№1

Возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерии

Ставропольская Государственная Медицинская Академия

Кафедра микробиологии иммунологии и вирусологии

Лекция для студентов специальностей: лечебное дело, педиатрия, стоматология

Тема: частная микробиология, иммунология, вирусология

Лекция № 1 Брюшной тиф, паратифы, дизентерия

Виды сальмонелл – возбудители брюшного тифа и паратифов, таксономия,

характеристика, микробиологический анализ сальмонеллезов, принципы
профилактики и лечения
Шигеллы. Возбудители бактериальной дизентерии
Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика

Лекция обсуждена на
совещании кафедры
« »____________ 2008 г
Таран Т.В.

Ставрополь, 2008 г

21
 №1
Возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерии

ЛЕКЦИЯ № 1 Сальмонеллы, шигеллы

1
Семейство Enterobacteriaceae
Семейство кишечных бактерий включает большую гетерогенную
группу грамотрицательных неспорообразующих палочек, в состав которой
входят патогенные и непатогенные виды. К этой группе относится несколько
семейств (Enterobacteriaceae, Pseudomonadaceae), множество триб и
большое количество родов (например, Escherichia, Shigella, Salmonella, En-
terobacter, Klebsiella, Serratia, Proteus). Кишечные бактерии являются
факультативно анаэробными микробами, обладают сложной антигенной
структурой, ферментируют различные углеводы. Чем выше ферментативная
активность вида, тем менее выражена его патогенность, и наоборот. Это
объясняется тем, что микроб, приспособившийся к паразитическому
существованию, утрачивает ряд ненужных ему ферментов, необходимых для
автономной (во внешней среде) жизнедеятельности:
Кишечная палочка обладает большим количеством разнообразных
ферментов, что и обеспечивает широкий диапазон приспособляемости к
различным видам животных и условиям внешней среды.
Паратифозные бактерии менее активны; они являются возбудителями
разнообразных патологических процессов у многочисленных животных.
Бактерии брюшного тифа и дизентерии располагают наименьшим
количеством ферментов и вызывают заболевание только у человека.
Изучение ферментативной активности бактерий кишечной группы
позволяет дифференцировать их, чем пользуются в диагностике при
выделении из организма больных соответствующих бактерий. Однако более
точным дифференциально-диагностическим признаком, позволяющим
отличать представителей кишечной группы бактерий, является их
антигенная структура.
В клеточной стенке большинства грам(-) бактерий имеются сложные
ЛПС-ды (эндотоксины), вызывающие различные патофизиологические
изменения. Многие кишечные бактерии продуцируют также экзотоксины,
имеющие клиническое значение (например, шига- и шигаподобные токсины).
В настоящее время многие энтеробактерии представляют особый
интерес как возбудители госпитальных инфекций.
Считают, что историческим родоначальником семейства Enterobacteri-
aceae является непатогенная кишечная палочка E. coli – постоянный

21
 №1
Возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерии

обитатель кишечника человека и животных, от которой в процессе эволюции

паразитизма произошли все остальные представители группы кишечных
бактерий.
К патогенным видам семейства Enterobacteriaceae в числе многих
других относятся возбудители брюшного тифа, паратифозных заболеваний и
дизентерии. Хотя указанные бактерии отличаются степенью патогенности,
токсигенности, вызывают различные заболевания, всех их объединяют
общие черты сходства.
Местом обитания всех видов семейства Enterobacteriaceae является
кишечник, откуда они и выделяются во внешнюю среду. В организм эти
бактерии попадают через пищеварительный тракт. Попадая во внешнюю
среду, они могут некоторое время выживать, а иногда и размножаться. В
воде, например, сохраняются неделями, в молоке размножаются. При
нагревании до 60 С гибнут через 15 мин.

21
 №1
Возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерии

Род Salmonella
2
Сальмонеллы являются грам(-) подвижными (большинство
сальмонеллл имеют перитрихиальные жгутики) анаэробными
неспорообразующими палочками различной длины, которые, как правило, не
ферментируют лактозу и патогенны для людей и животных при введении per
os. Различные виды сальмонелл очень близки по антигенной структуре.
Хорошо растут на обычных ПС в температурном интервале 8-45 °С.
Род Salmonella представлен патогенами животных и человека,
вызывающими три вида поражений (условно): брюшной тиф и паратифы,
гастроэнтериты, септицемии. Их развитие во многом обусловлено видом и
вирулентностью возбудителя, инфицирующей дозой и состоянием
иммунитета макроорганизма.
Эпидемиология. Заболевания распространены повсеместно,
природный резервуар большинства возбудителей – человек и различные
животные. Основные пути передачи – водный и пищевой, реже –
3
контактный путь.
Культуральные свойства и резистентность. Температурный
оптимум для роста – 35-37 °С, рост полностью прекращается при 5 °С.
Сальмонеллы долго сохраняют жизнеспособность во внешней среде: в воде
открытых водоемов и питьевой воде они живут 11-120 cут, в почве – 1-9 мес,
в яйцах – до 13 мес, в замороженном мясе – 6-13 мес, в замороженных
овощах и фруктах – 0,5-2,5 мес.
Наиболее устойчива S. Typhimurium, остающаяся жизнеспособной в
высушенном состоянии на тканях и на бумаге до года. Сальмонеллы
резистентны к замораживанию в воде и к некоторым химическим веществам
– бриллиантовому зеленому, тетратионату и дезоксихолату натрия,
которые угнетают рост остальных колиформных бактерий и поэтому могут
быть использованы при выделении сальмонелл из фекалий.
На питательных средах большинство сальмонелл образует мелкие (2-
4 мм) прозрачные голубоватые S-колонии, ряд сероваров образует колонии
около 1 мм. На агаре Эндо они розоватые и прозрачные, на агаре Плоскирева
– бесцветные и выглядят более плотными и мутноватыми, на висмут-
сульфитном агаре – черные, с металлическим блеском, окружены черным
ореолом (но S. Paratyphi A, S. Choleraesuis, S. Abortusovis и некоторые
другие серовары образуют светлые, зеленоватые колонии), среда под

