15

Лекция для студентов специальностей: лечебное дело, педиатрия, стоматология

Раздел: частная микробиология, иммунология, вирусология

Лекция № 15. Особо опасные инфекции: туляремия, сибирская

язва, бруцеллез, чума и др.

Возбудитель туляремии. Этиология, патогенез. Характеристика.

Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и
лечение
Возбудитель сибирской язвы. Этиология, патогенез. Характеристика.
Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и
лечение. Проблемы биотерроризма.
Возбудитель бруцеллеза. Этиология, патогенез. Таксономия.
Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая
профилактика и лечение.
Возбудитель чумы. Этиология, патогенез. Таксономия. Характеристика.
Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и
лечение.

Лекция обсуждена на
совещании кафедры
« »____________ 2008 г
д.м.н. Таран Т.В.

Ставрополь, 2008 г
15
 15
1
К особо опасным инфекциям (ООИ) относят группу острых заразных
заболеваний человека, которые: а) способны к внезапному появлению,
быстрому распространению и массовому охвату населения; б)
характеризуются тяжелым течением и высокой летальностью, нередко
наступающей в первые часы болезни.
В группу ООИ включают: чуму, холеру, оспу, желтую лихорадку (это
т. н. конвенционные болезни, подпадающие под действие Международных
санитарных правил, прежнее название – карантинные), сыпной и возвратный
тифы, вирусный грипп, полиомиелит, малярию (б-ни, подлежащие
международному надзору), сибирскую язву, сап, мелиоидоз, туляремию,
бруцеллез, риккетсиоз, орнитоз, арбовирусные инфекции, ботулизм,
гистоплазмоз, бластомикозы.
2 Конвенционные, или карантинные инфекции – чума, холера, оспа и
желтая лихорадка. Эти инфекции характеризуются быстрым
распространением и особой опасностью для людей. Поэтому разработаны
международные правила (конвенция); информирование по их обнаружению и
методам профилактики. В случае возникновения заболевания накладывается
карантин.
Микробиологические, исследования при большинстве ООИ играют
особо важную роль, поскольку от правильности и быстроты установления
этиологического диагноза в высокой степени зависят своевременность,
адекватность и, следовательно, эффективность противоэпидемических и
лечебных мероприятий. В связи с этим в диагностике ООИ широко
используют ускоренные и экспресс-методы. В ходе исследования
необходимо также исключить возможность выноса инфекции из лаборатории
любыми путями и предупредить возникновение лабораторного заражения.
Для обеспечения этих требований изданы соответствующие инструкции о
режиме работы лабораторий, которым разрешено проведение исследований с
целью диагностики отдельных ООИ. При этом предусмотрены методы,
правила отбора и доставки проб в лабораторию, планировка, оборудование и
режим работы таких лабораторий. Микробиологическая диагностика
основывается на изучении и биологических свойств возбудителей любых
инфекционных заболеваний, в том числе, и особо опасных, что позволяет
обнаружить не только сам факт наличия возбудителей в организме человека,
но и определить их принадлежность к определённому виду микроорганизма,
т. е. провести их идентификацию.
 15

Некоторые из перечисленных выше особо опасных инфекций мы

разберём в настоящей лекции.
ЗООНОЗЫ
Группа природно-очаговых болезней весьма многочисленна. Это
вирусные инфекции (различные виды энцефалитов, бешенство, орнитоз),
риккетсиозы (различные виды лихорадок), спирохетозы, лептоспирозы,
микозы, бактериозы (чума, туляремия, бруцеллез), протозоозы (различные
виды лейшманиозов, токсоплазмозов, сонная болезнь), гельминтозы
(описторхоз, шистосомоз), арахнозы (чесотка), энтомозы (миазы). По
определению Павловского, понятие «природный очаг» подразумевает
местность или территорию, в пределах которой возбудитель болезни
непрерывно циркулирует. «Природный очаг» болезни существует в условиях
определенного климата, определенной растительности, почвы и
благоприятного микроклимата тех мест, в которых имеются переносчики,
доноры и реципиенты возбудителя. Другими словами, природный очаг
болезни соответствует определенному географическому ландшафту.

ЧУМА
3
Чума известна с глубокой древности. Опустошительные эпидемии
чумы составили неизгладимый след в истории человечества.
Первая достоверная пандемия чумы, вошедшая в литературу под
названием «юстиановой чумы», возникла в 6 в. до н.э. в Восточно-Римской
империи, длилась 50 лет (531 – 580), охватила многие страны и унесла
огромное число жертв.
Следующая пандемия, известная под названием «черной смерти»
наблюдалась в 14 в. погибло около 50 млн. человек, т.е. более четверти
населения Европы. Во время этой пандемии впервые в Венеции был введен
карантин. В нашем отечестве уже в 16 столетии со всей решительностью
проводились ограничительные мероприятия при вывозе из зараженных
местности товаров и передвижением населения. Об этом свидетельствует
переписка царя Алексея Михайловича с английским королем Карлом II и
приказы Петра I. Был сделан ряд предположений о причине чумы. Наш
соотечественник Д. Самойлович один из первых стал искать возбудителя
чумы при помощи микроскопа. Но ему не удалось найти возбудителя чумы.
Это объясняется тем, что бактериоскопическая техника в то время (1784)
находилась на низком уровне.
 15

