäíûõ ñòàíäàðòîâ ÈÑÎ 21528-1 è ÈÑÎ 21528-2 . . . 18

III
ÃÎÑÒ Ð 54005—2010

Ââåäåíèå
 íàñòîÿùèé ñòàíäàðò âêëþ÷åíû äîïîëíèòåëüíûå ïî îòíîøåíèþ ê ìåæäóíàðîäíûì ñòàíäàðòàì
ÈÑÎ 21528-1 è ÈÑÎ 21528-2 òðåáîâàíèÿ, îòðàæàþùèå ïîòðåáíîñòè íàöèîíàëüíîé ýêîíîìèêè Ðîññèé-
ñêîé Ôåäåðàöèè, à èìåííî:
- ââåäåí äîïîëíèòåëüíûé ìåòîä ïîñåâà íà ïîâåðõíîñòü àãàðèçîâàííîé ñðåäû äëÿ òâåðäûõ ïèùå-
âûõ ïðîäóêòîâ, ñîäåðæàùèõ â 1 ã íå ìåíåå 1500 ÊÎÅ áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae, è äëÿ æèä-
êèõ ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ, ñîäåðæàùèõ â 1 ñì3 íå ìåíåå 150 ÊÎÅ áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae.
Ðîñò ôàêóëüòàòèâíî-àíàýðîáíûõ áàêòåðèé âîçìîæåí íà ïîâåðõíîñòè ñðåäû, è ýòîò ïîâåðõíîñòíûé ðîñò
îáëåã÷àåò äàëüíåéøóþ èäåíòèôèêàöèþ áàêòåðèé, ìåòîä ïîñåâà íà ïîâåðõíîñòü àãàðèçîâàííîé ñðåäû
ïðåäóñìîòðåí ÃÎÑÒ 26670. Òàêæå ñ èñïîëüçîâàíèåì ýòîãî ìåòîäà ïðåäóñìîòðåíî âûÿâëåíèå áàêòåðèé
ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae, ïðè óñëîâèè, ÷òî ïðîáó ïðîäóêòà äëÿ àíàëèçà, â êîòîðîé ïðåäóñìîòðåíî
âûÿâëåíèå, âîçìîæíî ïîñåÿòü ïî ýòîìó ìåòîäó;
- âêëþ÷åí ìåòîä ïîñåâà ìåìáðàííûõ ôèëüòðîâ, êîòîðûé òàêæå ÿâëÿåòñÿ ðàçíîâèäíîñòüþ ïîñåâà
íà ïîâåðõíîñòü àãàðèçîâàííîé ïèòàòåëüíîé ñðåäû;
- â ðàçäåë 2 «Íîðìàòèâíûå ññûëêè» ââåäåíû ññûëêè íà íàöèîíàëüíûå ñòàíäàðòû Ðîññèéñêîé
Ôåäåðàöèè;
- ïðåäóñìîòðåí, ïðè âûÿâëåíèè èëè ïðè îïðåäåëåíèè êîëè÷åñòâà ïî ìåòîäó ÍÂ× áàêòåðèé ñåìåé-
ñòâà Enterobacteriaceae, íåïîñðåäñòâåííûé ïîñåâ â ñåëåêòèâíûå ïèòàòåëüíûå ñðåäû äëÿ ïèùåâûõ ïðî-
äóêòîâ, â êîòîðûõ ìèêðîîðãàíèçìû íå ïîäâåðãíóòû êàêèì-ëèáî ñóáëåòàëüíûì âîçäåéñòâèÿì;
- äëÿ óâåëè÷åíèÿ îáúåìà èëè ìàññû ïðîáû ïðîäóêòà äëÿ àíàëèçà ïðåäóñìîòðåíî èñïîëüçîâàíèå
äëÿ ïîñåâà ïèòàòåëüíûõ ñðåä äâîéíîé êîíöåíòðàöèè;
- ïðè èñïûòàíèè âûñîêîêèñëîòíûõ ïðîäóêòîâ äëÿ ñîçäàíèÿ îïòèìàëüíûõ óñëîâèé ðîñòà ìèêðîîð-
ãàíèçìîâ ïðåäóñìîòðåíî äîâåäåíèå ðÍ äî íåéòðàëüíîãî çíà÷åíèÿ â ñàìèõ ïðîäóêòàõ èëè â ïîñåâàõ;
- ïðåäóñìîòðåíî èñïîëüçîâàíèå äîïîëíèòåëüíûõ ïèòàòåëüíûõ ñðåä è ðåàêòèâîâ òðàäèöèîííî
èñïîëüçóåìûõ â Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè äëÿ âûÿâëåíèÿ áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae;
- â ïîäòâåðæäàþùèå òåñòû ââåäåí ìåòîä îêðàñêè ïî Ãðàìó, òàê êàê áàêòåðèè ñåìåéñòâà
Enterobacteriaceae ýòî, ïðåæäå âñåãî, ãðàìîòðèöàòåëüíûå áàêòåðèè, à ïðè èäåíòèôèêàöèè ïåðåõîäÿò îò
îáùèõ ïðèçíàêîâ ê ÷àñòíûì;
- äîïîëíèòåëüíîå ïðèëîæåíèå ÄÀ «Ñõåìû ìåòîäîâ âûÿâëåíèÿ è îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà áàêòå-
ðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae ïî ìåòîäó ÍÂ×»;
- äîïîëíèòåëüíîå ïðèëîæåíèå ÄÁ «Ðàñ÷åò íàèáîëåå âåðîÿòíîãî ÷èñëà ìèêðîîðãàíèçìîâ»;
- äîïîëíèòåëüíîå ïðèëîæåíèå ÄÂ «Ñîïîñòàâëåíèå ñòðóêòóðû íàñòîÿùåãî ñòàíäàðòà ñî ñòðóêòó-
ðîé ïðèìåíåííûõ â íåì ìåæäóíàðîäíûõ ñòàíäàðòîâ ÈÑÎ 21528-1 è ÈÑÎ 21528-2»;
- íå âêëþ÷åíû â íàöèîíàëüíûé ñòàíäàðò:
- ññûëêè íà ÈÑÎ 6887 (÷åòûðå ÷àñòè) è ÈÑÎ 8261, êàñàþùèåñÿ òðåáîâàíèé ê ïîäãîòîâêå ïðîá äëÿ
ïðîâåäåíèÿ èñïûòàíèÿ, òàê êàê ïîäãîòîâêó ïðîá ïðîâîäÿò ïî ÃÎÑÒ 26669;
- ññûëêè íà ÈÑÎ/ÒÓ 11133 (äâå ÷àñòè), êàñàþùèéñÿ òðåáîâàíèé ïî îáåñïå÷åíèþ êà÷åñòâà ïîäãî-
òîâêè êóëüòóðàëüíûõ ñðåä, òàê êàê ýòè òðåáîâàíèÿ âêëþ÷åíû â íàöèîíàëüíûé ñòàíäàðò;
- ïðèëîæåíèå À (íîðìàòèâíîå) «Ñõåìà ìåòîäèêè îáíàðóæåíèÿ» è ïðèëîæåíèå Â «Ñõåìà ïðîöåäó-
ðû äëÿ ìåòîäà ÍÂ×» (ÈÑÎ 21528-1), êîòîðûå äëÿ óäîáñòâà ïîëüçîâàíèÿ îáúåäèíåíû â ñïðàâî÷íîì ïðè-
ëîæåíèè ÄÀ íàöèîíàëüíîãî ñòàíäàðòà;
- ïðèëîæåíèå À (íîðìàòèâíîå) «Äîâåðèòåëüíûå ïðåäåëû äëÿ îöåíêè íåáîëüøèõ êîëè÷åñòâ êîëî-
íèé» (ÈÑÎ 21528-2), ò. ê. ýòà èíôîðìàöèÿ ñîäåðæèòñÿ â ÃÎÑÒ 26670;
- ñòðóêòóðíûé ýëåìåíò «Áèáëèîãðàôèÿ», òàê êàê ñîîòâåòñòâóþùàÿ ññûëêà îòñóòñòâóåò â íàöèî-
íàëüíîì ñòàíäàðòå.

IV
 ÃÎÑÒ Ð 54005—2010

Í À Ö È Î Í À Ë Ü Í Û É Ñ Ò À Í Ä À Ð Ò Ð Î Ñ Ñ È É Ñ Ê Î É Ô Å Ä Å Ð À Ö È È

ÏÐÎÄÓÊÒÛ ÏÈÙÅÂÛÅ

Ìåòîäû âûÿâëåíèÿ è îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae

Food products.
Methods for detection and quantity determination of family Enterobacteriaceae

Äàòà ââåäåíèÿ — 2012—01—01

1 Îáëàñòü ïðèìåíåíèÿ
Íàñòîÿùèé ñòàíäàðò ðàñïðîñòðàíÿåòñÿ íà ïèùåâûå ïðîäóêòû, à òàêæå êîðìà äëÿ æèâîòíûõ, ïðîáû
îêðóæàþùåé ñðåäû â ñôåðå ïðîèçâîäñòâà è îáðàáîòêè ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ è óñòàíàâëèâàåò:
- êà÷åñòâåííûé ìåòîä âûÿâëåíèÿ áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae;
- êîëè÷åñòâåííûé ìåòîä íàèáîëåå âåðîÿòíîãî ÷èñëà (ÍÂ×);
- êîëè÷åñòâåííûå ìåòîäû ïîñåâà â èëè íà àãàðèçîâàííûå ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêèå ñðåäû.
Ìåòîä ÍÂ× ïðèìåíÿþò äëÿ ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ, ñîäåðæàùèõ â 1 ã òâåðäîãî ïðîäóêòà íå áîëåå 150
èëè â 1 ñì3 æèäêîãî ïðîäóêòà íå áîëåå 15 êëåòîê áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae.
Ìåòîä ïîñåâà â àãàðèçîâàííûå ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêèå ñðåäû ïðèìåíÿþò äëÿ ïèùåâûõ ïðî-
äóêòîâ, ñîäåðæàùèõ â 1 ã òâåðäîãî ïðîäóêòà íå ìåíåå 150 èëè â 1 ñì3 æèäêîãî ïðîäóêòà íå ìåíåå 15 êîëî-
íèåîáðàçóþùèõ åäèíèö (ÊÎÅ) áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae.
Ìåòîä ïîñåâà íà àãàðèçîâàííûå ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêèå ñðåäû ïðèìåíÿþò äëÿ ïèùåâûõ
ïðîäóêòîâ, ñîäåðæàùèõ â 1 ã òâåðäîãî ïðîäóêòà íå ìåíåå 1500 èëè â 1 ñì3 æèäêîãî ïðîäóêòà íå ìåíåå
150 ÊÎÅ áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae.
Ï ð è ì å ÷ à í è å — Ìåòîä ïîñåâà íà ïîâåðõíîñòü àãàðèçîâàííîé ñðåäû ïðåäóñìîòðåí ÃÎÑÒ 26670 è ââå-
äåí äîïîëíèòåëüíî â ñâÿçè ñ òåì, ÷òî ðîñò ôàêóëüòàòèâíî-àíàýðîáíûõ áàêòåðèé âîçìîæåí íà ïîâåðõíîñòè ñðåäû è
ýòîò ïîâåðõíîñòíûé ðîñò îáëåã÷àåò äàëüíåéøóþ èäåíòèôèêàöèþ áàêòåðèé.

2 Íîðìàòèâíûå ññûëêè
 íàñòîÿùåì ñòàíäàðòå èñïîëüçîâàíû íîðìàòèâíûå ññûëêè íà ñëåäóþùèå ñòàíäàðòû:
ÃÎÑÒ Ð ÈÑÎ 7218—2008 Ìèêðîáèîëîãèÿ ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ è êîðìîâ äëÿ æèâîòíûõ. Îáùèå
òðåáîâàíèÿ è ðåêîìåíäàöèè ïî ìèêðîáèîëîãè÷åñêèì èññëåäîâàíèÿì
ÃÎÑÒ Ð 51426—99 (ÈÑÎ 6887—83) Ìèêðîáèîëîãèÿ. Êîðìà, êîìáèêîðìà, êîìáèíèðîâàííîå
ñûðüå. Îáùåå ðóêîâîäñòâî ïî ïðèãîòîâëåíèþ ðàçâåäåíèé äëÿ ìèêðîáèîëîãè÷åñêèõ èññëåäîâàíèé
ÃÎÑÒ Ð 54004—2010 Ïðîäóêòû ïèùåâûå. Ìåòîäû îòáîðà ïðîá äëÿ ìèêðîáèîëîãè÷åñêèõ
èñïûòàíèé
ÃÎÑÒ 3622—68 Ìîëîêî è ìîëî÷íûå ïðîäóêòû. Îòáîð ïðîá è ïîäãîòîâêà èõ ê èñïûòàíèþ
ÃÎÑÒ 6672—75 Ñòåêëà ïîêðîâíûå äëÿ ìèêðîïðåïàðàòîâ. Òåõíè÷åñêèå óñëîâèÿ
ÃÎÑÒ 9284—75 Ñòåêëà ïðåäìåòíûå äëÿ ìèêðîïðåïàðàòîâ. Òåõíè÷åñêèå óñëîâèÿ
ÃÎÑÒ 10444.1—84 Êîíñåðâû. Ïðèãîòîâëåíèå ðàñòâîðîâ ðåàêòèâîâ, êðàñîê, èíäèêàòîðîâ è
ïèòàòåëüíûõ ñðåä, ïðèìåíÿåìûõ â ìèêðîáèîëîãè÷åñêîì àíàëèçå
ÃÎÑÒ 13496.0—80 Êîìáèêîðìà, ñûðüå. Ìåòîäû îòáîðà ïðîá
ÃÎÑÒ 25336—82 Ïîñóäà è îáîðóäîâàíèå ëàáîðàòîðíûå ñòåêëÿííûå. Òèïû, îñíîâíûå ïàðà-
ìåòðû è ðàçìåðû

Èçäàíèå îôèöèàëüíîå

1
ÃÎÑÒ Ð 54005—2010

ÃÎÑÒ 26669—85 Ïðîäóêòû ïèùåâûå è âêóñîâûå. Ïîäãîòîâêà ïðîá äëÿ ìèêðîáèîëîãè÷åñêèõ

àíàëèçîâ
ÃÎÑÒ 26670—91 Ïðîäóêòû ïèùåâûå. Ìåòîäû êóëüòèâèðîâàíèÿ ìèêðîîðãàíèçìîâ
ÃÎÑÒ 30425—97 Êîíñåðâû. Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ ïðîìûøëåííîé ñòåðèëüíîñòè
Ï ð è ì å ÷ à í è å — Ïðè ïîëüçîâàíèè íàñòîÿùèì ñòàíäàðòîì öåëåñîîáðàçíî ïðîâåðèòü äåéñòâèå ññûëî÷-
íûõ ñòàíäàðòîâ â èíôîðìàöèîííîé ñèñòåìå îáùåãî ïîëüçîâàíèÿ — íà îôèöèàëüíîì ñàéòå Ôåäåðàëüíîãî
àãåíòñòâà ïî òåõíè÷åñêîìó ðåãóëèðîâàíèþ è ìåòðîëîãèè â ñåòè Èíòåðíåò èëè ïî åæåãîäíî èçäàâàåìîìó èíôîðìà-
öèîííîìó óêàçàòåëþ «Íàöèîíàëüíûå ñòàíäàðòû», êîòîðûé îïóáëèêîâàí ïî ñîñòîÿíèþ íà 1 ÿíâàðÿ òåêóùåãî ãîäà, è
ïî ñîîòâåòñòâóþùèì åæåìåñÿ÷íî èçäàâàåìûì èíôîðìàöèîííûì óêàçàòåëÿì, îïóáëèêîâàííûì â òåêóùåì ãîäó.
Åñëè ññûëî÷íûé ñòàíäàðò çàìåíåí (èçìåíåí), òî ïðè ïîëüçîâàíèè íàñòîÿùèì ñòàíäàðòîì ñëåäóåò ðóêîâîäñòâî-
âàòüñÿ çàìåíÿþùèì (èçìåíåííûì) ñòàíäàðòîì. Åñëè ññûëî÷íûé ñòàíäàðò îòìåíåí áåç çàìåíû, òî ïîëîæåíèå, â
êîòîðîì äàíà ññûëêà íà íåãî, ïðèìåíÿåòñÿ â ÷àñòè, íå çàòðàãèâàþùåé ýòó ññûëêó.