21
 №1
Возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерии

колониями также окрашена в черный цвет (следует помнить, что висмут-

сульфитный агар ингибирует рост возбудителя брюшного тифа).
Сальмонеллы также образуют переходные и шероховатые, тусклые и
сухие R-колонии с неровными краями. На бульоне S-формы дают
равномерное помутнение, R-формы – осадок.
4
Биохимия. Ферментативные свойства сальмонелл, послужившие
основным критерием выделения подвидов и сероваров, различаются даже в
пределах одного серовара. Образование сероводорода (+), отсутствие
продукции индола (-) и аэробность – характерные свойства сальмонелл, но
5 существуют серовары, образующие индол.
Исключая немногих представителей, сальмонеллы не способны
ферментировать лактозу, адонит, сахарозу и салицин, не расщепляют
мочевину и не образуют индол. Оксидаза (-), реакция Фогеса-Проскауэра
6 (-).
Антигены. Сальмонеллы, так же как эшерихии, имеют сложную
антигенную структуру. Они содержат среди прочих 3 основных Аг:
тертостабильные О-антигены (соматические), термолабильные Н-антигены
(жгутиковые) и термолабильные Vi-Аг – антиген вирулентности.
По химической структуре О-антигены сальмонелл аналогичны
одноименным антигенам эшерихий. Они отличаются друг от друга только
структурой концевых звеньев полисахардного компонента ЛПС,
определяющим иммунохимическую специфичность грамотрицательных
бактерий.
Состав Н-антигенов обусловливает разделение сальмонелл на
серовары. Н-антигены могут существовать в 2 разных фазах: специфической
1-й фазе и менее специфической, или групповой, 2-й фазе. Сальмонеллы, в
которых Н-Аг представлены двумя фазами, называют двухфазными (в
отличие от монофазных, имеющих антигенные факторы только первой
фазы).
Один из компонентов антигенной структуры – Vi-Аг, или Аг
вирулентности. Vi-Аг - соматический Аг, принадлежащий к группе
поверхностных или капсульных (К) Аг. Он термолабилен, чувствителен к
действию HCl и этанола. Его наличие может препятствовать агглютинации
микроорганизмов О-антисыворотками.
Vi-антиген содержится в вирулентных штаммах сальмонелл и является
специфическим рецептором для фагов, названных Vi-фагами. Это дало

21
 №1
Возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерии

возможность разработать методику определения фаговаров

брюшнотифозных и паратифизных сальмонелл и распределить их по
определенным группам. Определение фаговара, так же как и серовара,
проводится для эпиданализа брюшного тифа и паратифов с целью
установления источника инфекции, путей и способов ее распространения.
Антигены могут быть приобретены или утрачены в процессе
трансдукции. Состав основных антигенов, определяющих антигенную
формулу сальмонелл, подвержен вариациям Н-, О- и Vi-Аг:
Различают S-R-вариации (переход от гладкой формы к шероховатой),
имеющие различные качественные и количественные характеристики О-Аг.
Редкие пересевы, яичная среда (среда Дорсе) или лиофилизация оптимальны
для сохранения культур в S-форме.
Н-О-вариации состоят в переходе из жгутиковой Н-формы в безжгутиковую
О-форму,
Vi-Аг-вариации описаны только у S. Typhimurium.
Схема Кауфманна-Уайта. Несмотря на мозаичность и вариабельность
антигенной структуры сальмонелл, при серологической идентификации во
внимание принимаются только 3 основных антигена (О-, Н- и Vi-Аг). Этот
принцип положен в основу диагностической антигенной схемы Кауфманна-
Уайта, где все известные серовары сальмонелл на основе набора
соматических (О-)антигенов разделены на 67 серогрупп: А(02), В(04), С(07) и
др. Число сероваров, выделяемых на основе жгутиковых (Н-Аг), постоянно
увеличивается. В 1934 г. первая схема Кауфманна-Уайта включало 44
серовара, в настоящее время – более 3 тысяч.
7
Согласно последней классификации, род Salmonella состоит из 2
видов – вида S. enterica, в который включены все сальмонеллы, являющиеся
возбудителями болезней человека и теплокровных животных, и вида
S. bongori, который подразделяется на 10 сероваров и включает в себя
сальмонеллы, изолированные от холоднокровных животных.
Вид S. enterica разделен на 6 подвидов, которые в свою очередь
подразделены на серовары. Все серовары подвида enterica, согласно данной
классификации, имеют названия, которые соответствуют прежним видовым
8
названиям. Например: S. typhi – S. enterica serovar Typhi, или просто: S. Ty-
phi.
Патогенез поражений:
Проникновение в кровь. Адгезию к клеткам эпителия обеспечивают пили 1-
го, 3-го и 4-го типов. В отличие от шигелл, сальмонеллы неспособны

21
 №1
Возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерии

самостоятельно проникать в эпителиальные клетки ЖКТ, а попадают в

них посредством эндоцитоза. Бактерии мало приспособлены к размножению
в эпителии, и, достигая базальной мембраны, попадают в lamina propria,
откуда проникают в кровоток (в этот период выделяются гемокультуры).
Большинство сальмонелл не вызывает клинических проявлений
бактериемии, т.к. быстро элиминируется фагоцитами. Исключения (кроме
тифопаратифозной группы) - S. Typhimurium и S. Enteritidis, способные
наряду с гастроэнтеритами вызывать септицемии. Риск развития
бактериемий значительно возрастает у лиц с нарушением активности
мононуклеарных фагоцитов (серповидно-клеточная анемия).
Воспаление слизистой оболочки. Многие механизмы развития
гастроэнтеритов изучены плохо. Возбудитель проникает в lamina propria,
размножается там, вызывает развитие местной воспалительной реакции и
приток жидкости в очаг поражения. Проявления диарейного синдрома
обусловлены выработкой энтеротоксинов. Возбудители подобных
поражений (сальмонеллы, вызывающие гастроэнтериты и пищевые
токсикоинфекции) в большинстве случаев активно элиминируются
фагоцитирующими клетками, что и приводит к выздоровлению.
Генерализация процесса. В отличие от прочих сальмонелл, возбудители
брюшного тифа и паратифов, проникнув в кровоток, способны
выживать и размножаться в фагоцитах, а после гибели последних в
больших количествах освобождаться в кровь. При этом Vi-Аг ингибирует
действие сывороточных и фагоцитарных бактерицидных факторов.
Погибшие сальмонеллы высвобождают эндотоксин. С этого момента (4-7
сут при брюшном тифе) возникает лихорадка до 39-40 °С, продолжающаяся
без лечения до 4-8 нед.
Эндотоксин угнетает ЦНС (отсюда термин «тиф», от греч. Typhos – туман,
спутанное сознание). Воздействие эндотоксина может привести к развитию
миокардита, миокардиодистрофии и инфекционно-токсического шока.
Бактериемия приводит к генерализованному инфицированию различных
органов (почек, желчного пузыря, печени, костного мозга, твердых мозговых
оболочек и др.) и вторичной инвазии эпителия кишечника (особенно
пейеровых бляшек) – лимфо- и гематогенное инфицирование.
Инфицирование различных органов сопровождается специфическими для
конкретного органа поражениями (пиелонефрит, кишечные кровотечения,
перфорации и т.д.), гибелью и слущиванием клеток кишечного эпителия либо
образованием абсцессов.