Последняя третья пандемия чумы возникла в 1894г. (более 100 лет

назад) в Кантоне и Гонконге; особенностью этой пандемии явилось то, что
она охватывала только портовые города (87 портовых городов Европы,
Северной Америки и Австралии), не распространяясь за их пределы. Тогда
впервые была создана международная комиссия, в составе которой активное
участие принимали русские врачи и ученые: Заболотный, Исаев. Природные
очаги чумы существуют и сейчас на всех континентах, кроме Австралии и
Антарктиды. В настоящее время ежегодно регистрируется несколько
сот случаев чумы человека. В России такими очагами являются регионы
Закавказья, Поволжья.
4
Честь открытия возбудителя чумы принадлежит японскому ученому
Китазато, ученику Р. Коха, и французскому ученому Иерсену, ученику
Пастера и Мечникова. Они открыли микроб во время эпидемии чумы в
Гонконге в 1894 г. почти одновременно и независимо друг от друга. И.
Мечников первый после открытия возбудителя чумы дал подробную
характеристику этой инфекции. Мечников в дальнейшем руководил работой
исследовательских отрядов в Астраханских степях. Н.Ф. Гамалея описал
особенности чумы в портах. Мировую известность имеют исследования
Иоффа по систематике, экологии и эпидемиологическому значению блох.
Фенюк, Калабухов и др. развили эколого-физиологическое направление по
характеристике грызунов – носителей чумы. В 1918г. создан институт
«Микроб», который стал противочумным центром юго-востока страны.
Много исследователей продолжают работать в области совершенствования
5 профилактики и лечения чумы.
Природные очаги чумы расположены в тропических и умеренных
зонах земного шара.
В Азии – это Китай, Монголия, Средняя Азия – пустыни, на Памире –
Среднеазиатский черный очаг. Имеются очаги в Иране, Закавказье, на
Кавказе. Носители чумы – сурки, суслики и песчанки, тарбаганы,
переносчики инфекции – блохи.
Кроме того, в Азии находится огромный индийский очаг,
охватывающий территорию Индии, Пакистана, Бирмы и Индокитая.
Носителями чумы здесь являются крысы и индийские песчанки. На островах
Ява и Цейлон имеются очаги крысиной чумы. В Восточной Африке чума
проявляется в Уганде, Кении, Танганьике, в Центральной Африке – в Конго.
Имеются очаги в Южно-Африканской Республике, Южной Родезии, на
территории Сенегала.
 15

В африканских очагах носители – песчанки, земляные белки и лесные

крысы. В Южной Америке – морские свинки, хомяки, в Северной Америке –
суслики, сурки. Волго-Уральский очаг и Калмыцкие степи – суслики и
песчанки. Кроме грызунов чумой болеют верблюды.
Переносчиками инфекции от грызуна к грызуну и от грызуна к
человеку являются блохи, которые заражаются при сосании крови больного
грызуна. Возбудитель чумы размножается в желудке блохи, склеиваясь в
отдельные комочки и образуя сплошную вязкую массу, заполняет всю
полость желудка. Такой «чумной блок» полностью закупоривает
пищеварительный тракт блохи. Голодная блоха заражает грызуна или
человека, пытаясь, сосать на них кровь и отрыгивая в ранку, чумные
микробы. При отсутствии блока блохи практически незаразны. Способность
блох образовывать блок неодинакова у различных видов и родов блох.
Наиболее активными переносчиками инфекции являются блохи рода Xenop-
sylla, паразитирующие на крысах, песчанках и др. грызунах.
Различают два типа природных очагов: «дикой» (степной) и
«крысиной» чумы. Очаги «дикой» чумы наиболее древние, приурочены к
пустынным, степным, горным ландшафтам и охватывают большие
территории. Основные носители – дикие грызуны. Распространение чумы в
этих очагах не связано с путями сообщения людей.
6 Очаги в тропических и субтропических зонах связаны с крысами,
существование которых тесно связано с человеком.
Заболевание человека происходит при наличии острой эпизоотии среди
грызунов. Чума у человека бывает в виде двух основных форм – бубонной и
легочной.
Бубонная чума – микроб попадает через поврежденную кожу
(незаметно) или через укусы блох (часто при охоте на тарбаганов и
сусликов). Бубоны локализуются в подмышечной области. Люди с бубонной
формой безопасны для окружающих. Возбудитель чумы очень не стоек к
различным факторам окружающей среды (высыхание, наличие постоянной
микрофлоры), вода и почва также не являются источниками заражения. Итак,
основную роль в распространении бубонной чумы играет крысиная блоха.
7 При легочной чуме единственным источником инфекции является
больной человек. Заболевание возникает при контакте с больным бубонной
формой, у которого развилась вторичная чумная пневмония. Воспаление
легких, вызванное возбудителем чумы, обычно сопровождается сильным
кашлем с обильным выделением пенистой с примесью крови мокроты,
 15

содержащей огромное количество возбудителя. При воздушно-капельном

пути заражения заболевание начинается с воспаления легких (первичная
легочная чума). При заражении человека через рот – развивается
«тонзиллярная» форма по типу бубонной (Вьетнам). Первичная легочная
форма при зараженьях в лаборатории. Заражение при легочной чуме
происходят при приближении к больному на расстояние 1,5 – 2м. Первичная
легочная чума чаще имеет место при «крысиной» чуме («океаническая» -
8 глицеринонегативная раса чумного микроба).
Вторичная чумная пневмония чаще бывает в «диких» очагах
(Монголия), где возбудитель относится к «континентальной»
глицеринопозитивной расе.
Чумной микроб Y. pestis относится к роду Yersinia. К этому роду
принадлежат три вида (Y. pestis, Y. pseudotuberculosis, Y. enterocolitica).
Чумная палочка в мазках имеет яйцевидную форму, неподвижна, не образует
спор и капсул. Гр-, более интенсивно окрашивается по полюсам. Выражен
полиморфизм, имеет самые разнообразные формы. Факультативный анаэроб,
9 Т -оптимальная 27 –28 С. При 37 °С в организме образует капсулу. На
чашках с агаром чумная палочка имеет характерный рост в виде платочка,
окруженного кружевом. Лучше растет, если добавить сульфит натрия, кровь.
Селективными преимуществами обладают среды, к которым добавляют
10 генцианвиолет. Чумной микроб на питательных средах растет в R-форме.
Диссоциация связана с переходом в S-форму. Некоторые штаммы чумного
микроба образуют пестицины, активные против иерсиний
11 псевдотуберкулеза.

Все штаммы разделяют на глицеринопозитивные и

глицеринонегативные хемовары. Первые (континентальные) глицерин+
выделяются в глубине материков, глицерин- в портовых городах и на
островах тропического пояса, океанические.
Бактерия чумы чрезвычайно вирулентна для человека. Она образует
термолабильный экзотоксин и «мышиный» токсин, а также обладает
способностью вызывать гемолиз эритроцитов и растворять фибрин.
12
Антигенная структура очень сложна (О-Аг, Fl, W, V –
термолабильные антигены), соматический термостабильный антиген. Общие
антигены с псевдотуберкулезными микробами, кишечно-тифозными,
дизентерийными и эритроцитами человека О- группы крови.
 15

Иммунитет различной длительности и напряженности, обусловлен

преимущественно фагоцитарной активностью клеток лимфоидно-
макрофагальной системы (клеточный).
13 Лечение – эффективны антибиотики аминогликозидного ряда.
Специфическая профилактика – живая вакцина из штамма EV.