3 Òåðìèíû è îïðåäåëåíèÿ

 íàñòîÿùåì ñòàíäàðòå ïðèìåíåíû ñëåäóþùèå òåðìèíû ñ ñîîòâåòñòâóþùèìè îïðåäåëå-

íèÿìè:
3.1 áàêòåðèè ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae: Ôàêóëüòàòèâíî-àíàýðîáíûå ãðàìîòðèöàòåëü-
íûå áàêòåðèè, êîòîðûå îáðàçóþò òèïè÷íûå êîëîíèè íà àãàðèçîâàííûõ ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêèõ
ñðåäàõ, ñáðàæèâàþò ãëþêîçó, ñ îáðàçîâàíèåì èëè áåç îáðàçîâàíèÿ ãàçà, è äàþò îòðèöàòåëüíóþ ðåàêöèþ
íà îêñèäàçó.
3.2 âûÿâëåíèå áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae: Îïðåäåëåíèå ïðèñóòñòâèÿ èëè îòñóò-
ñòâèÿ áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae â îïðåäåëåííîé ìàññå èëè îáúåìå ïðîäóêòà.
3.3 îïðåäåëåíèå êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae:
3.3.1 Êîëè÷åñòâî áàêòåðèé, ñîäåðæàùååñÿ â 1 ñì3 èëè 1 ã ïðîäóêòà, îïðåäåëåííîå ïóòåì ïîñå-
âà ïðîäóêòà è/èëè åãî ðàçâåäåíèé â èëè íà àãàðèçîâàííóþ ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêóþ ñðåäó.
3.3.2 Êîëè÷åñòâî áàêòåðèé, ñîäåðæàùååñÿ â 1 ñì3 èëè 1 ã ïðîäóêòà, îïðåäåëåííîå ïî ìåòîäó
ÍÂ×.
3.4 Âûÿâëåíèå è îïðåäåëåíèå êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae ïðîâîäÿò ïî
ìåòîäàì, ïðèâåäåííûì â íàñòîÿùåì ñòàíäàðòå.

4 Ìåòîä âûÿâëåíèÿ è îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ñåìåéñòâà

Enterobacteriaceae ïî ìåòîäó ÍÂ×

Ìåòîä âûÿâëåíèÿ è îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae ïî ìåòîäó

ÍÂ× îñíîâàí íà âûñåâå îïðåäåëåííîãî êîëè÷åñòâà ïðîäóêòà è/èëè ðàçâåäåíèé ïðîáû äëÿ àíàëèçà â
æèäêóþ íåñåëåêòèâíóþ ñðåäó, èíêóáèðîâàíèè ïîñåâîâ, ïåðåñåâå êóëüòóðàëüíîé æèäêîñòè â æèäêóþ
ñåëåêòèâíóþ ñðåäó, ó÷åòå ïîëîæèòåëüíûõ ïðîáèðîê, è ïåðåñåâà êóëüòóðàëüíîé æèäêîñòè íà
ïîâåðõíîñòü àãàðèçîâàííîé ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêîé ñðåäû äëÿ ïîäòâåðæäåíèÿ ïî áèîõèìè÷åñ-
êèì è êóëüòóðàëüíûì ïðèçíàêàì ðîñòà ïðèíàäëåæíîñòè âûäåëåííûõ òèïè÷íûõ êîëîíèé ê áàêòåðèÿì
ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae.
4.1 Âûÿâëåíèå áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae
4.1.1 Ïðåäâàðèòåëüíîå îáîãàùåíèå â íåñåëåêòèâíîé ñðåäå
 çàáóôåðåííóþ ïåïòîííóþ âîäó âûñåâàþò ïðîáó äëÿ àíàëèçà, ïðåäíàçíà÷åííóþ äëÿ èñïûòàíèÿ,
çàòåì èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (37 ± 1) °C â òå÷åíèå (18 ± 2) ÷.
4.1.2 Îáîãàùåíèå â ñåëåêòèâíîé æèäêîé ñðåäå
Ïðîáèðêó ñ ñåëåêòèâíîé ñðåäîé èíîêóëèðóþò 1 ñì3 èç ïðîáèðêè, ïîëó÷åííîé ïî 4.1.1, è èíêóáèðóþò
ïðè òåìïåðàòóðå (37 ± 1) °C â òå÷åíèå (24 ± 2) ÷.
4.1.3 Âûäåëåíèå òèïè÷íûõ êîëîíèé
Íà ïîâåðõíîñòü ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêîé àãàðèçîâàííîé ñðåäû âûñåâàþò êóëüòóðó, ïîëó÷åí-
íóþ ïî 4.1.2, ïîñåâû èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (37 ± 1) °C.
Ïîñåâû ïðîñìàòðèâàþò ÷åðåç (24 ± 2) ÷ äëÿ îïðåäåëåíèÿ íàëè÷èÿ òèïè÷íûõ äëÿ áàêòåðèé
ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae êîëîíèé.
2
 ÃÎÑÒ Ð 54005—2010

4.1.4 Ïîäòâåðæäåíèå ïðèíàäëåæíîñòè âûäåëåííûõ òèïè÷íûõ êîëîíèé ê áàêòåðèÿì

ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae
Òèïè÷íûå êîëîíèè, ïîëó÷åííûå ïî 4.1.3, ïåðåñåâàþò íà ïîâåðõíîñòü ïèòàòåëüíîãî àãàðà äëÿ äàëü-
íåéøåãî ïîäòâåðæäåíèÿ ïðèíàäëåæíîñòè âûäåëåííûõ êóëüòóð ê áàêòåðèÿì ñåìåéñòâà
Enterobacteriaceae.
4.1.5 Ñõåìà âûÿâëåíèÿ áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae ïðèâåäåíà â ñïðàâî÷íîì ïðèëî-
æåíèè ÄÀ.
4.2 Îïðåäåëåíèå êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae (ìåòîä Í×Â)
4.2.1 Ïðåäâàðèòåëüíîå îáîãàùåíèå â íåñåëåêòèâíîé ñðåäå
Äëÿ ïîñåâà èñïîëüçóþò íå ìåíåå òðåõ ïîñëåäîâàòåëüíûõ ïðîá äëÿ àíàëèçà, îòëè÷àþùèõñÿ ìåæäó
ñîáîé â 10 ðàç ïî ìàññå èëè îáúåìó. Êàæäîé ïðîáîé äëÿ àíàëèçà çàñåâàþò òðè ïîâòîðíîñòè. Âûáèðàåìàÿ
ïîñëåäîâàòåëüíîñòü ðàçâåäåíèé äëÿ ïîñåâà çàâèñèò îò ïðåäïîëàãàåìîãî óðîâíÿ îáñåìåíåííîñòè ïðî-
äóêòà áàêòåðèÿìè ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae èëè îò íîðìàòèâíûõ çíà÷åíèé.
Ïðåäâàðèòåëüíîå íåñåëåêòèâíîå îáîãàùåíèå ïðîâîäÿò ïóòåì ïîñåâà ïðîäóêòà è/èëè åãî ðàçâåäå-
íèé â çàáóôåðåííóþ ïåïòîííóþ âîäó.
Ïîñåâû èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (37 ± 1) °C â òå÷åíèå (18 ± 2) ÷.
4.2.2 Îáîãàùåíèå â ñåëåêòèâíîé æèäêîé ñðåäå
Ïðîáèðêè ñ ñåëåêòèâíîé ñðåäîé èíîêóëèðóþò 1 ñì3 èç êàæäîãî ïîñåâà, ïîëó÷åííîãî ïî 4.2.1, è èíêó-
áèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (37 ± 1) °C â òå÷åíèå (24 ± 2) ÷.
4.2.3 Âûäåëåíèå òèïè÷íûõ êîëîíèé, ïîäòâåðæäåíèå ïðèíàäëåæíîñòè âûäåëåííûõ
òèïè÷íûõ êîëîíèé ê áàêòåðèÿì ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae
Âûäåëåíèå òèïè÷íûõ êîëîíèé, ïîäòâåðæäåíèå ïðèíàäëåæíîñòè âûäåëåííûõ òèïè÷íûõ êîëîíèé ê
áàêòåðèÿì ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae ïðîâîäÿò ïî 4.1.3 è 4.1.4.
4.2.4 Ñõåìà îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae ïî ìåòîäó ÍÂ× ñ
ïðåäâàðèòåëüíûì îáîãàùåíèåì ïðèâåäåíà â ñïðàâî÷íîì ïðèëîæåíèè ÄÀ.
4.2.5 Íàèáîëåå âåðîÿòíîå ÷èñëî áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae â 1 ñì3 èëè 1 ã ïðîáû ïðî-
äóêòà (ÍÂ×) ðàññ÷èòûâàþò èñõîäÿ èç ÷èñëà ïîñåâîâ, â êîòîðûõ ïîäòâåðæäåíî ïðèñóòñòâèå ýòèõ áàêòå-
ðèé. Îïðåäåëåíèå íàèáîëåå âåðîÿòíîãî ÷èñëà — â ñîîòâåòñòâèè ñ òàáëèöåé ïðèëîæåíèÿ ÄÁ.
4.3 Ïðè âûÿâëåíèè áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae è îïðåäåëåíèÿ èõ êîëè÷åñòâà ïî
ìåòîäó ÍÂ× â ñâåæèõ ïðîäóêòàõ, íå ñîäåðæàùèõ ñóáëåòàëüíî ïîâðåæäåííûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ, ïîä-
âåðãíóòûõ êàêèì-ëèáî âîçäåéñòâèÿì, íàïðèìåð ñóøêå, çàìîðîçêå è ò. ä., äîïóñêàåòñÿ âûñåâàòü ïðî-
áó ïðîäóêòà äëÿ àíàëèçà è/èëè åãî ðàçâåäåíèÿ íåïîñðåäñòâåííî â ñåëåêòèâíûå ñðåäû, ìèíóÿ ýòàï
íåñåëåêòèâíîãî îáîãàùåíèÿ.
Êîëè÷åñòâî âûñåâàåìîãî ïðîäóêòà èëè åãî ðàçâåäåíèÿ è ñðåäû äîëæíî áûòü â ñîîòíîøåíèè íå
ìåíåå ÷åì 1:10.
Äëÿ óâåëè÷åíèÿ ìàññû èëè îáúåìà âûñåâàåìîé ïðîáû ïðîäóêòà äîïóñêàåòñÿ èñïîëüçîâàíèå
ñåëåêòèâíûõ æèäêèõ ñðåä äâîéíîé êîíöåíòðàöèè.
Ïðè íåïîñðåäñòâåííîì ïîñåâå ïðîäóêòà â ñåëåêòèâíóþ ñðåäó ïîñåâû èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðà-
òóðå (37 ± 1) °C â òå÷åíèå 48 ÷.
Ï ð è ì å ÷ à í è å — 4.3 ââåäåí â ñâÿçè ñ òåì, ÷òî íåïîñðåäñòâåííûé ïîñåâ â ñåëåêòèâíûå ïèòàòåëüíûå ñðå-
äû äëÿ ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ, â êîòîðûõ ìèêðîîðãàíèçìû íå ïîäâåðãíóòû êàêèì-ëèáî ñóáëåòàëüíûì âîçäåéñòâèÿì,
ïðåäóñìîòðåí äëÿ óïðîùåíèÿ èñïûòàíèÿ è ñîêðàùåíèÿ åãî ïðîäîëæèòåëüíîñòè.

5 Ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae

(ïîäñ÷åò êîëîíèé)
Ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae ïîñåâîì â èëè íà àãà-
ðèçîâàííûå ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêèå ñðåäû îñíîâàíû íà ïîñåâå îïðåäåëåííîãî êîëè÷åñòâà ïðî-
äóêòà è/èëè åãî ðàçâåäåíèé â èëè íà àãàðèçîâàííóþ ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêóþ ñðåäó,
èíêóáèðîâàíèè ïîñåâîâ, ïîäñ÷åòå òèïè÷íûõ êîëîíèé, ïîäòâåðæäåíèè ïî áèîõèìè÷åñêèì è êóëüòó-
ðàëüíûì ïðèçíàêàì ïðèíàäëåæíîñòè âûäåëåííûõ òèïè÷íûõ êîëîíèé ê áàêòåðèÿì ñåìåéñòâà
Enterobacteriaceae.
5.1 Ìåòîä ïîñåâà â àãàðèçîâàííóþ ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêóþ ñðåäó
5.1.1 Äëÿ îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae ïî 1 ñì3 ïðîäóêòà, åñëè
ïðîäóêò æèäêèé, èëè ïî 1 ñì3 èñõîäíîãî ðàçâåäåíèÿ â ñëó÷àå íå æèäêîãî ïðîäóêòà âíîñÿò â êàæäóþ èç äâóõ
ñòåðèëüíûõ ÷àøåê Ïåòðè.
3
ÃÎÑÒ Ð 54005—2010

Äðóãóþ ïàðó ÷àøåê èñïîëüçóþò äëÿ áîëåå ðàçâåäåííîãî âûñåâàåìîãî ïðîäóêòà — èñõîäíîé ñóñ-
ïåíçèè è/èëè äåñÿòèêðàòíûõ ðàçâåäåíèé ïðîäóêòà.
×àøêè ñ âíåñåííûì â íèõ ïðîäóêòîì è/èëè åãî ðàçâåäåíèåì çàëèâàþò ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêîé
àãàðèçîâàííîé ïèòàòåëüíîé ñðåäîé.
Ïîñåâû â ÷àøêàõ èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (37 ± 1) °C â òå÷åíèå (24 ± 2) ÷.
5.1.2 Ïîñëå èíêóáèðîâàíèÿ ïîñåâîâ îòáèðàþò ÷àøêè, íà êîòîðûõ âûðîñëî îò 15 äî 150 òèïè÷íûõ
êîëîíèé. Ïîäñ÷èòûâàþò íà îòîáðàííûõ ÷àøêàõ êîëè÷åñòâî âûðîñøèõ òèïè÷íûõ êîëîíèé.
Ïðè ïîñåâå ìåòîäîì ìåìáðàííûõ ôèëüòðîâ íà íèõ ïîäñ÷èòûâàþò êîëîíèè â òîì ñëó÷àå, åñëè
èõ ìåíåå 15.
Ï ð è ì å ÷ à í è å — Äîïîëíåíèå ââåäåíî â ñâÿçè ñ òåì, ÷òî ïîâåðõíîñòü ìåìáðàííîãî ôèëüòðà íàìíîãî
ìåíüøå, ÷åì ÷àøêè Ïåòðè.
Âûáèðàþò ïî òðè òèïè÷íûõ êîëîíèè êàæäîãî òèïà äëÿ ïåðåñåâà íà ïîâåðõíîñòü ïèòàòåëüíîãî àãàðà
äëÿ äàëüíåéøåãî ïîäòâåðæäåíèÿ ïðèíàäëåæíîñòè âûðîñøèõ êóëüòóð ê áàêòåðèÿì ñåìåéñòâà
Enterobacteriaceae.
5.2 Ìåòîä ïîñåâà íà àãàðèçîâàííóþ ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêóþ ñðåäó
5.2.1 Íà ïîäñóøåííóþ ïîâåðõíîñòü àãàðèçîâàííîé ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêîé ñðåäû äâóõ
÷àøåê Ïåòðè íàíîñÿò ïî 0,1—0,2 ñì3 ïðîäóêòà, åñëè ïðîäóêò æèäêèé, èëè èñõîäíîé ñóñïåíçèè â ñëó÷àå
íå æèäêîãî ïðîäóêòà.
Äðóãóþ ïàðó ÷àøåê èñïîëüçóþò äëÿ äðóãèõ êîëè÷åñòâ âûñåâàåìîãî ïðîäóêòà — èñõîäíîé ñóñ-
ïåíçèè è/èëè äåñÿòèêðàòíûõ ðàçâåäåíèé ïðîäóêòà.
Âíåñåííûé â ÷àøêè ïðîäóêò èëè åãî ðàçâåäåíèÿ ðàñïðåäåëÿþò ïî ïîâåðõíîñòè ñåëåêòèâ-
íî-äèàãíîñòè÷åñêîé àãàðèçîâàííîé ïèòàòåëüíîé ñðåäû ñòåðèëüíûì øïàòåëåì.
Ïîñåâû â ÷àøêàõ èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (37 ± 1) °C â òå÷åíèå (24 ± 2) ÷.
5.2.2 Ïîäñ÷åò è îòáîð òèïè÷íûõ êîëîíèé äëÿ äàëüíåéøåãî ïîäòâåðæäåíèÿ èõ ïðèíàäëåæíîñòè
ê áàêòåðèÿì ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae ïðîâîäÿò ïî 5.1.2.
Ï ð è ì å ÷ à í è å — 5.2 ââåäåí äîïîëíèòåëüíî â ñâÿçè ñ âêëþ÷åíèåì â íàñòîÿùèé ñòàíäàðò ìåòîäà ïîñåâà
íà ïîâåðõíîñòü ïèòàòåëüíûõ ñðåä.
5.3 Êîëè÷åñòâî ïðîäóêòà è/èëè åãî ðàçâåäåíèé äëÿ ïîñåâà â èëè íà àãàðèçîâàííóþ ñåëåêòèâ-
íî-äèàãíîñòè÷åñêóþ ñðåäó çàâèñèò îò ïðåäïîëàãàåìîãî óðîâíÿ îáñåìåíåííîñòè ïðîäóêòà áàêòåðèÿìè
ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae èëè îò íîðìàòèâíûõ çíà÷åíèé.
5.4 Êîëè÷åñòâî áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae íà 1 ñì3 èëè íà 1 ã àíàëèçèðóåìîãî ïðîäóê-
òà ïåðåñ÷èòûâàþò ïî ÃÎÑÒ 26670, èñõîäÿ èç ÷èñëà ïîäòâåðæäåííûõ òèïè÷íûõ êîëîíèé, âûðîñøèõ íà
÷àøêàõ Ïåòðè ïðè ïîñåâå â èëè íà àãàðèçîâàííûå ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêèå ñðåäû.