21
 №1
Возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерии

21
 №1
Возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерии

Группа тифозно-паратифозных бактерий – S. Typhi,

9 S. Paratyphi A, S. Schotmulleri, S. Hirschfeldii
Брюшной тиф и паратифы – острые инфекционные поражения
кишечника, сопровождающиеся бактериемией, поражениями лимфатической
ткани кишечника, лихорадкой и явлениями общей интоксикации.
Возбудитель брюшного тифа - S. Typhi (палочка Эберта-Гаффки). Ее
впервые обнаружил Эберт (1880), а в чистой культуре выделил Гаффки
(1884).
Возбудитель паратифа А - S. Paratyphi A (палочка Бриона-Кайзера).
Обнаружил Гвин (1898),в самостоятельный род выделили Брион и Кайзер
(1902).
Возбудитель паратифа В - S. Schotmulleri (палочка Шотмюллера).
Впервые выделили в чистой культуре Ашар и Бенсод (1896), детально изучил
Шотмюллер (1900).
Возбудитель паратифа С – S. Hirschfeldii (палочка Хиршфельдта),
10 впервые выделил Хиршфельдт.
Эта группа включает моно- и полипатогенные типы. Брюшной тиф и
паратиф А – типичные антропонозы, резервуар инфекции – человек.
Возбудители паратифов В и С выделены также от некоторых животных и
птиц.
Возбудители паратифов близки к S. Typhi по основным свойствам;
отличаются от него способностью ферментировать углеводы с образованием
кислоты и газа и антигенной структурой.
Больной (или носитель) выделяет возбудитель с испражнениями,
мочой, слюной. Основной механизм передачи – фекально-оральный.
Наиболее часто возбудитель передается через молоко, молочные и мясные
продукты. Инкубационный период обычно составляет 9-14 сут.
11
Клинические проявления:
В зависимости от клинических проявлений различают типичные и атипичные
(абортивные, стертые) формы.
По степени тяжести – легкие, среднетяжелые и тяжелые формы.
По характеру клинические формы могут быть циклическими,
рецидивирующими, неосложнёнными или осложненными.

21
 №1
Возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерии

Клинические проявления брюшного тифа и паратифов довольно похожи,

однако имеются некоторые различия, имеющие дифференциально-
диагностическое значение.

Брюшной тиф. Заболевание начинается постепенно и проявляется

симптомами общей интоксикации; температура тела достигает 39-40 °С к 4-7
сут. Язык сухой, обложен серовато-бурым налетом, утолщен, с отпечатками
зубов по краям. Живот умеренно вздут, иногда отмечают симптом Падалки
(укорочение перкуторного звука в правой подвздошной области). На 3-5 сут
увеличиваются печень и селезенка.
В период разгара болезни (на 7-8 сут) симптомы интоксикации
усиливаются, что проявляется резкой заторможенностью, помрачением
сознания; характерна розеолёзная сыпь. Розеолы единичные, мономорфные,
с четкими границами, несколько возвышаются над уровнем кожи верхних
отделом живота и нижних отделов грудной клетки. Живот значительно вздут,
характерны симптомы энтерита. В этот период возможно возникновение
осложнений: перфорации тонкой кишки и кишечное кровотечение.
В период выздоровления проявления болезни постепенно смягчаются,
больной выздоравливает.
Возможные осложнения – инфекционно-токсический шок, миокардит,
пневмония. Реже: холецистохолангит, тромбофлебит, менингит, паротит,
артрит, пиелонефрит, инфекционный психоз, поражение периферических
12 нервов.
Паратиф А. Отличительная особенность клинической картины
паратифа А – отсутствие поражений ЦНС. Заболевание протекает менее
тяжело, сыпь полиморфная (розеоло-папулёзная, кореподобная,
петехиальная), появляется на более ранних сроках, в ходе болезни обычно
бывает несколько волн подсыпаний. Паратиф А чаще начинается остро, с
диспептических расстройств (тошнота, рвота, диарея) и катаральных явлений
(кашель, насморк). Возможны гиперемия лица, герпетические высыпания.
13
Лихорадка ремиттирующая или гектическая.
Паратиф В. Течение паратифа В вариабельно – от стертых до тяжелых
форм с симптомами менингита, менингоэнцефалита и септикопиемии.
Нередка обильная розеоло-папулезная сыпь, захватывающая и лицо (на 4-7
сут). Кишечные поражения напоминают таковые при сальмонеллезных
гастроэнтеритах. При водном пути передачи чаще наблюдают постепенное
развитие болезни с абортивным и относительно легким течением.
14