ТУЛЯРЕМИЯ
14
Francisella tularensis является возбудителем туляремии – острого или
хронического системного природно-очагового заболевания человека и
животных, которое характеризуется лихорадкой, интоксикацией и
поражением лимфатических узлов.
Выделяют 3 подвида франциселл, отличающихся по антигенным
свойствам и вирулентности: голарктический, распространенный в Европе,
Азии и Северной Америке, умеренно патогенный для домашних кроликов;
среднеазиатский, распространенный в долинах рек Средней Азии, умеренно
патогенный для домашних кроликов; неарктический, или американский,
распространенный в Северной Америке, высокопатогенный для домашних
кроликов.
15
Экологическая ниша. Резервуаром возбудителя в естественных
условиях являются дикие животные (около 50 видов). Туляремией болеют
мелкие грызуны, зайцы, ондатры, водяные крысы, обыкновенная хомяки и
др. Для них туляремия – тяжелое септическое заболевание, от которого
наступает гибель спустя 5-12 дней после заражения. Органы и ткани этих
животных содержат огромное количество микробов. Сред домашних
животных болеют овцы, свиньи, крупный рогатый скот.
Из лабораторных животных F. tularensis патогенны для белых мышей
и морских свинок. На вскрытии – характерная картина, некротические узелки
в печени и селезенке.
16 Эпидемиология. Туляремия – природно-очаговое заболевание.
Источником инфекции являются мелкие грызуны (полевые мыши, водяные
крысы, ондатры, хомяки) и зайцы. Как и для всех зоонозов, для туляремии
характерна множественность механизмов путей и факторов передачи. Среди
грызунов передача туляремии осуществляется клещами, комарами и в
меньшей степени блохами, слепнями и гамазовыми клещами. В иксодовых
клещах возбудитель туляремии способен интенсивно размножаться и
длительно сохраняться, они являются основными хранителями этой

17
 15

инфекции в природе. Человек заражается контактным, алиментарным,

аэрозольным и трансмиссивными путями. Восприимчивость человека очень
высока. Чаще заболевают сельские жители или охотники (в последние годы).
На территории нашей страны выделяют 6 типов природных очагов: пойменно-
болотный, предгорно-ручьевой, луго-полевой, лесной, степной и тугайный. Каждому типу
свойственен основной носитель и основной переносчик. Туляремия может передаваться и
через воду.
18 Морфология. Бактерии F. tularensis очень мелкие, грам-, неподвижны,
спор не образуют, могут образовывать капсулу. Не растут на обычных
питательных средах.
Культуральные свойства. Факультативный анаэроб. На простых ПС
не растет. Культивируется на желточной среде (Мак-Коя) или на агаровых
средах с добавлением цистеина (среда Френсиса), крови, Т – 37-38 С. На
плотных средах образует мелкие колонии молочно-белого цвета. Хорошо
культивируется в желточном мешке куриного эмбриона. При
культивировании на искусственных питательных средах происходит
аттенуация бактерий и превращение их из вирулентной S-формы в
авирулентную и неиммуногенную R-форму. Вакцинные штаммы бактерий
представляют собой промежуточную форму изменчивости, которую
обозначают как SR-вариант.
Биохимическая активность очень низкая. Ферментируют глюкозу до
кислоты; непостоянно ферментируют маннозу, левулезу, образуют
сероводород.
Антигенная структура. Бактерии туляремии содержат оболочечный
поверхностный (Vi) и соматический (О) антиген. Вирулентные и
иммуногенные свойства связаны с оболочечным Vi-антигеном. Имеют
антигенную близость с бруцеллами. В R-форме теряют Vi-антиген, а вместе с
ним вирулентность и иммуногенность.
Резистентность. Бактерии устойчивы к различным факторам
внешней среды. В воде и влажной почве свыше 4 месяцев. В продуктах
питания – до нескольких месяцев. В замороженных тушах до 9 месяцев. В
шкурах животных более месяца. Нестойки к высоким температурам и
обычным дезинфицирующим веществам.
19
Факторы патогенности. Неарктический подвид обладает высокой
патогенностью для человека при кожном пути заражения, голарктический и
среднеазиатский подвиды умеренно патогенны. Патогенные свойства
связаны с оболочечным антигенным комплексом и токсическими веществами
типа эндотоксина.
13
 15

Патогенез. Возбудитель туляремии попадает в организм человека

через кожу, слизистые оболочки глаз, дыхательных путей, ЖКТ. Способы
заражения человека обусловливают развитие тех или иных клинических
форм туляремии. В патогенезе туляремии выделяют несколько фаз:
внедрение и первичная адаптация возбудителя; лимфогенное
распространение; первичные регионарно-очаговые и общие реакции
организма; гематогенные метастазы и генерализация процесса; вторичные
очаги; реактивно-аллергические изменения; обратный метаморфоз и
выздоровление.
Ведущее значение в патогенезе имеет фаза лимфогенного
распространения возбудителя. В месте его внедрения нередко развивается
первичный аффект с регионарным первичным лимфаденитом. Микроб и его
токсины проникают в кровь, что приводит к бактериемии и генерализации
процесса, метастазированию и развитию вторичных туляремийных бубонов.
20 Клинические проявления. Инкубационный период колеблется в
средних пределах от 2 до 7 суток (от нескольких часов до 3 недель). Болезнь
начинается остро, внезапно, без продромального периода с повышения
температуры до 38-39 С. Появляется озноб, резкая головная боль,
интоксикация. Клиническая картина обусловлена характером пораженных
органов. Различают несколько клинических форм туляремии:
бубонная
язвенно-бубонная
глазобубонная
ангинозно-бубонная
абдоминальная
легочная
генерализованная (септическая)
При туляремии различают легкие, средней тяжести и тяжелые формы
течения болезни. Болезнь протекает длительно (около месяца). Летальность
при заражении неарктическим подвидом – около 6 %; при заражении
другими подвидами – 0,1 % и ниже. Прогноз при туляремии, как правило,
благоприятный.
21 Иммунитет после перенесенной инфекции сохраняется длительно,
иногда пожизненно; развивается аллергизация организма к антигенам
возбудителя.
Лечение – антибиотики стрептомицинового и тетрациклинового ряда
(стрептомицин, левомицетин, биомицин).
 15