6 Ïèòàòåëüíûå ñðåäû è ðàñòâîðû ðåàêòèâîâ

Õèìè÷åñêèå âåùåñòâà, èñïîëüçóåìûå äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ ïèòàòåëüíûõ ñðåä è ðåàêòèâîâ, äîëæíû
áûòü àíàëèòè÷åñêîãî êà÷åñòâà, à âîäà äèñòèëëèðîâàííîé.
6.1 Ñåëåêòèâíàÿ ñðåäà îáîãàùåíèÿ: ãëþêîçíûé áóëüîí ñ æåë÷üþ è áðèëëèàíòîâûì
çåëåíûì
6.1.1 Ñîñòàâ
ôåðìåíòàòèâíûé ãèäðîëèçàò æèâîòíûõ òêàíåé, ã 10,0
ãëþêîçà, ã 5,0
íàòðèé ôîñôîðíîêèñëûé äâóçàìåùåííûé áåçâîäíûé (Na2 HPO4), ã 6,45
êàëèé ôîñôîðíîêèñëûé îäíîçàìåùåííûé áåçâîäíûé (ÊÍ2 ÐÎ4), ã 2,0
ãîâÿæüÿ æåë÷ü äëÿ áàêòåðèîëîãè÷åñêîãî èñïîëüçîâàíèÿ, ã 20,0
áðèëëèàíòîâûé çåëåíûé, ã 0,0125
(èëè 2,5 ñì3 ðàñòâîðà, ïðèãîòîâëåííîãî ïî 6.1.3, â ñëó÷àå
ïðèãîòîâëåíèÿ ñðåäû èç îòäåëüíûõ êîìïîíåíòîâ);
âîäà, ñì3 1000
6.1.2 Ïðèãîòîâëåíèå
Ðàñòâîðÿþò êîìïîíåíòû èëè äåãèäðàòèðîâàííóþ îñíîâó ñðåäû â âîäå. Íàãðåâàþò ñðåäó íà ñëàáîì
îãíå äî êèïåíèÿ, êèïÿòÿò 1—2 ìèí, ôèëüòðóþò ÷åðåç âàòíî-ìàðëåâûé ôèëüòð, äîâîäÿò îáüåì äî 1 äì3,
îõëàæäàþò äî òåìïåðàòóðû 45 °C—55 °C. Óñòàíàâëèâàþò ðÍ òàê, ÷òîáû îí ñîñòàâëÿë (7,2 ± 0,2) ïðè òåì-
ïåðàòóðå 25 °C, ïîñëå ÷åãî ñðåäó äîâîäÿò äî êèïåíèÿ.
4
 ÃÎÑÒ Ð 54005—2010

Ñðåäó íå ñòåðèëèçóþò.
Ñðåäó ðàçëèâàþò â ñòåðèëüíóþ ïîñóäó:
- ïî 10 ñì3 â ïðîáèðêè ðàçìåðîì ïðèáëèçèòåëüíî 16 ´ 160 ìì ïðè èñïîëüçîâàíèÿ ñðåäû íîðìàëü-
íîé êîíöåíòðàöèè;
- ïî 10 ñì3 â ïðîáèðêè ðàçìåðîì ïðèáëèçèòåëüíî 20 ´ 200 ìì ïðè èñïîëüçîâàíèè ñðåäû äâîéíîé
êîíöåíòðàöèè;
- ïî 90 ñì3 â êîëáû.
Ï ð è ì å ÷ à í è å — Äîïîëíåíèå ââåäåíî â ñâÿçè ñ òåì, ÷òî èñïîëüçîâàíèå ñðåä äâîéíîé êîíöåíòðàöèè
ïðåäóñìàòðèâàåò äîáàâëåíèå êîëè÷åñòâà ïðîäóêòà èëè åãî ðàçâåäåíèÿ ïî îáúåìó, ðàâíîìó êîëè÷åñòâó ñðåäû, äëÿ
ýòîãî äîëæíû èñïîëüçîâàòüñÿ ïðîáèðêè áîëüøåé âìåñòèìîñòè.
Ñðåäó õðàíÿò ïðè òåìïåðàòóðå (5 ± 3) °C íå áîëåå 1 ìåñ.
6.1.3 Ðàñòâîð áðèëëèàíòîâîãî çåëåíîãî
6.1.3.1 Ñîñòàâ:
áðèëëèàíòîâûé çåëåíûé, ã 0,5
Âîäà, ñì3 100
6.1.3.2 Ïðèãîòîâëåíèå
Áðèëëèàíòîâûé çåëåíûé ïåðåíîñÿò â ôàðôîðîâóþ ñòóïêó è ïîñòåïåííî ðàñòâîðÿþò â âîäå.
Ðàñòâîð ïåðåëèâàþò â ìåðíóþ êîëáó âìåñòèìîñòüþ 100 ñì3 è äîâîäÿò âîäîé äî ìåòêè.
Ï ð è ì å ÷ à í è å — Ïóíêò 6.1.3 ââåäåí äîïîëíèòåëüíî â ñâÿçè ñ òåì, ÷òî â ñòàíäàðòàõ ÈÑÎ ïðåäóñìîòðåíî
âíåñåíèå êðàñîê â äåãèäðàòèðîâàííóþ îñíîâó ñðåäû â ñóõîì âèäå, à ïðè ïðèãîòîâëåíèè ñðåäû èç îòäåëüíûõ êîìïî-
íåíòîâ êðàñêè âíîñÿòñÿ â âèäå ðàñòâîðîâ (ñì. òàêæå 6.2.3, 6.2.4, 6.4.3.)
6.2 Ãëþêîçíûé àãàð ñ æåë÷üþ è ôèîëåòîâûì êðàñíûì (VRBG)
6.2.1 Ñîñòàâ:
ôåðìåíòàòèâíûé ãèäðîëèçàò æèâîòíûõ òêàíåé, ã 7,0
ýêñòðàêò äðîææåé, ã 3,0
ãîâÿæüÿ æåë÷ü äëÿ áàêòåðèîëîãè÷åñêîãî èñïîëüçîâàíèÿ , ã 1,5
ãëþêîçà, ã 10,0
íàòðèé õëîðèñòûé, ã 5,0
íåéòðàëüíûé êðàñíûé, ã 0,03
(èëè 1 ñì3 ðàñòâîðà, ïðèãîòîâëåííîãî ïî 6.2.3, â ñëó÷àå
ïðèãîòîâëåíèÿ ñðåäû èç îòäåëüíûõ êîìïîíåíòîâ);
êðèñòàëëè÷åñêèé ôèîëåòîâûé, ã 0,002
(èëè 0,2 ñì3 ðàñòâîðà, ïðèãîòîâëåííîãî ïî 6.2.4, â ñëó÷àå
ïðèãîòîâëåíèÿ ñðåäû èç îòäåëüíûõ êîìïîíåíòîâ);
àãàð, ã 9—18
(çàâèñèò îò æåëèðóþùåé ñïîñîáíîñòè àãàðà);
âîäà, ñì3 1000
6.2.2 Ïðèãîòîâëåíèå
Ðàñòâîðÿþò êîìïîíåíòû èëè äåãèäðàòèðîâàííóþ îñíîâó ñðåäû â âîäå. Íàãðåâàþò ñðåäó íà ñëàáîì
îãíå äî êèïåíèÿ, êèïÿòÿò 1—2 ìèí, ôèëüòðóþò ÷åðåç âàòíî-ìàðëåâûé ôèëüòð, äîâîäÿò îáüåì äî 1 äì3,
îõëàæäàþò äî òåìïåðàòóðû 45 °C—55 °C. Óñòàíàâëèâàþò ðÍ òàê, ÷òîáû îí ñîñòàâëÿë (7,4 ± 0,2) ïðè òåì-
ïåðàòóðå 25 °C, ïîñëå ÷åãî ñðåäó äîâîäÿò äî êèïåíèÿ, ðàçëèâàþò â ñòåðèëüíûå êîëáû. Ñðåäó íå ñòåðè-
ëèçóþò.
Ðàñïëàâëåííóþ ñðåäó ñ ìîìåíòà åå ïðèãîòîâëåíèÿ õðàíÿò íå áîëåå 4 ÷.
6.2.3 Ðàñòâîð íåéòðàëüíîãî êðàñíîãî
6.2.3.1 Ñîñòàâ:
íåéòðàëüíûé êðàñíûé, ã 3,0
âîäà, ñì3 100
6.2.3.2 Ïðèãîòîâëåíèå
Íåéòðàëüíûé êðàñíûé ïåðåíîñÿò â ôàðôîðîâóþ ñòóïêó è ïîñòåïåííî ðàñòâîðÿþò â âîäå. Ðàñ-
òâîð ïåðåëèâàþò â ìåðíóþ êîëáó âìåñòèìîñòüþ 100 ñì3 è äîâîäÿò âîäîé äî ìåòêè.
6.2.4 Ðàñòâîð êðèñòàëëè÷åñêîãî ôèîëåòîâîãî
6.2.4.1 Ñîñòàâ:
êðèñòàëëè÷åñêèé ôèîëåòîâûé, ã 1,0
âîäà, ñì3 100
5
ÃÎÑÒ Ð 54005—2010

6.2.4.2 Ïðèãîòîâëåíèå
Êðèñòàëëè÷åñêèé ôèîëåòîâûé ïåðåíîñÿò â ôàðôîðîâóþ ñòóïêó è ïîñòåïåííî ðàñòâîðÿþò â
âîäå. Ðàñòâîð ïåðåëèâàþò â ìåðíóþ êîëáó âìåñòèìîñòüþ 100 ñì3 è äîâîäÿò âîäîé äî ìåòêè.
Ï ð è ì å ÷ à í è å — Ïóíêòû 6.2.3—6.2.4 ââåäåíû äîïîëíèòåëüíî â ñîîòâåòñòâèè ñ 6.1.2.
6.2.5 Ïðèãîòîâëåíèÿ ÷àøåê Ïåòðè ñ àãàðîì
Ïðèáëèçèòåëüíî ïî 15 ñì3 àãàðèçîâàííîé ñðåäû, îõëàæäåííîé äî òåìïåðàòóðû 44 °C—47 °C, ðàç-
ëèâàþò â ñòåðèëüíûå ÷àøêè Ïåòðè è äàþò çàòâåðäåòü.
Íåïîñðåäñòâåííî ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì ïîäñóøèâàþò ïîâåðõíîñòü ñðåäû â ÷àøêàõ Ïåòðè, ïðåä-
ïî÷òèòåëüíî ïðè ñíÿòûõ êðûøêàõ è ïîâåðõíîñòüþ àãàðà, ñìîòðÿùåé âíèç, â ñóøèëüíîì øêàôó äî òåõ ïîð
(îêîëî 30 ìèí), ïîêà íà ïîâåðõíîñòè àãàðà íå îñòàíåòñÿ âëàãè.
Åñëè ñðåäà ïðèãîòîâëåíà çàðàíåå, òî íå ïîäñóøåííóþ ñðåäó â ÷àøêàõ Ïåòðè ìîæíî õðàíèòü â óñëî-
âèÿõ, êîòîðûå íå ïðèâåäóò ê èçìåíåíèþ õèìè÷åñêîãî ñîñòàâà ñðåäû, äî äâóõ íåäåëü ïðè òåìïåðàòóðå
(5 ± 3) °C.
6.3 Ïèòàòåëüíûé àãàð
6.3.1 Ñîñòàâ
ìÿñíîé ýêñòðàêò, ã 3,0
ôåðìåíòàòèâíîãî ãèäðîëèçàò æèâîòíûõ òêàíåé, ã 5,0
íàòðèé õëîðèñòûé, ã 5,0
àãàð, ã 9—18
(çàâèñèò îò æåëèðóþùåé ñïîñîáíîñòè àãàðà)
âîäà, ñì3 1000
6.3.2 Ïðèãîòîâëåíèå
Ðàñòâîðÿþò êîìïîíåíòû èëè äåãèäðàòèðîâàííóþ îñíîâó ñðåäû â âîäå. Íàãðåâàþò ñðåäó íà ñëàáîì
îãíå äî êèïåíèÿ, êèïÿòÿò 1—2 ìèí, äîâîäÿò îáúåì äî 1 äì3, îõëàæäàþò äî òåìïåðàòóðû 45 °C—55 °C.
Óñòàíàâëèâàþò ðÍ òàê, ÷òîáû ïîñëå ñòåðèëèçàöèè îí ñîñòàâëÿë (7,3 ± 0,2) ïðè òåìïåðàòóðå 25 °C. Ðàç-
ëèâàþò ñðåäó ïî êîëáàì èëè ïðîáèðêàì è ñòåðèëèçóþò â àâòîêëàâå ïðè òåìïåðàòóðå (121 ± 1) °C â òå÷å-
íèå 15 ìèí.
6.4 Ãëþêîçíûé àãàð
6.4.1 Ñîñòàâ
ôåðìåíòàòèâíûé ãèäðîëèçàò êàçåèíà, ã 10,0
ýêñòðàêò äðîææåé, ã 1,5
ãëþêîçà, ã 10,0
íàòðèé õëîðèñòûé, ã 5,0
áðîìêðåçîëîâûé ïóðïóðîâûé, ã 0,015
(èëè 1,5 ñì3 ðàñòâîðà, ïðèãîòîâëåííîãî ïî 6.4.3, â ñëó÷àå
ïðèãîòîâëåíèÿ ñðåäû èç îòäåëüíûõ êîìïîíåíòîâ);
àãàð, ã 9—18
(çàâèñèò îò æåëèðóþùåé ñïîñîáíîñòè àãàðà)
Âîäà, ñì3 1000
6.4.2 Ïðèãîòîâëåíèå
Ðàñòâîðÿþò êîìïîíåíòû èëè äåãèäðàòèðîâàííóþ îñíîâó ñðåäû â âîäå. Íàãðåâàþò ñðåäó íà ñëàáîì
îãíå äî êèïåíèÿ, êèïÿòÿò 1—2 ìèí, äîâîäÿò îáúåì äî 1 äì3, îõëàæäàþò äî òåìïåðàòóðû 45 °C—55 °C.
Óñòàíàâëèâàþò ðÍ òàê, ÷òîáû îí ñîñòàâëÿë (7,0 ± 0,2) ïðè òåìïåðàòóðå 25 °C. Ðàçëèâàþò ñðåäó ïî 5 ñì3 â
ïðîáèðêè è ñòåðèëèçóþò â àâòîêëàâå ïðè òåìïåðàòóðå (112 ± 1) °C â òå÷åíèå 20 ìèí.
Ï ð è ì å ÷ à í è å — Èçìåíåíèå ðåæèìà ñòåðèëèçàöèè ñðåäû ââåäåíî â ñâÿçè ñ òåì, ÷òî ñðåäû Ãèññà ñ óãëå-
âîäàìè äëÿ ïðåäîòâðàùåíèÿ ðàçëîæåíèÿ óãëåâîäîâ ñòåðèëèçóþò ïðè 112 °C.
Ïðîáèðêè ïîñëå ñòåðèëèçàöèè îñòàâëÿþò â âåðòèêàëüíîì ïîëîæåíèè. Ïðèãîòîâëåííóþ ñðåäó ìîæ-
íî õðàíèòü ïðè òåìïåðàòóðå (5 ± 3) °C íå áîëåå 1 íåä. Åñëè ñðåäà õðàíèëàñü ïðè òåìïåðàòóðå (5 ± 3) °C,
òî äëÿ óäàëåíèÿ êèñëîðîäà âîçäóõà, íåïîñðåäñòâåííî ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì, ñðåäó ïðîãðåâàþò (ðåãå-
íåðèðóþò) â êèïÿùåé âîäÿíîé áàíå èëè òåêó÷èì ïàðîì â àâòîêëàâå â òå÷åíèå 15 ìèí, çàòåì áûñòðî
îõëàæäàþò äî òåìïåðàòóðû èíêóáàöèè ïîñåâîâ.