21
 №1
Возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерии

Паратиф С. Как самостоятельное заболевание паратиф С

регистрируется редко, обычно у пациентов с иммунодефицитными
состояниями. Характерны симптомы интоксикации, миалгии, желтушность
кожи, лихорадка. Сознание угнетено, возможно развитие психотических
15 состояний.
Лечение брюшного тифа и паратифов. Этиотропную терапию
проводят до 10-го дня нормальной температуры тела хлорамфениколом,
ампициллином, ампициллином с гентамицином, бактримом,
фторхинолонами. Патогенетическое лечение включает инфузионно-
дезинтоксикационную терапию, экстракорпоральную детоксикацию. Прогноз
при своевременном и адекватном лечении благоприятный.
16
Профилактика сальмонеллезов: проведение ветеринарно-санитарных,
санитарно-гигиенических и противоэпидемических мероприятий. Для
иммунопрофилактики брюшного тифа разработано 3 вида вакцин – убитые
(эффективность 50-70 %), живая аттенуированная (из штамма ТУ 21а),
17 проявляющая больший протективный эффект, но дающая побочные
эффекты, химическая вакцина из Vi-Аг капсулы S. Typhi, находящаяся на
стадии клинических испытаний.
Микробиологическая диагностика сальмонеллезов
Основу диагностики сальмонеллезов, выявления носительства,
изучения обсемененности объектов окружающей среды составляют
бактериологические исследования, проводимые по стандартной схеме.
18
Для исследования отбирают испражнения, рвотные массы, промывные
воды желудка, кровь, мочу. При брюшном тифе также проводят забор проб
из кожных высыпаний, желчи, дуоденального содержимого и секционного
материала.
Дополнительные объекты исследования: остатки пищи,
употреблявшейся заболевшими, суточные пробы готовой пищи, корма
животного и растительного происхождения, смывы с различного
оборудования и других предметов, подозреваемых в качестве фактора
передачи возбудителя.
Оптимальными сроками для проведения бактериологических
исследований при гастроинтестинальных формах сальмонеллезов считают
первые дни заболевания, тогда как при генерализованных формах (тиф,
паратифы) – конец 2-й и начало 3-й недели. Число положительных
результатов значительно возрастает с увеличением кратности обследования.

19
21
 №1
Возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерии

Получение положительных результатов наиболее вероятно при тестировании

испражнений.
Следует помнить, что сальмонеллы образуют сероводород, не
ферментируют лактозу. Сальмонеллы (в отличие от шигелл) подвижны,
дают положительные результаты с метиловым красным, цитратом и на
лизин-декарбоксилазу; не образуют индол, не утилизируют малонат и не
синтезируют уреазу. Следует производить повторные бактериологические
исследования крови, которые при брюшном тифе и септицемиях нередко
дают положительные результаты на 1-й неделе болезни. Положительные
результаты при брюшном тифе может дать культуральное исследование
костного мозга, а с 3 недели заболевания – посевы мочи.
Питательные среды для выделения и идентификации сальмонелл
Среды обогащения. Селенитовый бульон с аминопептидом, селенитовая и
магниевая среда, тетратионатовый бульон Мюллера, среда Кауффмана, 20 % жёлчный
бульон.
Дифференциальные среды. Среди дифференциально-диагностических сред для
первичных посевов и высевов со сред обогащения выделяют высокоселективные
(висмут-сульфитный агар или агар с бриллиантовым зеленым); среднеселективные
(среда Плоскирева, слабощелочной питательный агар); низкоселективные (агары Эндо и
Левина). Применение висмут-сульфитного агара позволяет быстро идентифицировать S.
typhi, которые вследствие продукции сероводорода образуют черные колонии.
Среды для первичной идентификации – агар Клиглера, комбинированная среда по
Олькеницкому, среда Ресселя. На них определяют ферментацию лактозы, глюкозы,
способность образовывать сероводород и газ, гидролиз мочевины.
Для дальнейшей идентификации используют среду с мочевиной по Кристенсену,
среду с мочевиной по Преусу, среду Кларка, среды с углеводами, среды для определения
индолообразования, среды с аминокислотами (лизином, орнитином, аргинином),
глицериново-фуксиновый бульон Штерна и полужидкий агар для определения
подвижности.
20 Бактериологическая идентификация
Подозрительные колонии (не 3) со сред обогащения пересевают в пробирки
со скошенным МПА или одной из кобинированных сред (Олькеницкого,
Клиглера, Ресселя). Высев на МПА делают для последующей постановки
ориентировочной реакции агглютинации (РА). Результаты РА требуют
последующего подтверждения на этапе завершения биохимической
идентификации.
Одновременно изучают морфологию и тинкториальные свойства бактерий,
готовя мазки и окрашивая их по Граму. При отсутствии подозрительных
колоний чашки с висмут-сульфитным агаром оставляют в термостате еще на

21
 №1
Возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерии

24 ч, после чего просматривают и при обнаружении подозрительных колоний

продолжают исследование. В противном случае работу с посевами
прекращают.
Для дальнейшей работы (изучение ферментативной активности) отбирают
колонии уреаза-отрицательных бактерий, ферментирующих глюкозу, не
ферментирующих сахарозу и образующих сероводород. Культуры
пересевают со среды Олькеницкого в среду Хисса с маннитом, 1 %
пептонную воду для определения образования индола и в полужидкий агар
для определения подвижности. При выделении культур, имеющих
ферментативные свойства, характерные для сальмонелл, изучают их
антигенную структуру в РА на стекле с О- и Н-агглютинирующими
диагностическими антисыворотками, а также определяют биовары. По
результатам РА ставят окончательный бактериологический диагноз, а
исследование прекращают.
21
Следует помнить, что бактерии тифопаратифозной группы не
разлагают сахарозу, лактозу и салицин; не образуют индол.
Серологические исследования проводят для диагностики, а также для
выявления и дифференциации различных форм носительства.
Для диагностики брюшного тифа и паратифов наиболее часто
применяют линейную реакцию агглютинации (реакция Видаля). Серийные
(двукратные) разведения неизвестной сыворотки исследуют с известными
сальмонеллезными антигенами. В качестве Аг наиболее удобно
использовать монодиагностикумы к конкретным возбудителям.
Исследования рекомендуют начинать с 7 сут (время нарастания титров АТ).
Результаты интерпретируют следующим образом:
 высокие или нарастающие (1:160 и выше) титры О-антител
свидетельствуют об активной инфекции;
 высокие титры Н-антител (1:160 и выше) указывают на перенесенную
инфекцию или вакцинацию в прошлом;
 высокие титры Vi-антител обнаруживаются у некоторых
бактерионосителей.
При дифдиагностике выделенных культур нередко прибегают также к
постановке реакции Vi-агглютинации с сыворотками. Серологические
реакции в этом случае используют для идентификации стандартными
(известными) сыворотками неизвестных культур.