Специфическое лечение. В случаях затяжного течения заболевания

проводят комбинированную антибиотикотерапию и вакцинотерапию с
применением убитой лечебной вакцины, которая вводится различными
путями в дозах от 1 до 15 млн м.кл. с интервалом 3-6 дней. Курс лечения 6-10
инъекций.
Специфическая профилактика – живая туляремийная вакцина
Эльберта-Гайского из штамма № 15. Вакцина обеспечивает прочный
иммунитет при заражении европейским и голарктическим подвидами и
эффективна против американской разновидности возбудителя. Вакцинацию
проводят по эпидемическим показаниям, а также лицам, относящимся к
группам риска.
Лабораторная диагностика туляремии.
22
Материал для исследования – кровь, пунктат из бубона, соскоб из язвы,
отделяемое конъюнктивы, налет из зева, мокрота и др. – определяется
клинической формой болезни. Кроме того – вода и пищевые продукты. В
природных очагах проводят плановые систематические исследования для
выделения возбудителя туляремии от грызунов.
Для диагностики применяют все методы микробиологической
диагностики. Исследование проводят в режимных лабораториях.
Бактериологический метод в диагностике туляремии у человека
редко дает положительные результаты. Чистую культуру, как правило,
выделяют после накопления ее в организме восприимчивых лабораторных
животных. Для биопробы применяют б.м. и м.св. Мышей заражают п/к,
свинок – в/б. Животные погибают в среднем на 3-6 сутки. Зараженных
животных содержат в особых условиях (как при заражении чумой). Если
биопробы в течение 7-15 дней не погибают, их забивают на 15-20 день и
вскрывают. При наличии туляремии обнаруживают патологоанатомические
изменения в виде продуктивного процесса с некрозом. Чистую культуру
выделяют из внутренних органов на желточной среде, глюкозоцистеиновом
кровяном агаре, среде Емельяновой и др.
При идентификации опираются на:
морфологию и тинкториальные свойства возбудителя,
отсутствие роста на МПА,
агглютинацию гомологичной сывороткой,
патогенность для б.м. и м.св.
Чистую культуру можно выделить, заражая 12-дневные куриные
эмбрионы в желточный мешок.
 15

Для выделения чистой культуры из воды последнюю центрифугируют

или фильтруют через бумажные фильтры; полученным осадком заражают
лабораторных животных.
При исследовании пищевых продуктов их промывают мясопептонным
бульоном, центрифугируют и осадком заражают лабораторных животных.
Бактериоскопический метод. Параллельно с бактериологическим
исследованием из исследуемого материала готовят мазки-отпечатки, которые
окрашивают по Романовскому-Гимзе. В мазках из органов можно
обнаружить мелкие кокковидные и палочковидные бактерии, которые
располагаются внутриклеточно в виде скоплений, образуют нежную капсулу.
Серодиагностика. Для серодиагностики используют развернутую
реакцию агглютинации, РПГА, РСК на холоде, РИФ.
Аллергические пробы применяют для ранней диагностики туляремии
(с 5-го дня от начала болезни). Используют 2 вида тулярина и,
соответственно, 2 способа их введения: накожный и внутрикожный. Так как
концентрация аллергена в препаратах различна, недопустимо использовать
накожный тулярин для внутрикожного введения и наоборот. Результаты
аллергической реакции учитывают в динамике через 24-36-48 ч. За
положительный результат принимают инфильтрат диаметром не менее 5 мм.
У вакцинированных или переболевших туляремией лиц в течение ряда лет
аллергические пробы остаются положительными (анамнестическая реакция).

БРУЦЕЛЛЕЗ
23
Это инфекционное заболевание домашних животных, вызываемое
патогенной группой микробов – бруцеллами. Эта инфекция зоонозная, т.к.
источником инфекции являются больное животное, а сам человек попадает в
эпидемиологическую цепь случайно и является эпидемиологическим
тупиком.
Бруцеллы являются возбудителями бруцеллеза – острого или
хронического инфекционного антропозоонозного заболевания, которое
характеризуется интоксикацией, преимущественным поражением опорно-
двигательного аппарата, нервной, сердечно-сосудистой, мочеполовой систем
и других органов, аллергизацией организма, затяжным течением,
приводящим, как правило, к инвалидизации.
24 Название рода связано с именем Брюса, открывшего в 1886 г.
возбудителя бруцеллеза. Возбудители бруцеллеза относятся к роду Brucella,
 15

которые включает несколько видов: Br. abortus (КРС), Br. melitensis (МРС),
Br. suis (свиньи), B. ovis (возбудители эпидидимитов у баранов и абортов у
овец), B. canis (собаки), B. neotomae (лесные крысы), B. rangiferi (4-ый
биовар B. suis, выделенный в Канаде, Сибири и на Аляске от северных
оленей, от которых может заболеть человек).
25
Бруцеллез среди животных вызывается различными видами бруцелл
неодинаковой вирулентности для человека. Так, возбудитель бруцеллеза КРС
Br. abortus маловирулентен для человека, поэтому у людей встречается лишь
спорадический бруцеллез этого типа – болезнь Ганга.
Напротив, возбудитель бруцеллеза МРС (Br. melitensis) является
высоковирулентным для человека, поэтому заболевание иногда принимает
эпидемическое распространение.
Возбудитель свиного бруцеллеза – Br. suis по аналогии с возбудителем
коровьего типа обычно вызывает среди людей также спорадические
заболевания. Для клиники бруцеллеза домашних животных особо
характерны выкидыши.
Внутри трех видов бруцелл (melitensis, abortus, suis) описаны биовары.
Бруцеллезная инфекция распространена повсеместно, особенно в местах с
развитым животноводством. В Ставропольском Крае постоянно
регистрируются случаи, как овечьего, так и коровьего типа. В настоящий
момент количество заболеваний увеличивается из года в год. С 1983г.
неблагополучные районы – Нефтекумский, Курской, Левокумский,
Шпаковский, Изобильнинский. Выделется приблизительно 50% гемокультур
Br melitensis и 30% Br abortus.
26 Эпидемиология. Резервуаром возбудителей и источником инфекции в
природе являются сельскохозяйственные и домашние животные – КРС, МРС,
свиньи, реже – олени, лошади, собаки, кошки. Бруцеллез распространен на
всех континентах. Как для всех зоонозов, для бруцеллеза характерна
множественность механизмов и путей передачи. Больные животные
выделяют бруцеллы с молоком, мочой, калом, околоплодными водами и др.
Человек чаще заражается фекально-орально, пищевым путем (сырое молоко,
молочные продукты, мясо и т.д.) и контактным путем при уходе за больными
животными. Восприимчивость человека к бруцеллам высокая. Заболевания
носят спорадический характер или в виде отдельных вспышек, что зависит от
видовой принадлежности бруцелл.
Морфология.
 15