6
 ÃÎÑÒ Ð 54005—2010

6.4.3 Ðàñòâîð áðîìêðåçîëîâîãî ïóðïóðîâîãî

6.4.3.1 Ñîñòàâ:
áðîìêðåçîëîâûé ïóðïóðîâûé, ã 1
ðàñòâîð ãèäðîîêèñè íàòðèÿ ìîëÿðíîé êîíöåíòðàöèåé
ñ (NaOH) = 0,1 ìîëü/äì3, ñì3 19
âîäà, ñì3 80
6.4.3.2 Ïðèãîòîâëåíèå
Áðîìêðåçîëîâûé ïóðïóðîâûé ïåðåíîñÿò â ôàðôîðîâóþ ñòóïêó ñ 19 ñì3 ðàñòâîðà ãèäðîîêèñè
íàòðèÿ ìîëÿðíîé êîíöåíòðàöèåé ñ (NaOH) = 0,1 ìîëü/äì3 è ïîñëå ðàñòâîðåíèÿ äîáàâëÿþò âîäó.
Ï ð è ì å ÷ à í è å — Ïóíêò 6.4.3 ââåäåí äîïîëíèòåëüíî â ñîîòâåòñòâèè ñ 6.1.2.
6.5 Ñåëåêòèâíàÿ îáîãàòèòåëüíàÿ ñðåäà (ñðåäà Êåññëåðà)
6.5.1 Ñîñòàâ:
ïåïòîí, ã 10,0
ãëþêîçà, ã 2,5
æåë÷ü, ã 5,0
ðàñòâîð êðèñòàëëè÷åñêîãî ôèîëåòîâîãî, ïðèãîòîâëåííûé ïî 6.2.4, ñì3 2,0
âîäà, ñì3 1000
6.5.2 Ïðèãîòîâëåíèå
Ïðè íàãðåâàíèè ðàñòâîðÿþò êîìïîíåíòû â âîäå. Íàãðåâàþò íà ñëàáîì îãíå äî êèïåíèÿ, êèïÿ-
òÿò 1—2 ìèí, ôèëüòðóþò ÷åðåç âàòíî-ìàðëåâûé ôèëüòð, äîâîäÿò îáúåì äî 1 äì3, îõëàæäàþò äî
òåìïåðàòóðû 45 °C—55 °C è óñòàíàâëèâàþò ðÍ òàê, ÷òîáû ïîñëå ñòåðèëèçàöèè îí ñîñòàâëÿë
(7,2 ± 0,1) ïðè òåìïåðàòóðå 25 °C.
Ñðåäó ðàçëèâàþò ïî 6.1.2.
Ñòåðèëèçóþò ñðåäó â àâòîêëàâå ïðè òåìïåðàòóðå (115 ± 1) °C â òå÷åíèå 20 ìèí.
6.6 Ñåëåêòèâíàÿ îáîãàòèòåëüíàÿ ñðåäà (áóëüîí Ìàê-Êîíêè)
6.6.1 Ñîñòàâ:
ïåïòîí, ã 20,0
ãëþêîçà, ã 10,0
æåë÷ü, ã 5,0
ðàñòâîð áðîìêðåçîëîâîãî ïóðïóðîâîãî, ïðèãîòîâëåííûé ïî 6.4.3, ñì3 1,0
íàòðèé õëîðèñòûé, ã 5,0
âîäà, ñì3 1000
6.6.2 Ïðèãîòîâëåíèå
Ïðè íàãðåâàíèè âñå êîìïîíåíòû ðàñòâîðÿþò â âîäå. Íàãðåâàþò íà ñëàáîì îãíå äî êèïåíèÿ,
êèïÿòÿò 1—2 ìèí, ôèëüòðóþò ÷åðåç âàòíî-ìàðëåâûé ôèëüòð, äîâîäÿò îáúåì äî 1 äì3, îõëàæäàþò
äî òåìïåðàòóðû 45 °C—55 °C è óñòàíàâëèâàþò ðÍ òàê, ÷òîáû ïîñëå ñòåðèëèçàöèè îí ñîñòàâëÿë
(7,2 ± 0,1) ïðè òåìïåðàòóðå 25 °C. Ðàçëèâàþò ñðåäó ïî 6.5.2 è ñòåðèëèçóþò â àâòîêëàâå ïðè òåìïå-
ðàòóðå (121 ± 1) °C â òå÷åíèå 15 ìèí.
6.7 Àãàð Ýíäî
Ñðåäó ãîòîâÿò â ñîîòâåòñòâèè ñ ðåêîìåíäàöèÿìè, óêàçàííûìè íà ýòèêåòêå.
6.8 Ñðåäà Ãèññà ñ ãëþêîçîé
Ñðåäó ãîòîâÿò ïî ÃÎÑÒ 10444.1 èëè èñïîëüçóþò ñóõóþ ñðåäó ñ ãëþêîçîé, ñðåäó ãîòîâÿò â ñîîò-
âåòñòâèè ñ ðåêîìåíäàöèÿìè, óêàçàííûìè íà ýòèêåòêå.
6.9 ÃÐÌ-àãàð (ñóõîé ïèòàòåëüíûé àãàð íà îñíîâå ãèäðîëèçàòà ðûáíîé ìóêè äëÿ
êóëüòèâèðîâàíèÿ ìèêðîîðãàíèçìîâ)
Ñðåäó ãîòîâÿò â ñîîòâåòñòâèè ñ ðåêîìåíäàöèÿìè, óêàçàííûìè íà ýòèêåòêå.
6.10 Ìÿñî-ïåïòîííûé àãàð
Ñðåäó ãîòîâÿò ïî ÃÎÑÒ Ð 51426 è ÃÎÑÒ 10444.1.
Ï ð è ì å ÷ à í è å — 6.5—6.10 ââåäåíû äîïîëíèòåëüíî äëÿ îòðàæåíèÿ ïîòðåáíîñòåé íàöèîíàëüíîé ýêîíî-
ìèêè. Ïðåäóñìîòðåíî èñïîëüçîâàíèå äîïîëíèòåëüíûõ ïèòàòåëüíûõ ñðåä è ðåàêòèâîâ, òðàäèöèîííî ïðèìåíÿåìûõ â
Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè äëÿ âûÿâëåíèÿ áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae.

7
ÃÎÑÒ Ð 54005—2010

6.11 Ðåàêòèâ äëÿ îïðåäåëåíèÿ îêñèäàçû

6.11.1 Ñîñòàâ:
N,N,N ¢,N ¢-òåòðàìåòèë-n-ôåíèëåíäèàìèíäèãèäðîõëîðèä, ã 1,0 ;
âîäà, ñì3 100
6.11.2 Ïðèãîòîâëåíèå
Ðàñòâîðÿþò êîìïîíåíò â âîäå òåìïåðàòóðîé 10 °C—15 °C. Ðåàêòèâ ãîòîâÿò íåïîñðåäñòâåííî
ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì.
Äëÿ îïðåäåëåíèÿ îêñèäàçû äîïóñêàåòñÿ èñïîëüçîâàíèå äèñêîâ è ðàñòâîðîâ îòå÷åñòâåííîãî è
èìïîðòíîãî (çàðåãèñòðèðîâàííûõ â Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè) ïðîìûøëåííîãî ïðîèçâîäñòâà. Äëÿ
êîíòðîëÿ êà÷åñòâà äèñêîâ è ðàñòâîðîâ èñïîëüçóþò ìóçåéíûå îêñèäàçîïîëîæèòåëüíûå è îêñèäàçî-
îòðèöàòåëüíûå êóëüòóðû.
6.12 Ïðè ïðèãîòîâëåíèè ñåëåêòèâíûõ æèäêèõ ñðåä äâîéíîé êîíöåíòðàöèè êîëè÷åñòâî èíãðåäè-
åíòîâ èëè äåãèäðàòèðîâàííîé îñíîâû ñðåäû óâåëè÷èâàåòñÿ â äâà ðàçà, à êîëè÷åñòâî âîäû îñòàåòñÿ
áåç èçìåíåíèÿ.
6.13 Ðàñòâîðû è ðåàêòèâû äëÿ îêðàñêè ïî Ãðàìó ãîòîâÿò ïî ÃÎÑÒ Ð 51426 è ÃÎÑÒ 10444.1.
Ðàñòâîðû è ðåàêòèâû äëÿ îêðàñêè ïî Ãðàìó, à òàêæå ðàñòâîðû, ïðèãîòîâëåííûå ïî 6.1.3, 6.2.3,
6.2.4, 6.4.3, õðàíÿò â çàêðûòûõ ñîñóäàõ èç òåìíîãî ñòåêëà ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå íå áîëåå
3 ìåñ.
6.14 Äîïóñêàåòñÿ èñïîëüçîâàíèå ãîòîâûõ è äåãèäðàòèðîâàííûõ ïèòàòåëüíûõ ñðåä, â ò. ÷.
õðîìîãåííûõ, îòå÷åñòâåííîãî è èìïîðòíîãî ïðîèçâîäñòâà, çàðåãèñòðèðîâàííûõ â Ðîññèéñêîé
Ôåäåðàöèè.
Ï ð è ì å ÷ à í è å — 6.12—6.14 ââåäåíû äîïîëíèòåëüíî äëÿ îòðàæåíèÿ ïîòðåáíîñòåé íàöèîíàëüíîé ýêîíî-
ìèêè Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè.

7 Àïïàðàòóðà, ïîñóäà, âñïîìîãàòåëüíûå ìàòåðèàëû, ðåàêòèâû

Ïðèåìëåìîé àëüòåðíàòèâîé ïîñóäû ìíîãîðàçîâîãî ïðèìåíåíèÿ ÿâëÿåòñÿ îäíîðàçîâàÿ ïîñóäà,
åñëè îíà îòâå÷àåò ñîîòâåòñòâóþùèì òðåáîâàíèÿì.
7.1 Îáîðóäîâàíèå ëàáîðàòîðíîå äëÿ ìèêðîáèîëîãè÷åñêèõ èññëåäîâàíèé — ïî ÃÎÑÒ Ð ÈÑÎ 7218
è ÃÎÑÒ 10444.1.
7.2 Àïïàðàò äëÿ ñóõîé ñòåðèëèçàöèè (ñòåðèëèçàöèîííûé ñóøèëüíûé øêàô) èëè âëàæíîé ñòåðèëè-
çàöèè (àâòîêëàâ), ñ ðåãóëèðóþùèìè óñòðîéñòâàìè äëÿ ïîääåðæàíèÿ çàäàííîé òåìïåðàòóðû, ñ äîïóñ-
òèìîé ïîãðåøíîñòüþ íå áîëåå ± 1 °C.
7.3 Òåðìîñòàò, ïîääåðæèâàþùèé òåìïåðàòóðó (37 ± 1) °C.
7.4 Áàíÿ âîäÿíàÿ, ïîääåðæèâàþùàÿ çàäàííóþ òåìïåðàòóðó îò 44 °C äî 47 °C ñ ïîãðåøíîñòüþ
± 0,5 °C.
7.5 Ïðèáîð äëÿ ìåìáðàííîé ôèëüòðàöèè ðàñòâîðîâ.
7.6 Âåñû ëàáîðàòîðíûå äëÿ âçâåøèâàíèÿ ðåàêòèâîâ ñ ïðåäåëàìè äîïóñêàåìîé àáñîëþòíîé
ïîãðåøíîñòè îäíîêðàòíîãî âçâåøèâàíèÿ ± 0,01 ìã è ± 10 ìã.
7.7 Ïðîáèðêè è êîëáû ðàçíîé âìåñòèìîñòè ïî ÃÎÑÒ 25336. Äîïóñêàåòñÿ èñïîëüçîâàíèå ôëàêî-
íîâ èëè áóòûëîê ñ íåòîêñè÷íûìè ìåòàëëè÷åñêèìè èëè ïëàñòèêîâûìè çàâèí÷èâàþùèìèñÿ êðûøêàìè.
7.8 Ìèêðîñêîï áèîëîãè÷åñêèé, îáåñïå÷èâàþùèé ïðîñìîòð â ïðîõîäÿùåì ñâåòå, ñ óâåëè÷åíèåì
900—1000´.
7.9 Ïåòëÿ áàêòåðèîëîãè÷åñêàÿ, ñ ðàçìåðîì äèàìåòðà ïåòëè îêîëî 3 ìì.
7.10 ðÍ-ìåòð ñ äèàïîçîíîì èçìåðåíèé ðÍ îò 2 äî 18, ïîãðåøíîñòü èçìåðåíèé ± 0,01 åä. ðÍ ïðè
òåìïåðàòóðå 20 °C—25 °C.
7.11 Ñòåêëà ïðåäìåòíûå ïî ÃÎÑÒ 9284.
7.12 Ñòåêëà ïîêðîâíûå ïî ÃÎÑÒ 6672.
7.13 Ïèïåòêè ãðàäóèðîâàííûå èëè àâòîìàòè÷åñêèå, âìåñòèìîñòüþ îò 1 äî 10 ñì3 ïî ÃÎÑÒ 29228.
7.14 ×àøêè Ïåòðè íîðìàëüíîãî ðàçìåðà (äèàìåòð 100 ìì) è/èëè áîëüøîãî ðàçìåðà (äèàìåòð
150 ìì) ïî ÃÎÑÒ 25336.
7.15 Áðèëëèàíòîâûé çåëåíûé.
7.16 Æåë÷ü ãîâÿæüÿ ñóõàÿ.
7.17 Ýêñòðàêò ìÿñíîé.
7.18 Íåéòðàëüíûé êðàñíûé.
7.19 Ãèäðîëèçàò æèâîòíûõ òêàíåé ôåðìåíòàòèâíûé.
7.20 Ãèäðîëèçàò êàçåèíà ôåðìåíòàòèâíûé.
8
 ÃÎÑÒ Ð 54005—2010

Äîïóñêàåòñÿ ïðèìåíåíèå äðóãèõ ñðåäñòâ èçìåðåíèé, âñïîìîãàòåëüíîãî îáîðóäîâàíèÿ ñ àíàëî-

ãè÷íûìè ìåòðîëîãè÷åñêèìè è òåõíè÷åñêèìè õàðàêòåðèñòèêàìè, à òàêæå ìàòåðèàëîâ ïî êà÷åñòâó
íå õóæå óêàçàííûõ â ðàçäåëå 7.