21
 №1
Возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерии

Для диагностики сальмонеллезов и брюшного тифа применяют РПГА с

цистеиновой пробой, позволяющей дифференцированно определять титры
АТ класса Ig G.
Быстрая реакция агглютинации на стекле. Особенно полезна для
предварительной идентификации культур. Реакцию ставят, смешивая
известную сыворотку и неизвестную культуру на стеклянной пластинке, и
исследуют под малым увеличением микроскопа. Агглютинация (если она
имеет место) происходит в течение нескольких минут.
22 Возбудители сальмонеллезов и пищевых токсикоинфекций

Сальмонеллезы - заболевания людей и животных, вызванные бактериями

рода Salmonella. Однако под термином сальмонеллезы чаще всего имеют ввиду острые
кишечные инфекции человека (гастроэнтериты), вызванные сальмонеллами,
исключая сальмонеллы брюшного типа и паратифов.

Сальмонелллезный гастроэнтерит может быть вызван многочисленными видами (по

новой номенклатуре серовары или серотипы) рода. Но наиболее часто сальмонеллезы
вызываются S. Enteritidis, S.Typhimurium, S. Choleraesuis и другими сальмонеллами,
Основной источник болезни - домашние животные (свиньи, крупный и мелкий рогатый
23 скот и др.) и птицы (куры, гуси, утки и др.). Механизм заражения - фекально-оральный.
Основной путь передачи - пищевой: факторами передачи являются яйца птиц, мясо
животных и птиц.

24
Род Shigella
Род назван в честь Киёси Шига, описавшего его типовой вид. Шигеллы –
кишечные патогены человека и приматов; в различных странах поражения составляют до
20-60 % всех кишечных инфекций и известны как бактериальная дизентерия, или
шигеллёз. Заболевания известны с глубокой древности (термин «дизентерия» ввел
Гиппократ). В конце 19 века была установлена протозойная природа некоторых
дизентерий, возникло представление об амебной дизентерии.
Начало изучения шигеллёзов положили Шантемесс и Видаль (1888), в 1891 г.
Григорьев выделил возбудитель в чистом виде, а его расширенное изучение провели
25 Шига (1898) и Крузе (1900). Исследования Флекснера (1900), Зонне (1915), Штуцера и
Шмица (1917) и др. авторов позволили выявить новые виды шигелл.
Шигеллы вызывают заболевания, называемые шигеллезами (старое
название – бактериальная дизентерия), которые являются антропонозными
инфекциями с фекально-оральным механизмом передачи. Заболевание,
вызываемое Shigella dysenteriae, чаще имеет контактно-бытовой путь
передачи; Shigella flexneri – водный; а Shigella sonnei – алиментарный.

21
 №1
Возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерии

Естественная восприимчивость людей высокая, поэтому шигеллезы

распространены повсеместно, чаще возникают в виде вспышек
алиментарного и водного характера.
26 В соответствии с антигенной структурой О-антигена и
биохимическими свойствами известные 39 серотипов шигелл разделяют
на 4 вида:
Shigella dysenteriae (серогруппа А) – бактерии Григорьева-Шига, впервые
описаны французскими учеными Шантемессом и Видалем в 1888г. и
русскими учеными Кубасовым и Григорьевым в 1891 г. Обладают
наибольшей вирулентностью;
Shigella flexneri (серогруппа B) – впервые описаны в 1917 г. американцем
Флекснером. Представляют собой большую группу бактерий, сходных по
биохимическим признакам (ферментируют маннит) и антигенной
структуре, характеризующейся большим количеством серологических типов.
Shigella boydii (серогруппа C) – шигеллы Бойда;
Shigella sonnei (серогруппа D) – шигеллы Зонне.
Дальнейшая дифференциация на типы и подтипы произведена с учетом
особенностей антигенной структуры. Подтипы существуют лишь в серогруппе В и
отражают варьирование состава групповых антигенов в пределах основных видов.
27
Морфология. Род шигелл образуют прямые неподвижные грам(-)
факультативно анаэробные палочки, лишенные жгутиков.
28 Хемоорганотрофы, метаболизм – дыхательный и ферментативный.
Температурный оптимум – 37 °С. Оксидаза-отрицательны, каталаза-
положительны, образование индола непостоянно. Углеводы разлагают с
образованием кислоты, а некоторые штаммы – кислоты и газа. Типовой вид –
29 Shigella dysenteriae.
Культуральные свойства. По морфологическим признакам шигеллы
неотличимы от других представителей семейства Enterobacteriaceae. Хорошо
культивируются на простых ПС. На твердых питательных средах образуют
гладкие (S) и шероховатые (R) колонии. S-колонии круглые,
куполообразные, гладкие, полупрозрачные в проходящем свете. R-колонии
неправильной формы, плоские, тусклые, с шероховатой поверхностью и
неровными краями. Возможно образование переходных форм. На жидких
средах S-формы дают равномерное помутнение, R-формы – придонный
осадок, среда остается прозрачной.
Биохимические свойства. По сравнению с прочими кишечными
бактериями шигеллы биохимически практически инертны. Все шигеллы

21
 №1
Возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерии

не образуют сероводород на агаре Клиглера, трехсахарно-железном агаре и

агаре с ацетатом свинца. Эти характеристики могут служить косвенным
подтверждением принадлежности выделенной культуры к роду Shigella. В
некоторых случаях эти признаки могут дать ориентировочные преставления
и о видовой принадлежности.
Shigella dysenteriae (Григорьева-Шига) обладают наименьшей
ферментативной активностью, ферментируют лишь глюкозу без
газообразования; они известны как маннит-отрицательные шигеллы
(прочие виды утилизируют маннит). Вызывают наиболее тяжелую форму
дизентерии.
Shigella flexneri, как правило, не ферментируют глюкозу, дульцит и
ксилозу; слабо активны в отношении мальтозы, сахарозы, арабинозы и
рамнозы (не ферментируют либо расщепляют не ранее 6-10 сут), почти все
образуют индол.
Shigella boydii (Бойда) обладают весьма сходной биохимической
активностью, но они дополнительно также ферментируют ксилозу, дульцит
и арабинозу (обычно в первые 24 ч). Некоторые шигеллы Бойда также
способны ферментировать мальтозу (на 6-20 сут), что имеет практическое
значение при идентификации культур.
Shigella sonnei не ферментируют сорбит и дульцит, не образуют
индол, но расщепляют ксилозу, арабинозу, что сближает их с бактериями
серогруппы С. Основное отличие – способность сбраживать рамнозу,
лактозу и сахарозу (в более поздние сроки).
Основные биохимические признаки шигелл, необходимые для
идентификации при выделении чистой культуры:
отсутствие газообразования при ферментации глюкозы;
отсутствие продукции сероводорода;
отсутствие ферментации лактозы в течение 48 ч.