Морфологически все три основных типа бруцелл неотличимы друг от

друга. Это мельчайшие бактерии шаровидной, овоидной или более
удлиненной формы (0,3-0,4). Бруцеллы вида suis более крупные,
палочковидные с закругленными концами. Бруцеллы неподвижны, спор не
образуют. При действии специфического бактериофага или при
выращивании на среде с 10 % иммунной сыворотки образуют нежную
капсулу. У бруцелл описаны явления диссоциации с образованием R-форм,
обнаружены и L-формы.
Резистентность. Бруцеллы длительно сохраняются в окружающей
среде: в молоке – до 45 дней; в масле, сливках, простокваше, свежих сырах –
в течение всего периода их пищевой ценности; в брынзе – до 60 дней; в
замороженном мясе – свыше 5 мес., в засоленных шкурах – 2 мес., в шерсти –
3-4 мес.; в воде – до 5 мес.; в почве – до 3 мес. При 60 С гибнут через 30
мин., при кипячении – мгновенно. Чувствительны к большинству
антибиотиков; к действию обычно применяемых антисептиков и
дезинфектантов.
Культуральные свойства. Аэробы. Требовательны к ПС. На простых
ПС не растут, растут на сывороточно-декстрозном и кровяном агаре.
Характерной особенностью бактерий группы Brucella является
медленный рост их в первой генерации. При посеве крови, костного мозга и
мочи бруцеллы обычно обнаруживаются через 5-10 дней, а иногда 20-30 дней
после посева. Для получения первых генераций B. abortus требуется
атмосфер с повышенным содержанием углекислоты (в пределах 5-10%), а
рост B. melitensis происходит в обычных аэробных условиях.
В жидких средах вызывают равномерное помутнение с небольшим
осадком без пленки на поверхности. На плотных ПС формируют мелкие
круглые выпуклые гладкие прозрачные, голубовато-серые колонии. Гемолиза
не дают, пигмента не образуют. Наблюдается диссоциация от S- к R-формам
колоний. В гладкой форме некоторые штаммы бруцелл лизируются
бруцеллезными фагами.
Для выделения культур рекомендуется применять печеночный агар,
среду «Д», агар альбими и картофельный агар. При добавлении к
печеночному и МПА 1% глюкозы и 1% глицерина получается лучший рост
бруцелл. Посевы выдерживаются в термостате при +37 С не менее 20-25
дней. Первые наблюдения за посевами производится через 4-6 дней, затем
через каждые 3-4 дня. Бруцеллы хорошо культивируются в жировых
 15

(неоплодотворенных) яйцах, желточном мешке 10-12 дневных куриных

эмбрионов.
Биохимическая активность бруцелл очень низкая. Содержат каталазу
и оксидазу, нитраты редуцируют в нитриты, цитраты не утилизируют,
реакция Фогеса-Проскауэра отрицательная, продуцируют сероводород.
Антигенная структура сложная и близкая для разных видов бруцелл.
Имеют соматический О- и капсульный антигены. Различные виды бруцелл
различаются количественным соотношением А- (абортус) и М- (мелитензис)
антигенов.
Факторы патогенности. Бруцеллы являются факультативными
внутриклеточными паразитами млекопитающих, включая человека.
Обладают высокой инвазивной способностью, образуют фермент агрессии
гиалуронидазу. Основными факторами вирулентности являются эндотоксин
и капсула.
Иммунитет при бруцеллезе клеточно-гуморальный, в основном
нестерильный и относительный. После выздоровления иммунитет угасает,
возможна реинфекция.
Патогенез. Бруцеллы, проникнув в организм через кожные или слизистые
покровы, распространяются из первоначальных ворот по лимфотоку и оседают в
регионарных лимфатических узлах – первичный бруцеллезный комплекс. Отсюда
размножившийся возбудитель в дальнейшем проникает в кроваток и гематогенно
распространяется по всему организму, вызывая первичную генерализацию инфекции.
Оседая из кроватока преимущественно в тканях лимфо- и гемопоэтической системы,
бруцеллы образуют в организме стойкие метастатические очаги и при обострениях
процесса, усиленно размножаясь, вызывает повторные волны генерализации с появлением
бруцелл в крови. Рецидивные волны генерализации могут быть многократными,
определяя ход инфекции по типу хроносепсиса. Это находит свое отражение в
характерной кривой гемокультур – 70% - первый год, 44% - 4-12 месяцев, второй год 17%,
как правило, исчезает на третьем году болезни. Иммунитет при бруцеллезе, так же как и
при туберкулезе, вырабатывается лишь до относительного уровня, причем инфекция
вызывает в организме быстро наступающую и длительно сохраняющуюся
сенсибилизацию, проявляется в различных аллергическую реакциях. Механизм
иммунитета при бруцеллезе в основном связан с фагоцитарным процессом,
завершающийся лизисом захваченных бруцелл. У всех восприимчивых животных и у
человека бруцеллез протекает хронически с самоочищением организма от возбудителя
27 лишь через месяцы, а у человека – через годы.
Клиника. Входными воротами могут быть пищеварительный тракт,
наружные покровы – слизистые оболочки, поврежденная кожа и
дыхательные пути. Заражение может быть алиментарным (через молоко и
молочные продукты), контактным и аэрогенным.
 15

Клиническая картина характеризуется большим разнообразием

симптомов и осложнений. Одним из постоянных симптомов бруцеллеза
является лихорадка, чаще всего волнообразного типа (индуцирующая
лихорадка).
Среди различных поражений особое значение имеет поражение
опорно-двигательного аппарата, формирование болезненных соединительно-
тканных узелков и инфильтратов в области ягодичных мышц и в пояснично-
крестцовой области. Характерно поражение костно-суставной системы,
образование бурситов и тендовагинитов, артритов, остеоартритов. В процесс
вовлекаются и кости, позвоночник, развиваются спондилиты.
Очень часто поражается нервная система, что дает основание
некоторым авторам говорить о «нейробруцеллезе». Головные боли,
бессонница, повышенная раздражительность и явления общей депрессии.
Поражение периферической нервной системы. При бруцеллезе иногда
наблюдаются различные формы поражения глаз и органов слуха. Очень
часто осложнение со стороны половой сферы – эпидидимиты и эндометриты.
Бруцеллезные аборты.
Лечение применяются антибиотики – тетрациклин, доксициклин,
рифампицин, левомицетин, а также восстановительная и стимулирующая
терапия.
28
Профилактика – живая вакцина.