8 Îòáîð è ïîäãîòîâêà ïðîá

8.1 Îòáîð ïðîá — ïî ÃÎÑÒ Ð 54004, 3622 è ÃÎÑÒ 13496.0.
Äëÿ èñïûòàíèÿ äîëæíà áûòü îòîáðàíà è íàïðàâëåíà ïðåäñòàâèòåëüíàÿ ïðîáà, íå ïîâðåæäåí-
íàÿ è íå èçìåíåííàÿ â õîäå òðàíñïîðòèðîâàíèÿ èëè õðàíåíèÿ.
8.2 Ïîäãîòîâêà ïðîá — ïî ÃÎÑÒ Ð 51426 è ÃÎÑÒ 26669.
Ï ð è ì å ÷ à í è å — Ðàçäåë 8 ââåäåí äîïîëíèòåëüíî â ñîîòâåòñòâèè ñ òðåáîâàíèÿìè íàöèîíàëüíîé ñòàí-
äàðòèçàöèè.

9 Ïðîâåäåíèå èñïûòàíèÿ

9.1 Ìåòîä âûÿâëåíèÿ áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae

9.1.1 Ïðèãîòîâëåíèå èñõîäíîãî è äåñÿòèêðàòíûõ ðàçâåäåíèé — ïî ÃÎÑÒ Ð 51426 è
ÃÎÑÒ 26669.
9.1.2 Ïðåäâàðèòåëüíîå îáîãàùåíèå â íåñåëåêòèâíîé ñðåäå
 çàâèñèìîñòè îò ïðåäïîëàãàåìîé îáñåìåíåííîñòè ïðîäóêòà áàêòåðèÿìè ñåìåéñòâà
Enterobacteriaceae èëè íîðìàòèâíûõ çíà÷åíèé õ ñì3 æèäêîé ïðîáû èëè õ ñì3 èñõîäíîé ñóñïåíçèè ïðè
èñïûòàíèè íå æèäêèõ ïðîäóêòîâ è/èëè èõ ðàçâåäåíèé ïåðåíîñÿò â ïðîáèðêó, ñîäåðæàùóþ çàáóôåðåííóþ
ïåïòîííóþ âîäó. Ñîîòíîøåíèå êîëè÷åñòâà âûñåâàåìîãî ïðîäóêòà è çàáóôåðåííîé ïåïòîííîé âîäû
ñîîòâåòñòâåííî 1:10.
Ïîñåâû èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (37 ± 1) °C â òå÷åíèå (18 ± 2) ÷.
9.1.3 Îáîãàùåíèå â ñåëåêòèâíîé æèäêîé ñðåäå
Ïðîáèðêó ñ ñåëåêòèâíîé ñðåäîé èíîêóëèðóþò 1 ñì3 èç ïðîáèðêè, ïîëó÷åííîé ïî 9.1.2, è èíêóáèðóþò
ïðè òåìïåðàòóðå (37 ± 1) °C â òå÷åíèå (24 ± 2) ÷.
Ïðè íåïîñðåäñòâåííîì ïîñåâå ïðîäóêòà â ñåëåêòèâíóþ ñðåäó â çàâèñèìîñòè îò òðåáóåìûõ
ïðåäåëîâ âûÿâëåíèÿ õ ñì3 æèäêîé ïðîáû èëè õ ñì3 èñõîäíîé ñóñïåíçèè ïðè èñïîëüçîâàíèè äðóãèõ ïðî-
äóêòîâ ïåðåíîñÿò â ïðîáèðêó, ñîäåðæàùóþ 10 ñì3 îáîãàòèòåëüíîé ñåëåêòèâíîé ñðåäû äâîéíîé êîí-
öåíòðàöèè äëÿ 1 ñì3 < õ £ 10 ñì3, èëè â ïðîáèðêó, ñîäåðæàùóþ 10 ñì3 îáîãàòèòåëüíîé ñåëåêòèâíîé
ñðåäû íîðìàëüíîé êîíöåíòðàöèè äëÿ õ £1 ñì3.
Ïðè èñïûòàíèè âûñîêîêèñëîòíûõ ïðîäóêòîâ äëÿ ïðåäîòâðàùåíèÿ ðåçêîãî ñíèæåíèÿ ðÍ (íà 0,5 è
áîëåå) ïèòàòåëüíûõ ñðåä ðÍ ïèòàòåëüíûõ ñðåä ïîñëå âíåñåíèè â íèõ ïðîäóêòà èëè åãî ðàçâåäåíèÿ
äîâîäÿò äî äîïóñòèìûõ çíà÷åíèé ñ ïîìîùüþ ñòåðèëüíîãî ðàñòâîðà ãèäðîîêèñè íàòðèÿ, ïðèãîòîâ-
ëåííîãî ïî ÃÎÑÒ 10444.1, èëè ïðè ïðèãîòîâëåíèè ïèòàòåëüíûõ ñðåä ðÍ óñòàíàâëèâàþò âûøå çàäàí-
íîãî ñ ó÷åòîì åãî ïîñëåäóþùåãî ñíèæåíèÿ ïðè âíåñåíèè ïðîäóêòà. Êîëè÷åñòâî äîáàâëÿåìîãî
ñòåðèëüíîãî ðàñòâîðà ãèäðîîêèñè íàòðèÿ èëè âåëè÷èíó, íà êîòîðóþ íåîáõîäèìî óâåëè÷èòü ðÍ ïðè
ïðèãîòîâëåíèè ïèòàòåëüíûõ ñðåä, óñòàíàâëèâàþò îïûòíûì ïóòåì.
Äîïóñêàåòñÿ äîâîäèòü ðÍ äî íåéòðàëüíîãî çíà÷åíèÿ ñ ïîìîùüþ ñòåðèëüíîãî ðàñòâîðà ãèäðî-
îêèñè íàòðèÿ íåïîñðåäñòâåííî â âûñîêîêèñëîòíîì ïðîäóêòå.
Ïîñåâû íåïîñðåäñòâåííî â ñåëåêòèâíóþ ñðåäó èíêóáèðóþò â òå÷åíèå 24—48 ÷, ÷åðåç 24 ÷ ïðîâî-
äÿò ïðåäâàðèòåëüíûé ó÷åò ðîñòà áàêòåðèé â ñðåäå, à ÷åðåç 48 ÷ — îêîí÷àòåëüíûé.
Ï ð è ì å ÷ à í è å — Äîïîëíåíèå ââåäåíî â ñâÿçè ñ òåì, ÷òî ïîäêèñëåíèå ñðåä â Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè ïðî-
âîäÿò äëÿ ñîçäàíèÿ îïòèìàëüíûõ óñëîâèé äëÿ ðîñòà ìèêðîîðãàíèçìîâ.
9.1.4 Âûäåëåíèå òèïè÷íûõ êîëîíèé
Èñïîëüçóÿ ïåòëþ, ïåðåñåâàþò êóëüòóðû ñ ñåëåêòèâíîé ïèòàòåëüíîé ñðåäû ñ ïðèçíàêàìè ðîñòà íà
ïîâåðõíîñòü îäíîé èç ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêèõ ñðåä, ïðèãîòîâëåííûõ ïî 6.2 èëè 6.7.
Ïîñåâû èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (37 ± 1) °C â òå÷åíèå (24 ± 2) ÷.
9.1.5 Âûáîð êîëîíèé äëÿ ïîäòâåðæäåíèÿ
Ïîñëå èíêóáèðîâàíèÿ ïîñåâîâ ïî 9.1.4 îòìå÷àþò ðîñò òèïè÷íûõ êîëîíèé.
Íà ãëþêîçíîì àãàðå ñ æåë÷üþ è ôèîëåòîâûì êðàñíûì áàêòåðèè ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae
îáðàçóþò êîëîíèè ðîçîâûå, êðàñíûå èëè ïóðïóðíûå (ñ îðåîëîì èëè áåç íåãî).
Íà ñðåäå Ýíäî áàêòåðèè ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae îáðàçóþò êîëîíèè òåìíî-êðàñíûå ñ ìåòàë-
ëè÷åñêèì áëåñêîì èëè áåç íåãî, ðîçîâûå, ïðîçðà÷íûå.
9
ÃÎÑÒ Ð 54005—2010

Èç êàæäîé èíêóáèðîâàííîé ÷àøêè (ñì. 9.1.4), íà êîòîðîé îáíàðóæåíû òèïè÷íûå êîëîíèè, âûáèðàþò
ïî òðè õîðîøî èçîëèðîâàííûõ êîëîíèé êàæäîãî òèïà è ïåðåñåâàþò êàæäóþ îòîáðàííóþ êîëîíèþ îòäåëü-
íî íà ïîâåðõíîñòü ïèòàòåëüíîãî àãàðà.
Ïîñåâû èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (37 ± 1) °C â òå÷åíèå (24 ± 2) ÷.
9.1.6 Ïîäòâåðæäåíèå ïðèíàäëåæíîñòè òèïè÷íûõ êîëîíèé ê áàêòåðèÿì ñåìåéñòâà
Enterobacteriaceae
Ïðèíàäëåæíîñòü âûðîñøèõ êóëüòóð ê áàêòåðèÿì ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae ïîäòâåðæäàþò ïî
îòíîøåíèþ ê îêðàñêå ïî Ãðàìó, îòñóòñòâèþ îêñèäàçû è ïî ôåðìåíòàöèè ãëþêîçû.
9.1.6.1 Îêðàñêà ïî Ãðàìó
Ïðèãîòîâëåíèå ìàçêîâ èç êóëüòóð, âûðîñøèõ íà ñêîøåííîé ïîâåðõíîñòè ïèòàòåëüíîãî àãàðà,
è îêðàñêó èõ ïî Ãðàìó ïðîâîäÿò ïî ÃÎÑÒ 30425.
Áàêòåðèè ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae — ãðàìîòðèöàòåëüíûå ïàëî÷êè.
Äîïóñêàåòñÿ îêðàñêó ïî Ãðàìó çàìåíÿòü òåñòîì Ãðåãîðñåíà, äëÿ ýòîãî íà ïðåäìåòíîì ñòåêëå
â êàïëå 3 %-íîãî âîäíîãî ðàñòâîðà êàëèÿ ãèäðîîêèñè ýìóëüãèðóþò êóëüòóðó ìèêðîîðãàíèçìîâ, âçÿ-
òóþ èç êîëîíèè ñ àãàðèçîâàííîé ñðåäû. Åñëè ÷åðåç íåñêîëüêî ñåêóíä âçâåñü îñëèçíÿåòñÿ è çà ïåòëåé
òÿíóòñÿ ñëèçèñòûå íèòè, òî ýòî óêàçûâàåò íà ïðèíàäëåæíîñòü èñïûòóåìîé êóëüòóðû ê ãðàìîòðè-
öàòåëüíîìó âèäó. Ó ãðàìïîëîæèòåëüíûõ áàêòåðèé ñëèçèñòûõ íèòåé íå îáðàçóåòñÿ.
Ï ð è ì å ÷ à í è å — Ïóíêò 9.1.6.1 ââåäåí äîïîëíèòåëüíî â ñâÿçè ñ òåì, ÷òî áàêòåðèè ñåìåéñòâà
Enterobacteriaceae ýòî, ïðåæäå âñåãî, ãðàìîòðèöàòåëüíûå áàêòåðèè, à ïðè èäåíòèôèêàöèè ïåðåõîäÿò îò îáùèõ ïðè-
çíàêîâ ê ÷àñòíûì, ïîýòîìó ïðåæäå âñåãî íåîáõîäèìî îïðåäåëèòü îòíîøåíèå âûÿâëåííûõ áàêòåðèé ê îêðàñêå ïî
Ãðàìó.
9.1.6.2 Îïðåäåëåíèå îòñóòñòâèÿ îêñèäàçû
Èñïîëüçóÿ ïëàòèíîâî-èðèäèåâóþ ïåòëþ (ïðîâîëîêó) èëè íèêåëü-õðîìîâóþ èëè ñòåêëÿííóþ ïàëî÷-
êó, îòáèðàþò êóëüòóðû, âûðîñøèå íà ïîâåðõíîñòè ïèòàòåëüíîãî àãàðà (ñì. 9.1.5) è íàíîñÿò øòðèõàìè íà
ôèëüòðîâàëüíóþ áóìàãó, ñìî÷åííóþ ðåàêòèâîì äëÿ îïðåäåëåíèÿ îêñèäàçû (6.11).
Ðåçóëüòàò èñïûòàíèÿ ñ÷èòàþò îòðèöàòåëüíûì, åñëè ôèëüòðîâàëüíàÿ áóìàãà íà ìåñòå íàíåñåíèÿ
øòðèõîâ íå ïîñèíåëà â òå÷åíèå 10 ñ.
9.1.6.3 Îïðåäåëåíèå ôåðìåíòàöèè ãëþêîçû
Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ôåðìåíòàöèè ãëþêîçû èñïûòóåìóþ êóëüòóðó âûñåâàþò óêîëîì â ãëþêîçíûé
àãàð (6.4) èëè ñðåäó Ãèññà ñ ãëþêîçîé (6.8). Ïîñåâû òåðìîñòàòèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (37 ± 1) °C â òå÷å-
íèå (24 ± 2) ÷.
Áàêòåðèè ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae ôåðìåíòèðóþò ãëþêîçó ñ îáðàçîâàíèåì òîëüêî êèñëî-
òû (öâåò ñðåäû ìåíÿåòñÿ) èëè êèñëîòû è ãàçà.
9.1.7 Ïî ðåçóëüòàòàì äîïîëíèòåëüíîãî ïîäòâåðæäåíèÿ ê áàêòåðèÿì ñåìåéñòâà
Enterobacteriaceae îòíîñÿò ôàêóëüòàòèâíî-àíàýðîáíûå, íå îáðàçóþùèå ñïîð ãðàìîòðèöàòåëüíûå
îêñèäàçîîòðèöàòåëüíûå ïàëî÷êè, ñáðàæèâàþùèå ãëþêîçó ñ îáðàçîâàíèåì êèñëîòû èëè êèñëîòû è ãàçà.
9.2 Ìåòîä ÍÂ×-îïðåäåëåíèå êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae
9.2.1 Ïðèãîòîâëåíèå èñõîäíîãî ðàçâåäåíèÿ è äåñÿòèêðàòíûõ ðàçâåäåíèé — ïî
ÃÎÑÒ Ð 51426 è ÃÎÑÒ 26669.
Ãîòîâÿò äîñòàòî÷íîå ÷èñëî ðàçâåäåíèé ïî ÃÎÑÒ 26669, ãàðàíòèðóÿ, ÷òî âñå ïðîáèðêè, ñîîòâåòñòâó-
þùèå êîíå÷íîìó ðàçâåäåíèþ, ïîêàæóò îòðèöàòåëüíûé ðåçóëüòàò.
9.2.2 Èíîêóëÿöèÿ è èíêóáàöèÿ
9.2.2.1 Èñïîëüçóþò ïî òðè ïðîáèðêè äëÿ êàæäîé ïðîáû ïðîäóêòà äëÿ àíàëèçà è/èëè åãî ðàçâåäåíèÿ.
9.2.3 Ïðåäâàðèòåëüíîå îáîãàùåíèå â íåñåëåêòèâíîé ñðåäå
Ïîñåâû äëÿ ïðåäâàðèòåëüíîãî îáîãàùåíèÿ ïðîâîäÿò ñ ó÷åòîì òðåáîâàíèé 4.2.1.
Íàïðèìåð, â êàæäóþ èç òðåõ ïðîáèðîê ñ 9 ñì3 çàáóôåðåííîé ïåïòîííîé âîäû âíîñÿò ïî 1 ñì3 ïðî-
äóêòà, åñëè àíàëèçèðóåìûé ïðîäóêò æèäêèé, èëè âíîñÿò ïî 10 ñì3 èñõîäíîãî ðàçâåäåíèÿ íå æèäêîãî ïðî-
äóêòà â êîëáó ñ 90 ñì3 çàáóôåðåííîé ïåïòîííîé âîäû.
 êàæäóþ èç òðåõ ïðîáèðîê ñ 9 ñì3 çàáóôåðåííîé ïåïòîííîé âîäû âíîñÿò ïî 1 ñì3 ïåðâîãî äåñÿòè-
êðàòíîãî ðàçâåäåíèÿ ïðîäóêòà, åñëè èñõîäíûé ïðîäóêò æèäêèé, èëè âíîñÿò ïî 1 ñì3 èñõîäíîãî ðàçâåäå-
íèÿ ïðîäóêòà, â ñëó÷àå íå æèäêîãî ïðîäóêòà.
 êàæäóþ èç òðåõ ïðîáèðîê ñ 9 ñì3 çàáóôåðåííîé ïåïòîííîé âîäû âíîñÿò ïî 1 ñì3 âòîðîãî äåñÿòè-
êðàòíîãî ðàçâåäåíèÿ ïðîäóêòà, åñëè èñõîäíûé ïðîäóêò æèäêèé, èëè âíîñÿò ïî 1 ñì3 ïåðâîãî äåñÿòèêðàò-
íîãî èñõîäíîãî ðàçâåäåíèÿ ïðîäóêòà â ñëó÷àå íå æèäêîãî ïðîäóêòà.
Êàæäîå ïîñëåäóþùåå ðàçâåäåíèå âûñåâàþò, èñïîëüçóÿ íîâóþ ñòåðèëüíóþ ïèïåòêó. Îñòîðîæíî
ïåðåìåøèâàþò èíîêóëóì è ñðåäó.
Ïîñåâû èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (37 ± 1) °C â òå÷åíèå (18 ± 2) ÷.
10
 ÃÎÑÒ Ð 54005—2010