32 Антигенная структура шигелл

Все шигеллы обладают соматическим О-антигеном, в зависимости от
строения которого происходит их разделение на серовары, а Shigella flexneri
внутри сероваров подразделяется на подсеровары. S. sonnei обладает
антигеном 1-й фазы, который является К-антигеном.
Shigella dysenteriae (Григорьева-Шига) образуют эндо- и экзотоксин
(шига-токсин белковой природы), и вызывают самую тяжелую форму

21
 №1
Возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерии

дизентерии. Они обладают специфическим антигеном, серологически

однородным и обособленным от других представителей этой группы.
Антигенный комплекс шигелл включает 2 термостабильных Аг
(типовые и групповые) и термолабильные Аг. Термолабильные Аг
(включают К-Аг, сходный с К-Аг эшерихий) обнаружены у всех шигелл
(исключая шигеллы Флекснера и Зонне); эти Аг способны маскировать О-Аг
и вызывать О-инагглютинабельность (действие снимается кипячением в
течение 1ч).
Менее изучены термолабильные фимбриальные Аг. У Shigella flexneri
они структурно близки аналогичным антигенам E. coli. Очевидно, что это в
некоторой степени объясняет агглютинацию эшерихий сыворотками к
шигеллам Флекснера, а также широкое распространение антител (АТ) к
шигеллам Флекснера в сыворотке людей и животных.
Определение антигенной структуры проводят для окончательной
идентификации бактерий.
Эпидемиология. Бактериальная дизентерия распространена
повсеместно, особенно в слаборазвитых странах. С введением
противоэпидемических мероприятий заболеваемость в развитых странах
33
резко снизилась.
Следует отметить, что эпидемиологию шигеллёзов отличает изменение
этиологической структуры: до конца I Мировой войны основным
возбудителем была S. dysenteriae; затем стали доминировать поражения,
вызванные S. flexneri; после II Мировой войны – S. sonnei. Это разделение
условно, т.к. в некоторых регионах могут циркулировать другие виды –
Цхинвали.
Единственный природный резервуар шигелл – человек. Вероятность
развития заболевания более высока у лиц со сниженной резистентностью и
заболеваниями ЖКТ. Источник заражения – больные и бактерионосители.
Период носительства – 1-4 нед, но может удлиняться.
Основные механизмы передачи – фекально-оральный и контактно-
бытовой (через воду, пищевые продукты). Определенную роль играют
насекомые-переносчики – мухи, тараканы и др., переносящие возбудитель с
испражнений на пищевые продукты.
Инфицирующая доза – 200-1000 ж.м.к., что обычно достаточно для
развития заболевания (зависит от вирулентности возбудителя, состояния

21
 №1
Возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерии

иммунитета человека и т.д.). Бактериальную дизентерию регистрируют в

течение всего года с подъемом заболеваемости в теплый сезон.
34
Патогенез поражений при шигеллезах
Патогенез поражений обусловлен способностью шигелл проникать в
клетки слизистой оболочки толстой кишки, размножаться в них и
инфицировать соседние клетки, а также покидать фагосомы и выходить в
цитоплазму нейтрофилов и макрофагов.
Размножение шигелл в эпителиальных клетках вызывает их гибель и
приводит к прорыву бактерий в подлежащие ткани с развитием дефектов
слизистой оболочки и воспалительной реакцией подслизистой оболочки с
выходом форменных элементов крови в просвет кишечника.

Гены, кодирующие комплекс вирулентных свойств, расположены в хромосоме

35 и плазмидах. Все вирулентные штаммы содержат большие (120000-140000 кД) плазмиды,
кодирующие синтез определенных поверхностных белков. В настоящее время
идентифицированы:
 ген ipa (плазмидный антиген инвазивности), распознающий поверхностные антигены
эпителиальных клеток; имеется у всех 4 видов шигелл;
 ген inv (антиген инвазии), обусловливающий встраивание продукта ipa (антиген
инвазивности) в мембраны клеток;
 ген vir F, обеспечивающий повреждение клеточных мембран;
 ген vir G, ответственный за способность шигелл покидать фагосомы и инфицировать
эпителиальные клетки.
36 Факторы патогенности шигелл:
Цитотоксин (токсин Шига, шигатоксин), вызывающий гибель
клеток и приток жидкости в очаг поражения. Шигатоксин вызывает
повреждение эндотелия, поражение почек с гемолитическим уремическим
синдромом, нарушение водно-солевого обмена и ЦНС. Шигатоксин
продуцирует только I серовар S. dysenteriae. Также у шигатоксина
установлена гемолитическая активность in vitro, что иногда используют для
идентификации.
Некоторые шигеллы способны продуцировать, так называемые,
шигаподобные токсины, которые менее токсичны и вырабатываются в
количестве в 1000 раз меньшем, чем шигатоксин, поэтому их действие
ограничивается только кишечником.

21
 №1
Возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерии

Ipa-BCD-инвазины – (Invasion plasmide antigen)-инвазины. Белки

наружной мембраны бактерий, которые прикрепляются к апикальной
мембране М-клеток. Вызывают апоптоз (запрограммированную гибель
клеток), тем самым обеспечивая внутри- и межклеточное
распространение шигелл.
Ipa-BCD-инвазины чувствительны к трипсину, поэтому
патологический процесс ограничивается толстым кишечником.
Эндотоксины, проявляющие весь спектр активности, характерных для
эндотоксинов грам (-) бактерий.