29 Лабораторная диагностика.
Материалом для исследования служат: кровь, пунктат красного
костного мозга, моча, испражнения, молоко и молочные продукты, кусочки
органов. Для диагностики бруцеллеза используют все методы
микробиологической диагностики. Серодиагностику и аллергические пробы
проводят в базовых лабораториях, чистую культуру бруцелл выделяют и
идентифицируют в специальных лабораториях с соблюдением режима
противоэпидемической безопасности.
30
Посев крови для выделения гемокультуры является наиболее
достоверным методом диагностики бруцеллеза у людей; проводят в первые
дни болезни при наличии лихорадки; при отрицательных результатах
исследование многократно повторяют (бактериемия может быть в течение
года и более). Учитывая медленный рост бруцелл, посевы выдерживают в
термостате до 1 мес.
31
 15

Обнаружение микроба в крови возможно при инфицировании B.

melitensis,в случае B. abortus – бактериемия редко встречается. Посевы крови
рекомендуется делать во время лихорадочного состояния и до лечения
антибиотиками. Кровь стерильно набирают шприцом и засевают по 5мл в 2
флакона, содержащих по 50 мл МП и печеночного бульона. Во избежание
свертывания крови к бульону добавляют 0,5% лимоннокислого натрия, а для
подавления роста б/фага – антифаговую сыворотку. Один из флаконов
инкубируют в условиях с повышенным содержанием углекислого газа, а
другой в обычных условиях. Посевы выдерживают 20-25 суток и через
каждые 3–4 дня делают высевы на скошенный МПА или печеночный агар.
Колонии бруцелл на агаре бесцветны, выпуклые, с гладкой поверхностью.
Наряду с крупными колониями, могут быть и мелкие.
32 Пунктат костного мозга засевают на те же среды. Миелокультуры
при бруцеллезе удается получить в 1,5-2 раза чаще, чем гемокультуры.
Миелокультуры могут быть получены в остром, подостром и даже
хроническом периоде заболевания.
Мочу для получения уринокультуры предварительно центрифугируют,
из осадка делают посевы. Уринокультуры выделяют как при остром
бруцеллезе, так и в период реконвалесценции. Процент высеваемости
невелик и зависит от периода заболевания (5-14 %).
28
Молоко – исследуют аналогично моче.
Желчь, кал, мокрота, суставная жидкость, влагалищные выделения и
др. – выделение культуры удается очень редко.
Наибольшую высеваемость бруцелл, особенно из бактериально
загрязненного материала, получают при посевах исследуемого материала в
желток свежего куриного яйца или в желточный мешок эмбриона.
Зараженные яйца выдерживают в термостате 5 дней, а затем делают высев на
ПС.
Биопроба. Используют б.м. и м.св. Заражают кровью в/б; осадком мочи
и молока – п/к. Через 20-30 дней у зараженного животного берут кровь и
ставят с ней реакцию агглютинации. Затем животных забивают, вскрывают и
делают посевы крови из сердца, взвеси внутренних органов и л/у.
Быстрая предварительная идентификация на стекле. Для этого
берется сыворотка 1:25, разводится карболовой кислотой. Можно поставить
пробу с фагом. Однако R-формы бактерий не агглютинируются
бруцеллезной сывороткой.
Выделенные чистые культуры бруцелл дифференцируют.
33
 15

Определение типа бруцелл производится на основе комплексного

метода:
потребность в углекислом газе в первых генерациях (способность
34
роста в отсутствие повышенной концентрации углекислого газа);
образование сероводорода (B. suis и B. abortis при ассимиляции
белков и аминокислот продуцируют сероводород, B. meliteusis не
35
выделяют его. B. suis больше, чем B. abortus. Потемнение бумажки).
чувствительность к бруцеллезному фагу;
чувствительность к бактериостатическому действию анилиновых
красителей (фуксина и тионина) – Br suis растет на тионине, не
36
растет на фуксине (1:25000); Br abortus – растет на фуксине (1:50000),
и не растет на тионине. Br melitensis растет на фуксине и тионине;
дифференциация с моноспецифическими сыворотками;
уреазная активность (мочевина) – Br suis продуцирует уреазу
быстрее и сильнее других бруцелл. Br abortus – слабее, Br melitensis
занимает промежуточное положение. Среда Кристонью с мочевиной,
краснеет. B. suis краснеет через 15-20 мин, B. melitensis – через 2
часа, B. abortus – через 18-20 ч.

37
Серологическая диагностика. В сыворотке больных бруцеллезом
накапливаются агглютинирующие (вначале IgM, затем IgG), неполные
блокирующие (IgA, IgG) и опсонические (IgG) антитела.

1. Реакция Райта – титр 1:200 – 1:400;

38
2. Реакция Хеддельсона;
3. РСК;
Реакция Бюрне – в/к проба, через 6-8ч, редко 24ч. и сохраняется 40-50ч.
39 Основная фагоцитарная реакция.
Серологические реакции Хеддельсона или Райта могут быть
положительными уже с первых дней клинически выраженного бруцеллеза и,
как правило, сохраняется в течение всего периода болезни. Эти реакции
могут быть положительны, и после вакцинации.
Реакция Бюрне является строго специфической. Обе реакции взаимно
дополняют друг друга.
41
42
 15