9.2.4 Îáîãàùåíèå â ñåëåêòèâíîé æèäêîé ñðåäå

Ïðîáèðêè ñ ñåëåêòèâíîé ñðåäîé èíîêóëèðóþò 1 ñì3 èç êàæäîãî ïîñåâà, ïîëó÷åííîãî ïî 9.2.3, è
èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (37 ± 1) °C â òå÷åíèå (24 ± 2) ÷.
Ïîñåâ íåïîñðåäñòâåííî â ñåëåêòèâíóþ ïèòàòåëüíóþ ñðåäó ïðîâîäÿò â ñîîòâåòñòâèè ñ 9.1.3.
9.2.5 Âûäåëåíèå òèïè÷íûõ êîëîíèé, ïîäòâåðæäåíèå ïðèíàäëåæíîñòè âûäåëåííûõ êîëî-
íèé ê áàêòåðèÿì ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae
Âûäåëåíèå òèïè÷íûõ êîëîíèé, ïîäòâåðæäåíèå ïðèíàäëåæíîñòè âûäåëåííûõ êîëîíèé ê áàêòåðèÿì
ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae ïðîâîäÿò ïî 9.1.4—9.1.6.
9.2.6 Íàèáîëåå âåðîÿòíîå ÷èñëî áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae â 1 ñì3 èëè 1 ã ïðîáû ïðî-
äóêòà (ÍÂ×) ðàññ÷èòûâàþò èñõîäÿ èç ÷èñëà ïîñåâîâ, â êîòîðûõ ïîäòâåðæäåíî ïðèñóòñòâèå ýòèõ áàêòå-
ðèé. Äëÿ îïðåäåëåíèÿ íàèáîëåå âåðîÿòíîãî ÷èñëà ïîëüçóþòñÿ òàáëèöåé ÄÁ.1 ïðèëîæåíèÿ ÄÁ. Äëÿ
ïðèìåðà, ïðèâåäåííîãî â 9.2.3, ïîëó÷åííûå òàáëè÷íûå çíà÷åíèÿ äåëÿò íà äåñÿòü, òàê êàê âûñåâàëè
1 ã (10°), 0,1 ã (10–1) è 0,01 ã (10–2), à ìàññà (îáúåìû) ïðîá äëÿ àíàëèçà, âûáðàííûå äëÿ ïîñåâà, îòëè÷à-
þòñÿ îò òàáëè÷íûõ çíà÷åíèé â äåñÿòü ðàç.
9.3 Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae — (ïîäñ÷åò
êîëîíèé)
9.3.1 Ïðèãîòîâëåíèå èñõîäíîãî è äåñÿòèêðàòíûõ ðàçâåäåíèé — ïî ÃÎÑÒ Ð 51426 è
ÃÎÑÒ 26669.
9.3.2 Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae ïîñåâîì â
àãàðèçîâàííóþ ñðåäó
9.3.2.1 Äëÿ ïîñåâà æèäêîãî ïðîäóêòà èëè èñõîäíîãî ðàçâåäåíèÿ íå æèäêîãî ïðîäóêòà èëè èõ ðàçâå-
äåíèé èñïîëüçóþò ïî äâå ÷àøêè Ïåòðè äëÿ ïðîäóêòà è êàæäîãî åãî ðàçâåäåíèÿ. Ïåðåíîñÿò ñòåðèëüíîé
ïèïåòêîé 1 ñì3 ïðîäóêòà èëè ðàçâåäåíèÿ â öåíòð êàæäîé ÷àøêè. Äëÿ ïîñåâà â ÷àøêó Ïåòðè ïðîäóêòà è êàæ-
äîãî åãî ðàçâåäåíèÿ èñïîëüçóþò îòäåëüíóþ ñòåðèëüíóþ ïèïåòêó.
9.3.2.2  êàæäóþ ÷àøêó Ïåòðè (9.3.2.1) íàëèâàþò îêîëî 15 ñì3 îäíîé èç ñðåä (6.2, 6.7), îõëàæäåííîé
äî òåìïåðàòóðû 44 °C—47 °C. Âðåìÿ, ïðîøåäøåå ìåæäó ïîñåâîì ïðîäóêòà è/èëè åãî ðàçâåäåíèÿ â ÷àø-
êó Ïåòðè è çàëèâêîé ñðåäû, íå äîëæíî ïðåâûøàòü 15 ìèí.
Àêêóðàòíî ïåðåìåøèâàþò èíîêóëÿò ñî ñðåäîé è îñòàâëÿþò ñìåñü äëÿ çàñòûâàíèÿ, äëÿ ýòîãî ÷àøêè
Ïåòðè ïîìåùàþò íà õîëîäíóþ ãîðèçîíòàëüíóþ ïîâåðõíîñòü.
 êà÷åñòâå àðáèòðàæíîé ñðåäû èñïîëüçóþò VRBG-àãàð.
Îäíîâðåìåííî äëÿ êîíòðîëÿ ñòåðèëüíîñòè àãàðèçîâàííîé ñðåäû â ñòåðèëüíóþ ÷àøêó Ïåòðè íàëè-
âàþò ïðèáëèçèòåëüíî 15 ñì3 ñðåäû è èíêóáèðóþò âìåñòå ñ ïîñåâàìè.
9.3.2.3  ñëó÷àå îæèäàåìîãî ïîëçó÷åãî ðîñòà äîïóñêàåòñÿ íàñëàèâàíèå âòîðîãî ñëîÿ ñðåäû. Äëÿ
ýòîãî ïîñëå çàñòûâàíèÿ ñðåäû â ÷àøêàõ Ïåòðè íà åå ïîâåðõíîñòü íàëèâàþò îêîëî 4 ñì3 èñïîëüçîâàííîé
àãàðèçîâàííîé ñðåäû (6.2, 6.7) òåìïåðàòóðîé 44 °C—47 °C. Äîáàâëåííàÿ ñðåäà äîëæíà çàòâåðäåòü.
9.3.3 Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae ïîñåâîì íà
àãàðèçîâàííóþ ñðåäó
9.3.3.1 Ïðè îïðåäåëåíèè êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae ïîñåâîì íà àãàðè-
çîâàííûå ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêèå ñðåäû (6.2, 6.7) ïî 0,1 èëè 0,2 ñì3 ïðîäóêòà èëè åãî ðàçâåäåíèÿ
íàíîñÿò íà ïîâåðõíîñòü îäíîé èç ýòèõ ñðåä, ðàçëèòûõ â ÷àøêè Ïåòðè ïî äâå äëÿ êàæäîé ïðîáû ïðî-
äóêòà äëÿ àíàëèçà èëè åå ðàçâåäåíèÿ. Ïîäãîòîâêó ÷àøåê Ïåòðè ñî ñðåäîé ê ïîñåâó è ïîñåâ ïðîâîäÿò
ïî ÃÎÑÒ 26670.
Ïðè ïðèìåíåíèè ìåòîäà ìåìáðàííûõ ôèëüòðîâ ôèëüòðû ïîñëå ôèëüòðàöèè ïåðåíîñÿò íà
ïîâåðõíîñòü àãàðèçîâàííîé ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêîé ñðåäû, èçáåãàÿ îáðàçîâàíèÿ ïóçûðüêîâ
âîçäóõà ìåæäó ñðåäîé è ôèëüòðîì. Ïîâåðõíîñòü ôèëüòðà ñ îñåâøèìè íà íåé áàêòåðèÿìè äîëæíà
áûòü îáðàùåíà ââåðõ.
Ï ð è ì å ÷ à í è å — Ïóíêò 9.3.3 ââåäåí äîïîëíèòåëüíî â ñâÿçè ñ âêëþ÷åíèåì â íàñòîÿùèé ñòàíäàðò ìåòîäà
ïîñåâà íà ïîâåðõíîñòü ïèòàòåëüíûõ ñðåä ( ðàçäåë 1).
9.3.3.2 Ïåðåâîðà÷èâàþò êðûøêîé âíèç ÷àøêè Ïåòðè ñ ïîñåâàìè ïî 9.3.2.3 è 9.3.3.1 è èíêóáèðóþò â
òåðìîñòàòå ïðè òåìïåðàòóðå (37 ± 1) °C â òå÷åíèå (24 ± 2) ÷.
9.3.4 Ïîäñ÷åò êîëè÷åñòâà êîëîíèé
Ïîñëå èíêóáàöèè ïî 9.3.3.2 îòáèðàþò ÷àøêè, íà êîòîðûõ âûðîñëî îò 15 äî 150 êîëîíèé. Ïîñåâû ïðî-
ñìàòðèâàþò, îòìå÷àþò ðîñò òèïè÷íûõ êîëîíèé è ïîäñ÷èòûâàþò èõ êîëè÷åñòâî.
Õàðàêòåðèñòèêà òèïè÷íûõ êîëîíèé — ïî 9.1.5.
11
ÃÎÑÒ Ð 54005—2010

9.3.5 Ïîäòâåðæäåíèå ïðèíàäëåæíîñòè áàêòåðèé èç òèïè÷íûõ êîëîíèé ê áàêòåðèÿì

ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae
Îòáèðàþò íå ìåíåå ÷åì ïî òðè òèïè÷íûå êîëîíèè. Êàæäóþ îòîáðàííóþ êîëîíèþ ïåðåñåâàþò íà
ïîâåðõíîñòü ïèòàòåëüíîãî àãàðà. Ïîñåâû òåðìîñòàòèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (37 ± 1) °C â òå÷åíèå
(24 ± 2) ÷.
Ïîäòâåðæäåíèå ïðèíàäëåæíîñòè âûäåëåííûõ òèïè÷íûõ êîëîíèé ê áàêòåðèÿì ñåìåéñòâà
Enterobacteriaceae ïðîâîäÿò ïî 9.1.6.
9.3.6 Äîïóñêàåòñÿ òàêæå âûÿâëåíèå áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae ïðîâîäèòü ïîñå-
âîì â èëè íà àãàðèçîâàííóþ ñðåäó ïðè óñëîâèè, ÷òî íàâåñêó ïðîäóêòà, â êîòîðîé ïðåäóñìàòðèâàåòñÿ
âûÿâëåíèå, âîçìîæíî ïîñåÿòü ïî ýòîìó ìåòîäó.
Ïðè âûÿâëåíèè áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae ïîñåâîì â èëè íà àãàðèçîâàííóþ ñðåäó
ïîäñ÷åòà êîëè÷åñòâà âûðîñøèõ êîëîíèé íå ïðîâîäÿò.
Ï ð è ì å ÷ à í è å — Ïóíêò 9.3.6 ââåäåí äîïîëíèòåëüíî â ñâÿçè ñ òåì, ÷òî âûÿâëåíèå áàêòåðèé ñåìåéñòâà
Enterobacteriaceae â îïðåäåëåííîé ïðîáå äëÿ àíàëèçà âîçìîæíî ïðîâîäèòü â Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè ïóòåì ïîñåâà
ýòîé ïðîáû â èëè íà àãàðèçîâàííûå ñðåäû.
9.3.7 Ïîäñ÷åò è âûðàæåíèå ðåçóëüòàòîâ
Åñëè ïðè ïîäòâåðæäåíèè òèïè÷íûõ êîëîíèé â äâóõ èç òðåõ èëè òðåõ èç òðåõ îòîáðàííûõ êîëî-
íèé ïîäòâåðæäåí ðîñò áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae, òî ñ÷èòàþò, ÷òî âñå êîëîíèè,
âûðîñøèå íà ÷àøêå Ïåòðè (ñì. 9.3.4), ïðèíàäëåæàò ê áàêòåðèÿì ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae. Åñëè â
îäíîé èç òðåõ êîëîíèé ïîäòâåðæäåí ðîñò áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae, òî êîëè÷åñòâî
áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae îïðåäåëÿþò, èñõîäÿ èç ïðîöåíòíîãî îòíîøåíèÿ ïîäòâåð-
æäåííûõ êîëîíèé ê îáùåìó êîëè÷åñòâó êîëîíèé, âçÿòûõ äëÿ ïîäòâåðæäåíèÿ.
Ïåðåñ÷åò êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae, îïðåäåëåííîãî ïîñåâîì â èëè íà
àãàðèçîâàííûå ñðåäû, íà 1 ã (ñì3) ïðîäóêòà ïðîâîäÿò ïî ÃÎÑÒ 26670.
Ðåçóëüòàòû îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae è âûÿâëåíèÿ èõ â
îïðåäåëåííîé ïðîáå ïðîäóêòà äëÿ àíàëèçà âûðàæàþò ïî ÃÎÑÒ 26670.
Ï ð è ì å ÷ à í è å — Ïóíêò 9.3.7 ââåäåí äîïîëíèòåëüíî â ñâÿçè ñ òåì, ÷òî îáðàáîòêà è âûðàæåíèå ðåçóëüòà-
òîâ ìèêðîáèîëîãè÷åñêèõ èñïûòàíèé ïðèâåäåíû â ÃÎÑÒ 26670.

10 Ïðîòîêîë èñïûòàíèÿ
Ðåçóëüòàòû îöåíèâàþò ïî êàæäîé ïðîáå äëÿ àíàëèçà îòäåëüíî.
Ïðîòîêîë èñïûòàíèÿ äîëæåí âêëþ÷àòü:
- âñþ èíôîðìàöèþ, íåîáõîäèìóþ äëÿ ïîëíîé èäåíòèôèêàöèè ïðîäóêòà;
- èñïîëüçóåìûé ìåòîä â ñîîòâåòñòâèè ñ íàñòîÿùèì ñòàíäàðòîì;
- âñå äåòàëè èñïûòàíèÿ, íå óñòàíîâëåííûå íàñòîÿùèì ñòàíäàðòîì;
- ïîëó÷åííûé(å) ðåçóëüòàò(û).

12
 ÃÎÑÒ Ð 54005—2010

Ïðèëîæåíèå ÄÀ
(ñïðàâî÷íîå)

Ñõåìû ìåòîäîâ âûÿâëåíèÿ è îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ñåìåéñòâà

Enterobacteriaceae ïî ìåòîäó ÍÂ×

ÄÀ.1 Ñõåìà îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae ïî ìåòîäó ÍÂ× ñ ïðåäâàðè-
òåëüíûì îáîãàùåíèåì ïðèâåäåíà íà ðèñóíêå ÄÀ.1

Ðèñóíîê ÄÀ.1

* Ïîäñ÷åò ÍÂ× ïðîâîäÿò â ñîîòâåòñòâèè ñ òàáëèöåé ÄÁ.