Клинические проявления шигеллезов вариабельны: от

37
бессимптомной инфекции до тяжелых поражений с лихорадкой, ознобом,
болями в животе, тенезмами, диареей с кровью и слизью и др.
Шигеллезы – это инфекционные заболевания, характеризующиеся
поражением толстого кишечника, с развитием колита и интоксикацией
организма.
Инкубационный период – 1-7 сут (чаще 1-2). Первоначально стул
частый (10-25 дефекаций в день) и обильный, однако вскоре значительно
уменьшается в количестве и приобретает вид и запах, напоминающий
тёртый картофель. Он состоит из слизи и крови, а в более поздний период и
примеси гноя. Характерно отделение последней порции, состоящей из слизи
(«ректальный плевок»).
Апоптоз фагоцитов позволяет шигеллам сохраниться и проникнуть в
эпителиальные клетки слизистой через базальную мембрану. Внутри
энтероцитов происходит размножение шигелл и их межклеточное
распространение, следствием чего является развитие эрозий, что
обусловливает наличие крови в испражнениях. При гибели шигелл
происходит выделение шига- и шигаподобных токсинов, действие которых
также приводит к появлению крови в испражнениях.
Типичны катаральные, катарально-язвенные поражения толстого
кишечника. Довольно часто наблюдают гепатомегалию, поражения
поджелудочной железы и нарушение проницаемости сосудов. В выраженных
случаях происходят нарушения всех видов обмена. Наиболее
распространенные осложнения – кишечные кровотечения, реже –
прободение кишечника, пери- и парапроктиты, выпадение прямой кишки и
коллапсы.

21
 №1
Возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерии

Ранее тяжелые случаи сопровождались гибелью 10-15 % больных;

совершенствование методов терапии, а также смена основных
возбудителей способствовали снижению летальности, которая в настоящее
время колеблется в пределах 0-1 %.
38 Лабораторная диагностики шигеллезов основана на выделении и
идентификации возбудителя по стандартной схеме. Материалом для
исследования служат испражнения. Для посева отбираются гнойно-слизисто-
кровяные образования из средней порции кала, которые непосредственно
высеваются на лактозосодержащие дифференциальные плотные
питательные среды (ППС).
В случае выявления бактерионосителей посев испражнений
обязательно производится в селенитовый бульон с последующим
выделением возбудителя на плотных лактозосодержащих дифференциальных
питательных средах.
Среди выросших на этих средах отбирают лактозонегативные
колонии, которые идентифицируют до вида и серовара, а выделенные
культуры S. flexneri – до подсероваров, S. sonne – до хемоваров. В качестве
вспомогательного используют серологический метод с постановкой РНГА.
39 Критерии дифференциальной лабораторной диагностики шигелл:
Шигеллы неподвижны, дают отрицательные реакции с метиловым
красным, Фогеса-Проскауэра (продуцирование ацетилметилкарбинола – на
среде Кларка); не утилизируют цитрат, мочевину; не декарбоксилируют
лизин. Образование индола вариабельно (более половина штаммов серогрупп
А, В и С положительно).
Шигеллы не ферментируют лактозу и поэтому образуют бесцветные
колонии на лактозосодержащих средах (агаре МакКонки или Плоскирева).
На агаре Клиглера ферментируют только глюкозу, не образуют газ
40 (исключая газообразующие подвиды Shigella flexneri) и сероводород.
Выделенные изоляты необходимо исследовать в РА с поливалентными
сыворотками. Если выделенная культура, обладающая всеми
биохимическими признаками шигелл, не реагирует с сыворотками, то ее
следует прокипятить в течение 30 мин, т.к. многие шигеллы, особенно
серогрупп А и С, обладают термолабильными капсулярными Аг,
ингибирующими взаимодействие АТ с О-Аг.
41 Лечение шигеллезов. Для лечения по эпидемиологическим
показаниям используют бактериофаг орального применения
(специфическое лечение). В этиотропной терапии диареи препараты выбора

21
 №1
Возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерии

– ампициллин, триметоприм-сульфаметоксазол, норфлоксацин и др. В

большинстве случаев необходимо назначение симптоматических средств,
восполнение потерь жидкости и электролитов.
Специфическая профилактика шигеллезов – нет. Многочисленная
практика разработки и применения вакцинопрофилактики свидетельствует о
неэффективности метода специфической профилактики шигеллезов.

21
 №1
Возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерии

Факультатив-повтор (из Атласа)

САЛЬМОНЕЛЛЫ (род Salmonella)