Сибирская язва
Сибирская язва – острое инфекционное заболевание из группы
антропозоонозов, вызываемое спорообразующим микробом Bacillus an-
thracis, представителем рода Bacillus, сем. Bacillaceae. Не передаётся от
человека к человеку, но передается человеку при контакте с больными
животными, их трупами, сырьем животного происхождения,
контаминированными объектами внешней среды, а также, возможно,
кровососущими членистоногими. Заболевание характеризуется тяжелой
интоксикацией, поражением кожи, лимфоузлов и других органов и высокой
летальностью.
43
Человек заражается контактным путем (при уходе за больными
животными, убое, переработке животного сырья), реже алиментарным
путем (при употреблении мяса и других животноводческих продуктов),
воздушно-пылевым путем. Резервуар и источник инфекции: крупный и
мелкий рогатый скот, лошади, верблюды, свиньи. Споры B. anthracis
длительно сохраняются в почве и могут служить источником инфекции.
44
Морфология. Грамположительные спорообразующие прямые палочки
(0,5-2,5 х 1,2-10 мкм) с обрубленными или слегка закругленными концами,
образующие цепочки. Неподвижны. Могут образовывать капсулы. Споры
располагаются центрально, они чрезвычайно устойчивы и сохраняются в
окружающей среде десятки лет.
45
Культуральные свойства. Аэробы. Хорошо растут на простых ПС. На
жидких средах дают придонный рост в виде комочка ваты, не вызывая
помутнения среды. На плотных средах образуют крупные, с неровными
краями, шероховатые матовые колонии (R-форма). Под лупой колонии
напоминают гриву льва или голову медузы. На средах, содержащих 0,05-0,5
ЕД/мл пенициллина, сибиреязвенные бациллы через 3-6 ч роста образуют
сферопласты, расположенные цепочкой и напоминающие в мазке жемчужное
ожерелье (тест «жемчужного ожерелья»).
46 Биохимическая активность достаточно высокая.
Антигенная структура. Содержат родовой соматический
полисахаридный Аг клеточной стенки и видовой белковый капсульный Аг.
Антитела к капсульным Аг не обладают протективной активностью.
Образует белковый экзотоксин, обладающий антигенными свойствами.
Капсульные Аг и белковый экзотоксин кодируются плазмидами, потеря
которых делает бактерии авирулентными.
47
 15

Факторы патогенности
Фактор вирулентности Биологический эффект
Белковый экзотоксин Экзотоксин содержит 3 компонента: летальный фактор
(синтез контролируется (проявляет цитотоксический эффект, вызывает отек легких);
плазмидой) протективный компонент; эдематозный фактор (вызывает
отек). По отдельности компоненты не проявляют токсическое
действие.
Капсула Антифагоцитарная активность
48
Патогенез. Входными воротами в большинстве случаев является
поврежденная кожа, значительно реже – слизистые оболочки дыхательных
путей и ЖКТ. В основе патогенеза лежит действие экзотоксина, отдельные
фракции которого вызывают коагуляцию белков, отек тканей, приводят к
развитию токсико-инфекционного шока.
48 На месте внедрения возбудителя в кожу развивается сибиреязвенный
карбункул – очаг геморрагически-некротического воспаления глубоких слоев
дермы на границе с подкожной клетчаткой, сопровождающийся отеком и
деструкцией тканей. В центре очага – некроз кожи с образованием буро-
черной корки (anthrax – уголь).
Возбудитель из входных ворот заносится макрофагами в регионарные
лимфоузлы, в которых развивается воспаление без серьезных нарушений
барьерной функции, в силу чего генерализация процесса не наступает или
наступает в относительно поздние сроки от начала болезни.
49
При вдыхании пылевых частиц, содержащих сибиреязвенные споры,
макрофаги захватывают возбудителя со слизистой дыхательных путей и
заносят в трахеобронхиальные лимфоузлы. В них развивается воспаление с
исходом в тотальный некроз, способствующий гематогенной генерализации
инфекции. Акты биотерроризма в США были рассчитаны на вдыхание спор.
50
Клиника. Инкубационный период – в среднем 2-3 дня. Клиническая
картина обусловлена характером пораженных органов. Различают кожную,
легочную и кишечную клинические формы, которые могут закончиться
сепсисом. Генерализованные формы в 100 % случаев заканчиваются
летально; при кожной форме летальность не превышает 5 %.
Иммунитет. После перенесенного заболевания развивается стойкий
перекрестный клеточно-гуморальный иммунитет, хотя отмечаются
отдельные случаи повторных заболеваний.
 15

Специфическая профилактика. Живая сибиреязвенная вакцина СТИ

51
(санитарно-технический институт). Иммунизацию групп риска проводят по
эпидемиологическим показаниям. Для экстренной профилактики
назначают сибиреязвенный иммуноглобулин.
Лабораторная диагностика сибирской язвы
52
Исследуемый материал: содержимое везикул, карбункулов,
отделяемого язвы или отторгнутого струпа при кожной форме, мокрота
– при легочной форме, кровь – при септической, рвотные массы и
испражнения – при кишечной форме. Режим безопасности с ООИ.
Для диагностики применяют все пять методов микробиологической
диагностики.
Бактериоскопический метод – мазки из патологического материала
53 окрашивают по Граму; для выявления капсул - по Романовскому-Гимзе
или раствором метиленового синего; для выявления спор – по Ауэске.
Наличие в мазке крупных Гр+ бацилл, окруженных капсулой, дает
возможность поставить предварительный диагноз. Люминесцентная
микроскопия – палочки со светящимся зеленым ободком.
Бактериологический метод с выделением чистой культуры на МПА и
МПБ, кровяном агаре. Выделенную чистую культуру идентифицируют
по общепринятой схеме с учетом морфологии, характера роста на МПА
и МПБ, разжижения желатина в виде перевернутой елочки, отсутствия
подвижности, положительного теста "жемчужного ожерелья", лизиса
сибиреязвенным бактериофагом «ВА-9» и «Саратов». Дополнительно
определяют лецитиназную, фосфатазную и гемолитическую
активность.
Биологическая проба на морских свинках и мышах. У павших
животных типичная патологоанатомическая картина: отек в месте
введения исследуемого материала, темная, не свернувшаяся кровь,
кровоизлияния в клетчатке, рыхлая селезенка и плотная красная
печень. В мазках-отпечатках из органов и крови – Гр+
капсулированные палочки.
Серодиагностика. Для определения АТ в сыворотке крови больных
используют реакцию латексной агглютинации или РПГА с
протективным сибиреязвенным Аг. Сибиреязвенные Аг определяют в
РИФ, ИФА, РСК, РНГА, РП в геле и реакции термопреципитации по
Асколи. Реакция термопреципитации по Асколи при определении
 15

сибиреязвенного гаптена в загнившем материале (для прижизненной

диагностики не дает преимуществ перед бактериологическим и серологическими
методами).

Кожно-аллергическая проба с антраксином для ретроспективной

диагностики при эпидобследованиях. Антраксин вводят внутрикожно
объемом 0,1 мл, результаты учитывают через 24-48 ч. Пробу считают
положительной при наличии гиперемии диаметром более 16 мм и инфильтрата.