13
ÃÎÑÒ Ð 54005—2010

ÄÀ.2 Ñõåìà âûÿâëåíèÿ áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae ñ ïðåäâàðèòåëüíûì îáîãàùåíèåì è áåç

ïðåäâàðèòåëüíîãî îáîãàùåíèÿ ïðèâåäåíà íà ðèñóíêå ÄÀ.2

Ðèñóíîê ÄÀ.2

14
 ÃÎÑÒ Ð 54005—2010

Ïðèëîæåíèå ÄÁ
(ñïðàâî÷íîå)

Ðàñ÷åò íàèáîëåå âåðîÿòíîãî ÷èñëà ìèêðîîðãàíèçìîâ

Ðàñ÷åò íàèáîëåå âåðîÿòíîãî ÷èñëà ìèêðîîðãàíèçìîâ ïðèâåäåí â òàáëèöå ÄÁ.1

Ò à á ë è ö à ÄÁ.1

Êîëè÷åñòâî
ïîëîæèòåëüíûõ Ôàêòè÷åñêîå êîëè÷åñòâî
Êàòåãîðèÿ îöåíêè ÍÂ× äëÿ ðàçíîãî êîëè÷åñòâà
ïðîáèðîê â êàæäîì èç ìèêðîîðãàíèçìîâ
îäíîâðåìåííî èñïûòàííûõ ïðîá äëÿ àíàëèçà
òðåõ ïîñëåäîâàòåëüíûõ ÍÂ× â 1 ã (ñì3) ñ âåðîÿòíîñòüþ
ðàçâåäåíèé

10–1 10–2 10–3 1 2 3 5 10 95 % 99 %

0 0 0 <3 0,0—9,4 0,0—14,0

0 1 3 3 3 2 2 2 1 0,1—9,5 0,0—14,0
0 0 3 2 2 1 1 1 1 0,1—10,0 0,0—16,0
0 1 1 6 0 3 3 3 3 1,2—17,0 0,5—25,0
0 2 0 6 3 2 2 2 1 1,2—17,0 0,5—25,0
0 3 0 9 0 0 0 0 3 3,5—35,0 1,8—46,0
1 0 0 4 1 1 1 1 1 0,2—17,0 0,1—25,0
1 0 1 7 2 1 1 1 1 1,2—17,0 0,5—25,0
1 0 2 11 0 0 0 3 3 4,0—35,0 2,0—46,0
1 1 0 7 1 1 1 1 1 1,3—20,0 0,6—27,0
1 1 1 11 3 3 3 2 2 4,0—35,0 2,0—46,0
1 2 0 11 2 2 1 1 1 4,0—35,0 2,0—46,0
1 2 1 15 3 3 3 3 2 5,0—38,0 2,0—52,0
1 3 1 16 3 3 3 3 2 5,0—38,0 2,0—52,0
2 0 0 9 1 1 1 1 1 1,5—35,0 0,7—46,0
2 0 1 14 2 1 1 1 1 4,0—35,0 2,0—46,0
2 0 2 20 0 3 3 3 3 5,0—38,0 2,0—52,0
2 1 0 15 1 1 1 1 1 4,0—38,0 2,0—52,0
2 1 1 20 2 2 1 1 1 5,0—38,0 2,0—52,0
2 1 2 27 0 3 3 3 3 9,0—94,0 5,0—142,0
2 2 0 21 1 1 1 1 1 5,0—40,0 2,0—55,0
2 2 1 28 3 2 2 2 1 9,0—94,0 5,0—142,0
2 2 2 35 0 0 0 0 3 9,0—94,0 5,0—142,0
2 3 0 29 3 2 2 2 1 9,0—94,0 5,0—142,0
2 3 1 36 0 3 3 3 3 9,0—94,0 5,0—142,0
3 0 0 23 1 1 1 1 1 5,0—94,0 3,0—142,0
3 0 1 38 1 1 1 1 1 9,0—104,0 5,0—157,0
3 0 2 64 3 3 2 2 2 16,0—181,0 10,0—250,0
3 1 0 43 1 1 1 1 1 9,0—181,0 5,0—250,0
3 1 1 75 1 1 1 1 1 17,0—199,0 11,0—270,0
3 1 2 120 3 2 2 2 1 30,0—360,0 20,0—440,0

15
ÃÎÑÒ Ð 54005—2010

Îêîí÷àíèå òàáëèöû ÄÁ.1

Êîëè÷åñòâî
ïîëîæèòåëüíûõ Ôàêòè÷åñêîå êîëè÷åñòâî
Êàòåãîðèÿ îöåíêè ÍÂ× äëÿ ðàçíîãî êîëè÷åñòâà
ïðîáèðîê â êàæäîì èç ìèêðîîðãàíèçìîâ
îäíîâðåìåííî èñïûòàííûõ ïðîá äëÿ àíàëèçà
òðåõ ïîñëåäîâàòåëüíûõ ÍÂ× â 1 ã (ñì3) ñ âåðîÿòíîñòüþ
ðàçâåäåíèé

10–1 10–2 10–3 1 2 3 5 10 95 % 99 %

3 1 3 160 0 0 0 3 3 30,0—380,0 20,0—520,0

3 2 0 93 1 1 1 1 1 18,0—360,0 12,0—430,0
3 2 1 150 1 1 1 1 1 30,0—380,0 20,0—520,0
3 2 2 210 2 1 1 1 1 30,0—400,0 20,0—560,0
3 2 3 290 3 3 3 2 2 90,0—990,0 50,0—1520,0
3 3 0 240 1 1 1 1 1 40,0—990,0 30,0—1520,0
3 3 1 460 1 1 1 1 1 90,0—1960,0 50,0—2830,0
3 3 2 1100 1 1 1 1 1 200,0—4000,0 100,0—5700,0
3 3 3 >1100 — — — — — — —

Îïèñàíèå ìåòîäà ÍÂ× è ðàçúÿñíåíèå ïî åãî ïðèìåíåíèþ

1. Èç ïðîáû ïðîäóêòà äëÿ àíàëèçà ãîòîâÿò èñõîäíîå è ðÿä äåñÿòèêðàòíûõ ðàçâåäåíèé äî òàêîé ñòåïåíè, ÷òî-
áû ìîæíî áûëî îïðåäåëèòü ïðåäïîëàãàåìîå ÍÂ× áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae.
Âûñåâàåìûå îáúåìû ïðîäóêòà è åãî ðàçâåäåíèÿ âûáèðàþò ñëåäóþùèì îáðàçîì:
à) ïî 1 ñì3 èç ðàçâåäåíèÿ 10–1 è ïîñëåäóþùèõ áîëåå âûñîêèõ ðàçâåäåíèé, åñëè íåîáõîäèìî îïðåäåëèòü
êîëè÷åñòâî áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae, ïðåâûøàþùåå 3 êëåòêè â 1 ã (ñì3) ïðîäóêòà;
á) ïî 10 ñì3 èç ðàçâåäåíèÿ 10–1 èëè 1 ñì3 íåðàçâåäåííîãî ïðîäóêòà è ïî 1 ñì3 èç ðàçâåäåíèÿ 10–1 è ïîñëåäóþ-
ùåãî áîëåå âûñîêîãî ðàçâåäåíèÿ, åñëè íåîáõîäèìî îïðåäåëèòü êîëè÷åñòâî áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacte-
riaceae, ïðåâûøàþùåå 3 êëåòêè â 10 ã (ñì3) ïðîäóêòà;
â) ïî 10 è 1 ñì3 íåðàçâåäåííîãî ïðîäóêòà è ðÿäà åãî ðàçâåäåíèé, åñëè íåîáõîäèìî îïðåäåëèòü êîëè÷åñòâî
áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae, ïðåâûøàþùåå 3 êëåòêè â 100 ã (ñì3) ïðîäóêòà.
2. Ðàçâåäåíèÿ è íåðàçâåäåííûé ïðîäóêò âûñåâàþò ïàðàëëåëüíî â òðè êîëáû (ïðîáèðêè) ñ ïèòàòåëüíîé ñðå-
äîé. Èíîêóëóì îáúåìîì 1 ñì3 âûñåâàþò â 10 ñì3 ñðåäû íîðìàëüíîé êîíöåíòðàöèè, èíîêóëóìû îáúåìîì 10 ñì3
âûñåâàþò â 10 ñì3 ñðåäû äâîéíîé êîíöåíòðàöèè.
3. Ïîñåâû èíêóáèðóþò â óñëîâèÿõ, óêàçàííûõ â íàñòîÿùåì ñòàíäàðòå.
4. ÍÂ× áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae îïðåäåëÿþò, èñõîäÿ èç êîëè÷åñòâà ïîëîæèòåëüíûõ ïðîáèðîê
ñ ïîñåâàìè ïî òàáëèöå.
5. Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ÍÂ× âûáèðàþò òðè ñàìûõ âûñîêèõ ïîñëåäîâàòåëüíûõ ðàçâåäåíèé, â ïåðâîì èç êîòîðûõ
âñå òðè ïîâòîðíîñòè ïîëîæèòåëüíûå, à â ïîñëåäíåì è â ïîñëåäóþùåì óæå íå îöåíèâàåìîì ðàçâåäåíèè âñå òðè
ïîâòîðíîñòè îòðèöàòåëüíûå (íàïðèìåð: 3, 2, 0 èëè 3, 2, 1,0).
6. Åñëè ïîñëå ðàçâåäåíèÿ, â êîòîðîì âñå òðè ïðîáèðêè áûëè îòðèöàòåëüíûìè, îäíà èç ïðîáèðîê áîëüøåãî
(òî åñòü ñëåäóþùåãî çà íèì) ðàçâåäåíèÿ îêàæåòñÿ ïîëîæèòåëüíîé (íàïðèìåð: 3, 2, 0, 1), òî äëÿ îïðåäåëåíèÿ ÍÂ×
ó÷èòûâàþò òðè ðàçâåäåíèÿ, íà÷èíàÿ ñ òîãî, â êîòîðîì êîëè÷åñòâî ïîëîæèòåëüíûõ ïðîáèðîê áûëî ìåíüøå òðåõ
(òî åñòü 2, 0,1).
7. Åñëè ïîñëå íàèáîëüøåãî ðàçâåäåíèÿ ñ òðåìÿ ïîëîæèòåëüíûìè ïðîáèðêàìè áûëî ïîñåÿíî ëèøü îäíî ðàç-
âåäåíèå, â êîòîðîì îêàçàëèñü ïîëîæèòåëüíûìè îäíà èëè äâå ïðîáèðêè, òî ÍÂ× áàêòåðèé ñåìåéñòâà
Enterobacteriaceae çàïèñûâàþò êàê «áîëåå ÷åì», òàê êàê â ïîñëåäóþùèõ ðàçâåäåíèÿõ ìîãëè áû áûòü ïîëîæèòåëü-
íûå ïðîáèðêè. Íàïðèìåð, ïðè ïîñåâå ÷èñëî ïîëîæèòåëüíûõ ïðîáèðîê ñîîòâåòñòâîâàëî 3, 3, 1 èëè 3, 3, 2, òî ñîãëàñíî
òàáëèöå ÍÂ× áóäåò áîëåå 460 èëè áîëåå 1100.
8. Åñëè íè â îäíîì èç ðàçâåäåíèé íå áûëî òðåõ ïîëîæèòåëüíûõ ïðîáèðîê, òî äëÿ îïðåäåëåíèÿ ÍÂ× ó÷èòûâà-
þò òðè ïîñëåäîâàòåëüíûõ ðàçâåäåíèÿ (íàïðèìåð, 2, 2, 1, 0 èëè 2, 1, 0, 0).
9. Åñëè âñå ïðîáèðêè ïîñåÿííûõ ðàçâåäåíèé áóäóò îòðèöàòåëüíûìè (òî åñòü 0, 0, 0), òî ÍÂ× áàêòåðèé
ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae íèæå ÷èñëà, âûÿâëÿåìîãî ïîñåÿííûìè ðàçâåäåíèÿìè (íàïðèìåð, «íèæå ÷åì 3 â 10 ã»)
è íàîáîðîò, åñëè âñå ïðîáèðêè ïîñåÿííûõ ðàçâåäåíèé áóäóò ïîëîæèòåëüíûìè (òî åñòü 3, 3,3), òî ÍÂ× áóäåò âûøå åãî
ìàêñèìàëüíîãî çíà÷åíèÿ, îïðåäåëÿåìîãî ïîñåÿííûìè ðàçâåäåíèÿìè (íàïðèìåð, «âûøå ÷åì 1100 â 1 ã»).
Ïðè íåîáõîäèìîñòè îïðåäåëåíèÿ êîíå÷íîãî ÷èñëà áàêòåðèé èññëåäîâàíèå ïîâòîðÿþò.
10. Åñëè òðè äåñÿòèêðàòíûõ ðàçâåäåíèÿ áûëè áîëåå íèçêèìè èëè áîëåå âûñîêèìè ïî ñðàâíåíèþ ñ ïðèâåäåí-
íûìè â òàáëèöå, òî ÍÂ× áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae â ïðîäóêòå áóäåò íà ñòîëüêî ðàçðÿäîâ íèæå èëè
âûøå, íà ñêîëüêî ðàçðÿäîâ ïîñåÿííûå ðàçâåäåíèÿ îòëè÷àþòñÿ îò òàáëè÷íûõ.