Сальмонеллы - бактерии, относящиеся к семейству Enterobacteriaceae, роду Salmonella.
Род представлен 2-мя видами: S. enterica и S. bongori. Salmonella enterica - типовой вид;
включает более 2500 серотипов (сероваров). Вызывают заболевания у человека и
животных. У человека вызывают брюшной тиф, паратифы, сальмонеллезы,
септицемию.
Представители: S. Typhi - возбудитель брюшного тифа; S. Paratyphi A, S. Schottmuelleri,
S. Hirschfeldii (Хиршфельдта) - возбудители паратифов; S. serovar Typhimurium, S.
serovar Enteritidis и др. - возбудители сальмонеллеза. S. bongori включает 10 сероваров,
которые редко встречаются. Большинство специалистов используют старые видовые
названия сальмонелл на основе классификации их антигенной структуры, которую
предложили в 1934г. Ф.Кауфман и П.Уайт.
Сальмонеллы - прямые грамотрицательные палочки (0,7-1,5 х 2-5мкм). Подвижны
(перитрихи). Спор и капсул не образуют. Факультативные анаэробы. Основные антигены:
O- и H-антигены. Все виды сальмонелл, имеющие общий компонент O-антигена,
объединены в одну группу. Таких групп по Кауфману-Уайту насчитывается около 70. При
этом отдельные антигены обозначаются арабскими цифрами. H-антиген имеет 2 фазы:
первая фаза - специфическая и вторая - неспецифическая. Антигены первой фазы
обозначаются строчными латинскими буквами, второй фазы - арабскими цифрами или
строчными латинскими буквами с арабскими цифрами.
Возбудитель брюшного тифа (Salmonella typhi)
S.Typhi - серовар бактерий, относящийся к сем. Enterobacteriaceae, роду Salmonella, виду
Salmonella enterica. Вызывает брюшной тиф - антропонозную инфекцию,
характеризующуюся язвенным поражением лимфатического аппарата тонкой кишки,
бактериемией, интоксикацией, розеолезной сыпью, увеличением печени и селезенки.
Предложено новое название возбудителя брюшного тифа на основе молекулярно-
генетической информации - S. enterica серовар Typhi, или S. серовар Typhi (Берджи,
1994). Основной механизм заражения - фекально-оральный. Основные пути передачи -
водный, пищевой, редко - контактный.
S. Typhi - прямые с закругленными концами грамотрицательные палочки. Подвижны
(перитрихи). Имеют микрокапсулу. Факультативные анаэробы. Имеют O-, H-, Vi-
антигены. Внутри вида выделяют фаговары A,B,C. Факторы вирулентности: эндотоксин,
каталаза, супероксиддисмутаза, белки наружной мембраны, микрокапсула.
Микробиологическая диагностика брюшного тифа и паратифов
Основной метод диагностики - бактериологический: посев и выделение S. typhi из крови
(гемокультура), фекалий (копрокультура), мочи (уринокультура), желчи, костного мозга.
РИФ для обнаружения антигена возбудителя в биологических жидкостях.
Серологический метод обнаружения O- и H- антител в РНГА. Бактерионосителей
выявляют по обнаружению Vi-антител в сыворотке крови с помощью РНГА и
положительному результату бактериологического выделения возбудителя. Для
внутривидовой идентификации применяют фаготипирование.
Специфическая профилактика. Существует брюшнотифозная химическая и
брюшнотифозная спиртовая вакцина, обогащенная Vi-антигеном. Для экстренной
профилактики брюшного тифа возможно использование брюшнотифозного бактериофага.

21
 №1
Возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерии

Возбудители паратифов
Salmonella Paratyphi A (паратиф А), Salmonella Schottmuelleri (Шотмюллера),
Salmonella Hirschfeldii (Хиршфельдта) - виды бактерий, относящиеся к сем.
Enterobacteriaceae, роду Salmonella; вызывают соответственно паратифы A, B и C -
острые инфекционные заболевания человека из группы острых кишечных инфекций,
напоминающие брюшной тиф по клинике, патогенезу, эпидемиологии и
микробиологической диагностике.
Паратиф A - антропоноз, возбудители паратифов B и C выделены от некоторых
животных и птиц. Возбудители близки к S. Typhi по основным свойствам; отличаются от
него способностью ферментировать углеводы с образованием кислоты и газа и
антигенной структурой.
Специфическая профилактика паратифов А, В и С не разработана.

Возбудители сальмонеллезов (гастроэнтеритов)

Сальмонеллезы - заболевания людей и животных, вызванные бактериями
рода Salmonella. Однако под термином сальмонеллезы чаще всего имеют ввиду острые
кишечные инфекции человека (гастроэнтериты), вызванные сальмонеллами,
исключая сальмонеллы брюшного типа и паратифа А.
Сальмонелллезный гастроэнтерит может быть вызван многочисленными видами (по
новой номенклатуре серовары или серотипы) рода. Но наиболее часто сальмонеллезы
вызываются S. Enteritidis, S. Typhimurium, S. Choleraesuis и др. сальмонеллами. Основной
источник болезни - домашние животные (свиньи, крупный и мелкий рогатый скот и др.) и
птицы (куры, гуси, утки и др.). Механизм заражения - фекально-оральный. Основной путь
передачи - пищевой: факторами передачи являются яйца птиц, мясо животных и птиц.
Микробиологическая диагностика сальмонеллезов.
Бактериологический метод: материал для исследования - рвотные массы, фекалии,
промывные воды желудка. При идентификации выделенных культур необходим широкий
набор диагностических O- и H-сывороток.
Вспомогательное значение имеет серологический метод диагностики.

ШИГЕЛЛЫ (род Shigella)

Шигеллы (Shigella) - бактерии, относящиеся к семейству Enterobacteriaceae, роду

Shigella. Название рода связано с именем японского исследователя К.Шигги, одним из
первых (1898 г.) открывшего возбудителя дизентерии. Род состоит из 4-х видов:
S.dysenteriae (типовой вид), S.flexneri, S. boydii, S. sonnei, которые вызывают
бактериальную дизентерию (шигеллез) - антропонозную кишечную инфекционную
болезнь с преимущественным поражением толстой кишки. Механизм заражения -
фекально-оральный.

Шигеллы - прямые грамотрицательные палочки с закругленными концами (0,7-1,0 х 1-3

мкм). Неподвижны (не имеют жгутиков). Факультативные анаэробы. По О-антигенам
выделяют 45 сероваров внутри видов S.dysenteriae, S.flexneri, S.boydii. У некоторых
представителей обнаруживают К-антиген. Вирулентность шигелл связана с плазмидой
инвазии, которая имеется у всех шигелл. Плазмида детерминирует синтез Ipa BCD-
инвазинов (invasion plasmide antigen) - белков, входящих в состав наружной мембраны.
Шигеллы размножаются в клетках слизистой оболочки толстой кишки.

21
 №1
Возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерии

Факторы вирулентности шигелл и биологический эффект

Ipa BCD-инвазины. Ipa (invasion plasmide antigen)-инвазины - белки наружной
мембраны бактерий, которые прикрепляются к апикальной мембране M-клеток;
вызывают апоптоз фагоцитов, лизис мембран эукариотических клеток, обеспечивая
внутриклеточное и межклеточное распространение шигелл
Экзотоксин (шигатоксин). Вызывает повреждение эндотелия, поражение почек с
гемолитическим уремическим синдромом, нарушения водно-солевого обмена и ЦНС
Эндотоксин. Общая интоксикация, усиление перистальтики кишечника.

Микробиологическая диагностика дизентерии

0сновной метод - бактериологический (с посевом на лактозо-содержащие среды),

позволяющий идентифицировать вид, проводить внутривидовую
идентификацию(определить серовар), определять его чувствительность к
антибиотикам.
При затяжном течении дизентерии можно использовать серологический
метод (РНГА).

21