Проблема биотерроризма и противодействие

Последние мировые события (ряд террористических актов в США с
применением ПБА (патогенных биологических агентов) – спор возбудителя
сибирской язвы) показали, что здоровью человека угрожают новые
опасности, которые могут быть вызваны злонамеренным использованием и
высвобождением микробиологических агентов и токсинов.
Биобезопасность включает обеспечение мер безопасности для
уменьшения риска потери, хищения или применения микробиологических
агентов или токсинов в целях диверсии, что может привести к
ненадлежащему или преступному использованию того или иного агента в
качестве биологического оружия, например, для биотерроризма,
Биобезопасность - это политика процедур, предназначенных для
предупреждения преднамеренного хищения или умышленного
использования высококонтагиозных патогенов и токсинов.
Термин биогарантия (biosurity) упоминается в качестве объединения
понятий биозащита и биобезопасность.
Основные источники биологической опасности :
 потенциальная возможность агрессии с масштабным использованием
биологических поражающих агентов (БПА) в качестве оружия
массового поражения и биотерроризма
 спонтанно возникающие природные инфекции, вызванные
традиционными, видоизмененными или направленно
модифицированными микроорганизмами
 неконтролируемый трансгенный перенос и интродукция чужеродных
видов, включая ГМО и продукты или корма, полученные на их основе
 неконтролируемая генно-инженерная деятельность;
 неконтролируемое клонирование человека и животных
Биологическими поражающими агентами могут быть:
 патогены (бактерии, риккетсии, вирусы)
 токсины (специфические продукты метаболизма животного или
растительного происхождения)
 15

 биорегуляторы (биохимические соединения, которые регулируют

процессы, протекающие в клетках, и физиологические активные
соединения, такие как катализаторы и ферменты)
 прионы (белки, вызывающие нейрогенеративные заболевания у людей
и животных)
Патогенные биологические агенты (ПБА) - это патогенные для
человека микроорганизмы (бактерии, вирусы, хламидии, риккетсии, грибы),
включая генно-инженерно-модифицированные, яды биологического
происхождения (токсины), а также любые объекты и материалы, включая
полевой, клинический, секционный, подозрительные на содержание
перечисленных агентов.
Низкая степень опасности – микроорганизм в обычных условиях, как
правило, не вызывает заболевания людей (или сельскохозяйственных
животных);
Средняя степень опасности – микроорганизм может вызывать
заболевания людей (или сельскохозяйственных животных), но в обычных
условиях опасность для работников лабораторий и для населения
практически отсутствует; лабораторные заражения и заболевания редко
приводят к серьезным последствия для заболевших, а наличие эффективных
средств профилактики и лечения исключает возможность распространения
инфекции
Высокая степень опасности – микроорганизм часто вызывает тяжелое
заболевание у людей, но возможность передачи возбудителя болезни от
человека к человеку отсутствует или является незначительной;
Высокая степень опасности эпидемического распространения
инфекции – микроорганизм часто вызывает тяжелое заболевание у людей; он
может легко передаваться другим людям путем прямого контакта или
опосредованно.

Группы риска опасности патогенов в качестве возможного орудия

биотерроризма:
Группа риска 1 (отсутствие или низкая индивидуальная и
общественная опасность). Микроорганизм, который потенциально не
является возбудителем болезней человека или животных.
Группа риска 2 (умеренная индивидуальная опасность, низкая
общественная опасность). Патогенный микроорганизм, который может
вызвать заболевание у человека или животных, но не представляет
серьезного риска для лабораторного персонала, населения, домашнего скота
или окружающей среды. Неосторожность в лаборатории может вызвать
 15

серьезную инфекцию, однако существуют доступные лечебные и

профилактические меры и риск ее распространения ограничен.
Группа риска 3 (высокий индивидуальный и низкий общественный
риск). Патогенный агент, который обычно вызывает серьезное заболевание
человека или животных, однако, как правило, не распространяется от
больного к здоровому. Существуют эффективные лечебные и
профилактические меры.
Группа риска 4 (высокий индивидуальный и общественный риск).
Патогенный агент, который обычно вызывает серьезные заболевания у
человека или животных и легко распространяется от больного к здоровому
прямо или опосредованно. Эффективных лечебных и профилактических мер
в большинстве случаев нет.

Биологические патогены обладают рядом уникальных

характеристик:
широко распространены в природе
живые, размножающиеся
легкое и дешевое производство
разнообразны: более 20 патогенов могут использоваться для создания БО
не могут быть обнаружены дистанционно существующими методами
широко используются в легитимных биологических исследованиях и
фармацевтической/биотехнологической промышленности

Образцы патогенов, которые могут эффективно использоваться как

БПА:
 вирусы
- оспы,
- Венесуэльского лошадиного энцефаломиелита,
- желтой лихорадки,
- Эбола и Марбург
 бактерии
- B.anthracis
- Y.pestis,
- F.tularensis
Основная цель стандартов и процедур биобезопасности заключается в
создании проблем для террористов в приобретении опасных патогенов и
уверенности в легитимностной деятельности производства биопрепаратов.
Биозащита – это практическое применение принципов и методов
обеспечения биологической безопасности, которые позволяют защитить
 15

работников от воздействия, связанного с работой, выполняемой в

лаборатории, т.е. это комплекс мер, методов, планов и процедур,
направленных на поддержание биобезопасности или ее восстановления после
естественной, случайной или преднамеренной вспышки заболевания,
вызванного патогенными микроорганизмами или токсинами.
Целью биозащиты является предотвращение распространения опасных
патогенов, а также двойного использования патогенов, токсинов,
оборудования и результатов исследования.
Двойное использование результатов исследований включает в себя
знания, продукты или технологии, которые могут быть неправильно
применены с целью нанесения угрозы здоровья населения, растениям,
животным, окружающей среде и материальной базе.
Факторы оценки микробиологического риска
 патогенность агента и инфекционная доза
 потенциальные последствия инфицирования
 естественные пути передачи инфекции
 другие пути инфицирования, вызванные манипуляциями в
лабораторных условиях (парентеральный, воздушно-капельный, с приемом
пищи)
 стабильность агента в окружающей среде
 концентрация агента и объем материалов, которые
предполагается использовать в работе
 наличие подходящего «хозяина» агента (человека или животных)

Глобальные правила биобезопасности должны включать:

 регистрацию и лицензирование предприятий, работающих с
опасными биологическими агентами, на основании перечня патогенов и
токсинов
 физическую безопасность и контроль доступа в лаборатории и к
коллекциям культур
 систему контроля и учета патогенов и токсинов
 испытательный срок для лабораторного персонала
 чрезвычайный план реагирования в случае нарушения
биобезопасности.