16
 ÃÎÑÒ Ð 54005—2010

Íàïðèìåð, äëÿ êîìáèíàöèè ÷èñåë 3, 2, 1 ÍÂ× ñîñòàâëÿåò 150 ìèêðîîðãàíèçìîâ â 1 ã ïðîäóêòà, â ñëó÷àå, åñëè
ïîñåÿíû ïî 1 ñì3 ðàçâåäåíèÿ 10–1, 10–2, 10–3. Åñëè äëÿ ïîñåâà èñïîëüçîâàíû ðàçâåäåíèÿ 10–2, 10–3, 10–4, òî íàéäåí-
íîå ÍÂ× ðàâíî 150 × 10 = 1500 ìèêðîîðãàíèçìîâ â 1 ã (ñì3). Åñëè äëÿ ïîñåâà èñïîëüçîâàëèñü 10 è 1 ñì3 íåðàçâåäåí-
íîãî ïðîäóêòà è 1 ñì3 ðàçâåäåíèÿ 10–1, òî ÍÂ× ðàâíî 150:100 = 1,5 â 1 ã (ñì3) èëè 15 ìèêðîîðãàíèçìîâ â 10 ñì3
ïðîäóêòà.
11. Èç çíà÷åíèé ÍÂ× ó÷èòûâàþò òå, êîòîðûå îòâå÷àþò íàèáîëåå âåðîÿòíûì êîìáèíàöèÿì òðåõçíà÷íîãî ÷èñ-
ëà ïåðâîé êàòåãîðèè. Åñëè ÍÂ×, ñîîòâåòñòâóþùåãî êîìáèíàöèè òðåõçíà÷íîãî ÷èñëà ïåðâîé êàòåãîðèè, íå ïîëó÷åíî,
òî åãî îïðåäåëÿþò êîìáèíàöèÿìè òðåõçíà÷íîãî ÷èñëà, ñîîòâåòñòâóþùåãî âòîðîé êàòåãîðèè.
Ïðèâåäåííûå â òàáëèöå íàèáîëåå âåðîÿòíûå ÷èñëà ñîîòâåòñòâóþò ñëó÷àÿì, êîãäà âûñåâàëè ïî 1 ñì3 èç 10–1,
10–2, 10–3 ðàçâåäåíèé, òî åñòü 0,1, 0,01 è 0,001 ã (ñì3) ïðîäóêòà.
Êàòåãîðèÿ 1 — íàèáîëåå ÷àñòî âñòðå÷àåìûå êîìáèíàöèè ïîëîæèòåëüíûõ ïðîáèðîê, âåðîÿòíîñòü ïîëó÷åíèÿ
êîòîðûõ ðàâíà 95 %.
Êàòåãîðèÿ 2 — êîìáèíàöèè ïîëîæèòåëüíûõ ïðîáèðîê, âåðîÿòíîñòü ïîëó÷åíèÿ êîòîðûõ ðàâíà 4 %.
Êàòåãîðèÿ 3 èëè 0 — êîìáèíàöèè ïîëîæèòåëüíûõ ïðîáèðîê, âåðîÿòíîñòü ïîëó÷åíèÿ êîòîðûõ äëÿ íîðìàëüíûõ
ïðîäóêòîâ ðàâíà íóëþ äëÿ êàòåãîðèè 0 ëèáî ìàëî âåðîÿòíà äëÿ êàòåãîðèè 3. Êîìáèíàöèè ýòèõ êàòåãîðèé ìîãóò áûòü
ñëåäñòâèåì îøèáêè îïûòà èëè ïðèñóòñòâèÿ â ïðîäóêòå áàêòåðèîñòàòè÷åñêèõ âåùåñòâ.
Ñ óâåëè÷åíèåì ÷èñëà èñïûòóåìûõ ïðîá îò îäíîé è òîé æå ïàðòèè ïðîäóêòà òî÷íîñòü ÍÂ× ïîâûøàåòñÿ íà îäíó,
à èíîãäà è íà äâå êàòåãîðèè.
Ðàçúÿñíåíèå ê ìåòîäó îïðåäåëåíèÿ ÍÂ× â íåæèäêèõ ïðîäóêòàõ
Ïðè îïðåäåëåíèè ÍÂ× â íåæèäêèõ ïðîäóêòàõ èñõîäíîå ðàçâåäåíèå íå âñåãäà ìîæåò áûòü äåñÿòèêðàòíûì. Ïðè
èñïûòàíèè íåæèäêèõ ïðîäóêòîâ ñëåäóåò èìåòü â âèäó, ðàñòâîðÿþòñÿ ëè ýòè ïðîäóêòû èëè íåò (â ýòîì ñëó÷àå ïîëó÷à-
åòñÿ ñìûâ ñ ïðîäóêòà). Åñëè èñõîäíîå ðàçâåäåíèå íå äåñÿòèêðàòíîå, òî îíî áåðåòñÿ çà îñíîâó è èç íåãî ãîòîâÿò äåñÿ-
òèêðàòíûå ðàçâåäåíèÿ.
ÍÂ× îïðåäåëÿþò ñíà÷àëà â 1 ñì3 èñõîäíîãî ðàçâåäåíèÿ, à çàòåì ýòî çíà÷åíèå ïåðåñ÷èòûâàåòñÿ íà 1 ã ïðî-
äóêòà.
Ïðèìåð 1. Èñïûòàíèå ðàñòâîðèìûõ ïðîäóêòîâ (ñàõàð, ñîëü, ïàñòû è ò. ä.)
Äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ èñõîäíîãî ðàçâåäåíèÿ 20 ã ïðîäóêòà âíåñëè â 50 ñì3 ðàñòâîðà äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ ðàçâåäå-
íèé.
20 ã + 50 ñì3 = 70 ñì3 ðàñòâîðà, êîòîðûé áåðåòñÿ çà îñíîâó äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ äåñÿòèêðàòíûõ ðàçâåäåíèé.
Äëÿ ïîäñ÷åòà ïî ìåòîäó ÍÂ× âûáèðàåì 3 ïîñëåäîâàòåëüíûõ ðàçâåäåíèÿ, íàïðèìåð:
10 ñì3 èñõîäíîãî ðàçâåäåíèÿ;
1 ñì3 èñõîäíîãî ðàçâåäåíèÿ;
1 ñì3 ïåðâîãî äåñÿòèêðàòíîãî èñõîäíîãî ðàçâåäåíèÿ.
Âûáðàííûå ðàçâåäåíèÿ ïîñåÿëè â 3-êðàòíîé ïîâòîðíîñòè.
Ïðåäïîëîæèì, ïîëó÷åíû â êîíöå èñïûòàíèÿ ñëåäóþùèå ðåçóëüòàòû:
10 ñì3 èñõîäíîãî ðàçâåäåíèÿ + + + ò. å. 3;
1 ñì3 èñõîäíîãî ðàçâåäåíèÿ + – – ò. å. 1;
1 ñì3 ïåðâîãî äåñÿòèêðàòíîãî
èñõîäíîãî ðàçâåäåíèÿ – – – ò. å. 0.
Ïî òàáëèöå ÍÂ× äëÿ ÷èñëà 310 íàõîäèì êîëè÷åñòâî ðàâíîå 43, ýòî ÷èñëî íåîáõîäèìî ðàçäåëèòü íà 100, ò. ê.
âûáðàííûå äëÿ ïîñåâà ðàçâåäåíèÿ îòëè÷àþòñÿ îò òàáëè÷íûõ â 100 ðàç. Òàáëè÷íûå 10–1, 10–2, 10–3, à ïîñåÿííûå
101, 100, 10–1.
43:100 = 0,43 êëåòêè — ýòî êîëè÷åñòâî â 1 ñì3 èñõîäíîãî ðàñòâîðà ïðèíÿòîãî çà îñíîâó.
Ïåðåñ÷èòàåì ýòî êîëè÷åñòâî íà 1 ã èñïûòóåìîãî ïðîäóêòà:
0,43 × 70:20 = 0,805 êëåòêè â 1 ã ïðîäóêòà èëè ïðèáëèçèòåëüíî 8 êëåòîê â 10 ã ïðîäóêòà.
Ïðèìåð 2. Èñïûòàíèå íåðàñòâîðèìûõ ïðîäóêòîâ (ìîðêîâü, ñïåöèè è ò. ä.)
Ïðè èñïûòàíèè íåðàñòâîðèìûõ ïðîäóêòîâ ïîëó÷àåòñÿ ñìûâ ìèêðîîðãàíèçìîâ ñ ïðîäóêòà. Ðàñ÷åò ÍÂ× — àíà-
ëîãè÷íûé óêàçàííîìó â ï. 1, çà èñêëþ÷åíèåì òîãî, ÷òî â ðàñ÷åò áåðóò íå 70 ñì3 (20 ã + 50 ñì3), à 50 ñì3.
0,43 × 50:20 = 1,07 êëåòêè â 1 ã èëè 11 êëåòîê â 10 ã.

17
ÃÎÑÒ Ð 54005—2010

Ïðèëîæåíèå ÄÂ
(ñïðàâî÷íîå)

Ñîïîñòàâëåíèå ñòðóêòóðû íàñòîÿùåãî ñòàíäàðòà ñî ñòðóêòóðîé ïðèìåíåííûõ

â íåì ìåæäóíàðîäíûõ ñòàíäàðòîâ ÈÑÎ 21528-1 è ÈÑÎ 21528-2

Ò à á ë è ö à ÄÂ.1

Ñòðóêòóðà ìåæäóíàðîäíîãî ñòàíäàðòà ÈÑÎ 21528-1 Ñòðóêòóðà íàñòîÿùåãî ñòàíäàðòà

Ðàçäåë Ïóíêòû Ïîäïóíêòû Ðàçäåë Ïóíêòû Ïîäïóíêòû

1 Îáëàñòü ðàñïðîñòðàíå- — — 1 Îáëàñòü ïðèìåíåíèÿ — —

íèÿ
2 Íîðìàòèâíûå ññûëêè — — 2 Íîðìàòèâíûå ññûëêè — —
3 Òåðìèíû è îïðåäåëå- 3.1—3.3 — 3 Òåðìèíû è îïðåäåëå- 3.1—3.4 3.3.1, 3.3.2
íèÿ íèÿ
4 Ïðèíöèï 4.1, 4.2 4.1.1—4.1.3, 4 Ìåòîä âûÿâëåíèÿ è 4.1—4.3 4.1.1—4.1.5,
4.2.1—4.2.5 îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà 4.2.1— 4.2.5
áàêòåðèé ñåìåéñòâà
Enterobacteriaceae ïî ìå-
òîäó ÍÂ×
5 Êóëüòóðàëüíûå ñðåäû, 5.1—5.3 — 5 Ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ 5.1—5.4 5.1.1, 5.1.2,
ðàçáàâèòåëü è ðåàêòèâ êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ñå- 5.2.1, 5.2.2
ìåéñòâà
Enterobacteriaceae (ïîä-
ñ÷åò êîëîíèé)
6 Àïïàðàòóðà è ñòåêëÿí- 6.1—6.11 — 6 Ïèòàòåëüíûå ñðåäû è 6.1—6.14 —
íàÿ ïîñóäà ðåàêòèâû
7 Îòáîð ïðîá — — 7 Àïïàðàòóðà, ïîñóäà, 7.1—7.24 —
ìàòåðèàëû è ðåàêòèâû
8 Ïðèãîòîâëåíèå ïðîáû — — 8 Îòáîð è ïîäãîòîâêà 8.1—8.2
äëÿ èñïûòàíèÿ ïðîá
9 Ìåòîäèêà 9.1—9.6 9.2.1—9.2.3, 9 Ïðîâåäåíèå èñïûòàíèÿ 9.1—9.2 9.1.1—9.1.7,
9.3.1—9.3.3, 9.2.1—9.2.6
9.4.1—9.4.2,
9.6.1—9.6.2
10 Âûðàæåíèå ðåçóëüòà- 10.1—10.3 — — — —
òîâ
11 Ïðåöèçèîííîñòü — — — — —
12 Ïðîòîêîë èñïûòàíèÿ — — 10 Ïðîòîêîë èñïûòàíèÿ — —
Ïðèëîæåíèå À (íîðìàòèâ- — — Ïðèëîæåíèå ÄÀ (ñïðàâî÷- — —
íîå) Ñõåìà ìåòîäèêè îá- íîå) ñõåìû ìåòîäîâ âûÿâ-
íàðóæåíèÿ ëåíèÿ è îïðåäåëåíèÿ
êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ñå-
ìåéñòâà
Enterobacteriaceae ïî ìå-
òîäó ÍÂ×
Ïðèëîæåíèå Â (íîðìàòèâ- — — Ïðèëîæåíèå ÄÁ (ñïðàâî÷- 1—11 —
íîå) Ñõåìà ïðîöåäóðû íîå) Ðàñ÷åò íàèáîëåå âå-
äëÿ ìåòîäà MPN ðîÿòíîãî ÷èñëà ìèêðî-
îðãàíèçìîâ
— — — Ïðèëîæåíèå ÄÂ (ñïðà- — —
âî÷íîå) Ñîïîñòàâëåíèå
ñòðóêòóðû íàñòîÿùåãî
ñòàíäàðòà ñî ñòðóêòóðîé
ïðèìåíåííûõ â íåì ÈÑÎ
21528-1 è ÈÑÎ 21528-2

18
 ÃÎÑÒ Ð 54005—2010

Ò à á ë è ö à ÄÂ.2

Ñòðóêòóðà ìåæäóíàðîäíîãî ñòàíäàðòà ÈÑÎ 21528-2 Ñòðóêòóðà íàñòîÿùåãî ñòàíäàðòà

Ðàçäåë Ïóíêòû Ïîäïóíêòû Ðàçäåë Ïóíêòû Ïîäïóíêòû

1 Îáëàñòü ðàñïðîñòðàíå- — — 1 Îáëàñòü ïðèìåíåíèÿ — —

íèÿ
2 Íîðìàòèâíûå ññûëêè — — 2 Íîðìàòèâíûå ññûëêè — —
3 Òåðìèíû è îïðåäåëå- 3.1,3.2 — 3 Òåðìèíû è îïðåäåëå- 3.1—3.4 3.3.1, 3.3.2
íèÿ íèÿ
4 Ïðèíöèï 4.1—4.4 — 4 Ìåòîä âûÿâëåíèÿ è 4.1—4.3 4.1.1—4.1.5,
îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà 4.2.1—4.2.5
áàêòåðèé ñåìåéñòâà Ente-
robacteriaceae ïî ìåòîäó
ÍÂ×
5 Ðàçáàâèòåëü, ïèòà- 5.1—5.3 — 6 Ïèòàòåëüíûå ñðåäû è 6.1—6.14
òåëüíûå ñðåäû è ðåàêòèâ ðåàêòèâû
6 Àïïàðàòóðà è ñòåêëÿí- 6.1—6.10 — 7 Àïïàðàòóðà, ïîñóäà, 7.1—7.24 —
íàÿ ïîñóäà ìàòåðèàëû è ðåàêòèâû
7 Îòáîð ïðîá — — 8 Îòáîð è ïîäãîòîâêà 8.1, 8.2 —
ïðîá
8 Ïðèãîòîâëåíèå ïðîáû — —
9 Ìåòîäèêà 9.1—9.6 9.3.1—9.3.4, 9 Ïðîâåäåíèå èñïûòàíèÿ 9.3 9.1.1—9.1.7,
9.6.1—9.6.3 9.2.1—9.2.6
10 Âûðàæåíèå ðåçóëüòà- — — 10 Ïðîòîêîë èñïûòàíèÿ — —
òîâ
11 Ïðîòîêîë èñïûòàíèÿ — — — — —
12 Ïðèëîæåíèå À (íîðìà- — — Ïðèëîæåíèå ÄÀ (ñïðàâî÷- — —
òèâíîå) Äîâåðèòåëüíûå íîå) Ñõåìû ìåòîäîâ âû-
ïðåäåëû äëÿ îöåíêè íå- ÿâëåíèÿ è îïðåäåëåíèÿ
áîëüøèõ êîëè÷åñòâ êîëî- êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ñå-
íèé ìåéñòâà Enterobacteria-
ceae ïî ìåòîäó ÍÂ×
— — — Ïðèëîæåíèå ÄÁ (ñïðàâî÷- 1-11 —
íîå) Ðàñ÷åò íàèáîëåå âå-
ðîÿòíîãî ÷èñëà
ìèêðîîðãàíèçìîâ
— — — Ïðèëîæåíèå ÄÂ (ñïðàâî÷- — —
íîå) Ñîïîñòàâëåíèå
ñòðóêòóðû íàñòîÿùåãî
ñòàíäàðòà ñî ñòðóêòóðîé
ïðèìåíåííûõ â íåì ÈÑÎ
21528-1 è ÈÑÎ 21528-2
13 Áèáëèîãðàôèÿ — — — — —

19
ÃÎÑÒ Ð 54005—2010

ÓÄÊ 663/.664:543.9:006.354 ÎÊÑ 07.100.01 Í09 ÎÊÑÒÓ 9109

Êëþ÷åâûå ñëîâà: ïðîäóêòû ïèùåâûå, òåðìèíû, àïïàðàòóðà, ïîñóäà, ìàòåðèàëû è ðåàêòèâû, êà÷åñòâåí-
íûé ìåòîä âûÿâëåíèÿ áàêòåðèé ñåìåéñòâà Enterobacteriaceae, êîëè÷åñòâåííûé ìåòîä íàèáîëåå âåðîÿò-
íîãî ÷èñëà (ÍÂ×), êîëè÷åñòâåííûå ìåòîäû ïîñåâà â èëè íà àãàðèçîâàííûå ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêèå
ñðåäû, îòáîð è ïîäãîòîâêà ïðîá, ïðîâåäåíèå èñïûòàíèÿ, èíêóáèðîâàíèå ïîñåâîâ, ïîäñ÷åò êîëîíèåîáðà-
çóþùèõ åäèíèö (ÊÎÅ), âûðàæåíèå ðåçóëüòàòîâ

Ðåäàêòîð Ì.Å. Íèêóëèíà

Òåõíè÷åñêèé ðåäàêòîð Í.Ñ. Ãðèøàíîâà
Êîððåêòîð È.À. Êîðîëåâà
Êîìïüþòåðíàÿ âåðñòêà È.À. Íàëåéêèíîé

Ñäàíî â íàáîð 07.10.2011. Ïîäïèñàíî â ïå÷àòü 14.11.2011. Ôîðìàò 60 ´ 84 18. Ãàðíèòóðà Àðèàë.
Óñë. ïå÷. ë. 2,79. Ó÷.-èçä. ë. 2,40. Òèðàæ 191 ýêç. Çàê. 1086.

ÔÃÓÏ «ÑÒÀÍÄÀÐÒÈÍÔÎÐÌ», 123995 Ìîñêâà, Ãðàíàòíûé ïåð., 4.

www.gostinfo.ru info@gostinfo.ru
Íàáðàíî âî ÔÃÓÏ «ÑÒÀÍÄÀÐÒÈÍÔÎÐÌ» íà ÏÝÂÌ.
Îòïå÷àòàíî â ôèëèàëå ÔÃÓÏ «ÑÒÀÍÄÀÐÒÈÍÔÎÐÌ» — òèï. «Ìîñêîâñêèé ïå÷àòíèê», 105062 Ìîñêâà, Ëÿëèí ïåð., 6.